Acinetobacter baumannii é um patógeno nosocomial que está envolvido em um amplo espectro de infeções hospitalares. A maior preocupação atual é devido a sua alta capacidade de adquirir mecanismos de resistência, principalmente aos carbapenêmicos, fármacos utilizados normalmente para o tratamento dessas infecções. Desta forma, as opções terapêuticas tornam-se restritas e por isso, as polimixinas (polimixina B e colistina) voltaram a serem utilizadas na prática clínica. A heterorresistência a colistina já foi descrita em estudos recentes com isolados de A. baumannii e outros estudos detectaram a presença de resistência adaptativa as polimixinas. O objetivo deste estudo foi investigar a presença do fenômeno de heterorresistência e resistência adaptativa a polimixina B, e avaliar sua estabilidade. A pesquisa foi feita em isolados pertencentes a 15 clones diferentes de A. baumannii resistentes aos carbapenênicos e sensíveis a polimixina B. A avaliação da heterorresistência foi feita através da análise do perfil da população (PAP) para 29 isolados, selecionados aleatoriamente (pelo menos um de cada clone). A indução da resistência foi avaliada para 22 isolados, selecionados aleatoriamente (pelo menos um de cada clone), submetendo os isolados ao cultivo em concentrações crescentes de polimixina B. A determinação da estabilidade das subpopulações e da indução da resistência foi feita através de passagens, em dias consecutivos, em meio livre de antibiótico. Foram consideradas subpopulações heterogêneas aquele isolado que possuía colônias com uma CIM maior do que a população original para polimixina B. A CIM foi reavaliada após 75 e 60 dias de estocagem em -80ºC para os isolados que apresentaram subpopulação heterogênea ou indução da resistência para a polimixina B, respectivamente. Dos 29 isolados, submetidos a avaliação da heterorresistência, 26 (90%) apresentaram subpopulações heterogêneas para polimixina B. Nenhum isolado apresentou subpopulação superior a 2 μg/mL para polimixina B, ou seja, não foi encontrado neste estudo subpopulações heterorresistentes. As CIMs das subpopulações heterogêneas permaneceram iguais após os subcultivos em meio livre de antibiótico, mas quando a CIM foi reavaliada depois da estocagem, os valores obtidos foram os mesmos da população original. Dos 22 isolados submetidos a indução de resistência, 12 (55%) apresentaram algum crescimento até a concentração de 64 μg/mL de polimixina B. Após as passagens em meio livre de antibiótico a CIM diminuiu, voltando a CIM original na reavaliação após a estocagem a -80ºC. Este estudo mostra pela primeira vez a avaliação da heterorresistência e indução da resistência para polimixina B em isolados de A. baumannii resistentes aos carbapenêmicos. O fenômeno de heterorresistência não foi encontrado neste estudo, no entanto, subpopulações com uma CIM maior do que a original foram identificadas em 90% dos isolados. As CIMs das subpopulações permaneceram estáveis após 4 dias de passagens em meio livre de antibiótico, mas retornaram a CIM original após estocagem, o que sugere o envolvimento de mecanismos moleculares neste fenômeno. A presença da resistência induzida a polimixina B foi detectada em 55% dos isolados, sugerindo que este fenômeno pode ser comum entre os isolados de A. baumannii resistentes aos carbapenêmicos, frente a polimixina B. Embora a presença de subpopulações heterogêneas e a indução da resistência a polimixina B tenha sido comum neste estudo, mais estudos são necessários para um melhor entendimento do significado clínico e das implicações terapêuticas destes dois fenômenos.

