Submitted by isabela.moljf@hotmail.com (isabela.moljf@hotmail.com) on 2016-08-08T15:54:25Z No. of bitstreams: 1 joaovitordeassis.pdf: 9320922 bytes, checksum: 18e2d425e61d33a9c607ab96500fa294 (MD5) / Rejected by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br), reason: incluir co-orientador on 2016-08-09T11:38:01Z (GMT) / Submitted by isabela.moljf@hotmail.com (isabela.moljf@hotmail.com) on 2016-08-09T11:52:03Z No. of bitstreams: 1 joaovitordeassis.pdf: 9320922 bytes, checksum: 18e2d425e61d33a9c607ab96500fa294 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2016-08-09T11:56:46Z (GMT) No. of bitstreams: 1 joaovitordeassis.pdf: 9320922 bytes, checksum: 18e2d425e61d33a9c607ab96500fa294 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-09T11:56:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 joaovitordeassis.pdf: 9320922 bytes, checksum: 18e2d425e61d33a9c607ab96500fa294 (MD5) Previous issue date: 2013-07-25 / A tuberculose (TB) ocupa um lugar de destaque entre as doenças negligenciadas, principalmente devido ao grande número de mortes que essa doença ocasiona em todo o mundo. A isoniazida (INH) é um dos fármacos mais antigos utilizados no tratamento da TB e continua sendo uma das mais eficientes. No entanto, em razão dos seus efeitos colaterais e o surgimento de cepas resistentes a esse e a outros fármacos, faz-se necessária à busca por novas substâncias ativas contra essa doença. O primeiro capítulo deste trabalho descreve a síntese de candidatos a novos agentes antituberculose, a partir da condensação de derivados da D-galactose ou da curcumina com a isoniazida. Alguns compostos sintetizados foram avaliadas in vitro contra o Mycobacterium tuberculosis. Os resultados mostraram que o análogo derivado do citral apresentou atividade semelhante à INH, e através do seu encapsulamento em nanopartículas de PLGA (ácido poli-lático-co-glicólico) a sua atividade foi superior. Nesse trabalho foi realizado, ainda, o encapsulamento da isoniazida com a Hp-β-ciclodextrina, Me-β-ciclodextrina, ácido p-sulfônico calixar[4]eno (SO3CX4) e o ácido p-sulfônico calixar[6]eno (SO3CX6). Os sistemas supramoleculares, assim obtidos, foram estudados principalmente por RMN de 1H e a atividade antituberculose desses complexos (MIC=1,6 a 2,6 µmol/L) foram semelhantes à isoniazida (MIC=1,5 µmol/L). O segundo capítulo descreve os resultados obtidos na tentativa de preparação do aminoácido alloenduracididina. A guanidina cíclica foi obtida pela reação de uma isotioureia com a 4,5-diamina preparada a partir de uma aziridina. Essa aziridina foi obtida por uma reação de aziridinação intramolecular do sulfamato do (2R)-2-(terc-butoxicarbonil)-aminopent-4-eno catalisada por ródio em presença de iodosilbenzeno. / Tuberculosis occupies a prominent place among the neglected diseases, mainly due to the great number of deaths that it causes all around the world. Isoniazid (INH) is one of the oldest and most common drugs used in the treatment of tuberculosis. However, despite its excellent antimycobacterial activity, INH causes side effects related to its hepatic and neuronal toxicity and cases of isoniazid resistant strains of the bacillus have emerged worldwide. The first chapter of this work describes the synthesis of potential new antitubercular compounds obtained from the condensation of D-galactose or curcumin derivatives with isoniazid. The synthesized compounds were evaluated in vitro against Mycobacterium tuberculosis. The results showed that the citral-derived isoniazid analogue has an activity similar to INH and when it was encapsulated using the system of PLGA nanoparticles (poly-lactic-co-glycolic acid) its activity was increased. INH was also encapsulated in Hp-β-cyclodextrin, Me-β-cyclodextrin, psulphonic acid calixar[4]ene (SO3CX4) and p-sulphonic acid calixar[6]ene (SO3CX6) and the supramolecular system thus obtained were studied using 1H NMR as the major tool. The antitubercular activity (1.6 - 2.6 µmol/L) of these complexes was similar to that of INH (1.5 µmol/L). The second chapter describes the results obtained in the preparation of the amino acid alloenduracididine using synthetic strategy analogous to that used for the preparation of enduracididine. The cyclic guanidine was obtained by the reaction of a isothiourea with 4,5-diamine prepared from an aziridine intermediate. The late one was obtained by a rhodium-catalyzed intramolecular aziridination of (2R)-2-(tertbutoxycarbonyl)-aminopent-4-enyl sulfamate with iodosylbenzene. The application of the methodology developed in the course of the work to appropriate substrates will lead to the preparation of other amino acids containing the guanidinium group.

