To improve the knowledge on progesterone (P4)-based hormonal protocols for synchronization of ovulation in Bos indicus, three studies were performed. The first study, consisting of three experiments (two in non-lactating cows, and one in Nelore heifers), were based on daily ultrasound evaluation and blood sampling for circulating P4 at specific times [onset of the protocol (D0) and first prostaglandin F2α (PGF) administration] of P4-based protocols differing in: inducer of the follicle wave emergence; protocol lengths; and ovulation inducer at the end of the protocol. Administration of 16.8 µg of buserelin acetate (GnRH) at the beginning of the protocol was associated with better ovulation rate after D0 (~55%), and higher number of corpus luteum (CL) at PGF. In addition, sometimes GnRH-based protocols were associated to early emergence of the follicle wave (~1.9 d after D0) and/or bigger ovulatory follicle, as well as greater circulating P4 at the time of PGF, especially in females that ovulated after GnRH administration. Nevertheless, protocols based on estradiol benzoate (EB) promoted delayed follicular wave emergence (~2.4 d after D0), but both (GnRH and EB) were associated to satisfactory synchronization rate of follicular wave emergence between D0 and D5 (~92%). In contrast, short protocols (5 d of P4 implant) only with insertion of a P4 implant on D0 were associated to low follicle wave emergence between D0 and D5 (~30%). However, the three strategies mentioned above promoted high ovulation rate at the end of the protocol (~85%), and did not differ in relation to the time of ovulation. The second study, consisting of two experiments (one in Nelore heifers, and the second in Nelore cows), evaluated fertility and some physiological variables of P4-based 7 d protocols beginning with EB (conventional protocol) or GnRH (16.8 µg of buserelin acetate) with adaptations (eCG and PGF on D6, and an additional PGF on D7), and with or without GnRH (8.4 µg) administration at the time of AI. As expected, higher ovulation rate after D0 (~67%) and more CL at PGF were observed in protocols starting with GnRH. Administration of EB at the beginning of the protocol was associated to greater luteolysis rate between D0 and PGF (~33%). At the time of implant withdrawal (D7), GnRH-based protocols induced bigger dominant follicles, and more estrus expression by the time of AI. However, only in heifers it was observed a bigger dominant follicle at the time of AI for GnRH group. Both (GnRH and EB) obtained satisfactory ovulation rate after AI (~92%). In heifers, no treatment effect was observed (EB vs. GnRH on D0, with vs. without GnRH at the time of AI) or interactions on pregnancy/AI (P/AI). However, in cows EB-based protocols obtained great P/AI when GnRH was administered at the time of AI (60.2% vs. 69.5%). In addition, this administration also increased P/AI of cows that did not express estrus during the protocol (no estrus: no GnRH = 48.2% vs. GnRH = 59.1%), although this effect was not observed in heifers. The third study evaluated ovarian dynamics and fertility of Nelore cows submitted to a P4-based 7 d FTAI protocol using 0.5 or 1.0 mg of estradiol cypionate (EC) at the time of implant removal (D7). Although 1.0 mg EC induced a smaller preovulatory follicle and lower ovulation rate after AI in multiparous, the P/AI was similar for both doses in this parity (multiparous: 0.5 mg = 58.4% vs. 1.0 mg = 59.0%). However, primiparous had lower P/AI when receiving 0.5 mg EC (primiparous: 0.5 mg = 30.2% vs. 1.0 mg = 53.6%). Therefore, both studies allowed a more refined knowledge regarding P4-based protocols in Bos indicus, especially on the efficiency of 7 d protocols and the inclusion of GnRH at the start or in the end of this type of synchronization protocol. / Com o intuito de aprofundar o conhecimento sobre protocolos hormonais de sincronização da ovulação à base de progesterona (P4) em Bos indicus, três estudos foram realizados. O primeiro estudo, composto por três experimentos (dois em vacas Nelore não-lactantes, e um em novilhas Nelore), baseou-se em avaliações ultrassonográficas diárias e colheitas de sangue para P4 circulante em momentos pontuais [início do protocolo (D0) e administração da primeira prostaglandina F2α (PGF)] de protocolos à base de P4 diferindo em: indutor de emergência de onda folicular; duração do protocolo; e indutor da ovulação ao final do protocolo. A administração de 16,8 µg de acetato de buserelina (GnRH) ao início do protocolo promoveu maiores taxas de ovulação após o D0 (~55%) e também maior número de corpos lúteos (CL) no momento da PGF. Em alguns momentos, protocolos à base de GnRH estiveram associados a antecipação da emergência de onda folicular (~1,9 d após D0) e/ou maior folículo ovulatório, bem como maior P4 circulante no momento da PGF, e pontualmente em fêmeas que ovularam após a administração deste fármaco. Não obstante, protocolos à base de benzoato de estradiol (BE) promoveram atraso na emergência da onda folicular (~2,4 d após D0), porém ambos (GnRH e BE) estiveram associados a alta taxa de sincronização da emergência de onda folicular entre D0 e D5 do protocolo (~92%). Em contrapartida, protocolos curtos (5 d de implante de P4), apenas com a inserção de implante de P4 no D0, estiveram associados à baixa taxa de emergência de onda folicular (~30%). Entretanto, as três estratégias citadas acima promoveram alta taxa de ovulação ao final do protocolo (~85%), e não diferiram em relação ao horário da ovulação. O segundo estudo, composto por dois experimentos (um em novilhas Nelore e o segundo em vacas Nelore), testou a fertilidade e variáveis fisiológicas de protocolos à base de P4 com duração de 7 d iniciando com BE (convencional) ou com GnRH (16,8 µg de acetato de buserelina) com adaptações (eCG e PGF no D6, e uma PGF adicional no D7), e com ou sem a administração de GnRH (8,4 µg) no momento da IATF. Ambos também receberam cipionato de estradiol (CE) no D7. Como esperado, observou-se maior taxa de ovulação (~67%) após o D0 e maior número de CL na PGF em protocolos iniciando com GnRH. A administração de BE ao início do protocolo esteve associada a maior luteólise entre D0 e PGF (~33%). No momento da retirada do implante (D7), protocolos à base de GnRH promoveram maior folículo dominante, e além disso, mais expressão de estro até a IATF. Contudo, apenas em novilhas observou-se maior folículo dominante no momento da IATF para o grupo GnRH. Ambos protocolos (iniciados com GnRH ou BE) obtiveram altas taxas de ovulação após a IATF (~92%). Em novilhas, não se observou efeito de tratamento (BE vs. GnRH no D0, com vs. sem GnRH na IATF) ou interações sobre a prenhez/IA (P/IA). Entretanto, em vacas, protocolos à base de BE obtiveram maior P/IA quando houve a administração de GnRH no momento da IATF (60,2% vs. 69,5%). Além disso, GnRH na IATF também favoreceu a P/IA de vacas que não expressaram estro durante o protocolo (Sem cio: sem GnRH 48,2% vs. com GnRH 59,1%), apesar de não ter sido observado este efeito em novilhas. O terceiro estudo avaliou a fertilidade e dinâmica ovariana de vacas Nelore submetidas a protocolo à base de P4 com duração de 7 d utilizando 0,5 ou 1,0 mg de CE no momento da retirada do implante (D7). Apesar de 1,0 mg CE produzir menor folículo preovulatório e menor taxa de ovulação após a IA em multíparas, a P/IA foi semelhante para ambas as doses nesta categoria (multíparas: 0,5 mg = 58,4% vs. 1,0 mg = 59,0%). Contudo, primíparas tiveram menor P/IA ao receber 0,5 mg CE (primíparas: 0,5 mg = 30,2% vs. 1,0 mg = 53,6%). Portanto, os estudos permitiram um conhecimento mais refinado em relação a protocolos à base de P4 em Bos indicus, especialmente quanto à eficiência de protocolos de 7 d e inclusão de GnRH tanto ao início quanto ao final.

A Inseminação Artificial (IA) é a biotécnica que proporciona a maior pressão de seleção no melhoramento genético de um rebanho e, portanto deveria ser imprescindível na pecuária moderna. A ineficiência na detecção de estro e a baixa ciclicidade ovariana no período pós-parto constituem um grande entrave na aplicabilidade de programas de IA. Frente a estas dificuldades, o uso da Inseminação Artificial em Tempo Fixo (IATF) vem incrementando os resultados obtidos, uma vez que elimina a necessidade de observação de estro e induz a ciclicidade de vacas em anestro pós-parto. Nos protocolos de IATF é de fundamental importância o uso dos dispositivos intravaginais para liberação de progesterona (P4). No mercado atual, estes dispositivos importados são fabricados à base de silicone, um polímero biocompatível, porém não biodegradável. Recentemente, dispositivos intravaginais de P4, incorporada à matriz polimérica biodegradável de poli-hidroxibutirato (PHB), vêm sendo estudados. Este trabalho teve como objetivo comparar a eficiência, em programa de IATF, de um novo dispositivo intravaginal (Progestar®), na taxa de prenhez, em bovinos da raça Nelore, com a do dispositivo à base de silicone, DIB®, atualmente disponível no mercado brasileiro. Foram utilizadas 240 vacas da raça Nelore, em um delineamento de blocos casualizados generalizados, divididas em dois grupos (controle - DIB® e tratamento - Progestar®, usados nos protocolos de sincronização e IATF). Foram realizados 2 experimentos distintos: no primeiro experimento utilizaram-se dispositivos de 1º uso (n=136), enquanto que no segundo experimento, dispositivos de 2º uso (n=104). As taxas de prenhez, decorrentes da IATF (TPIATF) e ao final da estação de monta (TPEM) (variáveis dependentes), foram comparadas por análise de variância, separando o efeito de tratamento, dos blocos e das interações. No experimento 1: não houve interação das variáveis com o tratamento; não houve efeito de tratamento sobre a TPIATF (DIB® - 66,7% e Progestar® - 65,8%) nem sobre a TPEM (DIB® - 95% e Progestar® - 94,7%); houve interação entre período pós-parto (PPP) e escore de condição corporal (ECC). Animais no PPP1 (45 a 70 dias) e ECC4 apresentaram resultados inferiores na TPIATF em relação aos animais ECC5 e 6; houve também interação entre PPP e escore de condição ovariana (ECO), em que animais no PPP2 (71 a 90 dias) que não estavam ciclando apresentaram resultados inferiores de TPIATF, em relação aos animais ciclando; e também não houve efeito das demais variáveis sobre a TPIATF e TPEM. No experimento 2: não houve interação das variáveis com o tratamento; não houve efeito de tratamento sobre a TPIATF (DIB® 2 - 61,6% e Progestar® 2 - 55,8%) nem sobre a TPEM (DIB® 2 - 94,2% e Progestar® 2 - 88,5%); houve interação entre categoria animal (Cat) e PPP, em que primíparas no PPP1 (32 a 55 dias) apresentaram resultados inferiores na TPEM em relação às primíparas no PPP2 (56 a 90 dias); houve também interação entre PPP e ECC, em que animais no PPP2 e com ECC4 apresentaram resultados inferiores de TPEM, em relação aos animais com ECC5; e também houve efeito negativo do PPP1 sobre a TPIATF e de um dos touros na TPEM. Após a realização do experimento concluiu-se que o Progestar® possui semelhante eficiência na taxa de prenhez, quando comparado ao DIB® e que ambos tratamentos têm potencial para proporcionar TPIATF acima de 50% e TPEM acima de 90%. / The artificial insemination (AI) is a biotechnique that causes the fastest genetic improvement of a herd and, therefore should be essential in the modern livestock. Heat detection inefficiency and low ovarian ciclicity in the postpartum period establish a great obstacle on applicability of AI programs. In front of these difficulties, the use of timed artificial insemination (TAI) improves the results, because eliminates the heat detection and induces the ciclicity of cows in anestrous postpartum. In TAI protocols is fundamental the use of intravaginal devices for releasing progesterone (P4). In the current market, these devices are imported and made of silicone, a biocompatible polymer, but not biodegradable. Recently intravaginal progesterone devices made of PHB, a biodegradable polymer, have been studied. The aim of this study was to compare the efficiency, in TAI program, of a new intravaginal device (Progestar®), on pregnancy rate, in Nelore cows, with a device made of silicone DIB®, currently available in the brazilian market. Were used 240 Nelore cows, in a generalized randomized block design, divided in two groups (control - DIB® and treatment - Progestar®, used in the synchronization protocols and TAI). Two experiments were done: the first experiment used new intravaginal devices (n=136), while the second experiment utilized used intravaginal devices (n=104). The pregnancy rates, of TAI (TAIPR) and breeding season (BSPR) (dependent variables), were compared by analysis of variance, separating the treatment, blocks and interactions effect. In experiment 1: there was no interaction between variables and treatment; there was no effect of treatment on TAIPR (DIB® - 66,7% and Progestar® - 65,8%) and on BSPR (DIB® - 95% and Progestar® - 94,7%); there was an interaction between postpartum period (PPP) and body condition score (BCS), in which animals in PPP1 (45 to 70 days) and BCS4 showed inferior results on TAIPR related to animals BCS5 and 6; there was also an interaction between PPP and ovary condition score (OCS), in which animals in PPP2 (71 to 90 days) not cyclic showed inferior results on TAIPR, related to cyclic animals; and there was also no effect of variables on TAIPR and BSPR. In experiment 2: there was no interaction between variables and treatment; there was no effect of treatment on TAIPR (DIB® 2 - 61,6% and Progestar® 2 - 55,8%) and on BSPR (DIB® 2 - 94,2% and Progestar® 2 - 88,5%); there was an interaction between animal category (Cat) and PPP, in which primiparous in PPP1 (32 to 55 days) showed inferior results on BSPR, related to primiparous in PPP2 (56 to 90 days); there was also an interaction between PPP and BCS, in which animals in PPP2 and BCS4 showed inferior results on BSPR, related animals BCS5; and there was also negative effect of PPP1 on TAIPR and one of the bulls on BSPR. This experiment showed that the Progestar® had the same efficiency on pregnancy rate, as the commercially available DIB® and both treatments have the potential to provide TAIPR above 50% and BSPR above 90%.

O estabelecimento gestacional é determinado por interações entre o perfil endócrino e o trato reprodutivo materno. Eventos endócrinos são primariamente mediados pela ligação do hormônio a receptores específicos e subsequente transcrição de genes alvos. O endométrio bovino é um tecido dinâmico que passa por alterações espaço-temporais dirigidas pelos hormônios ovarianos, estradiol (E2) e progesterona (P4). A hipótese é que os efeitos combinados das concentrações plasmáticas de E2 e P4 à abundância tecidual de seus respectivos receptores estabelecem um “tônus de esteroides sexuais” que dirige funções do endométrio durante o período periovulatório em vacas. Os objetivos foram comparar diferentes tônus de esteroides na (1) expressão de receptores específicos e sua distribuição tecidual, (2) expressão de genes de resposta que regulam a função uterina, e (3) abundância e distribuição de mucina pelo epitélio, uma glicoproteína que indica pobre receptividade endometrial. Vacas Nelore (Bos indicus) foram farmacologicamente manipuladas para ovular um folículo pequeno (FP-CLP) ou grande (FG-CLG) e produzir, respectivamente, menores ou maiores concentrações plasmáticas de E2 no proestro e de P4 no diestro. O grupo FG-CLG representa um modelo de maior fertilidade. Tecido endometrial foi coletado através de biópsia transvaginal no dia zero (D0; FP-CLP, n=4; FG-CLG, n=5) e post mortem no D4 (n=8 por grupo; Experimento 1) ou D7 (FP-CLP, n=8; FG-CLG, n=9; Experimento 2) após indução da ovulação com GnRH. Para estudar a regulação endometrial dos receptores de esteroides, a abundância de transcritos para receptores nucleares e de membrana de esteroides foi mesurada por qPCR: receptor de estrógenos alpha (ESR1) e beta (ESR2), receptor de estrógeno acoplado a proteína G (GPER), receptor de P4 isoformas A (PGR1), B (PGR2) e C (PGR3), receptor de P4 componente de membrana 1 (PGRMC1) e 2 (PGRMC2). Genes previamente mostrados estarem envolvidos em vias de resposta ao E2 foram selecionados: GREB1, CCND1, WNT5a, FGF2 (proliferação), SERPINA14, LTF, NRIP1 (atividade secretória), MMP2 (remodelamento de matriz extracelular), AQP4 (transporte de água) e MUC1 (adesão celular). Os dados foram analisados por one-way ANOVA para efeito de tratamento. O tamanho do POF, subsequente CL, concentrações plasmáticas de E2 (D0) e P4 (D4 e D7) foram significativamente maiores no grupo FG-CLG. No D0, a abundância de mRNA para ESR1, PGR1, PGR2 e PGR3 foi significativamente maior no tecido endometrial de vacas do grupo FG-CLG. A abundância de transcritos envolvidos na proliferação e remodelamento de matriz extracelular sugeriu maior atividade proliferativa e remodelamento no endométrio do grupo FG-CLG no D0. No D4, a expressão de PGR1 e PGRMC2 foi menor no grupo FG-CLG. A abundância de mRNA para AQP4 foi maior no grupo FG-CLG e positivamente correlacionada com a concentração de E2 pré-ovulatório. No D7, a abundância de mRNA foi maior para ESR2, PGRMC1 e PGRMC2, e reduzida para PGR2 e PGR3 em vacas do grupo FG-CLG. Abundância de mRNA para OXTR e MUC1 foi menor neste grupo. Análise histológica de amostras endometriais revelaram que o sinal para mucinas anti-adesivas no epitélio do grupo FG-CLG foi consistentemente menor quando comparado ao grupo FP-CLP (33.3% vs. 62.0%) no D7. A menor expressão de mucinas transmembranas indica a condição receptiva do endométrio. Estes resultados confirmam que a complexa modulação da expressão dos receptores de esteroides pelo ambiente endócrino periovulatório altera a transcrição de genes alvos de maneira tempo-específica para regular a receptividade uterina ao embrião em desenvolvimento / Establishment of pregnancy depends on a well-balanced interplay between the endocrine profiles and the maternal reproductive tract. Endocrine actions are primarily mediated by binding to specific receptors and subsequent transcription of responsive genes. The bovine endometrium is a dynamic tissue that undergoes spatiotemporal functional changes directed by ovarian hormones, estradiol (E2) and progesterone (P4). Hypothesis is that the combined effects of plasma concentrations of E2 and P4 and tissue abundance of their respective receptors establish a “sex steroid tone” that directs endometrial function during the periovulatory period in cattle. Therefore, the aims were to compare different sex steroid tones on (1) steroid receptors gene expression and protein distribution, (2) expression of steroid responsive genes that regulate uterine function and (3) abundance and distribution of epithelial mucin, a glycoprotein that indicates poor endometrial receptivity. Nelore (Bos indicus) cows were pharmacologically manipulated to ovulate small (SFSCL) or large (LFLCL) follicles. Consequently, LF-LCL group was associated with greater proestrus concentrations of E2 and diestrus concentrations of P4, which were previously associated with greater receptivity and fertility. Endometrial tissue was collected by transvaginal biopsy on day zero (D0; SF-SCL, n=4; LF-LCL, n=5), and post mortem on D4 (n=8 per group; Experiment 1) or D7 (SF-SCL, n=8; LF-LCL, n=9; Experiment 2) after GnRH-induced ovulation. To study the regulation of endometrial steroid receptors, abundance of the following transcripts for nuclear and membrane receptor for steroids was measure by qPCR: estrogen receptor alpha (ESR1) and beta (ESR2), G protein-coupled estrogen receptor (GPER), progesterone receptor isoforms A (PGR1), B (PGR2) and C (PGR3), progesterone receptor membrane component 1 (PGRMC1) and 2 (PGRMC2). A subset of genes previously shown to be involved with estrogen-dependent pathways was also studied: GREB1, CCND1, WNT5a, FGF2 (proliferation), SERPINA14, LTF, NRIP1 (secretory activity), MMP2 (extracellular matrix remodeling), AQP4 (aqueous transport) and MUC1 (cell-adhesion pathways). Data were analyzed by one-way ANOVA for the effect of treatment. The POF, subsequent CL size, plasmatic E2 (D0) and P4 concentrations (D4 and D7) were significantly greater in the LFLCL group. On D0, the abundance of mRNA for ESR1, PGR1, PGR2 and PGR3 genes was significantly up-regulated in the endometrial tissue from LFLCL cows compared to the SFSCL counterparts. Abundance of transcripts for growth-related and extracellular matrix remodeling-related genes suggested greater proliferative and remodeling activity on LF-LCL than SF-SCL endometrial tissue at D0. On D4, expression of PGR1 and PGRMC2 was down-regulated in the LFLCL group. The AQP4 mRNA abundance was greater in LF-LCL group and it was positively correlated with preovulatory E2 concentration. On D7, mRNA abundance was greater for ESR2, PGRMC1 and PGRMC2, while it was reduced for PGR2 and PGR3 in the LF-LCL cows. Abundance of mRNA for secretory activity-related genes was increased in LF-LCL group. Abundance of mRNA for OXTR and MUC1 was down-regulated in the LF-LCL group. Histology of endometrial samples revealed that the signal for anti-adhesive mucin at the LF-LCL epithelium was consistently lower than that of the SF-SCL tissue (33.3% vs. 62.0%) at D7. A down-regulated expression of the transmembrane mucin indicates a receptive condition of the endometrium. These results confirm that complex modulation of receptor expression by the periovulatory steroid milieu alters transcription of responsive genes in a time-specific manner to regulate uterine receptivity to the developing embryo