Estudos para obter perfis químicos ou físicos de drogas ilícitas destinam-se a provar materialmente a existência de um crime ou para fornecer informações precisas aos serviços de inteligência estratégica e operacional. Um perfil pode ser definido como um conjunto de características específicas selecionadas para proporcionar informações sobre determinada produção, por exemplo, clandestina. Historicamente, focados sobre drogas de abuso, tais estudos podem ser perfeitamente utilizados em outro problema das Ciências Forenses: a falsificação de medicamentos. Seguindo uma tendência mundial, a maior incidência de medicamentos falsificados no Brasil é dos produtos Viagra® (citrato de sildenafila, SLD, Pfizer) e Cialis® (tadalafila, TAD, Eli Lilly). Avaliaram-se perfis físicos e químicos de amostras forenses de Viagra e Cialis falsificados fazendo uso de Análise Multivariada de Dados (AMD). O controle físico dos comprimidos, o perfil inorgânico por espectrometria de fluorescência de raios – X (XRF), o perfil orgânico por espectrometria de massa com ionização por eletro spray (ESI-MS), o perfil de ingredientes farmacologicamente ativos (IFA) por cromatografia líquida acoplada espectrometria de massa (UPLC-MS) e o perfil por espectroscopia de infravermelho (FTIR-ATR) foram avaliados para caracterizar as amostras, detectando falsificações e agrupando amostras com propriedades semelhantes. Os resultados mostraram a presença de falsificações de risco à saúde com a existência de outros IFA do que o especificado na embalagem; a ocorrência simultânea de dois IFA em um mesmo produto; a existência de outros IFA (contaminantes); e concentrações de TAD e SLD muito mais elevadas do que nos medicamentos originais. A aplicação de ferramenta de AMD torna a representação dos dados experimentais mais clara e conclusiva relativamente às diferenças na composição das amostras testadas. Identificamos pares de amostras de apreensões diferentes estreitamente ligadas pelo perfil químico, que podem estar associadas a uma origem ilícita comum de mistura farmacêutica pré-compressão e/ou de ciclo de compressão. Além disso, nossos resultados sugerem a hipótese de uma mesma mistura farmacêutica, contendo apenas SLD, foi empregada na fabricação de comprimidos falsificados de Viagra e de Cialis. / Studies to obtain chemical or physical profiles of illicit drugs intended to materially prove the existence of a crime or to provide to accurate information the strategic and operational intelligence services. A profile can be defined as a series of specific characteristics selected to provide information about certain production (e.g., clandestine). Historically focused on drugs of abuse, such studies can be perfectly used in another problem on Forensic Sciences field: counterfeit medicines. Following a global trend, the highest incidence of counterfeit medicines in Brazil is on the products Viagra® (sildenafil citrate, SLD, Pfizer) and Cialis® (tadalafil, TAD, Eli Lilly). We studied physical and chemical profiles of forensic counterfeit Viagra and Cialis samples using also Multivariate Data Analysis (MDA). Physical control of tablets, inorganic profile by X – Ray fluorescence spectrometry (XRF), organic profile by electrospray ionization mass spectrometry (ESI-MS), active pharmacologically ingredients (API) profile by liquid chromatography coupled mass spectrometer (UPLC-MS) and infrared spectroscopy (FTIR-ATR) profiles were evaluated to characterize the samples allowing detection of counterfeits and grouping samples with similar properties. The results showed the presence of health risk counterfeits with the existence of API other than specified on the package, the simultaneous occurrence of two API in the same product, the existence of others contaminants API and concentrations of TAD and SLD much higher than in original commercial tablets. By applying a MDA tool the experimental data representation becomes more clear and conclusive with respect to the differences in composition of tested samples. We identified paired samples from different seizures closely linked by chemical profile, which can be associated with a common origin of mixture powders and/or tableting cycle. In addition, our results suggest the hypothesis of a unique pharmaceutical powder mixture containing only SLD, which was compressed into counterfeits Viagra and Cialis tablets.

Novas formas terapêuticas e o progresso da medicina proporcionaram a emergência de infecções por Rhodotorula mucilaginosa em pacientes imunocomprometidos. Este estudo tem o objetivo de avaliar a suscetibilidade dos isolados de R. mucilaginosa aos antifúngicos convencionais, verificar a habilidade destes em modificar seu perfil de suscetibilidade após exposição a crescentes concentrações de anfotericina B (AMB) e comparar a atividade antifúngica de AMB ou voriconazol (VCR) em combinação com fármacos diversos frente aos dois grupos de R. mucilaginosa. Trinta e cinco isolados de R. mucilaginosa proveniente de pacientes foram estudados. Os isolados foram identificados baseado em métodos microbiológicos e moleculares. Definimos como grupo I os isolados fúngicos originais e grupo II como estes mesmos isolados após serem submetidos a crescentes concentrações de AMB. A exposição à AMB foi realizada segundo Fekete-Forgács et al., com algumas modificações. Os testes de susceptibilidade foram realizados de acordo com a técnica de microdiluição em caldo (CLSI M27-A3). AMB, caspofungina, fluconazol e VRC foram testadas isoladamente e ciprofloxacino, levofloxacino, anlodipino, ciclosporina A, fluoxetina, ibuprofeno, sinvastatina e varfarina foram testadas em combinação com AMB ou VRC, utilizando a técnica de microdiluição em caldo “checkerboard”. Os isolados do grupo I foram suscetíveis a baixas concentrações de AMB. A suscetibilidade ao VCR foi muito reduzida. Fluconazol e caspofungina não exibiram atividade frente a R. mucilaginosa. A exposição prolongada à AMB modificou a suscetibilidade dos isolados. Os testes de suscetibilidade com os isolados do grupo II mostraram elevadas Concentrações Inibitórias Mínimas (CIMs) para AMB e