Tesis para optar al título profesional de Ingeniero Agrónomo y al grado de Magíster en Ciencias agropecuarias con mención en Producción Agroindustrial / Se utilizó harina de linaza y harina de garbanzo como ingredientes funcionales e inulina como reemplazo parcial de la materia grasa aportada por la margarina. La investigación se dividió en 3 etapas, en la primera se realizó una caracterización física y química de las 3 harinas que forman parte de la matriz variable. En la segunda etapa se realizó un diseño de mezcla Simplex Lattice Cúbico que se basó en la matriz variable compuesta por los tres ingredientes (harina de linaza, harina de garbanzo y harina de trigo), el cual arrojó 10 tratamientos distintos; a estas formulaciones se les realizaron análisis físicos, químicos y sensoriales, los cuales permitieron obtener estadísticamente una formulación óptima con un nivel de optimización del 0,93, con cantidades de 20% de harina de linaza, 10% de harina de trigo y 20% de harina de garbanzo, valores que coincidieron con el tratamiento 10. En la tercera etapa, el óptimo se comparó mediante análisis físicos, químicos y sensoriales con un tratamiento control, cuya harina en un 100% correspondía a harina de trigo.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2017-06-07T14:31:24Z No. of bitstreams: 1 Jefferson Moraes Azevedo.pdf: 1066331 bytes, checksum: 1492d3da79d484cf5bc3fa6be9b9f019 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-07T14:31:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jefferson Moraes Azevedo.pdf: 1066331 bytes, checksum: 1492d3da79d484cf5bc3fa6be9b9f019 (MD5) Previous issue date: 2016-12-22 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The objective of this study was to evaluate the influence of different lysine levels on performance of Duroc gilts in growing phase at 15 to 30 kg of body weight kept in a semi-arid environment. The mean of temperature in the experimental period was 32,6 °C and the humidity was 30.6 %. Thirty gilts with initial body weight of 15,5 ± 0,80 kg were randomly assigned to five treatments and six replicates, totaling 30 experimental pens and one animal per pen. Treatments have been formulated to reach 3230 kcal/EM per kg and 17% crude protein and supplemented with L-lysine HCL, resulting in diets with (0,850; 0,950; 1,050; 1,150; 1,250%) of digestible lysine and keeping the ideal protein ratio for the other essential amino acids. There was no effect of lysine levels on daily feed intake and daily weight gain, however, dietary lysine levels influenced daily lysine intake and the feed conversion, that show a point of response optimization at the level of 10,64g/kg or 1,064%, equivalent to concentration of 3,49g lysine/Mcal EM / Objetivou-se avaliar a influência de diferentes níveis de lisina sobre o desempenho de leitoas da raça Duroc na fase inicial de 15 a 30 kg de peso corporal criadas em ambiente semiárido. A temperatura média do período experimental foi de 32,6 °C e a umidade relativa de 30,6%. Foram utilizados 30 fêmeas suínas com peso médio inicial de 15,5 ± 0,80 kg distribuídos em blocos ao acaso, com cinco tratamentos e seis repetições, totalizando 30 unidades experimentais com um animal por unidade experimental. Os tratamentos corresponderam a uma ração a base de milho e farelo de soja formulada para atender a exigência de 3230 kcal/EM por kg e 17% de proteína bruta, suplementada com L-lisina HCl, para atingir os níveis (0,850; 0,950; 1,050; 1,150; 1,250%) de lisina digestível, e mantendo a relação de proteína ideal para os demais aminoácidos essenciais. Não houve efeito significativo dos níveis de lisina sobre o consumo diário de ração e ganho de peso diário, no entanto, os níveis de lisina da dieta influenciaram significativamente o consumo diário de lisina, e a conversão alimentar de forma quadrática, que apresentou ponto de otimização da resposta ao nível de 10,64 g/kg ou 1,064%, equivalente a um adensamento 3,49g de lisina/Mcal de EM.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-07-11T17:08:07Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 127415 bytes, checksum: b2501326a13c59c4a829ea3d57ee2cac (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-11T17:08:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 127415 bytes, checksum: b2501326a13c59c4a829ea3d57ee2cac (MD5) Previous issue date: 2003-04-29 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Foram conduzidos dois experimentos em que se utilizou um total de 108 suínos para avaliar dietas com diferentes níveis de lisina e proteína bruta para suínos fêmeas e machos castrados, na fase de crescimento (30 a 60 kg) e terminação (60 a 105 kg). No experimento I, foram utilizados 108 leitões, sendo 54 fêmeas e 54 machos castrados, distribuídos em delineamento experimental de blocos ao acaso, com três tratamentos (0,85 e 15,5; 0,95 e 16,5 e 1,05 e 17,5% de lisina total e proteína bruta, respectivamente), seis repetições e três animais por unidade experimental. Não houve interação entre tratamento e sexo para nenhum dos parâmetros avaliados. Não se observou efeito dos tratamentos e do sexo sobre o ganho de peso e o consumo de ração, constatando-se efeito dos tratamentos sobre a conversão alimentar, taxa de deposição de proteína e taxa de deposição de gordura em que os animais que receberam dieta contendo 1,05 e 17,5% de lisina total e proteína bruta apresentaram os melhores resultados. Houve efeito do sexo para conversão alimentar, taxa