O experimento foi conduzido na FZEA/USP com objetivo de comparar a utilização de fontes orgânicas de selênio (Se) com o selenito de sódio na dieta de cordeiros, pela análise da concentração de Se nos tecidos, da atividade da enzima glutationa peroxidase no fígado, do balanço metabólico e do cálculo da biodisponibilidade. Foram utilizados 40 cordeiros Suffolk, os quais foram submetidos a três fontes e três níveis de Se suplementar por 84 dias. Os tratamentos foram: tratamento 1: sem suplementação; tratamentos 2, 3 e 4: 0,2; 0,8 e 1,4 mg/kg de Se suplementar na forma de selenito de sódio; tratamentos 5, 6 e 7: 0,2; 0,8 e 1,4 mg/kg de Se suplementar na forma de Se-levedura; tratamentos 8, 9 e 10: 0,2; 0,8 e 1,4 mg/kg de Se suplementar na forma de Se-metionina. Foram colhidas amostras de sangue para dosagem sérica de Se e ao final do experimento, os animais foram abatidos para colheita de amostras de fígado, músculo e rim, para determinação dos teores de Se e da atividade da glutationa peroxidase (fígado). Nos últimos cinco dias de experimento foi realizado um balanço metabólico de Se. A biodisponibilidade foi calculada através da técnica “slope ratio", utilizando como parâmetros a concentração de selênio no fígado, músculo, rim e a atividade da glutationa peroxidase. Não houve efeito da fonte de Se utilizada na ingestão, absorção aparente e retenção de Se, atividade da glutationa peroxidase e nas concentrações de selênio no fígado, rim e soro; porém, as concentrações de selênio no músculo foram maiores nos animais suplementados com fontes orgânicas do que nos outros animais (P<0,0001). A biodisponibilidade de Se no músculo foi maior quando foram utilizadas fontes orgânicas de selênio. O uso de fontes orgânicas de Se promove maior acúmulo de Se no músculo de cordeiros e promoveria maior ingestão de Se por consumidores de carne ovina. / This research was carried out at FZEA/USP to compare the utilization of organic selenium (Se) sources to sodium selenite in lambs’ diet, through analyses of tissues Se concentrations, liver glutathione peroxidase activity, metabolic balance of Se and bioavailability assay. Forty Suffolk lambs were used and submitted to three sources and three levels of supplementary Se for 84 days. Treatments were: treatment 1: no supplement; treatments 2, 3 and 4: 0.2, 0.8 and 1.4 mg/kg of supplementary sodium selenite-selenium; treatments 5, 6 and 7: 0.2, 0.8 and 1.4 mg/kg of supplementary selenoyeast-selenium; treatments 8, 9 and 10: 0.2, 0.8 and 1.4 mg/kg of supplementary selenomethionine-selenium. Blood samples were taken to Se serum dosage and in the end of the experiment the animals were killed and samples of liver, muscle and kidney were taken to Se concentrations dosage and glutathione peroxidase activity (liver). In the last five days of the experiment, a Se metabolic balance was realized. Bioavailability was calculated by “Slope Ration Assay", using liver, muscle and kidney Se concentrations and glutathione peroxidase activity as parameters. Se sources did not affect Se intake, apparent absorption and retention, glutathione peroxidase activity and Se concentrations in liver, kidney and serum; however, selenium concentrations in muscle of animals supplied with organic sources were higher than in other animals (P<0.0001). Se bioavailability in muscle was higher when organic Se sources were used. Using organic Se sources provides higher accumulation of Se in lambs’ muscle which would provide higher Se intake to consumers of sheep meat.

Durante a fase de crescimento e terminação, 1890 frangos de corte machos da linhagem Cobb®500 foram submetidos a altas temperaturas e alimentados com dietas experimentais contendo três fontes de metionina (DL-Met, DL-HMTBA e DL-Met/ DL-HMTBA), três níveis de vitamina E (15 UI, 45 UI e 100 UI) e duas relações Arg:Lis (0,9 e 1,5), cujo delineamento fatorial 3 x 3 x 2 totalizou 18 tratamentos, com sete repetições de 15 aves cada. Ao final do período experimental, os parâmetros de desempenho zootécnico como consumo de ração, peso corporal, conversão alimentar e rendimento de carcaça, peito e pernas foram avaliados e, após análise estatística, comprovou-se que não houve interação entre os fatores. Dessa maneira, os efeitos individuais dos elementos testados foram analisados e observou-se que a utilização de diferentes fontes de metionina e a inclusão de vitamina E nas quantidades testadas não apresentaram diferenças significativas. Porém, a maior inclusão de arginina na dieta proporcionou melhora nos resultados de ganho de peso, peso corporal e conversão alimentar, mas não resultou em diferenças significativas nos parâmetros de carcaça avaliados. / During the growing and the finishing, 1890 male broiler chickens of Cobb 500 ® were subjected to high temperatures and fed with experimental diets containing three sources of methionine (DL -Met ,DL - HMTBA and DL-Met/DL - HMTBA), three levels of vitamin E (15 IU, 45 IU and 100 IU) and two relations Arg:Lys (0.9 and 1.5), whose factorial design 3 x 3 x 2 totaled 18 treatments with seven replicates of 15 birds each. At the end of the experimental period, the growth performance parameters such as feed intake, body weight, feed conversion and carcass, breast and legs yieldwere evaluated and, after statistical analysis, it was shown that there was no interaction between factors. Thus, the effects of the tested individual elements were analyzed and it was found that the use of different sources of methionine and the inclusion of vitamin E in the amounts tested showed no significant differences. However, the increased inclusion of arginine in the diet improved results in weight gain, body weight and feed conversion, but resulted in no significant differences in carcass parameters.

