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Análise cromatográfica, morfológica e molecular da síntese do oleoresina em plantas jovens de Copaifera multijuga hayne (fabaceae – caesalpinioideae)Bastos, Ana Paula Meneses Rodrigues 28 September 2011 (has links)
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Previous issue date: 2011-09-28 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / Adult plants Copaifera genus are known to have one of the
resin oils most commonly used in folk medicine, which credited to several
pharmacological and cosmetic properties. In plant oil resin produced in
secondary xylem, is used for its defense against various internal agents and
external. In this paper we analyzed the essential oil extracted in young plants
Copaifera Hayne multijuga in order to confirm the presence of coding sequences
enzymes responsible for synthesis of oil and to generate a cDNA library. To the
oil extraction was used the technique of steam distillation in Clevenger apparatus
modified and then the spectrophotometric analysis of masses for classification of
sesquiterpene compounds (essential oil). In chromatographic analysis allowed
identification of various compounds present in both the young plant as the plant
the adult Copaifera gender, such as ß-caryophyllene, α-copaene, D germacrene, α-
humulene, δ-cadineno, γ-elemene, α-cubebeno and α-bergamotene etc.
Minority studied. In one approach we used immunohistochemistry methods
microscopic to locate secretory canals of the plant, where slides were
prepared using semi-automated microtome, stained blue solution
toluidine reagent and NADI. After these analyzes, proved the presence of these
secretory ducts in young leaves, a cDNA library was constructed, utilizandose
as a source of mRNA similar biological material (young leaves of C. multijuga), and
subsequently their nucleotides sequenced by pirosenquenciamento the
which was analyzed by computational biology, using programs prioritized
biosynthesis of terpenes and sesquiterpenes, where their coding sequences
enzymes were found, showing engagement of the mRNA in the oil construction
not essential in adult plants of this species. Using techniques
chromatography to identify phytochemicals compounds, together with methods
histological and then the sequencing of genes expressed in young leaves
and therefore the secretory oil rosin, allow confirmation of the biosynthesis
various substances present in this oil as well as their metabolic pathways. Those
Data are presented for the first time together, believing that they can
helping to open new frontiers in research and development
biotechnologies based upon its results. / As plantas adultas do gênero Copaifera são conhecidas por possuírem um dos
óleos resina mais utilizados na medicina popular, ao qual creditam-se diversas
propriedades farmacológicas e cosméticas. Na planta, o óleo resina, produzido no
xilema secundário, é utilizado para sua defesa contra diversos agentes internos e
externos. Neste trabalho analisou-se o óleo essencial extraído em plantas jovens de
Copaifera multijuga Hayne, a fim de confirmar a presença de seqüências codificadoras
de enzimas responsáveis pela síntese do óleo e gerar uma biblioteca de cDNA. Para a
extração do óleo foi usada a técnica de arraste a vapor em aparelho de clevenger
modificado e a seguir a análise espectrofotométrica de massas para classificação dos
compostos sesquiterpênicos (óleo essencial). Na análise cromatográfica permitiu a
identificação de vários compostos presentes tanto na planta jovem quanto na planta
adulta do gênero Copaifera, como: ß-cariofileno, α-copaeno, D germacreno, α-
humuleno, δ-cadineno, γ-elemeno, α-cubebeno e α-bergamoteno entre outros
minoritários estudados. Numa abordagem histoquímica utilizou-se métodos
microscópicos para localizar canais secretores da planta, onde lâminas foram
preparadas utilizando o micrótomo semi-automático, coradas em solução de azul de
toluidina e em reagente de NADI. Após estas análises, comprovada a presença desses
ductos secretores em folhas jovens, foi construída uma biblioteca de cDNA, utilizandose
como fonte de mRNA material biológico similar (folhas jovens de C. multijuga), sendo
posteriormente seqüenciado seus nucleotídeos por meio de pirosenquenciamento, o
qual foi analisado por biologia computacional, utilizando-se programas que priorizaram
a biossíntese dos terpenos e sesquiterpenos, onde suas seqüências codificadoras de
enzimas foram encontradas, mostrando envolvimento do mRNA na construção do óleo
essencial em plantas não adultas desta espécie. A utilização de técnicas
cromatográficas para identificação de compostos fitoquímicos, aliadas a métodos
histológicos e posteriormente ao seqüenciamento de genes expressos de folhas jovens
e, portanto secretoras de óleo resina, permitiram a confirmação da biossíntese de
diversas substâncias presentes nesse óleo, bem como suas rotas metabólicas. Esses
dados são apresentados pela primeira vez conjuntamente, acreditando-se que possam
contribuir para a abertura de novas fronteiras na pesquisa e no desenvolvimento de
biotecnologias baseadas em seus resultados.
