Submitted by MARCIA ROVADOSCHI (marciar@unifra.br) on 2018-08-16T14:24:58Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_FrancineRodriguesIaniski.pdf: 3871772 bytes, checksum: ea06b31c8ed51f3bf9a88cbfb0d4956c (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-16T14:24:58Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_FrancineRodriguesIaniski.pdf: 3871772 bytes, checksum: ea06b31c8ed51f3bf9a88cbfb0d4956c (MD5) Previous issue date: 2011-12-02 / Alzheimer's disease (AD) is a chronic neurodegenerative pathologic process associated with aging. This disease causes cognition deterioration and memory loss. The formation of senile plaques containing amyloid-β peptide (aβ) is the main characteristic of this disease. Also, AD related with the inflammation and oxidative stress. The lack of drugs used in the prevention and treatment of AD has stimulated the search for new agents that may represent a novel therapeutic alternative. In the present study, we investigated the beneficial effect of meloxicam-loaded nanocapsules in a model of AD induced by intracerebroventricular (i.c.v.) injection of aβ peptide (fragment 25-35) in mice, comparing the effect with free meloxicam. Mice were divided into six groups: (I) control, (II) aβ, (III) Nano, (IV) Free, (V) Nano + aβ and (VI) Free + aβ. Mice were treated with meloxicam-loaded nanocapsules (5 mg/kg, by gavage), free-meloxicam (5 mg/kg, by gavage) or blank nanocapsules. Thirty minutes after treatments, aβ (3 nmol) or filtered water were i.c.v. injected (day 1). Learning and memory were assessed with the Morris water-maze and step-down-type passive-avoidance tasks at the days 4–7 and 7–8 after the aβ injection, respectively. At the end of the experimental protocol, animals were died and brains were removed for determination of reactive species (RS) and non-protein thiols (NPSH) levels, and superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), glutathione peroxidase (GPx), glutathione reductase (GR), glutathione S-transferase (GST) activities. The results demonstrated that aβ injection caused learning and memory deficits in mice, which were verified using the Morris water-maze and step-down-type passiveavoidance tasks. Furthermore, this study showed that oxidative stress was increased in mice that received aβ. The most important findings of the present study was that meloxicam-loaded nanocapsules protected the learning and memory impairments induced by aβ. Moreover, meloxicam-loaded nanocapsules also protected against the increase of oxidative stress. However, free-meloxicam did not have protective effect. All these findings support the beneficial role of meloxicam-loaded nanocapsules in a model of AD induced by aβ. We can suggest that nanocapsules favor the passage of meloxicam through the blood-brain barrier and entry of the drug in the central nervous system. / A doença de Alzheimer (DA) é um processo patológico neurodegenerativo crônico associado ao envelhecimento. Essa patologia ocasiona deterioração da cognição e perda da memória. A formação de placas senis contendo o peptídeo β-amiloide (βa) é a principal característica dessa doença, que também está associada à inflamação e ao estresse oxidativo. A falta de fármacos empregados na prevenção e no tratamento da DA tem estimulado a pesquisa por novos agentes que possam representar uma inovadora alternativa terapêutica. No presente estudo, investigamos o efeito benéfico das nanocápsulas contendo meloxicam sobre o déficit de aprendizagem e de memória em um modelo da DA induzido pela injeção intracerebroventricular (i.c.v.) do peptídeo βa (fragmento 25-35) nos camundongos, comparando o efeito com o fármaco na forma livre. Os camundongos foram divididos em seis grupos: (I) Controle, (II) βa, (III) Nano, (IV) Livre, (V) Nano + βa, (VI) Livre + βa. Os camundongos foram pré-tratados com as nanocápsulas contendo meloxicam (5 mg/kg, por gavagem), ou com o fármaco na forma livre (5 mg/kg, por gavagem), ou com as nanocápsulas brancas. Trinta minutos após os tratamentos, foram injetados i.c.v. o peptídeo βa (3 nmol) ou água filtrada (dia 1). A aprendizagem e a memória foram avaliadas através dos testes do labirinto aquático de Morris e da esquiva passiva, nos dias 4-7 e 7-8 após a injeção do peptídeo βa, respectivamente. No final dos testes comportamentais, os animais foram mortos e os cérebros removidos para a determinação dos níveis de espécies reativas (ER) e tióis nãoproteicos (SHNP), e a atividade das enzimas superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT), glutationa