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Dynamics of gene expression during vegetative phase change in maize

Beydler, Benjamin DuPree 01 December 2014 (has links)
As maize plants undergo vegetative phase change, they both exhibit heteroblasty, an abrupt change in pattern of leaf morphogenesis, and gain the ability to produce flowers. Both processes are under the control of microRNA 156, whose levels decline at the end of the juvenile phase. Gain of ability to flower is conferred by expression of miR156 targets that encode Squamosa Promoter-Binding (SBP) transcription factors, which in turn induce the expression of MADS-box transcription factors that promote maturation and flowering. What gene expression differences underlie heteroblasty, as well as what causes the reduction in miR156 levels, remain open questions. Here, we compare the gene expression in primordia that will develop into juvenile or adult leaves to identify genes that define these two developmental states and may influence vegetative phase change. In comparisons among successive leaves at the same developmental stage of plastochron 6, three-fourths of approximately 1,100 differentially expressed genes were more highly expressed in juvenile primordia. This juvenile set was enriched in photosynthetic genes, particularly those associated with cyclic electron flow at photosystem I, and genes involved in oxidative stress and retrograde redox signaling. Pathogen responsive pathways including jasmonic acid, salicylic acid, and benzoxazinoids were also up-regulated in juvenile primordia and indeed, we found that exogenous application of jasmonic acid, and hydrogen peroxide delays vegetative phase change in maize seedlings. These results suggest that the timing of vegetative phase change in maize is coordinated in part downstream of photo-oxidative stress signaling. Photo-oxidative stress during greening likely amplifies heterotrophic energy insufficiency. The successful amelioration of these stress signals may ultimately determine the duration of miR156-mediated juvenility.
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Indução de rejuvenescimento de teca (Tectona grandis L. f) através de enxertia seriada e micropropagação / Induction of rejuvenation of teak (Tectona grandis L. f) through serial grafting and micropropagation

Andrade, Wirifran Fernandes de 18 June 2010 (has links)
O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da enxertia seriada e micropropagação no rejuvenescimento de matrizes adultas de Tectona grandis. A experimentação foi realizada nas empresas Floresteca S.A e Bioteca Ltda, Mato Grosso, utilizando três materiais genéticos diferente, sendo dois clones, com 35 anos idade e mudas de semente. Como técnica de macropropagação optou-se pela enxertia seriada com delineamento inteiramente aleatorizado com três tratamentos representados pelos materiais genéticos com sete repetições. Para micropropagação, utilizou-se meio MS modificado. O experimento in vitro foi dividido em etapas: resgate do meristema com delineamento inteiramente aleatorizado, com os tratamentos sendo três materiais genéticos com trinta repetições; estabelecimento da cultura com os tratamentos arranjados em fatorial 3x5 sendo três materiais genéticos com cinco concentrações de BAP, totalizando quinze tratamentos com cinco repetições; multiplicação/rejuvenescimento com delineamento inteiramente aleatorizado, com os tratamentos arranjados em fatorial 3x5 sendo três materiais genéticos com cinco subcultivos, totalizando quinze tratamentos com três repetições e enraizamento das microestacas. Para macroprogação, o parâmetro avaliado foi a percentagem de pega dos enxertos. Para micropropagação, na fase de resgate, avaliou-se o número de meristemas viáveis; na fase de estabelecimento da cultura, avaliou-se o tamanho, número de nós e número de folhas dos explantes; e na fase de multiplicação/rejuvenescimento, avaliou-se o desenvolvimento de brotos nos sucessivos subcultivos. Os enxertos das mudas obtidas por semente apresentaram brotação aos sete dias de enxertados comparados aos clones que iniciaram as brotações aos quinze dias de enxertados. A sobrevivência dos meristemas apicais introduzidos que não apresentaram oxidação ou contaminação foi superior a 84%. A concentração de 1,5 mg.L-1 de BAP foi a mais significativa na fase de estabelecimento da cultura. O número de brotação e o rejuvenescimento do material adulto aumentaram à medida que aumentou o número de subcultivos, bem como a percentagem de enraizamento. O estabelecimento de minijardim clonal de Tectona grandis é possível mediante uso de brotações rejuvenescidas in vitro. / The aim of this study was to evaluate the effect of serial grafting and micropropagation in rejuvenation of Tectona grandis. The experiments were carried out in Floresteca SA and Bioteca Ltda. companies, Mato Grosso, using two clones and seedlings. The clones were 35 years old and the seedlings were six months old. Serial grafting was chosen for macropropagation technique on a completely randomized statistical design, with three treatments corresponding to genetic material with seven replications. For micropropagation, solid modified MS medium was used. The in vitro experiment was divided into stages: meristem rescue on a completely randomized design with the treatments corresponding to three genetic material with seven replications; establishment in vitro culture on completely randomized design arranged in 3x5 