Orientador: Edésio Luiz Simionatto. / Dissertação (Mestrado em Química) - Programa de Pós-Graduação em Química, Centro de Ciências Exatas e Naturais, Universidade Regional de Blumenau, Blumenau.

Os anticonvulsivantes são fármacos bastante utilizados no tratamento da epilepsia. Todavia, sua periculosidade é elevada, visto que há uma grande proximidade entre a faixa terapêutica e a dose tóxica. Assim sendo, a avaliação do perfil cinético dessa classe de substâncias é imprescindível. Entretanto, analisar substâncias em fluidos biológicos não é uma tarefa trivial visto que os analitos estão imersos em matrizes complexas, sendo necessária uma preparação da amostra para retirada de interferentes. Uma opção interessante para realizar extrações diretas é trabalhar com materiais que possuam a capacidade de reter compostos de baixo peso molecular e ao mesmo tempo excluírem proteínas da amostra, como é o caso dos nanotubos de carbono de acesso restrito (RACNTs). Neste trabalho, foi realizada a síntese dos RACNTs por meio do recobrimento dos CNTs comercial com albumina de soro bovino (BSA) para posteriormente utilizá-los como adsorventes (coluna extratora) em um sistema de Cromatografia Líquida multidimensional em modo column switching, para análise direta de fenobarbital, carbamazepina e primidona em plasma sanguíneo humano. Os modelos de quimissorção e Sips foram os que melhores se ajustaram aos dados experimentais nos estudos cinéticos e de equilíbrio, respectivamente. A análise dos cromatogramas obtidos permitiu identificar todos os compostos de interesse devido aos bons valores obtidos de resolução de pico. A faixa analítica testada foi de 2 e 40 µg mL-¹ (R² > 0,99). O limite de quantificação foi de 2 µg mL-¹ para todos os fármacos, ao passo que o limite de detecção assumiu um valor igual a 0,1 µg mL-¹. Com relação à precisão (intra e intercorrida) e exatidão (intra e intercorrida) os analitos apresentaram valores inferiores a 15% e entre -15 e 15%, respectivamente. O método proposto mostrou-se eficiente na extração e separação de fármacos anticonvulsivantes em amostras reais, o que sinaliza sua possível utilização na monitorização terapêutica. / Anticonvulsivant are drugs often used in the treatment of the epilepsy. However, their danger is high, whereas there is a close proximity between the therapeutic range with the toxic dose. Therefore, the evaluation of the kinetic profile of this class of drugs is essential. But, analyze substances in biological fluids is not a trivial task because the analytes are immersed in complex matrices, making it necessary to sample preparation for removal of interfering. An interesting option to make direct extractions is to work with materials that having the capacity to retain low molecular weight while excluding the sample proteins, such as the restricted access carbon nanotubes (RACNTs). In this work, was made the synthesis of RACNTs by recoating of CNTs commercial with bovine serum albumin (BSA) to subsequently use them as adsorbents (extraction column) in a multidimensional Liquid Chromatography system in column switching mode for direct analysis of phenobarbital, carbamazepine and primidone from human blood plasma. The models of chemisorption and Sips were the best fitted to the experimental data in kinetic studies and equilibrium, respectively. It was possible to identify all compounds of interest in the obtained chromatograms, due to the good values of peak resolution. The analytical curve ranges from 2 to 40 mg L-¹ (R² > 0.99) for all the analytes. The limit of quantitation was of 2 mg L-¹ for all drugs, while the limit of detection assumed values equal to 0.1 µg mL-¹. Concerning precision (within and between-day) and accuracy (within and between-day) the analytes presented values less that 15% and between -15 and 15%, respectively. Additionally, the proposed method was efficient in the extraction and separation of anticonvulsivants drugs from real samples, being possible its use in therapy monitoring.

