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Caracterização eletroquímica de colóides magnéticos visando a aplicações nanotecnológicas nanobiotecnológicasFerreira, Marcelo de Ataíde January 2008 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Química, 2008. / Submitted by Jaqueline Ferreira de Souza (jaquefs.braz@gmail.com) on 2009-09-16T17:32:15Z
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Previous issue date: 2008 / Fluidos magnéticos de dupla camada elétrica (EDL-MF) são dispersões coloidais estáveis de nanopartículas de ferrita do tipo espinélio dispersas em água. A estabilidade termodinâmica é adquirida pela introdução de forças repulsivas eletrostáticas entre as partículas ao balanço de forças atrativas dipolar magnética e de van der Walls, com o intuito de se evitarem fenômenos de aglomeração.Recentemente, o Grupo de Fluidos Complexos da Universidade de Brasília (GFC–UnB) evidenciou, através de titulações condutimétricas e potenciométricas simultâneas, que as partículas de EDL-MF se comportam como um sistema ácido/básico diprótico (Two-pK Model) em meio aquoso, demonstrando três tipos de sítios superficiais. Os sítios carregados positivamente são encontrados em meio ácido e os carregados negativamente em meio básico, ocorrendo estabilidade apenas nas faixas: 3,5 pH 10,5. Esse estudo foi viável graças a eterminação da densidade de carga superficial (DCS) das partículas e da determinação das
constantes termodinâmicas para esses sistemas, ambos obtidos experimentalmente
a partir das análises das curvas simultâneas.Visando tampão fisiológico, faz-se necessário colóides magnéticos estáveis em meio fisiológico. Para isso, fluidos magnéticos funcionalizados (F-MF) são produzidos a partir de EDL-MF convencionais através da quimiossorção dos ligantes apropriados nos sítios ácidos das partículas. Neste trabalho serão utilizadas dispersões coloidais de nanopartículas de ferrita de cobalto funcionalizadas com íons tartarato com o objetivo principal de aplicar as titulações condutimétricas e
potenciométricas simultâneas na resolução do sistema ácido/base monoprótico (One
pK Model). O alvo desse trabalho é descrever, quantitativamente, a pH dependência
da DCS para os F-MF e comparar esses resultados às novas medidas realizadas
para os EDL-MF, além de compreender quantitativamente as observações empíricas
em termos de estabilidade já publicadas na literatura. Para tal, serão apresentados
toda a metodologia descrita para os dois sistemas trabalhados, gráficos de pH
dependência com a DCS, além de diagramas de especiação que revelam a existência ou coexistência das espécies estáveis em dispersão em determinada faixa de pH. _________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Electric Double Layered Magnetic Fluids (EDL-MF) are stable colloidal dispersions of spinel ferrite type nanoparticles in water medium. The thermodynamic stability is achieved by balancing the van der Waals and magnetic dipolar attractions with the introduction of repulsive electrostatic interactions between particles in order to avoid the agglomeration phenomena. Recently, the Complex Fluids Group from University of Brasilia (GFC-UnB) proved by simultaneous potentiometric and conductimetric titrations, that EDL-MF particles behave like a diprotic acid/base system (Two-pK Model) in water medium, showing three types of surface sites. The positively charged sites are found in acid medium and the negatively charged in alkaline medium, occurring stability only in the following pH ranges: 3.5 _ pH _ 10.5. This study was feasible due to the determination of the particles’ surface charge density (SCD) and also the determination of those systems’ thermodynamic constants, both experimentally obtained through the simultaneous analysis of the curves. For physiologic buffering, it is necessary the synthesis of magnetic colloids that are stable in physiological medium. For this reason, functionalized magnetic fluids (F-MF) are produced from conventional EDL-MF through the hemoadsorsion of appropriate ligands in the particles’ acidic sites. In this work will be used colloidal dispersions of cobalt ferrite nanoparticles with tartrate-functionalized ions to implement the simultaneous potentiometric and conductimetric titrations in the monoprotic acid / base (One pK Model) system resolution. This work main goal is to describe, quantitatively, the pH dependency of SCD for the F-MF and compare these results to the new measures taken for the EDL-MF in order to, quantitatively, understand the empirical observations in terms of stability that were already published in the literature. To do this, will be presented the described methodology for the two used systems, pH dependency plots with the SCD, as well as speciation diagrams that reveal the existence or coexistence of stable species in dispersion within a certain range of pH.
