SANTRAUKA Kamieninių ląstelių apoptozę ar išgyvenimą sąlygojantys signaliniai keliai yra potencialus taikinys tobulinant kardiomioplastijos metodą. Šiame darbe, pagal specifinius baltymus - žymenis ir morfologinius požymius patvirtinome iš triušio raumens gautų ląstelių, pasižyminčių neribotu proliferaciniu potencialu in vitro, gebėjimą diferencijuotis miogenine linkme. Tyrėme ląstelių žūtį/išgyvenimą sąlygojančius mechanizmus, ląstelėms atsakant į genotoksinių medžiagų, bei fiziologinio apoptozės induktoriaus – azoto oksido donoro – NOC-18 poveikį. Nustatėme didesnį diferencijuotų ląstelių, palyginus jas su proliferuojančiomis, atsparumą minėtoms medžiagoms. Tyrimai parodė apsauginį ERK, JNK ir p38 MAP kinazių vaidmenį ląstelių diferencijuotų miogenine kryptimi apoptozėje. Buvo nustatytas JNK vaidmens pasikeitimas iš pro- į antiapoptotinį, priklausomai nuo ląstelių diferenciacijos stadijos ir ląstelių kontaktavimo trukmės. / SUMMARY Studies of muscle-derived stem cell death and survival mechanisms during their proliferation and differentiation Stem cell apoptosis/survival signaling pathways are potential gains in the development of cardiomyoplasty method. During this work, by specific myogenic protein and morphology there was demonstrated the myogenic origin of cells derived from rabbit muscle and their ability to differentiate into muscle cells. There were studied molecular mechanisms governing the death/survival pathways of primary myogenic cells in response to treatment with genotoxic drug cisplatin, daunorubicin and nitric oxide donor NOC-18. Differentiated cells appeared to be more resistant to the above subtances as compared to proliferating cells. The study has proved the protective role of ERK, JNK ir p38 MAP kinases in differentiated muscle stem cell apoptosis. There was observed a change of JNK function from pro- to antiapoptotic depending on cell differentiation stages and cell contact duration.

Melatoninas – hormonas, kurį produkuoja kankorėžinė liauka, buvo atrastas 1959 metais ir vadinamas “tamsos hormonu“, kadangi jis gaminamas tamsiu paros metu. Maksimalus melatonino kiekis būna vidurnaktį ir iki ryto mažėja, be to šviesa silpnina jo sintezę. Melatoninas reguliuoja biologinį laikrodį, pagerina miegą, stimuliuoja imuninę sistemą bei apsaugo nervų sistemą. Literatūriniai duomenys apie melatonino įtaką imuninei sistemai daugiausia yra apie jo poveikį T ląstelėms. Melatoninas padidina čiobrialaukės dydį bei citokinų produkciją, stimuliuoja T ląsteles pagalbininkes (TH1) bei aktyvuoja NK ląsteles ir makrofagus. Tačiau, šio hormono įtaka B ląstelių funkcijoms nėra ištirta. Mūsų darbo tikslas buvo ištirti melatonino įtaką B ląstelių funkcijoms, t.y. antikūnų susidarymui. Kadangi antikūnų produkcija būna nepriklausoma ir priklausoma nuo T ląstelių, buvo nuspręsta imunizuoti BALB/c peles nuo T ląstelių nepriklausomu ir priklausomu antigenais, bei stebimas specifinių antikūnų susidarymas. Imunizuojamos pelės eksperimento metu buvo laikomos trijose skirtingose sąlygose: esant normalioms šviesos tamsos ciklo sąlygoms; esant pastoviam apšvietimui ir esant pastoviam apšvietimui, ir papildomai kasdien leidžiant melatoniną. Buvo nustatyta kad, esant melatonino sintezės sutrikimams (gyvūnams esant pastovaus apšvietimo sąlygoms) padidėja nuo T ląstelių nepriklausomų antikūnų sintezė. Padidėja visų izotipų (IgM, IgG1, IgG2b ir IgG3) antikūnų kiekis. Melatonino sintezės sutrikimai... [toliau žr. visą tekstą] / Melatonin is a hormone produced by the pineal gland that is secreted during the night in response to the darkness. It reaches a maximum level in the middle of the night, then decrease until the morning. The light inhibits the melatonin synthesis: it is the hormone of the circadian rate/rhythm. When people are exposed to frequent artificial light and they do not get enough sleep, melatonin level is suppressed. The production of melatonin decreases with age. Melatonin regulates and controls biological clock: it improves sleep, stimulates the immune system, and protects the central nervous system. This hormone is an extremely powerful antioxidant. The literature data about melatonin effect on immune system are mostly about the T cells and macrophages. Melatonin increases the thymus weight. It stimulates the function of TH1 T cells, increases cytokine production by T cells. Melatonin also activates NK cells and macrophages. However, the role of melatonin on the function of B cells is not investigated very well. We have investigated the role of melatonin on the function of B cells, e.g. production of specific antibodies. For this purpose, BALB/c mice were immunized with T independent and T dependent antigen. We looked for production of specific antibodies in animals living at three different conditions. The first group of mice was kept on the normal light/night cycle conditions. The second group of mice was exposed all the time to artificial light, which causes decreased synthesis... [to full text]

