A esterigmatocistina (ST) é uma micotoxina policetônica produzida por diferentes espécies de Aspergillus e outros gêneros fúngicos como Bipolaris e Chaetomium. Esta toxina é caracterizada como uma bifuranoxantona com fórmula molecular C18H12O6, freqüentemente encontrada como contaminante de diversos produtos alimentícios como sementes oleaginosas e cereais. Possui propriedades carcinogênicas, toxigênicas, mutagênicas e teratogênicas, entretanto, ela é menos tóxica do que a aflatoxina. O fungo Emericella nidulans (Eidam) Vuillemin, cujo anamorfo é o Aspergillus nidulans (Eidam) Winter, foi usado como modelo genético para a investigação de genes envolvidos na via biossintética da esterigmatocistina. Linhagens estoque de Utrecht (originárias de Glasgow) foram analisadas quanto à produção de ST e, entre elas, somente a linhagem UT196 [yA2 (I); metA17 (II); piroA4 (IV)] apresentou produção de 4 ppm de ST (stc+), enquanto que as linhagens UT448 e UT184 mostraram-se não produtoras dessa micotoxina (stc). Embora a linhagem UT196 seja muito bem caracterizada geneticamente, este foi o primeiro relato da produção de ST nessa linhagem. Os índices de segregação alélica e todas as freqüências de recombinação entre os marcadores genéticos ligados e não ligados foram determinados tanto pelo cruzamento meiótico UT448 (stc) x UT196 (stc+) como pelo cruzamento mitótico UT448//UT184. 175 segregantes meióticos e 140 segregantes mitóticos foram analisados quanto à produção de ST, aos marcadores de auxotrofia e de resistência a acriflavina. Essas linhagens cruzadas apresentavam vários marcadores em heterozigose e isso permitiu o mapeamento de um gene estrutural da ST (stcZ+), localizado no braço esquerdo do cromossomo I, 4% distante do gene da riboflavina (riboA1). Como um subproduto deste trabalho, foi detectado um pigmento vermelho, de Rf = 0,90, em todos os segregantes meióticos e mitóticos, produtores ou não de ST, indicando tratar-se, provavelmente, de um pigmento policetônico produzido pelos ascosporos do fungo. A baixa expressão da produção de ST em 13 segregantes meióticos e a alta expressão dessa toxina nos diplóides UT448//UT196 e UT448//UT184 (40 ppm) permitiram concluir a existência de um fator regulador, compreendido na região w-met do cromossomo II, responsável pela expressão do gene estrutural stcZ+. A análise desses genes através do ciclo parassexual sugeriu um comportamento epigenético típico envolvendo esses genes. Com base nos dados obtidos, hipóteses para explicar o controle da expressão desses genes e suas inter-relações foram aqui apresentadas. / Sterigmatocystin (ST) is a polyketide produced by different species of Aspergillus as well as by other fungus genera such as Bipolaris and Chaetomium. This toxin is characterized as a bifuranoxanthone, whose molecular formula is C18H12O6 and which is frequently found as a contaminant in several food products such as oil-seed grains and cereals. It has carcinogenic, toxigenic, mutagenic and teratogenic properties; however, it is less toxic than aflatoxin. The fungus Emericella nidulans (Eidam) Vuillemin, whose anamorph is Aspergillus nidulans (Eidam) Winter, was used as a genetic model to investigate the genes involved in the sterigmatocystin biosynthetic pathway. Strains from Utrecht stocks (originally from Glasgow) were analyzed in order to detect ST production and, among them, only the UT196 strain [yA2 (I); metA17 (II); piroA4 (IV)] showed the production of 4 ppm of ST (stc+), whereas the UT448 and UT184 strains showed to be nonproducers of such toxin (stc). Although the UT196 strain is very well characterized genetically, this has been the first report on its production of ST. The allelic segregation rates and all the recombination frequencies between linked and non-linked genetic markers were determined by both the meiotic crossing UT448 (stc) x UT196 (stc+) and mitotic crossing UT448//UT184. 175 meiotic segregants and 140 mitotic segregants were analyzed as to ST production, auxotrophy markers and resistance to acriflavine. These crossed strains presented various markers in heterozygous configuration, which allowed to map a structural gene of ST (stcZ+) located on the left arm of chromosome I, 4% distant from the riboflavin gene (riboA1). As a byproduct of this work, a red pigment of 0.90 Rf was detected in all meiotic and mitotic segregants, whether they were ST producers or not, which indicated that was probably a polyketide produced by the fungus ascopores. The low expression of ST production in 13 meiotic segregants and the high expression of such toxin in the UT448//UT196 and UT448//UT184 diploids (40 ppm) allowed to conclude that a regulating factor existed in the w-met region of chromosome II, which is responsible for the expression of the structural gene stcZ+. The analyses of those genes through the parasexual cycle suggested a typical epigenetic behavior which involved them. Based on the data obtained, hypotheses to explain the expression control of these genes as well as their inter-relationships were here presented.