factorial scheme, corresponding to three genetic material with five concentrations of BAP resulting in fifteen treatments with five replications; multiplication/rejuvenation on completely randomized design arranged in 3x5 factorial scheme, corresponding to three genetic material with five subcultures concentrations of resulting in fifteen treatments with three replications on a completely randomized 3x5 and microcuttings rooting. For macropropagation, the parameter evaluated was the percentage of grafting takes. For micropropagation, in the rescue phase, it was evaluated the number of viable meristems. In the establishment phase of culture, the parameters evaluated were the size, number of nodes and number of leaves of the explants; and in the phase of multiplication/rejuvenation it was evaluated the development of the shoots in successive subcultures. The shoots sprouting from seedlings grafts at seventh day compared with grafted clones that started sprouting on the fifteenth day after grafting. The survival of apical meristems without oxidation or contamination was above 84%. The concentration of BAP (1.5 mg.L-1) that was the most significant in the establishment phase of culture. The number of shoots produced and the rejuvenation process increases with increasing number of subcultures, as well as the percentage of rooting. The establishment of clonal minigarden of Tectona grandis coud be possible through rejuvenation of trees in vitro.
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Diferentes formas de propagação e intensidades de poda no desempenho a campo de mirtileiros do grupo rabbiteye. 2011. / Different methods of propagation and intensity of pruning on field performance of rabbiteye blueberries.

Souza, André Luiz Külkamp de 02 March 2011 (has links)
Made available in DSpace on 2014-08-20T14:22:08Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-03-02 / Blueberry cultivars of rabbiteye group Bluegem, Briteblue, and Woodard are characterized by having low chilling requirement, high vigor and productivity, being able to be produced in region of Southern Brazil. Studies on cultural practices and field performance in blueberry are recent in Brazil. In order to provide more accurated informations to the growers of this fruit crop, experiments were carried out during 2009 and 2010 in a high potential region. The first experiment was carried out in a didactic orchard at the Federal University of Pelotas (Rio Grande do Sul State), and the objective was to study the field behavior of the blueberries propagated by two different techniques. Evaluations on vegetation, production, and fruit quality aspects were done in order to determine the effect of rejuvenation obtained through micropropagation technique. One year-old plants of blueberry, cultivars Bluegem, Briteblue, and Woodard, obtained from micropropagation and semi-hardwood cuttings were used. It was found that micropropagated plants showed a high initial vegetative growth, and both productivity and fruit quality similar to plants propagated by cuttings. In the second experiment, conducted in a commercial orchard located in the same city of the first experiment, it was tested different intensities of pruning on production and fruit quality aspects. Seven years-old plants, cultivars Briteblue and Woodard were used. They were pruned during the winter rest period in different intensities (low, moderate, drastic and control), and the control (no pruning). Blueberry plants which were not pruned showed high productivity, but produced smaller fruits. The moderate pruning system showed the best results. / As cultivares de mirtileiro Bluegem, Briteblue e Woodard pertencem ao grupo rabbiteye e caracterizam-se pela baixa exigência em frio, elevado vigor e alta produtividade, sendo aptas a serem produzidas nas condições do Sul do Brasil. No país ainda são recentes os estudos relativos ao manejo do pomar de mirtileiro e suas características a campo. Na tentativa de oferecer informações mais precisas aos produtores desta cultura, foram conduzidos dois experimentos durante os anos de 2009 e 2010 em região com potencial produtivo. O primeiro experimento foi conduzido em pomar didático pertencente à Universidade Federal de Pelotas, e o objetivo foi estudar o comportamento a campo de mirtileiros propagados por duas diferentes técnicas, avaliando-se aspectos vegetativos, produtivos e de qualidade dos frutos, a fim de constatar o efeito do rejuvenescimento obtido através da técnica de micropropagação. Para isso, realizou-se o plantio de mudas de mirtileiro com um ano de idade das cultivares Bluegem, Briteblue e Woodard, propagadas in vitro e por estaquia semilenhosa. Foi constatado que plantas micropropagadas apresentam, a campo, crescimento vegetativo inicial superior, além de produtividade e qualidade de frutos semelhantes às plantas propagadas por estaquia. No segundo experimento, conduzido em um pomar comercial localizado no mesmo município do primeiro, foram testadas diferentes intensidades de poda de frutificação e avaliados aspectos produtivos e de qualidade de frutos. Foram utilizadas plantas com sete anos de idade, das cultivares Briteblue e Woodard, que foram podadas no período de repouso hibernal em intensidades distintas (leve, moderada, drástica e testemunha). Plantas de mirtileiro não podadas apresentaram produtividade superior, porém produziram frutos de menor tamanho. O sistema de poda moderado foi o que apresentou melhores resultados.