A colina é um nutriente essencial nas dietas de frangos de corte. Os valores de exigências nutricionais são variáveis e foram estabelecidos há muitos anos. Assim, o objetivou-se com este trabalho reavaliar as respostas de frangos de corte de alto potencial genético de 1 a 7, 1 a 14 e 1 a 21 dias de idade como também modelar as respostas por diferentes funções matemáticas. Foram conduzidos dois experimentos sob dois níveis de metionina na dieta, tendo como base o método dose-resposta. Para os ensaios, foram utilizados 2.160 pintos de corte machos da linhagem Cobb 500 (1.080 em cada experimento), distribuídos em um delineamento inteiramente casualizado, com seis tratamentos, seis repetições e 30 aves por unidade experimental. Os tratamentos consistiram em rações com níveis de 390, 715, 1.040, 1.365, 1.690 e 2.015 mg/kg de colina. As rações experimentais foram formuladas utilizando-se a técnica da suplementação. Foi formulada uma ração basal à base de milho, farelo de soja, concentrado proteico de soja, açúcar e amido contendo 390 mg/kg de colina total e 0,596% de metionina digestível. O cloreto de colina (62,5%) comercial foi suplementado para obter os demais níveis. O segundo experimento consistiu nos mesmos tratamentos do primeiro, porém com atendimento de 0,440% da metionina digestível. As variáveis mensuradas em ambos os ensaios foram: consumo de ração, consumo de colina, conversão alimentar e ganho de peso. Para modelar as respostas considerou-se o consumo de colina como variável independente e ganho de peso como variável dependente. As respostas foram modeladas por cinco modelos matemáticos: broken line, broken line com ascendência quadrática, cinética de saturação, logístico e monomolecular e o melhor modelo foi selecionado pelo critério de Akaike. As análises estatísticas foram realizadas com auxílio do programa computacional SAS® utilizando o procedimento PROC GLM para análise das pressuposições e análise de variância e PROC NLIN para o ajuste dos modelos. Os modelos que melhor se ajustaram foram: Broken line com ascendência quadrática (1,26 mg/g de GP ensaio 1) e Logístico (1,26 mg/g de GP ensaio 2) para o período de 1 a 7 dias. No período de 1 a 14 dias os modelos selecionados para o experimento com metionina normal e reduzida foram Logístico (1,16 mg/g de GP) e Broken line com ascendência quadrática (1,28 mg/g de GP), respectivamente. Já para o período de 1 a 21 foram o cinética de saturação, estimando uma exigência de 1,35 mg/g de GP para o experimento com metionina normal, e Broken line com ascendência quadrática estimando uma exigência de 1,21 mg de colina/g de GP para o experimento com metionina reduzida. / Choline is an essential nutrient in the diets of chicks. Supplementation levels in feeds is variable and requirements have been established many years ago. Thus, the objective of this study was to reassess the responses of high genetic potential chicks from 1-7, 1-14 and 1 to 21 days as well as modeling the responses of different mathematical functions. Two trials were conducted using two dietary levels of methionine, based on the dose-response method. For the trials were used 2,160 Cobb 500 male broiler chicks (1,080 birds in each experiment), distributed in a completely randomized design with six treatments and six replicates and 30 birds per experimental unit. The treatments consisted of diets with levels of 390, 715, 1,040, 1,365, 1,690 and 2,015 mg/kg of choline. The diets were formulated using the supplementation method. The basal diet was formulated based on corn, soybean meal, soy protein concentrate, sugar and starch, and contained 390 mg/kg of choline and 0.596% of digestible methionine. Commercial choline chloride (62.5%) was supplemented to obtain the other levels. The second trial consisted of the same treatments of the first, but with 0.440% of digestible methionine. The variables measured in both trials were: feed intake (FI), intake of choline (IC), feed conversion (FC) and weight gain (WG). To model the responses, the variables used were the intake of choline as an independent variable and weight gain as the dependent variable. The responses were modeled by five mathematical models: broken line (ascending linear and quadratic segments), saturation kinetic, 4-parameter logistics and monomolecular models and the best model was selected by Akaike information criterion. Statistical analyzes were performed using the computer program SAS® using PROC GLM for analysis of the assumptions and analysis of variance and PROC NLIN to fit the models. The models that best fit were: broken line quadratic segments (1.26 mg/g of WG - trial 1) and Logistics (1.26 mg/g of WG - trial 2) for the period 1-7 days. In the period 1-14 days, the models selected for the experiment with normal and deficient methionine were Logistic (1.16 mg/g WG) and broken line quadratic segments (1.28 mg/g WG), respectively. For the period 1-21days, the models were the saturation kinetics, estimating a requirement of 1.35 mg/g of WG for the experiment with normal methionine, and broken line quadratic segments estimating a requirement of 1.21 mg choline/g of WG for the experiment with deficient methionine.

