Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências Médicas, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, 2016. / Submitted by Camila Duarte (camiladias@bce.unb.br) on 2017-02-06T14:14:04Z No. of bitstreams: 1 2016_FabrícioClaudinoEstrelaTerraTheodoro.pdf: 1528155 bytes, checksum: 7e2bf484d829a436b7529442a92e6883 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2017-02-09T17:12:12Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_FabrícioClaudinoEstrelaTerraTheodoro.pdf: 1528155 bytes, checksum: 7e2bf484d829a436b7529442a92e6883 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-09T17:12:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_FabrícioClaudinoEstrelaTerraTheodoro.pdf: 1528155 bytes, checksum: 7e2bf484d829a436b7529442a92e6883 (MD5) / Introdução: a Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) é uma doença negligenciada tanto em relação a métodos diagnósticos de baixa complexidade como em relação ao tratamento pelo uso de medicação extremamente tóxica e sem esquemas terapêuticos com associações medicamentosas há mais de 100 anos. O diagnóstico preciso das formas clínicas de LTA é importante porque a forma mucosa requer maior tempo de tratamento com drogas tóxicas, tem uma evolução crônica, uma alta taxa de recorrência, podendo gerar deformidades e morte. Métodos: nosso objetivo foi estudar o perfil clínico e exames laboratoriais de pacientes tratados em clínica de referência para LTA no HUB-UnB, no Centro-Oeste do Brasil entre 2001-2014, para diferenciar a forma mucosa (LM) da cutânea (LC), utilizando análise multivariada. Resultados: de 1019 pacientes com lesões suspeitas, 737 tiveram LTA. A análise univariada mostrou que os pacientes com LM, quando comparado aos LC, tinham maior idade média (p <0,001), maior duração da doença (p <0,001), menor número de lesões (p <0,001), maior diâmetro no teste de Montenegro (IDRM) e maiores títulos na imunofluorescência indireta (IFA) (p = 0,001). A análise multivariada mostrou que um fator de confusão pode ter influenciado os resultados da análise univariada e os valores tornaram-se não significativos. Conclusões: maior diâmetro da IDRM, títulos elevados da IFA, bem como os pacientes de maior duração idade e da doença, estão associados à forma LM, mas não podem ser utilizados como único critério para diferenciação. / Introduction: the American Cutaneous Leishmaniasis (ACL) is a neglected disease both in relation to low-complexity diagnostic methods as compared to treatment by the use of highly toxic drug with no therapeutic regimens in combination therapy for over 100 years. The accurate diagnosis of the clinical forms of ATL is important because the mucosal form requires longer treatment with toxic drugs, has a chronic evolution, a high recurrence rate and cause disfiguring scars and death. Methods: Our objective was to study the clinical profile and laboratory tests from patients treated at a referral clinic for ATL at HUB-UnB in Midwest Brazil from 2001 to 2014 to differentiate mucosal (ML) from cutaneous (CL) forms using a multivariate analysis. Results: Of 1019 patients with suspicious lesions, 737 had ATL. Univariate analysis showed that patients with ML, when compared to CL, were older (p<0.001), had longer disease duration (p < 0.001), lower number of lesions (p<0.001), higher values of Montenegro skin test (MST) (p=0.042) and tittles of indirect immunofluorescence assay (IFA) (p=0.001). Multivariate analysis showed that a confounder influenced the univariate analysis result. Conclusions: High titles of MST and IFA, as well as patients with higher age and disease duration, could be associated with the form ML, but this information cannot be used as the sole criterion for differentiation.

Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2014-09-26T20:15:20Z No. of bitstreams: 2 Clayson Gomes - 2012 - dissertação.pdf: 1729605 bytes, checksum: 48dd1bd05f0e954a3dd14fb20b162e2f (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Silva (jtas29@gmail.com) on 2014-09-26T21:28:37Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Clayson Gomes - 2012 - dissertação.pdf: 1729605 bytes, checksum: 48dd1bd05f0e954a3dd14fb20b162e2f (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-09-26T21:28:37Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Clayson Gomes - 2012 - dissertação.pdf: 1729605 bytes, checksum: 48dd1bd05f0e954a3dd14fb20b162e2f (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2012-02-03 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Introduction: Leishmaniasis is a tropical zoonoses that is endemic, causing different clinical forms including cutaneous, diffuse, disseminated, mucosal and visceral manifestations. The L. (V.) braziliensis is the most common parasite found in cutaneous leishmaniasis in Brazil and is the major agent for the mucosal leishmaniasis. The manifestation of the disease and the clinical forms are dependent on several factors related between the parasite and host. Objective: The aim of this study was to compare the ability of amastigote parasite isolated from patients with cutaneous or mucosal leishmaniasis to stimulate the production of cytokines in peripheral blood mononuclear cells cultures (PBMC) obtained from health donors. Methods: Isolates of patients with cutaneous or mucosal lesion were inoculated in IFNγ knockout mice to obtain amastigotes, which were purifyed by density using Percoll. The PBMCs from healthy individuals were separated by density using Ficoll. The cells were incubated in cultures at different times with amastigotes and then the supernatant were collect to quantify cytokines by ELISA or cells that are used to quantify cytokines using the real time PCR. Results: PBMCs produced higher amounts of IL-1β, IL-6, IL-10 and TGFβ in cultures after stimulation with amastigotes than uninfected controls. When comparing isolates from cutaneous or mucosal disease it was not found differerence regarding to the production of IL-6, IL-10 and TGFβ, but amastigotes from patients with cutaneous leishmaniasis induced more IL-1β than in parasites obtained from mucosal lesion. Production of IFNγ IL17, and TNF was was not detected at different times after stimulation with L. (V.) braziliensis amastigotes. Conclusion: The results suggest that amastigotes of patients with cutaneous leishmaniasis interact with innate immunity cells by inducing the production of proinflammatory or anti-inflammatory and isolated from mucosal lesions induce less IL-1 than parasites obtained from skin lesions. The greatest amount of IL-1 promotes an inflammatory response with migration of cells to the site of infection, so a low xvii production would cause a slower disease and would prejudice an effective acquired response. Thus, the parasite would be able to survive longer in host in a silent way. / Introdução: A leishmaniose é uma zoonose tropical endêmica com diferentes formas clínicas, incluindo as formas cutânea, difusa, disseminada, mucosa e visceral. L. (V.) braziliensis é o parasito mais comumente encontrado na leishmaniose tegumentar no Brasil sendo, o principal agente da leishmaniose mucosa. A manifestação da doença e as formas clínicas existentes são dependentes de diversos fatores relacionados ao parasito e ao hospedeiro. Objetivo: Comparar a habilidade de formas amastigotas isoladas de pacientes com leishmaniose cutânea ou mucosa em estimular a produção de citocinas em células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) obtidas de doadores sadios. Métodos: Isolados obtidos de pacientes com lesões cutâneas ou mucosas foram inoculados em camundongos deficientes de IFNγ para obtenção de formas amastigotas, que foram separadas por gradiente de densidade usando o Percoll. As PBMCs de indivíduos sadios foram separadas por gradiente de densidade usando o Ficoll e cultivadas por diferentes tempos com as formas amastigotas. O sobrenadante foi coletado para quantificar as citocinas por ELISA e as células restantes foram lisadas para análise do mRNA para citocinas usando o PCR em tempo real. Resultados: As PBMCs produziram IL-1β, IL-6, IL-10 e TGFβ em culturas após a estimulação com amastigotas. Os isolados de lesões cutâneas produziram quantidades semelhantes de IL-6, IL-10 e TGFβ quando comparados com isolados de lesões mucosas. Formas amastigotas obtidas de pacientes com leishmaniose cutânea induziram uma maior produção de IL-1β do que parasitos obtidos de lesões mucosas. A produção de IFNγ, IL-17, e TNF não foi detectada em todos os tempos avaliados, após a estimulação com amastigotas de L. (V.) braziliensis. Conclusão: Os resultados sugerem que formas amastigotas de pacientes com leishmaniose tegumentar interagem com células da imunidade inata, induzindo a produção de citocinas pró e anti inflamatórias, sendo que isolados oriundos de lesão mucosa induzem menos IL-1 do que parasitos obtidos de lesões cutâneas. A maior quantidade de IL-1 favorece uma resposta inflamatória com a migração de células para xv o local da infecção. Uma baixa produção dessa citocina faria com que a doença fosse mais lenta prejudicando a formação de uma resposta adquirida eficiente. Portanto, o parasito poderia ser capaz de sobreviver por um tempo maior no hospedeiro de uma maneira silenciosa, causando a forma mucosa.

Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandarego@gmail.com) on 2016-12-21T14:48:29Z No. of bitstreams: 1 Tese_ICS_Eliane Pereira Menezes.pdf: 18598624 bytes, checksum: e2cc868d4bb1be2b815801b4f4db02b8 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-21T14:48:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_ICS_Eliane Pereira Menezes.pdf: 18598624 bytes, checksum: e2cc868d4bb1be2b815801b4f4db02b8 (MD5) / Estudos mais recentes mostraram uma complexidade da resposta imune e diferentes tipos celulares estão envolvidos na imunoregulação de diversas doenças, incluindo a leishmaniose. Sendo assim, o tipo de resposta imune do hospedeiro infectado é determinado pelo padrão de citocinas produzidas pelos linfócitos T CD4+. A resposta imune Th1 é principalmente representada pela produção de INF-y, IL-2, TNF- e corresponde a denominada imunidade celular que auxilia a resposta efetora de outros linfócitos T CD4+, T CD8+ citotóxicos e macrófagos. A resposta imune Th2 está relacionada com a produção de IL-4, IL-5 e IL-10 e estimulação de linfócitos B na síntese de anticorpos IgG1, IgG4 e IgE, ativação de eosinófilos e mastócitos. As células T regulatórias suprimem ambos os tipos de resposta através de contato celular e pela produção de citocinas como IL-10 e TGF-b. Diversos estudos têm demonstrado uma influência genética em muitas doenças complexas, usando escaneamento de genoma e estudos de associação. Inicialmente diversos estudos mostraram associação entre doenças infecciosas, incluindo a leishmaniose e HLA. Posteriormente, a observação de polimorfismos genéticos em genes de citocinas, quimiocinas, receptores celulares, fatores de transcrição e diversos produtos que influenciam direta ou indiretamente a resposta imune, gerou diversos estudos associando esses polimorfismos com doenças. Por exemplo, um polimorfismo na posição -308, com mutação de G por A, no gene de TNF- , foi demonstrado que induzia a produção de níveis mais elevados dessa citocina e tem sido associado com várias doenças, incluindo leishmaniose cutânea (LC), mucosa (LM) e visceral (LV). No presente trabalho, avaliamos alguns polimorfismos funcionais em genes que codificam produtos relacionados à resposta imune com o objetivo de investigar se fatores genéticos relacionados com o controle da resposta imune influenciam o curso da infecção por Leishmania. Dois tipos de análises foram realizados: 1) Um estudo tipo caso-controle com objetivo de comparar as freqüências alélicas dos genes de IL- 6, linfotoxina- e MCP-1 em quatro grupos de 60 indivíduos cada: LM, LC, controle de vizinhança sem doença (“aparentemente normal”) (CN) e controle DTH+; 2) Um estudo baseado em família (FBAT) para confirmar as associações encontradas no estudo caso-controle. O estudo caso-controle demonstrou: 1) Alta freqüência do alelo C de IL-6 -174 G/C em LM quando comparado com LC e CN. A análise de FBAT confirmou a associação entre o alelo C e LM tanto no modelo aditivo (z=4.295, p=0.000017) como no modelo dominante (z=4.325, p=0.000015); 2) Uma freqüência alta do alelo G de linfotoxina- +252 G/A em LM quando comparado com LC, não sendo essa associação confirmada pelo estudo de famílias: 3) Uma freqüência alta do alelo G de CCL2/MCP-1 -2518 A/G em LM quando comparado com CN (OR=2.3; p=0.0078; 95% CI 1.3-4.1). O teste de FBAT confirmou a associação do alelo G de MCP-1 com LM no modelo recessivo (z=2.69, p=0.007). Esse estudo demonstrou uma associação entre os polimorfismos de genes que induzem a resposta inflamatória com a LM, sugerindo que eles podem influenciar o curso clínico da leishmaniose. Esta tese inclui 3 artigos originais e um capítulo de livro.