Avaliou-se a influência do desenvolvimento corporal na ciclicidade, na resposta ovariana e na taxa de prenhez à inseminação artificial em tempo fixo (IATF) de novilhas da raça Nelore ao sobreano (Experimento 1). Ainda, avaliou-se a eficiência de um protocolo de indução de ciclicidade (Experimento 2) previamente ao protocolo de IATF. No Experimento 1, 650 novilhas de 13,9&#177;0,03 meses de idade foram submetidas ao mesmo protocolo de sincronização da ovulação para IATF. Dez dias antes do início do protocolo de sincronização (Dia -10), as novilhas foram avaliadas quanto à idade (meses), peso (kg), escore de condição corporal (ECC, escala de 1 a 5), altura de cernelha (hCERN, cm) e relação altura/profundidade de costela (pCOST,% ) escore do trato reprodutivo (ETR, escala de 1 a 5), ciclicidade (presença de CL) e espessura de gordura subcutânea na garupa (EGPU, mm). No Dia 0, as fêmeas foram submetidas a sincronização da ovulação, recebendo IATF 10 dias após (Dia 10). Foram determinados por ultrassonografia a taxa de ciclicidade (presença de CL no Dia -10 e/ou Dia 0) os diâmetros do maior folículo presente no Dia 8 (FDD8), no Dia 10 (FDIA), presença de CL no Dia 17 (ovulação) e taxa de prenhez 30 dias após a IATF. Com relação à análise univariável, não houve diferença na taxa de ciclicidade com relação à hCERN e pCOST (P&gt;0,05), mas isoladamente a idade, o peso, o ECC e a EGPU foram associados com incremento na taxa de ciclicidade (P&lt;0,05). Entretanto, na análise multivariável o parâmetro retido no modelo foi a EGPU (&gt;3,4mm; 19,4 vs. &le;3,4mm; 8,8%; P=0,002). O FDD8 não foi influenciado pela idade, ECC e pCOST (P&gt;0,05) quando analisados de maneira isolada. Entretanto, o peso, hCERN, EGPU e ETR foram associados com maior FDD8 (P&lt;0,05). Contudo, ao se avaliar todos os parâmetros de maneira conjunta, houve efeito de hCERN (&gt;121,5=7,2 vs. &le;121,5=6,9mm; P=0,03), EGPU (&gt;2,6=7,4 vs. &le;2,6=6mm; P=0,02) e ETR (1=6,9ab;2=7,4ab; 3=7,1ab; 4=7,7ª; 5=6,3mmb; P=0,002) sobre o FDD8. O CrescFD e a taxa de ovulação não foram influenciados por nenhum dos parâmetros avaliados, em ambas as análises (P&gt;0,05). Ainda, na análise univariável a hCERN e o ETR (P&gt;0,05) não resultaram em efeito na taxa de prenhez, mas a idade, o peso, o ECC, a pCOST e a EGPU foram associados com incremento no sucesso gestacional (P&lt;0,01). Entretanto, ao se utilizar a análise multivariável os parâmetros retidos no modelo foram a idade (&gt;13,8=43,0 vs. &le;13,8=27,2; P=0,04), a pCOST (&gt;44,0=41,9 vs. &le;44,0=27,0; P = 0,02) e a EGPU (>2,5=44,4 vs. &le;2,5=23,4%; P=0,0003). No Experimento 2, 626 novilhas de 14,2±0,03 meses de idade foram aleatoriamente distribuídas em dois grupos experimentais: Indução (n=307; dispositivo de P4 usado durante 10 dias mais 0.6mg de CE no momento da retirada) e Controle (n=319). Doze dias após a retirada do dispositivo de P4 (Dia 0) todas as fêmeas foram submetidas a protocolo de sincronização para IATF conforme descrito no Experimento 1. As novilhas que receberam o protocolo de indução tiveram maior (P<0,0001) taxa de ciclicidade (75,2%) no Dia 0 em relação ao controle (7,8%). Entretanto, semelhante taxa de prenhez à IATF foi verificada entre os tratamentos (Controle 42,9 vs. Indução = 43,0%; P=0,40). Conclui-se que os parâmetros de desenvolvimento corporal apresentam relação positiva com a ciclicidade e a resposta ao protocolo para IATF em novilhas raça Nelore ao sobreano. Além disso, o estímulo hormonal prévio aumentou a proporção de novilhas com CL no início do protocolo de IATF, entretanto, não influenciou a taxa de prenhez à inseminação artificial / The influence of body development on ciclicity, ovarian response and pregnancy rate after timed artificial insemination (TAI) was evaluated in yearling Nelore beef heifers (Experiment 1). Furthermore, the efficiency of a protocol for ciclicity induction, previously to the TAI was tested (Experiment 2). At Experiment 1, 650 heifers aged 13,9 ± 0.03 months were submitted to the same ovulation synchronization protocol for TAI. Ten days before the beginning of the TAI protocol (Day -10), all females were evaluated for age (months), weight (kg), body condition score (BCS, 1 to 5 scale), withers height (hCERN, cm) and whiters height/depth of rib relationship (pCOST, %), reproductive tract score (RTS, 1 to 5 scale) ciclicity (presence of a CL) and subcutaneuos fat thickness (EGPU, mm). At Day 0, all heifers were submitted to the ovulation synchronization, receiving TAI after 10 days (Day 10). The ciclicity (presence of a CL at Day -10 and/or Day 0), diameter of the biggest follicle at Day 8 (FDD8) and Day 10 (FDIA) as the ovulation rate at Day 17 and pregnancy rate at Day 30 were determined by ultrassonography. In relationship to the univariable analysis, there was no difference of ciclicity rate according to hCERN and pCOST (P>0.05), but age, weight, BCS, and EGPU were associated to greater ciclicity (P<0.05). However, considering the multivariable analysis, heifers with greater EGPU (>3.4mm; 19.4%) presented greater (P=0.002) ciclicity rate in comparison to heifers with lesser EGPU ( &le;3.4mm; 8.8%). The FDD8 was