A metionina é doadora de grupos metil para metilação do DNA, processo responsável por modificações da expressão gênica. Diante da importância da metionina para o crescimento e desenvolvimento normais, variações desse aminoácido na dieta podem alterar a estabilidade do DNA. O objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito de dietas deficiente e suplementada em metionina sobre a instabilidade genômica e o estresse oxidativo em camundongos e suas mães tratadas durante gestação e lactação e destas também foi realizada a expressão de RNAm de Mat1a, Bhmt e Cbsdas vias de transmetilação, remetilação e transsulfuração da metionina, respectivamente, em fígado. As fêmeas foram divididas nos grupos de dietas de metionina (controle, 0,3% DL-metionina; suplementado, 2,0%; e deficiente 0%) até o fim da lactação (10 semanas) e, para cada grupo de fêmeas, os filhotes foram subdivididos e também receberam essas dietas durante 18 semanas após desmame. Foram avaliados o consumo de ração, massa corpórea e massa relativa de fígado e rinse a taxa de sobrevivência dos filhotes. Também foram realizadas a avaliação da peroxidação lipídica (quantificação das substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico, TBARS), da quantificação de glutationa (GSH)e da atividade da catalase, da instabilidade genômica (ensaio do cometa) e a análise do RNAm deMat1a, BhmteCbs somente em fígado das fêmeas. A dieta deficiente resultou em menor consumo de ração e massa corpórea em ambas fases e reduziu a sobrevivência dos filhotes que receberam essa dieta.A suplementação reduziu a concentração de TBARS nas fêmeas em ambos tecidos e a deficiência não diferiu. Nos filhotes, a suplementação reduziu a concentração de TBARS em fígado, enquanto que a deficiência aumentou. A suplementação aumentou a concentração de GSH em fígado das fêmeas, assim como a deficiência em rins. Nos filhotes, houve uma inversão de respostas, ou seja, a suplementação reduziu a concentração de GSH em fígado, assim como a deficiência, também observada em rins. Não houve diferença na catalase das fêmeas, mas houve redução em ambos tecidos dos filhotes. A suplementação e a deficiência reduziram os danos ao DNA hepático das fêmeas, mas em rins a suplementação aumentou e a deficiência reduziu. Nos filhotes, a suplementação e a deficiência aumentaram os danos ao DNA em ambos tecidos. A suplementação de metionina em fêmeas não alterou a expressão dos RNAm avaliados e a deficiência reduziu em Cbs somente. Concluiu-se que na fase materna, a suplementação ou a deficiência de metionina não resultou em estresse oxidativo, mas a suplementação reduziu a instabilidade genômica no fígado e aumentou no rim. A deficiência resultou em menor instabilidade nos dois tecidos. Na fase descendente, a suplementação e a deficiência de metionina apresentaram variação de estresse oxidativo em ambos tecidos e também resultaram em maior instabilidade genômica. / Methionine is the main methyl donor for the DNA methylation, a process responsible for gene expression modifications. Since this essential amino acid is required for normal growth and development, variations of this compound in the diet may lead to alterations on DNA stability. Thus, this study aimed to evaluate the effect of deficient and supplemented methionine diets on oxidative stress and genomic instability in mice and their dams treated during pregnancy and lactation, and the expression of Mat1a, Bhmt and Cbs mRNA of transmethylation, remetthylation, and transulfuration pathways, respectively, in dams livers. The dams were divided into three methionine diets groups (control, 0,3% DL-methionine; supplemented, 2,0%; and deficient, 0%) until the end of lactation (10 weeks). For each dams groups, the offspring were subdivided and were also treated with the same diets during 18 weeks after weaning. The parameters evaluated were food intake, body weight, relative liver and kidney weights, and survival of the offspring. Also, it was carried out theevaluation of lipid peroxidation (thiobarbituric acid reactive substances, TBARS), quantification of glutathione (GSH) and catalase activity, and genomic instability (comet assay) in liver and kidneys; andMat1a, Bhmt, and CbsmRNA analysis only in dams liver. The deficient diet resulted in lower food intake and body weights in both phases and reduced the survival of the offspring that were treated with this diet. The supplemented diet reduced the TBARS concentration in both tissues of dams and the deficient diet did not differ. In the offspring, the supplementation reduced liver TBARS, whereas the deficiency raised. The supplementation increased the liver GSH concentration of dams, as well as the deficiency in kidneys. In the offspring, the responses were different; the supplementation reduced the liver GSH, as well as the deficiency, also observed in kidneys. There were no differences of catalase parameter of dams, but there was a reduction in both tissues of the offspring. Both supplementation and deficiency reduced the liver DNA damage of dams, however the supplementation increased and the deficiency reduced the DNA damage of kidneys. In the offspring, both diets increased the DNA damage in both tissues. The methionine supplementation did not differ the mRNA expression and the deficiency only reduced the Cbs, mRNA expression. It was concluded that the methionine supplementation or deficiency did not resulted in oxidative stress in dams, but the supplementation reduced the genomic instability of liver and raised the kidney one. The deficiency resulted in lower genomic instability in both tissues in dams. In the offspring, both methionine supplementation and deficiency presented variation of oxidative stress in both tissues and resulted more genomic instability.

A hipermetioninemia é uma condição caracterizada por altos níveis de metionina no sangue e em outros tecidos, podendo causar danos neurológicos, hepáticos e musculares. Considerando que a placenta transfere a metionina do sangue materno para a circulação fetal e que pouco se sabe sobre o efeito da hipermetioninemia gestacional sobre o feto em desenvolvimento, o principal objetivo deste trabalho foi desenvolver um modelo animal de hipermetioninemia materna quimicamente induzido em ratas e utilizar o mesmo para investigar parâmetros bioquímicos (estresse oxidativo, atividade da Mg2+-ATPase, atividade e imunoconteúdo da Na+,K+-ATPase, número de neurônios, níveis de neurotrofinas, metabolismo energético, inflamação e apoptose), moleculares (expressão gênica da Na+,K+-ATPase) e histológicos (microscopia eletrônica) nos encéfalos da prole, bem como avaliar tarefas comportamentais (campo aberto, esquiva inibitória e reconhecimento de objetos). Também analisamos parâmetros de estresse oxidativo/nitrosativo no músculo esquelético e parâmetros de dano muscular e inflamação no soro da prole. A hipermetioninemia foi induzida em ratas através de duas injeções subcutâneas diárias de metionina durante todo o período gestacional. Um grupo de ratas recebeu a dose 1 (1,34 μmol/g peso corporal) e outro recebeu a dose 2 (2,68 μmol/g peso corporal). O grupo controle recebeu salina. Após o nascimento, um grupo de filhotes foi eutanasiado no sétimo dia de vida e outro grupo foi eutanasiado aos 21 dias. Ambas as doses aumentaram os níveis encefálicos de metionina das mães e a dose 2 aumentou os níveis de metionina nos encéfalos da prole. Após estabelecer o modelo, a dose 2 de metionina foi escolhida para estudar os efeitos do tratamento sobre a prole. Os testes bioquímicos subsequentes foram realizados nos filhotes de 21 dias, a histologia foi realizada na prole de 21 e 30 dias e os testes comportamentais foram realizados em filhotes de 30 dias. Os resultados demonstraram que a hipermetioninemia materna reduziu a atividade da Na+,K+-ATPase, Mg2+- ATPase, catalase e complexo II/succinato desidrogenase, o conteúdo de sulfidrilas, número de neurônios e níveis de NGF e BDNF, bem como aumentou os níveis de RNAm e imunoconteúdo da Na+,K+-ATPase nos encéfalos dos filhotes. Foram observados também alterações morfológicas, indicativas de degeneração celular nos neurônios da prole, e os testes comportamentais indicaram deficit