Made available in DSpace on 2014-12-02T11:16:39Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-04-25Bitstream added on 2014-12-02T11:21:03Z : No. of bitstreams: 1 000774521_20150425.pdf: 591036 bytes, checksum: 68e51704330ca050817edd1af813d018 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-04-28T18:32:04Z: 000774521_20150425.pdf,Bitstream added on 2015-04-28T18:32:39Z : No. of bitstreams: 1 000774521.pdf: 8721514 bytes, checksum: 1e4d9f25e7af862c5c68fd21215a3975 (MD5) / A cana-de-açúcar é a principal cultura agrícola em importância econômica das regiões tropicais, sendo que o Brasil possui a maior área cultivada e em expansão do mundo. As variedades modernas são oriundas principalmente do cruzamento entre Saccharum officinarum e Saccharum spontaneum. Com o desenvolvimento tecnológico dos programas de melhoramento genético, muitas doenças antigas da cana-de-açúcar foram superadas através do desenvolvimento de genótipos resistente. Entretanto, no ano de 2009 o aparecimento da ferrugem alaranjada no estado de São Paulo causou grande prejuízo econômico, porque variedades com características de alta produtividade e resistência à ferrugem marrom, mostraram-se suscetíveis à ferrugem alaranjada. Diante disso, este trabalho teve por objetivo a caracterização micromolecular de genótipos de cana-de-açúcar resistentes e suscetíveis à ferrugem alaranjada, visando à identificação de marcadores moleculares de resistência a esse patógeno. Para isso, empregaram-se LC-DAD-MS e 1H NMR para obtenção de dados analíticos e métodos quimiométricos para análise multivariada. Para a etapa de caracterização, o extrato hidro-alcoólico preparado a partir de 500 mg das folhas de cana-de-açúcar foi fracionado em HPLC-DAD, fornecendo 60 frações que foram analisadas por LC-DAD-MS e 1H NMR. Esta etapa permitiu a identificação de 52 metabólitos, entre aminoácidos, açúcares, derivados do ácido benzoico, ácido hidroxicinâmico e flavonas C e O glicosiladas. Na segunda etapa foram avaliados os fingerprintings metabólicos dos genótipos resistentes (IAC95 5000) e suscetíveis (SP89 1115) empregando LC-DAD e submetidos a PCA. No primeiro planejamento experimental as mudas de ambos os genótipos com 30 dias foram transferidas para câmara de crescimento e mantidas a 25 ºC durante 30 dias. A PCA deste experimento mostrou que o genótipo resistente possui maior correlação com derivados de... / Sugarcane is the main agricultural crop in economic importance of tropical regions and Brazil has the largest cultivation acreage in the world. The modern varieties are arising mainly from the crossing of Saccharum officinarum X Saccharum spontaneum. With the technological development of breeding programs, many old diseases affecting sugarcane were overcome through the development of resistant genotypes. However, in 2009 the first appeareance of orange rust in São Paulo State led to huge economic loss, because varieties with characteristics of high yield and resistance to brown rust were susceptible to orange rust. Therefore, this study aimed the micromolecular characterization of the sugarcane genotypes resistant and susceptible to orange rust by employing LC-DAD-MS and 1H NMR as well as analysis of both genotype extracts by HPLC-DAD and multivariate analysis. For the characterization step, the extract prepared from 500 mg of sugarcane leaves employing H2O/MeOH (8:2) was fractioned in 60 fractions and analyzed by LC-DAD-MS and 1H NMR. This step allowed the identification of 52 metabolites, including amino acids, sugars, organic acids, such as benzoic and phenolic, and flavones, out of which 33 are described for the first time in sugarcane. On the second step, the genotypes IAC95 5000 (resistant) and SP89 1115 (susceptible) growing under control conditions and inoculated with Puccinia kuehnii were analyzed by HPLC-DAD e submitted to multivariate analysis by PCA. In the first experimental design, the seedlings of IAC95 5000 and SP89 1115 genotypes with 30 days were maintained in growth room at 25 ºC. The harvest was carried out on 30, 35, 40, 45 and 60 day old seedlings at 6 am and 8 pm. The PCA of this experiment showed that the resistant genotype has the highest correlation of with luteolin derivatives. In the second experimental design, 25 plants were inoculated and 25 were considered as control for each genotype. The seedlings were...