Submitted by isabela.moljf@hotmail.com (isabela.moljf@hotmail.com) on 2017-05-25T12:04:02Z No. of bitstreams: 1 williamcaneschi.pdf: 11580354 bytes, checksum: d5186d98d0e023e595e7509f1a08efff (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-05-25T13:32:21Z (GMT) No. of bitstreams: 1 williamcaneschi.pdf: 11580354 bytes, checksum: d5186d98d0e023e595e7509f1a08efff (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-25T13:32:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 williamcaneschi.pdf: 11580354 bytes, checksum: d5186d98d0e023e595e7509f1a08efff (MD5) Previous issue date: 2013-02-22 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Diversos análogos 1,3,4-oxadiazóis tem sido reportados na literatura uma vez que possuem grande espectro de atividade biológica, como: antiviral, antibacteriano, antitumoral, antioxidante, anti-inflamatório, anticonvulsivante, antimalarial, antifúngica e analgésica. Com o intuito de desenvolver moléculas ativas e seletivas a certas doenças, este trabalho descreve a síntese de derivados N-acilidrazonas e seus respectivos 2,3-diidro-1,3,4-oxadiazóis, o que resultou na obtenção de vinte e sete derivados inéditos, dentre eles: nove derivados de Nacilidrazonas e dezoito derivados 2,3-diidro-1,3,4-oxadiazóis. Foram obtidos vinte e oito derivados N-acilidrazonas a partir de uma reação de adição de aldeídos aromáticos e heteroaromáticos com a isoniazida. Para a obtenção das N-acilidrazonas com cadeia longa, foi proposto, inicialmente, a alquilação do 4-hidroxibenzaldeído com haletos de alquila com: 1-cloroexano, 1-cloro-octano, 1-bromononano, 1-clorodecano, 1-clorododecano, 1-lorotetradecano e 1-bromo-propargila. Foi proposta também a síntese de dois derivados sulfonados, sintetizados pela mesma metodologia de alquilação com os cloretos de mesila e tosila. Em seguida, os aldeídos alquilados e sulfonados sintetizados e dezenove aldeídos comerciais foram condensados a isoniazida gerando os derivados N-acilidrazonas, que por sua vez, foram ciclizados, em reação com anidrido acético, que gerou vinte e sete derivados 2,3-diidro-1,3,4-oxadiazólicos. As estruturas dos compostos obtidos foram elucidadas por espectroscopia na região do infravermelho, RMN de 1H e de 13C, técnicas de RMN 2D, espectrometria de massas. Os análogos oxadiazólicos foram submetidos a teste de citotoxicidade, antibacteriano, antioxidante e antimalarial. Os compostos se mostraram bastantes ativos contra células cancerígenas, com índices de seletividade superiores ao composto padrão utilizado. / Several analogs 1,3,4-oxadiazoles have been reported in the literature due to wide range biological activity, such as: antiviral, antibacterial, antitumoral, antioxidant, anti-inflammatory, anticonvulsivant, antimalarial, antifungal e analgesic activity. With the aim to develop molecules active and selective for some illness, this work describe the synthesis of some N-acyl-hydrazones derivatives and the respective 2,3-dihydro-1,3,4-oxadiazoles, that resulted the obtainment twenty seven inedited derivatives, among them: nine N-acyl-hydrazones derivatives and eighteen 2,3-dihydro-1,3,4-xadiazoles derivatives. At this work were obtainment twenty e eight N-acylhydrazones derivatives through the addition reaction of aromatics and heteroaromatics aldehydes with isoniazid. For the obtainment of N-acyl-hydrazones of long chain, the 4-hydroxybenzaldehyde was alkylated with several alkyl halides: 1-chlorohexane, 1-chlorooctane, 1-bromononane, 1-chlorodecane, 1-chlorododecane, 1-hlorotetradecane and 1-bromopropargyl. It was also proposed the synthesis of two sulfa derivatives, synthesized by the same alkylation methodology with the mesyl and tosyl chloride. These alkylated aldehydes and nineteen commercials aldehydes were condensed to the isoniazid that gave the N-acyl-hydrazones derivatives, which in turn were cyclized to obtain the 2,3-dihydro-1,3,4-oxadiazoles derivatives in reaction with acetic anhydride. The structures of the compounds were elucidated by in infrared, ¹H NMR, ¹³C NMR, 2D NMR techniques, mass spectrometry. The oxadiazoles analogs were submitted to citotoxicity, antibacterial, antioxidant and antimalarial activity. The compounds showed great activity against tumor cells, with selectivity index higher than standard compound used.