Nostoc é um gênero cianobacteriano com distribuição ubíqua que tem importância em diversos ecossistemas. Contudo, poucos genomas estão atualmente disponíveis para esse gênero. Enquanto Nostoc spp. são as cianobactérias mais comumente relatadas em relações simbióticas com fungos, animais, plantas e outros organismos, associações com outros micro organismos não receberam atenção similar. Como consequência das fortes interações entre cianobactérias e heterótrofos, culturas não axênicas são geralmente obtidas no isolamento dessas bactérias, o que proporciona uma oportunidade interessante para o desenvolvimento tanto de estudos genômicos quanto metagenômicos. Este trabalho teve como objetivo investigar as características genômicas e funcionais da linhagem Nostoc sp. CENA67, isolada de terra preta antropogênica, bem como estudar sua comunidade associada. Para esse fim, células de uma cultura não axênica de Nostoc sp. CENA67 foram sequenciadas com as plataformas MiSeq e Ion PGM e analisados com ferramentas genômicas e metagenômicas. A linhagem CENA67 de fato pertence à família Nostocaceae e possui algumas características em comum com cianobactérias do gênero Nostoc, porém diverge em certos aspectos morfológicos e filogenéticos do grupo típico de Nostoc, sugerindo que seja representante de um novo táxon. Além disso, seu genoma apresenta diferenças em relação aos genomas atualmente disponíveis para cianobactérias relacionadas ao gênero. A mineração desse genoma revelou 31 agrupamentos gênicos hipoteticamente relacionados à síntese de metabólitos secundários, a maioria dos quais não mostrou similaridade significativa com agrupamentos conhecidos. A análise de um agrupamento gênico de microviridina desvendou uma maior diversidade de genes para precursores dessa molécula do que se acreditava anteriormente, sugerindo que um número considerável de variantes ainda está a ser descoberta. A análise taxonômica da comunidade associada confirmou a dominância de cianobactérias na cultura, mas também revelou a presença de grande número de gêneros microbianos que normalmente são capazes de fixar nitrogênio atmosférico e estabelecer simbiose com plantas, incluindo Mesorhizobium, Sinorhizobium e Starkeya, entre outros. Rascunhos genômicos foram obtidos para Bradyrhizobium diazoefficiens, Bradyrhizobium japonicum, Burkholderia lata e Hyphomicrobium nitrativorans. Todavia, genes para fixação de nitrogênio não foram detectados nesses genomas, apesar de serem encontrados no genoma da cianobactéria e no metagenoma da comunidade, o que sugere que algumas populações podem estar sob pressão de seleção para a perda da capacidade de fixação de nitrogênio, provavelmente devido a este nutriente estar sendo fornecido pelo organismo mais abundante nesta comunidade, a cianobactéria. A análise funcional indicou vias exclusivas tanto à cianobactéria quanto à comunidade associada, e sugeriu a complementariedade de certos metabolismos. Os resultados possibilitam o aumento do conhecimento sobre a diversidade molecular e química do filo Cyanobacteria e levantam possíveis interações com micro organismos simbiontes / Nostoc is a cyanobacterial genus with ubiquitous distribution that is important in several ecosystems. However, few genomes are currently available for this genus. While Nostoc spp. are the most commonly reported cyanobacteria in symbiotic relationship with fungi, animals, plants, and other organisms, associations with other microorganisms have not received similar attention. As a consequence of tight interactions between cyanobacteria and heterotrophs, non-axenic cultures are usually achieved in the isolation of these bacteria, which provides an interesting opportunity for carrying out both genomic as metagenomic studies. This work aimed to investigate the genomic and functional characteristics of the strain Nostoc sp. CENA67, isolated from anthropogenic dark earth, and to study its associated community. For this purpose, cells from a non-axenic culture of Nostoc sp. CENA67 were sequenced with the platforms MiSeq and Ion PGM and analyzed with genomic and metagenomic tools. The strain CENA67 indeed belongs to the family Nostocaceae and presents some characteristics in common with cyanobacteria of the genus Nostoc, but diverges in certain morphological and phylogenetic aspects of the typical Nostoc group, suggesting that it is a representative of a new taxon. In addition, its genome presents differences in relation to the genomes currently available for cyanobacteria related to this genus. Genome mining revealed 31 gene clusters hypothetically related to the synthesis of secondary metabolites, most of which did not show significant similarity to known clusters. The analysis of a microviridin gene cluster unveiled a larger diversity of precursor genes for this molecule than was previously believed, suggesting that a considerable number of variants is still to be found. The taxonomic analysis of the associated community confirmed the dominance of cyanobacteria in the culture, but also revealed the presence of a great number of microbial genera that are usually capable of fixing atmospheric nitrogen and establishing symbiosis with plants, including Mesorhizobium, Sinorhizobium, and Starkeya, among others. Genomic drafts were obtained for Bradyrhizobium diazoefficiens, Bradyrhizobium japonicum, Burkholderia lata, and Hyphomicrobium nitrativorans. Nevertheless, genes for nitrogen fixation were not detected in these genomes, despite being found in the cyanobacterial genome and the community metagenome, suggesting that some populations might be under selection pressure for the loss of the ability to fix nitrogen, probably due to this nutrient being provided for the most abundant organism in this culture, the cyanobacterium. Functional analysis indicated pathways exclusive both to the cyanobacterium as to the associated community, and suggested the complementarity of certain metabolisms. The results allow the increase of the knowledge about the molecular and chemical diversity of the phylum Cyanobacteria and raise possible interactions with symbiotic microorganisms