not influenced by age, BCS and pCOST (P>0.05) and was influenced by hCERN, EGPU and RTS when the variables were singly analyzed. Nevertheless, there was an effect of hCERN (>121.5=7.2 vs. &le;121.5=6.9; P=0.03), EGPU (>2.6=7.4 vs. &le;2.6=6.0; P=0.02) and RTS (1=6.9ab; 2=7.4ab; 3=7.1ab; 4=7.7ª; 5=6.3 mmb; P=0.002) over the FDD8, when all variables were analyzed together. The ovulation rate was not influenced by any of the evaluated parameters (P>0.20). Still, considering the univariable statistical model, there was no effect of hCERN and RTS (P=0.05) on pregnancy rate, but age, weight, BCS, pCOST and EGPU were associated with increased pregnancy rate to TAI (P<0.05). Still, heifers with more age (>13.8=43.0 vs. &le;13.8=27.2; P=0.04), greater pCOST (>44.0=41.9 vs. &le;44.0=27.0%; P = 0.02) and greater EGPU (>2.5=44.4 vs.&le;2.5mm=23.4%; P=0.0003) presented greater pregnancy rate when all varaiables were analyzed together. At Experiment 2, 626 heifers aged 14.2±0.03 months were randomly allocated in two experimental groups: Induction (n=307; used P4 device during 10 days plus 0.6mg EC at device removal) and Control (n=319). Twelve days after P4 device removal (Day 0) all females were submitted to the same ovulation synchronization protocol described in Experiment 1. Heifers from Induction group (75.2%) had greater (P<0.0001) ciclicity rate at Day 0 in comparison to Control (7.8%), but similar pregnancy rate to 1st TAI (Control 42.9 vs. Induction 43.0%; P=0.40). It is concluded that the body developmental parameters presents positive relationship with ciclicity and response to the TAI protocol in Nelore yearling heifers. Moreover, a previous hormonal stimulus increases the proportion of heifers with a corpus luteum at the beginning of the TAI protocol, but does not affect pregnancy rate to the artificial insemination

O presente estudo foi realizado no Laboratório de Reprodução Animal da Empresa Agropecuária Laffranchi Com. Ind. LTDA, localizada no município de Tamarana - Paraná. O experimento se refere aos resultados obtidos na produção in vitro de embriões através da aspiração folicular transvaginal em bovinos das raças Nelore (não CEIP, Bos indicus, n = 34), Nelore (CEIP, Bos indicus, n = 22). Brangus (5/8 Bos taurus x 3/8 Bos indicus, n = 64) e Girolando (5/8 Bos taurus x 3/8 Bos indicus, n = 52) totalizando 172 animais, no período de O 1 janeiro de 2010 a 31 de dezembro de 2012. Todos os animais foram submetidos à OPU (Ovum Pick Up) totalizando 397 procedimentos entre as doadoras, sendo 104 OPUs em Nelore (não CEIP), 52 OPUs em Nelore (CEIP). 133 OPUs em Brangus e 108 OPUs em Girolando. Com estes procedimentos foram aspirados 7335 oócitos, destes 3597 foram considerados viáveis (49%), produzindo 969 embriões (26.93%), destes foram transferidos 922 embriões em receptoras previamente selecionadas, resultando em 266 prenhes (taxa de prenhes 28.85%). Após a obtenção dos oócitos estes eram enviados para o laboratório acima citado para maturação, fecundação e cultivo in vitro, em um período de oito dias. Os embriões produzidos eram transferidos para receptoras de embrião previamente selecionadas e submetidas ao protocolo de TETF (transferência de embrião em tempo fixo), sendo o diagnóstico de gestação realizado aos 30 dias com auxílio de ultrassonografia transretal. Na raça Brangus recuperou-se um total de 2139 oócitos sendo 967 viáveis (45,2%), destes foram obtidos 272 embriões os quais foram transferidos 241 embriões resultando em 81 prenhezes (33.3%). Na raça Girolando, foram recuperados 1806 oócitos, destes 972 foram considerados viáveis (53.8%) e resultaram na produção de 251 embriões (25.8%), os quais foram transferidos 245, obtendo-se 61 prenhezes (24.9%). Com relação às doadoras da raça Nelore (CEIP). recuperou-se 1850 oócitos, destes 842 foram considerados viáveis (45.5%), resultando em 214 embriões (25.4%), obtendo-se 61 prenhezes (28.5%). Na raça Nelore (não CEIP) recuperou-se 1540 oócitos sendo 816 considerados viáveis (53.0%), os quais resultaram na produção de 232 embriões (28.4%), sendo transferidos 222 dos quais se obteve 63 prenhezes (28.4%). De acordo com a análise estatística observou-se que a raça Nelore (CEIP) teve resultados superiores de (P< 0.0001) em relação à média total de oócitos por OPU, total de oócitos viáveis por sessão de OPU (P< 0.0001), produção de embriões (P< 0.0001) e prenhes por OPU (P<O,0115). O presente trabalho forneceu dados inéditos de PIVE para discussão nas raças sintéticas Brangus e Girolando ( Bos taurus x Bos indicus), em larga escala, porém, o experimento também destaca a necessidade de mais estudos relacionados à produção in vitro de embriões nessas raças. Quanto ao comparativo entre as raças, observou que a quantidade total de oócitos não variou de acordo com as raças Brangus, Girolando e Nelore (não CEIP), no entanto podemos notar uma grande variação individual de animais da mesma raça, Nelore (CEIP) e Nelore (não CEIP), onde se obteve nas fêmeas da raça Nelore (CEIP, selecionadas) uma maior produção total de oócitos, oócitos viáveis e embriões por sessão de aspiração. / This study was developed at the Laboratory of Animal Reproduction from the \"Empresa Agropecuária Laffranchi Com. Ind. LTDA\", town of Tamarana, Paraná State, Brazil. Results from in vitro production of cattle embryos through follicular aspiration in the breeds