Made available in DSpace on 2018-06-27T18:56:30Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Queli Fernandes Lenz.pdf: 1109122 bytes, checksum: c96662d246963285f793b662d227cbe8 (MD5) Queli Fernandes Lenz.pdf.jpg: 3574 bytes, checksum: 11b4e5a1cb8de551f92f8caa41435ad9 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Non-steroidal anti-inflammatories (NSAIDs) represent one of the most commonly used classes of drugs, they are often applied in the treatment of chronic or acute inflammatory processes. Nimesulide, a drug which belongs to the NSAIDs, is usually applied in inflammatory processes, such as: inflammation of lower respiratory tract, oral cavity and in inflammatory processes associated to tendinitis, synovitis and rheumatoid arthritis. However, it is known that the oral administration of nimesulide might cause several adverse effects, from gastrointestinal disturbances to liver and kidney toxicity. Therefore, the topical administration of the drug is an alternative to these problems. Besides the use of such option, carriers ,such as nanoparticles, present many advantages for topic application. Among them, the sustained liberation, which becomes important for the drug supply on the skin during a longer period of time. This work aims at assessing the anti-inflammatory and the antioxidant activity of a topical gel containing nanoencapsulated nimesulide by using experimental models, as well as carrying out comparative analysis related to the nimesulide activity either free or nanostructured. In order to determine the anti-inflammatory activity, either acute or chronic, male rats were used Wistar (200 e 250g). In order to evaluate the acute inflammation, paw edema induced by carrageenan and acute arthritis inductions by Freud Adjuvant were used. The chronic inflammation models in vivo applied were induction of chronic arthritis by Freud Adjuvant, induction of formation of granulomatous tissue by cotton pellet and healing. The antioxidant activity was assessed through radical capturing method DPPH and dosage of substances reactive to the tiobarbituric acid (TBARS) in dorsal damaged tissue (healing model). The nanocapsules of nimesulide (1,5 mg/ml) were prepared through the method of nanoprecipitation of preformed polymer (Fessi, et al. 1998), developed and characterized by Alves and collaborators (2005). From the obtained data in the acute inflammation models, no significative difference was observed between the activity of the nimesulide in nanocapsules (GHNCN) and in the free form (GHN), where both the formulations were able to inhibit the inflammatory process. On the other hand, in the chronic inflammation the formulation containing the nonostructured drug showed a better activity than that showed by the free drug. In the chronic arthritis model the anti-inflammatory activity was 81,5%, compared to the free drug (27,75%). The formulation containing the nanostructured drug was also able to inhibit the formation of granulomatous tissue in 36,66% compared to the free drug, which inhibited just 2,82. In the healing trial the free drug (GHN) presented an tissue retraction of 38,82%, the nanostructured of 19,35% and the control of 10,5%. Through the DPPH technique, it was not possible to observe any significant difference between the formulations (GHNCN e GHN), however, both demonstrated excellent antioxidant action. Although not statistically different, it was possible to observe a higher action in the formulation containing nimesulide in nanocapsules in all tested concentrations. In the determination of TBARS malondialdehyde levels (MDA) for the free and the nanostructured drugs were respectively 730,20 e 571,33 nmol MDA/g tissue, compared to the control group (1.457 nmol MDA/g tissue). From the obtained data, it was possible to demonstrate that the nanostructured nimesulide incorporated to the hydro gel presents adequate anti-inflammatory and antioxidant activities, becoming an alternative to the treatment of inflammatory processes through topical administration. / Anti-inflamatórios não-esteroides (AINEs) representam uma das classes de fármacos mais comumente usados, sendo frequentemente usados para o tratamento de estados inflamatórios agudos e crônicos. A nimesulida, fármaco pertencente à classe dos AINEs, é comumente utilizada em processos inflamatórios, tais como: inflamações do trato respiratório, da cavidade oral e em situações inflamatórias associadas com tendinite, sinovite e artrite reumatóide. Sabe-se, porém, que a administração oral da nimesulida pode causar inúmeros efeitos adversos, incluindo desde perturbações gastrintestinais até toxicidade hepática e renal. Em virtude disso, a administração tópica do fármaco constitui uma alternativa a esses problemas. Além da utilização dessa via, carreadores como nanopartículas apresentam muitas vantagens para aplicação tópica, dentre elas, a liberação sustentada, a qual se torna importante para o suprimento de fármaco na pele, por um período prolongado de tempo. O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade anti-inflamatória e antioxidante de um gel tópico contendo nimesulida nanoencapsulada utilizando modelos experimentais, bem como a realização de análises comparativas com relação à atividade da nimesulida na forma livre e na forma nanoestruturada. Para determinação da atividade anti-inflamatória, tanto aguda quanto crônica, foram usados ratos machos Wistar (200 e 250g). Para avaliação de inflamação aguda foram usados os modelos de indução de edema de pata por carragenina e indução de artrite aguda por Adjuvante de Freud. Os modelos de inflamação crônica in vivo utilizados foram indução de artrite crônica por Adjuvante de Freud, indução de formação de tecido granulomatoso por introdução de pellet de algodão e cicatrização. A atividade antioxidante foi avaliada através dos métodos de captação do radical DPPH e dosagem de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) em tecido de lesão dorsal (modelo de cicatrização). As nanocápsulas de nimesulida (1,5 mg/ml) foram preparadas através do método de nanoprecipitação de polímero pré-formado (Fessi, et al, 1998), desenvolvidas e caracterizadas por Alves e colaboradores (2005). A partir dos dados obtidos nos modelos de inflamação aguda, não foi observada diferença significativa entre a atividade da nimesulida em nanocápsulas (GHNCN) e na forma livre (GHN), onde ambas as formulações foram capazes de inibir o processo inflamatório. Por outro lado, nos modelos de inflamação crônica a formulação contendo o fármaco nanoestruturado demonstrou uma atividade significativamente maior do que aquela contendo o fármaco livre. No modelo de artrite crônica a atividade anti-inflamatória foi de 81,5%, comparada ao fármaco livre (27,75%). A formulação contendo o fármaco nanoestruturado também foi capaz de inibir a formação de tecido granulomatoso em 36,66% em relação ao fármaco livre, o qual inibiu apenas 2,82%. No ensaio de cicatrização, o fármaco livre (GHN) apresentou uma retração do tecido de 38,82%; o nanoestruturado, de 19,35%; e o controle de 10,5%. Através da técnica do DPPH não foi possível observar diferença significativa entre as formulações (GHNCN e GHN), entretanto ambas demonstraram excelente ação antioxidante. Embora não estatisticamente diferentes, foi possível observar uma ação mais acentuada na formulação com a nimesulida em nanocápsulas em todas as concentrações testadas. Na determinação de TBARS, os níveis de malondialdeído (MDA) para o fármaco livre e nanoestruturado foram, respectivamente, 730,20 e 571,33 nmol MDA/g tecido, comparados com o grupo controle (1.457 nmol MDA/g tecido). A partir dos dados obtidos, foi possível demonstrar que a nimesulida nanoestruturada incorporada em hidrogel apresenta atividades anti-inflamatória e antioxidante adequadas, constituindo-se numa alternativa para tratamentos de processos inflamatórios através da via tópica de admistração.