Orientador: Marcelo de Carvalho Ramos / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T11:07:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Hofling_ChristianCruz_D.pdf: 21680576 bytes, checksum: d24a23695ef6089d59f1055b941a14a2 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Isoniazida, rifampicina e pirazinamida têm sido usadas como a base do tratamento da tuberculose no Brasil e na maioria dos países do mundo. O fenômeno da resistência bacteriana aos agentes quimioterápicos tem sido descrito desde que seu uso foi instituído. No caso da tuberculose, houve aumento expressivo do número de cepas resistentes, principalmente na década de 1990, devido à desestruturação dos serviços de vigilância e controle da doença e, também, à pandemia da AIDS. A resistência a antimicrobianos em cepas de Mycobacterium tuberculosis resulta em aumento da morbi-mortalidade e maiores custos para o serviço de saúde. A mutação no códon 315 do gene katG, responsável pela codificação da enzima catalase-peroxidase em M. tuberculosis, é um dos mecanismos de resistência desta bactéria à isoniazida. Para caracterizar as bases genéticas da resistência a drogas em cepas de M. tuberculosis no estado de São Paulo, foram selecionadas para estudo 91 amostras resistentes e 4 sensíveis à isoniazida. Essas cepas foram obtidas de culturas enviadas ao Instituto Adolfo Lutz central, em São Paulo, para identificação e realização de teste de sensibilidade a drogas. Um total de 467 cepas foram recebidas no período de agosto de 1999 a setembro de 2000. A genotipagem, utilizando a técnica de RFLP, foi realizada para o estabelecimento de parentesco entre as cepas. Estudos com as técnicas de SSCP e seqüenciamento de fragmento contendo o códon 315, amplificado do gene katG, foram realizados para triagem e confirmação de mutações associadas à resistência à isoniazida. A associação de resistência à isoniazida e rifampicina foi encontrada em 74.8% das cepas testadas. Resistência à isoniazidalpirazinamida e isoniazidaletambutol foi encontrada em 33 e 9,9%, respectivamente. Resistência concomitante a todas as drogas consideradas de primeira linha para o tratamento da tuberculose (isoniazida, rifampicina e pirazinamida) foi encontrada em 13,1 % das cepas. A genotipagem mostrou padrão heterogêneo de bandas, com formação de oito agrupamentos com apenas dua~ amostras cada. A substituição AGC~ACC (Serina~Tirosina) foi a mutação mais encontrada (48%). Não foram encontradas mutações em 39,5% das cepas resistentes estudadas e nos restantes 12,5% foram detectadas outras mutações. Conclui-se que no estado de São Paulo a resistência à rifampicina é freqüente entre as cepas resistentes à isoniazida. A resistência às três principais drogas para o tratamento da tuberculose também ocorreu em alta freqüência. A substituição AGC-.ACC foi a mutação mais encontrada, porém uma grande parte das cepas resistentes não apresentavam tais mutações. Pelos dados levantados, podemos também inferir que o fenômeno da resistência do M. tuberculosis a drogas não é, em São Paulo, uma conseqüência de disseminação clonal das cepas, mas casos isolados, provavelmente secundários a irregularidades no tratamento. Este trabalho, quando do seu início, foi um dos primeiros a endereçar a questão das bases genéticas para resistência a drogas em M. tuberculosis no Brasil, e estudos mais sistemáticos e abrangentes são necessários para melhor compreensão desta dinâmica em nosso meio / Abstract: Isoniazid, rifampin and pirazinamide have been used as the Standard treatment for tuberculosis in Brazil and most countries around the world. Antimicrobial resistance has been described since its use was instituted. As for tuberculosis, there has been an expressive rise in multidrug resistant strains in the decade of 1990, due mainly to the dismantling of tuberculosis vigilance programs and the AIDS pandemics. Antimicrobial resistance among Mycobacterium tuberculosis strains result in increase in morbidity and mortality and cost for health care. Mutations in codon 315 of the katG gene, responsible for coding catalaseperoxidase in M tuberculosis. has been associated as one of the key mechanisms of resistance of this bacteria to isoniazid. In Brazil, studies towards the molecular mechanisms involved in this process are still on its beginning. To characterize the genetic basis of M tuberculosis drug resistance in the state of São Paulo, 91 isoniazid resistant and 4 isoniazid sensitive strains were selected for study. These strains were drawn from samples (462 strains) sent to the Instituto Adolfo Lutz central laboratory in São Paulo for identification and drug susceptibility tests. The study period was from august 1999 through september 2000. Genotyping of mycobacterium was performed using RFLP technique. SSCP study and sequencing of the amplified fragment of katG gene that contained codon 315 were performed to screen and check for mutations conferring resistance to isoniazid. Concomitant resistance to isoniazid and rifampin was foud in 74,8% of strains tested. Resistance to both isoniazid/rifampin and isoniazid/ethambutol was found in 33 and 9,9%, respectively. Concomitant resistance to all drugs considered as first line treatment of tuberculosis (isoniazid, rifampin and pirazinamid) was found in 23,1% of strains. Genotypic studies revealed a heterogeneous band pattern, with formation of 8 clusters with only two specimens each. The most prevalent substitution was AGC-+ACC (Ser-+Thr), found in 48% of strains. No mutation was noted in 39,5% of resistant strains studied, and the remaining 12,5% habored other I .5S frequent mutations. In conclusion, resistance to rifampin is a frequent event among isoniazid resistant strains collected in Sao Paulo, Brazil. Resistance to the three front drugs used for the treatment of tuberculosis also occurred in high frequency. The AGC-+ACC substitution was the most frequent mutation found, a1thougha high percentage of strains did not carry any mutation / Doutorado / Clinica Medica / Doutor em Clínica Médica