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-04-18T14:57:11Z No. of bitstreams: 2 Tese - Clayson Moura Gomes - 2015.pdf: 2080474 bytes, checksum: e53c02c9eac98545d091fb13331c2b9a (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-04-18T14:58:58Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Clayson Moura Gomes - 2015.pdf: 2080474 bytes, checksum: e53c02c9eac98545d091fb13331c2b9a (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-18T14:58:58Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese - Clayson Moura Gomes - 2015.pdf: 2080474 bytes, checksum: e53c02c9eac98545d091fb13331c2b9a (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2015-08-05 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Leishmaniasis are zoonoses present in several countries, being Leishmania (Viannia) braziliensis the main parasite that causes localized cutaneous (LCL) and / or mucous leishmaniasis (LM) in Brazil. It is not clear yet which factors favor the development of the mucosal form of the disease. The aim of this study was to evaluate the profile of experimental leishmaniasis in wild type mice and mice lacking the IFN, inos or gp91phox genes, after infection with L. (V.) braziliensis amastigotes isolated from patients with LCL or LM. Mice were inoculated with different amount of amastigote parasites in the foot paw and lesion development was measured weekly. Histopathological analyses were performed in hematoxilin eosin stained slides. The number of parasites present in the infected foot paw, lymph node and spleen during infection was estimated by the limiting dilution assay. It was observed that IFNγ or Phox KO mice infected with amastigotes isolated from LCL patients develop lesion earlier than mice infected with amastigotes from LM patients. iNOS KO mice infected with 1000 amastigotes isolated from LM patients developed greater lesion and more severe inflammation than mice infected with parasites from LCL at the 5th week. The IFNγ, iNOS and gp91phox mice had similar parasite number in the infected foot paw after infection with LM or LCL parasites .The parasite burden in lymph node and spleen was higher after infection with parasites from LM than LCL patients. The low ability of human macrophages to produce sufficient amount of NO can favor survive of LM parasites. Additionally, the increased ability of LM parasite to disseminate will facilitate migration to mucosal tissue to promote the mucosal disease. / As leishmanioses são zoonoses presentes em vários países do mundo, sendo Leishmania (Viania) braziliensis o parasito que causa a leishmaniose cutânea e/ou a leishmaniose mucosa no Brasil. Ainda não são claros os fatores que favorecem o desenvolvimento da forma mucosa da doença, porém é possível que fatores presentes nos parasitos sejam responsáveis pelo aparecimento de lesões mucosas. O objetivo deste estudo foi avaliar o perfil imunopatológico da leishmaniose experimental em camundongos do tipo selvagem e também em deficientes nos genes de IFN, inos ou gp91phox após a infecção com amastigotas de L. (V.) braziliensis isoladas de pacientes com leishmaniose cutânea localizada (LCL) ou leishmaniose mucosa (LM). Foram inoculadas diferentes quantidades de parasitos na pata dos camundongos e a progressão da lesão foi mensurada semanalmente. A análise histopatológica da lesão foi feita em lâminas coradas com hematoxilina e eosina. O número de parasitos presentes na pata infectada, linfonodo e baço dos animais infectados foi estimado pelo método de diluição limitante. Observou-se que os camundongos desprovidos de IFN ou phox infectados com amastigotas isoladas de pacientes com LCL desenvolveram a lesão mais precocemente do que camundongos infectados com amastigotas isoladas de pacientes com LM. A infecção de camundongos desprovidos de iNOS com 1000 amastigotas de pacientes com LM desencadeou uma lesão maior e com uma inflamação mais severa que aquela causada por parasitos de pacientes com LCL a partir da 5a semana. Animais deficientes de IFN, iNOS e gp91phox possuíam um número similar de parasitos na pata infectada, independente dos parasitos serem oriundos de pacientes com LCL ou LM. Nos linfonodos e baço foi observado mais parasitos quando os animais eram infectados com amastigotas de pacientes com LM. A pequena habilidade dos macrófagos humanos de produzir uma quantidade suficiente de NO pode favorecer a sobrevida de parasitos oriundos de LM. Além disso, o aumento da habilidade de parasitos de LM em se disseminar facilitaria a migração para os tecidos mucosos e promoveriam a doença na mucosa.

