Submitted by Julia Pompeu De Mendonça (jupmendonca@uol.com.br) on 2018-06-27T16:36:24Z No. of bitstreams: 1 Julia Pompeu de Mendonça -dissertacao mestrado.pdf: 1485942 bytes, checksum: a159c840459c590dd92743f055a83018 (MD5) / Approved for entry into archive by Maria Lucia Martins Frederico null (mlucia@fca.unesp.br) on 2018-06-28T11:34:27Z (GMT) No. of bitstreams: 1 mendonca_jp_me_botfca.pdf: 1386980 bytes, checksum: 5e9e162d5cfb8e17716dd9eed92ef3f8 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-28T11:34:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 mendonca_jp_me_botfca.pdf: 1386980 bytes, checksum: 5e9e162d5cfb8e17716dd9eed92ef3f8 (MD5) Previous issue date: 2018-06-15 / A mão de obra dos ordenhadores é um fator determinante da qualidade do leite. No entanto, sistemas de capacitação técnica que sejam validados cientificamente ainda não estão disponíveis. O objetivo do presente trabalho foi desenvolver e validar um sistema de treinamento de procedimentos de ordenha que possa ser aplicado a ordenhadores com diferentes níveis de escolaridade. Trinta e quatro ordenhadores de 15 propriedades participantes, preferencialmente do projeto CATI-Leite, da Coordenadoria de Assistência Técnica Integral do Estado de São Paulo, foram incluídos no estudo. Foi aplicado um treinamento presencial de duas horas de duração, composto por uma palestra e uma dinâmica de grupo. Foram distribuídas apostilas didáticas desenvolvidas para melhorar o aprendizado. Os conhecimentos teórico e prático dos ordenhadores foram comparados em dois momentos, antes e depois do treinamento, por meio de avaliações realizadas nas propriedades. Um questionário foi desenvolvido para avaliação do conhecimento teórico dos ordenhadores e o conhecimento prático foi avaliado por meio de um sistema de escore de habilidade de ordenha baseado na observação do trabalho dos participantes. Modelos de medidas repetidas e de regressão logística foram utilizados para comparar a média dos escores teórico e prático e estimar as chances de realização de procedimentos de ordenha de forma correta antes e depois do treinamento, respectivamente. Houve aumento significante (P < 0,001) da média de ambos os escores teórico (aumento de 55,1%, de 616,76 ± 34,38 para 956,85 ± 34,88 pontos) e de habilidade de ordenha (aumento de 20,5%, de 14,27 ± 0,38 para 17,19 ± 0,38 pontos) após a participação no treinamento. A percentagem de animais que receberam um tempo de contato de pré-dipping adequado, ou um tempo de estímulo adequado, aumentou de 85,78 para 98,52% (N=204) e de 58,33 para 63,73% (N=204) após o treinamento, respectivamente. A função do ordenhador (funcionário ou proprietário) e a escolaridade foram associadas ao aprendizado teórico (escore teórico) e prático (habilidade de ordenha). Os resultados dessa pesquisa apontam que a metodologia foi eficiente na qualificação teórica e prática dos ordenhadores. O entendimento dos conceitos técnicos resultou em melhoria dos procedimentos de ordenha que podem beneficiar não somente o conforto e a saúde dos animais e das pessoas envolvidas, mas também a qualidade do leite produzido. O método proposto poderá ser utilizado para fins de difusão de conhecimento. / The work of milkers is a determining factor for milk quality. Nonetheless, training systems that have been scientifically validated are not still available. The objective of this work was to develop and validate a training system for milking procedures that can be applied to milkers with different levels of education. Thirty-four milkers were included in the study. A two-hour training consisting of a lecture and a group dynamics exercise was conducted. Milkers´s theoretical and practical knowledge were compared between two time points, before and after training, by means of evaluations performed on the farms. A questionnaire was developed to evaluate the theoretical knowledge and the practical knowledge was evaluated by means of a milking ability score system based on the observation or their work. Repeated measures and logistic regression models were used to compare the mean of the theoretical and practical scores, and to estimate the chances of performing a correct milking procedure, before and after training, respectively. There was a significant increase in both theoretical (increase of 55.1%) and milking ability (increase of 20.5%) scores after training. Employee status (employee or owner) and level of education were associated with the theoretical and practical learning. Results of this research indicate that the methodology was efficient to qualify milkers on both theoretical and practical aspects. Understanding the technical concepts resulted in improved milking procedures. The proposed method can be used by dairy professionals to disseminate knowledge.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-07-26T16:56:56Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 184759 bytes, checksum: ee62b459ffd119e180fc6ae57a7488cd (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-26T16:56:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 184759 bytes, checksum: ee62b459ffd119e180fc6ae57a7488cd (MD5) Previous issue date: 2001-12-17 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Neste estudo foi testada a eficácia de uma formulação a base de própolis verde, especialmente sua fração etanólica, no tratamento da mastite clínica e subclínica. Foram utilizados 25 e 17 quartos mamários para a forma clínica e subclínica, respectivamente. Estes foram divididos em um grupo tratado com a formulação e outro que recebeu apenas o veículo, sendo avaliada a cura microbiológica e o nú mero de células somáticas no leite. Foram tratados com a formulação de própolis 15 quartos mamários de animais que apresentavam mastite clínica, obtendo-se a cura de 11 quartos. Já os animais que receberam apenas o veículo, o número de cura foi de três dentre dez quartos tratados. Comparando-se estes dois valores, constatou-se que houve diferença significativa entre estes tratamentos (p < 0,05), sugerindo que a formulação exerceu atividade antimicrobiana nos casos estudados. Observou-se sensibilidade dos microrganismos Staphylococcus