Made available in DSpace on 2018-06-27T18:56:36Z (GMT). No. of bitstreams: 3 Carla Fontoura Ferreira.pdf: 1524660 bytes, checksum: f2627eb8bff1b2efacf130f3ea886cab (MD5) Carla Fontoura Ferreira.pdf.txt: 136087 bytes, checksum: 01a470496da5934a73509102fa059e17 (MD5) Carla Fontoura Ferreira.pdf.jpg: 3323 bytes, checksum: a5e51d047568f2121c8ad80ee83f6f23 (MD5) Previous issue date: 2013-04-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Depression and anxiety are psychiatric disorders and present psychological, behavioral and physiological symptoms. As for anxiety and depression treatment, the major problem found is the deficiency on drugs that associate the high effectiveness, high bioavailability and low side effects. Therefore, the L-ascorbil-6-palmitato (PA) associated with nanoparticles could be an inovative alternative for these disorders treatment. In this context, the objective of this study was to evaluate the antidepressant- and anxiolytic-like effects of AP-loaded nanocapsules in different depression and anxiety models on mice. Moreover, we verified the involvement of Na+, K+ -ATPase activity in brain. Animals were divided in 3 groups; group I: control; group II: nano and group III: free. Animals were pretreated intragastrically (i.g) by 24, 48, 72 or 96 hours before of behavioral tests. Group I were pretreated with suspensions containing blank nanocapsules, group II received AP-loaded nanocapsules (30 mg/kg) and group III received free PA (30 mg/kg). In order to evaluate animals locomotor and exploratory activity it was taken the open field test. The forced swimming and tail suspension tests ware used in order to evaluate the antidepressive-type effect, while the elevated plus maze and light/dark box tests were used in order to verify the anxiolytic-type effect. After behavioral tests, animals were killed and brains were removed to determinate Na+, K+ -ATPase activity. Results showed that pretreatment of 24 from 96 hours with AP-loaded nanocapsules reduced the immobility time in forced swim, while free PA in reduced the immobility time with 24 and 48 hours of pretreatment. In the tail suspension tests, AP-loaded nanocapsules and free form reduced the immobility time of 24 to 96 hours of pretreatment. In the elevated plus maze, there was an increase of the number of jump in the pretreated of 48 hours with AP-loaded nanocapsules. No change was observed in the other parameters and groups in this test. In the light/dark box test, all time of pretreatment with AP-loaded nanocapsules increased the latency time for the first entry in the dark compartment and time that the animal remained in the light compartment. Furthermore, no change was found in the Na+, K+-ATPase activity in brains of mice. In the open field test there was no change in animals locomotor and exploratory activity in any of the times tested and groups analyzed. Therefore, we concluded that the AP-loaded nanocapsules showed anxiolytic-like effect. Moreover, AP-loaded nanocapsules and free form presented antidepressant-like effect, but the effect of nanocapsules was more prolonged. Na+, K+-ATPase activity was not involved in the pharmacological effects. / A depressão e a ansiedade são transtornos psiquiátricos que apresentam sintomas psicológicos, comportamentais e fisiológicos. Quanto ao tratamento da ansiedade e da depressão, o maior problema encontrado é a deficiência de fármacos que associem alta eficácia, alta biodisponibilidade e baixos efeitos colaterais. Assim, o L-ascorbil-6-palmitato (PA) associado às nanopartículas poderia ser uma alternativa inovadora para o tratamento desses transtornos. Neste contexto, o presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito tipoantidepressivo e ansiolítico de nanocápsulas contendo PA, em diferentes modelos de depressão e ansiedade em camundongos. Além disso, foi verificado o envolvimento da atividade da enzima Na+, K+-ATPase cerebral no efeito farmacológico. Os animais foram divididos em 3 grupos: grupo I: controle; grupo II: nano e grupo III: livre. Os pré-tratamentos dos animais foram 24, 48, 72 ou 96 h antes da realização dos testes comportamentais, pela via intragástrica (i.g). Os animais do grupo I foram pré-tratados com suspensões contendo nanocápsulas brancas, do grupo II receberam PA nanoencapsulado (30 mg/kg) e do grupo III foram pré-tratados com o PA na forma livre (30 mg/kg). Para avaliar a atividade locomotora e exploratória dos animais foi realizado a teste do campo aberto. Os testes do nado forçado e da suspensão da cauda foram utilizados para avaliar o efeito tipo-antidepressivo, enquanto os testes do labirinto em cruz elevada e do claro/escuro foram utilizados para verificar o efeito tipo-ansiolítico. No final dos testes comportamentais, os animais foram sacrificados e os cérebros removidos para verificar a atividade da enzima Na+, K+-ATPase. Os resultados desse estudo demonstraram uma redução do tempo de imobilidade no teste do nado forçado nos animais pré-tratados com nanocápsulas de PA nos tempos de 24 a 96 h, enquanto o PA na forma livre reduziu o tempo de imobilidade apenas nos pré-tratamentos de 24 e 48 h. Enquanto que no teste da suspensão da cauda, tanto o fármaco nanoencapsulado quanto na forma livre apresentaram uma redução no tempo de imobilidade de 24 a 96 h. No teste da cruz elevada, houve um aumento no número de espiadas nos animais pré-tratados 48 h com as nanocápsulas de PA. Os outros parâmetros e os demais grupos analisados neste teste não apresentaram alterações. No teste do claro-escuro, as nanocápsulas de PA aumentaram o tempo de latência para a primeira entrada do animal no compartimento escuro em todos os tempos de pré-tratamentos e também aumentaram o tempo que o animal permaneceu no compartimento claro. No teste do campo aberto não houve modificação na atividade locomotora e exploratória dos animais, em nenhum dos tempos testados e grupos analisados.Além disso, nenhuma diferença significativa foi encontrada na atividade Na+, K+-ATPase em nenhum dos tempos de pré-tratamento no cérebro dos camundongos. Com isso, pode-se concluir que as nanocápsulas contendo PA apresentaram efeito tipo-ansiolítico, enquanto o PA na forma livre não apresentou esse efeito. Além disso, tanto o PA na forma livre quanto o encapsulado apresentaram efeito tipo-antidepressivo, porém o efeito das nanocápsulas de PA foi mais prolongado. Também, descartou-se o envolvimento da Na+, K+-ATPase nos efeitos farmacológicos obtidos.