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:30:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 107354 bytes, checksum: f8bf4d4e5a1424ff9f074f4c658d674e (MD5) Previous issue date: 2011-02-21 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The nutrients used for plant fertilization affect their susceptibility to insect herbivores. Among the major pests of tomato in the world is a leafminer, Tuta absoluta (Meyrick) (Lepidoptera: Gelechiidae). Thus, the aim of this study was to determine the influence of plant fertilization with calcium, sulfur, nitrogen and potassium in reproduction, growth, survival and damage of T. absoluta. This study was conducted in a greenhouse. The experimental design was randomized blocks with nine treatments and five replications. The treatments consisted of fertilization levels of deficiency and excess calcium, sulfur, nitrogen and potassium. One treatment with normal fertilization was established beyond these levels. The eggs from T. absoluta were transferred for the leaves of tomato a month after the start of the experiment. The number of surviving insects, the developmental stage of insects and the number of mines per leaf were evaluated daily. The contents of nutrients were determined in leaves of tomato. Among the nutrients studied, only the doses of sulfur and nitrogen fertilizer used in the affected T. absoluta. The reproduction of T. absoluta was lower in plants with normal fertilization, higher the mortality of larvae and these plants suffered less damage than those with nutritional deficiency. The maximum reproductive performance of T. absoluta occurred in plants with nutritional deficiency. The plants with higher levels of nutrients in leaves were less susceptible to T. absoluta. / Os nutrientes utilizados na adubação das plantas afetam sua suscetibilidade aos insetos herbívoros. Entre as principais pragas do tomateiro no mundo está a traça Tuta absoluta (Meyrick) (Lepidoptera: Gelechiidae). Assim, o objetivo deste trabalho foi determinar a influência da adubação das plantas com cálcio, enxofre, nitrogênio e potássio na reprodução, desenvolvimento, sobrevivência e danos de T. absoluta. Este trabalho foi conduzido em casa de vegetação. O delineamento experimental foi em blocos casualizados com nove tratamentos e cinco repetições. Os tratamentos foram constituídos de níveis de adubação em deficiência e em excesso de cálcio, enxofre, nitrogênio e potássio. Além destes níveis estabeleceu-se um tratamento com adubação normal. Um mês após o início do experimento, foram transferidos ovos de T. absoluta para as folhas do tomateiro. Diariamente avaliaram-se o número de insetos sobreviventes, o estádio de desenvolvimento dos insetos e o número de minas por folha. Foram determinados os teores de nutrientes nas folhas do tomateiro. Dos nutrientes estudados apenas as doses de enxofre e de nitrogênio usadas na adubação afetaram T. absoluta. Nas plantas com adubação normal foi menor a reprodução de T. absoluta, maior a mortalidade larval e estas plantas sofreram menores danos do que aquelas com deficiência nutricional. O máximo desempenho reprodutivo de T. absoluta ocorreu em plantas com deficiência nutricional. As plantas com maiores teores de nutrientes nas folhas foram menos suscetíveis a T. absoluta.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-08-17T18:27:21Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 887174 bytes, checksum: d5f704cd7a623e2a5b6b868f3946214a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-17T18:27:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 887174 bytes, checksum: d5f704cd7a623e2a5b6b868f3946214a (MD5) Previous issue date: 2016-06-28 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O objetivo deste trabalho foi avaliar as respostas da indução do sistema de defesa de plantas de arroz, milho e cana-de-açúcar, através da aplicação de ácido salicílico (AS) nas folhas. Plantas de arroz e milho, com 30 dias de crescimento em solução hidropônica, e plantas de cana-de-açúcar, com 2 meses de crescimento em substrato comercial, recebe- ram 5 aplicações de solução 100 μM AS + 0,15% Tween 20, ou apenas 0,15% Tween 20 (controle). Após duas semanas de tratamento, foram avaliados parâmetros de trocas ga- sosas e fluorescência da clorofila a nas folhas +3, que também foram coletadas para a quantificação de compostos do metabolismo primário, secundário e antioxidante, além dos componentes químicos da parede celular e da eficiência de sacarificação da parede. Nas três espécies, o AS promoveu aumento significativo na taxa fotossintética líquida e na condutância estomática, mas que não refletiram em acúmulo de compostos de reserva, pelo contrário, em cana-de-açúcar houve redução significativa dos níveis de glicose, sa- carose e aminoácidos. O AS não alterou o teor de malonaldeído em nenhuma das espécies. Em arroz e milho, os níveis de ânions superóxido e peróxido de hidrogênio já estavam em homeostase no momento da coleta. Em cana, o aumento significativo no teor de ânions superóxido foi neutralizado pela atividade basal da dismutase do superóxido. O teor de fenólicos não alterou após a aplicação de AS, e as atividades da fenilalanina amônia-liase e tirosina amônia-liase reduziram significativamente em milho e cana. Não houve altera- ções nos teores de lignina e celulose em nenhuma das espécies. Em cana, houve aumento no teor de glicose da fração hemicelulósica. O AS não alterou a eficiência de sacarificação da parede das folhas avaliadas. Os resultados sugerem que o AS induziu o metabolismo