aureus, Streptococcus uberis, Staphylococcus sp coagulase negativo, Streptococcus agalactiae, Escherichia. coli, levedura e enterobacteria não classificada. O veículo (DMSO) pode ter exercido algum efeito positivo ou negativo sobre o mecanismo de ação da própolis na mastite clínica. Nos casos de mastite subclínica tratados com esta formulação a base de própolis, verificou-se dois quartos mamários 11curados e oito não curados. No grupo de animais que receberam o veículo não foi constatada a cura de nenhum quarto mamário. Portanto, na mastite subclínica não houve diferença significativa entre os dois tratamentos (p > 0,05), ressaltando que o baixo número de amostras pode ter influenciado o resultado. O Staphylococcus aureus não demonstrou sensibilidade à formulação com própolis na mastite subclínica. Com relação ao número médio de células somáticas no leite dos animais com mastite clínica tratados com própolis, observou-se uma redução significativa destas células após o tratamento. Já nos casos de mastite subclínica ocorreu um aumento significativo das células somáticas após a primeira aplicação da formulação seguida por uma diminuição significativa no decorrer da terapia. Esses resultados do número de células somáticas sugerem que esta formulação teve ação antiinflamatória nas duas formas de mastite. / In this study, a formula based on green propolis, especially its ethanolic fraction, has been tested for clinic and subclinic mastitis treatment. 25 and 17 mammary quarters were used for clinic and subclinical treatments, respectively. These were separated in one group, treated with the formulation and another which only received the vehicle, under evaluation of the microbiological cure and the number of somatic cells in the milk. Animals with clinic mastitis in 15 mammary quarters were treated with the propolis formula, achieving cure in 11 quarters. Among the animals that received the vehicle only, cure was the obtained in three of ten treated quarters. Comparison revealed a significant difference between these treatments (p < 0.05), indicating that the formulation had exerted an antimicrobial activity in the studied cases. Sensitivity of the microorganisms Staphylococcus aureus, Streptococcus uberis, Staphylococcus sp negative coagulase, Streptococcus agalactiae, Escherichia coli, yeast and unclassified enterobacteria was observed. The vehicle (DMSO) may have had a positive or negative effect on the mechanism action of propolis in clinic mastitis. In the cases of subclinical mastitis treated with this propolis-based formulation, four mammary quarters were cured, while eight remained uncured. Among the animal group which had received the vehicle, cure was not observed in any of the mammary quarters. However, there was no significant difference between the two treatments (p > 0.05) for subclinical mastitis, but we point out, that the low sample number may have influenced this result. 13Staphylococcus aureus was not sensitive to the propolis formula in subclinical mastitis. After the treatment, a significant reduction in the average number of somatic cells in the milk of those animals with clinic mastitis that had been treated with propolis was stated. On the other hand, there was a significant increase of somatic cells for the cases of subclinical mastitis after the first formulation application, followed by a significant decrease during the therapy continuation. These results of somatic cell numbers indicate that this formulation had anti-inflammatory action in both mastitis forms.

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:05:04Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo6212_1.pdf: 6931212 bytes, checksum: 017a662001da24d39f9c629d562f17e5 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2007 / Dentre os agentes etiológicos da mastite contagiosa dos bovinos, o Staphylococcus aureus apresenta maior prevalência no mundo. Neste estudo foi investigada a diversidade genética de 94 isolados de S. aureus obtidos de leite de vacas com mastite subclínica (87), queijo cru tipo coalho (06) e equipamentos de ordenha (01) em 12 rebanhos leiteiros do Estado de Pernambuco (Brasil), através da análise do polimorfismo da região 3 -terminal do gene da coagulase (PCR/RFLP-coa) e da região intergênica 16S-23S dos operons ribossomais (ribotipagem-PCR), associados à análise de macrorrestrição do DNA genômico, digerido por SmaI, através da eletroforese em gel de campo pulsado (PFGE). A PCR/RFLP-coa revelou dois coagulotipos: Coa1 (~720 pb) que agrupou 62,5% dos isolados, e Coa2 (~950 pb) com 37.2%. O Coa1 foi subtipado em Coa1A (59,6%) e Coa1B (3,2%) após restrição com AluI e HhaI. A ribotipagem-PCR revelou dez ribotipos (R1 R10), dos quais R1 R6 (62,77%) agruparam os coagulotipos Coa1A/Coa1B, e os ribotipos R7 R10 (37,23%) agruparam o coagulotipo Coa2. Na análise do PFGE, considerando 80% de similaridade entre as amostras, foram identificados dez perfis de macrorrestrição (A J). Os índices discriminatórios desses métodos foram de 0.510, 0.741 e 0.836, respectivamente. Vinte e cinco perfis genotípicos (GI GXXV) foram obtidos com a associação desses resultados (índice discriminatório = 0.910). O genótipo predominante foi o GIII, encontrado em três rebanhos (20,21% das amostras). O PFGE foi mais discriminatório que os métodos baseados em PCR. Entretanto, a ribotipagem-PCR é mais rápida, barata e altamente reprodutível e poderá ser útil em investigações epidemiológicas. A presença de S. aureus em amostras de leite mastítico, queijo cru e em equipamentos de ordenha com o mesmo perfil genotípico evidencia o risco da transmissão deste patógeno aos consumidores e a vacas não-infectadas. A identificação de clones prevalentes dentro de um rebanho ou região pode ser usada como base para o desenvolvimento de medidas profiláticas específicas no controle das mastites estafilocócicas