Made available in DSpace on 2018-06-27T18:56:37Z (GMT). No. of bitstreams: 3 Flabio da Rosa Pons Junior.pdf: 1999620 bytes, checksum: e5045f0611ac73ef991604e04484fbb8 (MD5) Flabio da Rosa Pons Junior.pdf.txt: 174053 bytes, checksum: 8140591651031d4c7b893b3bc3ce8675 (MD5) Flabio da Rosa Pons Junior.pdf.jpg: 3814 bytes, checksum: 8bd8fcbd7817488781e11c3f2a9361f5 (MD5) Previous issue date: 2011-08-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The fungal infections in humans occur in several ways, can this is superficial and systemic mycoses mycoses. The use of new antifungal made important progress in the treatment of different types of fungal infections. Among the drugs used to treat, there is ketoconazole, azole derivative, a synthetic molecule that acts by inhibiting biosynthesis of ergosterol molecule, exerting fungicidal. Treatment with ketoconazole requires frequent applications of the product, which causes skin irritation, the adherence to treatment. Initial studies have shown that drugs have nanocarrier improvement in selectivity, reducing side effects by modifying the release and increasing the effectiveness of the asset. This study aimed to characterize, evaluate the physical and chemical stability and antimicrobial activity of systems composed of nanoparticles or microparticles incorporated into formulations containing ketoconazole shampoo. All studies were carried out comparing ketoconazole as nanostructured and microstructured with the free form. The samples were stored under conditions of 25 ± 2 ° C, 4 ± 2 ° C and 40 ± 2 ° C and 75 ± 5% RH and exposed to UV light for 90 days and analyzed at 0, 7, 15, 30, 60 and 90 days in relation to the determination of pH, particle diameter, polydispersity index, zeta potential, rate of association and the drug dosing, antimicrobial activity and viscosity for the samples of shampoo. The average particle size for the nanocapsules was less than 370 nm, for microparticles less than 52 micrometers. All samples consist of the nanocarrier showed negative zeta potential. The values for the rate of association were 92.10% for the nanocapsules and 97.69% for the microparticles. Regarding the content of the suspensions and tested for stability, the samples comprising nanocapsules showed the loss of a smaller amount of assets (17.9% and 19.7%) in conditions of 25 ± 2 ° C and ± 4 2 ° C respectively. For formulations of shampoo made by nanocarrier systems, the same place, but with losses (9.3% and 13.6%) for the same conditions of suspension. In the analysis of antimicrobial activity, suspensions of nanocapsules had power of 98.15% and 100.25% of microparticles. Samples of shampoo were analyzed by microbiological assay sensitivity, which analyzed both qualitatively and showed that the samples have antifungal activity. The validation of analytical methodologies for the suspensions showed satisfactory results for all parameters. The results obtained, it can be concluded that the suspensions have demonstrated good stability, even when incorporated into a topical pharmaceutical vehicle, thus representing a better technological feasibility for the pharmaceutical area. / As infecções fúngicas nos seres humanos ocorrem de formas variadas, podendo tratar-se de micoses superficiais ou micoses sistêmicas. O uso de novos antifúngicos permitiu importantes progressos na terapêutica dos diferentes tipos de infecções micóticas. Dentre os fármacos utilizados para o tratamento, destaca-se o cetoconazol, derivado dos azóis, uma molécula sintética que age inibindo na biossíntese da molécula do ergosterol, exercendo ação fungicida. O tratamento com cetoconazol exige aplicações freqüentes do produto, o que provoca irritação cutânea, dificultando a adesão ao tratamento. Estudos iniciais têm demonstrado que fármacos nanocarreados apresentam melhora na seletividade, reduzindo efeitos colaterais, modificando a liberação e aumentando a eficácia do ativo. Este trabalho teve como objetivo, caracterizar, avaliar a estabilidade físico química e a atividade antimicrobiana de sistemas compostos de nanopartículas ou micropartículas contendo cetoconazol incorporadas em formulações de xampu. Todos os estudos foram realizados comparando-se o cetoconazol na forma nanoestruturada e microestruturada com a forma livre. As amostras foram armazenadas nas condições de 25 ± 2 °C, 4 ± 2 °C e 40 ± 2 °C e 75 ± 5% UR e expostas à luz UV, durante 90 dias, sendo analisadas em períodos 0, 7, 15, 30, 60 e 90 dias, em relação à determinação do pH, diâmetro de partícula, índice de polidispersão, potencial zeta, taxa de associação e doseamento do fármaco, atividade antimicrobiana e viscosidade para as amostras de xampu. O tamanho médio das partículas para as nanocápsulas foi inferior a 370 nm, para as micropartículas inferior a 52 μm. Todas as amostras compostas pelos nanocarreadores apresentaram potencial zeta negativo. Os valores para a taxa de associação foram de 92,10 % para as nanocápsulas e 97,69 % para as micropartículas. Em relação ao teor das suspensões submetidas aos testes de estabilidade, as amostras compostas por nanocápsulas foram as que apresentaram uma menor perda de quantidade do ativo (17,9 % e 19,7 %) nas condições de 25 ± 2 °C e 4 ± 2 °C respectivamente. Para as formulações de xampu compostas pelos sistemas de nanocarreadores, o mesmo ocorreu, porém com perdas de (9,3 % e 13,6 %) para as mesmas condições das suspensões. Na análise da atividade antimicrobiana, as suspensões de nanocapsulas apresentaram potência de 98,15 % e as de micropartículas 100,25 %. As amostras de xampu foram analisadas pelo ensaio microbiológico de sensibilidade, o qual analisado de forma qualitativa e demonstrou que as amostras possuem atividade antifúngica. As validações das metodologias analíticas para as suspensões apresentaram resultados satisfatórios para todos os parâmetros analisados. Através dos resultados obtidos, pode-se concluir que as suspensões demonstraram ter boa estabilidade, mesmo quando incorporadas em um veículo farmacêutico de uso tópico, representando assim, uma melhor viabilidade tecnológica para a área farmacêutica.

Made available in DSpace on 2018-06-27T18:56:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-04-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Acne vulgaris is a genetic hormone disease, located in the hair follicle. Adapalene a third-generation retinoid, and it is a topical alternative for acne treatment, but may have some adverse effects, irritation and dryness of the skin are the most common. Due to this, and knowing the nanocarriers potential, the object of this study was determine the physicochemical stability of semisolid formulations containing adapalene-loaded nanocapsules (NC) incorporated in Aristoflex AVL®, evaluate the release profiles in semisolid formulations containing nanocapsules containing adapalene incorporated in Carbopol 940® and verify the safety of the formulation in vivo by noninvasive biophysical analysis. For the determination of the stability, samples were subjected to freeze-thaw cycle, completing a cycle of 21 days. The in vitro release studies were performed comparing the drug-loaded NC (GCNCA) with the gel containing adapalene in its free form (GCA). For the skin bioengineer techniques, twenty healthy volunteers were selected. Each week were performed biometric skin tests including stratum corneum water content (hydration), pH, color, erythema and transepidermal water loss for 63 days. In stability studies, we observed that the average particle size, polydispersity and zeta potential of cream gel containing NC without adapalene (CGNC) and cream gel containing adapaleneloaded NC (CGNCA) showed no change after being subjected to the freeze-thaw cycle. Semisolid formulations showed non-Newtonian flow and pseudoplastic behavior during the study period. The initial adapalene content in CGNCA did not change compared with the result obtained at the end of the experiment. However, for the cream gel containing free adapalene (CGA), there was a reduction in the drug concentration, whereas the initial content decreased to below 90% after 21 days of analysis. According to release studies, we can observe that the GCNCA showed total concentration and release rate less than the GCA, which demonstrates the ability of nanoparticles to control the drug release. According to the results observed for the non-invasive method in relation to the determination of melanin content, there was a decrease in this parameter during the experiment for both formulations. The GCNCA did not cause erythema, configuring security in the use of the formulation. However, the GCA increased the index of erythema of the skin of volunteers. We observed an increase in transepidermal water loss to the GCA while in GCNCA there is a reduction of this parameter. The results obtained for skin hydration, there was a more pronounced reduction of the values of the stratum corneum water content in the treated areas with GCA. Thus, it was evident that the polymeric nanocapsules are able to decrease transepidermal water loss, favoring the skin hydration degree and keeping the stratum corneum integrity. / A acne vulgar é uma doença genética hormonal, de localização pilo-sebácea. O adapaleno, retinóide de terceira geração, é uma alternativa tópica para o tratamento da acne, podendo apresentar alguns efeitos indesejáveis, sendo a irritação e o ressecamento da pele os mais comuns. Em vista disso, e conhecendo as potencialidades dos nanocarreadores, o presente trabalho tem como objetivo determinar a estabilidade físico-química de formulações semissólidas contendo adapaleno nanoestruturado incorporado em Aristoflex AVL®, avaliar os perfis de liberação em formulações semissólidas contendo nanocápsulas (NC) de adapaleno incorporadas em Carbopol 940® e verificar a segurança do fármaco nanoencapsulado in vivo, através de análises biofísicas não invasivas. Para a determinação da estabilidade as amostras foram submetidas ao ciclo gelo-degelo, completando-se um ciclo de 21 dias. Os estudos de liberação in vitro foram realizados comparando-se as formulações contendo nanocápsulas de adapaleno (GCNCA) com o gel contendo o fármaco na forma livre (GCA). Para o ensaio utilizando