Introdução: A tuberculose é uma infecção curável causada pelo Mycobacterium tuberculosis. Requer tratamento prolongado e a combinação de vários fármacos implicando em efeitos colaterais que podem levar pacientes ao abandono do tratamento. Formulações de droga de liberação controlada como nanopartículas, nanoemulsões ou lipossomos têm tido sucesso contra doenças infecciosas. Em especial, brometo de dioctadecildimetilamônio (DODAB) disperso em água pode formar lipossomos ou vesículas grandes (LV) ou fragmentos de bicamada (BF) que podem carrear drogas hidrofóbicas ou hidrofílicas e ademais, podem atuar como microbicidas. Objetivos: determinar atividade do DODAB contra Mycobacterium tuberculosis e M. smegmatis tanto isoladamente como em combinação com duas drogas tuberculostáticas, rifampicina (RIF) e isoniazida (ISO); determinar a incorporação de RIF e ISO em dispersões de DODAB. Material e Métodos: Dispersões de DODAB foram obtidas por vortexação (LV) ou sonicação (BF) e sua interação com as drogas foi avaliada por espectros óticos das drogas, espalhamento de luz dinâmico para medida de distribuição de tamanhos e potencial-zeta e diálise para determinação de incorporação dos fármacos em DODAB LV ou BF. Viabilidade de M. smegmatis ou M. tuberculosis foi determinada por contagem de viáveis em função de concentração de DODAB. Combinações DODAB/droga contra micobactérias foram avaliadas por determinação de concentração inibitória minima (CIM), em µg/ml. Resultados: DODAB mata M. smegmatis a partir de 4 µM de concentração e 1 h de interação e M. tuberculosis, em 100 µM e 120 h de interação. ISO resultou permeável através da bicamada de DODAB em contraste com RIF que adsorveu irreversivelmente nas bicamadas, resultando em 75% de incorporação com 0.1 e 2 mM de droga e DODAB, respectivamente. CIM de RIF contra M. smegmatis foi 32 e, em combinação com 2 de DODAB caiu para 2. Para M. tuberculosis CIM de 0,015 caiu para 0,007 em combinação com 4 DODAB. A combinação foi sinérgica contra M. smegmatis e de ação independente contra M. tuberculosis. / Introduction: Tuberculosis is potentially curable but remains a serious public health problem with large numbers of infected people in several countries. The long time that the patient should receive medication, associated with a large number of adverse effects often cause treatment failure. Nanoparticles, liposomes and emulsions have been used successfully in antibacterial therapy. In particular, dioctadecyldimethylammonium bromide (DODAB) bilayers in form of bilayer fragments (BF) or vesicles (LV) provided adequate environment for solubilization and stabilization of several drugs with an additional advantage: they acted as antimicrobial agents themselves. Objectives: investigation of DODAB bactericidal activity against mycobacteria, determination of entrapment efficiency for rifampicin (RIF) and isoniazid (ISO) in DODAB dispersions and determination of the DODAB/drug activity against Mycobacterium smegmatis and tuberculosis. Material and Methods: DODAB dispersions were obtained by sonication of dioctadecyldimethylammonium bromide (DODAB) synthetic lipid (BF)or by vortexing (LV) the lipid powder in aqueous solution. The physic-chemical characteristics of drugs in DODAB dispersions were determined from optical spectra and dynamic light scattering for evaluating size distribution and zeta-potentials. Drug incorporation in DODAB dispersions was determined from dialysis. Cell viability was determined from plating and colony forming unities (CFU) counting as a function of [DODAB]. Minimal inhibitory concentration (MIC) was obtained for drug or DODAB/drug combinations. Results: DODAB killed M. smegmatis and tuberculosis from 4¨µM (1 h interaction) and 100 µM (120 h interaction), respectively. Rifampicin drug particles above its solubilization limit could be solubilized by BF at 0.5 mM lipid. LV was leaky to ISO whereas RIF could be incorporated in BF or LV bilayer at high percentiles (0.1 mM RIF in 2 mM DODAB BF or LV). MIC for combination DODAB/RIF was 2/2 or 4/0.007 µg/mL whereas synergism index was 0.5 or 1.0 against M. smegmatis or M. tuberculosis, respectively. DODAB and RIF acted synergistically when tested against M. smegmatis.

Submitted by PPG Biologia Celular e Molecular (bcm@pucrs.br) on 2018-03-15T12:31:20Z No. of bitstreams: 1 Tese Doutorado Adilio.pdf: 2662669 bytes, checksum: 73c86d6d555c94d57c1f0714b5c2ccbc (MD5) / Approved for entry into archive by Tatiana Lopes (tatiana.lopes@pucrs.br) on 2018-03-23T11:44:45Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese Doutorado Adilio.pdf: 2662669 bytes, checksum: 73c86d6d555c94d57c1f0714b5c2ccbc (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-23T11:52:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese Doutorado Adilio.pdf: 2662669 bytes, checksum: 73c86d6d555c94d57c1f0714b5c2ccbc (MD5) Previous issue date: 2018-03-02 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Tuberculosis (TB), caused mainly by Mycobacterium tuberculosis, is an infectious disease responsible for a significant number of deaths worldwide. IQG-607 is an analog of isoniazid (INH). According to several experiments carried out by our research group, IQG-607 showed both in vitro and in vivo anti-TB activity. Initial studies showed that the compound INCT-TB551 (a quinoline derivative) also presents in vitro anti-TB activity. The aim of this study was to develop analytical methods by high performance liquid chromatography (HPLC-UV) for quantification of IQG-607 and INCT-TB551 in mice plasma, and therefore to perform pharmacokinetic studies. The analytical method for the determination of IQG-607 in mice plasma showed linearity (r = 0.9992) in 0.5? 