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Indução de rejuvenescimento de teca (Tectona grandis L. f) através de enxertia seriada e micropropagação / Induction of rejuvenation of teak (Tectona grandis L. f) through serial grafting and micropropagation

Wirifran Fernandes de Andrade 18 June 2010 (has links)
O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da enxertia seriada e micropropagação no rejuvenescimento de matrizes adultas de Tectona grandis. A experimentação foi realizada nas empresas Floresteca S.A e Bioteca Ltda, Mato Grosso, utilizando três materiais genéticos diferente, sendo dois clones, com 35 anos idade e mudas de semente. Como técnica de macropropagação optou-se pela enxertia seriada com delineamento inteiramente aleatorizado com três tratamentos representados pelos materiais genéticos com sete repetições. Para micropropagação, utilizou-se meio MS modificado. O experimento in vitro foi dividido em etapas: resgate do meristema com delineamento inteiramente aleatorizado, com os tratamentos sendo três materiais genéticos com trinta repetições; estabelecimento da cultura com os tratamentos arranjados em fatorial 3x5 sendo três materiais genéticos com cinco concentrações de BAP, totalizando quinze tratamentos com cinco repetições; multiplicação/rejuvenescimento com delineamento inteiramente aleatorizado, com os tratamentos arranjados em fatorial 3x5 sendo três materiais genéticos com cinco subcultivos, totalizando quinze tratamentos com três repetições e enraizamento das microestacas. Para macroprogação, o parâmetro avaliado foi a percentagem de pega dos enxertos. Para micropropagação, na fase de resgate, avaliou-se o número de meristemas viáveis; na fase de estabelecimento da cultura, avaliou-se o tamanho, número de nós e número de folhas dos explantes; e na fase de multiplicação/rejuvenescimento, avaliou-se o desenvolvimento de brotos nos sucessivos subcultivos. Os enxertos das mudas obtidas por semente apresentaram brotação aos sete dias de enxertados comparados aos clones que iniciaram as brotações aos quinze dias de enxertados. A sobrevivência dos meristemas apicais introduzidos que não apresentaram oxidação ou contaminação foi superior a 84%. A concentração de 1,5 mg.L-1 de BAP foi a mais significativa na fase de estabelecimento da cultura. O número de brotação e o rejuvenescimento do material adulto aumentaram à medida que aumentou o número de subcultivos, bem como a percentagem de enraizamento. O estabelecimento de minijardim clonal de Tectona grandis é possível mediante uso de brotações rejuvenescidas in vitro. / The aim of this study was to evaluate the effect of serial grafting and micropropagation in rejuvenation of Tectona grandis. The experiments were carried out in Floresteca SA and Bioteca Ltda. companies, Mato Grosso, using two clones and seedlings. The clones were 35 years old and the seedlings were six months old. Serial grafting was chosen for macropropagation technique on a completely randomized statistical design, with three treatments corresponding to genetic material with seven replications. For micropropagation, solid modified MS medium was used. The in vitro experiment was divided into stages: meristem rescue on a completely randomized design with the treatments corresponding to three genetic material with seven replications; establishment in vitro culture on completely randomized design arranged in 3x5 factorial scheme, corresponding to three genetic material with five concentrations of BAP resulting in fifteen treatments with five replications; multiplication/rejuvenation on completely randomized design arranged in 3x5 factorial scheme, corresponding to three genetic material with five subcultures concentrations of resulting in fifteen treatments with three replications on a completely randomized 3x5 and microcuttings rooting. For macropropagation, the parameter evaluated was the percentage of grafting takes. For micropropagation, in the rescue phase, it was evaluated the number of viable meristems. In the establishment phase of culture, the parameters evaluated were the size, number of nodes and number of leaves of the explants; and in the phase of multiplication/rejuvenation it was evaluated the development of the shoots in successive subcultures. The shoots sprouting from seedlings grafts at seventh day compared with grafted clones that started sprouting on the fifteenth day after grafting. The survival of apical meristems without oxidation or contamination was above 84%. The concentration of BAP (1.5 mg.L-1) that was the most significant in the establishment phase of culture. The number of shoots produced and the rejuvenation process increases with increasing number of subcultures, as well as the percentage of rooting. The establishment of clonal minigarden of Tectona grandis coud be possible through rejuvenation of trees in vitro.