a inibição pelo VCR requisitou CIMs mais elevadas. No grupo I, a combinação de AMB + ibuprofeno mostrou o maior número de interações sinérgicas. No grupo II, a combinação com o maior número de interações sinérgicas foi AMB + sinvastatina. No grupo I, quando VCR foi combinado com levofloxacino, um potente sinergismo foi observado frente a isolados de R. mucilaginosa. No grupo II, combinação de VRC + ciclosporina A mostrou um potente sinergismo. Os tratamentos para infecção por R. mucilaginosa são restritos e a terapia combinada pode ser uma alternativa quando novos fármacos são combinados com aqueles já disponíveis no mercado. / New therapies and medical progress have led to emerging fungal infections by Rhodotorula mucilaginosa in immunocompromised patients. The objectives of this study were to evaluate the susceptibility profile of Rhodotorula mucilaginosa, verify the ability of this species to change its susceptibility profile after exposure to high concentrations of AMB, and compare the antifungal activity of AMB or voriconazole (VCR) plus combinations of non-antifungal medications against the two groups of R. mucilaginosa. Thirty-five strains of R. mucilaginosa isolated from patients were studied. The isolates were identified based on microbiological and molecular methods. We defined group I to be the original strains isolated from patients and group II as the same strains after in vitro exposure to AMB. AMB exposure was assayed according to Fekete-Forgács et al., with some modifications. Susceptibility tests were performed using the broth microdilution method (CLSI M27-A3). AMB, caspofungin, fluconazole (FLC), and VRC were tested alone and ciprofloxacin, levofloxacin, amlodipine, cyclosporine A, fluoxetine, ibuprofen, simvastatin, and warfarin were tested in combination with AMB or VRC, using the broth microdilution checkerboard technique. All group I isolates were susceptible to low concentrations of AMB. Susceptibility to VRC was quite poor. FLC and CAS exhibited no activity against R. mucilaginosa. Prolonged exposure to AMB changed the susceptibility of the isolates. The susceptibility tests with strains from group II showed high minimal inhibitory concentration (MICs) for AMB and the inhibition by VRC required more elevated MICs. In group I, the combination AMB + ibuprofen demonstrated the highest number of synergistic interactions. In group II, the most synergistic interactions was AMB + simvastatin. In group I, When VCR was combined with levofloxacin, a strong synergism was demonstrate against R. mucilaginosa isolates. In group II, VRC + cyclosporine A combination demonstrated a potent synergism. Treatments for R. mucilaginosa are restricted and a multidrug approach seems to be an alternative by administering novel chemical entity drugs with drugs currently on the market simultaneously.

Tesis para optar al Grado de Magíster en Ciencias Animales y Veterinarias . / Los antibióticos son la principal herramienta terapéutica en el tratamiento de enfermedades de origen bacteriano en los sistemas de producción avícola. Sin embargo, si residuos de estos fármacos permanecen en productos destinados a consumo humano, por sobre los límites máximos residuales (LMR), se pueden producir diferentes efectos adversos sobre la población humana. En el caso de los subproductos como las plumas y a pesar de su uso para la alimentación de otras especies productivas, actualmente no existen estudios del comportamiento de varios antibióticos, como en el caso del florfenicol. De esta manera, en la presente tesis se evaluaron las concentraciones y depleción de florfenicol (FF) y su metabolito activo, florfenicol amina (FFA), en plumas y tejidos comestibles. Para evaluar la depleción de FF y FFA, se utilizó un grupo de 80 pollos broiler criados bajo condiciones controladas, a los que se les administró un tratamiento con una formulación comercial de florfenicol al 10%, vía oral por cinco días. Dos metodologías analíticas por cromatografía líquida asociada a espectrometría de masas (LC-MS/MS), fueron implementadas y validadas, para asegurar que las concentraciones detectadas y cuantificadas de los analitos de interés fueran confiables y precisas. Las concentraciones detectadas a partir de las muestras experimentales fueron cuantificadas a través de la ecuación del análisis de regresión lineal de las curvas de calibración construidas en matriz fortificada con estándares certificados. En el estudio de depleción se estableció un tiempo de depleción de 99 días con un 95% para plumas, considerando el LD (20 μg kg-1) como punto de corte. / Antibiotics are the main therapeutic tool in the treatment of diseases of bacterial origin in poultry production systems. However, if residues of these drugs remain in products intended for human consumption, above the Residual Maximum Limits (MRLs), different adverse effects can occur on the human population. In the case of by-product as feathers and despite their use for feeding other productive species, there are currently no studies of the behavior of several antibiotics, like florfenicol. In this thesis work, concentrations and depletion of florfenicol (FF) and its active metabolite, florfenicol amine (FFA), in feathers and edible tissues were evaluated. To evaluate FF and FFA depletion, a group of 80 broiler chickens raised under controlled conditions were used. They are treated with a commercial formulation of 10% florfenicol orally for five days. Two analytical methodologies by liquid chromatography associated to mass spectrometry (LC-MS / MS), were implemented and validated, to ensure that the detected and quantified concentrations of the analytes were reliable and accurate. The detected concentrations from experimental samples were quantified through the equation of the linear regression analysis of calibration curves constructed in matrix fortified with certified standards. In the depletion study established a 99-day depletion time with a 95% of confidence for feathers, considering LD (20 μg kg-1) as a cutoff point. / Financiamiento: Proyecto Fondecyt de Iniciación a la Investigación 11140530.