primário das folhas +3 de arroz, milho e cana-de-açúcar, mas não houve investimento de carbono no metabolismo secundário. / This study aimed to investigate the responses of plant defense system in rice, maize and sugarcane, after foliar application of salicylic acid (SA). Plants of rice and maize, grown for 30 days in hydroponic system, and plants of sugarcane, grown for 2 months under greenhouse conditions, were sprayed 5 times with 100 μM SA + 0,15% Tween 20, or only 0,15% Tween 20 (control). After two weeks of treatment, gas exchange and chloro- phyll a parameters were evaluated in leaf +3, from which samples were collected to de- termine compounds from primary, secondary and antioxidant metabolisms, and also cell wall components and saccharification efficiency. In the three species, SA significantly increased net CO2 and stomatal conductance, but these alterations were not coupled with reserve accumulation, on the contrary, there was a significantly reduction of glucose, su- crose and amino acids levels in sugarcane. SA did not alter malondealdehyde content in any specie. In rice and maize, levels of hydrogen peroxide and superoxide anion were in homeostasis when samples were collected. In sugarcane, SA significantly increased su- peroxide anion content, but it was scavenged by the basal activity of superoxide dis- mutase. Total phenolics did not change with SA application in any specie, and phenylal- anine ammonia-lyase and tyrosine ammonia-lyase activities significantly decreased in maize and sugarcane. There were no alternations in lignin or cellulose contents in any specie. In sugarcane, glucose from hemicellulose significantly increased. SA did not change cell wall saccharification efficiency of leaves +3. The results suggest that SA in- ducted primary metabolism of leaves +3 from rice, maize and sugarcane, but there was no carbon investment in secondary metabolism.

A esterigmatocistina (ST) é uma micotoxina policetônica produzida por diferentes espécies de Aspergillus e outros gêneros fúngicos como Bipolaris e Chaetomium. Esta toxina é caracterizada como uma bifuranoxantona com fórmula molecular C18H12O6, freqüentemente encontrada como contaminante de diversos produtos alimentícios como sementes oleaginosas e cereais. Possui propriedades carcinogênicas, toxigênicas, mutagênicas e teratogênicas, entretanto, ela é menos tóxica do que a aflatoxina. O fungo Emericella nidulans (Eidam) Vuillemin, cujo anamorfo é o Aspergillus nidulans (Eidam) Winter, foi usado como modelo genético para a investigação de genes envolvidos na via biossintética da esterigmatocistina. Linhagens estoque de Utrecht (originárias de Glasgow) foram analisadas quanto à produção de ST e, entre elas, somente a linhagem UT196 [yA2 (I); metA17 (II); piroA4 (IV)] apresentou produção de 4 ppm de ST (stc+), enquanto que as linhagens UT448 e UT184 mostraram-se não produtoras dessa micotoxina (stc). Embora a linhagem UT196 seja muito bem caracterizada geneticamente, este foi o primeiro relato da produção de ST nessa linhagem. Os índices de segregação alélica e todas as freqüências de recombinação entre os marcadores genéticos ligados e não ligados foram determinados tanto pelo cruzamento meiótico UT448 (stc) x UT196 (stc+) como pelo cruzamento mitótico UT448//UT184. 175 segregantes meióticos e 140 segregantes mitóticos foram analisados quanto à produção de ST, aos marcadores de auxotrofia e de resistência a acriflavina. Essas linhagens cruzadas apresentavam vários marcadores em heterozigose e isso permitiu o mapeamento de um gene estrutural da ST (stcZ+), localizado no braço esquerdo do cromossomo I, 4% distante do gene da riboflavina (riboA1). Como um subproduto deste trabalho, foi detectado um pigmento vermelho, de Rf = 0,90, em todos os segregantes meióticos e mitóticos, produtores ou não de ST, indicando tratar-se, provavelmente, de um pigmento policetônico produzido pelos ascosporos do fungo. A baixa expressão da produção de ST em 13 segregantes meióticos e a alta expressão dessa toxina nos diplóides UT448//UT196 e UT448//UT184 (40 ppm) permitiram concluir a existência de um fator regulador, compreendido na região w-met do cromossomo II, responsável pela expressão do gene estrutural stcZ+. A análise desses genes através do ciclo parassexual sugeriu um comportamento epigenético típico envolvendo esses genes. Com base nos dados obtidos, hipóteses para explicar o controle da expressão desses genes e suas inter-relações foram aqui apresentadas. / Sterigmatocystin (ST) is a polyketide produced by different species of Aspergillus as well as by other fungus genera such as Bipolaris and Chaetomium. This toxin is characterized as a bifuranoxanthone, whose molecular formula is C18H12O6 and which is frequently found as a contaminant in several food products such as oil-seed grains and cereals. It has carcinogenic, toxigenic, mutagenic and teratogenic properties; however, it is less toxic than aflatoxin. The fungus Emericella nidulans (Eidam) Vuillemin, whose anamorph is Aspergillus nidulans (Eidam) Winter, was used as a genetic model to investigate the genes involved in the sterigmatocystin biosynthetic pathway. Strains from Utrecht stocks (originally from Glasgow) were analyzed in order to detect ST production and, among them, only the UT196 strain [yA2 (I); metA17 (II); piroA4 (IV)] showed the production of 4 ppm of ST (stc+), whereas the UT448 and UT184 strains showed to be nonproducers of such toxin (stc). Although the UT196 strain is very well characterized genetically, this has been the first report on its production of ST. The allelic segregation rates and all the recombination frequencies between linked and non-linked genetic markers were determined by both the meiotic crossing UT448 (stc) x UT196 (stc+) and mitotic crossing UT448//UT184. 