Reprodução eletrostatica / Orientador: Kenneth Elmer Collins / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Química / Made available in DSpace on 2018-07-13T20:07:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bonato_PierinaSueli_M.pdf: 7050074 bytes, checksum: 63f44a8be92aa065780bd1dd3d72de81 (MD5) Previous issue date: 1983 / Resumo: A captura de um nêutron pelo núcleo do átomo de bromo, na molécula de CBr4, tem como resultado a quebra de ligações C-Br, devido ao recuo do átomo alvo relacionado com a emissão de fótons gama, ou devldo a Explosão Coulômbica ocasionada pela forte repu!são eletrostática dos íons positivos formados no processo Auger. A reformação de ligações pode dar origem a vários produtos marcados com radiobromo, como C*Br4, C2*Br4, C2*Br6 e *Br2. Na literatura, são usados vários métodos para a separação destas espécies marcadas e os resultados da distribuição de radiobromo nos produtos obtidos, são diferentes em cada um dos trabalhos. O uso de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência tornou possível a separação destas espécies marcadas com radiobromo, para a determinação da distribuição de radioatividade em cada uma delas, bem como verificar a influência de certos fatores sobre estes vaIores . Os valores de rendimento de 95,0% para C*Br4, 3,2% para C2*Br6, 0,2% para C2* Br4 e 1,6% para com um tempo de irradiação de dez minutos, modificaram-se quando este tempo de irradiação ou o tamanho dos cristais irradiados foram alterados. Os resultados alcançados por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência foram comparados com aqueles obtidos usando extração por solventes e evaporação do solvente bromo, como métodos de separação das espécies marcadas. Observou-se no primeiro caso, um aumento no rendimento inorgânico de acordo com o aumento das concentrações de sulfito na fase aquosa, e no segundo caso, uma perda de C*Br4 por volatilização. Estas observações, bem como aqueIas relacionadas com os efeitos da dose de irradiação e tamanho dos cristais irradiados, explicam as dlscrepâncias encontradas na literatura / Abstract: Neutron capture by the nucleus of a bromine atom in a CBr4 molecule results in the breaking af one or more C-Br bonds. This is due to the recoil of the target atom as a result of gamma-ray emission in the excitation of the activated bromine nucleus or to "Coulombic Explosion" caused by the multiple ionization which accompanies the Auger process. Bond reformation can rise to several radiobromine labelled compounds, such as C*Br4, C2*Br4, C2*Br6 and *Br2. The results described in the literature for the distribution of radiobromine among the product species have shown considerable disagreement for solid targets of CBr4. Use of High Performance Liquid Chromatography has made possible the separation of these radiobromine-labelled species and the subsequent determination of radioactivity distribution among these species and to investigate the influence of experimental parameters on these values. Yield values of 95,0% for C*Br4, 3,2% for C2*Br6, 0,2% for C2*Br4 and 1,6% for *Br2 with a irradiation time of ten minutes, are changed when this irradiation time or size of the irradiated crystals is alterated. The results obtained by High Performance Liquid Chromatography have been compared with those obtained by means of the solvent extraction and bromine solvent evaporation. In the first case, an increase is observed in the inorganic yield when the sulfite concentration in the water extraction phase is increased. In the second case, C*Br4 is lost by volatilization during the bromine evaporation. These observations, along with those on the effects of irradiation dose and crystal size, expIain discrepancies found in the liteterature / Mestrado / Quimica Analitica / Mestre em Química

El ácido ursólico es un triterpeno pentacíclico que pertenece al grupo de los terpenoides y debido a sus diversas actividades farmacológicas, relacionadas con sus efectos hepatoprotectores, anti-oxidante, anti-inflamatorio y antitumoral, es objeto de un gran interés científico. Esta investigación tuvo como finalidad obtener ácido ursólico de alta pureza de una manera fácil, rápida y económica a partir de la especie clinopodium revolutum conocida comercialmente como flor de arena. El proceso comenzó con la obtención del extracto de las hojas secas, a partir de ello se aisló ácido ursólico y se usó la técnica de recristalización para la separación y purificación. Finalmente se realizó análisis espectroscópicos de IR y RMN mono y bidimensional para caracterizar la molécula. Mediante la