de deposição de proteína e sobre a taxa de deposição de gordura, em que fêmeas apresentaram melhores resultados para tais variáveis quando comparados aos machos castrados. No experimento II, 72 leitões, sendo 36 fêmeas e 36 machos castrados, foram distribuídos em delineamento experimental de blocos ao acaso com três tratamentos (0,76 e 14,5; 0,84 e 15,5 e 0,92 e 16,5% de lisina total e proteína bruta, respectivamente), seis repetições e dois animais por unidade experimental. Não houve interação entre tratamento e sexo para nenhum dos parâmetros avaliados. Não se observou efeito dos tratamentos sobre o consumo de ração, comprimento de carcaça e da espessura de toucinho entre a última e a penúltima vértebra lombar (ETUL). Constatou-se efeito dos tratamentos em função dos níveis de lisina e proteína bruta sobre o ganho de peso, consumo de lisina, taxa de crescimento em músculo, rendimento de carcaça, rendimento de carne magra e rendimento de pernil, que aumentaram, entretanto, para conversão alimentar, conversão alimentar em músculo, espessura de toucinho medida a 6,5 cm da linha dorso-lombar (P 2 ) e rendimento de gordura, que reduziram. Efeito do sexo foi verificado para ganho de peso, consumo de ração, conversão alimentar, consumo de lisina, conversão alimentar em músculo, ETUL, P 2 e rendimento de gordura em que fêmeas apresentaram valores inferiores para tais variáveis quando comparadas aos machos castrados, entretanto, para a taxa de crescimento em músculo, área de olho de lombo, rendimento de carcaça e rendimento de carne magra, os resultados das fêmeas foram superiores aos machos castrados. Com base nos dados de desempenho e qualidade de carcaça pode-se concluir dentro do conceito de proteína ideal que para a fase de crescimento a dieta contendo 1,05% de lisina total e 17,5% de proteína bruta, para fêmeas e machos castrados, apresentou melhor conversão alimentar, maior taxa de deposição de proteína e menor deposição de gordura na carcaça de suínos dos 30 aos 60 kg. Enquanto, para a fase de terminação a dieta contendo 0,92% de lisina total e 16,5% de proteína bruta, para fêmeas e machos castrados, apresentou melhor conversão alimentar, rendimento de carcaça, rendimento de carne magra, rendimento de gordura, rendimento de pernil e espessura de toucinho (P 2 ) na carcaça de suínos dos 60 aos 105 kg. / Two experiments were conducted wit 108 swine to evaluate diets with differents levels of lysine and crude protein for female and male barrow swine in the growth phase (30 to 60 kg) and termination (60 to 105 kg). In the experiment I, 108 swine (Landrace x Large White) were used being 54 females and 54 barrow swine distributed in a randomized blocks experimental design with three treatments (0.85 and 15.5; 0.95 and 16.5; 1.05 and 17.5% of total lysine and crude protein, respectively ), six replicates and three animals per experimental unity. It was not observed effect of the treatment and sex for none of the evaluated parameters. It was not observed effect of the treatments and sex under weight gain and the feed intake verifying effect of the treatments under the feed:gain ratio, deposition rate of protein and fat in the animals that received diet containing 1.05 e 17.5% of total lysine and crude protein showed the best results. There was effect of sex for feed:gain ratio, deposition rate of protein and fat in that females showed best results for these variables when compared to barrow swine. In the experiment II, 72 swine (Landrace x Large White) were used being 36 females and 36 barrow swine were distributed in a randomized blocks experimental design with three treatments (0.76 and 14.5; 0.84 and 15.5; 0.92 and 16.5% of total lysine and crude protein, respectively) six replicates and two animals per experimental unity. There was no interaction between treatment and sex for none of the evaluated parameters. It was not observed effect of the treatments under feed intake, carcass length and the fat ixthickness between the last and penultimate lumbar vertebra (ETUL). It was verified effect of treatments in function of the levels of lysine and crude protein under the weight gain, lysine intake, growth rate in muscle, carcass yield, lean meat yield and ham yield that increased however, for feed:gain ratio, feed:gain ratio in muscle, thickness of fat measured in 6,5 cm of the dorsal lombar line (P 2 ) and fat yield that reduced. Effect of sex was verified for weight gain, feed intake, feed:gain ratio, lysine intake, feed:gain ratio in muscle, ETUL, P 2 and fat yield in that females showed inferior values for these variables when compared of barrow swine, however, for the growth rate of muscle, back eye area, carcass and lean meat yield, the results of females were greater than barrow swine. Basing on these data of performance and carcass quality can be conclude that in the concept of ideal protein that for the growing phase, for females and barrow swine, the diet containing 1.05% of total lysine and 17.5% of crude protein, showed better feed:gain ratio, greater deposition rate of protein and smaller deposition rate of at in carcass of swine from 30 to 60 kg. However, for the termination phase, the diet containing 0.92% of total lysine and 16.5% of crude protein, for females and barrow swine, showed better feed:gain ratio, carcass yield, lean meat yield, fat yield, ham yield and fat thickness (P 2 ) in the carcass of swine from 60 to 105 kg of weight.