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Adjuvant and Down-Staging Treatment with Imatinib in Gastrointestinal Stromal Tumours

Andersson, Anna January 2008 (has links)
Background: GISTs are gastrointestinal mesenchymal tumours that express the type III receptor tyrosine kinase KIT. The KIT proto-oncogene encodes the receptor KIT. Most GISTs have gain-of-function mutations in the KIT or PDGFRA gene. The tyrosine kinase is therefore continuously activated leading to ligand-independent dimerization. Imatinib mesylate (Glivec®) is considered to be the first-line palliative treatment. The activated form of the KIT receptor tyrosine kinase is inhibited by imatinib. The aim of the study was to compare the survival of patients treated with either adjuvant or down-staging imatinib with historic controls treated with radical surgery (R0) only. Methods: A historic control group was chosen from a population-based series from western Sweden (population 1.6 million) that matched the adjuvant (n=23) and down-staging (n=7) groups respectively. Mutation analysis was performed in all cases with bidirectional direct sequencing. The recurrence-free survival was calculated. Results: There was only one recurrence (4 %) in the adjuvant group, and no recurrences in the down-staging study group, compared to 32/48 patients (67 %) in the control group. Tumour size decreased in diameter from 20 cm to 11 cm with down-staging treatment. Conclusion: Adjuvant imatinib improves recurrence-free survival in R0 resected patients. Down-staging treatment with imatinib is recommended for patients with large tumours or metastases. The importance of mutation analysis was established.
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Adjuvant and Down-Staging Treatment with Imatinib in Gastrointestinal Stromal Tumours

Andersson, Anna January 2008 (has links)
<p>Background: GISTs are gastrointestinal mesenchymal tumours that express the type III receptor tyrosine kinase KIT. The KIT proto-oncogene encodes the receptor KIT. Most GISTs have gain-of-function mutations in the KIT or PDGFRA gene. The tyrosine kinase is therefore continuously activated leading to ligand-independent dimerization. Imatinib mesylate (Glivec®) is considered to be the first-line palliative treatment. The activated form of the KIT receptor tyrosine kinase is inhibited by imatinib. The aim of the study was to compare the survival of patients treated with either adjuvant or down-staging imatinib with historic controls treated with radical surgery (R0) only.</p><p>Methods: A historic control group was chosen from a population-based series from western Sweden (population 1.6 million) that matched the adjuvant (n=23) and down-staging (n=7) groups respectively. Mutation analysis was performed in all cases with bidirectional direct sequencing. The recurrence-free survival was calculated.</p><p>Results: There was only one recurrence (4 %) in the adjuvant group, and no recurrences in the down-staging study group, compared to 32/48 patients (67 %) in the control group. Tumour size decreased in diameter from 20 cm to 11 cm with down-staging treatment.</p><p>Conclusion: Adjuvant imatinib improves recurrence-free survival in R0 resected patients. Down-staging treatment with imatinib is recommended for patients with large tumours or metastases. The importance of mutation analysis was established.</p>
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Automatisierte Konfiguration des Antriebsstrangs bei der Projektierung dieselelektrischer Schienenfahrzeuge

Siegel, Ronny 25 August 2015 (has links) (PDF)
Die vorliegende Arbeit verfolgt als Ziel Algorithmen zur anwendungsbezogenen Komponen-tenauswahl und Antriebskonfiguration dieselelektrischer Schienenfahrzeuge zu entwickeln und umzusetzen. Aus modellierten Einzelkomponenten werden automatisiert virtuelle Antriebsstränge generiert, anhand einer vorgebbaren Transportaufgabe simulationstechnisch bewertet und miteinander verglichen. Aus den Berechnungsergebnissen kann die für die vorgegebenen Randbedingungen am besten geeignete Antriebskonfiguration ermittelt werden. Zum Verifizieren der Ergebnisse wurden messtechnische Untersuchungen durch-geführt.