de memória. Com relação aos danos musculares, houve um aumento na produção de espécies reativas de oxigênio e lipoperoxidação e uma redução do conteúdo de sulfidrilas, atividades das enzimas antioxidantes e nos níveis de nitritos no músculo esquelético da prole. A atividade da creatina cinase foi reduzida e os níveis de ureia e proteína C reativa foram aumentados no soro. Esses resultados foram acompanhados por perda de massa muscular. Tais achados mostraram que a hipermetioninemia gestacional induziu alterações bioquímicas, moleculares e histológicas no encéfalo e bioquímicas no músculo esquelético e soro dos filhotes, as quais podem contribuir para o entendimento dos mecanismos fisiopatológicos envolvidos nos danos neurológicos e musculares causados por essa condição. Ressaltamos a importância do desenvolvimento do referido modelo de hipermetioninemia gestacional que além de ampliar o entendimento da toxicidade de altos níveis metionina, também abriu perspectivas para novos estudos a respeito dos efeitos ocasionados pela exposição ao excesso de metionina devido a uma condição genética ou uma dieta rica em proteína durante a vida pré-natal. / Hypermethioninemia is a condition characterized by elevated levels of methionine in blood and other tissues and may cause neurological, hepatic and muscular damages. Considering that placenta transfers methionine from maternal blood to the fetal circulation and little is known about the effect of gestational hypermetioninemia on the developing fetus, the main objective of this work was to develop a chemically induced animal model of maternal hypermethioninemia in rats and to use it to investigate biochemical (oxidative stress, activity of Mg2+-ATPase, activity and immunocontent of Na+,K+-ATPase, number of neurons, neurotrophins levels, energy metabolism, inflammation, and apoptosis), molecular (gene expression of Na+,K+-ATPase) and histological parameters (electron microscopy) in encephalon of the offspring, as well as evaluate behavioral tasks (open field, inhibitory avoidance and object recognition). We also analyzed oxidative/nitrosative stress parameters in skeletal muscle and parameters of muscle damage and inflammation in serum of the offspring. Hypermethioninemia was induced in rats through two daily subcutaneous injections of methionine throughout the gestational period. A group of pregnant rats received dose 1 (1.34 μmol/g body weight) and the other received dose 2 (2.68 μmol/g body weight). The control group received saline. After birth, a first group of pups was euthanized at the 7th day of life and the second group at the 21st day of life. Both doses 1 and 2 increased methionine levels in the brain of the mother rats and dose 2 increased methionine levels in encephalon of the offspring. After establishing the experimental model, the highest dose of methionine was chosen to study the effects of treatment on offspring. The subsequent biochemical tests were performed on 21-day-old pups, histological analyses were performed on offspring of 21 and 30 days of age, and behavioral tests were performed on 30-day-old pups. The results demonstrated that maternal hypermethioninemia reduced Na+,K+-ATPase, Mg2+-ATPase, catalase and complex II/succinate dehydrogenase activities, sulfhydryl content, number of neurons and levels of NGF and BDNF, as well as increased levels of mRNA and immunocontent of Na+,K+-ATPase in the brains of the pups. Morphological changes indicative of cellular degeneration were also observed in offspring neurons, and behavioral tests indicated memory deficit. With regard to muscle damage, there was an increase in the production of reactive oxygen species and lipoperoxidation, and a reduction of the sulfhydryl content, antioxidant enzymes activities and in the levels of nitrites in skeletal muscle of the offspring. Creatine kinase activity was reduced and urea and C-reactive protein levels were increased in serum. These results were accompanied by loss of muscle mass. These findings showed that gestational hypermethioninemia induced biochemical, molecular and histological changes in the brain and biochemical changes in skeletal muscle and serum of pups, which may contribute to the understanding of the pathophysiological mechanisms involved in the neurological and muscular damages caused by this condition. We emphasize the importance of the development of this model of gestational hypermetioninemia that, in addition to increasing the understanding of toxicity of high methionine levels, also opened perspectives for new studies regarding the effects caused by exposure to excess methionine due to a genetic condition or a diet rich in protein during prenatal life.

O experimento foi conduzido na FZEA/USP com objetivo de comparar a utilização de fontes orgânicas de selênio (Se) com o selenito de sódio na dieta de cordeiros, pela análise da concentração de Se nos tecidos, da atividade da enzima glutationa peroxidase no fígado, do balanço metabólico e do cálculo da biodisponibilidade. Foram utilizados 40 cordeiros Suffolk, os quais foram submetidos a três fontes e três níveis de Se suplementar por 84 dias. Os tratamentos foram: tratamento 1: sem suplementação; tratamentos 2, 3 e 4: 0,2; 0,8 e 1,4 mg/kg de Se suplementar na forma de selenito de sódio; tratamentos 5, 6 e 7: 0,2; 0,8 e 1,4 mg/kg de Se suplementar na forma de Se-levedura; tratamentos 8, 9 e 10: 0,2; 0,8 e 1,4 mg/kg de Se suplementar na forma de Se-metionina. Foram colhidas amostras de sangue para dosagem sérica de Se e ao final do experimento, os animais foram abatidos para colheita de amostras de fígado, músculo e rim, para determinação dos teores de Se e da atividade da glutationa peroxidase (fígado). Nos últimos cinco dias de experimento foi realizado um balanço metabólico de Se. A biodisponibilidade foi calculada através da técnica “slope ratio”, utilizando como parâmetros a concentração de selênio no fígado, músculo, rim e a atividade da glutationa peroxidase. Não houve efeito da fonte de Se utilizada na ingestão, absorção aparente e retenção de Se, atividade da glutationa peroxidase e nas concentrações de selênio no fígado, rim e soro; porém, as concentrações de selênio no músculo foram maiores nos animais suplementados com fontes orgânicas do que nos outros animais (P<0,0001). A biodisponibilidade de Se no músculo foi maior quando foram utilizadas fontes orgânicas de selênio. O uso de fontes orgânicas de Se promove maior acúmulo de Se no músculo de cordeiros e promoveria maior ingestão de Se por consumidores de carne ovina. / This research was carried out at FZEA/USP to compare the utilization of organic selenium (Se) sources to sodium selenite in lambs’ diet, through analyses of tissues Se concentrations, liver glutathione peroxidase activity, metabolic balance of Se and bioavailability assay. Forty Suffolk lambs were used and submitted to three sources and three levels of supplementary Se for 84 days. Treatments were: treatment 1: no supplement; treatments 2, 3 and 4: 0.2, 0.8 and 1.4 mg/kg of supplementary sodium selenite-selenium; treatments 5, 6 and 7: 0.2, 0.8 and 1.4 mg/kg of supplementary selenoyeast-selenium; treatments 8, 9 and 10: 0.2, 0.8 and 1.4 mg/kg of supplementary selenomethionine-selenium. Blood samples were taken to Se serum dosage and in the end of the experiment the animals were killed and samples of liver, muscle and kidney were taken to Se concentrations dosage and glutathione peroxidase activity (liver). In the last five days of the experiment, a Se metabolic balance was realized. Bioavailability was calculated by “Slope Ration Assay”, using liver, muscle and kidney Se concentrations and glutathione peroxidase activity as parameters. Se sources did not affect Se intake, apparent absorption and retention, glutathione peroxidase activity and Se concentrations in liver, kidney and serum; however, selenium concentrations in muscle of animals supplied with organic sources were higher than in other animals (P<0.0001). Se bioavailability in muscle was higher when organic Se sources were used. Using organic Se sources provides higher accumulation of Se in lambs’ muscle which would provide higher Se intake to consumers of sheep meat.