peroxidase (GPx), glutationa redutase (GR) e glutationa S-transferase (GST). Os resultados demonstraram, através dos testes do labirinto aquático de Morris e da esquiva passiva, que a injeção i.c.v. do peptídeo βa causou um déficit na aprendizagem e na memória dos camundongos. Além disso, esse estudo demonstrou que o estresse oxidativo foi aumentado nos camundongos que receberam a injeção i.c.v. do peptídeo βa. Os achados mais importantes desse estudo foram que as nanocápsulas contendo meloxicam protegeram o déficit de aprendizado e de memória induzidas pela injeção i.c.v. do peptídeo βa, assim como foram capazes de proteger contra o aumento do estresse oxidativo. No entanto, o meloxicam na forma livre não apresentou esse efeito protetor. Todos esses achados reforçam o papel benéfico do meloxicam nanoencapsulado em um modelo da DA induzido pela injeção i.c.v. do peptídeo βa, sugerindo que as nanocápsulas favorecem a passagem do meloxicam através da barreira hematoencefálica (BHE) e a entrada do fármaco no sistema nervoso central (SNC)

Submitted by MARCIA ROVADOSCHI (marciar@unifra.br) on 2018-08-17T20:50:41Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_FrancineRodriguesIaniski.pdf: 21588740 bytes, checksum: f2108adb21f0cc7b0e41fb1107cec657 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-17T20:50:41Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_FrancineRodriguesIaniski.pdf: 21588740 bytes, checksum: f2108adb21f0cc7b0e41fb1107cec657 (MD5) Previous issue date: 2016-03-28 / Nanoparticles are considered systems of great interest for medicine, since they can enhance the therapeutic effects of various active as anti-inflammatories, such as meloxicam. The inflammatory process is associated with several diseases. Thus, in the present study, we investigated the pharmacological action of nanoencapsulated meloxicam, pegylated or not, using diseases animal models, associated with inflammation in mice. First, to evaluate the time/response curve of meloxicam loaded-nanocapsules (NC-M) and free meloxicam (M-F) was carried out acute inflammation model (pleurisy) induced by carrageenan (Cg) in male adult Swiss mice (20-25g). Subsequently, it was performed the evaluation of NC-M and M-F effects in Alzheimer's disease (AD) model induced by β-amyloid peptide (βa) in male adult Swiss mice (20-25g). Later, in order to reduce some of challenges that hinder the use of nanoparticles in clinical practice, we tried to coat the nanocapsules with polyethylene glycol (PEG), protecting the nanoparticles from recognition by opsonin and prolonging the circulation time. Finally, we evaluated the effect of nanocapsules containing meloxicam and coated with PEG (NCPEG-M) and M-F in a Parkinson's disease (PD) model induced by the neurotoxin 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP) in male adult C57/black mice (20-25g). For experimental models (pleurisy, AD and PD), mice were divided into six groups: control; induced; nano; free; induced-nano; and free-induced. The animals of control and induced groups received suspensions without meloxicam, mice belonging to nano and induced-nano groups received nanoencapsulated meloxicam (NC-M or NCPEG-M), while the animals of free and free-induced groups received free drug (M-F). Nanoencapsulated and free meloxicam were administered at dose of 5 mg/kg by gavage. In pleurisy model, it was observed that the treatment with the NC-M had a beneficial effect higher than M-F against the increase in total and differential of leukocytes, and in cytokines and of acid α-1-glycoprotein levels induced Cg in the pleural exudate. In AD, the NC-M reversed the memory and learning deficit and the changes on the Na+/K+-ATPase and cyclooxygenase (COX)-2 activities induced by βa in the hippocampus of mice, whereas the M-F only reversed the COX-2 activity. Also in this model, it was found that AD induced by βa peptide, in the short-term, is not a determining factor for reproducing the enzymatic modifications of creatine kinase, adenylate kinase and pyruvate kinase activities observed in the brains of post-mortem patients with AD. Based on the results obtained in models of pleurisy and AD, it can be seen that the NC-M showed anti-inflammatory effect. However, in order to improve the pharmacological effect of NC-M, particularly in diseases that affect the central nervous system, NC-M were coated with PEG and characterized. The NCPEG-M had an average particle diameter of 261 ± 13 nm, polydispersity index of 0.15 ± 0.07, pH values of 5.0 ± 0.2 and zeta potential values