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Caracterização e avaliação da citotoxidade de nanopartículas de ouro cobertas com citrato / Caracterization and cytotoxicity avaliation of citrate coated goldSantos, Antonio Djalma 27 August 2015 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Nanociência e Nanobiotecnologia, 2015. / Submitted by Tania Milca Carvalho Malheiros (tania@bce.unb.br) on 2015-11-26T17:16:16Z
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2015_AntonioDjalmaSantos.pdf: 835281 bytes, checksum: a35fbbfce0d7a7067165e1f99d4917b3 (MD5) / Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2015-12-23T14:04:11Z (GMT) No. of bitstreams: 1
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2015_AntonioDjalmaSantos.pdf: 835281 bytes, checksum: a35fbbfce0d7a7067165e1f99d4917b3 (MD5) / Apesar de seu conhecimento há milênios, a utilização de nanopartículas de ouro (AuNPs) na medicina, principalmente em estudos de diagnósticos e terapias, tais como: agente de entrega de droga e de contraste em imagenamento, terapia gênica, entre outros, têm se desenvolvido nos últimos anos. Os nanomateriais podem ser altamente reativos e desestabilizar a homeostase dos sistemas biológicos, devido a seu tamanho, forma, carga, composição e cobertura estabilizante. Assim, considerando a utilização de AuNPs na nanomedicina, este trabalho estudou AuNPs recobertas com citrato, quanto as suas características físico-químicas, estabilidade e toxicidade. Os resultados mostram que sua síntese foi eficiente na produção de nanopartículas polidispersas e esférica, com diâmetro médio de 35 nm, carga superficial negativa e diâmetro hidrodinâmico (DH) de 50 nm, único parâmetro que variou em função da temperatura de armazenamento, mantendo-se constante quando mantidas a 37 oC, porém houve uma aumento do DH quando estocadas a temperatura ambiente ou 4 °C, indicando agregação das mesmas. Exame macroscópico comprovou a precipitação das mesmas. É possível que esta agregação ocorra principalmente em função da diminuição do movimento browniano das partículas, que leva ao aumento da interação e reação interpartículas e sua consequente perda de estabilidade. Os testes citotoxicidade em fibroblastos murinos (NIH-3T3) demonstraram que a incubação com AuNPs por até cinco dias não alterou o índice celular, independentemente da concentração utilizada. Por outro lado, após este período, para concentração de ouro de 35 μg/mL, houve queda no índice celular, indicando a morte das células e/ou efeito citostático por parte das AuNPs. Os resultados indicam que as AuNPs recobertas com citrato são estáveis, porém apresentam citotoxicidade tempo e dose dependente. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Use of gold nanoparticles (AuNPs) in medicine particularly in diagnostic studies and therapies, such as drug delivery and imaging contrast agents, gene therapy, among others, have been developed in the last years. Nanomaterials can be highly reactive and destabilize homeostasis of biological systems due to its size, shape, charge, composition and stabilizing cover. Thus, considering use of AuNPs in nanomedicine, this paper studied AuNPs coated with citrate, as its physical and chemical characteristics, stability and toxicity. Results show that synthesis was efficient in producing polydisperse and spherical nanoparticles with average diameter of 35 nm, a negative surface charge and hydrodynamic diameter (DH) of 50 nm. Except for DH, no other parameters varied depending on storage temperature. In fact DH was constant when kept constantly at 37 °C, but there was an increase in DH when stored at room temperature or 4 °C, indicating their aggregation. Macroscopic examination proved the precipitation thereof. It is possible that this aggregation occurs mainly due to decrease in the Brownian motion of particles, which leads to increased interparticle interaction and reaction, and consequent loss of stability. Testing cytotoxicity in murine fibroblasts (NIH-3T3) demonstrated that incubation with AuNPs for up to five days did not affect cell content, regardless of concentration used. Moreover, after this period, for gold concentration of 35 μg/mL, there was a drop in Cell Index, suggesting cell death and/or cytostatic effect by the AuNPs. Results indicate that AuNPs coated with sodium citrate are stable but have time and dose-dependent cytotoxicity.
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Avaliação da biocompatibilidade de fluido magnético à base de nanopartículas de maghemita recobertas por polifosfato em camundongosCorrêa, Flávia Arruda Portilho January 2007 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2007. / Submitted by Fernanda Weschenfelder (nandaweschenfelder@gmail.com) on 2009-12-01T16:30:12Z
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Previous issue date: 2007 / A nanotecnologia representa, atualmente, uma área de interesse crescente. Dentre os materiais nanoestruturados que vêm sendo desenvolvidas, as nanopartículas magnéticas (NPM) surgem como proposta promissora para várias aplicações na área biomédica como, por exemplo, magnetohipertermia para tratamentos de tumores, entrega de drogas alvo-específico, agente de contraste para a imagem por ressonância magnética. Considerando a necessidade de testar novos materiais antes de seu emprego clínico, o presente trabalho tem como objetivo avaliar a biocompatibilidade (toxicidade e genotoxicidade) de fluido magnético à base de nanopartículas de maghemita recobertas com polifosfato (FMF), em duas concentrações diferentes (0,7×1015 partículas em 50μL nomeada FMF-1 e 1,4×1015 partículas em 100μL, a FMF-2), por meio de testes de viabilidade de células peritoneais, citometria de sangue periférico, ensaio de micronúcleo (MN) e análise morfológica, em camundongos fêmeas Swiss. A amostra FMF, no período que abrangeu de 30 minutos a sete dias, não afetou a viabilidade de células peritoneais, apresentou brando e temporário processo inflamatório (análise citométrica), ausência de genotoxicidade e baixa citotoxicidade nas células da medula óssea (ensaio de MN). Estudos morfológicos revelaram, em microscópio de luz, a presença de aglomerados de NPM nos três órgãos analisados (pulmão, fígado e baço). Ainda assim, não foram observadas alterações morfológicas no baço, e apenas ligeiro infiltrado celular no fígado (também observado nos controles) e pulmão, órgão em que também foi encontrado espessamento temporário dos septos alveolares. A toxicidade induzida pela amostra FMF é tempo e dose dependente. Os resultados obtidos permitem concluir que FMF possui biocompatibilidade adequada para aplicações biomédicas, como magnetohipertermia e sistemas entregadores de drogas. _____________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Nowadays, nanotechnology represents a broad area of increasing interest. Several kinds of nanostructured materials have been synthesized. Among them magnetic nanoparticles (MNPs) represent a promising class to be used in several biomedical applications, such as magnetohyperthermia for tumor therapy, target-specific drug delivery, and contrast agents for magnetic resonance images. New materials have to be pre-clinical tested before they can be used for clinical trials. Therefore, the aim of this work was to evaluate the biocompatibility (toxicity and genotoxicity) of a new magnetic sample based on maghemite nanoparticles coated with polyphosphate (FMF), using two different concentrations (0.7×1015 particle in 50μL named FMF-1 and 1.4×1015 particle in 100μL named FMF-2). FMF sample was tested using female Swiss mice through viability of peritoneal cells, cytometry of blood cells, micronucleus assay (MN), and morphological analysis. FMF sample effects were investigated from 30 minutes until 7 days after the administration. The viability of peritoneal cells was not affected. Light and temporary inflammatory process (cytometry analysis), absence of genotoxicity, and a slight cytotoxicity of bone marrow cells (MN assay) were found. Morphological studies performed under light microscope showed the presence of MNP clusters in three investigated organs: liver, lung, and spleen. Nevertheless, despite the observation of MNP clusters, no morphological alterations were found in the spleen, and only a slight cell infiltration was found in the liver (also observed in the control animals) and lungs. In was also found in the lungs a temporary alveolar septum enlargement. All the toxicity effects of FMF are time and doses dependent. The results allow concluding that the FMF sample presents biocompatibility adequate to be used in biomedical applications, such as magnetohyperthermia and drug delivery systems.