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2016-12-13T12:08:26Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 524623 bytes, checksum: ccb2aae7476cf5b85359d873ffc9e9b7 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-13T12:08:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 524623 bytes, checksum: ccb2aae7476cf5b85359d873ffc9e9b7 (MD5) Previous issue date: 2016-07-20 / Mastite é uma inflamação da glândula mamária e é apontada como a maior causa de perdas econômicas na cadeia láctea mundial. As espécies de Streptococcus estão entre os principais patógenos da mastite. É notável a emergência de patógenos resistentes aos compostos tradicionalmente usados para o controle de doenças. Dessa forma, novas alternativas têm sido buscadas nos produtos naturais, destacando-se as plantas. Rheedia brasiliensis é muito utilizada na medicina popular brasileira com diversos fins terapêuticos. Foi isolado de seu fruto a benzofenona 7-epiclusianona. Uma boa estratégia para aumentar a atividade antimicrobiana é complexar moléculas ativas com metais. Assim, foi sintetizado um complexo metálico composto por duas moléculas de 7-epiclusianona com cobre. O objetivo do presente trabalho foi verificar a atividade de 7-epiclusianona (7-epi) e do complexo metálico 7- epiclusianona-cobre (7-epi-Cu) sobre bactérias do gênero Streptococcus isoladas de mastite bovina, e avaliar a citotoxidade dessas moléculas sobre células MAC-T. Foram utilizados para esse estudo quatro isolados de mastite bovina, dois de Streptococcus agalactiae (SA3930 e SA4038) e dois de Streptococcus uberis (SU959 e SU3580). Eles foram submetidos ao teste de concentração inibitória mínima (CIM) através da microdiluição em caldo, e também foi determinada a concentração bactericida mínima (CBM) em caldo. A curva de tempo de morte foi traçada a partir da contagem de Unidades Formadoras de Colônias em tempos pré-determinados durante 24 horas com os isolados submetidos à CIM e à CBM. O conteúdo de proteína no sobrenadante foi determinado pela centrifugação da suspensão bacteriana tratada com a CIM dos dois compostos, através do método de Bradford. Para avaliar a indução da aderência, foi utilizada uma concentração subinibitória dos compostos. O efeito citotóxico dos compostos foi medido através dos ensaios do MTT e da captação de vermelho neutro sobre células MAC-T. As médias obtidas nos ensaios de MTT, vermelho neutro, teste de liberação de proteínas e avaliação da aderência foram comparas pelo ANOVA seguido pelo Tukey. O nível de significância adotado foi 95% (p<0,05). As CIMs encontradas para os compostos 7-epi e 7-epiCu foram de 7,8 μg mL -1 para as cepas SA4038, SU959 e SU3580. A cepa SA3930 foi resistente a maior concentração testada (125 μg mL -1 ). A CBM para SA4038 com 7-epi foi 15,6 μg mL -1 , para as demais combinações composto/isolado foi 31,3 μg mL -1 . A dinâmica da curva de tempo de morte para os compostos mostrou ação bacteriostática de uma maneira tempo/dose-independente. Não foi evidenciada a presença de proteína no sobrenadante das culturas tratadas com os compostos. 7-epi e 7-epi-Cu que, em subdose, não induziram a aderência das bactérias S. agalactiae e S. uberis. Ambos compostos não apresentaram atividade citotóxica quando na CIM para as células MAC-T, porém foram tóxicos na concentração 7×CIM. Os compostos testados apresentaram excelentes resultados quanto à sua atividade contra essas bactérias Gram-positivas. Uma vez que os resultados dos dois compostos avaliados foram semelhantes, seria mais recomendada a utilização de 7-epi, por ser mais simples e barata sua produção. / Mastitis is an inflammation of the mammary gland and is identified as the major cause of economic losses in global dairy chain. Streptococcus species are among the main mastitis pathogens. It is remarkable the emergence of resistant pathogens to compounds traditionally used for disease control. Thus, new alternatives have been researched in natural products, especially plants. Rheedia brasiliensis is widely used in Brazilian folk medicine with various therapeutic purposes. It was isolated from its fruit the benzophenone 7- epiclusianone. A good strategy to enhance the antimicrobial activity is complex active molecules with metals. Then it was synthesized a metal complex with two molecules of 7-epiclusianone with copper. The aim of this study was to determine the activity of 7-epiclusianone (7-epi) and the metal complex 7- epiclusianone-copper (7-epi-Cu) on bovine mastitis isolated Streptococcus spp, and assess the cytotoxicity of these molecules on MAC-T cells. Were used for this study four bovine mastitis isolates, two Streptococcus agalactiae (SA3930 and SA4038) and two Streptococcus uberis (SU959 and SU3580). They were subjected to a minimum inhibitory concentration test (MIC) by broth microdilution and minimum bactericidal concentration (MBC) test in broth. Time- kill curve was plotted from Forming Units Colony count at predetermined times during 24 hours with the isolates submitted to the CIM and CBM. The protein content in the supernatant was determined by centrifugation of bacterial suspension treated with MIC of both compound by Bradford’s method. To evaluate the induction of adhesion one sub-inhibitory concentration of the compounds was used. Cytotoxic effect of the compounds was measured through MTT assay and neutral red uptake on MAC-T cells. The average obtained in the MTT assay, neutral red uptake, protein leakage and adherence evaluation were compared by ANOVA followed by Tukey. The significance level was 5% (p <0.05). The MICs found for compounds 7-epi and 7 –epi-Cu was 7.8 μg mL -1 to SA4038, SU959 and SU3580 strains. SA3930 strain was resistant to the highest concentration tested (125 μg mL -1 ). CBM for SA4038 with 7-epi was 15.6 μg mL -1 , for the other combinations compound/strain was 31.3 μg mL -1 . Time-kill curve dynamic of compounds showed bacteriostatic action in a manner time/dose independent. There was no evidence of protein in supernatant of cultures treated with the compounds. 7-epi-7-epi-Cu, in sub-doses, no induced S. agalactiae and S. uberis adhesion. Compounds tested showed no cytotoxic activity when at the MIC for the MAC-T cells, but were toxic in 7×CIM. Two compounds tested had excellent results for their activity against these Gram- positive bacteria. Since results of both compounds evaluated were similar, would most recommended use of 7-epi, because its simpler and cheaper production.