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Frutos, sementes e desenvolvimento plantular de três espécies de Parkia R. Br. (Fabaceae-Mimosoideae): uma abordagem morfoanatômica, histoquímica e tecnológicaMelo, Maria da Glória Gonçalves de 28 July 2011 (has links)
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Previous issue date: 2011-07-28 / Parkia species are representative of the Amazonian floristic landscape and occupy an important role among leguminous trees. Despite the importance of species for reforestation projects, there are few reports on morpho anatomical technological in the gender, which require more detailed studies. This study aimed to characterize the morphology of fruit, morpho anatomy and histochemistry of the seeds and seedlings, as well as the technological characteristics of the seeds, in order to obtain standards for the proper management of species reproduction of Parkia multijuga, P. panurensis and P. velutina. The fruits were collected along the Urucu river at the Pedro de Moura Geologist Operations Base, Coari / AM, located at 623 km from Manaus. The physical tests indicated that seeds of P. multijuga had a weight of 1000 mature seeds equivalent of 3,432.6 g, whereas P. panurensis 712.10 g and P. velutina 521.31 g. The number of seeds per kilogram was 291 seeds for P. multijuga, 1404 for P. panurensis and 1918 for P. velutina. To determine the water content of seeds of P. multijuga three cut seeds by subsample can be used five for P. velutina. and 25 for P. panurensis. The three species have type of fruit nucóides vegetables, dry, estenocárpicos, uniseriate.The seed is oblong in P. multijuga, elliptical in P. panurensis and oboval in P. velutina. The integument presents palisade layer with clear line and printed on both sides pleurogram apical-basal, regular, 100 and 90% in P. multijuga and 90% in P. panurensis and P. velutina. Cotyledons, cloven with hidden rootlet in P. multijuga and P. panurensis and carved in radicle exposed to P. velutina. Radicle hypocotyl axle with well differentiated plumule in the three species, but only P. velutina presents axle with rachis of leaf prime with multicellular trichomes got from the tricellular base. In the mature seeds of three species, there is the presence of phenolics and alkaloids, which may be related to the mechanism of dormancy, while, carbohydrates, proteins and lipids, are the major reservations.The treatments of mechanical scarification with emery electric on the side of the seed were effective in overcoming physical dormancy of seeds of P. panurensis and P. multijuga, while the chemical scarification with sulfuric acid in a longer period of immersion was more effective for seeds of P. panurensis and P. velutina. The full seedling formation from 18 to 21 days in P. multijuga and 12 to 15 days in P. velutina and P. panurensis. The root of P. multijuga is polyarc and presents primary growth, since the P. panurensis and P. velutina present beginning of secondary growth with fascicular and interfascicular exchange both installed. Phenolic compounds were detected in the epidermis and pericycle of the root, the peripheral cortical parenchyma and epidermis of the hypocotyl, cotyledons of P. panurensis and in the pinnae of the three species. / As espécies de Parkia são representativas da paisagem florística amazônica e ocupam papel importante entre as leguminosas arbóreas. Apesar da importância das espécies para projetos de reflorestamento, são poucos os trabalhos morfoanatômicos e tecnológicos no gênero, que carecem de estudos mais detalhados. Este trabalho teve por objetivo caracterizar a morfologia dos frutos, morfoanatomia e histoquímica das sementes e plântulas, bem como as características tecnológicas das sementes, visando obter padrões para o manejo adequado de reprodução das espécies de Parkia multijuga, P. panurensis e P. velutina. Os frutos foram coletados de dez indivíduos por espécie, ao longo do rio Urucu na Base de Operações Geólogo Pedro de Moura, Coari/AM, localizada a 623 km de Manaus. Os testes físicos indicaram que as sementes de P. multijuga apresentaram peso de 1000 sementes maduras equivalente a 3.432,6 g, enquanto P. panurensis 712,10 g e P. velutina 521,31 g. O número de sementes por quilograma foi de 291 sementes para P. multijuga, 1.404 para P. panurensis e 1.918 para P. velutina. Para determinar o teor de água das sementes de P. multijuga pode-se utilizar três sementes cortadas por subamostra, cinco para P. velutina e 25 para P. panurensis. As três espécies apresentam frutos do tipo legumes nucóides, secos, estenocárpicos, unisseriados. A semente é oblonga em P. multijuga, elíptica em P. panurensis e oboval em P. velutina. O tegumento apresenta camada paliçádica com linha lúcida e impresso nas duas faces pleurograma apical-basal, regular, a 100 e 90% em P. multijuga e 90% em P. panurensis e P. velutina. Cotilédones, fendido com radícula escondida em P. multijuga e P. panurensis e entalhado com radícula exposta em P. velutina. Eixo hipocótilo-radícula com plúmula bem diferenciada nas três espécies, mas apenas P. velutina apresenta eixo com ráquis dos primórdios foliares com tricomas pluricelulares capitados de base tricelular. Na semente madura das três espécies, destaca-se a presença de compostos fenólicos e alcalóides, o que pode estar relacionado com a defesa primária da semente a possíveis predadores e ao
mecanismo de dormência, enquanto, carboidratos, proteínas e lipídios, constituem as principais reservas. Os tratamentos de escarificação mecânica com esmeril elétrico na lateral da semente foram eficientes na superação da dormência física de sementes de P. panurensis e P. multijuga, enquanto a escarificação química com ácido sulfúrico em maior tempo de imersão foi mais eficiente para as sementes de P. panurensis e P. velutina. A plântula completa a formação de 18 a 21 dias em P. multijuga e de 12 a 15 dias em P. velutina e P. panurensis. A raiz de P. multijuga é poliarca e apresenta crescimento primário, já a de P. panurensis e P. velutina apresentam início de crescimento secundário com câmbio tanto fascicular quanto interfascicular instalados. Compostos fenólicos foram evidenciados na epiderme e periciclo da raiz, no parênquima cortical periférico e epiderme do hipocótilo, nos cotilédones de P. panurensis e nos foliólulos das três espécies.