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Diferentes formas de propagação e intensidades de poda no desempenho a campo de mirtileiros do grupo rabbiteye / Different methods of propagation and intensity of pruning on field performance of rabbiteye blueberries

Souza, André Luiz Külkamp de 02 March 2011 (has links)
Made available in DSpace on 2014-08-20T14:22:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_andre_de_souza.pdf: 1505540 bytes, checksum: d992967fc84ee46bcd594a64a2a642a6 (MD5) Previous issue date: 2011-03-02 / Blueberry cultivars of rabbiteye group Bluegem, Briteblue, and Woodard are characterized by having low chilling requirement, high vigor and productivity, being able to be produced in region of Southern Brazil. Studies on cultural practices and field performance in blueberry are recent in Brazil. In order to provide more accurated informations to the growers of this fruit crop, experiments were carried out during 2009 and 2010 in a high potential region. The first experiment was carried out in a didactic orchard at the Federal University of Pelotas (Rio Grande do Sul State), and the objective was to study the field behavior of the blueberries propagated by two different techniques. Evaluations on vegetation, production, and fruit quality aspects were done in order to determine the effect of rejuvenation obtained through micropropagation technique. One year-old plants of blueberry, cultivars Bluegem, Briteblue, and Woodard, obtained from micropropagation and semi-hardwood cuttings were used. It was found that micropropagated plants showed a high initial vegetative growth, and both productivity and fruit quality similar to plants propagated by cuttings. In the second experiment, conducted in a commercial orchard located in the same city of the first experiment, it was tested different intensities of pruning on production and fruit quality aspects. Seven years-old plants, cultivars Briteblue and Woodard were used. They were pruned during the winter rest period in different intensities (low, moderate, drastic and control), and the control (no pruning). Blueberry plants which were not pruned showed high productivity, but produced smaller fruits. The moderate pruning system showed the best results. / As cultivares de mirtileiro Bluegem, Briteblue e Woodard pertencem ao grupo rabbiteye e caracterizam-se pela baixa exigência em frio, elevado vigor e alta produtividade, sendo aptas a serem produzidas nas condições do Sul do Brasil. No país ainda são recentes os estudos relativos ao manejo do pomar de mirtileiro e suas características a campo. Na tentativa de oferecer informações mais precisas aos produtores desta cultura, foram conduzidos dois experimentos durante os anos de 2009 e 2010 em região com potencial produtivo. O primeiro experimento foi conduzido em pomar didático pertencente à Universidade Federal de Pelotas, e o objetivo foi estudar o comportamento a campo de mirtileiros propagados por duas diferentes técnicas, avaliando-se aspectos vegetativos, produtivos e de qualidade dos frutos, a fim de constatar o efeito do rejuvenescimento obtido através da técnica de micropropagação. Para isso, realizou-se o plantio de mudas de mirtileiro com um ano de idade das cultivares Bluegem, Briteblue e Woodard, propagadas in vitro e por estaquia semilenhosa. Foi constatado que plantas micropropagadas apresentam, a campo, crescimento vegetativo inicial superior, além de produtividade e qualidade de frutos semelhantes às plantas propagadas por estaquia. No segundo experimento, conduzido em um pomar comercial localizado no mesmo município do primeiro, foram testadas diferentes intensidades de poda de frutificação e avaliados aspectos produtivos e de qualidade de frutos. Foram utilizadas plantas com sete anos de idade, das cultivares Briteblue e Woodard, que foram podadas no período de repouso hibernal em intensidades distintas (leve, moderada, drástica e testemunha). Plantas de mirtileiro não podadas apresentaram produtividade superior, porém produziram frutos de menor tamanho. O sistema de poda moderado foi o que apresentou melhores resultados.