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Saugos elektros tinkle įvertinimo laboratorinis stendas / Laboratory kit for safety evaluation in electrical network

Jasaitis, Mintaras 23 August 2013 (has links)
Šiame baigiamajame darbe buvo suprojektuotas ir sumontuotas saugos elektros tinkle įvertinimo laboratorinis stendas. Parinkta elektros įranga, atitinkanti EĮĮT saugos sąlygas. Tinklo ir žmogaus apsaugos nuo elektros sistema suprojektuota panaudojus šiuolaikines technologijas. Sudaryta stendo principinė elektrinė ir išdėstymo schema. Atliktas IT, TT, TN-C, TN-S tinklo pavojingumo tyrimas. Tyrimo metu buvo nagrinėjamas tinklas avariniame režime ir žmogaus rizikos laipsnis, eksploatuojant gedimą turintį imtuvą.Saugos įvertinimo stendui parinkta ir aprašyta elektros įranga: įtampos įjungimas; viršsrovių apsauga; srovės nuotėkio apsauga; keičiamos C ir N laidų varžos; keičiamos šaltinio neutralės ir vartotojo įžeminimo varžos; keičiamos laidų izoliacijos varžos; tinklo atjungimo nuo šaltinio trukmės matavimo prietaisas; įtampos matavimo prietaisas; trumpojo jungimo mygtukas; instaliacinių laidų parinkimas. / The laboratory kit for safety evaluation in electrical network was created and installed in this final bachelor thesis. According to the safety conditions and requirements, the electrical equipment was selected. Network’s and human’s protection against electrical system was designed using modern technologies. Principal electrical and layout schemes of laboratory kit were drawn. The reasearch was conducted of a danger in IT, TT, TN-C, TN-S electrical network. At the time of research the electrical network was analysed in emergency modes and the human's level of risk was investigated while operating electrical equipment with defects. The electrical equipment for safety evaluation kit was selected and described in this project: voltage switch, overcurrent protection, residual-current device protection, variable C and N wire resistance, variable neutral and local earth ground resistance, variable wire insulation resistance, currents cut-off stopwatch, voltage measuring device, short circuit button, installation wiring selection.
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Hemopathies spontanément regressives : exemples de la matocytose et de la papulose lymphomatoide

Bruneau, Julie 18 April 2013 (has links) (PDF)
En hématologie, du fait de leur évolution favorable, les tumeurs spontanément regressives comme lesmodèles myéloïde de la mastocytose, et lymphoïde de la papulose lymphomatoïde sont peu étudiés. Lamastocytose est une hémopathie myéloproliférative clonale dont les lésions cutanées peuvent régresserspontanément chez l'enfant alors que la maladie est chronique chez l'adulte. Les mutations chezl'enfant sont en partie différentes de celles retrouvées chez l'adulte. Nous avons montré in vivo dansles mastocytoses pédiatriques une expression diminuée de la télomérase, associée à des télomèrescourts. In vitro, grâce à deux modèles cellulaires comportant différents mutants de KIT de " typepédiatriques " ou de " type adulte ", nous avons montré une augmentation de la longueur destélomères dans le mutant adulte, associée à une moindre sénescence comparées aux mutantspédiatriques sans pour autant mettre en évidence de différence dans l'expression et l'activité de latélomérase. Ces observations permettent en partie d'expliquer la régression des formes pédiatriques.La papulose lymphomatoïde est une lymphoprolifération cutanée T CD30+ dont les lésions régressentspontanément sans traitement. Cependant 10 à 20% des cas sont associés à un lymphome. Nous avonsétudié la physiopathologie d'expression du PDGFRβ dans les cellules tumorales via l'activation deNotch1. L'étude des télomères et de la télomérase in vivo et in vitro est préliminaire, et montrenotamment des télomères courts dans les cellules tumorales. En conclusion, nous montrons d'une partque la longueur des télomères dans les mastocytoses et la papulose lymphomatoïde est corrélée àl'évolution de la maladie, d'autre part, nous identifions un type de mutation potentiellement agressivedans les mastocytoses. Nous recommandons le génotypage systématique de cette pathologie dans lebut d'un suivi clinique attentif lorsque les lésions sont persistantes ou évolutives.
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Receptor tyrosine kinase c-Kit signalling in hematopoietic progenitor cells /

Edling, Charlotte, January 2006 (has links)
Diss. (sammanfattning) Umeå : Umeå universitet, 2006. / Härtill 3 uppsatser.