biometria cutânea, foram selecionados vinte voluntários saudáveis. A cada semana foram realizados testes de bioengenharia cutânea, incluindo avaliação do conteúdo aquoso do estrato córneo (hidratação), pH, coloração, eritema e perda transepidérmica de água durante 63 dias. Nos estudos de estabilidade, observou-se que o diâmetro médio das partículas, índice de polidispersão e potencial zeta do creme gel contendo NC sem adapaleno (CGNC) e do creme gel contendo NC de adapaleno (CGNCA) não apresentaram alterações após serem submetidos ao ciclo gelodegelo. As formulações semissólidas independente da forma de dispersão do fármaco apresentaram fluxo não-newtoniano e comportamento pseudoplástico durante todo o período de análise. O teor inicial de adapaleno no CGNCA não sofreu alteração, quando comparado com o teor obtido no término do experimento. Entretanto, para o creme gel contendo adapaleno livre (CGA) houve uma redução na concentração de adapaleno, visto que o teor inicial decaiu para valores abaixo de 90% após 21 dias de análise. Com relação aos estudos de liberação, pode-se observar que o GCNCA apresentou concentração total e taxa de liberação menor do que o GCA, o que demonstra a capacidade das nanopartículas em controlar a liberação do fármaco. De acordo com os resultados observados para o ensaio de bioengenharia cutânea, com relação à determinação do conteúdo de melanina, verificouse uma redução deste parâmetro no decorrer do experimento para ambas as formulações. O GCNCA não causou eritema, configurando a segurança na utilização da formulação. Entretanto, o GCA aumentou, de maneira estatisticamente significativa, o índice de eritema da pele dos voluntários. Foi observado um aumento na perda transepidérmica de água para o GCA enquanto no GCNCA observa-se uma redução deste parâmetro. Nos resultados obtidos para hidratação cutânea, observou-se uma redução mais pronunciada dos valores do conteúdo aquoso do estrato córneo nas regiões tratadas com GCA. Desta forma, evidenciou-se que as nanocápsulas poliméricas são capazes de diminuir a perda transepidérmica de água, favorecendo o grau de hidratação cutânea e mantendo a integridade do estrato córneo.

Submitted by MARCIA ROVADOSCHI (marciar@unifra.br) on 2018-08-14T17:48:37Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_QueliFernandesLenz.pdf: 1103937 bytes, checksum: b2116f3f0ba1823908aaa8b249897b50 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-14T17:48:37Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_QueliFernandesLenz.pdf: 1103937 bytes, checksum: b2116f3f0ba1823908aaa8b249897b50 (MD5) Previous issue date: 2009-08-31 / Non-steroidal anti-inflammatories (NSAIDs) represent one of the most commonly used classes of drugs, they are often applied in the treatment of chronic or acute inflammatory processes. Nimesulide, a drug which belongs to the NSAIDs, is usually applied in inflammatory processes, such as: inflammation of lower respiratory tract, oral cavity and in inflammatory processes associated to tendinitis, synovitis and rheumatoid arthritis. However, it is known that the oral administration of nimesulide might cause several adverse effects, from gastrointestinal disturbances to liver and kidney toxicity. Therefore, the topical administration of the drug is an alternative to these problems. Besides the use of such option, carriers ,such as nanoparticles, present many advantages for topic application. Among them, the sustained liberation, which becomes important for the drug supply on the skin during a longer period of time. This work aims at assessing the anti-inflammatory and the antioxidant activity of a topical gel containing nanoencapsulated nimesulide by using experimental models, as well as carrying out comparative analysis related to the nimesulide activity either free or nanostructured. In order to determine the anti-inflammatory activity, either acute or chronic, male rats were used Wistar (200 e 250g). In order to evaluate the acute inflammation, paw edema induced by carrageenan and acute arthritis inductions by Freud Adjuvant were used. The chronic inflammation models in vivo applied were induction of chronic arthritis by Freud Adjuvant, induction of formation of granulomatous tissue by cotton pellet and healing. The antioxidant activity was assessed through radical capturing method DPPH and dosage of substances reactive to the tiobarbituric acid (TBARS) in dorsal damaged tissue (healing model). The nanocapsules of nimesulide (1,5 mg/ml) were prepared through the method of nanoprecipitation of preformed polymer (Fessi, et al. 1998), developed and characterized by Alves and collaborators (2005). From the obtained data in the acute inflammation models, no significative difference was observed between the activity of the nimesulide in nanocapsules (GHNCN) and in the free form (GHN), where both the formulations were able to inhibit the inflammatory process. On the other hand, in the chronic inflammation the formulation containing the nonostructured drug showed a better activity than that showed by the free drug. In the chronic arthritis model the anti-inflammatory activity was 81,5%, compared to the free drug (27,75%). The formulation containing the nanostructured drug was also able to inhibit the formation of granulomatous tissue in 36,66% compared to the free drug, which inhibited just 2,82. In the healing trial the free drug (GHN) presented an tissue retraction of 38,82%, the nanostructured of 19,35% and the control of 10,5%. Through the DPPH technique, it was not possible to observe any significant difference between the formulations (GHNCN e GHN), however, both demonstrated excellent antioxidant action. Although not statistically different, it was possible to observe a higher action in the formulation containing nimesulide in nanocapsules in all tested concentrations. In the determination of TBARS malondialdehyde levels (MDA) for the free and the nanostructured drugs were respectively 730,20 e 571,33 nmol MDA/g tissue, compared to the control group (1.457 nmol MDA/g tissue). From the obtained data, it was possible to demonstrate that the nanostructured nimesulide incorporated to the hydro gel presents adequate anti-inflammatory and antioxidant activities, becoming an alternative to the treatment of inflammatory processes through topical administration. / Anti-inflamatórios não-esteroides (AINEs) representam uma das classes de fármacos mais comumente usados, sendo frequentemente usados para o tratamento de estados inflamatórios agudos e crônicos. A nimesulida, fármaco pertencente à classe dos AINEs, é comumente utilizada em processos inflamatórios, tais como: inflamações do trato respiratório, da cavidade oral e em situações inflamatórias associadas com tendinite, sinovite e artrite reumatóide. Sabe-se, porém, que a administração oral da nimesulida pode causar inúmeros efeitos adversos, incluindo desde perturbações gastrintestinais até toxicidade hepática e renal. Em virtude disso, a administração tópica do fármaco constitui uma alternativa a esses problemas. Além da utilização dessa via, carreadores como nanopartículas apresentam muitas vantagens para aplicação tópica, dentre elas, a liberação sustentada, a qual se torna importante para o suprimento de fármaco na pele, por um período prolongado de tempo. O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade anti-inflamatória e antioxidante de um gel tópico contendo nimesulida nanoencapsulada utilizando modelos experimentais, bem como a realização de análises comparativas com relação à atividade da nimesulida na forma livre e na forma nanoestruturada. Para determinação da atividade anti-inflamatória, tanto aguda quanto crônica, foram usados ratos machos Wistar (200 e 250g). Para avaliação de inflamação aguda foram usados os modelos de indução de edema de pata por carragenina e indução de artrite aguda por Adjuvante de Freud. Os modelos de inflamação crônica in vivo utilizados foram indução de artrite crônica por Adjuvante de Freud, indução de formação de tecido granulomatoso por introdução de pellet de algodão e cicatrização. A atividade antioxidante foi avaliada através dos métodos de captação do radical DPPH e dosagem de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) em tecido de lesão dorsal (modelo de cicatrização). As nanocápsulas de nimesulida (1,5 mg/ml) foram preparadas através do método de nanoprecipitação de polímero pré-formado (Fessi, et al, 1998), desenvolvidas e caracterizadas por Alves e colaboradores (2005). A partir dos dados obtidos nos modelos de inflamação aguda, não foi observada diferença significativa entre a atividade da nimesulida em nanocápsulas (GHNCN) e na forma livre (GHN), onde ambas as formulações foram capazes de inibir o processo inflamatório. Por outro lado, nos modelos de inflamação crônica a formulação contendo o fármaco nanoestruturado demonstrou uma atividade significativamente maior do que aquela contendo o fármaco livre. No modelo de artrite crônica a atividade anti-inflamatória foi de 81,5%, comparada ao fármaco livre (27,75%). A formulação contendo o fármaco nanoestruturado também foi capaz de inibir a formação de tecido granulomatoso em 36,66% em relação ao fármaco livre, o qual inibiu apenas 2,82%. No ensaio de cicatrização, o fármaco livre (GHN) apresentou uma retração do tecido de 38,82%; o nanoestruturado, de 19,35%; e o controle de 10,5%. Através da técnica do DPPH não foi possível observar diferença significativa entre as formulações (GHNCN e GHN), entretanto ambas demonstraram excelente ação antioxidante. Embora não estatisticamente diferentes, foi possível observar uma ação mais acentuada na formulação com a nimesulida em nanocápsulas em todas as concentrações testadas. Na determinação de TBARS, os níveis de malondialdeído (MDA) para o fármaco livre e nanoestruturado foram, respectivamente, 730,20 e 571,33 nmol MDA/g tecido, comparados com o grupo controle (1.457 nmol MDA/g tecido). A partir dos dados obtidos, foi possível demonstrar que a nimesulida nanoestruturada incorporada em hidrogel apresenta atividades anti-inflamatória e antioxidante adequadas, constituindo-se numa alternativa para tratamentos de processos inflamatórios através da via tópica de admistração.