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Estudo químico dos alcalóides piridínicos encontrados em Senna multijugaFrancisco, Welington [UNESP] 16 February 2011 (has links) (PDF)
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Previous issue date: 2011-02-16Bitstream added on 2014-06-13T20:19:05Z : No. of bitstreams: 1
francisco_w_me_araiq.pdf: 5726334 bytes, checksum: fad4f57aaf53ae933a5c86aa96974115 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O presente trabalho teve como objetivo o estudo químico da fração diclorometânica das folhas de Senna multijuga, visando o isolamento, purificação e elucidação estrutural de alcalóides piridínicos com potencial farmacológico. Inicialmente foi preparado o extrato hidroalcóolico das folhas, o qual foi submetido à partição líquido/líquido com hexano, diclorometano e acetato de etila. As quatro frações obtidas foram avaliadas por CCD, sendo a fração diclorometânica a de maior concentração alcaloídica. Essa fração foi submetida à extração ácido/base e a fração alcaloídica submetida à CCD preparativa de sílica, que foi desenvolvida com uma mistura dos solventes hexano:CHCl3:AcOEt (1,5:2:6,5), de onde foram isolados cinco alcalóides que apresentaram absorção na região do ultravioleta a 254 e 286 nm. Desta separação obteve-se dois alcalóides puros, 7'-multijuguinona (5), 12'-hidroxi-7'-multijuguinona (2), e os demais foram purificados por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE): 4'-multijuguinato de metila (3), 7'- multijuguinol (4a e 4b) e 12'-hidroxi-7'-multijuguinol (1a e 1b). Estas substâncias tiveram suas estruturas elucidadas pelo uso dos experimentos de Ressonância Magnética Nuclear (RMN) e Espectrometria de Massas com ionização por eletrospray (EM). A partir destas análises foi possível determinar a estrutura de sete substâncias, sendo todas inéditas na literatura. As substâncias apresentaram atividade anticolinesterásica moderada, o que justifica a importância de estudos com metabólitos secundários. Os pares 1a e 1b e 4a e 4b isolados apresentam isomeria que ainda não determinada. Pelas análises do perfil alcaloídico determinado no estudo sobre a espécie, pode-se constatar que os demais órgãos também acumulam alcalóides, porém, em concentrações diferentes, prevalencendo um ou dois deles. / This present work deals with the chemical study of the dichloromethane fraction of the Senna multijuga leaves, aiming the isolation, purification and structural elucidation of the new bioactive pyridine alkaloids, which can be useful for further pharmacological evaluation. The leaves ethanol extract was subjected a liquid/liquid partitions with hexane, dichloromethane and ethyl acetate, resulting in four fractions, which were evaluated for TLC, being the dichloromethane the fraction with the highest concentration of alkaloids. This fraction was subjected to acid/basic extraction, and the alkaloidal fraction (1.42 g) was subjected to silica preparative TLC, and eluted with a solvent system: n-hexane:CHCl3:AcOEt (1.5:6.5:2), which were isolated five alkaloids. From this procedures were obtained alkaloids, 7'-multijuguinone (5), 12'-hydroxyl-7'- multijuguinone (2) and the resulting mixture was further purified by HPLC yielding methyl 4'-multijuguinate (3), 7'-multijuguinol (4a e 4b) and 12'-hydroxyl-7'- multijuguinol (1a e 1b). The structure of all alkaloids were determined by RMN and mass spectral data analysis resulting in seven new moderate acetylcholinesterase inhibitor derivatives. The alkaloids pairs, 1a;1b and 4a;4b, are isomeric mixtures, not identified yet. Through the alkaloid profile has been established after several data accumulated from this plant, it was observed that others organs also accumulate the same alkaloids, but in different concentration prevailing one or two alkaloids.
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Avaliação da segurança de uso do óleo de Copaifera multijuga Hayne (Fabaceae)Gonçalves, Eduardo da Silva 06 June 2014 (has links)
Submitted by Ramon Santana (ramon.souza@ufpe.br) on 2015-03-11T17:20:15Z
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Previous issue date: 2014-06-06 / FINEP / O óleo de copaíba é usado pela população sendo encontrado em farmácias e outros
estabelecimentos. É extraído de espécies de Copaifera (Fabacea), sendo a mais utilizada no Brasil a
Copaifera multijuga Hayne. Em sua constituição encontram-se sesquiterpênicos e ác. palmítico. A
literatura o atribui ação antiinflamatória, antinociceptiva, antibacteriana e antitumoral. São escassos
trabalhos relacionados à sua toxicidade, nesse sentido, procurou-se avaliar a segurança pré-clínica
do óleo de C. multijuga (Cm). Para tal, inicialmente confirmou-se a atividade antiinflamatória e
antinociceptiva por via oral do óleo nos modelos de peritonite (Cm 200 mg/kg) e de contorções
abdominais (Cm 50 a 200 mg/kg), posteriormente foi realizado o teste de toxicidade aguda (DL50)
em ratos e finalmente os ensaios por via oral de toxicidade de dose repetida por 4 e 8 semanas em
ratos Wistar e 4 semanas em coelhos Nova Zelândia, seguindo os critérios norteadores da ANVISA.