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Síntese, caracterização, estabilidade e efeitos biológicos in vitro de nanopartícula magnética associada a Anfotericina BIocca, Diêgo Cesar 14 March 2013 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Animal, 2013. / Submitted by Luiza Silva Almeida (luizaalmeida@bce.unb.br) on 2013-07-22T15:35:27Z
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2013_DiêgoCesarIocca.pdf: 3079203 bytes, checksum: 986645b9a824ceb81b3fdcc88729e02b (MD5) / Approved for entry into archive by Leandro Silva Borges(leandroborges@bce.unb.br) on 2013-07-23T17:07:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1
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2013_DiêgoCesarIocca.pdf: 3079203 bytes, checksum: 986645b9a824ceb81b3fdcc88729e02b (MD5) / A nanotecnologia proporcionou o aumento de pesquisas em sistemas de entrega de drogas. Entre eles, os fluidos magnéticos (FM) mostram várias vantagens, tais como biocompatibilidade e biodegradação. FM são constituídos por nanopartículas de óxido de ferro superparamagnéticas em suspensão num fluido carreador. Nanopartículas magnéticas (NPMs) de maguemita estão entre as mais utilizadas em aplicações médicas. Anfotericina B (AmB) é o agente antifúngico mais utilizado no tratamento de casos graves da Paracoccidioidomycosis (PCM), a qual é uma micose sistêmica nativa na América Latina, tendo como agente etiológico é o fungo termo- dimórfico Paracoccidioides brasiliensis. Infelizmente, a AmB causa graves efeitos adversos (principalmente nefrotoxicidade) após administração intravenosa, limitando assim seu uso clínico. A fim de reduzir os efeitos adversos da AmB, foram sintetizadas nanopartículas de maguemita estabilizadas com ácido láurico (BCL) e conjugadas com anfotericina B (BCL-AmB). O presente estudo mostra a caracterização, estabilidade e ensaios biológicos de BCL-AmB. A atividade antifúngica de BCL-AmB foi determinada pela Concentração Inibitória Mínima - MIC (do inglês -Minimum Inhibitory Concentracion) contra o P. brasiliensis. Citoxicidade, avaliada pelo ensaio MTT, e genotoxicidade, analisada pela fragmentação de DNA em citometro de fluxo e ensaio cometa, foram determinadas em fibroblastos murinos (NIH-3T3) e em células renais de porco (LLC-Pk1). Os ensaios de toxicidade foram realizados em dois tempos experimentais (24 e 48 horas). O diâmetro médio das nanopartículas de maguemita foi estimado por difração de raio-X e por microscopia eletrônica de transmissão, apresentando valores de 13 e 9 nm, respectivamente. Analises por espectroscopia na região do infravermelho mostraram a presença do ácido láurico associado à nanopartícula e confirmaram a presença da AmB. O diâmetro hidrodinâmico (DH) de BCL-AmB e BCL, após a síntese, foi de 62 e 55 nm e o potencial zeta foi de -28 e -42 mV, respectivamente. BCL apresentou alta estabilidade em 240 dias, entretanto o DH de BCL-AmB aumentou neste período. BCL-AmB apresentou atividade antifúngica, com MIC de 1,25 µg/mL, enquanto o MIC da AmB livre foi de 1,0 µg/mL. BCL-AmB apresentou baixa toxicidade em células de mamíferos. Para as células NIH-3T3, a citotoxicidade de BCL-AmB foi menor que a citoxicidade da AmB livre em 24 horas, com CC50 de 20 e 6 µg/mL, respectivamente; enquanto que para as células LLC-Pk1, os valores da CC50 foram de 267 e 37 µg/mL, respectivamente. Similarmente, após 48 horas, a citotoxicidade de BCL-AmB ainda foi menor que a citoxicidade da AmB livre. Nas duas linhagens celulares utilizadas, a CC50 de BCL-AmB induziu menor fragmentação de DNA que a CC50 da AmB livre pelo ensaio cometa. Entretanto, pela citometria não ocorreram diferenças significativas entre todos os grupos. Portanto, os resultados observados sugerem que BCL-AmB poderá ser uma nova nanoferramenta no tratamento da PCM, uma vez que a AmB quando conjugada as nanopartículas manteve sua propriedade fungicida e apresentou baixos efeitos citotóxicos e genotóxicos. A nanoformulação BCL-AmB mostrou resultados promissores (in vitro), entretanto outros testes ainda serão necessários para verificar a eficiência do fármaco adsorvido e sua toxicidade in vivo. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Nanotechnology has dramatically increased the research on drug delivery systems. Among them, magnetic fluids (MF) have shown several advantages such as its biocompatibility and biodegradability. MF samples, consists of superparamagnetic iron oxide nanoparticles suspended in a carrier fluid. Maghemite is the most used magnetic nanoparticles (MNPs) in biological and medical applications. Amphotericin B (AmB) is still the polyene antifungal agent choice for the treatment of severe Paracoccidioidomycosis (PCM), which is a systemic mycosis native from Latin America. Its etiological agent is the dimorphic human pathogenic fungus Paracoccidioides brasiliensis. Unfortunately, AmB causes acute side effects (mainly urinary problems) following intravenous administration, which limits its clinical use. In order to reduce the side effects of AmB, maghemite-based magnetic fluid stabilized with bilayer of lauric acid (BCL) and conjugated with AmB (BCL-AmB) were developed. The present study reports on characterization, stability and biological assays of BCL-AmB. Antifungal activity of BCL-AmB was determined by MIC (Minimum Inhibitory Concentration) assay against P. brasiliensis. Citotoxicity, evaluated by MTT assay, and genotoxicity, analysed by DNA fragmentation in flow cytometer and comet assays, were determined against murine fibroblast (NIH-3T3) and pig kidney (LLC-Pk1) cells line. Toxicity assays was evaluated at two different times (24 and 48 hours). The maghemite nanoparticles average size was estimated by X-ray diffraction and transmission electron microscopy showing value of 13 and 9 nm, respectively. Infra Red analysis showed the presence of lauric acid associated to the nanoparticles and confirmed the presence of Amphotericin B. Hydrodynamic diameters (HD) of BCL-AmB and BCL after synthesis was 62 and 55 nm and zeta potential was -28 and -42 mV, respectively. BCL has high stability on 240 days, however the HD of BCL-AmB increased at the same period. BCL-AmB presented antifungal activity, with MIC of 1.25 µg/mL, whereas the free AmB showed MIC of 1.0 µg/mL. BCL-AmB showed not toxicity for mammalian cells. For NIH-3T3 cells, the citotoxicity of BCL-AmB was lower than free AmB after 24h, with CC50 values of 20 and 6 µg/mL, respectively; whereas for LLC-Pk1 cells, the values were 267 and 37 µg/mL, respectively. Similarly, after 48h, the citotoxicity of BCL-AmB was still lower than free AmB. In both cells line, CC50 of BCL-AmB induced less DNA fragmentation than the CC50 of AmB by comet assay. However, by flow citometer assay, there is no difference between all groups. Hence, the results observed suggest that BCL-AmB may be a new nanotool of treatment for PCM, once the AmB in this nanoformulation is still antifungical and showed lower citotoxicity and genotoxicity effects. There are promising results in this model (in vitro) but tests are still needed to verify their in vivo mechanisms of toxicity.