Submitted by MARCIA ROVADOSCHI (marciar@unifra.br) on 2018-08-16T13:49:23Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_GabrielaD'AvilaFarias.pdf: 1690913 bytes, checksum: 045532806a12d78ce1324029cd8aedaf (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-16T13:49:23Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_GabrielaD'AvilaFarias.pdf: 1690913 bytes, checksum: 045532806a12d78ce1324029cd8aedaf (MD5) Previous issue date: 2011-04-19 / Acne vulgaris is a genetic hormone disease, located in the hair follicle. Adapalene a third-generation retinoid, and it is a topical alternative for acne treatment, but may have some adverse effects, irritation and dryness of the skin are the most common. Due to this, and knowing the nanocarriers potential, the object of this study was determine the physicochemical stability of semisolid formulations containing adapalene-loaded nanocapsules (NC) incorporated in Aristoflex AVL®, evaluate the release profiles in semisolid formulations containing nanocapsules containing adapalene incorporated in Carbopol 940® and verify the safety of the formulation in vivo by noninvasive biophysical analysis. For the determination of the stability, samples were subjected to freeze-thaw cycle, completing a cycle of 21 days. The in vitro release studies were performed comparing the drug-loaded NC (GCNCA) with the gel containing adapalene in its free form (GCA). For the skin bioengineer techniques, twenty healthy volunteers were selected. Each week were performed biometric skin tests including stratum corneum water content (hydration), pH, color, erythema and transepidermal water loss for 63 days. In stability studies, we observed that the average particle size, polydispersity and zeta potential of cream gel containing NC without adapalene (CGNC) and cream gel containing adapaleneloaded NC (CGNCA) showed no change after being subjected to the freeze-thaw cycle. Semisolid formulations showed non-Newtonian flow and pseudoplastic behavior during the study period. The initial adapalene content in CGNCA did not change compared with the result obtained at the end of the experiment. However, for the cream gel containing free adapalene (CGA), there was a reduction in the drug concentration, whereas the initial content decreased to below 90% after 21 days of analysis. According to release studies, we can observe that the GCNCA showed total concentration and release rate less than the GCA, which demonstrates the ability of nanoparticles to control the drug release. According to the results observed for the non-invasive method in relation to the determination of melanin content, there was a decrease in this parameter during the experiment for both formulations. The GCNCA did not cause erythema, configuring security in the use of the formulation. However, the GCA increased the index of erythema of the skin of volunteers. We observed an increase in transepidermal water loss to the GCA while in GCNCA there is a reduction of this parameter. The results obtained for skin hydration, there was a more pronounced reduction of the values of the stratum corneum water content in the treated areas with GCA. Thus, it was evident that the polymeric nanocapsules are able to decrease transepidermal water loss, favoring the skin hydration degree and keeping the stratum corneum integrity. / A acne vulgar é uma doença genética hormonal, de localização pilo-sebácea. O adapaleno, retinóide de terceira geração, é uma alternativa tópica para o tratamento da acne, podendo apresentar alguns efeitos indesejáveis, sendo a irritação e o ressecamento da pele os mais comuns. Em vista disso, e conhecendo as potencialidades dos nanocarreadores, o presente trabalho tem como objetivo determinar a estabilidade físico-química de formulações semissólidas contendo adapaleno nanoestruturado incorporado em Aristoflex AVL®, avaliar os perfis de liberação em formulações semissólidas contendo nanocápsulas (NC) de adapaleno incorporadas em Carbopol 940® e verificar a segurança do fármaco nanoencapsulado in vivo, através de análises biofísicas não invasivas. Para a determinação da estabilidade as amostras foram submetidas ao ciclo gelo-degelo, completando-se um ciclo de 21 dias. Os estudos de liberação in vitro foram realizados comparando-se as formulações contendo nanocápsulas de adapaleno (GCNCA) com o gel contendo o fármaco na forma livre (GCA). Para o ensaio utilizando biometria cutânea, foram selecionados vinte voluntários saudáveis. A cada semana foram realizados testes de bioengenharia cutânea, incluindo avaliação do conteúdo aquoso do estrato córneo (hidratação), pH, coloração, eritema e perda transepidérmica de água durante 63 dias. Nos estudos de estabilidade, observou-se que o diâmetro médio das partículas, índice de polidispersão e potencial zeta do creme gel contendo NC sem adapaleno (CGNC) e do creme gel contendo NC de adapaleno (CGNCA) não apresentaram alterações após serem submetidos ao ciclo gelodegelo. As formulações semissólidas independente da forma de dispersão do fármaco apresentaram fluxo não-newtoniano e comportamento pseudoplástico durante todo o período de análise. O teor inicial de adapaleno no CGNCA não sofreu alteração, quando comparado com o teor obtido no término do experimento. Entretanto, para o creme gel contendo adapaleno livre (CGA) houve uma redução na concentração de adapaleno, visto que o teor inicial decaiu para valores abaixo de 90% após 21 dias de análise. Com relação aos estudos de liberação, pode-se observar que o GCNCA apresentou concentração total e taxa de liberação menor do que o GCA, o que demonstra a capacidade das nanopartículas em controlar a liberação do fármaco. De acordo com os resultados observados para o ensaio de bioengenharia cutânea, com relação à determinação do conteúdo de melanina, verificouse uma redução deste parâmetro no decorrer do experimento para ambas as formulações. O GCNCA não causou eritema, configurando a segurança na utilização da formulação. Entretanto, o GCA aumentou, de maneira estatisticamente significativa, o índice de eritema da pele dos voluntários. Foi observado um aumento na perda transepidérmica de água para o GCA enquanto no GCNCA observa-se uma redução deste parâmetro. Nos resultados obtidos para hidratação cutânea, observou-se uma redução mais pronunciada dos valores do conteúdo aquoso do estrato córneo nas regiões tratadas com GCA. Desta forma, evidenciou-se que as nanocápsulas poliméricas são capazes de diminuir a perda transepidérmica de água, favorecendo o grau de hidratação cutânea e mantendo a integridade do estrato córneo.