of -37.9 ± 3.2 mV. Furthermore, suspensions containing NCPEG-M provided to be highly homogeneous with a narrow size distribution with pH and zeta potential suitable. Pharmacological effect of NCPEG-M was tested in PD model. It was noted that the NCPEGM improved motor and nesting changes, and biochemical changes induced by MPTP, while the M-F had no effect. In this context, we can conclude that NC-M, pegylated or not, exhibited a superior pharmacological effect than free active in different models of diseases related to inflammation in mice. / As nanopartículas são sistemas carreadores de fármacos de grande interesse para a Medicina porque podem potencializar os efeitos terapêuticos de diversos ativos como antiinflamatórios, tais como o meloxicam. Portanto, no presente estudo foi investigada a ação farmacológica do meloxicam nanoencapsulado, peguilado ou não, em modelos animais de doenças associadas ao processo inflamatório em camundongos. Primeiramente, para avaliar a curva tempo/resposta das nanocápsulas contendo meloxicam (NC-M) e do meloxicam livre (M-L) foi realizado um modelo de inflamação aguda (pleurisia) induzido por carragenina (Cg) em camundongos adultos machos (20-25g), da linhagem Swiss. Subsequentemente, foi realizada a avaliação do efeito das NC-M e do M-L em um modelo de doença de Alzheimer (DA) induzido pelo peptídeo β-amilóide (βa) em camundongos adultos machos (20-25g), da linhagem Swiss. Posteriormente, com intuito de diminuir alguns desafios que dificultam a utilização das nanopartículas na prática clínica, buscou-se revestir as nanocápsulas com polietilenoglicol (PEG), visando proteger as nanopartículas contra o reconhecimento pelas opsoninas e assim prolongar o tempo de circulação. Por último, foi avaliado o efeito das nanocápsulas contendo meloxicam e revestidas com PEG (NCPEG-M) e do M-L em um modelo experimental da doença de Parkinson (DP) induzido pela neurotoxina 1-metil-4-fenil- 1,2,3,6-tetra-hidropiridina (MPTP) em camundongos adultos machos (20-25g), da linhagem C57/black. Para os modelos experimentais (pleurisia, DA e DP), os camundongos foram divididos em seis grupos: controle; induzido; nano; livre; nano induzido; e livre induzido. Os animais pertencentes aos grupos controle e induzido receberam suspensões sem o meloxicam, os camundongos pertencentes aos grupos nano e nano induzido receberam o meloxicam nanoencapsulado (NC-M ou NCPEG-M), enquanto os animais dos grupos livre e livre induzido receberam o fármaco na forma livre (M-L). As suspensões contendo meloxicam livre ou nanoencapsulado foram administradas na dose de 5 mg/kg pela via intragástrica. No modelo da pleurisia, observou-se que o tratamento com as NC-M apresentou um efeito benéfico superior ao ativo livre contra o aumento no número total e diferencial de leucócitos, e nos níveis de citocinas e de α-1-glicoproteína ácida induzidas pela Cg no exsudado pleural. Na DA, as NC-M reverteram o déficit de memória e aprendizado, assim como as alterações na atividade da Na+/K+-ATPase e da ciclo-oxigenase (COX)-2 induzidas pelo peptídeo βa no hipocampo dos camundongos, ao passo que o M-L reverteu apenas a atividade da COX-2. Ainda neste modelo, verificou-se que a DA induzida pelo peptídeo βa, em curto prazo, não é um fator determinante para reproduzir as alterações na atividade da creatina cinase, da adenilato cinase e do piruvato cinase observadas nos cérebros post-mortem de pacientes com a DA. Baseado nos resultados obtidos nos modelos da pleurisia e DA, pode-se observar que as NC-M apresentaram efeito anti-inflamatório. Porém, em vista de melhorar o efeito farmacológico dessas NC-M, principalmente em doenças que acometem o sistema nervoso central, as mesmas foram revestidas com PEG e devidamente caracterizadas. As NCPEG-M apresentaram um diâmetro médio de partícula de 261 ± 13 nm, um índice de polidispersão de 0,15 ± 0,07, os valores de pH de 5,0 ± 0,2 e os valores de potencial zeta de -37,9 ± 3,2 mV. Além disso, as suspensões contendo NCPEG-M apresentaram-se altamente homogêneas com estreita distribuição de tamanho, com pH e potencial zeta adequados. O efeito farmacológico das NCPEG-M foi testado no modelo de DP. Observou-se que as NCPEG-M melhoraram as alterações motoras e de nidificação, além de modificações bioquímicas induzidas pelo MPTP, ao passo que o M-L não apresentou efeito. Nesse contexto, pode-se concluir as NC-M, peguiladas ou não, apresentaram um efeito farmacológico superior ao ativo livre, em diferentes modelos de doenças associadas ao processo inflamatório em camundongos.