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Investigação das condições de funcionalização de nanopartículas magnéticas (CoFe2O4) com ácidos aminocarboxílicosSilva, Atailson Oliveira da 05 March 2015 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Programa de Pós-Graduação em Nanociência e Nanobiotecnologia, 2015. / Submitted by Cristiane Mendes (mcristianem@gmail.com) on 2015-07-02T17:02:29Z
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2015_AtailsonOliveiraDaSilva.pdf: 5788172 bytes, checksum: d27bd93c3ca665fe3dc648a742c9f427 (MD5) / A nanociência se tornou uma das áreas científicas de maior notabilidade no cenário mundial nas ultimas décadas. As propriedades diferenciadas de estruturas em escala nanométrica (10-9) tem despertado a atenção de cientistas de diversos campos de pesquisa. Dentre os materiais que fazem parte deste novo cenário estão as nanopartículas magnéticas, as quais apresentam propriedades únicas quando submetidas a um campo magnético externo. O superparamagnetismo apresentado por estas partículas tem despertado a atenção de áreas estratégicas como eletrônica, energia, meio ambiente e biomedicina. Este trabalho destaca as potencialidades que estas nanoestruturas apresentam para aplicações Nanobiotecnológicas quando funcionalizadas com ligantes biocompatíveis. Quando imersas em um líquido carreador estas nanopartículas formam um coloide denominado ferrofluido magnético, material conhecido há algumas décadas que une as propriedades magnéticas da nanopartícula com as propriedades de fluidez dos líquidos. A compreensão dos mecanismos de estabilidade destes sistemas é uma primeira etapa necessária para modelar a quimiossorção de moléculas de interesse. Utilizando titulações potenciométricas e condutimétricas simultâneas nos sistemas coloidais magnéticos obtêm-se a pH-dependência da densidade superficial de carga e os valores dos pKs correspondentes aos sítios superficiais. De posse de tal informação foram escolhidos quatro ácidos aminocarboxílicos quimicamente capazes de complexar a superfície da nanopartícula. Utilizando diagramas de especiação foi possível obter as condições de pH adequadas para tal procedimento. O cálculo de área superficial disponível das partículas e a utilização de cross section calculado por simulação computacional permite se obter a relação entre a quantidade de ligantes e o número de camadas possivelmente formada. Medidas de espectroscopia de absorção no infravermelho com transformada de Fourier (FTIR) e XPS (X-Ray Photoelectron Spectroscopy) acompanhadas de medidas de potencial zeta () são utilizadas no estudo da complexação superficial de nanopartículas magnéticas de ferrita de cobalto (CoFe2O4) sintetizadas por hidrólise alcalina. / Nanoscience has become one of the scientific areas of greater notability on the world stage in recent decades. The unique properties of nanoscale (10-9) structures has attracted the attention of scientists from various fields of research. Among the materials that make up this new scenario are magnetic nanoparticles, which have unique properties when subjected to an external magnetic field. The superparamagnetism presented by these particles has attracted the attention of strategic areas such as electronics, energy, environment and biomedical. This paper highlights the potential that these nanostructures have to nanobiotechnological applications when functionalized biocompatible binders. When immersed in a liquid carrier such nanoparticles form a colloid so-called ferrofluid magnetic material known for some decades that unite the magnetic properties of the nanoparticles with the liquid flow properties. Understanding these mechanisms of stability system is a necessary step to model the possibility of chemisorption of molecules of interest. Using potentiometric and conductimetric titrations in simultaneous magnetic colloidal systems obtained by the pH-dependence of the surface charge density and pK values corresponding to the surface sites, in possession of this information was chosen four chemically aminocarboxylic acids capable of complexing the surface of the nanoparticle . Using speciation diagrams was obtain suitable pH conditions for such a procedure. The surface area available for calculation of particles and the use of cross-section calculated by computer simulation allows to obtain the relationship between the amount of binders and possibly the number of layers formed. Absorption spectroscopy measurements of the Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR) and XPS (X-Ray Photoelectron Spectroscopy) followed by zeta potential measurements () are used in the study of surface complexing magnetic cobalt ferrite nanoparticles (CoFe2O4) synthesized by alkaline hydrolysis.