técnica de UPLC se determinó el contenido total y el porcentaje de pureza. Entre los resultados más importantes del estudio se determinó que dicha especie es la que presenta mayor cantidad (4,864 %) de ácido ursólico entre las especies de la familia Lamiaceae. Entre las conclusiones se destaca que dicha planta medicinal Clinopodium revolutum conocida y comercializada con el nombre de flor de arena o té indio endémica del Perú, cultivada principalmente en las regiones de Huánuco y Cajamarca, resultó ser una importante biofuente de ácido ursólico, no solo por su alto contenido sino también por los métodos fáciles, económicos y reproducibles con las que se logró obtener cristales de ácido ursólico puro mediante la técnica de recristalización. / Ursolic acid is a pentacyclic triterpene that belongs to the group of terpenoids and for its variety of pharmacological activities, related to their hepatoprotective effects, anti-oxidant, anti-inflammatory and anti-metastasis, is a subject of great scientific interest. This research aimed to obtain high purity ursolic acid in an easy, fast and economical way from the Clinopodium revolutum species known commercially as flor de arena. The process began with obtaining the extract of the dried leaves, from which ursolic acid was isolated using and the recrystallization technique was used for separation and purification. Finally we performed spectroscopic analyzes of IR and mono and twodimensional NMR to characterize the molecule. The total content and percentage of purity were determined by the UPLC technique. Among the most important results of the study, it was determined that this species is the one with the highest amount (4.864%) of ursolic acid among species of the Lamiaceae family. Among the conclusions, it is noted that this medicinal plant known as Clinopodium revolutum and marketed under the name of flor de arena or té indio endemic of Peru, grown mainly in the regions of Huánuco and Cajamarca, proved to be an important biofuente of ursolic acid, not only for its high content but also by the easy, economical and reproducible methods with which crystals of pure ursolic acid were obtained by the recrystallization technique. / Tesis

Orientador: Felix Guillermo Reyes Reyes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-09-11T20:56:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lobato_Veronica_D.pdf: 19424184 bytes, checksum: fdb61d7d5f390118b2f0330dc933bb34 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: Foi validado um método para o monitoramento de ivermectina em leite destinado ao consumo humano, utilizando cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) com detector de fluorescência. Após separação da ivermectina da matriz, por extração líquido-líquido, e etapas de purificação do extrato, a mesma foi derivatizada com 1-metilimidazol em meio de N,N-dimetilformamida para a formação de derivado fluorescente, o qual foi determinado por CLAE em fase reversa C18,fase móvel metanol:água (96:4 v/v) e fluxo de 0,7 mL/min. Os sinais de excitação e emissão do detector de fIuorescência foram fixados em 360 e 470 nm, respectivamente. A curva padrão mostrou-se linear no intervalo de 10 a 100 ng de ivermectina/mL. Considerando-se 5 mL de amostra, o limite de quantificação do método foi calculado em 2 ).Lgde ivermectina/L de leite. A taxa de recuperação variou de 70 a 87%, com uma média de 77,9 :t 3,2 %. O coeficiente de variação do método foi de 13% (n=5). Foram analisadas 168 amostras de leite disponíveis ncomércio, das quais 17,8 % apresentaram nível residual acima do limite de determinação do método. Entretanto, nenhuma das amostras apresentou resíduo de ivermectina acima do limite máximo de resíduo (10 ).Lg/L)estabelecido pelo Ministério da Agricultura e Abastecimento do Brasil. Também avaliou-se a cinética de eliminação da ivermectina no leite de bovinos (n=10, peso corpóreo 420 a 595 kg) tratados, por via subcutânea, com uma dose única de 200 ).Lg/kgpc do princípio ativo de uma formulação comercial ¿Observação: O resumo, na íntegra poderá ser visualizado no texto completo da tese digital. / Abstract: A high performance liquid chromatography (HPLC) with fluorescence detector methodology was validated and used for the surveillance of ivermectin residues in milk intended for human consumption. After extraction of the ivermectin by liquid-liquid extraction and purification of the extract, the compound was derivatized with 1-methylimidazol in N,N-dimethyl formamide for the formation of a fluorescent derivative, which was determined by HPLC, reverse phase C18, mobile