Made available in DSpace on 2015-01-26T13:21:23Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-03-19Bitstream added on 2015-01-26T13:30:33Z : No. of bitstreams: 1 000801215.pdf: 1256590 bytes, checksum: 6b6640ddc74c3a963e3cafecc5c39b87 (MD5) / O objetivo deste estudo foi avaliar comparativamente o efeito do bochecho diário com solução de digluconato de clorexidina à 0,12% (TA - controle) em relação à solução de 0,03% de triclosan, 1% copolímero (Gantrez® ) e 0,05% de fluoreto de Sódio (TB - teste) em função da taxa de formação de placa dentária, retenção do antimicrobiano na placa dentária e saliva e redução de estreptococos do grupo mutans na saliva. Material e Método: Participaram deste estudo clínico randomizado, cruzado, com duplo cegamento e dois períodos de tratamento, 26 voluntários de ambos os gêneros e idade entre 18 e 30 anos (média de 24 anos), divididos em 2 grupo: G1(n=13) e G2 (n=13). Em cada período de tratamento os participantes realizaram 2 bochechos diários de 60 segundos cada, um ao se levantar e outro doze horas após, por sete dias. Resultado: A redução do índice de placa foi muito semelhante em ambos os grupos, já a análise por cromatografia líquida de alta eficiência não evidenciou traços dos antimicrobianos após 12 horas do uso dos enxaguatórios por 1 e 7 dias na placa dentária nem na saliva. A ação antimicrobiana evidenciou efeito estatisticamente significativo para tratamento (antes e após bochecho) com agente antimicrobiano (clorexidina e triclosan). A clorexidina foi mais eficaz que o triclosan (22,8% e 8,9% de redução, respectivamente). Conclusão: 1) Tanto o triclosan quanto a clorexidina, mostraram-se eficazes na redução da placa dentária dos voluntários. 2) Nenhum dos antimicrobianos permanecem na cavidade bucal após 12 horas do uso. 3) O uso de enxaguatórios bucais com clorexidina e triclosan, complementa o controle mecânico da placa dentária por sua eficaz ação antimicrobiana sobre os estreptococos do grupo mutans, reduzindo o risco de cárie dos pacientes. / The aim of this study was to comparatively evaluate the effect of daily rinsing with a solution of chlorhexidine digluconate 0,12% (TA- control) with the solution 0,03% triclosan + 1% copolymer (Gantrez ® ) + sodium fluoride 0,05% (TB- test) according of the rate of dental plaque formation, retention of antimicrobial agent in dental plaque and saliva by high performance liquid chromatography and reduction on mutans streptococci in saliva .Material and Method: In this randomized clinical study, crossover, double blinding with two treatment periods, 26 volunteers of both genders with between 18-30 years ( average 24 years), was divide into 2 groups: G1 (n=13) and G2 (n=13). In each treatment period the volunteers realized two daily mouthwashes of 60 seconds each, the first to get up and other twelve hours later, for 7 days. Results: The reduction of rate of dental plaque formation was same in bouth groups; high performance liquid chromatography analysis wasn’t show trace of antimicrobial after 12 hours use of mouthwashes by 1 or 7 days in dental plaque or in saliva .The antimicrobial action showed statistically significant effect for treatment (before and after rinsing) with antimicrobial agent (chlorhexidine x triclosan). The chlorexidine digluconate was more effective than triclosan (22,8% and 8,9 decrease, respectively). Conclusion: 1) As far as triclosan, chlorhexidine, were effective in reducing dental plaque volunteers. 2) None of the antimicrobial agents remain in the oral cavity after 12 hours of use. 3) The use of mouthwashes containing chlorhexidine and triclosan, complements the mechanical control of dental plaque for their effective antimicrobial action on mutans streptococci, reducing caries risk patients.