A mastite representa um grande desafio na pecuária leiteira, visto que é uma das afecções que mais acometem o rebanho bovino ocasionando grande impacto econômico. As bactérias são importantes agentes associados à enfermidade, sendo que as mais comumente encontradas são as do gênero Staphylococcus, associadas tanto às manifestações clínicas quanto subclínicas. A terapia antimicrobiana é usualmente requerida como tratamento, auxiliando as defesas do animal para a eliminação do agente invasor, sendo assim, de suma importância monitorar a sensibilidade dos patógenos aos antimicrobianos. Visto que a resistência aos medicamentos utilizados tem se tornado frequente, há a necessidade de estudos mais abrangentes sobre o assunto. Desta forma, o presente estudo avaliou 300 isolados de Staphylococcus provenientes de amostras de leite de bovinos com mastite clínica e/ou subclínica de propriedades de exploração leiteira. A espécie mais detectada nas análises foi S. aureus, e dentre os genes que codificam para adesinas e biofilmes os mais frequentes foram (eno, fib e fnbA) e (bap, icaA, icaD). A combinação mais frequente no tocante às adesinas foi eno-fib-fnbA, e para os biofilmes foram bap e bap-icaD. Os maiores índices de resistência foram verificados para os antimicrobianos betalactâmicos (amoxicilina, ampicilina e penicilina). Identificou-se as maiores frequências de sensibilidade para cefalotina, seguida pela oxacilina e gentamicina, e não foi detectada relação de concordância da oxacilina com os betalactâmicos. Avaliou-se a concentração mínima inibitória (MIC) para ampicilina, gentamicina, oxacilina e penicilina, para todas as cepas resistentes no antibiograma. Posteriormente, investigou-se os genes responsáveis pela codificação de resistência antimicrobiana, com os genes femA e femB sendo os mais comuns, porém o gene femA não foi detectado em todas as cepas de S. aureus. Os genes mecA e bla<//i>Z foram identificados, porém em baixa frequência, e o homólogo de mecA, o mecALGA251, somente em duas cepas. As informações obtidas podem ajudar em diferentes aspectos acerca dos perfis dos microrganismos no tocante aos fatores de virulência dos mesmos, permitindo novas abordagens relativas a terapias e medidas de prevenção à mastite. / Mastitis represents a major challenge in dairy farming, since it is one of the affections that most impact the cattle herd, causing great economic distress. Bacteria are important agents associated with the disease, and the most commonly found are those of the genus Staphylococcus, associated with both clinical and subclinical manifestations. Antimicrobial therapy is usually required as a treatment, assisting the animal\'s defenses to eliminate the invading agent, and it is therefore of paramount importance to monitor the susceptibility of pathogens to antimicrobials. Since resistance to drugs commonly used has become frequent, there is a need for more comprehensive studies on the subject. Thus, the present study evaluated 300 isolates of Staphylococcus from samples of dairy cattle from dairy farms. The most prevalent species in the analyses were S. aureus, and among the genes coding for adhesins and biofilms the most frequent combinations were (eno, fib and fnbA) and (bap, icaA, icaD). The most frequent combination for adhesins was eno-fib-fnbA, and for biofilms they were bap and bap-icaD. The highest resistance indices were verified for betalactam antibiotics (amoxicillin, ampicillin and penicillin). The highest frequencies of sensitivity were identified for cephalothin, followed by oxacillin and gentamicin, and no concordance relationship was found between oxacillin and betalactam. Minimum inhibitory concentration (MIC) for ampicillin, gentamicin, oxacillin and penicillin were performed for all strains resistant to the antibiogram. Subsequently, the genes responsible for the encoding of antimicrobial resistance were investigated, with the femA and femB genes being the most common, but the femA gene was not detected in all strains of S. aureus. The mecA and blaZ genes were identified, but at low frequency, and the mecA homolog, mecALGA251, was only found in two strains. The information obtained can help in different aspects about the microorganisms\' profiles regarding their virulence factors, allowing new approaches to therapies and mastitis prevention measures.