Submitted by MARCIA ROVADOSCHI (marciar@unifra.br) on 2018-08-16T14:17:32Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_FlabioDaRosaPonsJunior.pdf: 2017674 bytes, checksum: ce2baac29e6f32b9170ceef6e8aa57e7 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-16T14:17:32Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_FlabioDaRosaPonsJunior.pdf: 2017674 bytes, checksum: ce2baac29e6f32b9170ceef6e8aa57e7 (MD5) Previous issue date: 2011-08-30 / The fungal infections in humans occur in several ways, can this is superficial and systemic mycoses mycoses. The use of new antifungal made important progress in the treatment of different types of fungal infections. Among the drugs used to treat, there is ketoconazole, azole derivative, a synthetic molecule that acts by inhibiting biosynthesis of ergosterol molecule, exerting fungicidal. Treatment with ketoconazole requires frequent applications of the product, which causes skin irritation, the adherence to treatment. Initial studies have shown that drugs have nanocarrier improvement in selectivity, reducing side effects by modifying the release and increasing the effectiveness of the asset. This study aimed to characterize, evaluate the physical and chemical stability and antimicrobial activity of systems composed of nanoparticles or microparticles incorporated into formulations containing ketoconazole shampoo. All studies were carried out comparing ketoconazole as nanostructured and microstructured with the free form. The samples were stored under conditions of 25 ± 2 ° C, 4 ± 2 ° C and 40 ± 2 ° C and 75 ± 5% RH and exposed to UV light for 90 days and analyzed at 0, 7, 15, 30, 60 and 90 days in relation to the determination of pH, particle diameter, polydispersity index, zeta potential, rate of association and the drug dosing, antimicrobial activity and viscosity for the samples of shampoo. The average particle size for the nanocapsules was less than 370 nm, for microparticles less than 52 micrometers. All samples consist of the nanocarrier showed negative zeta potential. The values for the rate of association were 92.10% for the nanocapsules and 97.69% for the microparticles. Regarding the content of the suspensions and tested for stability, the samples comprising nanocapsules showed the loss of a smaller amount of assets (17.9% and 19.7%) in conditions of 25 ± 2 ° C and ± 4 2 ° C respectively. For formulations of shampoo made by nanocarrier systems, the same place, but with losses (9.3% and 13.6%) for the same conditions of suspension. In the analysis of antimicrobial activity, suspensions of nanocapsules had power of 98.15% and 100.25% of microparticles. Samples of shampoo were analyzed by microbiological assay sensitivity, which analyzed both qualitatively and showed that the samples have antifungal activity. The validation of analytical methodologies for the suspensions showed satisfactory results for all parameters. The results obtained, it can be concluded that the suspensions have demonstrated good stability, even when incorporated into a topical pharmaceutical vehicle, thus representing a better technological feasibility for the pharmaceutical area. / As infecções fúngicas nos seres humanos ocorrem de formas variadas, podendo tratar-se de micoses superficiais ou micoses sistêmicas. O uso de novos antifúngicos permitiu importantes progressos na terapêutica dos diferentes tipos de infecções micóticas. Dentre os fármacos utilizados para o tratamento, destaca-se o cetoconazol, derivado dos azóis, uma molécula sintética que age inibindo na biossíntese da molécula do ergosterol, exercendo ação fungicida. O tratamento com cetoconazol exige aplicações freqüentes do produto, o que provoca irritação cutânea, dificultando a adesão ao tratamento. Estudos iniciais têm demonstrado que fármacos nanocarreados apresentam melhora na seletividade, reduzindo efeitos colaterais, modificando a liberação e aumentando a eficácia do ativo. Este trabalho teve como objetivo, caracterizar, avaliar a estabilidade físico–química e a atividade antimicrobiana de sistemas compostos de nanopartículas ou micropartículas contendo cetoconazol incorporadas em formulações de xampu. Todos os estudos foram realizados comparando-se o cetoconazol na forma nanoestruturada e microestruturada com a forma livre. As amostras foram armazenadas nas condições de 25 ± 2 °C, 4 ± 2 °C e 40 ± 2 °C e 75 ± 5% UR e expostas à luz UV, durante 90 dias, sendo analisadas em períodos 0, 7, 15, 30, 60 e 90 dias, em relação à determinação do pH, diâmetro de partícula, índice de polidispersão, potencial zeta, taxa de associação e doseamento do fármaco, atividade antimicrobiana e viscosidade para as amostras de xampu. O tamanho médio das partículas para as nanocápsulas foi inferior a 370 nm, para as micropartículas inferior a 52 μm. Todas as amostras compostas pelos nanocarreadores apresentaram potencial zeta negativo. Os valores para a taxa de associação foram de 92,10 % para as nanocápsulas e 97,69 % para as micropartículas. Em relação ao teor das suspensões submetidas aos testes de estabilidade, as amostras compostas por nanocápsulas foram as que apresentaram uma menor perda de quantidade do ativo (17,9 % e 19,7 %) nas condições de 25 ± 2 °C e 4 ± 2 °C respectivamente. Para as formulações de xampu compostas pelos sistemas de nanocarreadores, o mesmo ocorreu, porém com perdas de (9,3 % e 13,6 %) para as mesmas condições das suspensões. Na análise da atividade antimicrobiana, as suspensões de nanocapsulas apresentaram potência de 98,15 % e as de micropartículas 100,25 %. As amostras de xampu foram analisadas pelo ensaio microbiológico de sensibilidade, o qual analisado de forma qualitativa e demonstrou que as amostras possuem atividade antifúngica. As validações das metodologias analíticas para as suspensões apresentaram resultados satisfatórios para todos os parâmetros analisados. Através dos resultados obtidos, pode-se concluir que as suspensões demonstraram ter boa estabilidade, mesmo quando incorporadas em um veículo farmacêutico de uso tópico, representando assim, uma melhor viabilidade tecnológica para a área farmacêutica.