Made available in DSpace on 2016-04-28T14:59:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2005-Fabiana Goes de Almeida Nobre.pdf: 412358 bytes, checksum: fd0b391dfbb07e357a843eb24048d913 (MD5) Previous issue date: 2005-08-30 / This research was carried out in the Institute of Zootecnia / Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, Serop?dica, Brazil, with the objective of evaluating the levels of methionine+cystine in the slow-growing broiler chickens, raised in conventional pen and in free-range farming. The study consisted of 360 broilers at 28 days of age distributed in 15 boxes in the conventional pen and 15 free-range farming areas with Tifton 85 grass. The experimental line used was a completely randomized design in a factorial arrangement (5 X 2) with 5 levels of supplementation of DL-metionine (0.000; 0.1515; 0.3030; 0.4545; 0.6060%) and two kinds of raising pens. The basal diet of corn and soybean-meal had a 16.039% CP and 2.900Kcal/Kg ME with 0.56% of metionine+cystine total. Feed intake, weight gain, and feed efficiency were evaluated during the experimental periods 1, 2 and 3 (respectively 28 to 49, 28 to 70 and 28 to 85 days of age. At the end of each experimental period the birds were slaughtered simulating the ages of slaughter in the conventional, organic and free-range systems, respectively 49, 70, and 85 days of age. The following weights chilled carcass, cold carcass, breast, legs, heart, gizzard, abdominal fat, and carcass income. The results yielded the following ideal levels: 1.05% for feed efficiency and 0.93% based on weight gain in period 1; 0.85% for the highest weight of gizzards raised in conventional pen at 49 days of age; 0.89% for feed efficiency in period 2; 0.87% for the highest weight of abdominal fat in the broilers raised in free-range farming area slaughtered at 70 days of age; 0.89% was the lowest weight of broiler gizzards raised in free-range farming areas slaughtered at 85 days of age. The level of 0,71% of metionine+cystine was more economic in all periods. The permanence of broilers in good living conditions had an effect on the relation between feed ingestion and weight gain specially when slowgrowing broiler chickens slaughtered later. / Um experimento foi conduzido no Setor de Avicultura do Instituto de Zootecnia da Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, com o objetivo de avaliar os n?veis de metionina+cistina na alimenta??o de frangos de corte de linhagem comercial de crescimento lento, criados em galp?o convencional e em abrigos com livre acesso a piquetes. A partir dos 28 dias de idade, 360 aves foram distribu?das em 15 boxes de um galp?o convencional e 15 abrigos com acesso a piquetes formados com a forrageira Tifton 85. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado, em um esquema fatorial 5X2, com cinco n?veis de suplementa??o de DL-metionina (0,000; 0,1515; 0,3030; 0,4545; 0,6060%) e dois tipos de alojamento. A dieta basal, a base de milho e farelo de soja, continha 16,039%PB e 2.900 kcalEM/kg com 0,56% de metionina+cistina total. Foram avaliados: consumo de ra??o, ganho de peso e convers?o alimentar nos per?odos experimentais I, II e III ( respectivamente, 28 a 49, 28 a 70 e 28 a 85 dias de idade). No final de cada per?odo experimental foram feitas avalia??es, correspondendo ?s idades de abate em sistema convencional, org?nico e caipira, respectivamente, 49, 70 e 85 dias de idade, para peso da carca?a quente, peso da carca?a fria, rendimento de carca?a, de peito e pernas, al?m do peso do cora??o, moela e gordura abdominal. Por an?lises de regress?o, observou-se que no per?odo I, o n?vel de 1,05% seria o melhor, considerando-se a convers?o alimentar e 0,93% quando se avaliou o ganho de peso, nos dois tipos de alojamentos. O peso da moela, no entanto, sofreu influ?ncia dos n?veis e do alojamento, com os maiores resultados, respectivamente, para 0,85% e galp?o convencional. No per?odo II, a convers?o alimentar foi melhor para ponto correspondente a um n?vel de 0,89%, e o maior peso de gordura abdominal em 0,87%, considerando ambos os alojamentos. Entretanto o n?vel de 0,89%, quando se avaliou o abate no per?odo III, correspondeu ao menor peso da moela dos frangos com acesso a piquetes. Pela an?lise de custo, o n?vel de 0,71% de metionina+cistina seria considerado o mais econ?mico para todos os per?odos. A perman?ncia dos frangos em condi??es favor?veis de bem-estar, teve influ?ncia na rela??o entre o consumo de ra??o e o ganho de peso, principalmente quando abatidos tardiamente.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:57Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-08-09Bitstream added on 2014-06-13T18:44:39Z : No. of bitstreams: 1 000736818.pdf: 1579566 bytes, checksum: d770b307cde39f2a54384a795c319cf7 (MD5) / O objetivo deste trabalho foi determinar as exigências de treonina para poedeiras comerciais na fase de crescimento com base nos métodos dose-resposta e fatorial. No fatorial, utilizando dados de desempenho e abate comparativo, diferentes modelos foram utilizados para estimar exigências de treonina (thr). As exigências de THR foram estimadas durante três fases: inicial (4 a 6 semanas), cria (8 a 11 semanas) e recria (13 a 16 semanas) através de três ensaios realizados separadamente. As aves foram distribuídas em um DIC, com 8 tratamentos, 6 repetições e 8 aves por unidade experimental, exceto a fase inicial, onde foram utilizadas 15 pintainhas por unidade experimental. As rações foram formuladas conforme a técnica da diluição. As variáveis mensuradas em cada fase de crescimento foram: GP (g), CR (g), consumo de thr (mg/ave/dia), CA (kg/kg), peso absoluto (g) e relativo (%) das penas, e as deposições de proteína e de gordura (g/ave/dia) no corpo livre de penas e nas penas. A