Foram submetidas a prova do \"California Mastitis Test\"(CMT), 468 vacas leiteiras pertencentes a seis propiedades rurais produtoras de leite tipo B, localizadas na região do Município de Barretos, SP. Das 56 (12,0 por cento ) fêmeas reagentes a esta prova, 48 (1O,3 por cento ) foram confirmadas através do isolamento e identificação do agente etiológico. A elevada concordância (85,71 por cento ) verificada entre, a prova do CMT e o exame bacteriológico, confirma a eficiência desta prova na detecção de transtôrnos da glândula mamária não perceptíveis clínicamente, uma vez que nenhuma das fêmeas analisadas apresentou sinais da enfermidade. A contagem leucocitária e a pesquisa do teor de cloretos efetuadas nas 56 fêmeas reagentes a prova do CMT, apresentaram concordâncias de 87,5 por cento e 50,0 por cento , respectivamente, em relação ao exame bacteriológico. O Staphylococcus aureus foi o agente etiológico mais frequente (52,08 por cento ) nos casos de mastite bovina. O estudo comparativo entre a contagem padrão em placas e a prova da redução do azul de metileno, efetuado nas 56 amostras reagentes a prova do CMT, revelou que 30 (53,57 por cento ) amostras apresentaram tempo de redução não condizente com o número de microrganismos determinado, isto é, tempo de redução menor que 3 l/2 horas e contagem total de microrganismos inferior a 500.000 microrg/ml. Observou-se, ainda, que destas 30 amostras, 26 (86,67 por cento ) apreesentaram contagens leucocitárias superiores a 2.500.000 leucócitos/ml., sugerindo deste modo, uma provável interferência dos leucócitos quando em número elevado, na prova da redução do azul de metileno. O estudo comparativo entre a contagem padrão em placas e a prova da redução do azul de metileno, efetuado nas 30 amostras negativas a prova do CMT, revelou que 27 (90,0 por cento ) amostras apresentaram o tempo de redução condizente com o número de microrganismos determinado, o que confirma a importância de sua utilização na rotina do Serviço de Inspeção. A provãvel interferência dos leucócitos não compromete a eficiência desta prova, pois as variações observadas ocorrem no sentido de abreviar o tempo de redução, sendo muito pequena a probabilidade de aceitação de um produto com o número de microrganismos superior ao permitido pelo Ministério da Agricultura. Dentre as provas utilizadas pelo Serviço de Inspeção na detecção da mastite bovina a nível de Estabelecimentos Industriais a prova de Whiteside foi a que apresentou maior sensibilidade e especificidade, capaz de revelar a presença de leite anormal em rebanhos cuja prevalência desta doença foi igual ou superior a 7,0 por cento das fêmeas ou 1,4 por cento dos quartos analisados. A pesquisa do teor de cloretos apresentou menor sensibilidade e especificidade, incapaz de revelar a presença de leite anormal em todos os rebanhos analisados. Entretanto, este fato não invalida a utilidade de sua aplicação, pois esta prova pode ser de fundamental importância na detecção de fraudes no leite. A prevalência da mastite bovina em até 20,0 por cento das fêmeas leiteiras ou em ate 5,0 por cento dos quartos examinados, não foi suficiente para colocar os quesitos analisados nas amostras de leite, fora dos padrões normais. Acredita-se que estes padrões devam ser objeto de estudos posteriores. / Four-hundred and sixty-eigth milk cows, belonging to six type B milk producing dayry farms, located in the region of Barretos, SP, Brazil were submitted to \"California Mastitis Test\", of the fifty-six (12,0 per cent ) cows positive to the mentioned test, forty eigth (10,31) had the diagnosis confirmed throght isolation and identification of the etiologic agent. High agreement (85,7 per cent ) was obtained between CMT and bacteriologic examination, which confirms the efficiency of CMT in the detection of diseases of the mammary glands, not perceptible by clinical examination, as none the animals examined presented signs of disease. Leucocyte count and determination of chloride level performed on the fifty-six reactors presented agreement of 87,5 per cent and 50,0 per cent , respectively, with bacteriological examination. Staphylococcus aureus was the most frequently isolated bacterium (52,08 per cent of cases). Comparison between total plate count and reductase test, performed on thirty samples negative to CMT, showed that twenty-seven samples (90,0 per cent ) presented a reduction time compatible with the number of microorganisms present, confirming the importance of reductase test regarding inspection. The theoretical interference of leucocytes was not important in practice, as variations observed were abreviation of reduction time, rendering the propability of accepting a product with a number of microorganisms over legal limits very small. Considering tests used by the Inspection Service for detection of bovine mastitis, the Whiteside test presented highest sensivity and specificity, as it was capable of reveling abnormal milk when prevalence was 7,0 per cent and over, considering animals and 1,1 per cent considering quarters. Chloride level presented lower sensitivity and specificity as it was unable to detect abnormal milk in all dairy farms. However it is very important in the detection of frauds. Prevalence of mastitis of up to 20,0 per cent of animals or of 5,0 per cent of quarters was not sufficient to bring the total milk produced below standards.

