Dentre os vários fatores que podem influenciar a polarização das respostas imunológicas nos animais destacam-se o tipo do agente agressor envolvido, as células apresentadoras de antígenos atuantes no processo e o microambiente formado pelas citocinas. Diferentes perfis de citocinas podem determinar o curso da doença, uma vez que distúrbios no equilíbrio da produção e liberação destes polipeptídeos têm papel significativo no desencadeamento e agravamento de diversas enfermidades. Vírus podem interferir com as funções das citocinas em vários níveis, influenciando na natureza da resposta imune do hospedeiro. Este desequilíbrio entre a produção de citocinas do tipo Th1 e Th2 é geralmente considerado como uma das causas da cronificação das infecções por retrovírus. O VLB, assim como outros retrovírus, também possui esta capacidade de manipular a resposta imune do hospedeiro a fim de direcionar os estágios alinfocitóticos (AL) e de linfocitose persistente (LP). No entanto, seu efeito diretamente sobre as citocinas no sangue e leite dos animais infectados ainda não foi completamente elucidado. Desta forma, o presente estudo objetivou a avaliação da resposta imune contra o VLB em vacas naturalmente infectadas por meio da quantificação de um perfil abrangente de citocinas presentes tanto no soro sanguíneo como no lácteo minimizados outros aspectos de estimulação que não fossem a presença do próprio vírus in vivo. Para tanto foram coletadas amostras de sangue e leite de 11 animais divididos em seus respectivos grupos experimentais (4, 3 e 4 animais para os grupos negativo, AL e LP, respectivamente) e determinadas as concentrações séricas e lácteas de IL-1β, IL-4, IL-10, TNF-α e IFN-γ. Para as comparações entre os grupos utilizou-se o teste não paramétrico de Kruskal-Wallis e quando estes apresentaramse significativos aplicou-se \"pós-teste\" para verificar onde tal diferença ocorreu. O nível de significância aplicado nos testes foi de 5 % (P≤0,05), sempre considerando hipóteses alternativas bicaudais. Verificou-se que não houve diferença nas concentrações das citocinas IL-1β, IL-4, IFN-γ e TNF-α no sangue dos animais pertencentes aos diferentes grupos experimentais. Quanto às concentrações das citocinas no soro lácteo dos bovinos testados nos diferentes grupos, os resultados demonstraram comportamentos semelhantes aos habitualmente descritos na literatura científica para o sangue periférico, sugerindo que a atuação do VLB sobre a glândula mamária promova interações análogas às observadas sistemicamente. Os resultados obtidos apontam para um envolvimento do VLB sobre o perfil de citocinas da glândula mamária nos animais sororreagentes. / Among the many factors that can influence the polarization of immune responses in animals include the type of the offending agent involved, the antigen-presenting cells active in the process and the microenvironment formed by the cytokine. Different profiles of cytokines may determine the course of the disease, since disturbances in the balance of production and release of these polypeptides play a significant role in triggering and worsening of many diseases. Viruses can interfere with the functions of cytokines at various levels, influencing the nature of the host immune response. This imbalance in cytokine production from Th1 and Th2 is generally regarded as a cause of chronic infections by retroviruses. The BLV, like other retroviruses, also possess this ability to manipulate the host immune response in order to drive the stages non-lymphocytotic and persistent lymphocytosis. However, its effect directly on cytokines in blood and milk of infected animals has not been fully elucidated. Thus, this study aimed at evaluating the immune response against the BLV in cows naturally infected by quantifying a comprehensive profile of cytokines present in both the serum and in whey minimized others aspects of stimulation that was not the presence of the virus itself in vivo. For this purpose, samples of blood and milk of 11 animals divided into their respective experimental groups (4, 3 and 4 animals for groups negative, PL- and PL+, respectively) and certain whey and serum concentrations of IL-1β, IL- 4, IL-10, TNF-α and IFN-γ. For comparisons between groups used the nonparametric Kruskal-Wallis test and when they showed up was applied to significant \"post test\" to see where this difference occurred. The level of significance in the tests was 5 % (P≤ 0.05), when considering two-tailed alternative hypotheses. There was no difference in the concentrations of IL-1β, IL-4, IFN-γ and TNF-α in the blood of animals belonging to the different experimental groups. The concentrations of cytokines in the whey of cattle in different groups, the results showed behaviors similar to those usually described in scientific literature to the peripheral blood, suggesting that the action of BLV on the mammary gland promotes interactions similar to those seen systemically. The results indicate an involvement of BLV on the cytokine profile of the mammary gland in animals seropositive.