A modulação das respostas imunológicas em modelos experimentais infectados por Trypanosoma cruzi tem contribuído de maneira importante nas investigações de novas terapias contra a doença de Chagas. Neste estudo, avaliamos a produção de citocinas Th1 e Th2 relevantes na fase aguda da doença, assim como, níveis de prostaglandina E2, nitrito, parasitemia sanguínea e parasitemia tecidual cardíaca em ratos Wistar machos infectados pela cepa Y de T. cruzi. Foram investigados nos 7°, 14° e 21° dias de infecção, as citocinas padrão Th1: IL-2, IFN-, TNF- e padrão Th2: IL-4, IL-10. Os parâmetros foram dosados e interpretados após a administração, ou não, de meloxicam, melatonina ou ambos. A administração de melatonina contribuiu na proteção do hospedeiro submetido à infecção experimental por T. cruzi devido às ações imunomodulatórias previamente atribuídas a esta substância. O bloqueio da síntese de PGE2 atribuído à administração de meloxicam e/ou melatonina durante a fase aguda da infecção foi seguido por uma modulação de citocinas pertencentes aos padrões Th-1 e Th-2. Houve um aumento da síntese de citocinas importantes na proteção do hospedeiro durante a fase aguda da infecção, tais como IFN-, IL-2 e NO. Estes efeitos demonstrados no estudo foram benéficos, sendo evidenciados pela diminuição da carga parasitária dos animais experimentais. Os resultados poderão auxiliar a estabelecer mecanismos alternativos de tratamento na infecção chagásica aguda através de um melhor entendimento das respostas imunológicas anti-T cruzi. / The modulation of the immune responses in experimental models infected with Trypanosoma cruzi has effectively contributed for the investigations of new therapies used to treat Chagas disease. In this study, it was evaluated the production of Th1 and Th2 cytokines, which play a role during the acute phase of the disease, as well as prostaglandin E2 and nitrite, number of blood parasites and cardiac tissue parasitism in male Wistar rats infected with the Y strain of T. cruzi. Experiments were performed on 7, 14 and 21 days after infection in which Th1 cytokines such IL-2, IFN-, TNF- were done and Th2 cytokines as IL-4 and IL-10. The parameters were evaluated with/without the administration of meloxicam, melatonin or both. Melatonin contributed for the hosts protection in animals experimentally infected with T. cruzi through its immunomodulator actions. The blockage of PGE2 synthesis was attributed to the administration of meloxicam and/or melatonin during the acute phase of infection, followed by a modulation of the Th1 and Th2 cytokines. In this work enhanced levels of IFN-, IL-2 and NO were observed. The analysis of these data was beneficial for the hosts protection through a reduced number of amastigote nests in heart tissue. These results permit to establish alternative mechanisms to treat the acute chagasic infection through a better understanding of the immune responses against T cruzi.

Os AINE\'s são frequentemente empregados para o tratamento da dor aguda em gatos, porém, podem ser contraindicados pela propensão em causar efeitos adversos. A dipirona é um antigo analgésico não-opioide extensamente utilizado cujo mecanismo de ação ainda não foi completamente elucidado. O presente estudo prospectivo, randomizado e cego teve como objetivo avaliar o efeito analgésico e o mecanismo de ação via cicloxigenases (COX-1 e 2) da administração por via intravenosa (IV) de dipirona (12,5 mg/kg a cada 12 horas D12,5 ou 25 mg/kg a cada 24 horas D25) ou de meloxicam (0,1 mg/kg a cada 24 horas M) em gatas submetidas à ovariosalpingohisterectomia (OSH) eletiva. Trinta gatas (13 ± 5 meses e 2,7 ± 0,5 kg) foram avaliadas durante 24 horas após o início do tratamento a partir de ferramentas objetivas e subjetivas da dor. Medicação resgate com cloridrato de tramadol (2 mg/kg, IV) foi instituída quando escores ≥ 5 pela Escala Glasgow. A atividade das COX-1 e 2 foi avaliada a partir da mensuração das concentrações de tromboxano B2 (TXB2) e prostaglandina E2 (PGE2). Efeitos adversos foram registrados e exames laboratoriais, incluindo concentrações séricas de dimetilarginina simétrica (SDMA), foram realizados. As análises estatísticas foram efetuadas com o software GraphPad Prism versão 7.03. O grau de significância estabelecido para os testes foi de 5% (P < 0,05). Mudanças nos parâmetros fisiológicos cardiovasculares não foram clinicamente relevantes, porém as gatas do grupo M apresentaram aumento de frequência cardíaca em relação ao basal (P = 0,0331). A temperatura retal reduziu no momento T1h em todos os grupos (P = 0,0001). Houve um aumento da glicemia no momento T4h no grupo D25 (P = 0,0178) e em T1h no grupo M (P = 0,0205). Apesar de os escores de dor e sedação 9 não