Goal of work: evaluate and analyze the factors that have an impact on the quantity of the somatic cells in cow‘s milk. Objectives of work: 1. To select and collect the data of the milk tests of the cows under observance when the lactation was over, taken in 2003-2004. 2. To describe the collected data by setting the diversity of age and breeds of cows under observance and evaluating the greatness of farms. 3. To estimate statistically and describe the impact of such factors as breed, age, season, greatness of farm, type of sample collection and the person taking it, impact on the quantity of the somatic cells in the milk of the observed cows. Conclusion: Statistically, the breed and age of an animal influence upon the quantity of the somatic cells in milk. The least number of the somatic cells can be detected in the milk of the cows that are young or used to the local keeping and feeding conditions. 1. The greatest quality of milk from the perspective of the somatic cells is achieved in grand farms that keep over milking cows. 2. The influence of the person taking a sample on the quantity of the somatic cells in milk is confidential statistically. The right order of taking a sample has a crucial meaning to the further investigations on the productivity of cows. It is recommended to organize a periodical training of the control assistants and the owners of the observed cows, putting emphasis on the importance of the right way of taking a sample.

Histonų potransliacinės modifikacijos sąlygoja chromatino struktūros pakitimus, lemiančius genų, atsakingų už ląstelėje vykstančių įvairių procesų, tokių kaip proliferacija, diferenciacija, apoptozė reguliavimą. Šiame darbe įvertinome chromatino baltymų, histonų H3 ir H4, modifikacijų dinamiką HL-60 ląstelėse, indukuotose granuliocitinei diferenciacijai su retinoine rūgštimi (RA) ir histonų deacetilazių slopikliais, fenilo butiratu (PB) ir vitaminu B3 (vitB3) bei jų kombinacijomis. Aktyvaus chromatino baltymų kompleksai proliferuojančiose ir diferenciacijai indukuotose ląstelėse buvo analizuojami chromatino imunoišsodinimo metodu, naudojant antikūnus prieš histonus - hiperacetilintą H4 ir trimetil-Lys4 H3, esančius aktyvaus chromatino vietose mononukleosomų frakcijoje. Atlikta baltymų, esančių komplekse su modifikuotais histonais H3 ir H4 proteominė analizė vienmatėje (SDS/PAGE) ir dvimatėje (2DE) elektroforezės sistemose. Nustatyti baltymai, sąveikaujantys su hiperacetilintu H4 ir trimetil-Lys4 H3. Tai baltymai, dalyvaujantys genų raiškos iniciavime bei chromatino modifikacijose, t.y. transkripcijos faktorius Sp1, metionino acetiltransferazė, DNR metiltransferazė ir kt. Taip pat patodyta, kad HL-60 ląstelėse p21 WAF1/CIP geno raiška priklauso nuo pasirinkto induktoriaus. Apibendrinant manome, kad poveikio variantas - 3mM PB su 5mM vit.B3 6 val., nuplovus tolesnis poveikis su 1μM RA ir 5mM vit.B3 24 val., galėtų būti tinkamas leukeminių ląstelių diferenciacinei terapijai... [toliau žr. visą tekstą] / Recently, a novel strategy for the treatment of leukemia’s through the modulation of chromatin structure is applicable. In this study, we conducted a detailed analysis of anti-leukemia effects of histone deacetylase (HDAC) inhibitors and their combinations with retinoic acid using human promyelocytic leukemia cell line HL-60. We have shown that HDAC inhibitors - phenyl butyrate and vitamin B3, cause rapid histone H3 and H4 modifications. Further we examined how HDACI and retinoic acid (RA) can modulate gene expression via acetylation and other modifications of histones associated with targeted genes. We performed Chip assay to identify proteins associated with hyperacetylated histone H4. Immunoprecipitated proteins were fractionated by SDS/PAGE and 2DE. Proteomic analysis was performed by using mass spectrometry (MALDI TOF and ESI MS/MS). We identified Sp1 transcriptional activation, DNA methyltransferase, methionine acetyltransferase and other proteins that were associated with modified histones H3 and H4. To evaluate the changes ofp21 gene expression affected by hyperacetylation of histone H4 during HL-60 cell granulocytic differentiation we performed PGR of active chromatin immunoprecipitated with hyperacetylated H4 by using different primers of p21 gene. In this study we have shown that p21 gene expression changes during granulocytic differentiation and depends on inducer. Our results suggest that the chromatin remodeling caused by HDAC inhibitors could be a promising... [to full text]