A leucose bovina enzoótica (LBE) é uma enfermidade causada por um retrovírus que possui duas manifestações distintas em animais adultos, o linfossarcoma multicêntrico dos adultos e a linfocitose persistente (LP). O linfossarcoma multicêntrico dos adultos é caracterizado pela apresentação de tumores em diversos órgãos em bovinos com idade superior a dois anos. O presente trabalhou analisou o histórico clínico e os achados patológicos de 30 casos de leucose bovina enzoótica, diagnosticados de um total de 845 bovinos necropsiados no Setor de Patologia Veterinária da Universidade Federal do Rio Grande do Sul, entre o período de janeiro de 1999 a janeiro de 2011. Todos os bovinos afetados eram fêmeas de aptidão leiteira, com idade entre três e nove anos, sendo 27 da raça Holândes (90,0%), dois de raça mista (6,3%) e um Jersey (3,7%). Os principais sinais clínicos apresentados pelos bovinos foram alterações locomotoras caracterizadas por paresia progressiva dos membros, perda de peso, aumento do volume de linfonodos superficiais e exoftalmia. As lesões macroscópicas observadas eram caracterizadas por massas neoplásicas, de coloração branco-amareladas, acinzentadas ou róseas, encontradas nos linfonodos, coração, sobre a meninge da medula espinhal, abomaso, intestinos e rins. A infiltração tumoral sobre a meninge da medula espinhal foi observada em 24 animais, sendo que a região lombar (20/24) e cauda equina (11/24) foram frequentemente afetadas. Ocasionalmente as massas também foram observadas na região cervical (6/24), próximo à intumescência, e na região torácica (2/24). No exame histológico essas massas tumorais eram formadas por infiltrado difuso de linfócitos neoplásicos, sendo apresentada na maioria dos casos como células pequenas não clivadas. A ocorrência de linfossarcoma com infiltração na medula espinhal deve ser considerada no diagnóstico de enfermidades que cursam com alterações locomotoras em bovinos adultos de aptidão leiteira. / The enzootic bovine leukosis (EBL) is a disease caused by a retrovirus that has two distinct manifestations in adult animals, the multicentric lymphosarcoma and persistent lymphocytosis in adults (LP). The multicentric lymphosarcoma in adults is characterized by the presentation of tumors in various organs in cattle older than two years. This study analyzed the clinical history and pathological findings in 30 cases of EBL, diagnosed a total of 845 cattle necropsied in the Setor de Patologia Veterinária of Universidade Federal do Rio Grande do Sul, between the period January 1999 to January 2011. All affected cattle were dairy females, between three and nine years old, and 27 Holstein (90,0%), two cross breed (6,3%) and Jersey (3,7%). The main clinical signs shown by the cattle were changes, locomotor characterized by progressive paralysis of the limbs, weight loss, most prominently superficial lymph nodes and exophthalmus. The gross lesions were characterized by neoplasms masses, pale yellowish-white, grayish or pinkish, found in lymph nodes, heart, on the meninges of the spinal cord, abomasum, intestines and kidneys. The tumor infiltration on the meninges of the spinal cord was observed in 24 animals, and the lumbar (20/24) and cauda equina (11/24) were commonly affected. Occasionally, the masses were also observed in the cervical region (6/24), near the swelling, and in the thoracic region (2/24). In histological examination, these tumor masses were composed of diffuse infiltration of neoplastic lymphocytes, and in most cases presented as small noncleaved cells. The occurrence of lymphosarcoma infiltrating the spinal cord should be considered in the diagnosis of diseases which lead to changes in locomotor adult dairy cattle.

A leucose bovina enzoótica (LBE) é uma enfermidade causada por um retrovírus que possui duas manifestações distintas em animais adultos, o linfossarcoma multicêntrico dos adultos e a linfocitose persistente (LP). O linfossarcoma multicêntrico dos adultos é caracterizado pela apresentação de tumores em diversos órgãos em bovinos com idade superior a dois anos. O presente trabalhou analisou o histórico clínico e os achados patológicos de 30 casos de leucose bovina enzoótica, diagnosticados de um total de 845 bovinos necropsiados no Setor de Patologia Veterinária da Universidade Federal do Rio Grande do Sul, entre o período de janeiro de 1999 a janeiro de 2011. Todos os bovinos afetados eram fêmeas de aptidão leiteira, com idade entre três e nove anos, sendo 27 da raça Holândes (90,0%), dois de raça mista (6,3%) e um Jersey (3,7%). Os principais sinais clínicos apresentados pelos bovinos foram alterações locomotoras caracterizadas por paresia progressiva dos membros, perda de peso, aumento do volume de linfonodos superficiais e exoftalmia. As lesões macroscópicas observadas eram caracterizadas por massas neoplásicas, de coloração branco-amareladas, acinzentadas ou róseas, encontradas nos linfonodos, coração, sobre a meninge da medula espinhal, abomaso, intestinos e rins. A infiltração tumoral sobre a meninge da medula espinhal foi observada em 24 animais, sendo que a região lombar (20/24) e cauda equina (11/24) foram frequentemente afetadas. Ocasionalmente as massas também foram observadas na região cervical (6/24), próximo à intumescência, e na região torácica (2/24). No exame histológico essas massas tumorais eram formadas por infiltrado difuso de linfócitos neoplásicos, sendo apresentada na maioria dos casos como células pequenas não clivadas. A ocorrência de linfossarcoma com infiltração na medula espinhal deve ser considerada no diagnóstico de enfermidades que cursam com alterações locomotoras em bovinos adultos de aptidão leiteira. / The enzootic bovine leukosis (EBL) is a disease caused by a retrovirus that has two distinct manifestations in adult animals, the multicentric lymphosarcoma and persistent lymphocytosis in adults (LP). The multicentric lymphosarcoma in adults is characterized by the presentation of tumors in various organs in cattle older than two years. This study analyzed the clinical history and pathological findings in 30 cases of EBL, diagnosed a total of 845 cattle necropsied in the Setor de Patologia Veterinária of Universidade Federal do Rio Grande do Sul, between the period January 1999 to January 2011. All affected cattle were dairy females, between three and nine years old, and 27 Holstein (90,0%), two cross breed (6,3%) and Jersey (3,7%). The main clinical signs shown by the cattle were changes, locomotor characterized by progressive paralysis of the limbs, weight loss, most prominently superficial lymph nodes and exophthalmus. The gross lesions were characterized by neoplasms masses, pale yellowish-white, grayish or pinkish, found in lymph nodes, heart, on the meninges of the spinal cord, abomasum, intestines and kidneys. The tumor infiltration on the meninges of the spinal cord was observed in 24 animals, and the lumbar (20/24) and cauda equina (11/24) were commonly affected. Occasionally, the masses were also observed in the cervical region (6/24), near the swelling, and in the thoracic region (2/24). In histological examination, these tumor masses were composed of diffuse infiltration of neoplastic lymphocytes, and in most cases presented as small noncleaved cells. The occurrence of lymphosarcoma infiltrating the spinal cord should be considered in the diagnosis of diseases which lead to changes in locomotor adult dairy cattle.