Os resultados mostram que o óleo (200 mg/kg) reduziu em 28% o número de leucócitos circulantes,
após estímulo com carragenina e que todas as doses (50 – 200 mg/kg) inibiram as contorções
abdominais por ác. acético. Na toxicidade aguda não houve morte até a dose de 4,0 g/kg o que
revela baixa toxicidade por via oral. Em ratas, a administração do óleo (Cm 200, 500 e 2500 mg/kg)
por via oral não produziu mortes ou alteração comportamental, entretanto, houve aumento do ganho
de massa, para Cm 200 mg/kg e redução para Cm 2500 mg/kg. O consumo de água aumentou para
Cm 2500 mg/kg ao final de 8 semanas. Nos ratos, não houve mortes ou alteração comportamental,
mas Cm 2500 mg/kg reduziu a massa corporal na 5ª e 6ª semana e aumentou o consumo de água já
na 3ª semana de administração. Os parâmetros hematológicos em ratos de ambos os sexos não
foram alterados. Enquanto que nos parâmetros bioquímicos em ratas, avaliados na 4ª semana
registrou-se que Cm 2500 mg/kg aumentou os níveis séricos de creatininia (creat), col. VLDL,
triglicerídeos (trig), fosfatase alcalina (FA), bilirrubinas T e D (BT e BD), albumina e amilase (amil)
e a dose de 500 mg/kg aumentou os níveis de amilase. Ao final da 8ª semana, Cm 2500 mg/kg
aumentou creat, col. VLDL, trig, BT e BD, enquanto Cm 500 mg/kg elevou col. VLDL e trig. Nos
machos, ao final da 4a semana, Cm 2500 mg/kg aumentou creat, FA, BT e BD e prot. total e nas
doses de 500 e 200 mg/kg aumentou creat. Na 8ª semana, Cm 2500 mg/kg aumentou ureia, creat,
col. HDL, FA, BT e BD, albumina, amilase e lactato desidrogenase (LDH), Cm 500 mg/kg,
aumentou BD e LDH e Cm 200 mg/kg aumentou BD. Em coelhos de ambos os sexos, Cm 2500
mg/kg aumentou creat, col. total e LDL e BT e BD. Na morfologia de ratos, observaram-se
alterações pontuais nas massas absolutas ou relativas no fígado, estômago e adrenal, contudo a
análise microscópica dos tecidos não revelou nenhuma alteração. Na toxicidade reprodutiva, o óleo
em todas as doses reduziu a massa corporal das mães durante o período de gestação e a massa
absoluta dos fetos. Houve também aumento do consumo de água no 14º e 20º dia. Na performace
reprodutiva dos machos, o óleo não alterou os parâmetros reprodutivos, assim como, não foram
constatadas alterações nos indicadores comportamentais da prole. E finalmente observou-se
alteração nos parâmetros globais de avaliação renal em ratos tratados por quatro semanas. Desta
forma conclui-se que o óleo possui baixa toxicidade, contudo, merece destaque o possível efeito
tóxico materno durante a gestação e sobre a função renal que requerem estudos mais detalhados.
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Estudo da suspensão do óleo de copaíba Multijulga com Nanopartículas de magnetitas substituídasOliveira, Liliam Gleicy de Souza 03 September 2015 (has links)
Submitted by Geyciane Santos (geyciane_thamires@hotmail.com) on 2015-11-25T20:31:11Z
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Previous issue date: 2015-09-03 / Não informada / Nanotechnology excels in many areas of expertise, for example, magnetic nanoparticles of iron oxides contribute to the therapy and diagnosis of cancer. Nanoparticles from iron oxides (NM) and magnetite (Fe3O4) and maghemite (γ-Fe2O3) assist in early detection of tumors by nuclear magnetic resonance and permeate into cancer cells for the eradication of tumors by hyperthermia. However, the application of magnetic iron oxides depends on the synthetic route of the magnetic namomaterial and their incorporation in cancer cells. Thus, a series of NM, replaced by Ni and Co, was synthesized by co-precipitation in this work to incorporate them into Copaiba oil Copaifera multijuga as a way to produce nanomaterials able to interact with cancer cells. Six NM replaced by Ni (Ni 1 Ni 2, Ni 3) and Co (Co1, Co 2, Co 3) were chosen using the exploratory techniques HCA and PCA with the R software (ChemoSpec packet) applied to spectra ray diffraction X. Selected NM were studied by XRD, FT-NIR, SEM-EDS and Mössbauer spectroscopy on samples embedded in C. oil multijuga and not incorporated. The results of XRD, SEM and FT-NIR showed a mixture of magnetite / maghemite particles distributed in small average particle size, or even amorphous. This suggests that the synthesis process generated the formation of NM with different morphologies. The Mössbauer spectra suggest different behavior as it increases the isomorphic substitution, so the higher is the substitution is superparamagnetic NM synthesized. / A nanotecnologia destaca-se em muitas áreas do conhecimento, por exemplo, nanopartículas magnéticas de óxidos de ferro contribuem na terapia e diagnóstico do câncer. Nanopartículas dos óxidos de ferro magnéticos (NM) como magnetita (Fe3O4) e maghemita (γ-Fe2O3) auxiliam na detecção precoce de tumores por ressonância magnética nuclear e impregnam-se em células cancerígenas para a erradicação dos tumores por hipertermia. Todavia, a aplicação dos óxidos de ferro magnéticos depende da rota sintética do namomaterial magnético e sua incorporação nas células cancerígenas. Sendo assim, uma série de NM, substituídas por Ni e Co, foi sintetizada por coprecipitação neste trabalho a fim de incorporá-las em óleo de copaíba da espécie Copaifera multijuga como forma de produzir nanomateriais capazes de interagir com células cancerígenas. Seis NM substituídas por Ni (Ni 1, Ni 2, Ni 3) e Co (Co1,Co 2, Co 3) foram escolhidas usando as técnicas exploratórias de HCA e PCA com o programa R (pacote ChemoSpec) aplicadas a espectros de difração de raios X. As NM selecionadas foram estudadas por DRX, FT-NIR, MEV-EDS e Espectroscopia Mössbauer em amostras incorporadas em óleo de C. multijuga e não incorporadas. Os resultados de DRX, FT-NIR e MEV mostraram uma mistura de magnetita/maghemita distribuída em particulas pequeno tamanho médio de partículas ou mesmo amorfas. Esse fato sugere que o processo de síntese gerou a formação de NM com morfologias diferentes. Os espectros Mössbauer sugerem comportamentos diferentes à medida que aumenta a substituição isomórfica, ou seja, quanto maior é a substituição mais superparamagnética é a NM sintetizada