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-07-14T13:49:25Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1944560 bytes, checksum: 7ad07e3457a61d348ba5d5a49e0c4292 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-14T13:49:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1944560 bytes, checksum: 7ad07e3457a61d348ba5d5a49e0c4292 (MD5) Previous issue date: 2004-05-03 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Foram conduzidos oito experiemntos a fim de determinr as exigências nutricionais de lisina e proteína bruta para frangos de corte nas fases pre-inicial, inicial, de crescimento e terminação. Nos primeiros quatro experimentos f oram utilizados 6800 frangos de corte machos da linhagem Ross em quatro experimentos nas fases pré-inicial (1-11 dias), inicial (12-22 dias), de crescimento (23-36 dias) e terminação (38-49 dias) em arranjo fatorial 5 x 2 aninhado, sendo cinco níveis de lisina digestível e dois ambientes (limpo e sujo), totalizando dez tratamentos com oito repetições. Os níveis de lisina digestível utilizados foram 1,06; 1,12; 1,18; 1,24 e 1,30% para a fase pré-inicial, 1,00; 1,06; 1,12; 1,18 e 1,24% para a fase inicial, 0,86; 0,92; 0,98; 1,04 e 1,10% para a fase de crescimento e 0,76; 0,82; 0,88; 0,94 e 1,00% para a fase de terminação. Em todas as fases foi mantida a relação mínima lisina digestível: metionina+cistina, treonina, triptofano e arginina digestível de 72; 67; 19 e 108%, respectivamente. Também foi mantido o nível de 2,088; 2,002; 1,808 e 1,662% de glicina+serina para as fases pré-inicial, inicial, de crescimento e terminação, respectivamente. Foram avaliados o ganho de peso, consumo de ração e conversão alimentar nas quatro fases de criação e características de carcaça nas fases de crescimento e terminação. Em todas as fases houve efeito significativo do nível de lisina digestível sobre o desempenho das aves, sendo que as aves criadas em ambiente limpo apresentaram maior exigência de lisina digestível e melhor desempenho. Houve efeito linear sobre o rendimento de peito na fase de crescimento para as aves criadas nos ambientes limpo e sujo e efeito linear sobre o rendimento de peito e filé de peito na fase de terminação para as aves criadas em ambiente limpo. Com base nos dados observados nesse trabalho os níveis de lisina digestível recomendados para os frangos de corte nas fases pré-inicial, inicial de crescimento e de terminação para o ambiente limpo são 1,30; 1,24; 1,045 e 1,005% e para o ambiente sujo são 1,26; 1,165; 1,041 e 0,93%, respectivamente. Nos quatro experimentos restantes, foram utilizados 6800 frangos de corte machos da linhagem Ross em quatro experimentos nas fases pré-inicial (1-11 dias), inicial (12-22 dias), de crescimento (23-35 dias) e terminação (37-49 dias) em arranjo fatorial 5 x 2 aninhado, sendo cinco níveis de proteína e dois ambientes (limpo e sujo), totalizando dez tratamentos com oito repetições. Os níveis de proteína utilizados foram 21; 22; 23; 24 e 25% para a fase pré-inicial, 19; 20; 21; 22 e 23% para a fase inicial, 16; 17; 18; 19 e 20% para a fase de crescimento e 15; 16; 17; 18 e 19% para a fase de terminação. Em todas as fases foi mantida a relação mínima lisina digestível: metionina+cistina, treonina, triptofano e arginina digestível de 72; 67; 19 e 108%, respectivamente. Também foi mantido o nível mínimo de 2,300; 2,140; 1,656 e 1,555% de glicina+serina para as fases pré-inicial, inicial, de crescimento e terminação, respectivamente. Foram avaliados o ganho de peso, consumo de ração e conversão alimentar nas quatro fases de criação e características de carcaça nas fases de crescimento e terminação. Nas fases pré-inicial e inicial o nível de proteína bruta da ração não influenciou o desempenho das aves e nas fases de crescimento e terminação houve efeito linear no desempenho e na redução da porcentagem de gordura abdominal do nível de proteína das aves criadas nos ambientes limpo e sujo. Os níveis de proteína bruta recomendados para os frangos de corte nas fases pré-inicial, inicial são de 20 e 19% respectivamente desde que mantida a relação aminoácidos digestíveis/lisina digestível e de 20 e 19% para as fases de crescimento e de terminação para os ambientes limpo e sujo. / Eight trials were conduced to determinate the lysine and crude protein nutritional requirements for broilers in a pre-starter, starter, growing and finishing phases. In the first four trials a 6800 Ross male broiler chicks were used in four trials, in a pre-starter (1-11 days), starter (12-22 days), growing (23-36 days) and finishing (38- 49 days) phases in a factorial arrangement of 5 (digestible lysine levels) x 2 (clean and dirty environment), with ten treatments and eight replicates per treatment. The digestible lysine levels used were 1.06; 1.12; 1.18; 1.24 and 1.30% in a pre-starter phase, 1.00; 1.06; 1.12; 1.18 and 1.24% in a starter phase, 0.86; 0.82; 0.98; 1.04 and 1.10% in a growing phase and 0.76; 0.82; 0.88; 0.94 and 1.00% in a finishing phase. The minimum ratio digestible lysine: digestible methionine+cystine, threonine, tryptophan and arginine ratio (72; 67; 19 and 108%) were maintained, and also maintained a level of 2.088; 2.002; 1.808 and 1.662% for glycine+serine for a pre- starter, starter, growing and finishing phases, respectively. Weight gain, feed consumption, feed conversion and carcass parameters were evaluated. In all phases digestible lysine levels had a significant effect in broiler performance, and chicks