diferirem entre grupos, a escala analógica visual revelou aumento em T4h em relação ao basal no D12,5 (P = 0,0415) e os escores de sedação em T1h foram superiores ao basal em todos os tratamentos (P < 0,0001). Não houve diferença quanto ao resgate analgésico, porém duas gatas dos grupos D12,5 (20%) e M (20%) e quatro do D25 necessitaram de medicação resgate. As concentrações de TXB2 foram superiores no grupo M em relação ao D12,5 e D25 em T4h (P = 0,0032 e P < 0,0001, respectivamente) e T24h (P = 0,0070 e 0,0111, respectivamente). Houve redução muito significativa em T1/2h, T4h e T24h quando comparados ao T0h em todos os grupos (P < 0.0001) e ocorreu aumento entre T1/2h e T4h no grupo M (P = 0,0004). As concentrações de PGE2 estimulada por lipopolisacarídeos (LPS) foram superiores em D25 em relação ao M em T4h (P = 0,0479). No grupo D12,5, em T1/2h, esta foram inferiores as de T0h (P = 0,0001) e T4h (P = 0,0112). O mesmo ocorreu no grupo D25 em T0h, T4h e T24h (P < 0,0001, P = 0,001 e 0,0004, respectivamente) enquanto que no M, os momentos T1/2h e T4h apresentaram valores inferiores ao T0h (P = 0,0016 e 0,0075). As concentrações séricas de SDMA do grupo D25 reduziram em T24h quando comparadas as de T0h (P = 0,0322), porém apenas uma gata do grupo M apresentou concentração acima do limite para a espécie. A partir dos resultados observados conclui-se que os protocolos analgésicos instituídos foram efetivos para o controle da dor pós-operatória neste contexto, apresentando inibição não seletiva COX-2 sem causar efeitos adversos e alterações hematológicas, na atividade das enzimas hepáticas e na taxa de filtração glomerular. / NSAIDs are often used for treatment of acute pain in cats, but it may be contraindicated for propensity to cause adverse effects. Dipyrone ia a widely used non-opioid analgesic whose mechanism of action has not yet been fully elucidated. The present prospective, randomized, blind study aimed to evaluate the analgesic effect and mechanism of action of inhibition of cycloxigenases (COX-1 and 2) of intravenous (IV) administration of dipyrone (25 mg/kg q 24 hours or 12.5 mg/kg q 12 hours) or meloxicam (0.1 mg/kg q 24 hours) in cats underwent elective ovariohysterectomy. Thirty cats (13 ± 5 months and 2,7 ± 0,5 kg) were evaluated for 24 hours after surgical procedure using objective and subjective pain tools. Rescue medication with tramadol hydrochloride (2 mg/kg IV) was administrated when scores ≥ 5 by the Glasgow scale. The activity of COX-1 and 2 was assessed by measuring the concentrations of thromboxane B2 (TXB2) and prostaglandin E2 (PGE2). Adverse effects were recorded and laboratory tests, including serum concentrations of symmetrical dimethylarginine (SDMA), were performed. Data was analyzed with GraphPad Prism version 7.03. Values of P < 0.05 were considered significant. Changes in cardiovascular parameters were not clinically relevant, but the M group presented higher heart rate than basal (P = 0.0331). The rectal temperature reduced at time T1h in all groups (P = 0.0001). There was an increase in blood glucose at time T4h in group D25 (P = 0.0178) and in T1h in group M (P = 0.0205). Although pain and sedation scores did not differ between groups, the visual analogue scale 11 showed an increase in T4h over baseline in D12.5 (P = 0.0415) and sedation scores in T1h were higher than baseline in all treatments (P < 0.0001). There was no difference in the analgesic rescue, but two cats of D12.5 (20%) and M (20%) groups and four from the D25 required rescue medication. The concentrations of TXB2 were higher in M group compared to D12.5 and D25 at T4h (P = 0.0032 and P < 0.0001, respectively) and T24h (P = 0.0070 and 0.0111, respectively) and there was a very significant reduction in T1/2h, T4h and T24h when compared to T0h in all groups (P < 0.0001) and there was an increase between T1/2h and T4h in group M (P = 0.0004). Concentrations of lipopolysaccharide-stimulated PGE2 (LPS) were higher in D25 compared to M in T4h (P = 0.0479). Those in the D12.5 group, in T1/2h, were lower than in T0h (P = 0.0001) and T4h (P = 0.0112). The same occurred in group D25 at T0h, T4h and T24h (P <0.0001, P = 0.001 and 0.0004, respectively) whereas in M, T1/2h and T4h moments presented values lower than T0h (P = 0.0016 and 0.0075). Serum concentrations of SDMA of D25 group decreased in T24h when compared to T0h (P = 0.0322) and only one cat (group M) showed serum concentration above the feline cut-off. In conclusion, the analgesic protocols were effective for the control of postoperative pain in this context, presenting COX-2 non-selective inhibition without causing adverse effects and hematological, liver enzyme activity and glomerular filtration rate alterations.