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Construção, aplicação e avaliação de um kit de experimentos para o ensino de eletrólitos / Construction, application, and evaluation of kit of experiments for the teaching of electrolytes

Rocha, Wilson Sergio de Araújo 28 March 2014 (has links)
Made available in DSpace on 2016-06-02T20:37:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 5835.pdf: 4624773 bytes, checksum: d8b4f5e11d50f5801b218ba768db01c4 (MD5) Previous issue date: 2014-03-28 / The limited information on electrolytes in high-school textbooks, the reduced time of weekly chemistry classes, and the lack of a laboratory in some schools suggest the need for an adaptation, for the teaching of this topic, with an experimental approach and using easily found materials. Thus, this work is focused on the development and application of a kit of experiments for use in the teaching of electrolytes, providing information on the construction (design and assembly) of an indicator of electrical conductivity and suggestions on how to apply the kit and evaluate the experimentally obtained results. This was done having Ausubel s meaningful learning theory as frame of reference. The developed kit comprises possible experiments for use of the indicator of conductivity as a tool for understanding the concept of electrolytes and questionnaires to collect the results obtained by the students. The kit was elaborated so as to make available simple classroom experiments, using easily found and daily used substances, and also seeking the scientific curiosity and motivation of the students, with safe handling and respect for the environment. The experimental activity, which may be addressed with an investigative approach, complements the theoretical exposition and should provide the students with a better understanding about electrolytes, thus contributing to the incorporation of knowledge and its relevant relationships. The kit was applied with four classes of students from a professionalizing public high school, encompassing: a diagnostic evaluation; a research-questionnaire (to be answered at home), followed by an evaluation; exercises in a worksheet (nº 1), carried out without and with the use of the kit of experiments; finally, exercises in another worksheet (nº 2). From the analysis of the results obtained throughout the application process, it was possible to conclude that there were evidences of student learning about electrolytes, rendered by the use of the kit of experiments. Hence, high-school teachers might use this kit as an auxiliary tool in the teaching of electrolytes and related topics and, in an interdisciplinary way, in the teaching of science, through experimentation. / As poucas informações sobre eletrólitos nos livros didáticos do Ensino Médio, o tempo reduzido das aulas semanais de Química e a falta de um laboratório em algumas escolas sugerem a necessidade de uma adequação para o ensino deste tópico, com abordagem experimental e usando-se materiais de fácil acesso. Assim, este trabalho está voltado para o desenvolvimento e aplicação de um kit de experimentos para uso no ensino de eletrólitos, fornecendo informações sobre como construir (projeto e montagem) um indicador de condutividade elétrica, e sugestões de como aplicar o kit e avaliar os resultados obtidos experimentalmente. Isso foi feito tendo como referencial teórico a aprendizagem significativa de Ausubel. O kit desenvolvido compreende possíveis experimentos para uso deste indicador de condutividade como ferramenta para apreensão do conceito de eletrólitos e questionários visando coletar resultados obtidos pelos alunos. Além disso, o kit foi elaborado tendo em mente a disponibilização em sala de aula de experimentos simples, utilizando substâncias de fácil acesso e de uso cotidiano, buscando também a curiosidade e a motivação científica dos alunos, com manuseio seguro e respeito ao meio ambiente. A atividade experimental, que poderá ser abordada com uma aproximação investigativa, complementa a exposição teórica e deve proporcionar uma melhor compreensão dos alunos sobre eletrólitos, assim contribuindo para a fixação dos conhecimentos e suas relações pertinentes. O kit foi aplicado com alunos de Ensino Médio Profissionalizante de quatro turmas de uma escola pública, compreendendo: uma avaliação diagnóstica; um questionário-pesquisa (a ser respondido em casa), seguido de uma avaliação; exercícios numa folha de trabalho (nº 1), respondidos sem e com o uso do kit de experimentos; finalmente, exercícios numa outra folha de trabalho (nº 2). A análise dos resultados obtidos ao longo do processo de aplicação proporcionou evidências de aprendizagem sobre eletrólitos, propiciada pelo uso do kit de experimentos. Portanto, professores do Ensino Médio poderão usar este kit como uma ferramenta auxiliar no ensino de eletrólitos e tópicos correlatos e, de forma interdisciplinar, no ensino de Ciências, através da experimentação.