reared in a clean environment had a best performance than chicks reared in a dirty environment. In the growing phase chicks reared in both environments showed a linear effect for breast yield, and in a finishing phase chicks reared in a clean environment showed a linear effect for breast and breast meat yield. The digestible lysine levels recommended for broilers in a pre-starter, starter, growing and finishing phases are 1,30; 1,24; 1,045 e 1,005% for clean enviroment and 1,26; 1,165; 1,041 e 0,93% for dirty enviroment, respectively. xiIn the last four trials a total of 6800 Ross male broiler chicks were used in four trials, in a pre-starter (1-11 days), starter (12-22 days), growing (23-35 days) and finishing (37-49 days) phases in a factorial arrangement of 5 (crude protein levels) x 2 (clean and dirty environment), with ten treatments and eight replicates per treatment. The crude protein levels used were 21; 22; 23; 24 and 25% in a pre-starter phase, 19; 20; 21; 22 and 23% in a starter phase, 16; 17; 18; 19 and 20% in a growing phase and 15; 16; 17; 18 and 19% in a finishing phase. The minimum ratio digestible lysine: digestible methionine+cystine, threonine, tryptophan and arginine ratio (72; 67; 19 and 108%) were maintained, and also maintained a level of 2.300; 2.140; 1.656 and 1.555% for glycine+serine for a pre-starter, starter, growing and finishing phases, respectively. Weight gain, feed consumption, feed conversion and carcass parameters were evaluated. In the pre-starter and starter phases the crude protein levels had no influence on broiler performance, and in the growing and finishing phases the crude protein level had a linear effect on broiler performance and reduce de percentage of abdominal fat in broilers reared in both enviroments. The crude protein levels recommended for a pre- starter and starter phases is a 20 and 19% respectively, as far as digestible amino acids/ digestible lysine ratio will be maintained, and 20 and 19% for a growing and finishing phases respectively for both environments.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2017-06-22T14:04:53Z No. of bitstreams: 1 Karine Silva Camargo.pdf: 517400 bytes, checksum: adacb8c349c31809544781bac5e37ac6 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-22T14:04:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Karine Silva Camargo.pdf: 517400 bytes, checksum: adacb8c349c31809544781bac5e37ac6 (MD5) Previous issue date: 2015-02-23 / The objective of this study was to estimate the demand of nitrogen and the deposition of lysine to females broilers of slow growth, the Redebro broilers lineage. Three nitrogen balance assay were carried out in phases: initial (13-27 days), growth (42-56 days) and late (72-91 days), with a total of 126 birds, 42 per period. The birds were housed in individual cages equipped with trays for holding excreta collection, trough feeder and drinker type nipple with cup, and distributed according to a completely randomized design with six treatments and six replications. The treatments were: NI = 5%, N2 = 10% = 15% N3, N4 = 20% = 25% N5 and N6 = 30% of CP. The diets were according with requirements of the birds for each period, except for lysine, which had a limitation of 20% on each diet. The experimental period was 15 days in the three trials, with the first 5 days for adaptation and the other 10 days for total feces collection. The diets and excreta were analyzed for nitrogen and quantification of intake and nitrogen excretion, and you can then calculate the nitrogen retained. Based on adjustments to the equations of Goettingen model was able to estimate the nitrogen requirement for maintenance (236, 211 and 138 mg / PV0,67), the maximum potential nitrogen retention (2,992, 1,952 and 1,984 mg / PV0, 67) and the consumption of digestible lysine (436, 472 and 725 mg / PV0,67), whereas 60% ND / O objetivo deste trabalho foi estimar a exigência de nitrogênio e a deposição de lisina para frangas de corte de crescimento lento, da linhagem Pesadão Vermelho. Foram realizados três ensaios de balanço de nitrogênio, nas fases: inicial (13-27 dias), crescimento (42-56 dias) e final (72-91 dias), com um total de 126 aves, sendo 42 por período. As aves foram alojadas em gaiolas individuais, equipadas com bandejas para a realização das coletas de excretas, comedouro tipo calha e bebedouro tipo nipple com copinho, e distribuídas de acordo com um delineamento inteiramente casualizado com seis tratamentos e seis repetições. Os tratamentos consistiram de seis dietas com diferentes níveis de proteína bruta, como sendo: NI=5%, N2=10%, N3=15%, N4=20%, N5=25% e N6=30% de proteína, sendo essas rações formuladas para atender às exigências das aves para cada período, com exceção da lisina, que teve uma limitação de 20% em cada dieta. O período experimental foi de 15 dias nos três ensaios, sendo os 5 primeiros dias destinados à adaptação e os outros 10 dias destinados à coleta total de excretas. As rações e as excretas foram analisadas quanto aos teores de nitrogênio e quantificou-se a ingestão e excreção de nitrogênio, sendo possível, então, calcular o nitrogênio retido. Com base nos ajustes das equações ao modelo de Göettingen, foi possível estimar a exigência de nitrogênio para mantença (236, 211 e 138 mg/PV0,67), o potencial máximo de retenção de nitrogênio (2.992, 1.952 e 1,984 mg/PV0,67) e o consumo de lisina digestível (436, 472 e 725 mg/PV0,67), considerando 60% do NDmaxT.