Glioblastoma (GB) é o tumor cerebral maligno mais frequente. O prognóstico para os pacientes é ruim e a sobrevida média após o diagnóstico varia de 6 meses a 1 ano. Isso ocorre devido à ineficácia das estratégias terapêuticas dos tratamentos atuais, pois esses tipos de tumores são altamente invasivos. Deste modo, novas estratégias terapêuticas são necessárias. Neste contexto surge a doxazosina (2 - {4 - [(2,3-dihidro-1,4-benzodioxano-2-il) carbonil] piperazina-1-il} -6,7-dimetoxiquinazolina-4amina, um composto quinazolínico pertencente à classe farmacológica dos antagonistas dos receptores adrenérgicos α1, amplamente utilizada na clínica para o tratamento de pressão arterial elevada, assim como no tratamento de retenção urinária relacionado com a hiperplasia benigna da próstata (BPH). O presente estudo avaliou os efeitos do tratamento com doxazosina em modelos experimentais de gliomas humano (U-138MG) e de rato (C6). Observamos que a doxazosina foi capaz de inibir a viabilidade na linhagem celular de glioma de rato C6. Além disso, o fármaco permaneceu estável no meio de cultura após 48 horas de incubação e foi captado pelas células de glioma C6, não apresentando efeito tóxico sobre as células não tumorais (cultura organotípica e cultura primária de astrócitos) em concentrações inferiores a 250µM. Os resultados mostraram que doxazosina foi capaz de diminuir a densidade celular e induzir a morte celular em ambas as linhagens (U-138MG e C6). Além disso, o fármaco induziu a diminuição da fosforilação das proteínas Akt e GSK-3β em 24 e 48hs de tratamento. São vários os possíveis mecanismos que possam estar associados com a ação da doxasozina, dentre eles apoptose, necrose, senescência e/ou autofagia. / Glioblastoma (GB) is the most frequent and most malignant human brain tumor. The prognosis for the patients with GB remains dismal, as median survival after diagnosis varies from 6 month to 1 year. This is largely due to the inability of current treatment strategies to address the highly invasive nature of this disease. Thus, new therapeutic strategies are needed. Doxazosin (2-{4-[(2,3-dihydro-1,4-benzodioxin-2yl)carbonyl]piperazin-1-yl}-6,7-dimethoxyquinazolin-4-amine, a quinazoline compound, is an selective α1-adrenoceptor antagonists, widely used for treatment of high blood pressure as well as in the treatment of urinary retention related with prostate benign hyperplasia (BPH). Doxazosin α1-adrenoceptor antagonists is a very promissing quinazoline drug, may represent chemical starting points to develop more potent death inducing agents free of α1-adrenoceptor antagonistic action and suitable for cancer treatment with minimal and well-tolerated side effects. Within this context, the present study was designed to evaluate the effects of doxazosin treatment in experimental models of gliomas. Doxazosin was able to viability inhibition of the C6 glioma cell line. Moreover, the drug seems to be stable in the culture medium after 48 hours of incubation and was taken up by C6 glioma cells and showed no toxic effect on non-tumor cells at concentrations below 250µM. The results showed that doxasozin was able to decrease cell density and induce cell death in both lineages. In addition, doxazosin induced the inactivation of Akt and of GSK-3β proteins after 24 and 48 hours. Taken together, our results show that doxazosin was able to significantly induce cells death of both, human and rat glioma lines (U-138MG and C6 respectively). The mechanisms associated with this effect involve apoptosis induction, necrosis, senescence or autophagy.