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Desenvolvimento de métodos analíticos para o radiofármaco MIBI e DTPA em produto acabado

Bitencourt, Fernanda Gobbi de January 2018 (has links)
Radiofármacos são compostos radioativos que podem ser usados tanto para diagnóstico como para terapia. O radiofármaco 99m-Tc-MIBI é a formação de um complexo contendo o radionúclideo Tecnécium-99m e seis moléculas de Sestamibi, usado principalmente para cintilografias do miocárdio, sendo o procedimento mais realizado dentro da medicina nuclear, por consequência, o radiofármaco mais comercializado. Já o radiofármaco 99m-Tc-DTPA é composto também pelo mesmo radioisótopo e por uma molécula de ácido pentético, a qual tem característica de um quelante com afinidade pelos rins, por isso, é possível fazer avaliação do sistema renal. Como os radiofármacos são considerados medicamentos, estão sujeitos às mesmas normativas, logo o objetivo deste trabalho foi desenvolver metodologia de doseamento destes insumos ativos antes da complexação com o radionuclídeo através da metodologia de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE). Dois métodos simples e eficientes foram desenvolvidos e validados para o MIBI em produto acabado e para a matéria-prima ácido pentético (DTPA), utilizando-se misturas de solvente orgânico e tampão. Os parâmetros de validação foram avaliados, obtendo resultados satisfatórios. Um teste de estabilidade para o radiofármaco MIBI em solução foi realizado e o resultado indicou uma preservação das características de aproximadamente 60 dias, e quando liofilizado de mais de 12 meses. Sendo assim, os métodos propostos foram considerados adequados para utilização na rotina da indústria farmacêutica. Como perspectivas, novas condições serão testadas para obter método de quantificação para o radiofármaco 99m-Tc-DTPA em produto acabado. / Radiopharmaceuticals are radioactive compounds that can be used for diagnostic and therapeutic purposes. Technetium (99mTc) sestamibi is a radiopharmaceutical including a coordination complex consisting of the radioisotope technetium-99m bound to six Sestamibi ligands, which is mainly used to image the myocardium via scintigraphy. This is the most common nuclear medicine procedure, making Technetium (99mTc) sestamibi the most commercialized radiopharmaceutical. Technetium (99mTC)-DTPA in turn is composed by the same radioisotope plus a molecule of Pentetic Acid, which, by its chelating properties, is used to scan renal system. As radiopharmaceuticals are regarded as drugs, they are subject to the same regulations; therefore, the objective of this study is to develop quantification methodology for these both active pharmaceutical ingredients before their complexation with the radioisotope by employing high-performance liquid chromatography (HPLC) methodology. Two simple, efficient methods were developed and validated for Sestamibi at its final form as well as for DTPA's raw material by using buffer and organic solvent mixtures. The validation parameters were evaluated with satisfactory results. A stability test was carried out for Sestamibi, indicating the preservation of characteristics for nearly 60 days, and for over 12 months when at its freezedryed form. The proposed methods were thus considered adequate for pharmaceutical industries. As perspectives, new conditions shall be tested to obtain a quantification method for Technetium (99mTC)-DTPA at its final form.