Orientador: Paulo Arruda / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-16T11:56:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Serrano_GuilhermeCoutinhodeMelo_M.pdf: 1314215 bytes, checksum: f2ea574317887a52e797252a637d3649 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: A lisina é considerada um aminoácido essencial, pois é componente fundamental de proteínas e não pode ser sintetizado por animais, sendo necessário ingeri-lo em sua forma final. Sua concentração é baixa em cereais, principal fonte de alimento animal e sua carência pode trazer sérios danos ao organismo, principalmente relacionados ao sistema nervoso. Por outro lado, seu excesso, causado pela deficiência na degradação, também é danoso podendo levar ao retardo no desenvolvimento mental. A síntese da lisina em plantas e bactérias é realizada principalmente pela via do ácido aspártico, que além desse aminoácido é responsável pela produção de treonina, metionina e isoleucina. A degradação da lisina em animais e plantas ocorre principalmente pela via da sacaropina. Essa via, por sua vez, é utilizada para a síntese de lisina em fungos. Assim, tanto a síntese como a degradação de lisina em diferentes organismos possuem arquiteturas metabólicas particulares que, durante o processo evolutivo, foram selecionadas para adequar-se as necessidades do metabolismo, diferenciação e desenvolvimento. Até o momento não existia indício da existência e da funcionalidade da via do ácido aspártico em animais e nem da via da sacaropina em bactérias. O presente trabalho apresenta um conjunto de resultados que sugerem a existência da via do ácido aspártico em insetos e a via da sacaropina em bactérias. Foram identificados em Anopheles gambie e Aedes aegypti, respectivamente 6 e 5 genes dos 9 que compõem a via do ácido aspártico em bactérias. A análise de similaridade de sequências sugere que os genes da via do ácido aspártico encontrados nos insetos pode ter se originado a partir de bactérias endosimbióticas. A necessidade da via de síntese de lisina nesses insetos pode estar ligada a fonte de alimentação, em alguns casos deficiente em aminoácidos essenciais. Quanto à degradação da lisina, os resultados sugerem a existência, em alguns grupos de bactérias, dos genes que codificam as enzimas lisinacetoglutarato redutase e sacaropina desidrogenase (lkr e sdh), responsáveis pelos passos iniciais da via em plantas e animais. Em alfa-proteobactérias, encontramos os genes lkr e sdh ligados em tandem na forma de um operon. Em plantas e animais esses genes também são ligados e codificam um polipeptídio bifuncional contendo as atividades da LKR e de SDH. O operon da lkr e sdh encontrado em alfaproteobactérias contém também os genes que codificam as enzimas glutationa-Stransferase (GST) e fosfogliceraldeído mutase (FM). Essa estrutura genômica sugere que a LKR e a SDH podem fazer parte de um conjunto de enzimas importantes na defesa contra estresse oxidativo, além da degradação da lisina como pode ser demonstrado pela atividade enzimática de LKR e SDH nesse organismo. A análise da estrutura genômica dos genes da via da sacaropina em bactérias revelou um fato curioso. Em plantas existe um peptídeo de aproximadamente 100 aminoácidos intercalando os domínios polipeptídicos da LKR e da SDH. Esse peptídeo, denominado de interdomínio (ID) é exclusivo de plantas, não tendo sido encontrado em nenhum dos genomas de eucariotos seqüenciados até o momento. Seqüências similares ao ID foram encontradas em cianobacterias e algumas archeobacterias, porém em nenhum caso esses IDs puderam ser associados com seqüências codificadoras de LKR e/ou SDH. Neste trabalho buscamos remontar uma possível história evolutiva da via da sacaropina e apresentamos uma hipótese evolutiva para a origem dos genes LKR e SDH de plantas e animais / Abstract: Lysine is an amino acid that is not synthesized by animals and therefore need to be ingested in its final form. Lysine concentration is low in cereals and the lack of this amino acid in diet can cause severe damage to the organism specially associated to the nervous system. On the other hand its excess, caused by the deficiency in the degradation of lysine, can also lead to organism disorder as mental development retardation. Lysine is mainly synthesized trough the aspartate pathway in plant and bacteria and the same pathway can also lead to synthesis of threonine, methionine and isoleucine. Lysine degradation occours trough the saccharopine pathway in animal and plant, but other pathways are known for bacteria and fungi. Until now there was not an evidence of the existence of any of the pathways. Here we present new data of the existence of the aspartate pathway in animals and the saccharopine pathway bacteria respectively. We were able to demonstrate the existence of most of the genes that compose the aspartate pathway in Anopheles gambie e Aedes aegypti and sequence clustering suggest a possible origin of these genes from endosymbiontic bacteria. Concerning the lysine degradation, we have gathered data that indicates the existence of genes responsible for producing the proteins for two first enzymatic steps, lysine ketoglutarate redutase (LKR) and saccharopine dehidrogenase (SDH), in bacteria. Exclusively in Proteobacteria we found these genes in the exact same structure of animals and plants and we were able to detected enzymatic activity for LKR and SDH. Curiously these genes are inside a single operon that also has glutatione s transferase and phosphoglyceraldehide mutase, both genes previously associated with defense against oxidative stress. This may suggest a possible new role for LKR/SDH in preventing oxidative stress. The analysis of amino acid sequence and domains of LKR/SDH in plant, animals and fungus, shows that there is a region of approximately 110 aa between LKR and SDH domains that is exclusive to plants, we called this region the inter domain (ID). Interestedly we found only in Cyanobacterial this typical plant domain, the ID. After these novel results we attempted to reconstruct the evolutionary history of pathway, suggesting an explanation for the origin of plants and animals LKR and SDH / Mestrado / Genetica Vegetal e Melhoramento / Mestre em Genética e Biologia Molecular

Las células endoteliales (CE) son responsables de la síntesis y liberación de sustancias vasoactivas ante un estímulo neuronal, hormonal o físico. Procesos patológicos, factores ambientales o el envejecimiento del individuo, dañan las CE y alteran su función. Se denomina disfunción endotelial (DE) a la capacidad disminuída de las CE de inducir vasorrelajación ante el estímulo agonista colinérgico. Los AINEs son fármacos antiinflamatorios, analgésicos y antipiréticos que bloquean la COX. Experimentos preliminares han mostrado que el clonixinato de lisina (Clx), un AINE antranílico, induce DE aguda en anillos de aorta in vitro, por un mecanismo no dilucidado. El extracto de Vitis vinifera (EVv) es rico en flavonoides, compuestos con acción antioxidante. Se intenta determinar si el EVv es capaz de prevenir in vitro la DE inducida por Clx. Se montaron anillos aórticos de ratas en baños termorregulados para la determinación isométrica de fuerza, asignándose al azar en tres grupos: control, grupo 1 (G1) y grupo 2 (G2). El G1 se incubó con 100 µM Clx y el G2 con 5,35 ng/mL EVv junto con 100 µM Clx. Determinamos y comparamos la DE en los anillos aórticos precontraídos con fenilefrina respecto del control. El G1 mostró una notable DE la que fue significativamente (p< 0,05) prevenida por la incubación con EVv. Los resultados obtenidos muestran que el EVv puede prevenir la DE inducida por Clx in vitro. Si bien, se requieren otros experimentos para explicar el mecanismo por el cual Clx induce DE y de prevención del EVv, este fitofármaco se perfila como una alternativa de protección vascular para los pacientes que utilizan crónicamente el Clx.