La presente tesis contempla el estudio electroquímico y cromatográfico de la interacción de estrona con β-ciclodextrina (β-CD) y sulfobutileter-βciclodextrina (SBE-β-CD) en solución. El estudio se efectuó en un medio mixto haciendo uso de técnicas electroquímicas como voltametría de pulso diferencial (VPD) y voltametría cíclica y técnicas cromatográficas como cromatografía líquida de alta eficiencia (HPLC). La estrona presentó una respuesta anódica correspondiente a su oxidación electroquímica en medio mixto (EtOH:Buffer fosfato 0,1M / 25:75) con la transferencia de 2 electrones. La intensidad de corriente disminuyó a medida que aumentó la concentración de las ciclodextrinas (CDs) lo que evidenció la formación de un complejo de inclusión. La variación de la corriente asociada a la concentración de las CDs permitió obtener las constantes de formación del complejo de inclusión y obtener los parámetros termodinámicos que dan cuenta de las interacciones entre estrona y las dos ciclodextrinas utilizadas en este estudio. La formación del complejo de inclusión también se evidenció en los resultados obtenidos mediante HPLC, los que mostraron una disminución del tiempo de retención de la estrona a medida que aumentó la concentración de βCD en la fase móvil. Esto es debido a la formación de un complejo de inclusión entre la ciclodextrina y el analito que está siendo cromatografiado. Las variaciones observadas en el tiempo de retención fueron utilizadas para calcular la constante de formación del complejo de inclusión y obtener parámetros termodinámicos de formación. La estrona mostró una menor afinidad por la β-CD, lo que se refleja en los valores inferiores de constante de formación en comparación con la SBE-βCD. Para el complejo de inclusión de estrona con β –CD, los parámetros indicaron que la contribución principal a la formación del complejo se debe a las interacciones de tipo van der Waals. En el caso de estrona con SBE-β-CD, es probable que exista una mayor contribución de interacciones de tipo hidrofóbicas. Sin embargo, el análisis es más complejo debido a que no se observa un efecto claro de la temperatura en la constante de formación de este complejo de inclusión.

No description available.

El ciclo de carbono en un bosque tropical se completa por la labor de descomposición que llevan a cabo los organismos detritívoros en el suelo del bosque. Estos actúan sobre el mantillo de hojas, ramas y troncos que se acumulan en el suelo. Dependiendo de la composición del bosque, estas tasas varían, y algunos de los factores determinantes más importantes para ver cuánto demora este proceso son el contenido de fenólicos totales, la proporción de carbono-nitrógeno y los tipos de lignina presentes. Se han realizado numerosos estudios sobre las tasas de desaparición de biomasa y análisis simples de contenidos de distintos indicadores en mantillo pero la dinámica de estos procesos de degradación, así como los principales componentes e intermediarios de la misma, aún están en proceso de caracterización. Un buen entendimiento del balance de carbono en todo el sistema es crítico para poder determinar su papel en el cambio climático, ya sea como amortiguadora del mismo, o agravando el problema. En particular, para poder realizar esto, es necesario cuantificar los flujos dominantes de salida y entrada de los grandes almacenes de carbono y el control ambiental de estos flujos. Estos esfuerzos en las diferentes determinaciones dependen, principalmente, de modelos predictivos para lo cual, a su vez, se necesitan estimaciones adecuadas de los principales procesos biológicos del ciclo de carbono como son: la absorción de carbono por fotosíntesis, el crecimiento de las plantas y la degradación de las mismas. Es por ello que este trabajo de investigación tuvo como fin, mediante técnicas analíticas, caracterizar la descomposición de mantillo en bosque evaluando los diferentes marcadores de degradación y ver cómo estos cambian en el tiempo durante el proceso de descomposición. Es así que se estudió la descomposición de dos especies arbóreas de alta importancia biológica: Calophyllum brasiliense Cambess y Bixa arborea Huber mediante la técnica de bolsas de descomposición. Estas fueron dejadas en el suelo del bosque de la Reserva Nacional Tambopata y recolectadas en períodos definidos para luego analizar el contenido de fósforo, calcio, polifenoles totales, taninos condensados, celulosa, hemicelulosa, lignina, carbono y nitrógeno y ver la correlación de cada parámetro con la velocidad de degradación del material vegetal. Se encontraron diferencias significativas en la química de ambas especies, así como en las constantes de descomposición. Se espera que estos resultados puedan ser utilizados en futuras investigaciones y modelos de flujo de carbono en bosques para así tener un mejor entendimiento del balance de carbono y nitrógeno y su papel en el cambio climático. / Tesis