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Influência dos genes candidatos MC1R, ASIP, TYRP1 e kit na pigmentação em ovinos crioulos e predição do efeito dos polimorfismos não sinônimos no gene MC1R humano

Hepp, Diego January 2015 (has links)
A coloração dos animais é uma característica que apresenta uma grande diversidade de fenótipos nas diferentes espécies. Diferentes abordagens podem ser utilizadas para o entendimento da diversidade na coloração existente nas espécies animais. Através da análise de genes candidatos as mutações responsáveis pela variação na coloração têm sido descritas em diferentes espécies, demonstrando o envolvimento de mecanismos moleculares variados na sua regulação. Este trabalho tem por objetivo a utilização de duas abordagens genéticas para o estudo da variação na coloração, a análise de genes candidatos e a predição computacional do efeito de polimorfismos não sinônimos. Em ovinos a coloração da lã é uma característica com importância na produção e para a identificação das raças. Polimorfismos em diferentes genes foram associados com a coloração da lã, entretanto, estes não foram estudados em muitas raças que apresentam variação fenotípica. A ovelha crioula é uma raça local existente no sul do Brasil que apresenta uma ampla diversidade de cores na lã, incluindo branco, preto e diversos tons intermediários. O gene receptor de melanocortina 1 (MC1R) foi previamente associado com a coloração na raça crioula, entretanto, outros genes também devem estar envolvidos na regulação da coloração na raça. Este trabalho avaliou a influência dos genes MC1R, ASIP (proteína sinalizadora agouti), TYRP1 (proteína relacionada à tirosinase 1) e KIT (homólogo do oncogene de sarcoma felino viral v-kit Hardy-Zuckerman 4) na coloração da lã na raça ovina crioula. Amostras de 410 animais de diferentes cores foram analisadas, sendo a variação na coloração da lã determinada por colorimetria. O padrão de herança dos fenótipos foi avaliado através de cruzamentos dirigidos entre indivíduos de diferentes cores. Os polimorfismos nos genes foram avaliados através da realização do sequenciamento e da análise de fragmentos e a quantificação da expressão do gene ASIP foi realizada por PCR em Tempo Real. Foi observada a associação significativa entre polimorfismos nos genes MC1R e ASIP e a cor da lã na raça crioula. O alelo dominante do gene MC1R, provocado pelas mutações p.M73K e p.D121N, foi encontrado apenas em indivíduos pigmentados. Este alelo resulta na ativação constitutiva do receptor, e consequentemente na produção constante de eumelanina, sendo epistático sobre o gene ASIP. Nos animais homozigotos para o alelo selvagem do MC1R a manifestação do fenótipo branco ocorreu somente nos portadores de um alelo contendo a duplicação do gene ASIP. Os portadores da duplicação do ASIP apresentaram níveis elevados de expressão do gene enquanto os homozigotos para a cópia simples do ASIP não expressaram o gene e apresentaram fenótipos pigmentados. Os resultados obtidos permitiram identificar a influência da interação epistática dos genes MC1R e ASIP na coloração da lã nos ovinos crioulos. O estudo de genes candidatos envolvidos na rota da pigmentação mostrou-se uma abordagem adequada para a análise da variação na coloração nestes animais. Espera-se que o conhecimento adquirido neste trabalho auxilie na criação e na preservação da raça através da manutenção da diversidade fenotípica existente. A avaliação computacional dos polimorfismos não sinônimos vem sendo utilizada recentemente a fim de determinar os SNPs que potencialmente afetam o funcionamento dos genes e identificar os mecanismos responsáveis por doenças complexas e pela variação nos fenótipos. A predição do efeito de polimorfismos nos genes utilizando ferramentas computacionais apresenta-se como uma abordagem alternativa para o estudo da genética da coloração. O gene MC1R humano apresenta uma grande quantidade de polimorfismos alguns dos quais foram associados com a variação na pigmentação e com suscetibilidade a tumores de pele. Entretanto, muitas das variações existentes no gene não foram avaliadas quanto às suas consequências funcionais e o seu papel na variação da pigmentação. Foi realizada a predição computacional dos polimorfismos não sinônimos no gene MC1R humano com o objetivo de identificar os nsSNPs mais provavelmente danosos, e estabelecer aqueles com potencial efeito na função do MC1R. Foram utilizadas 11 ferramentas de predição individuais (SIFT, MutPred, Polyphen-2, PROVEAN, I-Mutant 3.0, PANTHER, SNPs3D, Mutation Assessor, PhD-SNP, SNPs&GO e SNAP) e dois programas consenso (PON-P e PredictSNP 1.0) para a análise de 92 nsSNPs localizados no gene. Os programas utilizados baseiam-se em métodos evolutivos, estruturais e computacionais, resultando na identificação dos 14 nsSNPs mais danosos (L48P, R67W, H70Y, P72L, S83P, R151H, S172I, L206P, T242I, G255R, P256S, C273Y, C289R e R306H). Apesar das diferenças nos resultados de cada programa a combinação dos diferentes métodos permitiu diferenciar os polimorfismos neutros dos danosos, mostrando concordância com os programas