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Estudo dos metabólitos de Aspergillus fumigatus visando o isolamento de uma substância bioativa contraSilva, Emily Marcele Soares 10 July 2014 (has links)
Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-12-07T14:13:22Z
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Previous issue date: 2014-07-10 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Tuberculosis (TB) caused by Mycobacterium tuberculosisis one of the most lethal diseases in the world, causing millions of deaths every year. Due to the inadequate treatment and the emergence of multidrug-resistant strains, the search for new antimicrobial compounds have been often reported in the scientific literature. Drugs developed from natural products have been a frequent research target and promising results have been obtained with the discovery of antimicrobial compounds synthesized by endophytic microorganisms. Previous work demonstrated that an endophytic Aspergillus fumigatusspecies,isolated from Copaifera multijugaHayne (copaíba), produces antimicrobial compounds, which are released into the growth substrate. The direct use of this substrate (fermentation broth) in antibiosis assaysagainst M. tuberculosisin vitro allowed detectingantimicrobial activity against the pathogen when compared to the negative control. So, the objective of this work was the analysis and purification of these compounds by the fractionation of A. fumigatusmutant and non-mutantfermentation broth, aiming the selection of fractions with higher capacityfor inhibitM. tuberculosis. Mutants were obtained by the induction of the fungal culture to ultraviolet lightexposition. The wild and mutant derivatives isolateswere tested for antibiosis against the indicator organism, Staphylococcusaureusandthe antimicrobial activity has been evaluated by comparing in vitro antibiosis assaysand fungal extractson n-butanol by High Performance Liquid Chromatography (HPLC). After, n-butanolextracts of wild isolates were subjected to fractionation by Medium PressureLiquid Chromatography (MPLC), and the fractions were evaluated against M. smegmatis. After this test, the fractions that showed antagonistic activity were selected for testing against M. tuberculosis, and analyzed in analyticalHPLC. Among 18 mutants selected, eight showed antagonismagainst S. aureus. A peak with less than a minute of retention was correlated with the antimicrobial activity. On the fractionation, 30 fractions were obtained and among these, only two (F4 and F13) showed activity against M. smegmatisandonly F4 showed antagonism against M. tuberculosiswith an MIC of 256µg/mL. The chromatograms of both F4 andF13 showedpeaks atthe beginning of the analysis. The F4chromatogram showedtwo peaks with retention times of 2.1 and 2.4 minutes. These data will be useful in future optimization and purification of compounds / A tuberculose (TB), causada por Mycobacterium tuberculosisé uma das enfermidades mais letais do mundo, causando milhões demortes todos os anos. Devido aos tratamentos inadequados e ao surgimento de cepas multirresistentes aos fármacos utilizados nos tratamentos, a busca por novos compostos antimicrobianos tem sido reportada com freqüência na literatura científica. Fármacos desenvolvidos a partir de produtos naturais têm sido um alvo frequente de pesquisa e dentre as perspectivas, resultados promissores têm sido obtidos com a descoberta de compostos antimicrobianos sintetizados por micro-organismos endofíticos. Trabalhos anteriores demonstraram que um fungo endofítico da espécie Aspergillus fumigatusisolado de Copaifera multijuga Hayne (copaíba), produz compostos antimicrobianos, os quais são secretadospara o substrato de crescimento. A utilização direta desse substrato (caldo de fermentação) em testes de antibiose in vitro contra M. tuberculosispermitiram detectar sua atividade antimicrobiana contra o patógeno, quando comparadaao controle negativo. Partindo desse resultado, foi objetivo do presentetrabalhoproceder à análise e purificação desses compostos, através do fracionamento do caldo de fermentação de A. fumigatusmutantes e não mutantes, visando à seleção de frações que apresentem maiorcapacidade de inibição contra M. tuberculosis.Induziu-sea mutação do isolado selvagempor meio da exposição da cultura fúngica à luz ultravioleta. O isolado selvagem e os mutantes derivados desse isolado foram testados quanto à antibiose contrao micro-organismoindicador,Staphylococccusaureus, tendo sido a atividade antimicrobianaavaliada por meio de comparações entre os testes de antibiose in vitroe os cromatogramas dos extratos fúngicos fracionados em n-butanolpor Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE). Após isso, extratos em n-butanolde isolados selvagens foram submetidos ao fracionamento químico por Cromatografia Líquida de Média Pressão (MPLC)e as frações obtidas foram avaliadas contra M. smegmatis. Após este ensaio, as frações que apresentaram antagonismo foram selecionadas para o ensaio contra M. tuberculosis, além de serem analisadasem CLAEAnalítica. Foram selecionadas 18 colônias mutantes e destas, oito apresentaram antagonismo contra S. aureus. A partir da análise dos cromatogramas dos isolados, correlacionou-se à atividade antimicrobiana um pico com menos de um minuto de retenção.No fracionamento químico, foram obtidas 30 frações e destas,apenas duas (F4 e F13)apresentaram atividade contra M. smegmatis.Das duas frações, apenas F4 apresentou antagonismo frente a M. tuberculosiscom CIM de 256µg/mL. Os cromatogramas, tanto de F4 quanto de F13, apresentampicos no início da análise. O cromatograma de F4 mostra dois picos, com tempos de retenção de 2,1 e 2,4 minutos. Esses dados iniciais auxiliarão na otimização e futurapurificação dos compostos.