175 meiotic segregants and 140 mitotic segregants were analyzed as to ST production, auxotrophy markers and resistance to acriflavine. These crossed strains presented various markers in heterozygous configuration, which allowed to map a structural gene of ST (stcZ+) located on the left arm of chromosome I, 4% distant from the riboflavin gene (riboA1). As a byproduct of this work, a red pigment of 0.90 Rf was detected in all meiotic and mitotic segregants, whether they were ST producers or not, which indicated that was probably a polyketide produced by the fungus ascopores. The low expression of ST production in 13 meiotic segregants and the high expression of such toxin in the UT448//UT196 and UT448//UT184 diploids (40 ppm) allowed to conclude that a regulating factor existed in the w-met region of chromosome II, which is responsible for the expression of the structural gene stcZ+. The analyses of those genes through the parasexual cycle suggested a typical epigenetic behavior which involved them. Based on the data obtained, hypotheses to explain the expression control of these genes as well as their inter-relationships were here presented.

Made available in DSpace on 2016-08-17T18:39:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 3286.pdf: 1985838 bytes, checksum: e5ef56af190be032fb21c75bb7198227 (MD5) Previous issue date: 2010-06-01 / Universidade Federal de Sao Carlos / Studies of marine natural products in 20 years of research have revealed a wide variety of molecules with complex structures and hitherto unknown, and potent biological activities. The aims of this study were to isolate microbial strains associated with Didemnum granulatum, to fermentate such strains for the production of crude extracts and the screening of these extracts for bioactive secondary metabolites. For the isolation of the strains, six different culture media were prepared with artificial sea water: malt extract 2% and 3%, carrot/potato, corn, oat and GPY. The strains were cultivated for 30 days in 250mL of the same culture media. The crude extracts were obtained by partition with ethyl acetate. The extracts were sent for the cytotoxic activity bioassay and analyzed by thin layer chromatography (TLC) on silica gel plate (with absorption in UV-vis). Among the 26 extracts, samples DG (M3) 6'C and DG (M3) 5'C showed potent cytotoxic activity, samples DG (B) 13, DG (M3) 1 and DG (G) 2B a moderate activity. The analysis by TLC indicated the presence of bioactive secondary metabolites in the extracts. The strains were identified as bioactive three fungal: DG (M 3) 6'C (Penicillium sp.) DG (M3) 5'C (Cladosporium sp.) DG (M3) 1 (Aspergillus sp.) And two bacterial: DG (B) 13 (Aurantimonas sp.) DG (G) 2B (Nocardiopsis sp.). These were grown on a larger scale of broth (500 mL) and extracted after 7, 14, 21 and 30 days of incubation. We carried out a cleaning process of these extracts by solid phase extraction (SPE) column of silica gel derivatized with C18 (35 mL of eluent: 100% H2O, MeOH/H2O 1:1 and MeOH 100%). The fractions generated were analyzed by HPLC-UV-MS trying to find characteristic profiles of secondary metabolites. From the DG sample (M3) 6'C (A + B), was isolated and identified the compound 13- deoxy-fomenona previously obtained by Tirilly et al. in 1983. Although this compound is not unheard of, no literature reports of studies involving bioassays cytotoxic against tumor cells and even this compound has been isolated from other species of microorganisms other than the fungus Dicyma pulvinata. / Os estudos sobre produtos naturais marinhos, durante os ultimos 20 anos de pesquisa, revelaram uma grande variedade de moleculas com estruturas complexas e ate entao desconhecidas, alem de potentes atividades biologicas. Assim, os objetivos deste trabalho foram isolar linhagens de micro-organismos associadas a ascidia Didemnum granulatum, sua posterior fermentacao para a producao de extratos brutos e a analise destes extratos na busca por metabolitos secundarios bioativos. Para o isolamento das linhagens foram utilizados os seguintes meios de cultura preparados com agua do mar artificial: extrato de malte 2% e 3%, cenoura/batata, fuba, aveia e GPY. A fermentacao das linhagens foi feita em 250 mL dos mesmos meios de cultura sem agar, durante 30 dias. Os extratos brutos foram obtidos por particao com acetato de etila. Estes extratos foram enviados para bioensaio de atividade citotoxica contra celulas tumorais e analisados por cromatografia em camada delgada (CCD) em placa de silica gel (com diferentes reveladores). Dentre os 26 extratos, as amostras DG(M3) 6 C e DG(M3) 5 C apresentaram potente atividade citotoxica, as amostras DG(B)13, DG(M3)1 e DG(G)2B uma atividade moderada. As analises por CCD indicaram a presenca de metabolitos secundarios nos extratos bioativos. As linhagens bioativas foram identificadas como sendo tres fungicas: DG(M3)6 C (Penicilium sp.); DG(M3)5 C (Cladosporium sp.); DG(M3)1 (Aspergillus sp.) e duas bacterianas: DG(B)13 (Aurantimonas sp.); DG(G)2B (Nocardiopsis sp.). Estas foram cultivadas em escala maior de meio liquido (500 mL) e extraidas apos 7, 14, 21 e 30 dias de incubacao. Realizou-se um processo de limpeza destes extratos por extracao em fase solida (SPE) em coluna de silica-gel derivatizada com C18 (35 mL dos eluentes: H2O 100%, MeOH/H2O 1:1 e MeOH 100%). As fracoes geradas foram analisadas por CLAE-UV-EM buscando-se encontrar perfis caracteristicos de metabolitos secundarios. A partir da amostra DG(M3) 6 C (A+B), foi isolado e identificado o composto 13-desoxi-fomenona, previamente obtido por Tirilly et al. em 1983. Apesar deste composto nao ser inedito, nao ha relatos na literatura de estudos envolvendo bioensaios citotoxicos contra celulas tumorais e nem mesmo deste composto ter sido isolado de outras especies de microrganismos que nao seja do fungo Dicyma pulvinata.