Glioblastoma é um tumor cerebral que apresenta uma alta taxa de invasão, sendo que os pacientes portadores do mesmo possuem uma baixa sobrevida. Um dos maiores desafios encontrados é a resistência do tumor ao principal agente quimioterápico utilizado, a temozolomida, além de apresentar um fenótipo de resistência cruzada a outros quimioterápicos tradicionais como a doxorrubicina. Diversos estudos tem mostrado uma ativação contínua do fator de transcrição Transdutor de sinais e ativador de transcrição 3 (STAT3) em glioblastomas resistentes a quimioterapia. Neste trabalho nós examinamos se células de glioma de rato da linhagem C6 que se tornaram resistentes aos quimioterápicos doxorrubicina e/ou temozolamida, apresentam um conteúdo elevado de STAT3 fosforilada (p-STAT3) e se a inibição deste fenômeno pelo inibidor específico de JAK2/STAT3 AG490, poderia sensibilizar novamente estas células a quimioterápicos. Nós observamos que nossas linhagens resistentes apresentaram um IC50 para temozolamida 11 vezes maior do que a linhagem paterna e 33 vezes maior para doxorrubicina em comparação com a linhagem paterna. Além disto, ambas as linhagens resistentes apresentaram um imunoconteúdo elevado de STAT3. A inibição de STAT3 pelo inibidor de JAK2, AG490, apresentou um decréscimo no imunoconteúdo de p-STAT3, uma parada no ciclo celular na fase G2/M e uma consequente ressensibilização das linhagens resistentes aos seus quimioterápicos. Em suma, os dados aqui apresentados nos levam a acreditar que a inibição de STAT3 poderia ser uma interessante terapia adjuvante a ser estudada para a ressensibilização de pacientes com glioblastoma à quimioterapia. / Glioblastoma is a brain tumor whit high invasiveness and low survival. One of the main characteristics of the tumor is the resistance to the standard chemotherapy to the alkylating agent temozolomide, and the multidrug resistance to other traditional chemotherapeutics like doxorubicin. Signal Transducer and Activator of Transcription 3 (STAT3) has been shown to be constitutive active in glioblastomas resistant to chemotherapy. In this work we examined if C6 cells that became resistant to temozolomide and/or doxorubicin have increased STAT3 phosphorylation (p-STAT3) and if the inhibition of this phosphorylation could re-sensitize these cells. We observed that our two resistant lineages showed higher IC50 for TMZ and DOX in order of 11 and 33 fold higher respectively, and elevated p-STAT3 immunocontent when compared to their parental C6 lineage. The inhibition of p-STAT3 by AG490 50 μM decreased the p-STAT3 immunocontent, induced a G2/M arrest in cell cycle and re-sensitizes the resistant C6-TR and C6-DR to their chemotherapeutics showing a synergetic effect with both chemotherapeutics used in this work. In summary, data present here suggest that the inhibition of STAT3 could be an interesting adjuvant therapy for glioblastoma cells that became resistant to the traditional chemotherapy.

Submitted by PPGASFAR FARMACIA (ppgasfar.rede.ufba@gmail.com) on 2018-07-25T14:15:59Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_Aline_Luz_.pdf: 2128171 bytes, checksum: f0c40a3fa0329fc02b55c10dcdbc053e (MD5) / Approved for entry into archive by Uillis de Assis Santos (uillis.assis@ufba.br) on 2018-07-25T14:24:47Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação_Aline_Luz_.pdf: 2128171 bytes, checksum: f0c40a3fa0329fc02b55c10dcdbc053e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-25T14:24:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_Aline_Luz_.pdf: 2128171 bytes, checksum: f0c40a3fa0329fc02b55c10dcdbc053e (MD5) / Dissertação apresentada por Aline Cristina Barros Luz Amaral para obtenção do grau de mestre em Assistência Farmacêutica

Made available in DSpace on 2016-08-29T15:37:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_6907_Dissertação Lívia.pdf: 1847441 bytes, checksum: b52e9ecbb04f480764d8a1566cdb7d1f (MD5) Previous issue date: 2014-07-31 / FAPES / A doença de Parkinson (DP) é um distúrbio neurodegenerativo causado pela perda dos neurônios dopaminérgicos da substância negra pars compacta, que afeta cerca de 1% das pessoas a partir dos 70 anos. Atualmente, o tratamento principal baseia-se na reposição dos níveis de dopamina (DA) com a administração de levodopa, que ameniza principalmente os distúrbios motores. Outros fármacos, como agonistas dopaminérgicos, são hoje utilizados concomitantemente à levopoda, mas ainda não são efetivos e não previnem o avanço da doença, além de desencadearem diversos efeitos colaterais. Diante disso, existem esforços voltados para a descoberta e identificação de novas moléculas com atividade neuroprotetora, de origem natural, principalmente da biodiversidade da flora brasileira. A planta Combretum leprosum