consenso. A predição computacional demonstrou ser uma abordagem eficiente para a identificação dos alelos danosos no gene MC1R e para a priorização de mutações para posteriores estudos funcionais e populacionais. / Animal color is a characteristic that presents a large diversity of phenotypes. Different approaches can be used to understand the color diversity existing among and within species. Through analysis of candidate genes the mutations responsible for the color variation have been described in different species, showing the involvement of various molecular mechanisms of regulation. The objective of this work is the use of two genetic approaches to the study of color variation, the analysis of candidate genes and the computational prediction of non-synonym polymorphism effects (nsSNPs). In sheep the wool color is a feature with commercial importance and in identifying breeds. Polymorphisms in different genes have been associated with wool color, but they have not been studied in many breeds that show phenotypic variation regarding such a charactere. The Creole is a local breed from southern most Brazil that presents a wide range of wool color, varying from white to black, and including several intermediate hues. The melanocortin 1 receptor (MC1R) was previously associated with the wool color in the Creole, however, other genes might also be involved in the regulation of color in the breed. This study evaluated the influence of the genes MC1R, ASIP (agouti signaling protein), TYRP1 (tyrosinase related protein 1) and KIT (v-kit Hardy- Zuckerman 4 feline sarcoma viral oncogene homolog) in the Creole breed wool color. Samples from 410 specimens of different colors were analyzed. The variation in the color of the wool was performed by colorimetry. The inheritance pattern of the phenotypes was assessed by crossbreeding individuals of different colors. Polymorphisms in the genes were evaluated by performing sequencing and fragment analysis, and the quantification of the ASIP gene expression was performed by Real Time-PCR. It was observed a significant association between polymorphisms in MC1R and ASIP gene and the wool color in Creole breed. The dominant allele of the MC1R gene, caused by p.M73K and p.D121N mutations was found only in pigmented individuals. This allele leads to the constitutive activation of the receptor and therefore in constant production of eumelanin and is epistatic on the ASIP gene. In the homozygous to the wild-type allele of MC1R the manifestation of white phenotype occurred only in individuals with one allele containing a duplication of the ASIP gene. The carriers of the duplicated copy of ASIP showed high levels of gene expression while homozygous for the simple copy of the ASIP did not expressed the gene, and showed pigmented phenotypes. The results allowed the identification of the influence of epistatic interaction of MC1R and ASIP gene in the wool color in Creole breed. The study of candidate genes involved in the pigmentation pathway proved to be a suitable approach for the analysis of variation in pigmentation in these animals. It is expected that the knowledge acquired in this work will assist on stablishment of commercial breeding and preservation policies of this sheep breed. The computational evaluation of non-synonymous polymorphism has been used to determine SNPs that potentially affect the function of the genes and identify the mechanisms responsible for complex diseases and by the variation in phenotypes. The prediction of the effect of polymorphisms in genes using computational tools presents an alternative approach to the study of the genetic of coloration. The human MC1R gene has a large number of know polymorphisms, some of which were associated with changes in pigmentation and susceptibility to skin tumors. However, many existing variations in the gene have not been evaluated regarding the functional consequences and its role in the variation of pigmentation. Computational prediction of nonsynonymous polymorphisms was performed in the human MC1R gene in order to identify the most likely harmful nsSNPs and to establish those with potential effect on the function of MC1R. Eleven individual tools (SIFT, MutPred, Polyphen-2, PROVEAN, I-Mutant 3.0, PANTHER, SNPs3D, Mutation Assessor, PhD-SNP, SNPs&GO and SNAP) and two consensus programs (PON-P and PredictSNP 1.0) were used to the analysis of 92 nsSNPs located in the gene. The programs used are based in evolutionary, structural and computational methods, resulting in the identification of the 14 most damaging nsSNPs (L48P, R67W, H70Y, P72L, S83P, R151H, S172I, L206P, T242I, G255R, P256S, C273Y, C289R and R306H). Despite the differences in the results of the each program the combination of different methods allowed the differentiation of the neutral polymorphisms from the most damaging, showing agreement with the consensus programs. The computational prediction has proved to be an efficient approach for the identification of harmful alleles in the MC1R gene and for the prioritization of mutations for further functional and population studies.