Submitted by Éder Freyre (ederfreyre@icict.fiocruz.br) on 2013-12-09T16:58:26Z No. of bitstreams: 1 Doutorado_Joao_Sores_Moreira.pdf: 1252428 bytes, checksum: d2d5a3f0a0354c9fe3d2c250c315377d (MD5) / Submitted by Éder Freyre (ederfreyre@icict.fiocruz.br) on 2013-12-09T17:10:36Z No. of bitstreams: 1 Doutorado_Joao_Sores_Moreira.pdf: 1252428 bytes, checksum: d2d5a3f0a0354c9fe3d2c250c315377d (MD5) / Approved for entry into archive by Paulo Marques(pmarques@fiocruz.br) on 2013-12-09T17:11:07Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Doutorado_Joao_Sores_Moreira.pdf: 1252428 bytes, checksum: d2d5a3f0a0354c9fe3d2c250c315377d (MD5) / Made available in DSpace on 2013-12-09T17:12:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Doutorado_Joao_Sores_Moreira.pdf: 1252428 bytes, checksum: d2d5a3f0a0354c9fe3d2c250c315377d (MD5) Previous issue date: 2011 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Pesquisa Clínica Evandro Chagas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. / Os antimoniais pentavalentesem doses de 10 a 20mg Sb 5+ /kg/dia continuam sendo o tratamento de escolha para a leishmaniose tegumentar americana (LTA), apesar dos relatos de baixa efetividade e de elevado número de efeitos adversos, inclusive óbito. Este estudo teve como objetivo descrever a efetividade e a segurança do antimoniato de meglumina 5mg Sb 5+ /Kg/dia no tratamento de pacientes com a forma mucosa ou mucocutânea (LM/LMC) da LTA, ao longo de dezesseis anos, no Instituto de Pesquisa Clínica Evandro Chagas (IPEC), Fundação Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, Brasil. Foi realizado um estudo descritivo e retrospectivo, tipo série de casos acompanhados longitudinalmente. Os dadosforam obtidos dos prontuários dos pacientes com LM/LMC atendidos no Serviço de Otorrinolaringologia do IPEC entre 1º de janeiro de 1989 e 31 de dezembro de 2004 e tratados com baixa dose de antimoniato de meglumina, de forma contínua ou intermitente (em séries com intervalos de descanso). Dos 1667 pacientes com LTA tratados nesse período, 148 (8,9%) apresentavam LM/LMC. Destes, 98 (66,2%) tratados com antimoniato de meglumina 5mg Sb 5+ /Kg/dia foram incluídos neste estudo. A maioria dos pacientes eram homens que desempenhavam atividades de risco para LTA na região Sudeste do Brasil. A apresentação clínica mais frequente foi a forma mucosa tardia com acometimento nasal. Os pacientes submetidos ao tratamento em séries eram na maioria mais velhos e, possivelmente, com mais co-morbidades. Ambos os esquemas terapêuticos apresentaram boa efetividade com reduzido número de efeitos adversos. Mesmo nos pacientes com necessidade de retratamento, estes esquemas se mantiveram bem tolerados e eficazes. Os pacientes que foram tratados com anfotericina B ou alta dose de antimoniato de meglumina após o tratamento com baixa dose, responderam adequadamente. O tratamento com antimoniato de meglumina 5mg Sb 5+ /Kg/dia se mostrou efetivo e bem tolerado no tratamento da LM/LMC, com 91,7% de cura, mesmo que tendo sido necessário mais de um tratamento. / Pentavalent antimonials in 10 to 20mg Sb 5+ /kg/day doses are still the first drug of choice for American tegumentary leishmanisis (ATL) treatment despite reports of low efficiency and high number of adverse effects,including death. This study aims at describing the efficiency and safety of 5mg Sb 5+ /Kg/day of meglumine antimoniate in treating patients with mucous or mucocutaneous (ML/MCL) ATL over sixteen years at the Evandro Chagas Clinical Research Institute (IPEC), Oswaldo Cruz Foundation, Rio de Janeiro, Brasil. A retrospective and descriptive studywas conducted with a longitudinal surveillance of a series of cases. Datawere obtained from medical records of patients with ML/ MCL treated at IPEC Otorhinolaringology Department between January 1 st, 1989 and December 31, 2004 with low doses of meglumine antimoniate applied continuously or intermittently (in series with rest intervals). From a total of 1667 patients with ATL treated over that period, 148 (8.9%) presented ML/MCL. From those, 98 (66.2%) treated with 5mg Sb 5+ /Kg/day of meglumine antimoniate were included in the present study. Most patients were men who performed activitieswith risk for ATL in Southeastern Brazil. The most frequent clinical presentation was late mucousal impairment with nasal involvement. Patients undergoing serial treatment were mostly older and possibly with more co-morbidities.Both therapeutic plans presented good efficiency with few adverse effects. Even in patients needing retreatment, these therapeutic plans were well tolerated and efficient. Patients treated with anphotericin B or high dose of meglumine antimoniate,after treatment with low dose, presented an adequate response. Treatment of ML/MCL with 5mg Sb 5+ /Kg/day meglumine antimoniate was effective and well tolerated, with 91.7% healing, even when more than one treatment was needed.