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Propagação in vitro de Eucalyptus dunnii Maiden: desenvolvimento de um novo meio basal e estimação de parâmetros genéticos para características morfofisiológicas / In vitro propagation of Eucalyptus dunnii Maiden: development of a new basal medium and estimation of genetic parameters for morphophysiological traits

Oberschelp, Gustavo Pedro Javier 03 October 2014 (has links)
O Eucalyptus dunnii é reconhecido pela sua tolerância às geadas, por apresentar bom crescimento, assim como pela sua madeira de qualidade apta para o uso na indústria celulósica e em determinados produtos sólidos. Contudo, a baixa disponibilidade de material de propagação, devido à escassa floração e à recalcitrância ao enraizamento, representa um fator limitante tanto para o melhoramento genético como para a sua maior difusão no cultivo florestal. A aplicação de técnicas de propagação in vitro e a incorporação de critérios de seleção relacionados à capacidade de enraizamento poderiam contribuir para minimizar esses problemas. Até hoje, as pesquisas realizadas na cultura de tecidos de E. dunnii utilizaram meios basais desenvolvidos para atender os requerimentos nutricionais de outras espécies. Este fato, geralmente, demanda ajustes nutricionais para a adequação do meio, cujos resultados são limitados pelas interações entre seus diversos componentes. Portanto, foi desenvolvido um meio basal inédito, com base nos teores de nutrientes minerais essenciais em brotações juvenis de cepas de E. dunnii e, posteriormente, ajustado à disponibilidade dos nutrientes em solução. Para otimizar as condições de crescimento, foram avaliados o tipo de meio de suporte e a fonte de Fe empregada na formulação deste meio basal, o que permitiu demonstrar a importância destes fatores na quantidade e qualidade das respostas morfogênicas in vitro de brotações de E. dunnii. Posteriormente, o meio basal desenvolvido foi utilizado com sucesso na organogênese em hipocótilos quando empregado com 0,032 mmol L-1 de EDTA/Fe como fonte de Fe (EDM), assim como na multiplicação de gemas axilares de material juvenil e adulto de E. dunnii quando adicionado com 0,256 mmol L-1 de EDDHA/Fe (EDMm), apresentando melhor desempenho do que os meios basais JADS, MS e WPM na obtenção de microplantas. Além disso, foi possível determinar que a clorose das brotações é atribuível à deficiência de Fe e que a queda de folhas e a oxidação estão relacionadas aos baixos teores de N. Por outro lado, a restrição de K, Mg, Mn, Zn, Mo, Ni, Co ou NaCl do meio basal EDMm, afetou negativamente o desenvolvimento das brotações, evidenciando a maior importância relativa destes nutrientes na composição do meio basal. Finalmente, foram estimados parâmetros genéticos para características morfofisiológicas in vitro em vinte progênies de polinização aberta de E. dunnii. As herdabilidades das características de regeneração de gemas, número de gemas e regeneração de calos foram elevadas, entretanto, as associadas ao enraizamento foram baixas a moderadas. Foram determinadas correlações genéticas favoráveis e de elevada magnitude para o comprimento das brotações e do número de raízes com o enraizamento. A possibilidade de aplicar maiores intensidades de seleção nos caracteres quantitativos, sugere que maiores ganhos preditos poderiam ser obtidos quando implementada a seleção indireta do enraizamento. Estes resultados constituem um caso exitoso de regeneração de plantas a partir de tecidos juvenis e de micropropagação de árvores adultas de E. dunnii que, por fim, poderão contribuir com a disponibilidade de material de qualidade genética superior e com o planejamento e execução de uma estratégia de melhoramento mais adequada para esta espécie. / Eucalyptus dunnii is a well-known species for its tolerance to the deleterious effects of frost; moreover, it has good growth, as well as wood production suitable for pulp, paper and certain uses as a solid wood. However, low availability of propagation material, due to poor flowering and rooting recalcitrance, represents a limiting factor for both breeding and deployment in plantation forests. Combined application of in vitro propagation techniques and selection criteria for traits related to rooting ability could help to reduce these problems, allowing the selection, rescue, rejuvenation and multiplication of elite genotypes. Previous research on tissue culture of E. dunnii was based on culture media originally developed to meet the nutritional requirements of other species, which often involves further nutritional adjustments in order to adequate the media to the new species requirement. Nevertheless, results