50 ?g/mL concentration range. Intra- and inter-day precision was < 15%, and the recovery ranged from 92.07 to 107.68%, showing that the method provides a precise and accurate analysis of the compound. In addition, IQG-607 was stable in plasma for at least 30 days at ?80 ?C, and after plasma processing, for 4 h in the auto-sampler (6 ?C) and maintained on ice (recovery > 85%). The applicability of the method for pharmacokinetic studies was determined after intravenous (i.v.) and oral (fasted and fed conditions) administrations to mice. IQG-607 levels in plasma were quantified at time points for up to 2.5 h. A short half-life (t1/2) (1.14 h), a high clearance (CL) (3.89 L/h/kg), a moderate volume of distribution at steady state (Vdss, 1.22 L/kg), were observed after i.v. (50 mg/kg) administration. Similar results were obtained for oral administration (250 mg/kg) under fasted and fed conditions. The oral bioavailability (F), approximately 4%, was not altered by feeding. Plasma protein binding was 88.87 ? 0.9%. Recently, experiments in mice infected with M. tuberculosis have shown that the compound INCT-TB551 has no in vivo activity, unlike previous in vitro activity studies. An analytical method was developed for the determination of INCT-TB551 in mice plasma to assess compound absorption, if any, after oral administration. The analytical method presented linearity from 0.1-10 ?g/mL (r = 0.9999). After development of the analytical method, the compound was orally administered in mice and the plasma levels were quantified at time points for up to 1 h. The compound INCT-TB551 was detected in the plasma of animals, which indicated that INCT-TB551 was absorbed. Although absorbed when orally administered, the compound is not exhibiting activity against M. tuberculosis in this animal model. This finding may be associated with the formation of inactive metabolites and/or the plasma concentration of INCT-TB551 achieved may be inadequate to exert its therapeutic effect. However, these points require further investigations. The protocols described here may serve as support to initiate pharmacokinetic studies of promising compounds, collaborating to advance in earlier stages of drug development. / A tuberculose (TB) ? uma doen?a infecto-contagiosa, causada principalmente pelo Mycobacterium tuberculosis, respons?vel por um n?mero consider?vel de mortes em todo o mundo. O composto IQG-607 ? um an?logo da isoniazida (INH) que, de acordo com diversos experimentos realizados pelo grupo de pesquisa envolvido no seu estudo, apresenta atividade anti-TB in vitro e in vivo. Estudos iniciais do mesmo grupo demonstraram que o composto INCT-TB551 (um derivado quinol?nico) tamb?m apresenta promissora atividade anti-TB. O objetivo deste estudo foi desenvolver metodologias anal?ticas por cromatografia l?quida de alta efici?ncia (CLAE-UV) para a quantifica??o do composto IQG-607 e do INCT-TB551, em plasma de camundongos, para a realiza??o de estudos de farmacocin?tica. O m?todo anal?tico para a determina??o do composto IQG-607 em plasma de camundongos apresentou linearidade (r = 0.9992) na faixa de 0.5?50 ?g/mL. Os valores de precis?o intra e interensaio (CV < 15%) e de recupera??o (92.07-107.68%) demonstram que o m?todo ? preciso e exato para a an?lise do composto. Al?m disso, o IQG-607 se mostrou est?vel no plasma por at? 30 dias, quando armazenado no freezer -80 ?C, e est?vel ap?s o tratamento da amostra do plasma, por at? 4 horas (h) na bancada (gelo) e no autosampler do equipamento (6 ?C). A aplicabilidade do m?todo anal?tico para o estudo de farmacocin?tica foi determinada ap?s a administra??o i.v. e oral em camundongos (animais em jejum e animais alimentados). As concentra??es plasm?ticas de IQG-607 foram quantificadas por at? 2,5 h ap?s a administra??o nos animais. Quando administrado pela via i.v. foi observado um tempo de meia vida (t1/2) curto (1,14 h), elevado clearance (CL) (3,89 L/h/kg), e um moderado volume de distribui??o (Vdss) (1,22 L/kg). Resultados similares foram obtidos ap?s a administra??o oral (250 mg/kg) em camundongos que estavam em jejum ou alimentados. A biodisponibilidade oral (F) foi de aproximadamente 4 %, valor que n?o foi alterado pela alimenta??o. A taxa de liga??o a prote?nas plasm?ticas do IQG-607 ? de aproximadamente 88 ? 0.9%. Experimentos recentes em camundongos infectados com M. tuberculosis demonstraram que o composto INCT-TB551 n?o apresentou atividade neste modelo in vivo, ao contr?rio dos estudos de atividade in vitro realizados anteriormente. Um m?todo anal?tico para a determina??o do composto INCT-TB551 em plasma de camundongos foi desenvolvido para avaliar se o composto estava sendo absorvido ap?s a administra??o oral. O m?todo anal?tico apresentou linearidade na faixa de 0.1-10 ?g/mL (r = 0.9999). Ap?s o m?todo ter sido padronizado, o composto foi administrado por via oral em camundongos, e as concentra??es plasm?ticas foram quantificadas por at? 1 h ap?s a administra??o. O composto INCT-TB551 foi detectado no plasma dos animais, indicando que estava sendo absorvido. Apesar de absorvido quando administrado por via oral, o composto n?o est? apresentando atividade contra M. tuberculosis neste modelo animal, o que pode estar relacionado, por exemplo, com a forma??o de metab?litos inativos e/ou ainda, o n?vel plasm?tico atingido pode ser inadequado para que o composto consiga exercer o seu efeito terap?utico, e isto precisa ser melhor investigado. Os protocolos apresentados neste trabalho poder?o servir como suporte para estudos de farmacocin?ticoa de compostos que se apresentam promissores, colaborando para o avan?o nas etapas necess?rias para o desenvolvimento de poss?veis f?rmacos.