phase methanol:water (96:4 v/v) and flow rate 0,7 mL/min. The excitation and emission signals of the fluorescence detector where adjusted at 360 and 470 nm, respectively. The calibration curve was linear in the range of 10 to 100 ng ivermectin/mL. Considering a sample of 5 mL, the quantification limit for milk was calculated to be 2 j..lg ivermectin/L. The percentage of recovery varied from 70 to 87%, with an average of 77,9 :!:3,2%. The coefficient of variation of the method was 13% (n=5). Of 168 samples analyzed, 17,8 % presented residue level above the determination limit. Nevertheless, none of them presented residue level above the maximum residue limit (10 j..lg/L) established by the Brazilian Ministry of Agriculture. Also, it was studied the kinetics of elimination of ivermectin in the milk of bovine (n=10, body weigh 420 to 595 kg) treated with a single subcutaneous dose of 200 j..lg/kgof a commercial formulation. Samples of milk were collected during the morning and afternoon periods, up to 30 days after the drug application, and frozen until the drug assay. The main residue eliminated in the milk was the unalterated drug and it was detected in the milk among 13 hours and 20 days after dosing, in a level higher to the limit of determination of the method. The maximum time (Tmax) to reach the maximumconcentration(Cmax) of 47,50 :!: 6,28 47,5 mg/kg was 2 days, with a daily decay of 19.8 %. Considering the total amount of ivermectin eliminated, the main value of excretion was 1047 j..lg, which is equivalent to 1.03 % of the dose applied to the animais ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations. / Doutorado / Doutor em Ciência de Alimentos

Orientador: Hérida Regina Nunes Salgado / Banca: Elfrides Eva Scherman Schapoval / Banca: Magali Benjamim de Araújo / Banca: Álvaro José dos Santos Neto / Banca: Marlus Chorilli / Resumo: O orbifloxacino é uma fluorquinolona antimicrobiana de terceira geração aprovada para o uso veterinário em vários países. Este antimicrobiano possui excelente farmacocinética, com biodisponibilidade oral quase completa e é utilizado no tratamento de infecções causadas por bactérias Gram-negativas, incluindo Enterobacteriaceae e espécies Pseudomonas-resistentes e também por micro-organismos Gram-positivos e Mycoplasma sp. Muitos estudos têm demonstrado que o orbifloxacino é eficaz contra diversos patógenos apresentando baixa concentração inibitória mínima. A importância de se desenvolver e validar métodos analíticos para este fármaco é justificada por seu potencial terapêutico e grande emprego em terapias anti-microbianas, assim como pelo conhecimento de que a baixa qualidade dos produtos anti-infecciosos está relacionada ao desenvolvimento de cepas resistentes, como consequência da administração de doses subterapêuticas. Neste trabalho foram desenvolvidos ensaios para a análise qualitativa de orbifloxacino utilizando a espectrofotometria nas regiões do UV/VIS/IV, cromatografia líquida de alta eficiência, análise térmica, cromatografia em camada delgada e outros métodos gerais para caracterização da substância química de referência (SQR) e comprimidos de orbifloxacino. Técnicas analíticas, espectrofotométrica no UV, indicativa de estabilidade por cromatografia líquida de alta eficiência e microbiológicas - difusão em ágar e turbidimétrica foram utilizadas para o desenvolvimento e validação dos métodos para determinação quantitativa deste fármaco na forma farmacêutica... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Orbifloxacin, a new synthetic third-generation fluoroquinolone antimicrobial drug, was developed exclusively for use in veterinary medicine. This antimicrobial agent has an excellent pharmacokinetics with oral bioavailability almost complete and it is used in treatment of infections caused by Gram-negative bacteria, including Enterobacteriaceae and Pseudomonas-resistant species and also by Gram-positive microorganisms and Mycoplasma sp. Many studies have shown that orbifloxacin is effective against many pathogens and has low minimum inhibitory concentration. Analytical methods for quantitative determination of orbifloxacin are important due to its therapeutic potential and wide use in antimicrobial therapy. Moreover, it is known that the poor quality of antibiotic product is direct related to development of resistant strains, as consequence of sub therapeutic doses administration. Thus, it is important to develop efficient analytical methods for quality control commercialized products. In this work were developed methods for qualitative analysis of orbifloxacin using UV/VIS/IR spectrophotometry, high performance liquid chromatography, thermal analysis, thin-layer chromatography and other general methods for characterization of API and tablets of orbifloxacin. Analytical methods such as UV spectrophotometry, stability-indicating high performance liquid chromatography and microbiological - agar diffusion and turbidimetry were developed and validated for quantitation of this drug in tablets. All... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Para ser competitivo atualmente, o sistema intensivo de produção de suínos deve estar pautado na eficiência. A fim de obter esta eficiência produtiva, o avanço genético das ultimas décadas buscou por fêmeas suínas cada vez mais prolíficas. A prolificidade contudo, veio acompanhada por uma queda no consumo voluntário de alimento por parte das fêmeas, bem como um aumento na produção de leite, e no número de leitões nascidos; o aumento da leitegada, levou a uma redução do peso ao nascimento e um aumento da heterogeneidade entre os leitões. Como forma de contornar o problema, são oferecidas aos leitões dietas formuladas com ingredientes de alto valor biológico a partir dos sete dias de vida, procurando suprir a demanda nutricional do animal durante o período de amamentação e preparar seu sistema digestório para o desmame. Contudo, grande parte das dietas formuladas para os leitões neonatos são oferecidas aos animais em sua forma sólida. Neste projeto, avaliamos os efeitos sobre a performance de leitões neonatos e da performance reprodutiva da fêmea suína do oferecimento de uma dieta líquida para os leitões neonatos, dieta esta que foi disponibilizada aos animais através de um sistema automatizado que realizou a mistura do alimento em sua forma sólida com a água. Para tais avaliações, os leitões ao nascer foram alocados em três grupos distintos, recebendo a dieta em sua forma líquida, em sua forma sólida ou então apenas o leite materno. Foram avaliadas variáveis zootécnicas relacionadas aos leitões, como peso, ganho diário de peso, consumo de ração, conversão alimentar, mortalidade pré-desmame; frequência de dias com diarreia nos leitões em fase de maternidade e creche. Foram eutanasiados leitões aos 14 e aos 28 dias de idade, para a realização do exame morfométrico da altura de vilosidade, profundidade de cripta e a relação entre a altura de vilosidade e profundidade de cripta nas porções do duodeno, jejuno e íleo. Avaliamos também o impacto do uso da dieta líquida sobre o catabolismo sofrido pela fêmea durante a lactação, através da aferição do peso e da espessura de toucinho desta fêmeas durante o período lactacional e também a duração do intervalo desmame estro e a duração do estro subsequente ao desmame. Não verificamos contudo um melhor desempenho zootécnico dos leitões nos períodos de maternidade e creche, tão pouco uma alteração favorável quanto a frequência de dias com diarreia nas duas fases em relação aos leitões que não consumiram nenhum tipo de suplementação. Quanto aos parâmetros morfométricos do intestino delgado, apenas aos 28 dias de idade os leitões que receberam a dieta líquida apresentaram maiores alturas de vilosidades no íleo em relação aos leitões que consumiram a dieta sólida e os animais do grupo controle apresentaram menores profundidades de cripta no mesmo seguimento e idade quando comparados aos demais animais. Contudo, estas alterações não foram o suficiente para garantir diferenças na relação altura de vilosidade:profundidade de cripta. E ainda, a suplementação independente de sua forma não reduziu o catabolismo sofrido pela fêmea suína durante a lactação / To be competitive today, intensive pig production system must be founded on efficiency. In order to obtain this production efficiency, genetic progress of recent decades sought for sows increasingly prolificity. Prolificity however, was accompanied by a decrease in voluntary feed intake by the sow, an increase in milk yield, and the number of piglets born; increased litter led to a reduction in birth weight and increased heterogeneity among piglets. In order to solve this problem, are offered to piglets diets formulated with high biological value ingredients starting at seven days of life, trying to meet the nutritional demand of the animal during the breastfeeding period and prepare digestive system for weaning. However, most diets formulated for newborns piglets are offered in its solid form. In this project, we evaluated the effects on performance of newborn piglets and reproductive performance of swine female offering a liquid diet for the newborn