Master of Science / Department of Clinical Sciences / Hans Coetzee / Dehorning is a painful husbandry procedure that is commonly performed in dairy calves. Parenteral meloxicam combined with local anesthesia mitigates the physiological and behavioral effects of dehorning in calves. The purpose of this study was to determine the influence of timing of oral meloxicam administration on physiological responses in calves after dehorning. Thirty Holstein bull calves 8- 10 weeks of age (28-70 kg) were randomly assigned to one of three treatment groups: placebo-treated control group (CONT) (n=10), calves receiving meloxicam administered orally (1 mg/kg) in powdered milk replacer 12 h prior to cautery dehorning (MEL-PRE) (n=10) and calves receiving meloxicam administered as an oral bolus (1 mg/kg) at the time of dehorning (MEL-POST) (n=10). Following cautery dehorning, blood samples were collected to measure cortisol, substance P (SP), haptoglobin, ex-vivo prostaglandin E2 (PgE2) production after lipopolysaccharide stimulation and meloxicam concentrations. Maximum ocular temperature (MOT) and mechanical nociceptive threshold (MNT) was also assessed. Data were analyzed using non-compartmental pharmacokinetic analysis and repeated measures ANOVA models. Mean peak meloxicam concentrations were 3.61 ± 0 .21 μg/mL and 3.27 ± 0.14 μg/mL with average elimination half-lives of 38.62 ± 5.87 h and 35.81 ± 6.26 h in the MEL-PRE and MEL-POST groups respectively. Serum cortisol concentrations were lower in meloxicam-treated calves compared with control calves at 4 h post-dehorning (P=0.0004). SP concentrations were significantly higher in control calves compared with meloxicam-treated calves at 120 h after dehorning (P=0.038). PgE2 concentrations were lower in meloxicam-treated calves compared with control calves (P=0.001). MNT was higher in control calves at 1 h after dehorning (P=0.02) but meloxicam-treated calves tended to have a higher MNT at 6 h after dehorning (P=0.07). There was no effect of timing of meloxicam administration on plasma cortisol concentrations (P= 0.69), SP concentrations (P=0.86), haptoglobin concentrations (P=0.86), MOT (P=0.90), or MNT (P=0.99). However, PgE2 concentrations in MEL-PRE calves were similar to CONT calves after 12h post-dehorning, while MEL-POST calves had lower PgE2 concentrations for 3 d post dehorning. These findings suggest that meloxicam reduced cortisol, SP and PgE2 after dehorning but only PgE2 production was significantly affected by the timing of meloxicam administration.

A number of routine painful procedures such as castration and tail-docking are currently performed in swine production without the benefit of anaesthesia or analgesia. In addition, parturition is generally considered painful. Providing analgesics at the time of castration and tail-docking lowered plasma cortisol levels of the piglets suggesting a reduction in pain associated with the procedures. The use of the non-steroidal antiinflammatory drug meloxicam also resulted in less isolated behaviour of male piglets following castration. Providing meloxicam routinely following parturition did not result in reduced neonatal mortality or piglet growth, but lowered plasma cortisol suggesting a reduction in pain. Producers in the future may need to consider using pain control as part of their standard operating procedures in order improve piglet welfare and meet their consumers’ expectations, but are unlikely to see an economic return associated with improved productivity. / Please do not reject this before tomorrow afternoon. I am going to stop by the Office of Graduate Studies and hand in the necessary documents. / Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. and Ontario Pork

Šio darbo tikslas buvo ištirti hidrofilinių gelių pritaikymo galimybes transderminiam meloksikamo vartojimui. Gelių gamybos metu buvo taikomas temperatūros keitimo metodas. Visi hidrogeliai gaminami pagal pasirinktą 1,1 Pa•s ±15 proc. klampą. Meloksikamo mėginių analizė atliekama naudojant UV spektrofotometrijos metodą, puskiečių vaisto formų kokybiniam ir biofarmaciniam įvertinimui atliekami pH, dinaminės klampos, dalelių dydžio, gelių vienalytiškumo nustatymo testai, vaistinės medžiagos atsipalaidavimo tyrimai in vitro ir skvarbos į odą tyrimai ex vivo. Bandymo rezultatai parodė, kad meloksikamo hidrogelių, kuriuose vaistinė medžiaga įvesta tirpalo forma, pH siekė 6,24-6,70, suspensine forma – 5,45- 6,89. Atlikus klampos matavimą, paaiškėjo, kad