Introdução: A tuberculose é uma infecção curável causada pelo Mycobacterium tuberculosis. Requer tratamento prolongado e a combinação de vários fármacos implicando em efeitos colaterais que podem levar pacientes ao abandono do tratamento. Formulações de droga de liberação controlada como nanopartículas, nanoemulsões ou lipossomos têm tido sucesso contra doenças infecciosas. Em especial, brometo de dioctadecildimetilamônio (DODAB) disperso em água pode formar lipossomos ou vesículas grandes (LV) ou fragmentos de bicamada (BF) que podem carrear drogas hidrofóbicas ou hidrofílicas e ademais, podem atuar como microbicidas. Objetivos: determinar atividade do DODAB contra Mycobacterium tuberculosis e M. smegmatis tanto isoladamente como em combinação com duas drogas tuberculostáticas, rifampicina (RIF) e isoniazida (ISO); determinar a incorporação de RIF e ISO em dispersões de DODAB. Material e Métodos: Dispersões de DODAB foram obtidas por vortexação (LV) ou sonicação (BF) e sua interação com as drogas foi avaliada por espectros óticos das drogas, espalhamento de luz dinâmico para medida de distribuição de tamanhos e potencial-zeta e diálise para determinação de incorporação dos fármacos em DODAB LV ou BF. Viabilidade de M. smegmatis ou M. tuberculosis foi determinada por contagem de viáveis em função de concentração de DODAB. Combinações DODAB/droga contra micobactérias foram avaliadas por determinação de concentração inibitória minima (CIM), em &#181;g/ml. Resultados: DODAB mata M. smegmatis a partir de 4 &#181;M de concentração e 1 h de interação e M. tuberculosis, em 100 &#181;M e 120 h de interação. ISO resultou permeável através da bicamada de DODAB em contraste com RIF que adsorveu irreversivelmente nas bicamadas, resultando em 75% de incorporação com 0.1 e 2 mM de droga e DODAB, respectivamente. CIM de RIF contra M. smegmatis foi 32 e, em combinação com 2 de DODAB caiu para 2. Para M. tuberculosis CIM de 0,015 caiu para 0,007 em combinação com 4 DODAB. A combinação foi sinérgica contra M. smegmatis e de ação independente contra M. tuberculosis. / Introduction: Tuberculosis is potentially curable but remains a serious public health problem with large numbers of infected people in several countries. The long time that the patient should receive medication, associated with a large number of adverse effects often cause treatment failure. Nanoparticles, liposomes and emulsions have been used successfully in antibacterial therapy. In particular, dioctadecyldimethylammonium bromide (DODAB) bilayers in form of bilayer fragments (BF) or vesicles (LV) provided adequate environment for solubilization and stabilization of several drugs with an additional advantage: they acted as antimicrobial agents themselves. Objectives: investigation of DODAB bactericidal activity against mycobacteria, determination of entrapment efficiency for rifampicin (RIF) and isoniazid (ISO) in DODAB dispersions and determination of the DODAB/drug activity against Mycobacterium smegmatis and tuberculosis. Material and Methods: DODAB dispersions were obtained by sonication of dioctadecyldimethylammonium bromide (DODAB) synthetic lipid (BF)or by vortexing (LV) the lipid powder in aqueous solution. The physic-chemical characteristics of drugs in DODAB dispersions were determined from optical spectra and dynamic light scattering for evaluating size distribution and zeta-potentials. Drug incorporation in DODAB dispersions was determined from dialysis. Cell viability was determined from plating and colony forming unities (CFU) counting as a function of [DODAB]. Minimal inhibitory concentration (MIC) was obtained for drug or DODAB/drug combinations. Results: DODAB killed M. smegmatis and tuberculosis from 4¨&#181;M (1 h interaction) and 100 &#181;M (120 h interaction), respectively. Rifampicin drug particles above its solubilization limit could be solubilized by BF at 0.5 mM lipid. LV was leaky to ISO whereas RIF could be incorporated in BF or LV bilayer at high percentiles (0.1 mM RIF in 2 mM DODAB BF or LV). MIC for combination DODAB/RIF was 2/2 or 4/0.007 &#181;g/mL whereas synergism index was 0.5 or 1.0 against M. smegmatis or M. tuberculosis, respectively. DODAB and RIF acted synergistically when tested against M. smegmatis.