piglets, which was made available to the animals through an automated system that held the mixture of solid feed with water. For such evaluations, the piglets were divided into three groups, receiving the diet in liquid form ,in its solid form or only breast milk. Husbandry variables related to the piglets were evaluated, such as weight, daily gain, feed intake, feed conversion, pre-weaning mortality; frequency of days with diarrhea in piglets in maternity and nursery. Piglets were euthanized at 14 and 28 days for morphometric examination of villus height, crypt depth and the ratio of villus height and crypt depth in the portions of the duodenum, jejunum and ileum. We also evaluated the impact of the use of liquid diet on the catabolism suffered by the sow during lactation, by measuring the weight and backfat thickness during the lactation period and also the duration of weaning to estrus interval and duration of the subsequent estrus. We not checked a better growth performance of piglets during periods of maternity and nursery, nor a favorable change for the frequency of days with diarrhea in this two phases. As for the morphometric parameters of the small intestine, only 28 days old piglets that received liquid diet showed greater heights of villi in the ileum for piglets that consumed the solid diet and the control group showed lower crypt depth in the same tracking and age when compared to other animals. However, these changes were not enough to warrant differences in villus height:crypt depth. And yet, the independent supplementation of its form not reduced catabolism suffered by female swine during lactation

Orientador: Alberto José Cavalheiro / Co-orientador: Renato Lajarim Carneiro / Banca: Ian Castro-Gamboa / Banca: Monalisa Sampaio Carneiro / Banca: Rafael Victório Carvalho Guido / Banca: Jairo Kenupp Bastos / Resumo: A cana-de-açúcar é a principal cultura agrícola em importância econômica das regiões tropicais, sendo que o Brasil possui a maior área cultivada e em expansão do mundo. As variedades modernas são oriundas principalmente do cruzamento entre Saccharum officinarum e Saccharum spontaneum. Com o desenvolvimento tecnológico dos programas de melhoramento genético, muitas doenças antigas da cana-de-açúcar foram superadas através do desenvolvimento de genótipos resistente. Entretanto, no ano de 2009 o aparecimento da ferrugem alaranjada no estado de São Paulo causou grande prejuízo econômico, porque variedades com características de alta produtividade e resistência à ferrugem marrom, mostraram-se suscetíveis à ferrugem alaranjada. Diante disso, este trabalho teve por objetivo a caracterização micromolecular de genótipos de cana-de-açúcar resistentes e suscetíveis à ferrugem alaranjada, visando à identificação de marcadores moleculares de resistência a esse patógeno. Para isso, empregaram-se LC-DAD-MS e 1H NMR para obtenção de dados analíticos e métodos quimiométricos para análise multivariada. Para a etapa de caracterização, o extrato hidro-alcoólico preparado a partir de 500 mg das folhas de cana-de-açúcar foi fracionado em HPLC-DAD, fornecendo 60 frações que foram analisadas por LC-DAD-MS e 1H NMR. Esta etapa permitiu a identificação de 52 metabólitos, entre aminoácidos, açúcares, derivados do ácido benzoico, ácido hidroxicinâmico e flavonas C e O glicosiladas. Na segunda etapa foram avaliados os fingerprintings metabólicos dos genótipos resistentes (IAC95 5000) e suscetíveis (SP89 1115) empregando LC-DAD e submetidos a PCA. No primeiro planejamento experimental as mudas de ambos os genótipos com 30 dias foram transferidas para câmara de crescimento e mantidas a 25 ºC durante 30 dias. A PCA deste experimento mostrou que o genótipo resistente possui maior correlação com derivados de... / Abstract: Sugarcane is the main agricultural crop in economic importance of tropical regions and Brazil has the largest cultivation acreage in the world. The modern varieties are arising mainly from the crossing of Saccharum officinarum X Saccharum spontaneum. With the technological development of breeding programs, many old diseases affecting sugarcane were overcome through the development of resistant genotypes. However, in 2009 the first appeareance of orange rust in São Paulo State led to huge economic loss, because varieties with characteristics of high yield and resistance to brown rust were susceptible to orange rust. Therefore, this study aimed the micromolecular characterization of the sugarcane genotypes resistant and susceptible to orange rust by employing LC-DAD-MS and 1H NMR as well as analysis of both genotype