A leucose bovina enzoótica (LBE) é uma enfermidade causada por um retrovírus que possui duas manifestações distintas em animais adultos, o linfossarcoma multicêntrico dos adultos e a linfocitose persistente (LP). O linfossarcoma multicêntrico dos adultos é caracterizado pela apresentação de tumores em diversos órgãos em bovinos com idade superior a dois anos. O presente trabalhou analisou o histórico clínico e os achados patológicos de 30 casos de leucose bovina enzoótica, diagnosticados de um total de 845 bovinos necropsiados no Setor de Patologia Veterinária da Universidade Federal do Rio Grande do Sul, entre o período de janeiro de 1999 a janeiro de 2011. Todos os bovinos afetados eram fêmeas de aptidão leiteira, com idade entre três e nove anos, sendo 27 da raça Holândes (90,0%), dois de raça mista (6,3%) e um Jersey (3,7%). Os principais sinais clínicos apresentados pelos bovinos foram alterações locomotoras caracterizadas por paresia progressiva dos membros, perda de peso, aumento do volume de linfonodos superficiais e exoftalmia. As lesões macroscópicas observadas eram caracterizadas por massas neoplásicas, de coloração branco-amareladas, acinzentadas ou róseas, encontradas nos linfonodos, coração, sobre a meninge da medula espinhal, abomaso, intestinos e rins. A infiltração tumoral sobre a meninge da medula espinhal foi observada em 24 animais, sendo que a região lombar (20/24) e cauda equina (11/24) foram frequentemente afetadas. Ocasionalmente as massas também foram observadas na região cervical (6/24), próximo à intumescência, e na região torácica (2/24). No exame histológico essas massas tumorais eram formadas por infiltrado difuso de linfócitos neoplásicos, sendo apresentada na maioria dos casos como células pequenas não clivadas. A ocorrência de linfossarcoma com infiltração na medula espinhal deve ser considerada no diagnóstico de enfermidades que cursam com alterações locomotoras em bovinos adultos de aptidão leiteira. / The enzootic bovine leukosis (EBL) is a disease caused by a retrovirus that has two distinct manifestations in adult animals, the multicentric lymphosarcoma and persistent lymphocytosis in adults (LP). The multicentric lymphosarcoma in adults is characterized by the presentation of tumors in various organs in cattle older than two years. This study analyzed the clinical history and pathological findings in 30 cases of EBL, diagnosed a total of 845 cattle necropsied in the Setor de Patologia Veterinária of Universidade Federal do Rio Grande do Sul, between the period January 1999 to January 2011. All affected cattle were dairy females, between three and nine years old, and 27 Holstein (90,0%), two cross breed (6,3%) and Jersey (3,7%). The main clinical signs shown by the cattle were changes, locomotor characterized by progressive paralysis of the limbs, weight loss, most prominently superficial lymph nodes and exophthalmus. The gross lesions were characterized by neoplasms masses, pale yellowish-white, grayish or pinkish, found in lymph nodes, heart, on the meninges of the spinal cord, abomasum, intestines and kidneys. The tumor infiltration on the meninges of the spinal cord was observed in 24 animals, and the lumbar (20/24) and cauda equina (11/24) were commonly affected. Occasionally, the masses were also observed in the cervical region (6/24), near the swelling, and in the thoracic region (2/24). In histological examination, these tumor masses were composed of diffuse infiltration of neoplastic lymphocytes, and in most cases presented as small noncleaved cells. The occurrence of lymphosarcoma infiltrating the spinal cord should be considered in the diagnosis of diseases which lead to changes in locomotor adult dairy cattle.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-08-25T13:44:17Z No. of bitstreams: 1 Emerson Israel Mendes.pdf: 640770 bytes, checksum: 26e1e2818afab37975939886d860c031 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-25T13:44:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Emerson Israel Mendes.pdf: 640770 bytes, checksum: 26e1e2818afab37975939886d860c031 (MD5) Previous issue date: 2009-02-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / This study was conducted to evaluate the complications of enzootic leukosis (EBL) and tuberculosis (TB) in dairy cattle herds in eight districts of the State of Pernambuco, from the establishment of the prevalence of bovine specific reagents for diagnostic tests and to verify the correlation between Enzootic leucosis, tuberculosis in cattle, the Leukocytes count and lymphocytes count between animals studied. We analyzed 662 serum samples from cattle raised in 15 dairy herds, distributed in eight municipalities of the State of Pernambuco, two of which located in Mesorregião Metropolitan of Recife, three in, five in Mesorregião of Agreste and four in Mesorregião of Sertão. 662 animals were tested serologically and hematology, the techniques of double Immunodiffusion in agarose gel (AGID) and the leucocyte count in the total and differential leukocytes, respectively, and 612 were evaluated allergic immune through the test for tuberculosis. The 15 herds examined, the prevalence of cattle that were positive to the tuberculin tests were AGID and 32.2% (213/662) and 14.1% (86/612), respectively. Most herds (86.6% - 13/15) contributed to the bovine reagent composition of these indices, especially high rates of 48.9% (22/45) and 30% (36/121) for TB and EBL respectively. Analyzing the correlation between variables total leukocytes and lymphocytes, we have total leukocyte is highly positively related with the variable lymphocytes (72%). The results obtained in this study, considering the analysis and interpretation of health aspects of leukemia and of bovine tuberculosis in herds examined, have concluded that the diseases studied, are widespread in the population studied, with significant levels of growth in leukemia