Orientador: Mary Rosa Rodrigues de Marchi / Banca: Manoel Lima de Menezes / Banca: Magali Conceição Monteiro da Silva / Resumo: Este trabalho objetivou otimizar e validar método para determinação de hidrocarbonetos policíclicos aromáticos (HPAs) em rapadura. Foram estudados os 17 HPAs considerados como contaminantes prioritários pela agência americana NIOSH (National Institute of Occupational Safety and Health). As figuras de mérito estudadas na otimização da resposta do sistema cromatográfico foram: fator de retenção (k'), seletividade (") e número de pratos teóricos (N) através de variáveis como: composição da fase móvel, tipo de fase móvel e estacionária e vazão da fase móvel. O sistema de detecção fluorescente foi otimizado para a melhor resposta dos analitos de interesse. As condições otimizadas para o sistema de HPLC-Fluorescência incluem: coluna Supelcosil LC PAH (250 mm x 4,6 mm x 5 æm), sistema eluente acetonitrila/água, gradiente de 60% (5min) a 100% acetonitrila em 20 minutos (15 min), e 60% de acetonitrila (2 min). Os comprimentos de onda de excitação e de emissão utilizados foram : 220/320nm (0-10 min), 240/398 nm (10,01-32,5 min) e 300/498 (32,51 - 35 min). No preparo da amostra de rapadura foram otimizados diversos parâmetros como: razão massa/volume, tempo e número de extrações no sistema de ultra-som e melhor solvente extrator. Utilizando-se as condições analíticas otimizadas, foram determinados os limites de detecção e quantificação do método cromatográfico, de acordo com a IUPAC (International Union of Pure and Applied Chemistry). O método otimizado e validado foi aplicado a amostras de rapadura comercializadas em Araraquara(SP) e Natal (RN). Não foi encontrado benzo(a)pireno em nenhuma das amostras, sendo possível quantificar pireno, fenantreno e fluoranteno em todas as amostras. O total de HPas variou entre 0,97 e 1,56 æg.Kg-1. / Abstract: This work aimed to optimize and validate an analytical method for polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) quantification in rapadura (sugar cane candy) and applied the method to rapadura samples marked in Araraquara (SP) and Natal (RN). It was investigated seventeen PAHs considered priorytary contaminants by American institutions on NIOSH (National Institute of Occupational Safety and Health). In the optimization of the chromatographic response was studied: factor of retention (k'), selectivity (") and theoretical plate number (N). Variables as composition of the mobile phase, type of mobile and stationary phase and flow of the mobile phase was optimized. The fluorescent detection system was optimized for the best detection of the compounds of interest. Optimized chromatographic conditions (HPLC/Flu) include: column Supelcosil LC PAH (250 mm x 4, 6 mm x 5 æm), elution with acetonitrile/water, gradient of 60% (5min) the 100% acetonitrile in 20 minutes (15 min), and 60% of acetonitrile (2 min). The wave lengths of used excitation and emission were: 220/320nm (0-10 min), 240/398 nm (10, 01-32, 5 min) and 300/498 (32.51 - 35 min). In the treatment of the sample several parameters were optimized as: ratio mass/volume, time and number of extractions in ultrasonic bath and better solvent extractor. Using the optimized analytical conditions, it can be determined the limits of quantification and detention of the chromatographic method, in accordance with the IUPAC (International Union of Pure and Applied Chemistry). Rapadura samples from Araraquara(SP) and Natal(RN) were analysed. Benzo(a)pyrene was not found in none sample. It as possible quantify pyrene, phenantrene and fluoranthene in all samples. The total PAHs ranged from 0,97 to 1,56 æg Kg-1. / Mestre