Submitted by NATHÁLIA DE SOUZA PARREIRAS null (nathaliaparreiras@ig.com.br) on 2017-08-04T14:35:24Z No. of bitstreams: 1 tese nathalia 04-08-17 para impressão.pdf: 1835096 bytes, checksum: 83b6c0e6cef99c4619caafcd238490f8 (MD5) / Approved for entry into archive by LUIZA DE MENEZES ROMANETTO (luizamenezes@reitoria.unesp.br) on 2017-08-04T20:20:09Z (GMT) No. of bitstreams: 1 parreiras_ns_dr_bot.pdf: 1835096 bytes, checksum: 83b6c0e6cef99c4619caafcd238490f8 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-04T20:20:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 parreiras_ns_dr_bot.pdf: 1835096 bytes, checksum: 83b6c0e6cef99c4619caafcd238490f8 (MD5) Previous issue date: 2017-06-08 / O cálcio é um nutriente essencial às plantas, participando das funções estruturais da parede celular e da membrana, como contra cátion para ânions orgânicos e inorgânicos no vacúolo e desempenha papel essencial como mensageiro intracelular no citosol. A concentração de cálcio no citoplasma das células vegetais aumenta em resposta a várias condições de desenvolvimento e fatores ambientais. Essas alterações na concentração de cálcio no citosol da célula são cruciais para as respostas fisiológicas da planta. O presente estudo objetivou avaliar se a aplicação de concentrações de cloreto de cálcio afetam as trocas gasosas, atividade das enzimas antioxidantes, perfil químico do óleo essencial extraído das folhas, tamanho, firmeza e aspectos químicos ligados à qualidade dos frutos de Annona × atemoya Mabb. cv. ‘Thompson’. O experimento foi conduzido no sítio Paraizinho localizado no munícipio de Pardinho-SP em pomar comercial. O delineamento experimental foi em blocos casualisados, sendo quatro concentrações de cloreto de cálcio (0%, 0,5%, 1,0% e 1,5% de CaCl2) aplicados via foliar a cada 45 dias e seis blocos, com uma planta por parcela experimental. Foram avaliadas as seguintes características: trocas gasosas, enzimas antioxidantes, diâmetro e comprimento dos frutos, firmeza, pH, acidez titulável, sólidos solúveis, relação sólidos solúveis/acidez, açúcares, amido, teor de ácido ascórbico,teor de cálcio, perfil químico dos óleos essenciais. As dosagens de CaCl2 aumentaram a assimilação de CO2, a eficiência no uso da água, a eficiência de carboxilação, a firmeza e a acidez dos frutos, reduzindo os teores de ácido ascórbico e modificando o perfil químico dos óleos essenciais. / Calcium is an essential nutrient for plants, participating in the structural functions of the cell wall and membrane, as against cation for organic and inorganic anions in the vacuole and plays an essential role as a messenger in intracellular cytosol. The concentration of calcium in the cytoplasm of plant cells increases in response to several conditions of development and environmental factors. These changes in the concentration of calcium in the cytosol of the cell are crucial to the physiological responses of the plant. The present study aimed to evaluate the implementation of different calcium concentrations in gas exchange, chemical profile of essential oil extracted from the leaves, size, firmness and chemical aspects linked to the quality of the Annona × atemoya Mabb The experiment was conducted at the Paraisinho site located in the municipality of Pardinho-SP in a commercial orchard. The experimental design was in randomized blocks, being 4 concentrations of calcium chloride (0%, 0.5%, 1.0% and 1.5% CaCl2) applied via by foliar every 45 days and six replications of a plant. The effect of the treatments was evaluated by assessing the following: gas exchange, diameter and length of fruits, firmness, pH, soluble solids, titratable acidity, soluble solids/acidity, sugars, starch, ascorbic acid content and chemical profile of essential oils. The levels of CaCl2 increased CO2 assimilation, water use efficiency, carboxylation efficiency, the firmness and the acidity of the fruit, reducing the levels of Ascorbic acid and modifying the chemical profile of essential oils.