and infection by bovine leukemia virus (VLB) and Mycobacterium bovis they are active and growing, with imminent risk of compromising the health of cattle herds, and the zoonotic nature of bovine tuberculosis, people who deal with cattle. / Foi realizado esse estudo com o objetivo de avaliar à intercorrência entre leucose enzoótica (LEB) e tuberculose (TB) em rebanhos bovinos leiteiros em oito municípios do Estado de Pernambuco, a partir do estabelecimento da prevalência de bovinos reagentes às provas diagnósticas específicas, bem como, verificar a correlação entre a Leucose Enzoótica, a Tuberculose dos Bovinos, a Leucometria e linfocitometria entre os bovinos estudados. Foram analisadas 662 amostras séricas de bovinos criados em 15 rebanhos leiteiros, distribuídos em oito Municípios do Estado de Pernambuco, dos quais dois localizados na Mesorregião Metropolitana do Recife, três na Mesorregião da Mata Pernambucana, cinco na Mesorregião Agreste Pernambucano e quatro na Mesorregião do Sertão Pernambucano. 662 animais foram analisados sorologicamente e hematologicamente, pelas técnicas de Imunodifusão dupla em gel de agarose (IDGA) e pelo leucograma com a contagem total e diferencial dos leucócitos, respectivamente, e 612 foram avaliados imunoalergicamente, através do teste detuberculinização. Nos 15 rebanhos examinados, as prevalências de bovinos que apresentaram positividade aos testes IDGA e tuberculina foram 32,2% (213/662) e 14,1% (86/612), respectivamente. A maioria dos rebanhos (86,6% - 13/15) contribuiu com bovinos reagentes para a composição destes índices, destacando-se taxas elevadas de 48,9% (22/45) e 30% (36/121) para LEB e TB, respectivamente. Analisando a correlação entre as variáveis leucócitos total e linfócitos, temos que leucócito total está altamente relacionado positivamente com a variável linfócitos (72%). Os resultados obtidos nesta pesquisa, considerando a análise e interpretação dos aspectos sanitários da leucose e da tuberculose dos bovinos nos rebanhos examinados, permitiram concluir que, as doenças estudadas encontram-se amplamente disseminadas na população avaliada, com crescimento em níveis significativos da leucose, e as infecções pelo vírus da leucose bovina (VLB) e Mycobacterium bovis encontram-se ativas e em expansão, com risco iminente do comprometimento da saúde dos rebanhos bovinos e, pelo caráter zoonótico da tuberculose bovina, das pessoas que lidam com os bovinos.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-10T16:24:10Z No. of bitstreams: 1 Hamilton Pereira Santos.pdf: 661343 bytes, checksum: 002eebd8b1e7c7b5293fde2164fb6317 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-10T16:24:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Hamilton Pereira Santos.pdf: 661343 bytes, checksum: 002eebd8b1e7c7b5293fde2164fb6317 (MD5) Previous issue date: 2010-02-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The Bovine Enzootic Leukosis (BL) is a disease caused by bovine leukemia virus (BLV), a Deltaretrovirus of the Retroviridae family, characterized by lymphocyte proliferation and lymphosarcoma, mainly distributed in dairy cattle. Based on national and international literature was found that all continents are affected by BLV, including Brazil. The state of Maranhão is characterized by intense trading of cattle from various regions of the country, where the presence of the EBL was found. This work aimed to study the prevalence and risk factors associated with EBL in the dairy herd of the state of Maranhao and the evaluation of a microimmunediffusion technique (micro-AGID) in agar gel for the diagnosis of EBL. In order to know the seroprevalence and risk factors associated with EBL, a total of 920 blood samples were collected from 92 dairy HZ breed cattle distributed in 23 municipalities of the five that make up the regional dairy farming country. For the diagnosis of EBL, the AGID was used to test (kit produced by the Technological Institute of Parana - TECPAR). The estimated prevalence was of 53.80% of seropositive animals, distributed in98.91% (91/92) of herds, mainly affecting animals over the age of 48 months (P <0.05). The Bacabal, Sao Luis and Pedreiras regionals presented higher seropositive frequencies (63.50%, 61.87, and 60.62%%) respectively; Imperatriz, intermediate (41.18%), and Açailândia, the lowest (30.83%) (P<0.05). All municipalities had seropositive animals, with frequencies ranging from 22.50% (San Francisco Brejao) to 75.00% (Bernardo do Mearim). When analyzing the variables studied as potential risk factors for EBL a statistically significant association (P <0.05) was found between seropositive for EBL and repeated use of the same needle for blood sampling or vaccination (Odds Ratio - OR=2.76; IC – 1,73 - 4,93), repeated use of the same obstetric glove (OR=1.74; IC – 1.2 a 2.49), animal housing (OR=1.97; IC – 1.28 – 3.02 ), and lack of veterinary care (OR=1.42; IC – 1.06 – 1.88), was found. Knowledge of BEL by farmers and the purchase of animals from other farms for breeding did not interfere in seroreactivity to BEL (OR=1.09; IC – 0.82 – 1.44 and OR=0.88; IC – 0.57 – 1.36, respectively) (P> 0.05). In order to improve the development of a diagnostic test for EBL,micro-gel immuno-Agarose (micro-AGID) was used with simple protocol for obtaining the antigen compared to a macro-AGID. A total of 450 serum samples from 92 properties in 23 counties that make up the dairy state of Maranhao were used. The antigen used in micro-AGID was obtained by dialysis of supernatant of FLK cells infected by BLV against the polyethylenogricol. In micro-AGID 10 μl of antigen and positive serum control was used and 30 μl of test serum, in the macro-AGID 25 μl of all reagents wereused. This produced by the Technological Institute of Parana (TECPAR). Of the sera compared, 259 (57.56%) and 245 (54.44%) showed positive results in micro-AGID and macro-AGID, respectively. There was