Neutrofilų aktyvacijos produktų įtaka mezenchiminių kamieninių ląstelių migracijos aktyvumui Migracija į patologinį židinį yra pirmas esminis žingsnis, kuriuo prasideda mezenchiminių kamieninių ląstelių (MKL) vaidmuo audinio regeneracijos procese. Audinių pažeidimą visuomet lydi uždegiminė reakcija. Tai reiškia, kad MKL patenka į uždegiminę mikroaplinką. Neutrofilų infiltracija yra neatsiejamas kiekvienos uždegiminės reakcijos komponentas. Uždegimo židinyje neutrofilai išskiria savo granulių turinį, reaktyvius deguonies metabolitus, citokinus, arachidono rūgšties darinius ir kt. Šio darbo tikslas ištirti, kaip suaktyvintų neutrofilų išskiriamos medžiagos veikia mezenchiminių kamieninių ląstelių migracijos aktyvumą. MKL migracijos tyrimui buvo naudojama dešimties šulinėlių chemotaksio kamera AA10. Ląstelės kameroje migravo pro 8μm poras turinčią polikarbonatinę membraną. Migracijos aktyvumas įvertintas suskaičiavus migravusias ląsteles penkiuose regėjimo laukuose ir išvedus vidurkį. Rezultatai. Visų pirma buvo nutatyta, kad MKL būdingas chemokinezinis aktyvumas ir parinktas šių ląstelių chemotaksio induktorius (1% žmogaus kraujo plazma). Įvertintos neutrofilų degranuliacijos produktų galimybės sukelti MKL chemotaksį. Neutrofilų supernatantas, į kurį po aktyvacijos formil-Met-Leu-Phe (fMLP) išsiskyrė neutrofilų granulių turinys, sukėlė MKL chemotaksinį atsaką ir sąlygojo statistiškai reikšmingą šių ląstelių migracijos aktyvumo padidėjimą lyginant su jų chemokineziniu... [toliau žr. visą tekstą] / The Influence of the Substances Produced by Activated Neutrophils on the Migratory Activity of Mesenchymal Stem Cells Adult mesenchymal stem cells (MSCs) are multipotent stem cells which have the ability to differentiate into cells of multiple organs and systems such as bone, fat, cartilage, muscle, neurons, hepatocytes and insulin-producing cells. That is why they have generated a great deal of interest for their potential use in regenerative medicine and tissue engineering. MSCs are thought to be crucial for tissue regeneration, acting via migration into the site of injury, proliferating and differentiating into functional cells. The lesion of a tissue is always followed by the inflammatory reaction. It means that the MSCs migrate and access to the inflammatory environment. Neutrophil infiltration is a common pathological feature in acute inflammatory disorders. In the pathology sites they release oxygen species and their internal constituents, which are stored in different granules. The goal of this research work was to estimate the influence of the substances produced and released by activated neutrophils on the migratory activity of MSCs. The research work consisted of four groups of experiments. First of all we have determinated the level of the chemokinetic MSCs‘ migration and we have measured the chemotactic reponse to two different stimulus: DMEM suplemented with 10% FCS and 1% human plasma. That was an important stage for planning the further experiments. Secondly... [to full text]

Padidėjęs somatinių ląstelių skaičius piene - svarbus mastito požymis. Perdirbamajai pramonei karvių mastitas buvo ir liks vienu iš svarbiausių trukdžių, gaminant aukštos kokybės pieno produktus. Klinikine forma serga 2 - 5 % lakuojančių ir užtrūkintų karvių, o slaptuoju uždegimu - iki 50 % karvių. / The increased number of somatic cells - an important feature of mastitis. Processing industry bovine mastitis has been and will remain one of the most important interference in the manufacture of high-quality dairy products. The clinical form of suffering 2-5% lakuojančių and užtrūkintų cows and subclinical inflammation - up to 50% of the cows.