Introdução: existe evidencia de que o sabor umami detecta os alimentos ricos em proteínas e aminoácidos, o que presumivelmente interfere na ingestão destes alimentos. Há experimentos publicados que relacionam quadros de desnutrição ou alimentação deficiente de determinados aminoácidos, com o consumo voluntário de soluções ou ração contendo tais aminoácidos. Objetivos: os objetivos deste trabalho foram: a caracterização das preferências gustativas para diferentes aminoácidos no rato normal e o efeito da desnutrição protéica sobre essas preferências. Metodologia: o estudo compreendeu duas fases distintas: na primeira foram feitas comparações de consumo de soluções de aminoácidos isolados (10 gramas por litro de água) em um período curto (5 dias). As comparações foram realizadas em 4 grupos distintos, e cada grupo foi composto de 20 animais: 10 controles e 10 desnutridos. A desnutrição foi induzida pelo oferecimento de ração hipoprotéica (5% de caseína na primeira fase e 7,5% de caseína na segunda fase). As soluções de aminoácidos comparadas em cada grupo foram: glutamato e glicina, glutamato e valina, triptofano e glicina e triptofano e valina, todas na concentração de 10g/ L. Na segunda fase foram realizadas comparações de consumo de soluções contendo glutamato mais um aminoácido não essencial (glicina) e glutamato mais um aminoácido essencial (lisina ou triptofano) por um período de 42 dias. Esta segunda fase foi composta de 3 grupos de animais, sendo um formado por 10 animais controles e 10 desnutridos que não receberam soluções, outro grupo com a mesma divisão de animais, mas que receberam soluções de glutamato mais glicina e glutamato mais lisina, e o último grupo recebeu soluções de glutamato mais glicina e glutamato mais triptofano. Resultados, discussão e conclusão: observou-se, tanto na fase 1 como na fase 2, que: a glicina e o glutamato em solução são muito atrativos; a de lisina é atrativa 4 mas em menor intensidade do que as anteriores; a de valina é pouco atraente; o consumo da solução de triptofano foi tão pequena que esta é possivelmente aversiva. Os resultados da fase 1 indicaram que o consumo de soluções de glutamato e de valina de animais desnutridos foi significativamente maior do que o de animais controles. Entretanto, no subgrupo de ratos desnutridos, o consumo da solução de glutamato correlacionou-se positivamente com o peso do animal. Na fase 2 os animais desnutridos, nas duas últimas semanas experimentais, mas não nas anteriores, apresentaram consumo significativamente maior de lisina e triptofano; a comparação do consumo de solução de glicina foi impossibilitada pelo consumo excessivo e esgotamento dos frascos. Também se constatou que os animais da segunda fase apresentaram esteatose hepática. Entre os desnutridos, o consumo de solução de lisina foi inversamente correlacionado com o peso corporal / Umami is the taste quality associated with several amino acids, especially the amino acid L-glutamate, and evidence exists that umami indicates the presence of amino acids, peptides and related structures in foodstuffs, which may bear relevant nutritional implications. The objectives of the study were to establish the normal rat preferences among a set of amino acids (glycine, glutamate, lysine, valine and tryptophan), and determine wether the rat protein malnutrition modifies the preferences and/or the avidity for these amino acids. In a initial set of experiments, bottles containing 50 ml of the amino acid solutions whose palatability were to be compared were presented to each animal for a 5-day period, and volumes consumed during the last 3 days were measured, and the bottles were refilled to their original levels. The left-right positions of the bottles were reversed every day. At the termination of the testing periods, the volumes of test solutions remaining in each bottle were measured, and the consumed volumes calculated. In a second set of experiments, solutions of glutamate plus glycine, glutamate plus lysine or glutamate plus tryptophan were presented to the animals for 8 weeks; after that , for 2 weeks, the glutamate was removed so that solutions of glycine, lysine or tryptophan only were presented to the animals. The volumes remaining in the bottles were measured and the volumes consumed calculated at termination of each testing period. On the basis of the ratios of volume of solutions consumed/ body weight the avidity for the amino acid were inferred. Protein malnutrition was induced by a diet with 5% -7.5 % casein as the only protein source; malnutrition was consistently induced as demonstrated by severe reduction in weight gain and increase in liver fat content. Normal rats demonstrated great avidities for glycine and glutamate, moderate avidity for lysine, low avidity for valine and no avidity for tryptophan. Rats with protein malnutrition a similar profile of avidities, however they significantly grater avidities for 6 glutamate, lysine, valine, and tryptophan, but not for glycine than normal rats. Among the rats with with protein malnutrition, greater the body weight, the greater the glutamate solution comsumed/body weight and the lower the body weight, the greater the lysine solution consumed /body weight. Conclusions: Avidity for amino acid solutions is widely variable, and protein malnutrition enhances the avidity for glutamate, valine, lysine, and tryptophan solutions but not for glycine solution