a very good agreement between both techniques (K = 0.91), with sensitivity and specificity of the macro-AGID for micro-AGID of 93.43% and 98.43% with an accuracy of 95.96%. Micro-AGID showed clearer lines than those observed in the macro-AGID and reading can be made 24 hours before the macro-AGID. It is concluded that micro-AGID can be used successfully in the serological diagnosis of EBL, with the advantage of greater speed in issuing the results and obtaining the antigen with a simple technique. / A Leucose Enzoótica Bovina (LEB) é uma doença causada por um Deltaretrovirus da família Retroviridae, caracterizada por proliferação linfocitária e/ou formação de linfosarcomas, principalmente distribuída em bovinos leiteiros. O vírus da LEB está presente em todos os continentes. No Brasil foram encontrados 27,6% do rebanho leiteiro, infectado. O Estado do Maranhão se caracteriza por intensa comercialização de bovinos de várias regiões do país, onde foi constatada a presença da LEB. Neste trabalho se teve como objetivos, estudar a soroprevalência e fatores de riscos associado à LEB na Bacia Leiteira do Estado do Maranhão e aperfeiçoar técnica de imunodifusão em gel de agar (IDGA) para diagnóstico da LEB. Assim foram coletadas 920 amostras sanguíneas de 92 rebanhos leiteiros da raça Girolanda distribuídos em 23 municípios das cinco Regionais que compõem a bacia leiteira do Estado. Para o diagnóstico da LEB foi utilizada a prova de Imunodifusão em Gel deÁgar (IDGA). A prevalência estimada foi de 53,80% de animais sororeagentes, distribuídos em98,91% (91/92) dos rebanhos estudados, afetando principalmente animais de idade superior aos 48 meses (P<0,05). As Regionais Bacabal, São Luís e Pedreira apresentaram as freqüências de sororeatividade mais elevadas (63,50%, 61,87,% e 60,62%, respectivamente); Imperatriz, intermediária (41,18%); e Açailândia, a mais baixa (30,83%) (P<0,05). Todos os municípios apresentaram animais sororeagentes, com freqüências variando de 22,50% (São Francisco do Brejão) a 75,00% (Bernardo do Mearim). Ao se analisar as variáveis estudadas como potenciais fatores de risco para LEB foi verificada associação estatisticamente significativa (P<0,05) entre sororeagentes para LEB e uso repetido da mesma agulha para colheita de sangue ou vacinação (Odds Ratio – OR = 2,76; IC – 1,73 - 4,93), uso repetido da mesma luva obstétrica (OR=1,74; IC - 1,2 a 2,49), estabulação dos animais (OR=1,97; IC – 1,28 – 3,02) e ausência de assistência Veterinária (OR=1,42; IC – 1,06 – 1,88). O conhecimento da LEB pelos criadores e a aquisição de animais de outras criações parareprodução não interferiu na sororeatividade para LEB (OR=1,09; IC – 0,82 – 1,44 e OR=0,88; IC – 0,57 – 1,36, respectivamente) (P>0,05). Para aperfeiçoamento de uma prova de diagnóstico para LEB, utilizou-se a micro-imunodifusão em gel de agarose (micro-IDGA) usou-se protocolo simples para obtenção do antígeno comparativamente a uma macro-IDGA. Foram utilizadas 450 amostras de soro bovino provenientes de 92 propriedades dos 23 municípios que compõem a bacia leiteira do estado do Maranhão. O antígeno usado na micro-IDGA foi obtido por diálise frente ao polietilenogricol de sobrenadante de células FLK infectadas pelo VLEB. Na micro-IDGA utilizou-se 10 μl de antígeno e soro controle positivoe 30 μl do soro teste; na macro-IDGA 25 μl de todos os reagentes, produzidos pelo Instituto Tecnológico do Paraná (TECPAR). Dos soros comparados, 259 (57,56%) e 245 (54,44%) apresentaram resultados positivos na micro-IDGA e macro-IDGA, respectivamente. Houve ótima concordância entre as duas técnicas (K=0,91), com sensibilidade e especificidade da macro-IDGA em relação a micro-IDGA de 93,43% e 98,43%. A micro-IDGA apresentou linhas mais claras do que as observadas na macro-IDGA e a leitura pode ser feita 24 horas antes da macro-IDGA. Conclui-se que a micro-IDGA pode substituir a macro-IDGA no diagnóstico sorológico da LEB, com a vantagem de maior rapidez na emissão dos resultados e da obtenção do antígeno com técnica simples.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-18T13:39:28Z No. of bitstreams: 1 Luiz Carlos Fontes Baptista Filho.pdf: 748065 bytes, checksum: c624b21e9ec70bfdd8c60bd08dac6e9f (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-18T13:39:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Luiz Carlos Fontes Baptista Filho.pdf: 748065 bytes, checksum: c624b21e9ec70bfdd8c60bd08dac6e9f (MD5) Previous issue date: 2012-03-17 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Enzootic Leukosis (EBL) and Bovine Tuberculosis (BT) compromise the immune status of the herds, especially the immunosuppressive potential of bovine leukosis virus (BLV). Several factors interfere with leukocyte values of cattle, but little is known about the effects of BT on them. The aim with the study was to evaluate the leukogram of tuberculinized cattle, with a view to the use of leukocytes as an epidemiologic tool in combating EBL in dairy herds of Pernambuco. 1.000 serum samples from 33 herds of cattle coming from various municipalities in the state were submitted to the serodiagnosis of EBL (AGID), being 920 cattle previously tuberculinized by the simultaneously comparative technique (SCT). Blood smears were prepared of all tuberculinized cattle, and the total and differential leukocyte count was performed using conventional techniques. The evaluation of the influence of BT in leukocyte counts was performed by comparing the results of four experimental groups, according to the results of the AGID and SCT (gTB group - 41 to the positive SCT; group gLEB - the 151 AGID positive, group gNEG - 379 to the negative TSC and AGID, group gINT - 43 positive to both tests). The prevalence rates of TB and LEB were, respectively, 11% (99/920) and 28% (282/1000), with 88% (29/33) of herds contributing at least one animal positive for one or both tests. From the 920 cattle examined, 43 (4,7%) were positive to both tests simultaneously. The mean values of leukocytes and lymphocytes (x 103/mm3 of blood) of the experimental groups were, respectively: gTB 9,6 ± 2,5 and 5,9 ± 1,9; gLEB 13,3 ± 6,3 and 9,1 ± 6,0; gNEG 11,5 ± 3,8 and 7,6 ± 5,1; and gINT 11,8 ± 4,3 and 8,0 ± 3,5. There were significant differences (p<0,05) between leukocytes and lymphocytes, when confronted gTB group (lower values) and gLEB (higher values) with the gNEG group, while gINT group did not differ (p>0,05) in none of the parameters analyzed in relation to the group gNEG. It is concluded that the leukogram is influenced by bovine BT, and health programs to combat LEB in dairy herds in the state of Pernambuco, and include the white blood cell count as an epidemiologic tool wish to consider the strategic prior tuberculin test the herds involved, being discarded cattle that are experiencing imunoalergic test positivity. / Leucose Enzoótica (LEB) e Tuberculose bovina (TB) comprometem o estado imunitário dos rebanhos, especialmente pelo potencial imunodepressor do Vírus da Leucose Bovina (VLB). Inúmeros fatores interferem nos valores leucométricos dos bovinos, porém, pouco se sabe dos efeitos da TB sobre os mesmos. O objetivo com o estudo foi avaliar o leucograma de bovinos tuberculizados, com vista ao uso da leucometria como ferramenta epidemiológica no combate à LEB em rebanhos leiteiros de Pernambuco. Amostras séricas de 1.000 bovinos procedentes de 33 rebanhos de diversos municípios do estado foram submetidas ao sorodiagnóstico da LEB (IDGA), sendo 920 bovinos previamente tuberculinizados pela técnica simultânea comparada (TSC). Esfregaços sanguíneos foram confeccionados de todos os bovinos tuberculinizados, sendo a contagem total e diferencial dos leucócitos realizada usando técnicas convencionais. A avaliação da influência da TB no leucograma foi realizada pelo confronto dos resultados de quatro grupos experimentais, em função dos resultados da IDGA e TSC (grupo gTB - 41 positivos ao TSC; grupo gLEB - 151 positivos à IDGA; grupo gNEG - 379 negativos ao TSC e IDGA; grupo gINT - 43 positivos a ambos os testes). As taxas de prevalência da TB e da LEB foram, respectivamente, 11% (99/920) e 28% (282/1000), com 88% (29/33) dos rebanhos contribuindo com ao menos um animal positivo para um ou ambos os testes. Dos 920 bovinos examinados, 43 (4,7%) apresentaram positividade simultânea a ambos os testes. Os valores médios dos leucócitos e linfócitos (x 103/mm3 de sangue) dos grupos experimentais foram, respectivamente: gTB 9,6 ± 2,5 e 5,9 ± 1,9; gLEB 13,3 ± 6,3 e 9,1 ± 6,0; gNEG 11,5 ± 3,8 e 7,6 ± 5,1; e gINT 11,8 ± 4,3 e 8,0 ± 3,5. Houve diferença significativa (p<0,05) entre os leucócitos e linfócitos, quando confrontados os grupos gTB (valores menores) e gLEB (valores maiores) com o grupo gNEG, enquanto o grupo gINT não diferiu (p>0,05) em nenhum dos parâmetros analisados em relação ao grupo gNEG. Conclui-se que o leucograma dos bovinos sofre influência da TB, devendo programas sanitários de combate à LEB em rebanhos leiteiros do estado de Pernambuco e que incluam a leucometria como ferramenta epidemiológica estratégica preconizar a prévia tuberculinização dos rebanhos envolvidos, sendo descartados os bovinos que apresentarem positividade ao teste imunoalérgico.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2018-03-09T13:59:06Z No. of bitstreams: 1 Luiz Carlos Fontes Baptista Filho.pdf: 1860534 bytes, checksum: f341ae75df7ad5c7e6deb23b92d3052c (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-09T13:59:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Luiz Carlos Fontes Baptista Filho.pdf: 1860534 bytes, checksum: f341ae75df7ad5c7e6deb23b92d3052c (MD5) Previous issue date: 2016-02-16 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Enzootic Bovine Leukosis (EBL) and Bovine Tuberculosis (BT) are infectious diseases that cause great losses to the dairy industry due to the discard of animals, carcasses condemnation and veterinary services. The aim with this work was to evaluate the performance of a commercial imported (IDEXX®) enzyme linked immunoassay kits (ELISA) on the diagnosis and control of EBL and BT in dairy cattle naturally infected raised in the state of Pernambuco. The ELISA has being tested for assisting the diagnosis of both diseases, with the purpose of increasing the results sensitivity. While the efforts aim progressively to replacement of the agar gel immunodiffusion (AGID) for a more sensitive technique on the EBL diagnosis, about the BT the technique could be used in conjunction with the tuberculin test for the detection of animals at different stages of the immune response to the etiological agent. Blood serum samples from 327 dairy herds in the state of Pernambuco were subjected to AGID and commercial imported ELISA CHEKIT-leucosis-serum, produced by IDEXX® laboratory, for the diagnosis of EBL. 25 samples that resulted inconclusive to one or both tests were discarded. 302 samples were examined, resulting positive 24.1% (73/302) in the AGID and 45% (136/302) in the ELISA. The lack of agreement between the diagnostic methods was probably due to the high sensitivity of ELISA, which detects antibodies even in situations with low serum levels. The ELISA in relation to the AGID, considered the standard technique, had a sensitivity of 98.6%, specificity of 72% and Kappa 0.55. About the TB diagnosis, 379 cattle were tested for cervical compared test (CCT) and had blood serum samples examined for identification of anti-Mycobacterium bovis antibodies throught the ELISA kit IDEXX® M. bovis Ab Test. From the 379 cattle examined, 16 (4.2%) were positive to CCT and 10 (2.6%) to ELISA. The results associated to tuberculosis, with the simultaneous use of both tests, would allow the discard of 26 infected cattle and not 16, if the CCT had been used alone, resulting in remaining 10 potentially infected cattle and disseminators