Os materiais em estado sólido têm papel importante no desenvolvimento da tecnologia e na produção da forma farmacêutica, pois atuam como um dos principais constituintes das formulações. As dimensões das partículas sólidas normalmente influenciam a dissolução dos fármacos, visto que esta depende da área superficial exposta ao meio líquido. O presente trabalho estuda a influência do tamanho das partículas sólidas na liberação de fármacos contidos no sistema matricial. foram analisados comprimidos matriciais formados por hidroxipropilmetilcelulose (HPMC) (A) e fármacos (isoniazida (INH), fármaco hidrossolúvel (B) ou rifampicina (RMP) fármaco com baixa solubilidade(C)). Os pós para elaboração das formulações foram separados por tamisação, segundo classificação da USP XXIII, em quatro tamanho de partículas, partículas não homogêneas (branco), t&#8805;0,425 , 0,177&#8804;*t&#60;0,250 e t&#60;0,150 (t= tamanho em mm) e identificadas como A0, A1, A2, A3, B0, B1, B2, B3 e C0, C1, C2, C3, respectivamente. Por compressão direta foram preparados comprimidos matriciais de 250 mg, contendo, no primeiro tipo de formulação, 150 mg de isoniazida; 2,5 mg de estearato de magnésio e. 97,5 mg de HPMC e na segunda formulação mudou-se a constituição da fórmula, utilizando como fármaco 150 mg de rifampicina e os demais constituintes permaneceram os mesmos. As formulações foram obtidas pela combinação dos pós, mantendo-se constante a força de compressão, umidade do ambiente e demais variáveis, em A0B0, A1B1, A2B2, A3B3, A0C0, A0C1, A0C2, A0C3, A1C0, A1C1, A1C2, A1C3, A2C0, A2C1, A2C2, A2C3, A3C0, A3C1, A3C2 e A3C3. Os resultados das análises física e físico-química apresentaram claramente a influência do tamanho da partícula sólida sobre os parâmetros dos comprimidos matriciais estudados. Através da análise estatística dos parâmetros farmacocinéticos, Qmax e AUC, pode-se concluir que as formulações A1B1, A2B2, A3B3, A0C3, A1C1, A1C2, A1C3 e A2C1 apresentaram diferenças significativas entre as médias, quando comparada ao padrão. / The present work studies the solid particle size\'s influence of the rifampin and hydroxypropylmetylcellulose in kinetic release profile of the drug in matrix systems. The matrix tablets were formed by HPMC (A), isoniazid (B) and rifampin (C). The powders were classified by sieving in four different particle size distribution. (See table in file PDF) The twenty formulations were prepared by direct compression of the rifampin or isoniazid (150 mg), magnesium stearat (2,5 mg) and HPMC in order to obtain tablets of 250 mg. The formulations were obtained by the combination of the powders, in A0B0, A1,B1, A2B2, A3B3, A0C0, A0C1, A0C2, A0C3, A1C0, A1C1, A1C2, A1C3, A2C0, A2C1, A2C2, A2C3, A3C3, A3C1, A3C2 e A3C3. The drug release was studied by the dissolution and quantification assay. The dissolution curve represents the accumulated drug release during a period of 10 hours. The matrices dissolution profiles are upset by divergence the drugs and HPMC particle size in formulation. The estatistic analyse (teste t) the pharmacokinetic parameter (Qmax and AUC) show that the formulations A1B1, A2B2, A3B3, A1C1, A1C2, A1C3 and A2C1 are significantly differents when compare whith the standard tablets.

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:42:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 SeverinaDSO_DISSERT.pdf: 2512071 bytes, checksum: 12a15e7529d5b018959d5e9c644f10cf (MD5) Previous issue date: 2013-07-31 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / In this work a study was done using electrochemical cyclic voltammetry and differential pulse voltammetry for isoniazida (INH), ethambutol (EMB), rifampicina (RIF) and pyrazinamide (PZA) using the electrode boron-doped diamond (BDD) as working electrode. It also verified the applicability of the technique of differential pulse voltammetry in the quantification of the active compounds used in the treatment of tuberculosis, subsequently applying in samples of pharmaceutical formulation. Among the four active compounds studied, isoniazid showed the best results for the detection and quantification using differential pulse voltammetry. At pH 4 and pH 8, for the calibration curves to INH showed good linearity, with quantification limits of 6.15 mmol L-1 (0,844 ppm) and 4.08 mmol L-1 (0.560 ppm) for the respective pH. The proposed method can be used to determine drug isoniazid, for recovery values were obtained in approximately 100% / Neste trabalho foi feito um estudo eletroqu?mico utilizando a voltametria c?clica e voltametria de pulso diferencial para os f?rmacos isoniazida (INH), etambutol (EMB), rifampicina (RIF) e pirazinamida (PZA) usando o eletrodo de diamante dopado com boro (BDD) como eletrodo de trabalho. Foi tamb?m verificado a aplicabilidade da t?cnica de voltametria de pulso diferencial na quantifica??o dos princ?pios ativos usados no tratamento da tuberculose, posteriormente aplicando em amostras de formula??o farmac?utica. Dentre os quatro princ?pios ativos estudados, a isoniazida apresentou os melhores resultados de detec??o e quantifica??o com o uso da voltametria de pulso diferencial. Em pH 4 e pH 8, as curvas de calibra??o para a INH apresentaram boa linearidade, apresentando os limites de quantifica??o de 6,15 &#956;mol L-1 (0,844 ppm) e 4,08 &#956;mol L-1 (0,560 ppm), para os respectivos pH. O m?todo proposto pode ser usado para a determina??o de isoniazida em f?rmacos, pois foram obtidos valores de recupera??o em torno de 100%