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Elaboração de sistema sinérgico visando aplicações em nanobiotecnologia, baseado em microesferas de polímeros naturais contendo berberina e nanopartículas de ouro associada a doxorrubicinaPinheiro, Wagner Moreira 25 May 2015 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Programa de Pós-Graduação em Nanociência e Nanobiotecnologia, 2015. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2015-12-11T17:37:17Z
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2015_WagnerMoreiraPinheiro.pdf: 4778140 bytes, checksum: 8910c0c4d4de86dbdc512aec3acd9cda (MD5) / O estudo de novos fármacos e a otimização dos processos de biodistibuição, tem sido alvo de diversos estudos em nanobiotecnologia, com essa abordagem o presente trabalho tem como principal objetivo interligar o sistema microscópio, advindo de polímeros naturais e de berberina, que formaram microesferas, com nanopartículas de ouro obtidas a partir da metodologia modificada de Turchevich. No sistema de nanopartículas de ouro foi associado antibiótico citostático doxorrubicina, sendo esta associação realizada por duas metodologias: associação eletrostática junto as cargas de íons citrato na superfície da partícula de ouro; ou por acoplamento EDC/NHS do fármaco a superfície modificada das nanopartículas de ouro pelo THPAL. Os sistemas micro e nanoestruturados foram avaliados frente a características físico-químicos tais como: distribuição de tamanho, potencial zeta, analises térmicas, análises espectroscópicas de absorção na região Uv-vis, infravermelho com transformada de Fourie e análises de estrutura morfológica utilizando microscopia eletrônica de transmissão e varredura. Os resultados obtidos com ambos os sistemas micro e nanoestruturado isoladamente e associados mostraram que os sistemas mistos obtidos são promissores para o carreamento de fármacos. As microesferas apresentaram diâmetro médio de 0,65 mm quando secas e entumescidas de 0,85 mm, com parâmetros físico-químicos medidos (0,25 ± 0,05) fração de água retida, (30,15 ±10,6%) percentual de hidratação, (24,55±5,3%) inchaço e 1,25 ± 0,05 difusão. As análises térmicas dos sistemas mistos contendo ou não AuNPs mostraram ter transição vítrea no geral até a temperatura de 80ºC e que há uma diferença entre os sistemas que contem AuNP quanto a perda de massa (TGA). / The study of new drugs and the optimization of biodistribution processes, has been the subject of several studies in nanobiotechnology, with this approach the present work aims to link the microscope system, arising from natural polymers and berberine, which formed microspheres with gold nanoparticles obtained from Tuchevich methodology. In the gold nanoparticles system has been associated antineoplastic antibiotic, doxorubicin citrate particles and particles coupled to THPAL and covalently linked to doxorubicin. Were preparation of the systems evaluated the physicochemical and morphological parameters, such as, size, zeta potential, simultaneous differential thermal and thermogravimetric, electronic absorption spectra in the UV-vis region, FTIR transform infrared Fourier electronic microscopy scanning and transmission. The results obtained with both micro- and nanostructured systems and associated alone showed that the obtained mixed systems are promising for the carrying of drugs. The microspheres had an average size of 0.65 mm and 0.85mm, with measured physical and chemical parameters (0.25 ± 0.05) retained water fraction (30.15 ± 10.6%) hydration percentage (24.55 ± 5.3%) swelling and 1.25 ± 0.05 diffusion. The thermal analysis of mixed systems with or without AuNPs shown to have glass transition in general until the temperature of 80ºC and that there is a difference between the systems containing AuNP as the weight loss (TGA).
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Perfil de metilação global de DNA em células MCF-7 e MCF-10A após exposição transiente de nanopartículas de maghemita funcionalizadas com citratoBonadio, Raphael Severino 29 August 2014 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Pós-Graduação em Nanociências e Nanobiotecnologia, 2014. / Submitted by Ana Cristina Barbosa da Silva (annabds@hotmail.com) on 2014-11-13T17:36:35Z
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2014_RaphaelSeverinoBonadio.pdf: 1019534 bytes, checksum: 4151703aea9e28a2d016a232274697b0 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2014-11-14T11:24:09Z (GMT) No. of bitstreams: 1
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2014_RaphaelSeverinoBonadio.pdf: 1019534 bytes, checksum: 4151703aea9e28a2d016a232274697b0 (MD5) / Introdução: Diversos estudos reportam alterações na expressão gênica em resposta àexposição de células à nanomateriais, mas até o presente momento não há nenhumestudo sobre a toxicidade a nível epigenético causada por nanoestruturas e seus efeitosem sucessivas gerações celulares. Portanto, torna-se necessário estudar esses fenômenosa fim de contribuir no desenvolvimento de nanopartículas mais adequadas paraaplicações biológicas. Objetivo: Avaliar o perfil de metilação global de DNA emcélulas MCF-7 e MCF-10A em cultivo após a cessão da exposição de nanopartículas demaghemita funcionalizadas com citrato. Materiais e métodos: As NPM-citrato foramsintetizadas pelo método de coprecipitação de Fe (II) e Fe (III) e adição direta de ácidocítrico. As caracterizações das NPM-citrato foram realizadas por microscopia (MET,HRTEM, MEV e AFM) e por diâmetro hidrodinâmico e potencial zeta. Para detectar asconcentrações sub-letais IC-10 e IC-20, foram realizados a exclusão de viabilidade porcontagem de células coradas com Azul Tripan e o ensaio de citotoxicidade peladetecção da Lactato Desidrogenase (LDH). O ensaio de proliferação celular foirealizado no sistema xCELLigence™ (Roche/ACEA). A detecção de ferro intracelularfoi realizada pelo ensaio do Azul da Prússia. O perfil de metilação global de DNA foirealizado por ensaio colorimétrico. A expressão das DNMTs foi realizada por qRTPCR.Resultados: As NPM-citrato causaram efeito citostático em células MCF-7 eMCF-10A quando administradas nas concentrações 30 e 60μgFe/mL durante 24h. Apósa cessão da exposição das NPM-citrato, verificou-se que a proliferação das célulasMCF-7 tratadas foi maior que das células não tratadas. Além disso, foi constatado queas NPM-citrato encontravam-se no interior das células durante todo o experimento e quehavia uma dinâmica de metilação de DNA, mesmo após a exposição transiente dasNPM-citrato. Também foram identificadas diferenças entre o acúmulo de transcritos deDNA metiltransferases. Discussão: Os nanomateriais possuem um risco intrínseco emaplicações biológicas, mesmo quando administrados em concentrações consideradasnão-tóxicas por meio de técnicas convencionais. Isso porque seus efeitos em sistemasbiológicos podem se estender a múltiplas gerações, mesmo durante exposiçãotransiente. Conclusão: As NPM-citrato promovem alterações significativas no perfil demetilação global de DNA em células MCF-7 e não promovem em MCF-10A e essefenômeno pode ser explorado para aplicações biomédicas futuras. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Introduction: Several studies have reported changes in gene expression in response toexposure of cells to nanomaterials, but to date there is no study on the toxicity causedby nanostructures at epigenetic level and their effects in successive cell generations.Therefore, it becomes necessary to study these phenomena in order to contribute to thedevelopment of more appropriate nanoparticles for biological applications. Objective:To evaluate the profile of global DNA methylation in MCF-7 and MCF-10A cells inculture after cessation of exposure to maghemite nanoparticles functionalized with citricacid. Methods: The NPM-citrate were synthesized by coprecipitation of Fe (II) and Fe(III) method and direct addition of citric acid. The characterizations of NPM-citratewere performed by microscopy (TEM, HRTEM, SEM and AFM) and by analysis of thehydrodynamic diameter and zeta potential. To detect the sub-lethal concentrations IC-10and IC-20, we performed the counting of the cells stained with Trypan Blue andcytotoxicity assay for detection of lactate dehydrogenase (LDH). The cell proliferationassay was performed in xCELLigence ™ (Roche / ACEA) system. Detection ofintracellular iron assay was performed by Prussian Blue. The profile global DNAmethylation was performed by colorimetric assay. The expression of DNMTs wasperformed by qRT-PCR. Results: NPM-citrate caused cytostatic effect on MCF-7 andMCF-10A cells when given at concentrations of 30 and 60μgFe/ml for 24h. After thetransfer of the NPM-citrate exposure, it was found that the proliferation of MCF-7treated cells was higher than untreated cells. Furthermore, it was found that the NPMcitrateis found inside the cells throughout the experiment and had a dynamic DNAmethylation even after transient exposure of NPM-citrate. Differences between thetranscript accumulation of DNA methyltransferases were also identified. Discussion:The combination of nanotechnology and epigenetics is still poorly understood becausethese are frontier areas of knowledge. Thus, nanomaterials have an intrinsic risk inbiological applications, even when administered in non-toxic concentrations consideredby conventional techniques. This is because their effects on biological systems can beextended to multiple generations, even during transient exposure. Conclusion: TheNPM-citrate promote significant changes in global DNA methylation in MCF-7 cellsand do not promote in MCF-10A and this phenomenon can be exploited for futurebiomedical applications.
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Múltiplas injeções de nanopartículas magnéticas a base de maguemita recobertas com ácidomeso -2,3- Dimercaptosuccínico em camundongos : biocompatibilidade e toxicidadeMoreira, Vanessa Carvalho 17 February 2012 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2012. / Submitted by Sabrina Silva de Macedo (sabrinamacedo@bce.unb.br) on 2012-07-11T14:16:20Z
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2012_VanessaCarvalhoMoreira.pdf: 10228696 bytes, checksum: 8be80b8cdf424d6c81e47b6c0ae89b9f (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Ferreira de Souza(jaquefs.braz@gmail.com) on 2012-07-18T12:07:40Z (GMT) No. of bitstreams: 1
2012_VanessaCarvalhoMoreira.pdf: 10228696 bytes, checksum: 8be80b8cdf424d6c81e47b6c0ae89b9f (MD5) / Made available in DSpace on 2012-07-18T12:07:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1
2012_VanessaCarvalhoMoreira.pdf: 10228696 bytes, checksum: 8be80b8cdf424d6c81e47b6c0ae89b9f (MD5) / A nanotecnologia representa, atualmente, uma área de grande interesse.Materiais nanoestruturados, como as nanopartículas magnéticas (NPMs) são uma ferramenta promissora para várias aplicações biomédicas como. por exemplo,sistemas entregadores de drogas, agente de contraste em imagem de tomografia computadorizada e ressonância magnética. No entanto, é necessário avaliar os efeitos causados por múltiplas administrações destas nanopartículas, para que estas possam se tornar uma ferramenta segura e amplamente utilizada. Desta forma, este trabalho tem o intuito de avaliar a biocompatibilidade e toxicidade de nanopartículas magnéticas a base de maguemita recobertas com ácido meso-2,3-dl mercaptosuccínico (NPMs-DMSA). Após múltiplas Injeções endovenosas, em camundongos Swiss macho. Para atingir este objetivo. 100 uL de NPMs-DMSA contendo cerca de 2,78x101E partículas/mL foram administrados a cada 15 dias até completar um período total de 45 dias, sendo eutanasiados 90 dias após o início da administração de NPMs-DMSA. Nos tempos de 30, 45, 60 e 90 dias os animais foram submetidos à microtomografia computadorizada. O tamanho e o potencial de carga de superfície das NPMs foram estudados e apresentaram diâmetro médio de8 nm e carga negativa (- 53.7 mV). A análise dos animais no microtomógrafo mostrou que as nanopartículas magnéticas não causaram alterações pulmonares visíveis e nem promoveram diferença significativa entre as densidades do pulmão. Após 90 dias do início da aplicação de múltiplas injeções de NPMs-DMSA testes hematológicos e bioquímicos realizados no sangue não mostraram alterações relevantes; a viabilidade de células da medula óssea e peritoneais não foi afetada ea análise histopatológica, por microscópio de luz, revelou a presença de aglomerados de NPMs no rim, pulmão, baço e fígado. Não foram observadas alterações morfológicas nestes órgãos, apenas pequenos nódulos linfocitários perivasculares no rim (não observado nos controles). Os resultados mostraram que múltiplas administrações de NPMs-DMSA não geraram danos ao organismo dos camundongos, sugerindo ser um material biocompatível e com potencial para aplicações biomédicas. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Nowadays, nanotechnology represents an area of increasing interest. Nanostructured materials, such as magnetic nanoparticles (MNPs) are a promissigtool for several biomedical applications, for example, drug delivery systems, contrast agent for tomography computed imaging and magnetic resonance. However, it is necessary to evaluate the effects caused by multiple administrations of the senanoparticles, so that they can become a safe and widely used. This way, this study aims to evaluate the biocompatibility and toxicity of maghemite based magneticnano particles coated with meso 2,3-dimercaptosuccinic acid (NPMs-DMSA), aftermultiple intravenous injections in male Swiss mice. 100 uL of NPMs-DMSA containing about 2,78x1015 particles/mL were administered every 15 days to complete a total period of 45 days. 90 days after the start of administration of NPMs-DMSA the animals were killed. In experimental times 30, 45. 60 e 90 days, the animals were submitted a microtomography analysis. The particle size and surface charge potencial of MNPs were determined. They presented a mean particle size of8 nm and a negative surface charge, as determined by measuring the zeta potencial (-53,7 mV). The microtomography analysis showed that the magnetic nanoparticlesdid not cause lung changes visible neither promoted significant difference between the densities of the lung. After 90 days of the beginning of administration of multiples injections of NPMs-DMSA hematological and biochemical blood tests showed no significant changes; the viability of bone marrow and peritoneal cells was not affected. Histological analysis showed the presence of clusters MNPs in the kidney,lung, spleen and liver. There were no morphological changes in these organs, onlysmall perivascular lymphocytic nodules in the kidney (not observed in controls). The results showed that multiple administration of NPMs-DMSA did not cause damage to the mice organism, suggesting being a biocompatible material with potential for biomedical applications.