máxima deposição de proteína foi 4,0 ± 0,2; 5,3 ± 0,4 e 3,5 ± 0,5 g/d, nas fases 1, 2 e 3, respectivamente. Conforme a thr na dieta diminuiu, a deposição de lipídios no corpo aumentou. A eficiência de utilização da thr foi estimada por meio da regressão linear entre o consumo e a deposição do aminoácido, e não houve diferença entre as fases avaliadas (P>0.05) sendo estimada em 85,5%. Estas respostas do crescimento do corpo e penas são importantes na determinação do nível ótimo de thr nas dietas e aves de postura em fase de crescimento. Estes dados foram utilizados em dois modelos fatoriais para estimativa da exigência de thr para o crescimento, onde no primeiro foi considerada a mantença, perda de penas, deposição do aminoácido (corpo e penas) e eficiência de utilização, e no segundo, os mesmos parâmetros, porém adicionando-se a deposição do aminoácido no ovário e oviduto... / The aim of this study was to determine threonine requirements for pullets in the growth period based on the dose-response and factorial methods. In a factorial method, using performance data and comparative slaughter, different models were used to estimate threonine (thr) requirements. These requirements were estimated for three phases: I (4 to 6 weeks), II (8 to 11 weeks) and III (13 to 16 weeks). The birds were distributed in a completely randomized with 8 treatments, 6 replicates of e8 birds each, except the phase I, where we used 15 chicks each. The diets were formulated according to the dilution technique. Variables measured were: BWG (g), FI (g), thr intake (mg/bird/day), FC (kg/kg), absolute (g) and relative weight (%) of feathers, deposition of protein and fat (g/bird/day) in body feather free and feathers. The maximum growth rate for protein was 4.0 ± 0.2, 5.3 ± 0.4 and 3.5 ± 0.5 g/d, for phases I, II and III, respectively. The efficiency of utilization of thr was estimated by linear regression between amino acid intake and deposition, and was the same for all periods, at 0.85 ± 0.1 mg/mg. As dietary thr content decreased the amount of body lipid deposition increased. With this information it is possible to determine the daily requirement for thr for the potential growth of body and feather protein in growing pullets. These data were used in two factorial models to estimate the thr requirement for growth, where in the first model was considered the maintenance, loss of feathers, the amino acid deposition (body and feathers) and efficiency of utilization, and in the second one, the same parameters but by adding the amino acid deposition in the ovary and the oviduct. The potential rates of body and feather protein growth are described by the Gompertz growth curve. The rate of growth of the oviduct appears to be considerably faster than that of the ovary (0.139 vs. 0.084 /d) but the ...

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-07-17T14:21:09Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2278426 bytes, checksum: 895ea32da6362140f4f272398a47c6a7 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-17T14:21:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2278426 bytes, checksum: 895ea32da6362140f4f272398a47c6a7 (MD5) Previous issue date: 2005-11-25 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Três experimentos foram realizados com poedeiras leves Hy Line W-36, na fase de produção, mantidas em ambiente de alta temperatura. No primeiro experimento a temperatura média registrada foi mínima de 26°C e máxima de 31°C. No segundo e terceiro experimentos a temperatura média registrada foi mínima de 21oC e máxima de 30°C. No primeiro experimento objetivou-se determinar se a biodisponibilidade da metionina hidroxi análoga ácido livre (MHA-AL) é igual ou superior a 65%, na base de produto, para poedeiras leves no período de 24 a 40 semanas de idade. No segundo e terceiro experimentos objetivou-se determinar as exigências nutricionais em lisina e em triptofano, para poedeiras leves no período de 44 a 55 semanas de idade. No primeiro experimento foram utilizadas 640 poedeiras comerciais com 24 semanas de idade, durante quatro períodos experimentais de 28 dias. Foi utilizado um delineamento inteiramente casualizado, com dez tratamentos, oito repetições e oito aves por unidade experimental. Os tratamentos consistiram em uma ração basal farelada deficiente em metionina, contendo 2.830 kcal de energia metabolizável (EM)/kg, 14,5% de proteína bruta (PB) e 0,23% e 0,21% de metionina total e digestível, respectivamente, sendo suplementada com DL Metionina 99% - DLM (0,0325; 0,05; 0,065; 0,0975; 0,10 e 0,15%) e com MHA-AL 88% (0,05; 0,10 e 0,15%). As características avaliadas foram: peso corporal (kg), produção de ovos (%), massa de ovos (g), peso médio dos ovos (g), consumo de ração (g) e conversão alimentar (g de ração/g de ovo). Com base nos dados de produção de ovos, massa de ovo e conversão alimentar a biodisponibilidade da MHA-AL foi calculada em 74,66, 73,97, 71,17, respectivamente, conferindo a MHA- AL uma biodisponibilidade média de 73,22% em relação à DLM, na base de produto. Conclui-se que a biodisponibilidade da MHA-AL é maior que 65% na base de produto. No segundo experimento foram utilizadas 240 poedeiras comerciais no período de 44 a 55 semanas de idade. As aves foram distribuídas em cinco tratamentos durante três períodos experimentais de 28 dias. Foi utilizado um delineamento em blocos casualizados, com cinco tratamentos, quatro blocos e doze aves por unidade experimental. As aves foram submetidas a uma ração basal farelada deficiente em lisina formulada para conter 2.800 kcal de EM/kg, 15,0% de PB e 0,541% e 0,476% de lisina total e digestível, respectivamente, sendo suplementada com lisina (0,00; 0,08; 0,16; 0,24 e 0,32%). As características avaliadas foram, peso corporal (kg), produção de ovos (%), massa de ovos (g), peso médio dos ovos (g), consumo de ração (g) e conversão alimentar (g de ração/g de ovo). Ao ser realizada a análise de regressão, para os níveis de lisina, foi encontrado efeito linear (P<0,05) para produção de ovos, massa de ovos, consumo de ração e conversão alimentar. O peso corporal e peso do ovo não foram influenciados (P>0,05) pelos níveis de lisina na ração. Conclui-se que a exigência nutricional em lisina para poedeiras leves no período de 44 a 55 semanas de idade, mantidas em ambiente de alta temperatura, é de 0,796% de lisina digestível na ração, correspondendo a um consumo médio diário de lisina digestível de 726mg/ave ou 15,1 mg/g de ovo. No terceiro experimento, 240 poedeiras comerciais, no período de 44 a 55 semanas de idade, foram submetidas a uma ração basal farelada deficiente em triptofano, para conter 2.850 Kcal de EM/kg, 15,0% de PB e 0,132% e 0,116% de triptofano total e digestível respectivamente, suplementada com 0,00; 0,02; 0,04; 0,06 e, 0,08% de triptofano durante três períodos experimentais de 28 dias. Foi utilizado um delineamento em blocos casualizados, com cinco tratamentos, quatro blocos e doze aves por unidade experimental. As características avaliadas foram, peso corporal (kg), produção de ovos (%), massa de ovos (g), peso médio dos ovos (g), consumo de ração (g) e conversão alimentar (g de ração/g de ovo). Foi observado efeito quadrático para produção de ovos, massa de ovos e conversão alimentar; e efeito linear para peso corporal e consumo de ração. O peso do ovo não foi influenciado, significativamente (P>0,05), pelos níveis de triptofano da ração A exigência em triptofano digestível para poedeiras leves no período de 44 a 55 semanas de idade mantidas em ambiente de alta temperatura, foi estimada em 0,180% de triptofano na ração, correspondendo a um consumo médio diário de 159mg/ave de triptofano digestível ou de 3,5 mg/g de ovo. / Three experiment were developed with Hy Line W-36 commercial layers, in the production period, under hot climate conditions. In the first experiment the temperature registered was minimum of the 25°C and maximum of the 30°C, and in the second and third experiments the temperature registered was minimum of the 21°C and maximum of the 30°C. In the one experiment was conducted with the objective to determine if bioavailability of methionine hydroxy analogue free acid (MHA-FA) is higher than 65%, in product basis, of laying hen to 24 the 40wk of age. In the second and third experiment were conducted with the objective to determine the nutritional requirement the lysine and tryptophan of laying hen to 44 the 55 wk of age. In the first experiment six hundred end forty laying hens were used during four experimental periods of 28 days each. The laying hens were randomly distributed into ten treatments with eight replicates. The treatments were based on basal diet deficient in methionine, contained 2830 kcal of energy metabolizable/kg and 14,5% of crude protein, with 0,23% and 0,21% the methionine total and digestible, respectively. The basal diet was supplied DL- Methionine 99 % - DLM (0,0325; 0,05; 0,065; 0,0975; 0,10 e 0,15%) and with MHA-FA (0,05; 0,10 e 0,15%). The evaluated variables were body weight (kg), feed consumption (g), egg production (%), egg mass (g), egg weight (g), feed conversion (g/the feed/g the egg). Based on the evaluation egg production, egg mass and feed conversion the bioavaiability in the MHA-FA was estimated in 74,66, 73,97 and 71,17, xirespectively, resulted in bioavaiability average of the 73,22% on product basis. The results of the present study indicate that bioavailability is higher than 65% on product basis. In the second experiment two hundred end forty laying hens were used during three experimental periods of 28 days each. The laying hens were randomly distributed into five treatments with twelve replicates. The treatments were based on basal diet deficient in lysine, contained 2800 kcal of energy metabolizable/kg and 15,0% of crude protein, 0,541 e 0,476% the lysine total and digestible, respectively. The basal diet was supplied with lysine (0,00; 0,08; 0,16; 0,24 e 0,32%). The evaluated variables were body weight (kg), feed consumption (g), egg production (%), egg mass (g), egg weight (g), feed conversion (g the feed/g the eggs. A linear effect (P<0,05) of lysine levels was seen on egg production, egg mass, feed consumption and feed conversion. No significant differences (P>0,05) among lysine levels were observed for body weight and egg weight. In conclusion the dietary lysine at 726 mg/hen per day or 15,1 mg/g the egg, in the period the 44 the 55wk of age, under hot climate conditions. In the third experiment two hundred end forty laying hens were used during three experimental periods of 28 days each. The laying hens were randomly distributed into five treatments with twelve replicates. The treatments were based on basal diet deficient in tryptophan, contained 2850 kcal of energy metabolizable/kg and 15,0% of crude protein, with 0,132 e 0,116% the tryptophan total and digestible, respectively. The basal diet was supplied with tryptophan (0,00; 0,02; 0,04; 0,06 e 0,08%). The evaluated variables were body weight (kg), feed consumption (g), egg production (%), egg mass (g), egg weight (g), feed conversion (g the feed/g the eggs). A linear effect (P<0,05) of tryptophan levels was seen on body weight and feed consumption. A quadract effect (P<0,05) of tryptophan levels was seen on egg production, egg mass and feed conversion. No significant differences (P>0,05) among tryptophan levels were observed for egg weight. In conclusion the dietary tryptophan at 159 mg/hen per day or 3,5 mg/g the egg, in the period the 44 the 55wk of age, under hot climate conditions.