of the disease. It is concluded that the ELISA is relevant in the control and eradication of EBL and BT, its application on EBL diagnosis may replace the AGID, as well as in the TB, together with the tuberculin skin test. / Leucose Enzoótica dos Bovinos (LEB) e Tuberculose dos Bovinos (TB) são doenças infecciosas que causam grandes prejuízos à pecuária leiteira devido ao descarte de animais, condenação de carcaças e serviços veterinários. O objetivo com a realização deste trabalho foi avaliar o desempenho de kits de ensaio imunoenzimático (ELISA) comerciais importados (IDEXX®) no diagnóstico e controle da LEB e TB em bovinos leiteiros infectados naturalmente criados no estado de Pernambuco. O ELISA vem sendo progressivamente testado para auxiliar o diagnóstico de ambas as enfermidades, com a finalidade de aumentar a sensibilidade dos resultados. Enquanto que na LEB visa-se a substituição progressiva da imunodifusão em gel de ágar (IDGA) por uma técnica mais sensível, na TB a técnica poderia ser utilizada em conjunto com o teste da tuberculina, para a detecção de animais em distintas fases da resposta imunológica ao agente etiológico. Amostras de soro sanguíneo de 327 bovinos leiteiros do estado de Pernambuco foram submetidas à IDGA e ao ELISA comercial importado CHEKIT-Leucose-serum, produzido pelo laboratório IDEXX® para o diagnóstico da LEB. Descartadas 25 amostras inconclusivas a um ou a ambos os testes, 302 amostras foram examinadas, sendo 24,1% positivas (73/302) na IDGA e 45% (136/302) no ELISA. A falta de concordância entre os métodos diagnósticos ocorreu devido, provavelmente, à elevada sensibilidade do ELISA, que possibilita detectar anticorpos mesmo em situações com baixos teores séricos. O ELISA, em relação à IDGA, técnica considerada padrão, sensibilidade de 98,6%, especificidade de 72% e índice Kappa de 0.55. Em relação ao diagnóstico da TB, foram considerados 379 bovinos, sendo submetidos ao teste da tuberculina cervical comparado (TCC) e amostras de soro sanguíneo dos mesmos examinadas para identificação de anticorpos anti-Mycobaterium bovis, com o uso do kit ELISA IDEXX® M. bovis Ab Test. Dos 379 bovinos examinados, 16 (4,2%) apresentaram positividade ao TCC e 10 (2,6%) ao ELISA. Os resultados obtidos associados à tuberculose, com o uso simultâneo dos dois testes, possibilitariam o descarte de 26 bovinos infectados e não de 16, caso fosse usado o TCC isoladamente, resultando na permanência de 10 bovinos potencialmente infectados e disseminadores da doença. Conclui-se que o ELISA é relevante no controle e erradicação da LEB e da TB, podendo seu uso na LEB ocorrer em substituição à IDGA e na TB em conjunto com o teste da tuberculina.

Dentre os vários fatores que podem influenciar a polarização das respostas imunológicas nos animais destacam-se o tipo do agente agressor envolvido, as células apresentadoras de antígenos atuantes no processo e o microambiente formado pelas citocinas. Diferentes perfis de citocinas podem determinar o curso da doença, uma vez que distúrbios no equilíbrio da produção e liberação destes polipeptídeos têm papel significativo no desencadeamento e agravamento de diversas enfermidades. Vírus podem interferir com as funções das citocinas em vários níveis, influenciando na natureza da resposta imune do hospedeiro. Este desequilíbrio entre a produção de citocinas do tipo Th1 e Th2 é geralmente considerado como uma das causas da cronificação das infecções por retrovírus. O VLB, assim como outros retrovírus, também possui esta capacidade de manipular a resposta imune do hospedeiro a fim de direcionar os estágios alinfocitóticos (AL) e de linfocitose persistente (LP). No entanto, seu efeito diretamente sobre as citocinas no sangue e leite dos animais infectados ainda não foi completamente elucidado. Desta forma, o presente estudo objetivou a avaliação da resposta imune contra o VLB em vacas naturalmente infectadas por meio da quantificação de um perfil abrangente de citocinas presentes tanto no soro sanguíneo como no lácteo minimizados outros aspectos de estimulação que não fossem a presença do próprio vírus in vivo. Para tanto foram coletadas amostras de sangue e leite de 11 animais divididos em seus respectivos grupos experimentais (4, 3 e 4 animais para os grupos negativo, AL e LP, respectivamente) e determinadas as concentrações séricas e lácteas de IL-1&beta;, IL-4, IL-10, TNF-&alpha; e IFN-&gamma;. Para as comparações entre os grupos utilizou-se o teste não paramétrico de Kruskal-Wallis e quando estes apresentaramse significativos aplicou-se \"pós-teste\" para verificar onde tal diferença ocorreu. O nível de significância aplicado nos testes foi de 5 % (P&le;0,05), sempre considerando hipóteses alternativas bicaudais. Verificou-se que não houve diferença nas concentrações das citocinas IL-1&beta;, IL-4, IFN-&gamma; e TNF-&alpha; no sangue dos animais pertencentes aos diferentes grupos experimentais. Quanto às concentrações das citocinas no soro lácteo dos bovinos testados nos diferentes grupos, os resultados demonstraram comportamentos semelhantes aos habitualmente descritos na literatura científica para o sangue periférico, sugerindo que a atuação do VLB sobre a glândula mamária promova interações análogas às observadas sistemicamente. Os resultados obtidos apontam para um envolvimento do VLB sobre o perfil de citocinas da glândula mamária nos animais sororreagentes. / Among the many factors that can influence the polarization of immune responses in animals include the type of the offending agent involved, the antigen-presenting cells active in the process and the microenvironment formed by the cytokine. Different profiles of cytokines may determine the course of the disease, since disturbances in the balance of production and release of these polypeptides play a significant role in triggering and worsening of many diseases. Viruses can interfere with the functions of cytokines