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Potencial aplicação de nanoestruturas magnéticas contendo Selol no tratamento do câncer de pele e como contraste em exames de microtomografia computadorizadaAvelino, Lívia Carneiro Matos 18 December 2013 (has links)
Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Patologia Molecular, 2013. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2014-03-07T11:21:03Z
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2013_LiviaCarneiroMatosAvelino.pdf: 5223908 bytes, checksum: 608d1169ee0824a4d288853b632c6f3c (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2014-03-07T13:35:28Z (GMT) No. of bitstreams: 1
2013_LiviaCarneiroMatosAvelino.pdf: 5223908 bytes, checksum: 608d1169ee0824a4d288853b632c6f3c (MD5) / Made available in DSpace on 2014-03-07T13:35:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1
2013_LiviaCarneiroMatosAvelino.pdf: 5223908 bytes, checksum: 608d1169ee0824a4d288853b632c6f3c (MD5) / Nanopartículas magnéticas (NPM) representam ferramentas versáteis para a aplicação na área oncológica, uma vez que podem ser utilizadas como carreadores de medicamentos, instrumento para a magnetohipertermia (MHT) e como meio de contraste em exames de imagem. O objetivo principal deste trabalho foi investigar um novo fluido magnético, denominado FMS, que é constituído de nanopartículas de magnetita cobertas com bicamada de ácido láurico contendo Selol, um composto de baixa toxicidade e não mutagênico com importante ação antitumoral. Experimentos realizados para caracterização da amostra revelaram que FMS é composto de NPM esféricas com distribuição de tamanho monomodal, com diâmetro físico médio de 8,3 nm e com pouca variação do diâmetro hidrodinâmico ao longo do tempo. Medidas do potencial zeta ao longo do tempo evidenciaram NPM de carga negativa e extremamente estáveis por até 48 meses após seu preparo. Foi verificado, pelo ensaio de viabilidade celular por MTT, que FMS não foi tóxico para as células de melanoma da linhagem B16-F10 em concentrações até 75 μg Fe/mL. Foi mostrada também a capacidade dessas células tumorais em interiorizar as NPM, as quais foram encontradas no interior celular dentro de estruturas semelhantes a vesículas. Além disso, ensaios in vitro e in vivo foram realizados em equipamento de microtomografia computadorizada (microTC) para avaliar a capacidade de FMS ser um potencial meio de contraste neste tipo de imagem. Os testes in vitro revelaram que FMS possui densidade adequada para ser visualizada em imagens de microTC e os testes in vivo mostraram que FMS injetado diretamente no melanoma induzido nos camundongos permaneceu no tumor por até 72 h. Apesar da retenção tumoral prolongada, FMS não foi tóxico para os órgãos fígado, baço, rins, pulmões e cérebro, nem para o organismo como um todo, como visto nas análises histológicas, hematológicas e bioquímicas. Testes in vitro e in vivo demonstraram o potencial de aquecimento de FMS quando submetido a um campo magnético de frequência alternada. A amostra foi então testada para o tratamento do melanoma murino utilizando magnetohipertermia e os resultados dos pesos e volumes tumorais, percentual de necrose e exames hematológicos e bioquímicos foram promissores após 1 dia do término do tratamento. Em conjunto, os dados deste trabalho indicam que a amostra FMS apresenta grande potencial como estratégia terapêutica contra o câncer. ________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Magnetic nanoparticles (MNP) represent versatile tools for application in the oncologic field, especially when used as drug carriers, magnetic hyperthermia inducer and contrast improvement in imaging exams. The main goal of this study was to investigate a new magnetic fluid sample, named FMS, based on magnetite nanoparticles coated with lauric acid bilayer impregnated with Selol. Selol is a low toxic and non-mutagenic compound with an important antitumoral activity. In this work, FMS was characterized and tested for its ability to be used for a contrast agent in microcomputed tomography (microCT) imaging and for melanoma treatment using magnetic hyperthermia (MHT). Characterization assays revealed that FMS was composed by spherical MNP with monomodal size distribution, with an average physical diameter of 8.3 nm, and with little hydrodynamic diameter variation along time. Stability of FMS was also tested along time through zeta potential measurements and results highlighted negative charge MNP highly stable for up to 48 months after its preparation. Nanoparticles toxicity was evaluated by MTT viability cell assay and FMS was not toxic for melanoma cell line B16-F10 in concentrations up to 75 μg Fe/mL. It was also showed that tumoral cells are able to internalize these MNP, as they were seen in vesicle-like structures in the citoplasm. Further, in vitro and in vivo assays were performed in microCT equipment. In vitro tests revealed that FMS presented elevated density in microCT imaging and in vivo experiments showed that after intratumoral FMS injections, MNP remains in mouse melanoma tumor site for at least 72 hours. Although prolonged tumor retention, FMS was not toxic to the organs liver, spleen, kidneys, lungs and brain, neither to the whole organism, as verified by histological, hematological and biochemical analysis. In addition, 1 mL FMS aliquot exposed to an alternating magnetic field raised its temperature to 57°C and in vivo experiments confirmed intratumoral FMS heating potential. So, FMS was tested for murine melanoma treatment and showed promising results related to tumor volumes, tumor weights, necrosis percentage and hematological and biochemical analysis when data were evaluated the day after the end of the treatment. In conjunction, the data obtained by this work indicate that FMS presents the antitumor activities of both Selol and MNP, thus representing a potential therapeutic strategy against cancer. Keywords: magnetic nanoparticles, Selol, selenium, melanoma, magnetic hyperthermia, biocompatibility.