Memoria para optar al Titulo Profesional de: Ingeniero Agrónomo Mención: Enología y Vitivinicultura / Dentro de las primeras operaciones realizadas en la elaboración de vinos, se encuentran la cosecha y la maceración prefermentativa. Estas labores están dentro de aquellas que proporcionarán el máximo potencial del producto final. Es por esto que esta investigación se enfoca en resolver la problemática asociada a la toma de decisiones relacionadas con estas labores claves en la producción de vinos y su impacto sobre su calidad final. Los objetivos del presente estudio fueron describir física y químicamente mostos del cv. Sauvignon Blanc obtenidos de bayas cosechadas de forma mecánica y manual, además del efecto de la maceración prefermentativa sobre la composición del mismo. El estudio se realizó con mosto obtenido de bayas cosechadas en la viña Veramonte, ubicada en el valle de Casablanca, Región de Valparaíso, Chile. Durante el programa de prensado se tomó una muestra en cada etapa de éste, con el fin de observar la evolución del mosto a medida que se aumenta la presión sobre las bayas. Las muestras fueron sometidas a análisis de acidez total, pH, sólidos solubles, SO 2 libre y total, taninos totales, fenoles totales, intensidad colorante, y pardeamiento. Además se cuantificaron compuestos fenólicos de bajo peso molecular a través de Cromatografía Líquida de Alta Eficacia (HPLC). Si bien se encontraron diferencias entre los tratamientos referidos al tipo de cosecha, éstas no fueron determinantes como podría suponerse, esto debido a lo severo de la cosecha mecanizada; es decir, a pesar de que la cosecha manual entrega mostos con una acidez relativamente superior y con un pardeamiento menor al momento de analizarlo en la etapa de escurrido, no es posible afirmar con certeza que la cosecha mecánica genere mostos y por consecuencia vinos de una calidad enológica menor. En cuanto a los resultados del ensayo de maceración prefermentativa, los mostos provenientes de ésta presentaron como característica una disminución en la acidez y un aumento relativo en el pardeamiento. Sin embargo, obtiene valores superiores en cuanto a extracción de compuestos fenólicos, lo que genera beneficios al momento de elaborar vinos con una mayor complejidad sensorial, no obstante aumenta el riesgo de obtener oxidaciones no deseadas.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:04Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-02-24Bitstream added on 2014-06-13T19:15:57Z : No. of bitstreams: 1 alessio_pv_me_arafcf.pdf: 939351 bytes, checksum: ad67a335d2dd7e27f36d8fb9b1fe0940 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / A ceftriaxona sódica é um agente antimicrobiano β-lactâmico de uso parenteral, pertencente ao grupo das cefalosporinas de terceira geração. Foi produzida pelo Laboratório Roche, Suíça, sob a sigla RO 13-9904. Possui maior atividade contra bacilos Gram–negativos aeróbios e é utilizada no tratamento de escolha de meningite causada por bactérias Gram–negativas e outras multi-resistentes da família Enterobacteraceae, não é absorvida por via oral, apresenta meia-vida de 7-8 horas e pode ser injetada a cada 24 horas. A ceftriaxona sódica, assim como outras cefalosporinas, age inibindo a síntese de parede celular bacteriana é altamente estável à maioria das β-lactamases, tanto cefalosporinases quanto penicilinases destes micro-organismos. Apesar de ser uma substância altamente estudada e pesquisada com relação à sua atividade antimicrobiana, farmacocinética, farmacodinânica, estabilidade, métodos analíticos em fluidos biológicos, há poucos estudos na literatura em relação ao desenvolvimento de metodologia analítica para quantificação desta cefalosporina, pó para preparação injetável. Neste trabalho foram desenvolvidos métodos para análise qualitativa e quantitativa do pó de ceftriaxona sódica para preparações injetáveis. Para análise qualitativa estudaram-se os métodos por espectrofotometria nas regiões do infravermelho e ultravioleta, e cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), possibilitando a identificação da amostra. Para quantificação do fármaco em preparação injetável validaram-se os métodos: (1) espectrofotometria na região do UV a 241 nm com faixa de concentração 10,0 a 20,0 µg/mL, utilizando água como solvente, com exatidão de 101,28% e teor de 100,38%; (2) doseamento... / Ceftriaxone sodium is a β-lactam antimicrobial agent for parenteral use, belonging to the group of third-generation cephalosporins. It was produced by Roche, Switzerland, under the code RO 13-9904. It has greater activity against Gram-negative aerobic and is used in the treatment of choice for meningitis caused by Gram-negative bacteria and other multi-resistant Enterobacteraceae family, is not absorbed orally, has a half-life of 7-8 hours and can be injected every 24 hours. Ceftriaxone sodium, such as other cephalosporins, acts by inhibiting cell wall synthesis is highly stable to most β-lactamases, both penicillinase and cephalosporinases from these microorganisms. Despite being a substance is highly studied and researched in relation to