įvedus meloksikamą į puskietę sistemą, jos klampa padidėja. Atpalaidavimo tyrimų in vitro metu buvo nustatyta, kad iš hidrogelio su natrio karboksimetilceliulioze (50-200 cP) per 120 min. atsipalaidavo 57,8 ± 4,5 proc. meloksikamo, su natrio karboksimetilceliulioze (200-400 cP) – 36,9± 2,2 proc., su metilceliulioze - 35,5 ±4,1 proc., su hidroksipropilmetilceliulioze – 33,4 ± 1,3 proc., su poloksameru 407 - 14,2 ± 2,3 proc. Iš hidrogelių, kuriuose meloksikamas įvestas suspensine forma, natrio karboksimetilceliuliozės (50-200 cP) sudėtyje turintis gelis atpalaidavo 20,3±4,7 proc. vaistinės medžiagos. Atlikus skvarbos tyrimą ex vivo, iš kontrolinio meloksikamo tirpalo prasiskverbė 0,96 proc. medžiagos, iš hidrogelio tikslaus... [toliau žr. visą tekstą] / The aim of this work was to investigate the application of hydrogels for meloxicam transdermal use. Gels were prepared using temperature mixing method. All types of gels were made according to established viscosity of 1,1 Pa•s ±15 %. The quantitative determination of meloxicam was performed by UV spectrofotometry method. Characterisation of prepared gels was evaluated by pH measurement, viscosity, particle size analysis, in vitro drug release and ex vivo skin permeation studies. Results showed that the pH of the prepared gel formulations was in the range of 6,24-6,70 in liquid form incorporated meloxicam and in the form of suspension 5,45-6,89. Viscosity measurement showed that meloxicam increases the viscosity of semisolid preparations. In vitro release studies showed that the hydrogel with sodium carboxymethylcellulose (50-200 cP) over 120 min relaxed 57,8 ± 4,5% of meloxicam, with sodium carboxymethylcellulose (200-400 cP) – 36,9± 2,2 %, with methylcellulose - 35,5 ± 4,1 %, with hydroxypropilmethylcellulose – 33,4 ± 1,3 %, with poloxamer 407 - 14,2 ± 2,3 %. Suspension type hydrogel of meloxicam with a sodium carboxymethyl cellulose (50-200 -cP) relaxed 20,3 ± 4,7 % drug substances. During the experiment were prepared similar to the skin pH meloxicam hydrogels. In vitro studies have shown that the incorporating meloxicam in gel by suspension do not provide sufficient drug substance release. Diffusion rate of drugs generally depends on the physical structure of the... [to full text]

Zugl.: Giessen, Universiẗat, Diss., 2008.

Zugl.: Giessen, Universiẗat, Diss., 2008.

Submitted by MARCIA ROVADOSCHI (marciar@unifra.br) on 2018-08-17T20:45:44Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_BenonioTerraVillalba.pdf: 5654447 bytes, checksum: f5885e09d3992ac3d4d8f1af9ac53c88 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-17T20:45:44Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_BenonioTerraVillalba.pdf: 5654447 bytes, checksum: f5885e09d3992ac3d4d8f1af9ac53c88 (MD5) Previous issue date: 2015-06-22 / Neuropathic pain is a challenge in the therapeutic approach. Although there is a wide range of analgesics, they often are not effective. Furthermore, the use of long-term drug can caused significant adverse effects. Therefore, the mains of this study was to investigate a new pharmacological alternative for the treatment of neuropathic pain using meloxicam-loaded nanocapsules (M-NC) in mice, as well as to study the toxicological effects of nanoparticles in the liver and stomach of animals. Male Swiss mice were used. In toxicological study, mice were divided into three groups: control - treated with blank nanocapsules (B-NC); nano - treated with M-NC; and free - treated with free meloxicam (M-F). Treatments were performed daily for five consecutive days at dose of 10 mg/kg, intragastrically (i.g.). On the seventh day, animals were killed and liver, stomach and blood were removed for analysis. M-NC treatment did not cause stomach ulcerogenic parameters and lipid peroxidation in the stomach and liver, while M-F caused ulcerogenic changes in the stomach and increased lipid peroxidation in the stomach and liver. M-NC and M-F treatment promoted mild histological alterations in the liver and stomach of animals. Biochemical parameters in the blood were not changed in any of groups tested. In the diabetic neuropathy, animals were initially divided into two groups: I - no diabetic (treated with 0,9 % saline, 10 ml/kg); II - diabetic (streptozotocin (STZ), 100mg/kg). These treatments were performed during three consecutive days. One week after the first injection of STZ, animals were subjected to six hours fasting for determination of blood glucose