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Desenvolvimento e caracterização de nanoemulsões à base de óleo de buriti (Mauritia flexuosa) para avaliação de efeitos biológicos em células de câncer de mama in vitroSampaio, Marina Carvalho 22 February 2017 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Pós-Graduação em Nanociência e Nanobiotecnologia, 2017. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2017-04-07T17:08:39Z
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2017_MarinaCarvalhoSampaio.pdf: 2776388 bytes, checksum: 6a5e2f3ef65035e4f81b2d767ddede73 (MD5) / O câncer de mama representa a principal causa de mortalidade no Brasil e é a enfermidade com maior taxa de diagnósticos entre as mulheres no mundo. É uma doença que apresenta várias peculiaridades como a resistência às terapias. Há cerca de 20 subtipos e os tratamentos mais comuns são cirurgia, radioterapia e quimioterapia. Entretanto, ou são mutiladores ou levam a severos efeitos adversos e não são específicos, já que também atingem células saudáveis. Para contornar estes fatores, os nanomedicamentos estão em ampla fase de pesquisa e estudo. São medicamentos na escala nanométrica e, devido a características ópticas, físico-químicas, eletrônicas e à capacidade de se ligarem a anticorpos, são medicamentos inovadores para conduzir o princípio ativo até o sítio de ação. Nanoemulsões são um dos tipos de nanomedicamentos e podem ser empregadas como adjuvantes na terapia contra o câncer de mama, pois conseguem aumentar a biodistribuição e manter o nível estável da concentração de medicamentos no organismo. Como a flora brasileira é ainda pouco estudada para o desenvolvimento de medicamentos e por apresentar uma elevada taxa de antioxidantes, o óleo do fruto da palmeira de buriti (Mauritia flexuosa) foi avaliado no presente trabalho. Foram desenvolvidos quatro tipos de nanoemulsões à base deste óleo com sucesso e boa estabilidade a 4ᵒC. Ensaios de viabilidade celular em células de câncer de mama apresentaram uma citotoxicidade bastante significativa da nanoemulsão de óleo de buriti sem adição de polímeros ou fosfolipídio em sua superfície (BuNE-) e da nanoemulsão de óleo de buriti com fosfolipídio 1,2- dioleoyl-sn-glycero-3-trimethylammonium propane (BuNE+DOTAP), enquanto que em células saudáveis de fibroblasto apresentaram um aumento da viabilidade celular. Portanto, demonstram um potencial para um novo medicamento cicatrizante. Corroborando com o ensaio de viabilidade celular em células de câncer de mama, o teste de exposição à fosfatidilserina demonstrou que estas nanoemulsões levam à morte celular por meio de apoptose ou apoptose tardia. Estas nanoemulsões não levaram à fragmentação do ADN, a alteração do potencial de membrana mitocondrial e lesão de membrana plasmática em células de câncer de mama. A BuNE- alterou o padrão do ciclo celular: houve um aumento de células na fase S enquanto que houve uma diminuição na quantidade de células na fase G2/M. Pode-se concluir do presente trabalho que nanoemulsões à base de buriti foram desenvolvidas com sucesso, são estáveis e apresentam um potencial para um novo tratamento adjuvante contra o câncer de mama. / Breast cancer is the major cause of diagnosis among women worldwide and the major cause of mortality of Brazilian women. It is a disease that presents diverse peculiarities as the resistance to the therapies. The most common treatments are surgery, radiotherapy and chemotherapy. However, they lead to severe adverse effects and are not specific to the cancer cells. To avoid these pecualities, nanomedicine is the key. They are drugs at the nanometer scale and due to their physical, physicochemical, electronic and characteristics, they are innovative and can drive the drug directly to the cancer. Nanoemulsions, which are one of the tools of nanomedicine, can be used as adjuvants in breast cancer therapy because they can increase drug biodistribution. There are few studies about Brazilian flora for the development of new drugs. Buriti (Mauritia flexuosa), which is the most abundant palm in Brazil, was evaluated in the presente study. Four types of nanoemulsions based on buriti oil were successfully developed and presented stability at 4 ° C. Cell viability assays in breast cancer cells showed a high cytotoxicity of buriti oil nanoemulsions (BuNE- and BuNE+DOTAP), whereas in fibroblasts, cell viability was higher. As a result, these nanoemulsions demonstrate a potential for a new cicatrization medicine. Corroborating with cell viability assay in breast cancer cells, Anexin VFITC assay demonstrated that these nanoemulsions lead to cell death through apoptosis or late apoptosis. There were no DNA fragmentation, alteration of mitochondrial transmembrane potencial nor lesion of plasma membrane in breast cancer cells. BuNE- altered the cell cycle pattern: there was an increasement of cells in S phase whereas there was a reduction in the amount of cells in the G2 / M phase. It can be concluded that buriti oil nanoemulsions were developed successfully and are stable. In addition, they have the potential for a new adjuvant treatment against breast cancer.
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