O objetivo desta dissertação foi estimar a exigência de lisina (Lis) para frangos de corte machos Cobb x Cobb 500 de 1 a 12 dias de idade (experimento 1), 12 a 28 dias de idade (experimento 2) e 28 a 42 dias de idade (experimento 3). Dietas basais foram formuladas para atingir ou exceder as exigências nutricionais, com exceção da Lis. Cinco níveis de Lis foram suplementados às dietas basais a partir de L-Lis HCl ou sulfato de L-Lis de modo que os níveis variaram de 0,97% a 1,37% de Lis digestível no experimento 1, 0,77% a 1,17% de Lis digestível no experimento 2 e 0,68% a 1,08% de Lis digestível no experimento 3 em incrementos de 0,08%. Os tratamentos foram distribuídos em um delineamento inteiramente casualizado com 8 repetições de 25 aves. Em cada experimento, 2200 aves foram alojadas em 88 unidades experimentais. Nos dias 1 e 12 (experimento 1), 12 e 28 (experimento 2) e 28 e 42 (experimento 3) as aves e a ração foram pesadas para determinar o ganho de peso (GP) e conversão alimentar (CA). No experimento 3, quatro aves por unidade experimental foram abatidas para determinação do rendimento de carcaça e peito. A biodisponibilidade relativa (RBV) das fontes de Lis foi avaliada através de uma regressão multivariada e comparada pelo teste t. A exigência de Lis foi estimada por três modelos de regressão: polinomial quadrática, brokenline linear e broken-line quadrática. A exigência foi representada como 95% do ponto de máxima resposta. Não houve diferença entre a RBV da Lis no sulfato de L-Lis em relação ao L-Lis HCl, portanto ambas as fontes foram utilizadas para estimar as exigências. As exigências encontradas variaram de acordo com o modelo estatístico e a variável analisada. A regressão broken-line quadrática apresentou o melhor ajustamento aos dados de desempenho, enquanto a regressão broken-line linear se ajustou melhor aos dados de rendimento de carcaça e peito. As regressões polinomial quadrática, broken-line linear e broken-line quadrática estimaram, respectivamente, as exigências como 1,190, 1,032 e 1,101% para GP e 1,226, 1,038 e 1,124% para CA no experimento 1; 1,021, 0,900 e 0,961% para GP e 1,064, 0,966 e 1,043% para CA no experimento 2; 0,949, 0,833 e 0,925% para GP, 0,978, 0,851 e 0,960% para CA, 0,933, 0,842 e 0,931% para rendimento de carcaça e 0,952, 0,839 e 0,921% para rendimento de peito no experimento 3. Os resultados demonstraram que as exigências de Lis foram consideravelmente influenciadas pelas diferentes regressões. Portanto, a escolha do modelo estatístico é crítica para a obtenção de estimativas precisas e coerentes. / The objective of this thesis was to estimate lysine (Lys) requirement of male Cobb x Cobb 500 broilers from 1 to 12 days of age (experiment 1), 12 to 28 days of age (experiment 2), and 28 to 42 days of age (experiment 3). Basal diets were formulated to meet or exceed recommendations, except for Lys. Five graded levels of Lys were supplemented from L-Lys HCl or L-Lys sulfate to the basal diets. Dietary treatments ranged from 0.97% to 1.37% digestible Lys in experiment 1, 0.77% to 1.17% digestible Lys in experiment 2, and 0.68% to 1.08% digestible Lys in experiment 3 in 0.08% increments. Treatments were distributed in a completely randomized design with 8 repetitions of 25 birds each. A total of 2,200 birds per experiment were placed in 88 experimental units. At 1 and 12 days (experiment 1), 12 and 28 days (experiment 2), and 28 and 42 days (experiment 3), birds and feed were weighed to determine body weight gain (BWG) and feed conversion ratio (FCR). In experiment 3, four birds per experimental unit were processed for carcass and breast meat yield evaluation. Relative bioavailability (RBV) of Lys sources was assessed by a multivariate regression and compared by a t-test. Lysine requirement was estimated using three regression models: quadratic polynomial, linear broken-line, and quadratic broken-line. Requirements were represented as 95% of the asymptote. No difference was observed in Lys RBV in L-Lys sulfate compared to L-Lys HCl, thus both sources were used to estimate requirements. Requirement estimates varied according to statistic model and analyzed variable. Quadratic broken-line model presented the best fit to performance data (BWG and FCR), whereas linear broken-line model fitted better to carcass and breast meat yield data. Quadratic polynomial, linear broken-line, and quadratic brokenline estimates were, respectively, 1.190, 1.032, and 1.101% for BW gain and 1.226, 1.038, and 1.124% for FCR in experiment 1; 1.021, 0.900, and 0.961% for BW gain and as 1.064, 0.966, and 1.043% for FCR in experiment 2; and 0.949, 0.833, 0.925% for BW gain, 0.978, 0.851, and 0.960% for FCR, 0.933, 0.842, and 0.931% for carcass yield, and 0.952, 0.839, and 0.921% for breast meat yield in experiment 3. Results demonstrate that Lys requirements were considerably influenced by different regression models. Therefore, the choice of statistical model is crucial to obtain precise, coherent estimates.