at various levels, influencing the nature of the host immune response. This imbalance in cytokine production from Th1 and Th2 is generally regarded as a cause of chronic infections by retroviruses. The BLV, like other retroviruses, also possess this ability to manipulate the host immune response in order to drive the stages non-lymphocytotic and persistent lymphocytosis. However, its effect directly on cytokines in blood and milk of infected animals has not been fully elucidated. Thus, this study aimed at evaluating the immune response against the BLV in cows naturally infected by quantifying a comprehensive profile of cytokines present in both the serum and in whey minimized others aspects of stimulation that was not the presence of the virus itself in vivo. For this purpose, samples of blood and milk of 11 animals divided into their respective experimental groups (4, 3 and 4 animals for groups negative, PL- and PL+, respectively) and certain whey and serum concentrations of IL-1&beta;, IL- 4, IL-10, TNF-&alpha; and IFN-&gamma;. For comparisons between groups used the nonparametric Kruskal-Wallis test and when they showed up was applied to significant \"post test\" to see where this difference occurred. The level of significance in the tests was 5 % (P&le; 0.05), when considering two-tailed alternative hypotheses. There was no difference in the concentrations of IL-1&beta;, IL-4, IFN-&gamma; and TNF-&alpha; in the blood of animals belonging to the different experimental groups. The concentrations of cytokines in the whey of cattle in different groups, the results showed behaviors similar to those usually described in scientific literature to the peripheral blood, suggesting that the action of BLV on the mammary gland promotes interactions similar to those seen systemically. The results indicate an involvement of BLV on the cytokine profile of the mammary gland in animals seropositive.

Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-05-15T17:54:15Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_OcorrenciaAnticorposContra.PDF: 1109270 bytes, checksum: c6ad182dbe76da3e60b8512f01c5f05a (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2017-05-22T13:59:31Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_OcorrenciaAnticorposContra.PDF: 1109270 bytes, checksum: c6ad182dbe76da3e60b8512f01c5f05a (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-22T13:59:31Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_OcorrenciaAnticorposContra.PDF: 1109270 bytes, checksum: c6ad182dbe76da3e60b8512f01c5f05a (MD5) Previous issue date: 2014-02-28 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A leucose bovina, a diarréia viral bovina e a rinotraqueite infecciosa bovina estão entre as principais viroses que levam a perdas na produtividade e no desempenho reprodutivo de ruminantes. Embora bovinos e bubalinos sejam frequentemente criados em conjunto e apesar da comprovada ocorrência dessas enfermidades em bubalinos, trabalhos sobre ocorrência natural dessas viroses nessa espécie ainda são escassos. Deste modo, objetivou-se verificar a ocorrência de anticorpos contra os vírus da Leucose enzoótica bovina (LEB), Diarreia viral bovina (BVD) e Rinotraqueíte infecciosa bovina (IBR) em bubalinos de criações localizadas nas Mesorregiões Nordeste Paraense, Metropolitana de Belém e do Marajó, no Estado do Pará, além de identificar os fatores de risco para a BVD em criações das Mesorregiões Nordeste Paraense e Metropolitana de Belém. No presente estudo foram avaliados 350 soros de bubalinos (Bubalus bubalis) procedentes de propriedades agropecuárias localizadas nas respectivas mesorregiões, que foram submetidos às técnicas de sorologia: imunodifusão para LEB e soroneutralização para BVD e IBR. A frequência para as respectivas doenças na população de estudo foram: 0% (0/350), 53,71% (188/350) e 91,71% (321/350). Bubalinos machos e animais com idade mais avançada apresentaram maior soropositividade para BVD. A frequência de bubalinos sororreagentes para BVD foi maior na Mesorregião do Marajó, em relação às Mesorregiões Nordeste Paraense e Metropolitana de Belém, enquanto para IBR foi maior nas Mesorregiões Nordeste Paraense e Metropolitana de Belém. Dentre as variáveis investigadas, o tipo de ordenha foi o único identificado como fator de risco para a ocorrência da BVD em bubalinos. / Bovine Leukosis, Bovine Viral Diarrhea and Infectious Bovine Rhinotracheitis are among the main viruses that lead to losses in productivity and reproductive performance of ruminants. Although cattle and buffalo are often created together, and despite the proven occurrence of these diseases in buffalo, papers about natural occurrence of these infections in this species are scarce. Thus, the objective of this study was to verify the occurrence of antibodies against the Bovine Leukosis Virus (BLV), Bovine Viral Diarrhea (BVD) and Infectious Bovine Rhinotracheitis (IBR) in buffalo creations located in the “Paraense” Northeast Mesoregion, Greater Metropolitan Belém and Marajó Mesoregion, Pará, in addition to identify the risk factors for BVD in creations located in “Paraense” Northeast Mesoregion and Greater Metropolitan Belém. In this study 350 buffaloes (Bubalus bubalis) sera were evaluated, coming from farms located in each mesoregion, that were subjected to serological techniques: immunodiffusion for (BLV) and serum neutralizing for BVD and IBR. Frequency of the respective diseases in the study population were: 0% (0/350), 53,71% (188/350) and 91,71% (321/350). Male buffaloes and older animals had higher seropositivity for BVD. The frequency of BVD seroreagents buffaloes was higher in Marajó Mesoregion compared to “Paraense” Northeast Mesoregion and Greater Metropolitan Belém, whereas for IBR the opposite occurred. Among the variables investigated, the type of milking was the only identified as a risk factor for the occurrence of BVD in buffaloes.