its antimicrobial activity, pharmacokinetics, pharmacodinamics, stability, analytical methods in biological fluids, there are few studies in the literature regarding the development of analytical methodology for this order cephalosporins analysis time, cost, feasibility and ease of implementation of the method. In this work we developed methods for qualitative and quantitative analysis for ceftriaxone sodium. For qualitative analysis spectrophotometry in the infrared and ultraviolet regions and high performance liquid chromatography (HPLC) were studied to enabling the identification of the sample. Three methods were validated to quantitative ceftriaxone sodium: (1) UV spectrophotometry at 241 nm with a concentration range from 10.0 to 20.0 µg/mL using water as solvent, with an accuracy of 101.28% and content of 100.38%, (2) microbiological assay, agar diffusion method in the concentration... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Prof. Dr. Marcello Iacomini / Co-orientador: Dr. Lauro Mera de Souza / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Bioquímica. Defesa: Curitiba, 16/10/2011 / Inclui referências / Resumo: A Camellia sinensis e uma especie de planta cujas folhas sao utilizadas amplamente na obtencao de infusoes popularmente conhecidas como ¡§cha¡¨, sendo o mais conhecido o ¡§cha verde¡¨. Existem varios tipos de chas obtidos de C. sinensis, a principal diferenca entre eles esta baseada no processo de auto-oxidacao catalisado pelas enzimas polifenol-oxidase e peroxidase. Assim, os chas sao classificados em nao oxidados (cha verde e branco), semi-oxidado (cha oolong), oxidado (cha preto) e pos-fermentado (cha pu-erh). No presente trabalho foram avaliados os polissacarideos presentes no extrato aquoso dos chas verde e preto, assim como os compostos de baixa massa molecular presentes no extrato hidroalcoolico dos mesmos. Para o cha verde, apos processo de fracionamento por congelamento e degelo, as analises de composicao monossacaridica, HPSEC-MALLS e espectroscopia de RMN, indicaram a presenca de acido poligalacturonico com ligacoes 1„_4, alem da presenca de uma arabinogalactana. O polissacarideo extraido do cha preto apresentou tambem arabinose, galactose e acido galacturonico como componentes majoritarios, sugerindo a presenca de uma estrutura pectica e de uma arabinogalactana do tipo II. Os polissacarideos foram testados quanto as suas atividades antissepse, onde apresentaram discreta reducao da letalidade de camundongos, e uma diminuicao da atividade das enzimas mieloperoxidades, confirmando um efeito positivo desses polissacarideos na sepse. Tambem sao apresentadas neste trabalho duas metodologias desenvolvidas para alcancar uma analise detalhada dos extratos hidroalcoolicos do cha verde e preto. Na primeira etapa, os extratos foram fracionados em agua, n-butanol, acetato de etila e cloroformio para separar os compostos de acordo com sua polaridade, rendendo amostras menos complexas para serem analisadas na cromatografia liquida de ultra alta performance acoplada ao espectrometro de massas (UHPLC-MS). Adicionalmente, uma tecnica bidimensional abrangente da cromatografia liquida (2D-LC) que emprega a cromatografia da exclusao por tamanho (SEC) x fase reversa (C18) foi desenvolvida. Os seguintes compostos foram identificados (com base no tempo de retencao, espectros de UV, fragmentacao por MS e comparacao com padroes e literatura): catequinas; teaflavinas e seus derivados galatos; caempferol, quercetina e miricetina mono, di-, tri e tetraglicosideos; esteres do acido quinico, acido galico e acidos hidroxicinamicos; alcaloides de purina, tais como a cafeina e a teobromina, alem de lipideos. Adicionalmente, foram encontrados compostos pela primeira vez relatados em C.sinensis, como isomeros de diversas saponinas ja conhecidas e quatro glicosideos de miricetina, quercetina e caempferol, contendo esteres de acido galico. Os extratos hidroalcoolicos tambem foram submetidos a avaliacao de sua atividade gastroprotetora, sendo que estes reduziram significativamente a ocorrencia de lesao gastrica induzida por etanol. / Abstract: The Camellia sinensis is a species of plant whose leaves are widely used in infusions popularly known as "tea", such as ¡§green tea¡¨. There are many types of tea from C. sinensis, their difference is based on the process of auto-oxidation catalyzed by the enzymes polyphenoloxidase and peroxidase, so they are classified in non-oxidized (green and white tea), semi-oxidized (oolong tea), oxidized (black tea) and post-fermented (pu-erh tea). In the present study