A hipermetioninemia é uma condição caracterizada por altos níveis de metionina no sangue e em outros tecidos, podendo causar danos neurológicos, hepáticos e musculares. Considerando que a placenta transfere a metionina do sangue materno para a circulação fetal e que pouco se sabe sobre o efeito da hipermetioninemia gestacional sobre o feto em desenvolvimento, o principal objetivo deste trabalho foi desenvolver um modelo animal de hipermetioninemia materna quimicamente induzido em ratas e utilizar o mesmo para investigar parâmetros bioquímicos (estresse oxidativo, atividade da Mg2+-ATPase, atividade e imunoconteúdo da Na+,K+-ATPase, número de neurônios, níveis de neurotrofinas, metabolismo energético, inflamação e apoptose), moleculares (expressão gênica da Na+,K+-ATPase) e histológicos (microscopia eletrônica) nos encéfalos da prole, bem como avaliar tarefas comportamentais (campo aberto, esquiva inibitória e reconhecimento de objetos). Também analisamos parâmetros de estresse oxidativo/nitrosativo no músculo esquelético e parâmetros de dano muscular e inflamação no soro da prole. A hipermetioninemia foi induzida em ratas através de duas injeções subcutâneas diárias de metionina durante todo o período gestacional. Um grupo de ratas recebeu a dose 1 (1,34 μmol/g peso corporal) e outro recebeu a dose 2 (2,68 μmol/g peso corporal). O grupo controle recebeu salina. Após o nascimento, um grupo de filhotes foi eutanasiado no sétimo dia de vida e outro grupo foi eutanasiado aos 21 dias. Ambas as doses aumentaram os níveis encefálicos de metionina das mães e a dose 2 aumentou os níveis de metionina nos encéfalos da prole. Após estabelecer o modelo, a dose 2 de metionina foi escolhida para estudar os efeitos do tratamento sobre a prole. Os testes bioquímicos subsequentes foram realizados nos filhotes de 21 dias, a histologia foi realizada na prole de 21 e 30 dias e os testes comportamentais foram realizados em filhotes de 30 dias. Os resultados demonstraram que a hipermetioninemia materna reduziu a atividade da Na+,K+-ATPase, Mg2+- ATPase, catalase e complexo II/succinato desidrogenase, o conteúdo de sulfidrilas, número de neurônios e níveis de NGF e BDNF, bem como aumentou os níveis de RNAm e imunoconteúdo da Na+,K+-ATPase nos encéfalos dos filhotes. Foram observados também alterações morfológicas, indicativas de degeneração celular nos neurônios da prole, e os testes comportamentais indicaram deficit de memória. Com relação aos danos musculares, houve um aumento na produção de espécies reativas de oxigênio e lipoperoxidação e uma redução do conteúdo de sulfidrilas, atividades das enzimas antioxidantes e nos níveis de nitritos no músculo esquelético da prole. A atividade da creatina cinase foi reduzida e os níveis de ureia e proteína C reativa foram aumentados no soro. Esses resultados foram acompanhados por perda de massa muscular. Tais achados mostraram que a hipermetioninemia gestacional induziu alterações bioquímicas, moleculares e histológicas no encéfalo e bioquímicas no músculo esquelético e soro dos filhotes, as quais podem contribuir para o entendimento dos mecanismos fisiopatológicos envolvidos nos danos neurológicos e musculares causados por essa condição. Ressaltamos a importância do desenvolvimento do referido modelo de hipermetioninemia gestacional que além de ampliar o entendimento da toxicidade de altos níveis metionina, também abriu perspectivas para novos estudos a respeito dos efeitos ocasionados pela exposição ao excesso de metionina devido a uma condição genética ou uma dieta rica em proteína durante a vida pré-natal. / Hypermethioninemia is a condition characterized by elevated levels of methionine in blood and other tissues and may cause neurological, hepatic and muscular damages. Considering that placenta transfers methionine from maternal blood to the fetal circulation and little is known about the effect of gestational hypermetioninemia on the developing fetus, the main objective of this work was to develop a chemically induced animal model of maternal hypermethioninemia in rats and to use it to investigate biochemical (oxidative stress, activity of Mg2+-ATPase, activity and immunocontent of Na+,K+-ATPase, number of neurons, neurotrophins levels, energy metabolism, inflammation, and apoptosis), molecular (gene expression of Na+,K+-ATPase) and histological parameters (electron microscopy) in encephalon of the offspring, as well as evaluate behavioral tasks (open field, inhibitory avoidance and object recognition). We also analyzed oxidative/nitrosative stress parameters in skeletal muscle and parameters of muscle damage and inflammation in serum of the offspring. Hypermethioninemia was induced in rats through two daily subcutaneous injections of methionine throughout the gestational period. A group of pregnant rats received dose 1 (1.34 μmol/g body weight) and the other received dose 2 (2.68 μmol/g body weight). The control group received saline. After birth, a first group of pups was euthanized at the 7th day of life and the second group at the 21st day of life. Both doses 1 and 2 increased methionine levels in the brain of the mother rats and dose 2 increased methionine levels in encephalon of the offspring. After establishing the experimental model, the highest dose of methionine was chosen to study the effects of treatment on offspring. The subsequent biochemical tests were performed on 21-day-old pups, histological analyses were performed on offspring of 21 and 30 days of age, and behavioral tests were performed on 30-day-old pups. The results demonstrated that maternal hypermethioninemia reduced Na+,K+-ATPase, Mg2+-ATPase, catalase and complex II/succinate dehydrogenase activities, sulfhydryl content, number of neurons and levels of NGF and BDNF, as well as increased levels of mRNA and immunocontent of Na+,K+-ATPase in the brains of the pups. Morphological changes indicative of cellular degeneration were also observed in offspring neurons, and behavioral tests indicated memory deficit. With regard to muscle damage, there was an increase in the production of reactive oxygen species and lipoperoxidation, and a reduction of the sulfhydryl content, antioxidant enzymes activities and in the levels of nitrites in skeletal muscle of the offspring. Creatine kinase activity was reduced and urea and C-reactive protein levels were increased in serum. These results were accompanied by loss of muscle mass. These findings showed that gestational hypermethioninemia induced biochemical, molecular and histological changes in the brain and biochemical changes in skeletal muscle and serum of pups, which may contribute to the understanding of the pathophysiological mechanisms involved in the neurological and muscular damages caused by this condition. We emphasize the importance of the development of this model of gestational hypermetioninemia that, in addition to increasing the understanding of toxicity of high methionine levels, also opened perspectives for new studies regarding the effects caused by exposure to excess methionine due to a genetic condition or a diet rich in protein during prenatal life.