Submitted by MARCIA ROVADOSCHI (marciar@unifra.br) on 2018-08-16T14:21:31Z No. of bitstreams: 2 Dissertacao_BenonioTerraVillalba.pdf: 1084592 bytes, checksum: 26793415e5a9f5705ffceb4c83839d5d (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-16T14:21:31Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertacao_BenonioTerraVillalba.pdf: 1084592 bytes, checksum: 26793415e5a9f5705ffceb4c83839d5d (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2011-12-02 / The present study investigated the time-course of antinociceptive effect of meloxicam-loaded nanocapsules (M-NC) (5 mg/kg, intragastrically (i.g.) in chemical and thermal models of pain in mice. The antinociceptive activity of M-NC was compared to free meloxicam (M-F) (5 mg/kg, i.g.). Experiments were carried out in male Swiss mice previously treated with M-NC or M-F or suspension without drug (B-MC), at different times (0.5 – 120 h). M-NC elicited a significant increase in the tail-immersion and hot-plate response latency and this effect remained significant up to 24 h. Antinociceptive action of M-NC in the thermal test was similar to M-F. M-NC reduced the acetic acid-induced abdominal writhing up to 48 h, while M-F produced an inhibition to 24 h. Pre-treatment up to 96 h with M-NC produced a marked reduction of the licking time in the first and second phases in the formalin test, while M-F had significant effect against the duration of licking up to 24 h in the first phase and at 0.5 h in the second phase. Paw oedema formation induced by formalin was reduced up to 96 h of pre-treatment with M-NC, while M-F had no significant effect against the formation of the paw oedema. Pre-treatment of up to 72 h with M-NC produced a marked reduction of the licking time and paw oedema formation induced by glutamate, while M-F had significant effect in both parameters up to 24 h. The antiedematogenic effect of M-NC remained significant up to 96 h after the administration, while M-F produced an inhibition of ear oedema up to 24 h. In conclusion, time-curse of antinociceptive effect indicated that M-NC exhibited more prolonged action than M-F. Thus, M-NC may be of potential interest in developing new prolongated delivery systems for the treatment of pain. / O presente estudo investigou o tempo de duração do efeito antinociceptivo de nanocápsulas com meloxicam (M-NC) (5 mg / kg, por via intragástrica (ig)) em modelos químicos e térmicos de dor em camundongos. Além disso, a atividade antinociceptiva das M-NC foi comparada com a do meloxicam na forma livre (MF) (5 mg / kg,ig). Foram utilizados camundongos machos da linhagem Swiss previamente tratados com M-NC ou MF ou com uma suspensão sem o fármaco (B-MC), em diferentes tempos (0,5 - 120 h). As M-NC provocaram um aumento significativo na latência de resposta nos testes de imersão da cauda e placa quente e este efeito permaneceu até 24 h. A ação antinociceptiva das M-NC nos testes térmicos foi semelhante ao MF. As M-NC reduziram as contorções abdominais induzidas pelo ácido acético em até 48 h, enquanto o MF produziu uma inibição apenas até 24 h. O pré-tratamento de até 96 h com as M-NC produziu uma redução acentuada do tempo de lambida na primeira e segunda fases do teste da formalina, enquanto o MF teve efeito significativo contra a duração do tempo de lambida em até 24h na primeira fase e em 0,5 h, na segunda fase. A formação do edema de pata induzido pela formalina foi reduzido até 96 h de pré-tratamento com as M-NC, enquanto o MF não teve efeito significativo contra a formação do edema de pata. O pré-tratamento de até 72 h com as M-NC produziu uma redução acentuada do tempo de lambida e na formação de edema de pata induzido pelo glutamato, enquanto o MF teve efeito significativo em ambos os parâmetros em até 24h. O efeito antiedematogênico das M-NC permaneceu significativo até 96 h após a administração, enquanto o MF produziu uma inibição no edema de orelha até 24 h. Em conclusão, o tempo de duração do efeito antinociceptivo indicou que as M-NC exibiram uma ação mais prolongada do que o MF. Assim, as M-NC podem ser de interesse potencial no desenvolvimento de novos sistemas de liberação para o tratamento da dor.

Submitted by MARCIA ROVADOSCHI (marciar@unifra.br) on 2018-08-16T14:24:58Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_FrancineRodriguesIaniski.pdf: 3871772 bytes, checksum: ea06b31c8ed51f3bf9a88cbfb0d4956c (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-16T14:24:58Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_FrancineRodriguesIaniski.pdf: 3871772 bytes, checksum: ea06b31c8ed51f3bf9a88cbfb0d4956c (MD5) Previous issue date: 2011-12-02 / Alzheimer's disease (AD) is a chronic neurodegenerative pathologic process associated with aging. This disease causes cognition deterioration and memory loss. The formation of senile plaques containing amyloid-β peptide (aβ) is the main characteristic of this disease. Also, AD related with the inflammation and oxidative stress. The lack of drugs used in the prevention and treatment of AD has stimulated the search for new agents that may represent a novel therapeutic alternative. In the present study, we investigated the beneficial effect of meloxicam-loaded nanocapsules in a model of AD induced by intracerebroventricular (i.c.v.) injection of aβ peptide (fragment 25-35) in mice, comparing the effect with free meloxicam. Mice were divided into six groups: (I) control, (II) aβ, (III) Nano, (IV) Free, (V) Nano + aβ and (VI) Free + aβ. Mice were treated with meloxicam-loaded nanocapsules (5 mg/kg, by gavage), free-meloxicam (5 mg/kg, by gavage) or blank nanocapsules. Thirty minutes after treatments, aβ (3 nmol) or filtered water were i.c.v. injected (day 1). Learning and memory were assessed with the Morris water-maze and step-down-type passive-avoidance tasks at the days 4–7 and 7–8 after the aβ injection, respectively. At the end of the experimental protocol, animals were died and brains were removed for determination of reactive species (RS) and non-protein thiols (NPSH) levels, and superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), glutathione peroxidase (GPx), glutathione reductase (GR), glutathione S-transferase (GST) activities. The results demonstrated that aβ injection caused learning and memory deficits in mice, which were verified using the Morris water-maze and step-down-type passiveavoidance tasks. Furthermore, this study showed that oxidative stress was increased in mice that received aβ. The most important findings of the present study was that meloxicam-loaded nanocapsules protected the learning and memory impairments induced by aβ. Moreover, meloxicam-loaded nanocapsules also protected against the increase of oxidative stress. However, free-meloxicam did not have protective effect. All these findings support the beneficial role of meloxicam-loaded nanocapsules in a model of AD induced by aβ. We can suggest that nanocapsules favor the passage of meloxicam through the blood-brain barrier and entry of the drug in the central nervous system. / A doença de Alzheimer (DA) é um processo patológico neurodegenerativo crônico associado ao envelhecimento. Essa patologia ocasiona deterioração da cognição e perda da memória. A formação de placas senis contendo o peptídeo β-amiloide (βa) é a principal característica dessa doença, que também está associada à inflamação e ao estresse oxidativo. A falta de fármacos empregados na prevenção e no tratamento da DA tem estimulado a pesquisa por novos agentes que possam representar uma inovadora alternativa terapêutica. No presente estudo, investigamos o efeito benéfico das nanocápsulas contendo meloxicam sobre o déficit de aprendizagem e de memória em um modelo da DA induzido pela injeção intracerebroventricular (i.c.v.) do peptídeo βa (fragmento 25-35) nos camundongos, comparando o efeito com o fármaco na forma livre. Os camundongos foram divididos em seis grupos: (I) Controle, (II) βa, (III) Nano, (IV) Livre, (V) Nano + βa, (VI) Livre + βa. Os camundongos foram pré-tratados com as nanocápsulas contendo meloxicam (5 mg/kg, por gavagem), ou com o fármaco na forma livre (5 mg/kg, por gavagem), ou com as nanocápsulas brancas. Trinta minutos após os tratamentos, foram injetados i.c.v. o peptídeo βa (3 nmol) ou água filtrada (dia 1). A aprendizagem e a memória foram avaliadas