O elevado custo dos tratamentos tradicionais da mastite bovina, associado à redução de produção e inviabilidade de tratamento das mastites subclínicas durante a lactação, bem como a exigência cada vez mais rigorosa da ausência de resíduos de antimicrobianos por parte de instituições nacionais e internacionais, impulsiona o desenvolvimento de novas alternativas terapêuticas que visem minimizar o impacto das medidas tradicionais de tratamento. A homeopatia surge como importante alternativa, sendo aceita nacional e internacionalmente. O objetivo do trabalho foi avaliar o tratamento homeopático com Phytolacca decandra 30CH durante a lactação de vacas com mastite subclínica, utilizando parâmetros de qualidade do leite como Califórnia Mastitis Test (CMT), contagem de células somáticas (CCS) totais, porcentagens de polimorfonucleares (PMN) e de mononucleares (MN), teores de proteína, lactose, gordura, sólidos totais (ST) e extrato seco desengordurado (ESD), além da mensuração da produção leiteira. Foram selecionadas 26 vacas, CMT 2+ e 3+ sem sinais de mastite clínica, entre o terceiro e sexto mês de lactação, pluríparas e divididas em dois grupos, um com tratamentos medicamentosos mensais e outro com tratamentos quinzenais. Mensalmente foram colhidas duas amostras de leite de cada glândula mamária (teto) que apresentava mastite subclínica. Uma das amostras foi utilizada para CCS e análise dos componentes do leite, e a outra para identificação microbiológica. Nos grupos tratados, foi administrado o medicamento homeopático Phytolaca decandra 30CH diluído em água e aspergido nas mucosas oro-nasais e vaginais, enquanto que nos grupos denominados controle foi administrado placebo da mesma maneira. A pesagem da produção láctea de ambos os grupos foi realizada quinzenalmente até o final do experimento. Verificou-se então que não houve diferença significativa entre a produção láctea, CCS e a presença de microrganismos na secreção láctea das glândulas quando comparadas antes e depois do tratamento homeopático, dentro de cada grupo, bem como quando comparados os grupos entre si. As medianas de CMT e porcentagens de PMN foram compatíveis com infecções mamárias agudas, embora os animais tenham sido diagnosticados como portadores de mastites crônicas e em nenhum momento desenvolveram sinais clínicos. / The high cost of traditional treatments of bovine mastitis, with the reduction of production and impracticable treatment of subclinical mastitis during lactation, as well as the requirement of an increased demand for absence of antimicrobial agents residues by national and international institutions, drives the development of new therapeutic alternatives in order to minimizing the impact of traditional treatment measures. The homeopathy appears as an important alternative, accepted domestically and internationally. The objective of this work was to evaluate homeopathic treatment with Phytolacca decandra 30CH during the lactation of cows with subclinical mastitis, using some milk quality parameters as California Mastitis Test (CMT), total somatic cell count (SCC), percentages of polymorphonuclear (PMN) and mononuclear (MN) cells, levels of protein, lactose, fat, total solids and dry defatted matter, in addition to the measurement of milk production. Twenty-six cows were selected with CMT 2 + and 3 + without any signs of clinical mastitis, between the third and sixth month of lactation, pluriparous and they were divided into two groups, with monthly or biweekly drug treatments. Monthly were collected two milk samples from each mammary gland (teat) that presented subclinical mastitis. One of the samples was used for analysis of SCC and milk components, and the other one for microbiological identification. In the treated groups, was given the homeopathic medicine Phytolaca decandra 30CH diluted in water and sprayed in the oral-nasal and vaginal mucosa, while to the control group was given placebo following the same method. The weighing of the milk production for both groups was performed fortnightly until the end of the experiment. There was no significant difference between milk production, SCC and the presence of microorganisms in milk gland secretion compared before and after homeopathic treatment, within each group as well as comparing the groups together. The medians of CMT and percentages of PMN were compatible with acute mammary infection, in spite of they have been diagnosed as carriers of chronic mastitis, and at any time no clinical signs have been developed.