of this approach are hindered by interactions between the diverse media components. Therefore, it was developed a new culture medium based on essential mineral nutrients concentrations in E. dunnii shoots collected from coppice stumps and subsequently adjusted to the mineral nutrient availability in the solution. The support media and Fe sources effects on the quantity and quality of the organogenic responses were studied. The results showed the potential and constrains of each Fe source and agar based or liquid culture with phenolic foam support. The developed basal medium was successfully used on shoot organogenesis of hypocotyls when used 0.032 mmol L-1 of EDTA/Fe as Fe source, and on micropropagation of juvenile and adult materials of E. dunnii when added with 0.256 mmol L-1 of EDDHA/Fe as Fe source (EDMm), showing better performance than the baseline basal media JADS, MS and WPM for microplants production. Additionally, relationships between leaves chlorosis and low Fe concentrations and leaves drop and oxidation with low N concentration in EDMm basal media were recognized. Moreover, nutritional restrictions of K, Mg, Mn, Zn, Mo, Ni,Co or NaCl in EDMm basal media for 30 days reduced the growth and development of axillary shoots, showing the higher relative relevance of these nutrients in basal media composition. In addition, genetic parameters for in vitro morphophysiological traits were estimated on twenty open-pollinated families of E. dunnii. High heritability for bud number, bud regeneration and callus regeneration were defined, although rooting related traits showed low to moderate heritability. Nevertheless, moderate heritability for shoot length and number of roots coupled to high positive genetic correlations with rooting and the possibility to increase the selection intensity in quantitative traits, implies higher predicted gains for rooting under indirect selection. As a whole, these results validate the proposed approach for basal media development and report successfull plant regeneration from juvenile material and micropropagation of adult elite trees of E. dunnii, which may contribute with both improved plant propagation material availability and the planning and implementation of a more suitable breeding strategy for this species.
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Propagação in vitro de Eucalyptus dunnii Maiden: desenvolvimento de um novo meio basal e estimação de parâmetros genéticos para características morfofisiológicas / In vitro propagation of Eucalyptus dunnii Maiden: development of a new basal medium and estimation of genetic parameters for morphophysiological traits

Gustavo Pedro Javier Oberschelp 03 October 2014 (has links)
O Eucalyptus dunnii é reconhecido pela sua tolerância às geadas, por apresentar bom crescimento, assim como pela sua madeira de qualidade apta para o uso na indústria celulósica e em determinados produtos sólidos. Contudo, a baixa disponibilidade de material de propagação, devido à escassa floração e à recalcitrância ao enraizamento, representa um fator limitante tanto para o melhoramento genético como para a sua maior difusão no cultivo florestal. A aplicação de técnicas de propagação in vitro e a incorporação de critérios de seleção relacionados à capacidade de enraizamento poderiam contribuir para minimizar esses problemas. Até hoje, as pesquisas realizadas na cultura de tecidos de E. dunnii utilizaram meios basais desenvolvidos para atender os requerimentos nutricionais de outras espécies. Este fato, geralmente, demanda ajustes nutricionais para a adequação do meio, cujos resultados são limitados pelas interações entre seus diversos componentes. Portanto, foi desenvolvido um meio basal inédito, com base nos teores de nutrientes minerais essenciais em brotações juvenis de cepas de E. dunnii e, posteriormente, ajustado à disponibilidade dos nutrientes em solução. Para otimizar as condições de crescimento, foram avaliados o tipo de meio de suporte e a fonte de Fe empregada na formulação deste meio basal, o que permitiu demonstrar a importância destes fatores na quantidade e qualidade das respostas morfogênicas in vitro de brotações de E. dunnii. Posteriormente, o meio basal desenvolvido foi utilizado com sucesso na organogênese em hipocótilos quando empregado com 0,032 mmol L-1 de EDTA/Fe como fonte de Fe (EDM), assim como na multiplicação de gemas axilares de material juvenil e adulto de E. dunnii quando adicionado com 0,256 mmol L-1 de EDDHA/Fe (EDMm), apresentando melhor desempenho do que os meios basais JADS, MS e WPM na obtenção de microplantas. Além disso, foi possível determinar que a clorose