Nelore (no CEIP, Bos indicus, n = 34), Nelore (CEIP, Bos indicus, n = 22), Brangus (5/8 Bos taurus x 3/8 Bos indicus, n = 64) e Girolando (5/8 Bos taurus x 3/8 Bos indicus, n = 52) from January 1st of 2010 to December 31th of 2012 were used totalizing 397 oocyte donors OPU. From those, 104 OPU were realized in Nelore (no CEIP), 52 OPUs in Nelore (CEIP), 133 OPUs in Brangus, and 108 OPUs in Girolando. The total of recovered oocytes was 7335. Then, the oocytes were sent to the Laboratory for in vitro maturation, fertilization and culture during a period of eight days. The number ofviable oocytes was 3597 (49%) and 969 embryos were in vitro produced (26.9%). A total of 922 were transferred to recipients previously selected and submitted to estrous synchronization using the farm routine FTET (fixed-time embryo transfer) protocol. The pregnancy rate was 28.9% (266 pregnancies). Pregnancy diagnosis was done at the embryo age of 30 days using B-mode transrectal ultrasonography. From Brangus cows, a total of 2139 oocytes were recovered and 967 were c1assified as viable (45.2%), 272 embryos were produced and 241 were transferred resulting in 81 pregnancies (33.3%). From Girolando cows, 1806 oocytes were recovered and 972 c1assified as viable (53.8%). A total of 251 embryos (25.8%) were produced, 245 transferred and the pregnancy rate was 24.9% (61 pregnancies).From the Nelore CEIP cows, a total of 1850 oocytes were recovered and 842 were c1assified as viable (45.5%), 214 embryos were produced and 214 were transferred resulting in 61 pregnancies (28.5%).From Nelore cows, 1540 oocytes were recovered and 816 c1assified as viable (53.0%). A total of 232 embryos (28.4%) were produced, 222 transferred and the pregnancy rate was 28.4% (63 pregnancies).The Nelore CEIP presented superior results for the number of oocytes recovered per OPU (P<0.0001), for the total of viable oocytes per OPU (P<0.0001), embryos produced (P<0.0001), and total of pregnancies per OPU procedures (P<0.0115). This work presents for the first time data from IVPE from Brangus and Girolando breeds (Bos taurosx Bos indicus). When the four studied breeds were compared, the results showed a considerable variation between animais in the same breed. Also, it was observed, in the same breed Nelore, a superiority ofthe Nelore CEIP for oocyte recovery rate, viable oocytes e total of embryos produced by OPU procedure.

O presente trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos da introdução da linhagem materna, representando a herança mitocondrial, no modelo de avaliação genética para características de desenvolvimento (peso ao nascer, aos 120 dias, a desmama, ao ano e ao sobreano), perímetro escrotal e temperamento de um rebanho Nelore. O banco de dados era composto pelo registro de produção de 24.498 animais e o de genealogia, de 27.476. Com o intuito de estimar componentes de (co)variâncias e parâmetros genéticos, os dados foram analisados sob dois modelos, o primeiro igual ao atualmente utilizado nas avaliações genéticas desse rebanho, e o segundo incluiu o efeito de linhagem materna como efeito aleatório. A linhagem materna foi obtida traçando-se a partir de uma fêmea, uma linha até a última fêmea com registro no banco de dados, considerando-a uma fundadora. Dentre as características analisadas, o efeito de linhagem materna foi significativo (P < 0,05) somente para peso à desmama. Para essa característica, o efeito de linhagem materna foi responsável por grande alteração do "ranking" dos 1000 melhores animais, tanto para machos quanto para fêmeas. A variação entre as linhagens maternas pode promover diferenças de mais de 22 kg no peso a desmama, o que corresponde a 12,9% da média fenotípica / The present work had the objective to evaluate the effect of the introduction of the maternal lineage, representing the mitocondrial inheritance, in the model of genetic evaluation for growth characteristics (weights at birth, 120 days, weaning, year and 18 months), scrotal perimeter and temperament of one Nelore herd. The data base was composed of 24.498 animals and pedigree, of 27.476. With intention of estimating the (co)variance components and genetic parameters, data were analyzed under two models: first the equal one that currently used in the genetic evaluations of this herd and second that included the maternal lineage effect as random effect. The maternal lineage was gotten tracing itself from a female, a line until the last female with register in the data base, considering she as a founder. Amongst the analyzed characteristics, the maternal lineage effect was significant (P < 0,05) only for weight weaning. For this characteristic, the maternal lineage effect was responsible for great alteration in the ranking of the 1000 better animals, as much for males and females. The variation of the maternal lineages can promote difference of more than 22 kg in the weight at weaning, corresponding to 12,9% of the phenotypic mean