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Emulsões amazônicas bioativas para limpeza do preparo cavitário: atividade antibacteriana, citotoxicidade, alteração de cor e compatibilidade biológicaBari, Cristiane Nagai Coelho de 22 August 2011 (has links)
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Previous issue date: 2011-08-22 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The cleaning procedure is a step in cavity preparation of tooth structure to receive the
restorative treatment, this step aims to remove debris and microorganisms of the
cavity, allowing a direct interface between tooth and restoration. Oil-copal resin is a
natural product, used by Amazonian populations and recognized for its medicinal
properties such as antimicrobial activity against the microorganisms in the oral cavity.
This study evaluated the biological compatibility and antimicrobial activity in mouse
molar of the emulsions formulated cleaning the cavity of the base oil-resin of copaiba
(Copaifera multijuga), the following concentrations: 10% copal, copal to 10% with
amyrin, copal 30% and 30% with copal amyrin. The antibacterial activity of these
emulsions were analyzed by the minimum inhibitory concentration, minimum
bactericidal concentration and cell viability analysis by fluorescence techniques,
compared to ATCC 25175 Streptococcus mutans, Streptococcus oralis ATCC 10557,
Streptococcus salivarius ATCC 7073 and Lactobacillus casei ATCC 7469. The
cytotoxic activity of emulsions were evaluated by tests of the hemolysis tests and cell
culture, compared to murine fibroblasts NHI3T3 by the Alamar Blue test. The color
change was evaluated difference between the starting and ending of the specimens of
dentin when in contact with the test emulsions at different times, 10 seconds, 30
seconds and 10 minutes. The biological compatibility of the copal emulsions were
evaluated by washing the cavity with the test emulsion followed by pulp capping with
calcium hydroxide pastes associated with oil-resin of copaiba amyrin 10% + 1% in
molars of rats. The test emulsions at all concentrations showed antibacterial activity
against microorganisms relevant to dentistry. In cytotoxic activities, all emulsions
tested showed cell lysis, with an EC50 ranging from 11 to 32μL/mL. The emulsions
of the oil-resin of copaiba with amyrin showed better behavior and hemolytic activity
that the emulsions without amyrin. In the test cell culture was observed that the
emulsions of the oil-resin of copaiba decrease cell viability showing cytotoxicity.
Evaluating the color change, the emulsions of the oil-resin of Copaiba with amyrin
were less clinically noticeable color change, ΔE <3.3, within 10 minutes. The pulp
capping with emulsions and pastes the oil-resin of Copaiba observed behavior was
similar to control, when used in the emulsion of the oil-resin of Copaiba to 10% with
amyrin. The authors concluded that testing of emulsions and pastes the base of the oilresin
of Copaiba are promising for application in dentistry, requiring more research to
improve the pharmacological, physical, mechanical and biological properties. / O procedimento de limpeza da cavidade é uma etapa do preparo da estrutura dentária
para receber o tratamento restaurador, esta etapa visa remover resíduos e
microrganismos da cavidade, permitindo uma interface direta entre dente e
restauração. Óleo-resina da copaíba é um produto natural, utilizado pelas populações
amazônicas e reconhecido pelas suas propriedades medicinais, como atividade
antimicrobiana frente aos microrganismos presentes na cavidade oral. Este estudo
avaliou a atividade antibacteriana, citotoxicidade, alteração de cor e a
compatibilidade biológica em molares de rato das emulsões de limpeza de cavidade
formulada a base do óleo-resina da copaíba (Copaifera multijuga), nas seguintes
concentrações: copaíba a 10%, copaíba a 10% com amirina, copaíba a 30% e copaíba
a 30% com amirina. A atividade antibacteriana destas emulsões foram analisadas
pelos testes da Concentração Inibitória Mínima, Concentração Bactericida Mínima e
Análise da Viabilidade Celular por Técnica de Fluorescência, frente aos
Streptococcus mutans ATCC 25175; Streptococcus oralis ATCC 10557;
Streptococcus salivarius ATCC 7073 e Lactobacillus casei ATCC 7469. A atividade
citotóxica das emulsões testes foram avaliadas através dos testes de hemólise e de
cultura de células, frente a fibroblastos murinos NHI3T3, através do ensaio de
Alamar Blue. A alteração de cor avaliou diferença entre a cor inicial e final dos
corpos de prova de dentina quando em contato com as emulsões testes, em diferentes
períodos, 10 segundos, 30 segundos e 10 minutos. A compatibilidade biológica das
emulsões da copaíba foram avaliadas através da lavagem da cavidade com as
emulsões testes nas concentrações de 10% e 30% com amirina, seguida do
capeamento pulpar com pastas de hidróxido de cálcio associadas com óleo-resina da
copaíba 10% com amirina 1% em molares de ratos. As emulsões testes, em todas as
concentrações, apresentaram atividade antibacteriana frente aos microrganismos
relevantes na odontologia. Nas atividades de citotoxicidade, todas as emulsões
testadas apresentaram lise celular, com uma EC50 variando de 11 a 32μL/mL. As
emulsões do óleo-resina da copaíba com amirina apresentaram melhor
comportamento quanto a atividade hemolítica que as emulsões sem amirina. No teste
de cultura de células foi observado que as emulsões do óleo-resina da copaíba
diminuem a viabilidade celular apresentando atividade citotóxica. Comparando a cor
inicial e final dos corpos de prova quando em contato com as emulsões testes, as
emulsões do óleo-resina da copaíba com amirina apresentaram menor alteração de cor
perceptível clinicamente, ΔE <3,3, no período de 10 minutos. O capeamento pulpar
com emulsões e pastas do óleo-resina da copaíba foi observado um comportamento
semelhante ao controle, quando utilizado a emulsão do óleo-resina da copaíba a 10%
com amirina. Os autores concluíram que as emulsões e pastas testes a base do óleoresina
da copaíba são promissores para aplicação na odontologia, necessitando de
mais pesquisas para melhorar a farmacotécnica, propriedades físicas, mecânicas e
biológicas.