A lisina é um dos aminoácidos essenciais e um dos fatores limitantes ao uso de cereais como o milho na alimentação, pois, sem suplementação, não permite a obtenção de uma dieta balanceada. A fim de melhorar a qualidade nutricional dos cereais, várias tentativas têm sido realizadas baseadas em resultados obtidos sobre as rotas de metabolismo da lisina em plantas e o acúmulo de proteínas de reserva no endosperma. Ambrozevicius (2010) com o objetivo de produzir plantas de milho transgênicas com alto teor de lisina utilizou a estratégia de expressão de proteínas de reserva de outras espécies vegetais ricas em lisina, ou seja, através da expressão de uma proteína heteróloga: a zeolina. O presente trabalho teve como objetivo estudar os 6 eventos transformados expressando a zeolina na geração F3, caracterizando as proteínas de reserva, o perfil de aminoácidos e as enzimas envolvidas no metabolismo de lisina em milho geneticamente modificado, para compreender quais as possíveis alterações bioquímicas podem ter sido geradas pela transformação, e que podem ter levado ao incremento dos aminoácidos essenciais neste material transgênico. O perfil de proteínas de reserva dos eventos transformados exibiu redução na proporção das zeínas II e glutelinas em relação ao controle HiII, e ainda aumentos muito discretos da fração globulina, porém não para todos os eventos transformados. Na composição de aminoácidos solúveis totais foram observados incrementos nos teores dos aminoácidos que fazem parte da via metabólica do ácido aspártico: lisina, metionina, treonina e isoleucina. Para os aminoácidos incorporados em proteínas, foram observados incrementos nos teores de lisina nos eventos transformados da fração globulina e da fração glutelina, ambos em relação ao controle HiII. Já a fração zeína I teve o maior conteúdo total de aminoácidos em todos os eventos transformados. A análise das enzimas envolvidas no metabolismo de lisina revelou que ocorreram alterações em duas enzimas, a primeira enzima envolvida na síntese de lisina, aspartato quinase (AK) e a segunda envolvida na degradação de lisina, lisina cetoglutarato redutase (LOR). Embora as outras enzimas envolvidas na síntese e na degradação de lisina também tenham sido alteradas, os resultados foram variáveis para os diferentes eventos. Este trabalho mostrou que a expressão da proteína heteróloga zeolina causou alterações na composição das frações protéicas, no teor dos aminoácidos solúveis totais e aminoácidos incorporados em proteína em consequencia das alterações das enzimas envolvidas na síntese e degradação da lisina. Os resultados obtidos sugerem que a expressão da proteína heteróloga zeolina, que tem a necessidade de incorporação de lisina em sua estrutura, pode ter alterado a via metabólica do ácido aspártico para suprir a nova demanda de lisina. Essas alterações podem incluir o aumento na atividade da enzima AK, que é a primeira enzima da via que leva a síntese deste aminoácido e também uma redução na atividade da enzima de degradação LOR, pois o excesso de lisina livre que seria degradada é incorporado à nova proteína. / Lysine is an essential amino acid and one of the limiting factors for the use in cereals such as corn feed therefore, without supplementation; it does not allow obtaining a balanced diet. In order to improve the nutritional quality of cereals, several attempts have been made based on the results about routes of metabolism of lysine in plants and accumulation of storage proteins in endosperm. Ambrozevicius (2010) with the objective of producing transgenic corn plants with high content of lysine used a strategy of expression of storage proteins from other plant species which are rich in lysine, it means, through the expression of a heterologous protein: zeolin. This work aimed to study the 6 events processed expressing zeolina in F3 generation, featuring the storage proteins, the profile of amino acids and enzymes involved in the metabolism of lysine in genetically modified corn, in order to understand the possible biochemical changes which may have been generated by the transformation, and that may have led to the increase of essential amino acids in transgenic material The storage protein profile of transformed events exhibited reduction in the proportion of zein II and glutelins compared to control HiII, and yet very discrete increments of globulin, but not for all events processed. In the composition of soluble amino acids, it was observed increments in concentration of amino acids forming part of the metabolic pathway of aspartic acid: Lysine, methionine, threonine and isoleucine. For the amino acids incorporated into proteins, it was observed increments in the levels of lysine in the transformed events of globulin and glutelin fraction, both in relation to the control HiII. On the other hand, zein fraction I had the highest total amino acid content in all transformed events. The analysis of the enzymes involved in the metabolism of lysine revealed that changes occurred in two enzymes, the first enzyme involved in the synthesis of lysine, aspartate kinase (AK) and the second involved in the degradation of lysine, lysine ketoglutarate reductase (LOR). Although other enzymes involved in the synthesis and degradation of lysine have also been changed, the results were variable for different events. This work showed that the expression of heterologous protein zeolina caused changes in the composition of protein fractions, in the content of soluble amino acids and amino acids incorporated in consequence of changes in enzymes involved in the synthesis and degradation of lysine. The results suggest that the expression of heterologous protein zeolina, which has the need for incorporation of lysine in its structure, may have changed the aspartic acid pathway to meet the new demand for lysine. These changes may include the increase in AK enzyme activity, which is the first enzyme of the pathway leading to the synthesis of this amino acid and also a reduction in the activity of the enzyme degradation LOR, since the excess free lysine would be degraded is incorporated into the new protein.