através dos testes do labirinto aquático de Morris e da esquiva passiva, nos dias 4-7 e 7-8 após a injeção do peptídeo βa, respectivamente. No final dos testes comportamentais, os animais foram mortos e os cérebros removidos para a determinação dos níveis de espécies reativas (ER) e tióis nãoproteicos (SHNP), e a atividade das enzimas superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT), glutationa peroxidase (GPx), glutationa redutase (GR) e glutationa S-transferase (GST). Os resultados demonstraram, através dos testes do labirinto aquático de Morris e da esquiva passiva, que a injeção i.c.v. do peptídeo βa causou um déficit na aprendizagem e na memória dos camundongos. Além disso, esse estudo demonstrou que o estresse oxidativo foi aumentado nos camundongos que receberam a injeção i.c.v. do peptídeo βa. Os achados mais importantes desse estudo foram que as nanocápsulas contendo meloxicam protegeram o déficit de aprendizado e de memória induzidas pela injeção i.c.v. do peptídeo βa, assim como foram capazes de proteger contra o aumento do estresse oxidativo. No entanto, o meloxicam na forma livre não apresentou esse efeito protetor. Todos esses achados reforçam o papel benéfico do meloxicam nanoencapsulado em um modelo da DA induzido pela injeção i.c.v. do peptídeo βa, sugerindo que as nanocápsulas favorecem a passagem do meloxicam através da barreira hematoencefálica (BHE) e a entrada do fármaco no sistema nervoso central (SNC)

Submitted by MARCIA ROVADOSCHI (marciar@unifra.br) on 2018-08-16T17:48:59Z No. of bitstreams: 2 Dissertacao_LarissaDaianeWillrichDeMelo.pdf: 1512214 bytes, checksum: b264a462161b24ec3ce2aacf05afea14 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-16T17:48:59Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertacao_LarissaDaianeWillrichDeMelo.pdf: 1512214 bytes, checksum: b264a462161b24ec3ce2aacf05afea14 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2013-03-25 / Efforts to develop an effective vaccine against Herpes Simplex Virus-1 (HSV-1) has been intense enough, however, there is no effective vaccine yet. The using of nanocapsules (Ncs) for production of viral vaccines may contribute to the enhancement and effectiveness of the already developed vaccines models. The main properties of the nanostructured system, which may contribute to the improvement of the immune response generated by vaccine is the slow and gradual release of the encapsulated content, protection of the encapsulated molecule or protein and adjuvanticity, inherent in every Ncs. The objective of this study was to produce and characterize nanocapsules with aqueous core to encapsulate the SSIEFARL peptide from HSV-1. This peptide has hydrophilic characteristics which impossibility the encapsulation in conventional nanocapsules with oil core. For the standardization of the tunnel several adaptations where modified in the system previously developed by Lambert et al. Among these, the stirring of the suspension, temperature, amount of surfactant, amount of peptide and settling time were adapted. All protocols two aqueous suspensions were tested, one with the organic solvent ethanol in the aqueous phase or only water. The results showed that the production with magnetic stirring in the presence of ethanol in the aqueous phase lead to Ncs with better physicochemical characteristics. Empty Ncs presented an average of particle size of 285 nm (+ 19,4) and zeta potential of -40.1 mV (+ 1,7) and the Ncs containing SSIEFARL peptide presented the size of 315 nm (+ 20,7) and zeta potential of -35,5 mV (+ 2,4). Other condition of production tested was the water temperature added during the production. When water was used at 40 °C the physico-chemical parameters were better than when room temperature water was used. Additionally, we tested the stability of the suspensions after storage at room temperature or 4 °C. The Ncs were stable for longer periods of time under refrigeration. For the characterization of morphostructure, Ncs were analyzed by transmission electron microscopy (TEM). This analysis revealed that Ncs present as spherical structures, homogeneous and uniform as standards in nanostructure for biological application. The analysis of Ncs by confocal microscopy was applied to investigate the encapsulation. Three amounts of SSIEFARL-6 FAM peptide were used (20, 30 or 50 μL), and the 20 μL showed better encapsulation. The analysis of the release profile of the peptide from Ncs showed that of the suspension produced with 20 μL was more linear, demonstrating slow release for at least 24 h. These data indicate that the method of production under magnetic stirring with ethanol and 20 μL of peptide in the aqueous phase is more suitable for production of aqueous core Ncs. Furthermore, empty Ncs at low concentrations showed no cytotoxicity to lymphoid cells from BALB-c in cell culture. Thus, we suggest that this approach has promising potential for developing a vaccine against HSV-1. / Os esforços para o desenvolvimento de uma vacina eficaz contra o Herpes Simplex Vírus-1 (HSV-1) tem sido bastante intensos, entretanto, ainda não existe uma vacina eficaz. A utilização de nanocápsulas (Ncs) para a produção de vacinas anti-virais pode contribuir para o aprimoramento e eficácia dos modelos vacinas já desenvolvidos. As principais propriedades desse sistema nanoestruturado, que podem contribuir para a melhora da resposta imune gerada por uma vacina são liberação lenta e gradual do conteúdo encapsulado, a proteção da molécula ou proteína encapsulada e a adjuvanticidade, inerente a cada Ncs. Assim, o objetivo deste estudo foi produzir e caracterizar nanocápsulas de núcleo aquoso, capazes de encapsular o peptídeo SSIEFARL do HSV-1. Este peptídeo possui características hidrofílicas sendo impossível a encapsulação em nanocápsulas convencionais de núcleo oleoso. Para a padronização do encapsulamento, foram combinadas diversas adaptações ao sistema previamente desenvolvido por Lambert e colaboradores. Dentre essas, foram adaptados o modo de agitação das suspensões, temperatura, quantidade de tensoativo, quantidade de peptídeo e tempo de sedimentação. Em todos os métodos foram testados duas alterações na fase aquosa das suspensões, foram produzidas Ncs com solvente etanol, na fase aquosa e/ou sem. Como resultados foram observados que a produção com agitação magnética em presença de etanol na fase aquosa foi a que produziu NCs com melhores características físico-químicas. Foram obtidas Ncs brancas com tamanho de partícula médio de 285 nm (+ 19,4) e potencial zeta de -40,1 mV (+ 1,7) e Ncs contendo o peptídeo SSIEFARL com tamanho de 315 nm (+ 20,7) e potencial zeta de -35,5 mV (+2,4). Outra condição alterada foi a temperatura da água adicionada durante os processos de produção. Quando foi utilizada água na temperatura de 40 oC os parâmetros físico-químicos foram melhores do que quando foi utilizada água na temperatura ambiente (T.A). Além disso, foi testada a estabilidade das suspensões após armazenamento em temperatura ambiente e geladeira (4oC). As nanocápsulas se mantiveram estáveis por mais tempo em sob refrigeração. Para a caracterização morfoestrutural das Ncs produzidas, foi utilizada a microscopia eletrônica de transmissão (MET). Essa análise revelou que as Ncs apresentam-se como estruturas esféricas, homogêneas e uniformes, conforme padrões estabelecidos para esse tipo de nanoestrutura. A análise das Ncs por microscopia confocal foi utilizada para comprovação do encapsulamento do peptídeo SSIEFARL-6-Fam, assim como a melhor quantidade. Foram utilizadas três quantidades de peptídeo (20, 30 ou 50 L), sendo que a quantidade de 20 L foi a que apresentou melhores resultados. O gráfico do perfil de liberação da suspensão produzida com 20 μL mostrou-se mais linear, demonstrando liberação lenta por pelo menos 24 h. Estes dados apontam que a metodologia de produção sob agitação magnética com etanol e 20 μL de peptídeo na fase aquosa apresentaram os melhores resultados para produção de nanocápsulas de núcleo aquoso. Além disso, as nanocápsulas brancas em baixas concentrações não apresentaram citotoxicidade para células de órgãos linfóides de camundongos BALB-c em cultura de células. Com isso, podemos sugerir que esta metodologia possui potencial promissor para desenvolvimento de vacina contra o HSV-1.