apresenta potencial medicinal vasto com amplo espectro de ação biológica, tais como anti-inflamatória, analgésica, antiepilética, entre outras, porém, seu mecanismo de ação e seus efeitos neuroprotetores ainda não foram completamente elucidados. Neste estudo, exploramos o potencial efeito neuroprotetor do extrato etanólico (EE) de C. leprosum em um modelo murino da DP, utilizando a neurotoxina 1metil4fenill1,2,3,6tetrahidropiridina (MPTP) i.p. na dose de 30 mg/Kg durante 5 dias consecutivos. Foi observada hiperlocomoção exacerbada após a injeção de anfetamina (2 mg/Kg) no grupo tratado com MPTP, efeito este prevenido pelo prétratamento com o EE na dose de 100 mg/Kg. O déficit de força muscular induzido pelo MPTP foi também prevenido pelo prétratamento oral com C. leprosum. No contexto bioquímico, o tratamento com EE não foi capaz de prevenir a depleção dopaminérgica induzida pelo MPTP no estriado. Mas, interessantemente, nossos dados sugerem que o tratamento com EE pode prevenir a depleção induzida pelo MPTP dos metabólitos dopaminérgicos, o ácido homovanílico (HVA) e o ácido 3,4diidroxifenilacético (DOPAC), nesta mesma região. Adicionalmente, o tratamento com EE preveniu as alterações no metabolismo da DA induzidas pelo MPTP. No que tange a parte molecular, o tratamento com EE foi capaz de elevar a expressão do gene da tirosina hidroxilase (TH) na região mesencefálica dos animais. Embora exista tendência de que as diminuídas expressões do transportador de dopamina (DAT) e do receptor dopaminérgico D2 nesta região causada pelo MPTP possam ser prevenidas pelo tratamento com EE, esse dado não foi estatisticamente significativo. Já no estriado, a expressão dos genes da TH, D1 e D2 não diferiu entre os grupos estudados. Nossos resultados evidenciam que o tratamento com o EE na dose de 100 mg/Kg previne alterações motoras e moleculares desencadeadas pelo MPTP, entretanto parcialmente revertendo as alterações bioquímicas. Dessa forma, nosso estudo evidencia um potencial terapêutico da Combretum leprosum na prevenção e tratamento da DP. / The Parkinson’s disease (PD) is a neurodegenerative disturbe caused by neuronal loss of the dopaminergic neurons in the substantia nigra pars compacta, afecting by 1% in people >70 years of age. Currently, the main treatment is based on the replacement of the dopamine levels (DA) with administration of levodopa, which mitigates especially the motor impairment. Other drugs, such as dopamine agonists, are now used concomitantly with levopoda but they are not effective and do not prevent disease progression, beside triggers several side effects. Thus, there are efforts focused on the discovery and identification of new molecules with neuroprotective activity of natural origin, especially of the biodiversity of flora. The plant Combretum leprosum has vast medicinal potential with a wide spectrum of biological action, such as anti-inflammatory, analgesic, antiepileptic, among others, but its mechanism of action and its neuroprotective effects have not been fully elucidated. In this study, we explored the potential neuroprotective effect of ethanol extract (EE) of C. leprosum in a murine model of PD, using the neurotoxin 1-methyl- 4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP) i.p. at a dose of 30 mg/Kg for 5 consecutive days. Exacerbated hyperlocomotion was observed after injection of amphetamine (2 mg/kg) in the group treated with MPTP, an effect prevented by pretreatment with EE at a dose of 100 mg/kg. The deficit in muscle strength induced by MPTP was also prevented by pretreatment with C. leprosum. In biochemical context, treatment with EE was not able to prevent MPTP-induced dopamine depletion in the striatum. However, interestingly, our data suggest that treatment with EE can prevent depletion of dopamine metabolites, homovanillic acid (HVA) and 3,4- dihydroxyphenylacetic acid (DOPAC), in the same region. In addition, treatment with EE prevented the alterations in the metabolism of MPTP-induced DA. Regarding the molecular part, treatment with EE was able to increase the expression of tyrosine hydroxylase (TH) gene in the midbrain region of the animals. Although there is a clear tendency that the lower expression of the dopamine transporter (DAT) and the dopamine D2 receptor in this region caused by MPTP can be prevented by treatment with EE, this finding was not statistically significant. In the striatum, the expression of genes TH, D1 and D2 did not differ between groups. Our results show that treatment with EE at a dose of 100 mg/kg prevents motor and molecular alterations induced by MPTP, however partially reversing the biochemical changes. Accordingly, our study demonstrates the therapeutic potential Combretum leprosum in the prevention and treatment of PD.

Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. CIPHARMA, Escola de Farmácia, Universidade Federal de Ouro Preto. / Submitted by Oliveira Flávia (flavia@sisbin.ufop.br) on 2015-04-07T21:39:45Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) DISSERTAÇÃO_AvaliaçãoAtividadeCardioprotetora.pdf: 1900697 bytes, checksum: 05ab9456d41ec01ea1eeff0e0abf54ae (MD5) / Approved for entry into archive by Gracilene Carvalho (gracilene@sisbin.ufop.br) on 2015-04-10T19:44:12Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) DISSERTAÇÃO_AvaliaçãoAtividadeCardioprotetora.pdf: 1900697 bytes, checksum: 05ab9456d41ec01ea1eeff0e0abf54ae (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-10T19:44:24Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) DISSERTAÇÃO_AvaliaçãoAtividadeCardioprotetora.pdf: 1900697 bytes, checksum: 05ab9456d41ec01ea1eeff0e0abf54ae (MD5) Previous issue date: 2013 / A piridostigmina (PIR), um agente anti-colinesterásico reversível, apresenta efeitos cardioprotetores demonstrados pela redução da dispersão do intervalo QT do eletrocardiograma (ECG) em repouso em portadores de cardiopatias e do prolongamento do intervalo QT induzido por esforço ou, experimentalmente, por estimulação adrenérgica. No entanto, sua curta meia-vida de eliminação e incidência de efeitos adversos são fatores que limitam o seu uso prolongado. Este trabalho teve por objetivo principal a investigação da atividade cardioprotetora da piridostigmina veiculada em lipossomas convencionais multilamelares administrados por via subcutânea. Para isso, foi validado método espectrofotométrico em 270 nm para quantificação lipossomal de PIR. Este demonstrou ser linear entre 0,02-0,09 mg.ml-1. A precisão do método foi determinada intra e inter-dia, obtendo-se como resultados coeficiente de variação entre 1,73 a 2,72 % e 0,32 a 2,32 %, respectivamente. A exatidão variou entre 99,45 e 101,12 %. O método não se alterou em decorrência da matriz lipossomal. Duas formulações lipossomais multilamelares foram desenvolvidas: uma constituída de dioleil-fosfatidilcolina (DOPC) e colesterol (CHOL) ou outra constituída de distearoil-fosfatidilcolina (DSPC) e CHOL. A eficiência de encapsulação foi determinada em 15,4 % e 23,4 %, respectivamente. O método proposto demonstrou especificidade, precisão, exatidão sendo capaz de quantificar a PIR em lipossomas. A atividade cardioprotetora de PIR foi avaliada in vivo em ratos Wistar, por sua capacidade em impedir as alterações cardiovasculares, demonstradas nos sinais de pressão arterial (PA) e ECG, induzidas pela administração I.V. de noradrenalina (NA). Após administração de 10 μg/kg de NA, as formulações lipossomais DSPC e DOPC contendo PIR foram capazes de reduzir significativamente o prolongamento do intervalo QT, com máximos de inibição de 76,4 % e 73,0 %, respectivamente. Ambas as formulações, DSPC:CHOL e DOPC:CHOL, atenuaram o aumento da pressão arterial em até 12 e 24 horas respectivamente. Como o prolongamento do intervalo QT é um preditor de morte súbita e a PIR foi capaz de impedir seu prolongamento após a estimulação simpática, pode-se concluir que o brometo de piridostigmina veiculado em lipossomas e administrado por via subcutânea possui atividade cardioprotetora. ________________________________________________________________________________ / ABSTRACT: Pyridostigmine (PIR), a reversible anticholinestesic, has its cardioprotective effects demonstrated by the reduction of the QT interval of the electrocardiogram (ECG) dispersion at rest in patients with heart disease and QT prolongation induced by exertion or experimentally by adrenergic stimulation. However, its short half-life and the incidence of side efects are factors that limit its prolonged use. This study was aimed to investigate the cardioprotective activity of pyridostigmine conveyed in conventional multilamellar liposomes administered subcutaneously. A spectrophotometric method was validated for quantification at 270 nm of liposomal PIR. It was linear between 0.02 to 0.09 mg.ml-1. The accuracy of the method was determined in and between day, and the results obtained were 1.73 to 2.72%, and 0.32 to 2.32 %, for variation coefficient, respectively. The accuracy ranged between 99.45 and 101.12 %. The method was not affected by the liposomal matrix. Two multilamellar liposomal formulations were developed: one consisting of dioleil phosphatidylcholine (DOPC) and cholesterol (CHOL) and the other consisting of distearoyl phosphatidylcholine (DSPC) and CHOL. The encapsulation efficiency determined was 15.4 % and 23.4 % respectively. The proposed method showed specificity, precision, accuracy being adequate to quantify PIR in liposomes. The cardioprotective activity of PIR was evaluated in vivo in rats for its ability to prevent cardiovascular disorders, demonstrated in signs of blood pressure (BP) and ECG induced by IV administration of noradrenaline (NA). After administration of 10 mg/kg NA, the DSPC and DOPC liposomal formulations containing PIR were able to reduce significantly the QT interval, with a maximum inhibition of 76.4 % and 73.0 % respectively. Both formulations DSPC: CHOL and DOPC: CHOL, attenuated the increase in BP within 12 to 24 hours respectively. As the QT prolongation is a predictor of sudden death and the PIR was able to prevent its prolongation after sympathetic stimulation, it could be suggested that PIR in liposomes administered subcutaneously has cardioprotective activity.