extracts by HPLC-DAD and multivariate analysis. For the characterization step, the extract prepared from 500 mg of sugarcane leaves employing H2O/MeOH (8:2) was fractioned in 60 fractions and analyzed by LC-DAD-MS and 1H NMR. This step allowed the identification of 52 metabolites, including amino acids, sugars, organic acids, such as benzoic and phenolic, and flavones, out of which 33 are described for the first time in sugarcane. On the second step, the genotypes IAC95 5000 (resistant) and SP89 1115 (susceptible) growing under control conditions and inoculated with Puccinia kuehnii were analyzed by HPLC-DAD e submitted to multivariate analysis by PCA. In the first experimental design, the seedlings of IAC95 5000 and SP89 1115 genotypes with 30 days were maintained in growth room at 25 ºC. The harvest was carried out on 30, 35, 40, 45 and 60 day old seedlings at 6 am and 8 pm. The PCA of this experiment showed that the resistant genotype has the highest correlation of with luteolin derivatives. In the second experimental design, 25 plants were inoculated and 25 were considered as control for each genotype. The seedlings were... / Doutor

Tese de mestrado integrado. Engenharia Química. Faculdade de Engenharia. Universidade do Porto. 2008

La incidencia de infecciones fúngicas ha aumentado en los últimos años debido al incremento de situaciones clínicas que comportan alteraciones en los mecanismos de defensa del organismo tales como neoplasias, pacientes portadores de un trasplante y tratados con fármacos inmunosupresores o síndrome de la inmunodeficiencia adquirida (SIDA), entre otros. La anfotericina B (AnB), comercializada en 1956, continúa siendo el fármaco de elección para el tratamiento de las micosis sistémicas, aunque su utilización no está exenta de toxicidad. Las nuevas formulaciones lipídicas de AnB comercializadas a partir de 1995, han supuesto en la práctica clínica una mejora en la optimización de la terapia ya que su administración ha demostrado estar asociada a una menor incidencia de reacciones adversas. Antes de la comercilaización de éstas, ha sido frecuente la utilización de AnB vehiculada en un excipiente de características lipófilas como es el Intralipid 20%, preparada como formulación magistral en el momento de la infusión endovenosa por no disponer de estudios de estabilidad. La aspergilosis pulmonar invasiva es una infección fúngica que puede aparecer como complicación en la clínica de pacientes inmunodeprimidos cuya profilaxis con la formulación de AnB en solución acuosa para inhalación, ha demostrado una buena eficacia clínica exenta de los efectos adversos y toxicidad asociados a la administración endovenosa. En esta memoria se presentan los resultados de tres trabajos en formato de publicaciones en los cuales se estandariza y valida un método para la determinación de AnB en muestras biológicas (suero, secreciones respiratorias) y muestras lipídicas con aplicación a estudios farmacocinéticos y de estabilidad química de AnB cuando ésta se administra en diferentes formas farmacéuticas. / The incidence of fungal infection has increased in recent years due to the increment of clinical situations wich alter the defence mechanisms of the body such as neoplasia, transplantation patients treated with immunosupressive drugs or acquired immunodeficiency (AIDS), among others. Amphotericin B (AmB), licenced in 1956, continues to be the drug of choice for the treatment of systemic mycosis, although its use is not exempt from toxicity. The new AmB lipid formulations licenced from 1995 onwards, have represented in clinical practice an improvement in therapy since its administration has been associated with a declining incidence of adverse reactions. Prior to AmB commercialization, it was normal to inclued AmN in an excipient of lipofilas-like-characteristics such as Intralipid 20%, prepared as a magistral formulation at the moment of intravenous infusion, for lack of stability studies. Invasive pulmonary aspergillosis is a fungal infection which may appear as a complication in immunodepressed patients whose prophylaxis with AmN formulation in aqueous solution for inhalation, has shown good clinical efficacy free from adverse effects and toxicity associated with intravenous administration. In this thesis the results of three studies are presented, in whcih a standardized and validated method for the determination of AmB in biologic samples (serum, respiratory secretions) and liquid samples with application to pharmacokinetic studies and chemical stability of AmB when administered using pharmaceutical procedures.