Leishmanioses são doenças causadas por protozoários do gênero Leishmania e se apresentam sob forma tegumentar ou visceral. No Brasil, a leishmaniose tegumentar americana (LTA) é causada, na sua maioria, por Leishmania (Viannia) braziliensis e conhecem-se principalmente as formas cutânea (LC), mucosa (LM) e disseminada (LD) da doença. Na LTA as formas clínicas tem sido atribuídas a diferenças na resposta imune do hospedeiro, mas recentemente vinculam-se também à variabilidade intraespecífica da L. (V.) braziliensis. Neste estudo avaliamos se haveria variabilidade biológica nos isolados de L. (V.) braziliensis, provenientes de pacientes com LC, LM e LD, principalmente em resposta a fator de crescimento insulina-símile-I (IGF-I). Os fatores de crescimento do hospedeiro tem sido alvo de estudos no desenvolvimento das leishmanioses, sendo IGF-I um deles. Havíamos demonstrado em estudos anteriores, utilizando Leishmania (Leishmania) amazonensis, que IGF-I induz proliferação, aumentando a atividade da arginase, com geração de poliaminas e diminuindo a síntese de óxido nítrico. No presente estudo analisamos o efeito de IGF-I em L.(V.) braziliensis, espécie prevalente no Brasil. Avaliamos inicialmente as características dos diferentes isolados enquanto promastigota e no prosseguimento enquanto amastigota em células de linhagem monocítica humana THP-1, com e sem estímulo de IGF-I. Nossos dados sugerem que há diferenças na atividade da arginase basal entre os isolados de L. (V.) braziliensis, sendo maior naqueles provenientes de pacientes com LM. IGF-I aumentou a atividade da arginase nos isolados de LC e LD, mas não de LM. Nos isolados em forma amastigota nas células de linhagem monocítica humana THP-1, o efeito de IGF-I foi de aumento do parasitismo nos isolados de LC e LM e de diminuição com os de LD. Nos isolados de LD a atividade da arginase basal foi menor que nos de LC. Por outro lado, a produção de óxido nítrico tendeu a ser maior em isolados de LD quando sob estímulo de IGF-I. Os dados sugerem que diferenças nas características biológicas dos parasitos podem contribuir na apresentação clínica dos casos da LTA. / Leishmaniasis are diseases caused by protozoa of the genus Leishmania that may manifest as cutaneous or visceral disease. In Brazil, American tegumentary leishmaniasis (ATL) is caused mostly by Leishmania (Viannia) braziliensis and cutaneous (CL), mucosal (ML) and disseminated (DL) forms of the disease are known.The diversity of clinical manifestations has been attributed to differences in the host immune response, but recently it has also been related to intraspecific variability of L. (V.) braziliensis. In the present study we evaluated whether there were biological variability in different isolates of L. (V.) braziliensis from patients with CL, ML, and DL, mainly in response to insulin-like growth factor-I (IGF-I). Growth factors of the host have been investigated in the development of leishmaniasis including IGF-I. In previous studies using Leishmania (Leishmania) amazonensis IGF-I was shown to induce proliferation, to increase the activity of arginase, generating polyamines and to decrease the synthesis of nitric oxide. In this study we analyzed the effect of IGF-I in L. (V.) braziliensis, a species prevalent in Brazil. Initially we evaluated the characteristics of individual isolates as promastigote and further as amastigote within human macrophage cell line THP-1 with and without IGF-I stimulation. Our data suggest that there are differences in the basal arginase activity amongst isolates of L. (V.) braziliensis, being higher in those from patients with ML. IGF-I increased the activity of arginase in the isolates of CL and DL, but not of ML. In isolates in the form of amastigotes within THP-1 cells, IGF-I induced the increase of parasitism of isolates from CL and ML, and decrease of those from DL. In isolates of DL the basal arginase activity was lower than in those of CL. Moreover, the production of nitric oxide tended to be higher with isolates of DL upon IGF-I stimulation. The data suggest that differences in the biological characteristics of parasites may contribute to the diversity of clinical presentation of ATL.