Os materiais em estado sólido têm papel importante no desenvolvimento da tecnologia e na produção da forma farmacêutica, pois atuam como um dos principais constituintes das formulações. As dimensões das partículas sólidas normalmente influenciam a dissolução dos fármacos, visto que esta depende da área superficial exposta ao meio líquido. O presente trabalho estuda a influência do tamanho das partículas sólidas na liberação de fármacos contidos no sistema matricial. foram analisados comprimidos matriciais formados por hidroxipropilmetilcelulose (HPMC) (A) e fármacos (isoniazida (INH), fármaco hidrossolúvel (B) ou rifampicina (RMP) fármaco com baixa solubilidade(C)). Os pós para elaboração das formulações foram separados por tamisação, segundo classificação da USP XXIII, em quatro tamanho de partículas, partículas não homogêneas (branco), t&#8805;0,425 , 0,177&#8804;*t&#60;0,250 e t&#60;0,150 (t= tamanho em mm) e identificadas como A0, A1, A2, A3, B0, B1, B2, B3 e C0, C1, C2, C3, respectivamente. Por compressão direta foram preparados comprimidos matriciais de 250 mg, contendo, no primeiro tipo de formulação, 150 mg de isoniazida; 2,5 mg de estearato de magnésio e. 97,5 mg de HPMC e na segunda formulação mudou-se a constituição da fórmula, utilizando como fármaco 150 mg de rifampicina e os demais constituintes permaneceram os mesmos. As formulações foram obtidas pela combinação dos pós, mantendo-se constante a força de compressão, umidade do ambiente e demais variáveis, em A0B0, A1B1, A2B2, A3B3, A0C0, A0C1, A0C2, A0C3, A1C0, A1C1, A1C2, A1C3, A2C0, A2C1, A2C2, A2C3, A3C0, A3C1, A3C2 e A3C3. Os resultados das análises física e físico-química apresentaram claramente a influência do tamanho da partícula sólida sobre os parâmetros dos comprimidos matriciais estudados. Através da análise estatística dos parâmetros farmacocinéticos, Qmax e AUC, pode-se concluir que as formulações A1B1, A2B2, A3B3, A0C3, A1C1, A1C2, A1C3 e A2C1 apresentaram diferenças significativas entre as médias, quando comparada ao padrão. / The present work studies the solid particle size\'s influence of the rifampin and hydroxypropylmetylcellulose in kinetic release profile of the drug in matrix systems. The matrix tablets were formed by HPMC (A), isoniazid (B) and rifampin (C). The powders were classified by sieving in four different particle size distribution. (See table in file PDF) The twenty formulations were prepared by direct compression of the rifampin or isoniazid (150 mg), magnesium stearat (2,5 mg) and HPMC in order to obtain tablets of 250 mg. The formulations were obtained by the combination of the powders, in A0B0, A1,B1, A2B2, A3B3, A0C0, A0C1, A0C2, A0C3, A1C0, A1C1, A1C2, A1C3, A2C0, A2C1, A2C2, A2C3, A3C3, A3C1, A3C2 e A3C3. The drug release was studied by the dissolution and quantification assay. The dissolution curve represents the accumulated drug release during a period of 10 hours. The matrices dissolution profiles are upset by divergence the drugs and HPMC particle size in formulation. The estatistic analyse (teste t) the pharmacokinetic parameter (Qmax and AUC) show that the formulations A1B1, A2B2, A3B3, A1C1, A1C2, A1C3 and A2C1 are significantly differents when compare whith the standard tablets.

Submitted by Rosivalda Pereira (mrs.pereira@ufma.br) on 2017-06-02T19:09:40Z No. of bitstreams: 1 RolffSpindola.pdf: 1912678 bytes, checksum: 00839e9b1b8a2b01a86770dd2561ec07 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-02T19:09:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RolffSpindola.pdf: 1912678 bytes, checksum: 00839e9b1b8a2b01a86770dd2561ec07 (MD5) Previous issue date: 2016-07-25 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPQ) / Fundação de Amparo à Pesquisa e ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico do Maranhão (FAPEMA) / A novel platform for electroanalysis of isoniazid based on multi-walled carbon nanotube oxide and graphene oxide composite as support to iron phthalocyanine (MWCNTO-GO/FePc) has been developed. The FePc/MWCNTO-GO modified electrode is sensible for isoniazid, decreasing substantially its oxidation potential to + 200 mV vs. Ag/AgCl. Electrochemical and electroanalytical properties of the FePc/MWCNTO-GO modified electrode were investigated by cyclic voltammetry, electrochemical impedance spectroscopy, scanning electrochemical microscopy, and amperometry. The sensor presents better performance in 0,1 mol L-1 phosphate buffer at pH 7,4. Under optimized conditions, a linear response range from 5 μmol L-1 to 476 µmol L-1 was obtained with a sensitivity of 0,0225 μA L μmol-1. The limits of detection and quantification for isoniazid determination were 0,56 μmol L-1 and 1,88 μmol L-1, respectively. The relative standard deviation for 10 determinations of 100 μmol L-1 isoniazid was 2,5%. The sensor was successfully applied for isoniazid determination in artificial body fluids. / No presente trabalho é apresentado o desenvolvimento de uma nova plataforma para eletroanálise de isoniazida baseada em (MWCNTO-GO/FePc). O eletrodo modificado com FePc/MWCNTO-GO diminuiu sensivelmente o potencial de oxidação da isoniazida para +200 mV vs. Ag/AgCl. As propriedades eletroquímicas e eletroanalíticas do eletrodo modificado com FePc/MWCNTO-GO foram investigadas por voltametria cíclica, espectroscopia de impedância eletroquímica, microscopia eletroquímica de varredura, e amperometria. O sensor apresentou melhor desempenho em tampão fosfato 0,1 mol L-1 com pH 7,4. Sob condições otimizadas uma faixa de resposta linear de 5 μmol L-1 a 476 µmol L-1 foi obtida com uma sensibilidade de 0,0225 μA L μmol-1. O limite de detecção e quantificação para a isoniazida foram determinados como sendo 0,56 μmol L-1 e 1,88 μmol L-1, respectivamente. O desvio padrão relativo para 10 determinações de 100 μmol L-1 de isoniazida foi de 2,5%. O sensor foi aplicado com sucesso para determinação de isoniazida em fluidos corporais artificiais.