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Caracterização físico-química dos óleos-resinas de copaifera multijuga hayne e avaliação da variabilidade química de sua fração volátil / Physical-chemical characterization of copaifera multijuga hayne oils-resins and variability chemistry evaluation their volatile fractionSilva, Marcos Túlio da 13 May 2016 (has links)
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Previous issue date: 2016-05-13 / The genus Copaifera it belongs to the family Fabaceae, this genus it has 72 species distributed in tropical regions of America and West Africa. In Brazil there are 16 endemic species, highlighting: Copaifera officinalis L., Copaifera reticulata Ducke, Copaifera multijuga Hayne, Copaifera confertiflora Benth., Copaifera langsdorffi Desf., Copaifera coriacea Mart. and Copaifera cearensis Huber ex Ducke, as the most studied. Of The trunk of Copaiferas extracted an oil-resin which is attributed anti-inflammatory actions, antimicrobial, healing ulcers and wounds in general. In the chemical composition of copaiba oil-resin stand out a volatile fraction mainly composed of sesquiterpene and sesquiterpene hydrocarbons and oxygenates a resinous fraction consisting of diterpene acids. The lack of effective parameters to characterize and therefore realize the quality control, linked to the intrinsic chemical variability of oil-resin undertake the commercialization of this raw material for pharmaceutical industry. Among the most studied species, the Copaifera multijuga Hayne, known as copaíba, mari mari, purple copaíba, is used for its anti-inflammatory properties and was the subject of this study this work. This study aimed to characterize oils-resins of C. multijuga through physical and chemical methods, aiming at quality control parameters. The Chapter 1 presents the chemical variability of the essential oil obtained from 11 specimens of oil-resin of C.multijuga collected in Santarém / Pará, analyzed by GC-MS; analysis of physical parameters (density, refractive index and viscosity) and chemical (identification and quantification of β-caryophyllene marker HPLC) in the oils-resins samples, essential oil analysis from oil-resin as well as the isolation and identification of diterpenes in a sample oil-resin of C. multijuga. The density and the refractive index remained constant while the viscosity ranged between specimens. The β-caryophyllene content identified and quantified by HPLC ranged from 22.4 to 75.1%. In the essential oil, the major compounds were β-caryophyllene, the α-humuleno and multivariate statistical analyzes grouped the 11 specimens in two clusters in relation to compounds, δ-elemene, α-copaene, β-caryophyllene, α-humuleno, trans-cadina-1(6),4-diene and trans-4-muurola(14),5-diene. Statistical analysis realized out showed a high chemical variability between individuals of the same species of C. multijuga even the samples have been collected close to each other and in the same period of year. The diterpenes isolates of oil-resin of C. multijuga were the copalic acid, 3-hydroxy-copalic, 3-acetoxy-copalic and ent-agático. / O gênero Copaifera pertence à família Fabaceae e possui 72 espécies distribuídas em regiões de clima tropical da América e África Ocidental. No Brasil existem 16 espécies endêmicas, destacando-se pela maior ocorrência: Copaifera officinalis L., Copaifera reticulata Ducke, Copaifera multijuga Hayne, Copaifera confertiflora Benth., Copaifera langsdorffi Desf., Copaifera coriacea Mart. e Copaifera cearensis Huber ex Ducke. Do tronco das Copaiferas se extrai um óleo-resina a qual se atribuí ações anti-inflamatória, antimicrobiana, cicatrizante de úlceras e feridas em geral. Na composição química do óleo-resina de copaíba destacam-se uma fração volátil composta principalmente por hidrocarbonetos sesquiterpênicos e sesquiterpenos oxigenados e uma fração resinosa composta por diterpenos ácidos. A carência de parâmetros eficazes para caracterizar e, por conseguinte realizar o controle de qualidade, atrelado à variabilidade química intrínseca do óleo-resina comprometem a comercialização dessa matéria-prima para indústria farmacêutica. Dentre as espécies mais estudadas, a Copaifera multijuga Hayne, conhecida como copaíba, mari mari, copaíba roxa, é utilizada pelas suas propriedades anti-inflamatórias e foi objeto desse estudo. Este trabalho teve como objetivos caracaterizar óleos-resinas de C. multijuga por métodos físicos e químicos, visando parâmetros que possam ser utilizados no controle de qualidade. O capítulo 1 apresenta as variabilidade química do óleo essencial obtido do óleo-resina de 11 espécimes de C. multijuga coletados em Santarém/Pará, analisados por CG-EM; a análise de parâmetros físicos (densidade, índice de refração e viscosidade) e químicos (identificação e quantificação do marcador β-cariofileno por CLAE) bem como análise do óleo essencial, o isolamento e identificação de diterpenos de uma amostra de óleo-resina de C. multijuga. A densidade e o índice de refração se mantiveram constantes enquanto que a viscosidade variou entre os espécimes. O teor de β-cariofileno identificado e quantificado por CLAE variou de 22,4 a 75,1%. No óleo essencial, os compostos majoritários foram o β-cariofileno, o α-humuleno e as análises estatísticas multivariadas agruparam os 11 espécimes em dois clusters em relação aos compostos δ-elemeno, α-copaeno, β-cariofileno, α-humuleno, trans-cadina-1(6),4-dieno, trans-muurola-4(14),5-dieno. As análises estatísticas realizadas mostraram uma alta variabilidade química entre indivíduos da mesma espécie de C. multijuga, mesmo as amostras tendo sido coletadas próximas uma das outras e na mesma época do ano. Os diterpenos isolados do óleo-resina de C. multiuga foram o ácido copálico, 3-hidróxi-copálico, o 3-acetóxi-copálico e o ent-agático.