das brotações é atribuível à deficiência de Fe e que a queda de folhas e a oxidação estão relacionadas aos baixos teores de N. Por outro lado, a restrição de K, Mg, Mn, Zn, Mo, Ni, Co ou NaCl do meio basal EDMm, afetou negativamente o desenvolvimento das brotações, evidenciando a maior importância relativa destes nutrientes na composição do meio basal. Finalmente, foram estimados parâmetros genéticos para características morfofisiológicas in vitro em vinte progênies de polinização aberta de E. dunnii. As herdabilidades das características de regeneração de gemas, número de gemas e regeneração de calos foram elevadas, entretanto, as associadas ao enraizamento foram baixas a moderadas. Foram determinadas correlações genéticas favoráveis e de elevada magnitude para o comprimento das brotações e do número de raízes com o enraizamento. A possibilidade de aplicar maiores intensidades de seleção nos caracteres quantitativos, sugere que maiores ganhos preditos poderiam ser obtidos quando implementada a seleção indireta do enraizamento. Estes resultados constituem um caso exitoso de regeneração de plantas a partir de tecidos juvenis e de micropropagação de árvores adultas de E. dunnii que, por fim, poderão contribuir com a disponibilidade de material de qualidade genética superior e com o planejamento e execução de uma estratégia de melhoramento mais adequada para esta espécie. / Eucalyptus dunnii is a well-known species for its tolerance to the deleterious effects of frost; moreover, it has good growth, as well as wood production suitable for pulp, paper and certain uses as a solid wood. However, low availability of propagation material, due to poor flowering and rooting recalcitrance, represents a limiting factor for both breeding and deployment in plantation forests. Combined application of in vitro propagation techniques and selection criteria for traits related to rooting ability could help to reduce these problems, allowing the selection, rescue, rejuvenation and multiplication of elite genotypes. Previous research on tissue culture of E. dunnii was based on culture media originally developed to meet the nutritional requirements of other species, which often involves further nutritional adjustments in order to adequate the media to the new species requirement. Nevertheless, results of this approach are hindered by interactions between the diverse media components. Therefore, it was developed a new culture medium based on essential mineral nutrients concentrations in E. dunnii shoots collected from coppice stumps and subsequently adjusted to the mineral nutrient availability in the solution. The support media and Fe sources effects on the quantity and quality of the organogenic responses were studied. The results showed the potential and constrains of each Fe source and agar based or liquid culture with phenolic foam support. The developed basal medium was successfully used on shoot organogenesis of hypocotyls when used 0.032 mmol L-1 of EDTA/Fe as Fe source, and on micropropagation of juvenile and adult materials of E. dunnii when added with 0.256 mmol L-1 of EDDHA/Fe as Fe source (EDMm), showing better performance than the baseline basal media JADS, MS and WPM for microplants production. Additionally, relationships between leaves chlorosis and low Fe concentrations and leaves drop and oxidation with low N concentration in EDMm basal media were recognized. Moreover, nutritional restrictions of K, Mg, Mn, Zn, Mo, Ni,Co or NaCl in EDMm basal media for 30 days reduced the growth and development of axillary shoots, showing the higher relative relevance of these nutrients in basal media composition. In addition, genetic parameters for in vitro morphophysiological traits were estimated on twenty open-pollinated families of E. dunnii. High heritability for bud number, bud regeneration and callus regeneration were defined, although rooting related traits showed low to moderate heritability. Nevertheless, moderate heritability for shoot length and number of roots coupled to high positive genetic correlations with rooting and the possibility to increase the selection intensity in quantitative traits, implies higher predicted gains for rooting under indirect selection. As a whole, these results validate the proposed approach for basal media development and report successfull plant regeneration from juvenile material and micropropagation of adult elite trees of E. dunnii, which may contribute with both improved plant propagation material availability and the planning and implementation of a more suitable breeding strategy for this species.

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