O elevado custo dos tratamentos tradicionais da mastite bovina, associado à redução de produção e inviabilidade de tratamento das mastites subclínicas durante a lactação, bem como a exigência cada vez mais rigorosa da ausência de resíduos de antimicrobianos por parte de instituições nacionais e internacionais, impulsiona o desenvolvimento de novas alternativas terapêuticas que visem minimizar o impacto das medidas tradicionais de tratamento. A homeopatia surge como importante alternativa, sendo aceita nacional e internacionalmente. O objetivo do trabalho foi avaliar o tratamento homeopático com Phytolacca decandra 30CH durante a lactação de vacas com mastite subclínica, utilizando parâmetros de qualidade do leite como Califórnia Mastitis Test (CMT), contagem de células somáticas (CCS) totais, porcentagens de polimorfonucleares (PMN) e de mononucleares (MN), teores de proteína, lactose, gordura, sólidos totais (ST) e extrato seco desengordurado (ESD), além da mensuração da produção leiteira. Foram selecionadas 26 vacas, CMT 2+ e 3+ sem sinais de mastite clínica, entre o terceiro e sexto mês de lactação, pluríparas e divididas em dois grupos, um com tratamentos medicamentosos mensais e outro com tratamentos quinzenais. Mensalmente foram colhidas duas amostras de leite de cada glândula mamária (teto) que apresentava mastite subclínica. Uma das amostras foi utilizada para CCS e análise dos componentes do leite, e a outra para identificação microbiológica. Nos grupos tratados, foi administrado o medicamento homeopático Phytolaca decandra 30CH diluído em água e aspergido nas mucosas oro-nasais e vaginais, enquanto que nos grupos denominados controle foi administrado placebo da mesma maneira. A pesagem da produção láctea de ambos os grupos foi realizada quinzenalmente até o final do experimento. Verificou-se então que não houve diferença significativa entre a produção láctea, CCS e a presença de microrganismos na secreção láctea das glândulas quando comparadas antes e depois do tratamento homeopático, dentro de cada grupo, bem como quando comparados os grupos entre si. As medianas de CMT e porcentagens de PMN foram compatíveis com infecções mamárias agudas, embora os animais tenham sido diagnosticados como portadores de mastites crônicas e em nenhum momento desenvolveram sinais clínicos. / The high cost of traditional treatments of bovine mastitis, with the reduction of production and impracticable treatment of subclinical mastitis during lactation, as well as the requirement of an increased demand for absence of antimicrobial agents residues by national and international institutions, drives the development of new therapeutic alternatives in order to minimizing the impact of traditional treatment measures. The homeopathy appears as an important alternative, accepted domestically and internationally. The objective of this work was to evaluate homeopathic treatment with Phytolacca decandra 30CH during the lactation of cows with subclinical mastitis, using some milk quality parameters as California Mastitis Test (CMT), total somatic cell count (SCC), percentages of polymorphonuclear (PMN) and mononuclear (MN) cells, levels of protein, lactose, fat, total solids and dry defatted matter, in addition to the measurement of milk production. Twenty-six cows were selected with CMT 2 + and 3 + without any signs of clinical mastitis, between the third and sixth month of lactation, pluriparous and they were divided into two groups, with monthly or biweekly drug treatments. Monthly were collected two milk samples from each mammary gland (teat) that presented subclinical mastitis. One of the samples was used for analysis of SCC and milk components, and the other one for microbiological identification. In the treated groups, was given the homeopathic medicine Phytolaca decandra 30CH diluted in water and sprayed in the oral-nasal and vaginal mucosa, while to the control group was given placebo following the same method. The weighing of the milk production for both groups was performed fortnightly until the end of the experiment. There was no significant difference between milk production, SCC and the presence of microorganisms in milk gland secretion compared before and after homeopathic treatment, within each group as well as comparing the groups together. The medians of CMT and percentages of PMN were compatible with acute mammary infection, in spite of they have been diagnosed as carriers of chronic mastitis, and at any time no clinical signs have been developed.

Submitted by Leticia Schettini (leticia@ufrrj.br) on 2016-09-20T14:14:37Z No. of bitstreams: 1 2016 - NAIARA DE MIRANDA BENTO RODRIGUES.pdf: 1508318 bytes, checksum: bbf2aebb5d43033339bf559d73461919 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-20T14:14:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016 - NAIARA DE MIRANDA BENTO RODRIGUES.pdf: 1508318 bytes, checksum: bbf2aebb5d43033339bf559d73461919 (MD5) Previous issue date: 2016-02-26 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico - CNPQ / Mastitis adversely affects milk production and in general cows do not regain their full production levels post recovery, leading to considerable economic losses. Moreover the percentage decrease in milk production depends on the specific pathogen that caused the infection and enterobacteria are responsible for this greater reduction. These microorganisms are preferentially found in the habitat of animals in places contaminated with feces, urine, clay and also organic beds. Phenotypic tests are among the currently available methods used worldwide to identify enterobacteria; however they tend to misdiagnose the species despite the multiple tests carried out and they can delay the antibiotic therapy by clinic veterinary. On the other hand the MALDI-TOF MS technique has been attracting attention for its precise identification of several microorganisms at species level. In the current study, 183 enterobacteria were detected in milk (n=47) and fecal samples (n=94) collected from cows; also water (n=23) and milk line samples (n=19) collected from a farm in Rio de Janeiro with the purpose to present the MALDI-TOF MS technique as efficient methodology and also as a ?gold standard? to better understand the possible current biochemical errors in enterobacteria identification considering isolates from bovine environments. This proteomic technique confirmed 92.9% (170/183) of the enterobacteria species identified by biochemical tests that showed high sensitivity (> 81%) and specificity (> 89%). The gyrB sequencing was made in eigth from