we evaluated the polysacharides present in the aqueous extract of green and black teas, as well as low molecular weight compounds present in hydro-alcoholic extract of same. In green tea, after fractionation process by freezing-thawing, monosaccharide composition, HPSEC-MALLS and NMR analyses, the presence of a galacturonic acid 1„_4 linked, as well as an arabingalactan were confirmed. Similarly, the polysaccharides from black tea also contained arabinose, galactose and galacturonic acid as the main components, suggesting a pectic structure and arabingalactan. The polysacharides were tested for their anti sepsis activity, which showed a discreet reduction of the mortality of mice, and a decrease in activity of the enzymes mieloperoxidades, that confirms the positive effect of the polysacharides in the sepsis process. Also, it were described two methodologies aiming to achieve a comprehensive analysis of hydro-alcoholic extracts of C. sinensis. In the first one, the extracts were partitioned in water, n-buthanol, ethyl acetate and chloroform for fractionating compounds according to their polarity, yielding less complex samples to be analyzed by ultra high performance liquid chromatography coupled with mass spectrometry (UHPLC-MS). Additionally, a comprehensive bidimensional liquid chromatography (2D-LC) employing size exclusion chromatography (SEC) x reversed phase (C18) was developed. Based on their retention time, UV-spectra, MS-fragmentation profile and by comparison with literature, the following compounds were identified: catechins; theaflavins and their gallate derivatives; mono-, di-, tri- and tetraglycosides of kaempferol, quercetin and myricetin; esters from quinic, gallic and hydroxycinnamic acids; purine alkaloids, such as caffeine and theobromine, and so lipids. Additionally, unreported compounds in C.sinensis were now found, such as isomers of many known saponins and esters of gallic acid of four glycosides of myricetin, quercetin and kaempferol. The hydro-alcoholic extracts were also subjected to evaluation of their gastroprotective activity, and these have significantly reduced the occurrence of gastric lesions induced by ethanol treatment.

Submitted by Naira Buzzo Anhesine null (nbanhesine@hotmail.com) on 2018-03-16T20:58:37Z No. of bitstreams: 1 Dissertação de Mestrado_Naira Anhesine_VERSÃO FINAL.pdf: 14436445 bytes, checksum: f33c3d0298d9a260445f47abae8dcef1 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Carolina Gonçalves Bet null (abet@iq.unesp.br) on 2018-03-21T17:22:11Z (GMT) No. of bitstreams: 1 anhesine_nb_me_araiq_int.pdf: 12655628 bytes, checksum: 2d97859506140c833897e11b85dd720b (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-21T17:22:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 anhesine_nb_me_araiq_int.pdf: 12655628 bytes, checksum: 2d97859506140c833897e11b85dd720b (MD5) Previous issue date: 2018-03-09 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O gênero Erythrina (Fabaceae) é amplamente conhecido pela forte presença de alcaloides eritrínicos, os quais são uma classe de metabólitos secundários descritos como marcadores quimiotaxonômicos do gênero. Estes alcaloides também são responsáveis por uma série de atividades biológicas relacionadas ao tratamento de desordens como insônia, ansiedade, depressão e epilepsia, dentre outras ações no Sistema Nervoso Central, tornando as espécies deste gênero potenciais drogas vegetais para o desenvolvimento de fitoterápicos. A eficácia de tais medicamentos só é possível se houver controle de qualidade rigoroso de todo o processo produtivo para garantir segurança toxicológica e constância na ação terapêutica, os quais são requisitos fundamentais exigidos para os medicamentos modernos. Um dos meios utilizados para tal fim é o perfil cromatográfico (fingerprint), o qual é indicado pela Farmacopeia Chinesa como um método potencial e mais confiável para o controle de qualidade de misturas complexas, como plantas medicinais. Neste contexto, o intuito deste trabalho é desenvolver método por UPLC-DAD-MS para obtenção de perfil cromatográfico dos extratos hidroalcoolicos de três espécies de Erythrina: E. verna, E. falcata e E. dominguezii, amplamente citadas em compêndios de medicina popular. Por apresentarem mesmo nome popular, mulungu, o controle de qualidade das espécies deste gênero faz-se necessário já que apresentam composições químicas diferentes. A abordagem empregada neste trabalho foi o preparo de uma amostra representativa e complexa (MIX) contendo as três espécies em estudo e seus quatro órgãos selecionados (folhas, cascas, flores e frutos) para que o método desenvolvido pudesse abranger todos eles. Contrariamente à metodologia tradicional e demorada utilizada para o desenvolvimento de método cromatográfico, empregou-se o software Fusion Method Development da S-Matrix® o qual maneja estatística complexa e modelos matemáticos possibilitando o desenvolvimento de método de forma rápida e eficaz. Através de suas quatro etapas (triagem, otimização, simulação de robustez e ajuste fino) foi possível determinar as variáveis cromatográficas mais influentes bem como obter um método cromatográfico em um curto período de tempo. Através das análises quimiométricas (PCA e OPLS-DA) foi possível observar que os órgãos e as espécies são diferentes entre si sendo que os alcaloides eritrinicos são os marcadores responsáveis pela diferenciação entre eles. Dessa forma, o controle de qualidade das espécies deste gênero, através de perfil cromatográfico, é necessário visto que apresentam composições químicas diferentes. Adicionalmente, visando obter padrões fitoquímicos para análises quantitativas, foram isoladas três substâncias do extrato da casca de E. dominguezii, sendo uma delas um flavonoide glicosilado identificado como vicenina-2, enquanto as outras duas, isoladas de uma fração supostamente constituida por alcaloides, são inéditas, pertencendo a uma classe nova de metabólitos secundários e não são alcaloides. Para tais estruturas, serão realizadas análises cristalográficas para confirmação estrutural. / The genus Erythrina (Fabaceae) is widely known for the strong presence of alkaloids, which are a class of secondary metabolites described as chemotaxonomic markers of the genus. These alkaloids are also responsible for a number of biological activities related to the treatment of disorders such as insomnia, anxiety, depression and epilepsy, among other actions in the Central Nervous System, making the species of this genus potential plant drugs for the development of herbal medicines. The efficacy of such drugs is only possible if there is strict quality control of the entire production process to ensure toxicological safety and consistency in therapeutic action, which are fundamental requirements for modern medicines. One of the means used for this purpose is the fingerprint, which is indicated by the Chinese Pharmacopoeia as a potential and more reliable method for quality control of complex mixtures, such as medicinal plants. In this context, the aim of this work is to develop a method by UPLC-DAD-MS to obtain a chromatographic profile of the hydroalcoholic extracts of three species of Erythrina: E. verna, E. falcata and E. dominguezii, widely cited in compendia of popular medicine. Because they present the same popular name, mulungu, the quality control of the species of this genus is necessary since they present different chemical compositions. The approach used in this work was the preparation of a representative and complex sample (MIX) containing the three species under study and its four selected organs (leaves,stem barks, flowers and fruits) so that the developed method could cover all of them. Contrary to the traditional and timeconsuming methodology used for the development of a chromatographic method, Fusion Method Development, software designed by S-Matrix®, was used, which handles complex statistics and mathematical models, making it possible to develop a method quickly and efficiently. It was possible to determine the most influential chromatographic variables as well as to obtain a chromatographic method in a short period of time through its four steps (screening, optimization, robustness simulation and fine tuning). Through the chemometric analysis (PCA and OPLS-DA) it was possible to observe that the organs and the species are different from each other and that the erythrin alkaloids are the markers responsible for the differentiation between them. In this way, the quality control of the species of this genus, through a chromatographic profile, is necessary since they have different chemical compositions. Additionally, in order to obtain phytochemical standards for quantitative analysis, three substances of the E. dominguezii stem bark extract were isolated, one of them being a glycosylated flavonoid identified as vicenin-2, while the other two, isolated from a fraction supposedly constituted by alkaloids, are unpublished, belonging to a new class of secondary metabolites and are not alkaloids. For such structures, crystallographic analyzes will be performed for structural confirmation. / 16/09235-9