Introduction. Milk is one of the most important economies of the country. In 2002, milk contained 20% of the total value of agricultural economy products, and more than 30% of the total value of export of agricultural economy and alimentary products. Milk is going to stay the underlying branch of agricultural economy in the future. Today, 95.5 % of all Lithuanian farms have 1-4 cows. These farms contain 74.7% of the total number of cows. This producer group is the biggest and most problematic, because its contribution to production of milk is very important. It is important to emphasize, that pensioners contain 45% of milker holders. Objective of the study. The aim of this master‘s paper is to analyze the composition of Lithuania‘s recast companies according to the data taken from state lab Pieno Tyrimai of procurement raw milk. This paper will also analyze the dynamic of the most important quality parameters including: domain, season, the number of milk providers and the number of tested milk samples. Materials ant methods. In this master‘s paper the quality and the consistency of raw milk were analyzed according to parameters set by the state lab „Pieno tyrimai“. The subjects of research were the quality and composition data of 2002-2004 year samples of raw milk. Tendencies of resources of raw milk were analyzed according to the newest statutory requirements in Lithuania and in compliance with the main EU legislation. Findings. According to the analyses of the... [to full text]

Mastitis causes largest economic losses in dairy production. Sub-clinical mastitis is detected in 50% of lactating cows in Lithuania. Curing effect is transient if major causes and factors of mastitis are not eliminated. Prophylactic measures are directed to strengthen the immune system of the cow and to define and to eliminate all factors causing mastitis. Bacteria are present on skin of the teat in the surroundings. Use of antiseptics of cow teats before and after milking is the most effective preventive procedure that can prevent from new mastitis cases. Antiseptic solutions help to fight most opportunistic and contagious bacterial infections causing mastitis. Teat antiseptics can reduce mastitis incidence by 50 to 75 %. It is recommended to use antiseptic solutions for udder and teats, as they improve physical condition of the udder and milk quality. Agents for udder and teat antiseptics contain bactericidal, skin protecting components in aqueous solution. Bactericidal activity is defined to kill germs during chemical and biological reactions. Active ingredients are iodoforms, chlorhexidins, sodium hypochloride, sodium chloride, lactic acid, hypochloric acid, antimicrobial proteins and fatty acids. Teat dipping reduces bacterial milk contamination, and spreading of pathogens on the teats during the milking. For the present moment this procedure is also used in Europe. Spraying teats with two different concentrations of iodine solution before and after the milking... [to full text]

Pieno kokybę apibūdina visa eilė rodyklių. Svarbiausias iš jų - somatinių ląstelių skaičius. Didėjantis SLS nurodo, kad karvė serga dažniausiai pasitaikančia ginekologine liga mastitu. Klinikiniu mastitu serga apie 1 – 2 proc. karvių. Dažniausiai serga karvės slaptuoju mastitu. Literatūros duomenys teigia, kad laktuojančių karvių bandose šiuo mastitu serga 43 – 47 proc. karvių. Svarbiausias slaptojo mastito požymis-padidėjęs somatinių ląstelių skaičius piene. Dažniausiai tešmens infekcija karvės suserga pirmaisiais laktacijos mėnesiais ir 80 proc. atvejų jos serga visą laktacijos laikotarpį. Sergant mastitu netenkama iki 25 proc. pieno per laktaciją. Vien tik dėl vieno tešmens ketvirčio uždegimo pieno per laktaciją sumažėja net iki 12 proc. Mastitu persirgusių karvių produktyvumas ne visuomet atsikuria toks, koks buvo iki ligos, nes negrįžtamai pasikeičia alveolinis audinys, tad kai kurias karves tenka išbrokuoti. Mastitą galima diagnozuoti pagal laktozės koncentracija elektrolitų sudėti ir SLS. Patogiausia ir pigiausia diagnozuoti pagal SLS. / The aim of this study was to find the non genetical influence facts in cows milk, for healthy cows and cows with secret mastitis. Scientific research work was carried out at the Department of Non-infectious diseases, Lithuanian Veterinary Academy and Practical Instruction and Research Centre LVA from 2005 to 2007. This work analyses data from dairy cow milk production. Experiments were carried out on two to seven year old black and white breed lactating cows, during the housing period. Data from 166 cows was used in this analysis. Inclusion criteria - somatic cell count higher than 400x 103/ml. We analyzed the influence of lactation on milk somatic cell count, cow age impact on productivity during lactation period on the number of somatic cells in the milk, parturition – to conception period length, season of the year. Increasing lactation number, was associated with elevated somatic cell count from 247, 3 until 392, 4 103/ml; and average milk yield per day also increased from 12,1 until 13,8 kg, milk fat increased from 4,34 until 4,38 percent, protein content increased from 3,15 to 3,30 percent. Milk lactose content decreased accordingly from 4,75 to 4,67 percent. Age positively influences milk productivity. This can be explained by lowered resistance to mastitis which is more frequent with age, cow automatic milking and supervision mistakes (Powell, et Al. 1997). According to literature data age and lactation period highly influences cow health and productivity. Age has... [to full text]