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Saúde Coletiva, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2016-04-19T04:15:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 337726.pdf: 2231632 bytes, checksum: 43bc44a5dce2f42513fc808cb839f20c (MD5) Previous issue date: 2015 / Os medicamentos são parte importante da atenção à saúde na atualidade. Não só salvam vidas e recuperam a saúde, como previnem epidemias e doenças. Porém, eles não são substâncias inócuas e a sua má utilização pode trazer graves prejuízos a saúde e desperdício de recursos. Desde quando foram desenvolvidas as primeiras formulações farmacológicas o campo de abrangência dos medicamentos não parou de crescer e apesar do seu papel central na terapêutica contemporânea, a representação simbólica dos medicamentos ultrapassou as fronteiras do que se entende um mero recurso terapêutico. Dados da OMS mostram que os hábitos de utilização de medicamentos em todo mundo é preocupante, sendo um problema global e extremamente sério. No Brasil não é diferente, estudos mostram altas prevalências de consumo de medicamentos pela população e a utilização inadequada dos medicamentos. A Política Nacional de Medicamentos atribui ao gestor municipal responsabilidade de promover o Uso Racional de Medicamentos (URM) junto à população, prescritores e dispensadores. Esse trabalho teve como objetivo propor um modelo de avaliação da gestão municipal da saúde na Promoção do URM, em municípios com população igual ou superior a 100.000 habitantes, com a elaboração do modelo teórico, modelo lógico e da matriz de análise e julgamento. Foi realizado um estudo de avaliabilidade (EA) baseado na metodologia Framework for Program Evaluation in Public Health desenvolvida pelo Center for Disease Control and Prevention (CDC). Foram realizadas análises documentais, revisão de literatura e reuniões com um grupo de interessados para a elaboração dos modelos teórico e lógico e a matriz de análise preliminar composta por critérios, indicadores e padrões. Para a sua validação utilizou-se a técnica de conferência de consenso com especialistas envolvidos na gestão municipal, dispensação e prescrição e área acadêmica relacionadas ao tema de pesquisa em três etapas: rodada online, com manifestação individual e anônima, encontros presenciais com discussões abertas e uma nova etapa virtual. Os elementos que obtiveram consenso compuseram o modelo avaliativo final. Ao final do processo obteve-se um modelo teórico e um modelo lógico das ações da gestão municipal que propiciam o URM nos municípios e uma matriz avaliativa que permite avaliar e emitir um juízo de valor sobre a gestão municipal. A matriz de avaliação foi dividida em duas dimensões (estrutural e operacional), seis subdimensões e vinte e oito indicadores que representam as diversas formas de atuação da gestão municipal paracumprir com a determinação da Política Nacional de Medicamentos. Ao final desse trabalho entendeu-se que gestão municipal é responsável por garantir as condições necessárias à promoção do URM nos serviços de saúde e na comunidade de seus municípios, usando de estratégias diversas e versáteis para melhorar os padrões de utilização de medicamentos na população. As ações da gestão na promoção do URM mostraram-se aptas a serem avaliadas, através da explicitação da plausibilidade do modelo elaborado. O EA indicou a possibilidade de estudos avaliativos visando à qualificação da atuação da gestão na promoção do URM.<br> / Abstract : Medications are an important part of health care today. They do not only save lives and recover health, but also prevent epidemics and diseases. However, they are not harmless substances and its misuse can mean serious damage to health as well as waste of resources. Since first pharmaceutical formulations were developed, drug coverage field has not stopped growing and despite its central role in contemporary therapy, symbolic representation of medicines have overcome the boundaries of what is meant to be merely a therapeutic resource. World Health Organization (WHO) data shows that medication usage habits around the world is worrying, it is becoming a global and extremely serious problem. In Brazil, it is not different as studies have shown high medication consumption prevalence and its inadequate use. The National Medication Policy has named the city manager as responsible for promoting Medicines Rational Use (MRU) within general population, prescribers and dispensers. This work aimed to propose an evaluation model for municipal health management in promoting MRU, considering only cities with population equal or greater than 100,000, including theoretical and logical model development as well as analysis and judgment matrix. An evaluability study was conducted (ES) based on Framework for Program Evaluation in Public Health methodology that has been developed by Center for Disease Control and Prevention (CDC). Documental analysis, literature review and meetings with stakeholders were conducted to develop theoretical and logical models and a preliminary matrix of analysis was composed by criteria, indicators and standards. Its validation was based on consensus conference technique with experts involved in municipal management, dispensing and prescribing as well as academics related to this field of work in three stages: online round, with individual and anonymous expression; face to face meetings with open discussions; and a new online round. Elements used to compose the final evaluative model were the ones obtained by consensus. At the end a theoretical and a logical model of municipal management where MRU is provided and an evaluation matrix that allows to evaluate and judge municipal management were obtained. The evaluation matrix was divided into two dimensions (structural and operational), six sub-dimensions and twenty-eight indicators that represents various ways that municipal administration act to accomplish the National Drug Policy determinations. Finally, it could be understood that municipalmanagement is responsible for ensuring conditions necessary to promote MRU in health services and community, using diverse and versatile strategies to improve standards of medication usage within population. Management actions in promoting MRU were qualified to be evaluated through plausibility explanation of the model developed. This ES has indicated possibility of evaluative studies aiming to qualify management in promoting URM performance.