Made available in DSpace on 2016-01-26T18:56:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vivian Pupo de Oliveira Machado.pdf: 408979 bytes, checksum: 1346e7d9172ff64c6b220a5af3321fbc (MD5) Previous issue date: 2012-12-14 / Calendula officinalis L. (Asteraceae), known as calendula or marigold, is an annual plant and is widely used worldwide as medicinal and ornamental plant. The objective of this work was to evaluate the effect of biostimulant Stimulate®, applied by foliar spray, on the development, in the production of flowers and the content flavonoids in marigold. The experiment was conducted in greenhouse conditions, in Avaré-SP. Seedlings were obtained from commercial seed marigold (Calendula officinalis L., cv. Dobrada Sortida), and the experiment was conducted in plastic pots containing a mixture of organic substrate, loam and sand (ratio 1:1:1). Treatments consisted of different doses of the product Stimulate®, applied by foliar spray, as follow: T1= 0 (distilled water); T2= 3 mL L-1; T3= 6 mL L-1; T4= 9 mL L-1; T5= 12 mL L-1 and T6= 15 mL L-1, applied after 20 days of transplanting the seedlings to pots, carrying out 10 consecutive applications of the product, in the early-morning hours. Biometric evaluations of plants growth were performed at 30, 60 and 90 days after transplanting (height, number of leaves, dry weight of shoot and root) and during the reproductive phase (number of flowers, fresh and dry weight of flowers and content of flavonoids). The experimental design was completely randomized, with 6 treatment and 8 replicates in each treatment, a total of 48 pots. Data were tabulated and submitted to analysis of variance and regression analysis, observing the behavior of the variables according to Stimulate® doses Applying Stimulate® in marigold by foliar spray was not effective in increasing the vegetative growth and total flavonoid content in flowers. In relation to flowering, the Stimulate® application may be used as efficient management technique to provide an increased production of flowers per plant. / Calendula officinalis L. (Asteraceae), conhecida como calêndula ou malmequer, é uma planta anual e é amplamente utilizada em todo o mundo como planta medicinal e ornamental. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do bioestimulante Stimulate®, aplicado via pulverização foliar, no desenvolvimento, na produção de inflorescências e no teor de flavonoides em calêndula. O experimento foi instalado em condições de casa de vegetação, no município de Avaré-SP. As mudas foram obtidas a partir de sementes comerciais de calêndula (Calendula officinalis L., cv. Dobrada Sortida), e o experimento foi conduzido em vasos plásticos contendo uma mistura de substrato orgânico, terra argilosa e areia (proporção 1:1:1). Os tratamentos consistiram de diferentes doses do produto Stimulate®, aplicadas via pulverização foliar, a saber: T1= 0 (água destilada); T2= 3 mL L-1; T3= 6 mL L-1; T4= 9 mL L-1; T5= 12 mL L-1 e T6= 15 mL L-1, aplicadas após 20 dias do transplantio das mudas para os vasos, realizando-se 10 aplicações consecutivas do produto, nas primeiras horas da manhã. Foram realizadas avaliações biométricas de crescimento das plantas (altura, número de folhas, massa seca de parte aérea e raiz; aos 30, 60 e 90 dias após transplantio) e avaliações durante a fase reprodutiva (número de capítulos florais, massa seca e fresca dos capítulos florais e teor de flavonoides). O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com 6 tratamentos e 8 repetições em cada tratamento, num total de 48 vasos. Os dados obtidos foram tabulados e submetidos à análise de variância e análise de regressão, observando-se comportamento das variáveis em função das doses de Stimulate®. A aplicação de Stimulate® em calêndula via pulverização foliar não foi eficiente em aumentar o crescimento vegetativo das plantas e o teor de flavonoides totais presente nas inflorescências. Em relação ao florescimento, a utilização de Stimulate® pode ser indicada como técnica de manejo eficiente em proporcionar um aumento da produção de inflorescências por planta.