levels. After glucose measurement, animals were treated with M-NC or B-NC or M-F and behavioral tests (time 0) (mechanical and thermal hypersensitivities) were performed. M-NC and M-F were administered at dose of 5 mg/kg by i.g. via. Twenty-four hours after treatments, animals were again submitted to behavioral tests (mechanical and thermal hypersensitivities), open field test and printing paws. After, animals were killed; blood was collected for glucose measurement in the blood, glycosylated hemoglobin and determination of cytokines; as well as sciatic nerve was collected for optical and electronics microscopies and immunohistochemistry. M-NC treatment restored nociception, blood glucose levels, gait, and changes in sciatic nerve immunohistochemical and ultrastructural, while partially restored cytokine levels in the blood and not restored locomotor and exploratory activities of animals. M-F treatment did not restore behavioral, 14 immunohistochemical and ultrastructural changes, but partially restored the cytokines levels in the blood. In conclusion, M-NC showed a more antinociceptive and anti-inflammatory effects than M-F in the treatment of diabetic neuropathy. Moreover, M-NC showed low toxicity in the stomach and liver of mice. / A dor neuropática tornou-se um desafio quanto à abordagem terapêutica já que, embora exista uma gama grande de analgésicos, estes, muitas vezes, não são eficazes. Além disso, o uso de fármacos em longo prazo pode desencadear efeitos adversos significativos. Por isso, o presente estudo buscou uma nova alternativa farmacológica para o tratamento da dor neuropática utilizando nanocápsulas contendo meloxicam (NC-M) em camundongos, bem como se estudou os efeitos toxicológicos destas nanopartículas no fígado e estômago dos animais. Para isso, foram utilizados camundongos Swiss machos. No estudo toxicológico, os camundongos foram divididos em 3 grupos: controle – tratados com nanocápsulas brancas (NC-B), nano – tratados com NC-M e livre – tratados com o meloxicam livre (M-L). Os tratamentos foram realizados diariamente por 5 dias consecutivos na dose de 10 mg/Kg pela via intragástrica (i.g.). No sétimo dia os animais foram mortos e os fígado, estômago e sangue foram removidos para as análises. O tratamento com as NC-M não causaram alterações ulcerogênicas no estômago ou peroxidação lipídica no fígado e estômago, enquanto o tratamento com o M-L causou alterações ulcerogênicas no estômago, aumento da peroxidação lipídica no estômago e no fígado. As alterações histológicas no fígado e estômago dos animais tratados com as NC-M e com o M-L foram leves. Não foram observadas alterações nos parâmetros bioquímicos sanguíneos em nenhum dos grupos testados. Para a avaliação do efeito das NC-M na neuropatia diabética, os animais foram inicialmente divididos em dois grupos: I – não diabéticos (tratados com salina 0,9 %, 10 ml/Kg); e II – diabéticos (estreptozotocina (STZ), 100mg/Kg). Estes tratamentos foram realizados durante três dias consecutivos. Uma semana após a primeira injeção de STZ, os animais foram submetidos a um jejum de seis horas para dosagem de glicemia. Após a aferição da glicose, os animais foram tratados com as NC-B ou NC-M ou o M-L. e submetidos aos testes comportamentais (tempo 0) (teste de hipersensibilidade mecânica e térmica). NC-M e o M-L foram administrados na dose de 5 mg/Kg pela via i.g. Vinte e quatro horas após os tratamentos os animais foram submetidos novamente aos teste comportamentais (teste de hipersensibilidade mecânica e térmica), teste do campo aberto e impressão de pegadas. Após os testes comportamentais, os animais foram mortos e o sangue foi coletado para dosagem da glicemia, hemoglobina glicosilada e determinação de citocinas, bem como a coleta do nervo ciático para microscopia óptica, eletrônica e imuno- 12 histoquímica. O tratamento com as NC-M restaurou a nocicepção, a glicemia, a marcha, as alterações na imuno-histoquímica e ultraestruturais no nervo ciático, enquanto restauraram parcialmente os níveis de citocinas no sangue e não restauraram a atividade locomotora e exploratória dos animais. O tratamento com M-L não restaurou as alterações comportamentais e na imuno-histoquímica e ultraestruturais, porém restaurou parcialmente os níveis de citocinas plasmáticas. Com isso, pode-se concluir que as NC-M apresentaram um efeito antinociceptivo e anti-inflamatório mais evidente que o M-L no tratamento da neuropatia diabética, com sinais de toxicidade reduzidos.