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Desenvolvimento, caracteriza??o f?sico-qu?mica e atividade anti-inflamat?ria in vivo de complexos de inclus?o do ?leo-resina de Copaifera multijuga Hayne em ciclodextrinasPinheiro, Jonas Gabriel de Oliveira 31 March 2017 (has links)
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Previous issue date: 2017-03-31 / As ?rvores da esp?cie Copaifera multijuga Hayne crescem abundantemente na regi?o da Amaz?nia, apresentando grande visibilidade por seu ?leo-resina, que apresenta atividade anti-inflamat?ria. A forma??o de complexo de inclus?o (CI) com a ciclodextrina (CD) tem sido aplicada como alternativa para resolver algumas limita??es que os ?leos tem em comum, principalmente a baixa solubilidade em ambientes aquosos. Ent?o, o objetivo deste trabalho foi desenvolver CI?s do ?leo-resina de Copaifera multijuga (OCM) com a ?-ciclodextrina (?CD) e com a hidroxipropil-?-ciclodextrina (HP?CD) e avaliar a atividade anti-inflamat?ria deles. Inicialmente, foram realizados estudos te?ricos computacionais nos quais foram calculadas as energias de intera??o entre a ?CD e o ?-cariofileno (?CF), composto mais abundante do OCM. Em seguida, foram preparados os CI?s com ?CD e HP?CD pelos m?todos da mistura f?sica (MF), malaxagem (MAL) e co-precipita??o (CP). Foi realizada a caracteriza??o f?sico-qu?mica dos CI?s por espectroscopia de absor??o na regi?o do infravermelho com transformada Fourier (FTIR), microscopia eletr?nica de varredura (MEV), difra??o de raios X pelo m?todo do p? (DRX), an?lise termogravim?trica (TG) e calorimetria explorat?ria diferencial (DSC). Por fim, os CI?s de ?CD e HP?CD foram comparadas em rela??o ? suas atividades anti-inflamat?rias com o OCM puro. Os estudos te?ricos computacionais mostraram valores energ?ticos de -20,8 kcal?mol-1 e -17,0 kcal?mol-1 da complexa??o com a face menor e com a face maior do ?CF, respectivamente, entrando pela cavidade maior da ?CD. Pelo FTIR, foi poss?vel observar que ocorreu a intera??o entre a ?CD e o OCM por MAL e CP, e entre a HP?CD e o OCM, pelo CP. Na MEV, na DRX e na TG, foi poss?vel concluir que houve intera??o entre a ?CD e o OCM por MAL e CP. No caso da DSC foi observado que ocorreu intera??o entre a ?CD e o OCM e entre a HP?CD e o OCM pelos dois m?todos. O OCM e os CI?s de ?CD e de HP?CD (preparados por CP) mostraram evidente atividades anti-inflamat?rias pela diminui??o do edema de pata, nos n?veis de nitrito e da atividade da enzima mieloperoxidase, evidenciando que os CI?s do OCM com a ?CD e a HP?CD mantiveram a atividade anti-inflamat?ria do OCM. / Copaifera multijuga Hayne trees grows abundantly in Amazon region, presenting wide visibility for its oleoresin, which shows anti-inflammatory activity. The inclusion complex (IC) formation with cyclodextrin (CD) has been applied as alternative to solve some limitations that oils have in common, principally the poor aqueous solubility. Thus, this work aimed the ICs development of Copaifera multijuga oleoresin (CMO) with ?-cyclodextrin (?CD) and with hydroxypropyl-?-cyclodextrin (HP?CD) and evaluating of its anti-inflammatory activities. Initially, it were realized computational theoretical studies, in which were calculated the interaction energies between ?CD e o ?-caryophyllene (?CP), most abundant compound in CMO. Next, it were prepared ?CD and HP?CD IC?s by physical mixture, kneading method (KND) and slurry method (SL). ICs physical-chemical characterization was realized by Fourier transform infrared absorption region spectroscopy (FTIR), scanning electronic microscopy (SEM), powder X-ray diffraction (XRD), thermogravimetric analysis (TGA) and differential scanning calorimetry (DSC). Finally, ?CD and HP?CD IC?s were compared to pure CMO, in relation to its anti-inflammatory activity. Computational theoretical studies showed energetic values of -20.8 kcal?mol-1 and -17.0 kcal?mol-1 of complexation with ?CP minor and lager face, respectively, entering through the ?CD larger cavity side. In FTIR, it was possible observing that occurred interaction between ?CD and CMO by KND and SL, and between HP?CD and CMO by SL. In SEM, in XRD and in TGA, it was possible conclude that there was interaction between ?CD and CMO by KND and SL. In DSC case, it was observed that occurred interaction between ?CD and CMO and between HP?CD and CMO by KND and SL. CMO and ?CD and HP?CD ICs showed evident anti-inflammatory activity by paw edema, nitrite concentration and myeloperoxidase activity decreasing, evidencing that ICs of CMO with ?CD and HP?CD, which keeping the CMO anti-inflammatory activity.
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