Made available in DSpace on 2016-07-18T17:51:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vivian Pupo de Oliveira Machado.pdf: 408979 bytes, checksum: 1346e7d9172ff64c6b220a5af3321fbc (MD5) Previous issue date: 2012-12-14 / Calendula officinalis L. (Asteraceae), known as calendula or marigold, is an annual plant and is widely used worldwide as medicinal and ornamental plant. The objective of this work was to evaluate the effect of biostimulant Stimulate®, applied by foliar spray, on the development, in the production of flowers and the content flavonoids in marigold. The experiment was conducted in greenhouse conditions, in Avaré-SP. Seedlings were obtained from commercial seed marigold (Calendula officinalis L., cv. Dobrada Sortida), and the experiment was conducted in plastic pots containing a mixture of organic substrate, loam and sand (ratio 1:1:1). Treatments consisted of different doses of the product Stimulate®, applied by foliar spray, as follow: T1= 0 (distilled water); T2= 3 mL L-1; T3= 6 mL L-1; T4= 9 mL L-1; T5= 12 mL L-1 and T6= 15 mL L-1, applied after 20 days of transplanting the seedlings to pots, carrying out 10 consecutive applications of the product, in the early-morning hours. Biometric evaluations of plants growth were performed at 30, 60 and 90 days after transplanting (height, number of leaves, dry weight of shoot and root) and during the reproductive phase (number of flowers, fresh and dry weight of flowers and content of flavonoids). The experimental design was completely randomized, with 6 treatment and 8 replicates in each treatment, a total of 48 pots. Data were tabulated and submitted to analysis of variance and regression analysis, observing the behavior of the variables according to Stimulate® doses Applying Stimulate® in marigold by foliar spray was not effective in increasing the vegetative growth and total flavonoid content in flowers. In relation to flowering, the Stimulate® application may be used as efficient management technique to provide an increased production of flowers per plant. / Calendula officinalis L. (Asteraceae), conhecida como calêndula ou malmequer, é uma planta anual e é amplamente utilizada em todo o mundo como planta medicinal e ornamental. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do bioestimulante Stimulate®, aplicado via pulverização foliar, no desenvolvimento, na produção de inflorescências e no teor de flavonoides em calêndula. O experimento foi instalado em condições de casa de vegetação, no município de Avaré-SP. As mudas foram obtidas a partir de sementes comerciais de calêndula (Calendula officinalis L., cv. Dobrada Sortida), e o experimento foi conduzido em vasos plásticos contendo uma mistura de substrato orgânico, terra argilosa e areia (proporção 1:1:1). Os tratamentos consistiram de diferentes doses do produto Stimulate®, aplicadas via pulverização foliar, a saber: T1= 0 (água destilada); T2= 3 mL L-1; T3= 6 mL L-1; T4= 9 mL L-1; T5= 12 mL L-1 e T6= 15 mL L-1, aplicadas após 20 dias do transplantio das mudas para os vasos, realizando-se 10 aplicações consecutivas do produto, nas primeiras horas da manhã. Foram realizadas avaliações biométricas de crescimento das plantas (altura, número de folhas, massa seca de parte aérea e raiz; aos 30, 60 e 90 dias após transplantio) e avaliações durante a fase reprodutiva (número de capítulos florais, massa seca e fresca dos capítulos florais e teor de flavonoides). O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com 6 tratamentos e 8 repetições em cada tratamento, num total de 48 vasos. Os dados obtidos foram tabulados e submetidos à análise de variância e análise de regressão, observando-se comportamento das variáveis em função das doses de Stimulate®. A aplicação de Stimulate® em calêndula via pulverização foliar não foi eficiente em aumentar o crescimento vegetativo das plantas e o teor de flavonoides totais presente nas inflorescências. Em relação ao florescimento, a utilização de Stimulate® pode ser indicada como técnica de manejo eficiente em proporcionar um aumento da produção de inflorescências por planta.

Foi realizada uma investigação fitoquímica envolvendo diversos órgãos de plantas adultas (raízes, caules, folhas, inflorescências e sementes), plântulas (cultivadas in vivo e in vitro) e suspensões celulares de P. solmsianum. Dos órgãos estudados de plantas adultas, as raízes apresentaram a maior complexidade e diversidade química da planta, abrangendo ácidos benzóicos e benzaldeídos substituídos, esteróides, fenilpropanóides, lignanas tetraidrofurânicas e aristolactamas, enquanto que os outros órgãos acumulam principalmente fenilpropanóides e lignanas tetraidrofurânicas. As raízes de plântulas apresentaram semelhança qualitativa de metabólitos secundários quando comparadas às raízes de plantas adultas. No entanto, as partes aéreas apresentaram diferentes compostos como farnesol, fitol e α-tocoferol. Os extratos de plântulas separadas por tamanho foram comparados em relação à diversidade dos metabólitos encontrados, não sendo observada uma variação qualitativa muito significativa. Os extratos obtidos das células de suspensões celulares de P. solmsianum indicaram prevalência de ácidos graxos e esteróides, enquanto que o extrato obtido do meio de cultura apresentou como componente majoritário o ácido salicílico. / The phytochemical investigation was carried out to describe the composition in organs of adult plants (roots, steams, leaves, inflorescences and seeds), plantlets (in vivo and in vitro) and cell suspensions of Piper solmsianum. The roots of adult plants presented highest chemical diversity including benzoic acids, benzaldehydes, sterols, phenylpropanoids, tetrahydrofuran lignans and aristolactams, whereas aerial organs accumulate mainly phenylpropanoids and tetrahydrofuran lignans. The roots from plantlets presented qualitative similarity of secondary metabolites when compared to the roots of adult plants. However, the aerial parts from plantlets presented different composition including farnesol, phytol and α-tocopherol in addition to phenylpropanoids, but the plantlets at different developmental stages showed no significant qualitative variation. The extracts of cell suspensions of P. solmsianum indicated a suppressed phenylpropanoid metabolism with fatty acids and sterols in the cells and salicylic acid as major excreted compound in the culture medium.