Mūsų tyrimų duomenimis analizuotoje fermoje yra pakankamai aukštas išmilžis, kuris už 2007 metus sudarė 6234 kg per laktaciją. Karvių bandoje per mažą procentą sudaro pimaveršės (11,3%). Vyresnės karvės bandoje pasiskirsto beveik vienodai : antraveršės – 24,7 %, trečiaveršės- 39,1 % ir ketvirtos laktacijos- 24,7 %. Karvių sergamumas slaptuoju mastitu priklauso nuo produktyvumo. Mūsų tyrimai rodo, karvės, kurių produkcija per laktaciją buvo 3000 kg pieno - iki 200 tūkst./ml somatinių ląstelių turėjo 20,93 %, 3001 – 5000 kg – 55,8 % ir virš 5001 kg – 23,26 % karvių. Antroje bandomoje grupėje, karvių somatinių ląstelių skaičius buvo 201 – 400 tūkst./ml pirmaveršių buvo 20,0 %, 3001 – 5000 kg- 43,3% ir virš 5001 kg – 36,6 %. Trečioje bandomojoje grupėje ( 24 karvės) 401 tūkst./ml SLS turėjo 25 %, 3001 – 5000 kg – 16,7% ir virš 5001 kg – 58,3 %. Tyrimai rodo, kad didėjant karvių produktyvumui jos dažniau serga slaptuoju mastitu. Tuo mūsų tyrimų duomenys sutampa su J. Rudejevienės (2007), E Aniulio (2007), Sederevičiaus (2004) tyrimų duomenimis. Analizuojant pažeistus karvių tešmens ketvirčius pastebėjome, kad vienas ketvirtis buvo pažeistas pas 40,0 %, du ketvirčiai - 30 %, trys ketvirčiai - 16,7 % ir visi ketvirčiai 13,3 %. Šio tyrimo duomenys nevisiškai sutampa su J. Klimaitės (2005) duomenimis. Manome, kad pažeistų ketvirčių skaičius priklauso nuo karvių laikymo būdo, sanitarinių ir kitų priežasčių. Pieno sanitarinė būklė priklauso nuo tvarto higienos, spenių paruošimo melžimui... [toliau žr. visą tekstą] / According to the data of our studies, there is quite high milk yield in analyzed farm. This milk yield composed 6234 kg per lactation during 2007. In the herd of cows there is a small percent of first-calf cows (11,3%). Older cows are spread in the herd almost equally: second- calf cows – 24,7 %, third-calf cows- 39,1 %, and cows of fourth lactation- 24,7 %. Cows’ morbidity with subclinical mastitis depends on productivity. Our study shows that cows whose production during lactation was 3000 kg- till 200 thousands/ml of somatic cells had 20,93 %, 3001 – 5000 kg – 55,8 % and over 5001 kg – 23,26 % of cows. In the second experimental group the somatic cells count 201 – 400 thousands/ml had 20,0 % of first-calf cows, 3001 – 5000 kg- 43,3% and over 5001 kg – 36,6 %. In the third experimental group ( 24 cows) 401 thousands/ml of SCC (somatic cells count) had 25 %, 3001 – 5000 kg – 16,7% and over 5001 kg – 58,3 %. Studies show that during the rise of productivity of cows they more often suffer from subclinical mastitis. According to this aspect our studies data are compatible with research data of J. Rudejevienė (2007), E Aniulis (2007), Sederevičius (2004). While analysing damaged udder quarters we noticed that one quarter was damaged at 40,0 %, two quarters - 30 %, three quarters - 16,7 % and all four quarters- 13,3 %. The data of this study are only partially compatible with data of J. Klimaitė (2005). It is clear that the number of damaged quarters depends on the way of cows’... [to full text]