thirteen misidentified enterobacteria and confirmed 100% the MALDI-TOF results, so the proteomic technique was used as a ?gold standard? for this study. The amino acid decarboxylation test made the most misidentifications and Enterobacter spp was the largest misidentified genus (76.9%, 10/13). E.coli was prevalent (83%, 152/183) in all samples and the bovine milk presented the most enterobacteria diversity. The Salmonella sp wasn?t detected in feces bovine samples and all water samples from different points in the farm presented unacceptable microbiological standards. Was identified enterobacteria in milkers hands and nasal cavity also in the milking machines used on the property. These results aim to contribute significantly to the characterization of the Enterobacteriaceae as well in understanding of its spread in dairy production environment , assisting in need diagnostic of possible agents involved in bovine mastitis as well as to implement properly targeted prophylactic measures. / A mastite bovina afeta negativamente a produ??o de leite dificultando a recupera??o dos n?veis de produ??o total das propriedades leiteiras, levando a perdas econ?micas consider?veis. Esta redu??o no percentual da produ??o de leite pode estar associada ao agente patog?nico espec?fico que causou a infec??o, sendo as enterobact?rias frequentemente respons?veis pela mastite ambiental. Estes microrganismos s?o preferencialmente encontrados no habitat normal dos animais como locais que apresentam esterco, urina, barro e camas org?nicas. Os testes fenot?picos est?o entre os m?todos dispon?veis atualmente utilizados para identificar as enterobact?rias; no entanto, eles podem ocasionalmente identitificar erroneamente algumas esp?cies apesar dos m?ltiplos ensaios realizados. Al?m disso, a demora na sua execu??o pode tardar a antibioticoterapia realizada em campo. Por outro lado, a t?cnica de MALDI-TOF MS tem atra?do a aten??o pela sua identifica??o precisa dos v?rios microorganismos em n?vel de esp?cie. No presente estudo, um total de 183 enterobact?rias foram isoladas a partir de amostras de leite (n=47) e fezes colhidas de vacas em lacta??o (n=94); amostras de ?gua (n=23) e na linha de ordenha (n=19) em uma propriedade situada no Rio de Janeiro. A proposta foi utilizar a t?cnica de MALDI-TOF MS como um m?todo eficaz de identifica??o bacteriana de enterobact?rias e descrever a permanencia destes microrganismos no ambiente de produ??o leiteira. A t?cnica prote?mica confirmou 92,9% (170/183) das esp?cies de enterobact?rias identificadas pelos testes bioqu?micos convencionais. O sequenciamento do gene gyrB, realizado em oito das 13 enterobact?rias que apresentaram identifica??o discordante, confirmou em 100% o resultado da t?cnica prote?mica, que foi utilizada como metodologia de refer?ncia no presente estudo. O g?nero Enterobacter foi o mais discordante pelo m?todo bioqu?mico (76,9%, 9/13). A E.coli foi a esp?cie predominante (83%, 152/183) em todas as amostras avaliadas, sendo que o leite bovino apresentou maior diversidade de enterobact?rias. N?o foi detectada a presen?a de Salmonella spp. nas amostras de fezes bovinas e todas as amostras de ?gua dos diferentes pontos de coleta da propriedade apresentaram padr?es microbiol?gicos inaceit?veis. Foram isoladas enterobact?rias das m?os e cavidades nasal dos ordenhadores, bem como nas ordenhadeiras mec?nicas utilizadas na propriedade. Estes dados visam contribuir de forma significativa para a caracteriza??o das enterobacterias bem como para a compreens?o e sua descri??o no ambiente de produ??o leiteira, auxiliando no diagn?stico preciso dos poss?veis agentes envolvidos na mastite bovina bem como na implementa??o de medidas profil?ticas devidamente direcionadas.

A mastite bovina é comprovadamente um dos maiores problemas atuais da pecuária leiteira no Brasil e no mundo, acarretando ônus aos produtores, à indústria e ao consumidor final. Foram analisadas 240 amostras de leite proveniente de animais com mastite clínica e de animais com mastite subclínica, criados em propriedades leiteiras de alta produção, da região do Planalto Médio, Rio Grande do Sul. Houve isolamento de 250 agentes bacterianos em 218 amostras (90,8%) e 65 agentes leveduriformes em 39 amostras (16,25%). Foram identificados 10 gêneros e 12 espécies de bactérias, sendo os gêneros Staphylococcus, Corynebacterium e Nocardia responsáveis por 88% dos isolados. Foram identificados 08 gêneros (29 espécies) de leveduras além de 02 gêneros de fungos semelhantes a leveduras (04 espécies), sendo os gêneros Candida, Pichia, Cryptococcus e Rhodotorula responsáveis por 80% das espécies isoladas.Apenas 03 amostras apresentaram crescimento puro de leveduras, o restante estando associado com isolamentos bacterianos, o que demonstra uma importante relação entre fungos e bactérias na etiologia das mastites. Mais de 90% dos agentes leveduriformes isolados tiveram crescimento em temperaturas acima de 37ºC, demonstrando seu potencial patogênico. Verificou-se que a prevalência de mastite fúngica na região é significante e fortemente relacionada com a presença de agentes bacterianos, o tratamento inadequado com produtos antimicrobianos e a saúde do úbere. / The bovine mastitis is one of the largest problems of dairy herds in Brazil and all over the world, resulting in losses to producers, to the industry and to the final consumer. High production dairy herds were analyzed in Planalto Médio, Rio Grande do Sul, were 240 samples with clinical and subclínica mastitis were collected. There was the isolation of 250 bacterial agents in 218 samples (90,8%) and 65 yeast organisms in 39 samples (16,25%). There was identification of 10 genera and 12 species of bacteria, and 88% of the isolates were from genera Staphylococcus, Corynebacterium and Nocardia. There was the identification of 08 genera (29 species) of yeasts and 02 genera of yeast-like organisms (04 species), and 80% of the isolates were from genera Candida, Pichia, Cryptococcus and Rhodotorula. Only 03 samples presented pure growth of yeasts, the remaining was associated with bacterial isolations, which demonstrates an important relationship between yeasts and bacteria in the etiology of the mastitis. More than 90% of the yeast isolates had growth in temperatures above 37ºC, which demonstrates their pathogenic potential. It was verified that in this particularly region, the occurrence of mastitis caused by yeasts has a significant importance and are closely related with the bacterial agents' presence, the inadequate treatment with antibiotic products and udder’s health.