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Avaliação de testes de captura de antígeno NS1 para o diagnóstico precoce das infecções por dengue

Lima, Monique da Rocha Queiroz January 2009 (has links)
Submitted by Anderson Silva (avargas@icict.fiocruz.br) on 2012-03-29T13:29:04Z No. of bitstreams: 1 monique_rq_lima_ioc_mt_0010_2009.pdf: 1937766 bytes, checksum: d05c52dcbcc952c1a57ff1ff206f06b1 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-03-29T13:29:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 monique_rq_lima_ioc_mt_0010_2009.pdf: 1937766 bytes, checksum: d05c52dcbcc952c1a57ff1ff206f06b1 (MD5) Previous issue date: 2009 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. / O diagnóstico laboratorial de dengue é muito importante para apoiar os programas Vigilância Epidemiológica considerando-se a dificuldade da confirmação dos casos em bases clínicas apenas, em especial, durante períodos inter-epidêmicos. Atualmente estão disponíveis kits comerciais para o diagnóstico sorológico do dengue, embora o seu custo ainda represente um alto encargo financeiro para países em desenvolvimento. Um diagnóstico rápido pode direcionar as medidas de controle do vetor. A proteína não-estrutural 1 (NS1) do vírus dengue por ser um marcador utilizado durante a fase aguda da doença e tem sido proposto para o diagnóstico da doença. Desta forma, a sensibilidade e especificidade de três kits comerciais para captura de antígeno NS1 disponíveis no mercado foram avaliadas com um painel de 852 amostras obtidos a partir da coleção do Laboratório de Flavivírus no Instituto Oswaldo Cruz, FIOCRUZ, de epidemias ocorridas durante os anos de 1986 a 2008. O desempenho de cada kit foi avaliado individualmente e, a comparação entre os três kits foi baseada na análise de uma sub-população de 450 amostras. Dentre os três kits analisados, o kit NS1 Ag Strip (BioRad Laboratories) foi o mais sensível em confirmar casos de dengue na amostragem testada (89%, 197/220), seguido pelo Platelia NS1 (BioRad Laboratories) (84%, 184/220) .O menos sensível foi o pan -E Early ELISA (PanBio Diagnostics) com 72% (159/220) de sensibilidade. Porém, neste estudo o kit da PanBio foi o mais especifico (100%), enquanto que ambos os kits da BioRad apresentaram 99% de especificidade. Os resultados obtidos demonstraram uma maior sensibilidade de confirmação de casos de infecção primária pelos três kits, porém não houve diferença significativa em relação aos casos de infecção secundária. Os três kits foram mais sensíveis em confirmar casos positivos por isolamento viral do que em casos positivos por RT-PCR. A sensibilidade dos três kits foi maior no período compreendido entre o primeiro ao quinto dia após o inicio dos sintomas. Reações cruzadas foram raramente observadas em vacinados contra o vírus da febre amarela e casos de rubéola. Os resultados obtidos demonstraram que três kits podem ser utilizados para a detecção precoce da infecção viral por dengue. / Dengue virus diagnosis is an important tool to support Epidemiological Surveillance Programs considering the difficulties found in confirm dengue cases based only on the clinical symptoms, especially during inter-epidemic periods. Currently, there are many commercial serological kits for dengue diagnosis, however its costs poses a financial burden for many developing countries. The dengue virus non- structural protein a (NS1) can be used as a marker during the acute phase of the illness and its use has been proposed for the disease diagnosis. Therefore, here we evaluated the sensitivity and specificity of three newly available NS1 antigen capture commercial kits with a panel of 852 samples from the collection of the Flavivirus Laboratory at the Oswaldo Cruz Institute, FIOCRUZ, from epidemics occurred from 1986 to 2008. Each kit was evaluated individually and the comparison among them was based on the analysis of a sub- population of 450 samples. From the three kits analyzed, the NS1Ag Strip (Biorad Laboratories) showed the highest sensitivity (89%, 197/220) in confirming dengue cases, followed by the PlateliaTM NS1 (Biorad Laboratories). The less sensitive one was the pan-E Early ELISA (PanBio Diagnostics) with a sensitivity of 72% (159/220). However, in this study the PanBio kit was the most specific (100%) while the two kits from BioRad showed both 99% of specificity. Primary dengue cases were more frequently confirmed than secondary ones. A higher sensitivity was observed in cases positive by virus isolation, when compared to cases positive by RT-PCR. The highest NS1 antigen detection was from the first to the fifth day after the onset of the symptoms. Cross reactivity were rarely observed in yellow fever vaccinees and rubella cases. The results showed that the three kits can be used in the early diagnosis of dengue infections.

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