Leishmanioses são doenças causadas por protozoários do gênero Leishmania e se apresentam sob forma tegumentar ou visceral. No Brasil, a leishmaniose tegumentar americana (LTA) é causada, na sua maioria, por Leishmania (Viannia) braziliensis e conhecem-se principalmente as formas cutânea (LC), mucosa (LM) e disseminada (LD) da doença. Na LTA as formas clínicas tem sido atribuídas a diferenças na resposta imune do hospedeiro, mas recentemente vinculam-se também à variabilidade intraespecífica da L. (V.) braziliensis. Neste estudo avaliamos se haveria variabilidade biológica nos isolados de L. (V.) braziliensis, provenientes de pacientes com LC, LM e LD, principalmente em resposta a fator de crescimento insulina-símile-I (IGF-I). Os fatores de crescimento do hospedeiro tem sido alvo de estudos no desenvolvimento das leishmanioses, sendo IGF-I um deles. Havíamos demonstrado em estudos anteriores, utilizando Leishmania (Leishmania) amazonensis, que IGF-I induz proliferação, aumentando a atividade da arginase, com geração de poliaminas e diminuindo a síntese de óxido nítrico. No presente estudo analisamos o efeito de IGF-I em L.(V.) braziliensis, espécie prevalente no Brasil. Avaliamos inicialmente as características dos diferentes isolados enquanto promastigota e no prosseguimento enquanto amastigota em células de linhagem monocítica humana THP-1, com e sem estímulo de IGF-I. Nossos dados sugerem que há diferenças na atividade da arginase basal entre os isolados de L. (V.) braziliensis, sendo maior naqueles provenientes de pacientes com LM. IGF-I aumentou a atividade da arginase nos isolados de LC e LD, mas não de LM. Nos isolados em forma amastigota nas células de linhagem monocítica humana THP-1, o efeito de IGF-I foi de aumento do parasitismo nos isolados de LC e LM e de diminuição com os de LD. Nos isolados de LD a atividade da arginase basal foi menor que nos de LC. Por outro lado, a produção de óxido nítrico tendeu a ser maior em isolados de LD quando sob estímulo de IGF-I. Os dados sugerem que diferenças nas características biológicas dos parasitos podem contribuir na apresentação clínica dos casos da LTA. / Leishmaniasis are diseases caused by protozoa of the genus Leishmania that may manifest as cutaneous or visceral disease. In Brazil, American tegumentary leishmaniasis (ATL) is caused mostly by Leishmania (Viannia) braziliensis and cutaneous (CL), mucosal (ML) and disseminated (DL) forms of the disease are known.The diversity of clinical manifestations has been attributed to differences in the host immune response, but recently it has also been related to intraspecific variability of L. (V.) braziliensis. In the present study we evaluated whether there were biological variability in different isolates of L. (V.) braziliensis from patients with CL, ML, and DL, mainly in response to insulin-like growth factor-I (IGF-I). Growth factors of the host have been investigated in the development of leishmaniasis including IGF-I. In previous studies using Leishmania (Leishmania) amazonensis IGF-I was shown to induce proliferation, to increase the activity of arginase, generating polyamines and to decrease the synthesis of nitric oxide. In this study we analyzed the effect of IGF-I in L. (V.) braziliensis, a species prevalent in Brazil. Initially we evaluated the characteristics of individual isolates as promastigote and further as amastigote within human macrophage cell line THP-1 with and without IGF-I stimulation. Our data suggest that there are differences in the basal arginase activity amongst isolates of L. (V.) braziliensis, being higher in those from patients with ML. IGF-I increased the activity of arginase in the isolates of CL and DL, but not of ML. In isolates in the form of amastigotes within THP-1 cells, IGF-I induced the increase of parasitism of isolates from CL and ML, and decrease of those from DL. In isolates of DL the basal arginase activity was lower than in those of CL. Moreover, the production of nitric oxide tended to be higher with isolates of DL upon IGF-I stimulation. The data suggest that differences in the biological characteristics of parasites may contribute to the diversity of clinical presentation of ATL.