A identificação de mecanismos moleculares é importante para entender os eventos fisiológicos que ocorrem durante o processo de maturação sexual. O objetivo deste trabalho foi semiquantificar o RNAm para os receptores de gonadotrofinas em células da granulosa de folículos dominantes em crescimento de novilhas Nelore pré-púberes, buscando associação com a fertilidade precoce. As novilhas foram separadas em Precoce (P, n=6) e Não Precoce (NP, n=16), de acordo com o diagnóstico positivo de gestação aos 15 meses de idade. Realizou-se exame ultra-sonográfico dos ovários durante 17 dias para a identificação da onda folicular, o folículo dominante com 8-9 mm foi aspirado via trans-vaginal. O RNA total foi extraído das amostras e convertido a DNA complementar que teve uma região amplificada para a expressão dos genes para os receptores de gonadotrofinas. A semiquantificação foi feita por análise digital onde levou-se em consideração a intensidade média das bandas (unidade arbitrária - UA) em gel de poliacrilamida (8%) corado com uma solução de TBE-brometo de etídio (0,02%). Foi utilizado o RNAm para o gene do GAPDH como controle interno para corrigir a expressão dos receptores de gonadotrofinas em função da quantidade de RNA em cada amostra. Não houve diferença entre P e NP na quantidade de RNAm para o receptor de FSH (FSHr, 1,14±0,07 e 1,19±0,04 UA) e de LH (LHr 0,79±0,12 e 0,78±0,05 UA, respectivamente). Foi detectada a presença de splicing alternativo do RNAm para o receptor de LH (LHrs), pelo aparecimento de banda com peso molecular diferente, em todos os animais do experimento, constatando-se através do sequenciamento que o material apresentava a deleção do exon 10. As novilhas P apresentaram maior percentagem de LHrs em relação ao LHr (LHrs/LHr) (83,66±4,26%) quando comparadas a NP (70,05±3,39%). A quantidade de RNAm para receptores de gonadotrofinas parece não estar relacionada com o aparecimento de fertilidade precoce, mas a maior percentagem de deleção do exon 10 no RNAm para o LHr pode estar envolvida com a fertilidade precoce em novilhas Nelore. / Identification of molecular mechanisms is important to understand the physiological events occurring during the process of sexual maturation. The objective of this work was to semiquantify the mRNA for gonadotropins receptors from granulosa cells of developing dominant follicles in pre-pubertal Nellore heifers and associate the results to precocious fertility. The heifers were sorted in Precocious (P, n=6) and Non Precocious (NP, n=16), according to positive pregnancy at 15 months of age. Ovarian ultrasound examination was performed through 17 days for follicular wave identification, the growing dominant follicle was aspirated at 8-9 mm. Total mRNA was extracted from the granulosa cells samples, converted to complementary DNA and had a region amplified for gene expression for gonadotropins receptors. The semiquantification was performed by digital analysis of intensity average for the bands (arbitrary unit - AU) in poliacrilamida gel (8%) stained with etidio TBE-bromide solution (0,02%). mRNA for GAPDH gene was used as internal control to correct the expression of gonadotropins receptors to the amount of mRNA in each sample. There was no difference between P and NP in the amount of mRNA for FSH receptors (FSHr, 1,14±0,07 and 1,19±0,04 AU) and LH receptors (LHr 0,79±0,12 and 0,78±0,05 AU, respectively). Heifers presented alternative splicing of mRNA for LH receptors (LHrs) evidenced through sequencing, as the absence of exon 10. P heifers presented greater percentage of LHrs in relation to LHr (LHrs/LHr) (83,66±4,26%) when compared the NP (70,05±3,39%). The amount of mRNA for gonadotropins receptors was not related with precocious fertility, but the greater percentage of exon 10 deletion from mRNA for LHr was associate the precocious fertility in Nelore heifers.

Grande parte das perdas embrionárias ocorrem nas três primeiras semanas após a inseminação e grande parte pode-se atribuir a baixas concentrações de progesterona. Desta maneira, o objetivo do presente experimento foi avaliar os efeitos e a interação entre o escore de condição corporal (ECC) e condição ovariana (EO) em vacas suplementadas com progesterona de longa ação (P4) após IATF sobre a taxa de prenhez em vacas de corte. Neste experimento foram utilizados 1573 vacas de corte, lactantes entre 30 e 60 dias pós-parto. As vacas tiveram a ovulação sincronizada iniciando-se no dia - 10 e foram inseminadas no dia 0. No dia 4, os animais foram blocados de acordo com ECC e EO e ordem de parto e divididos em dois tratamentos: (P4, n = 786) e (Controle, n = 787). Foram feitas avaliações ultrassonograficas dos ovários nos dias -10, 0 e 4, para mensurações de tamanho de folículo e corpo lúteo e no dia -10 foi feita a avaliação do ECC. A taxa de prenhez (P/IA) entre os grupos P4 vs CONTROLE não apresentou diferenças P=0,49. Vacas com ECC &gt; 2,75 tiveram melhora P/IA (P&lt;0,05) comparadas com vacas com ECC &le; 2,5. Vacas com presença de folículo &ge; 8 mm no dia -10 apresentou melhor P/IA (P&lt;0,05) comparadas com vacas com presença de CL ou folículo &lt; 8 mm. Vacas com folículo &ge;8 mm e CL apresentaram maior tamanho de folículo, maior área de CL, no entanto, os animais com presença de folículo &ge; 8 mm apresentaram maior taxa de concepção comparado com os animais com folículo &lt; 8 mm e com presença de CL. Concluimos que a suplementação com P4 após a IATF não melhora as taxas de prenhez, independente do ECC e do EO, no entanto, o ECC e o EO apresentam influências nas taxas de prenhez, onde os animais com melhor ECC no início do protocolo apresentaram melhor EO e maior taxa de prenhez. / Embryo loss commonly occurs in the first three weeks after insemination due to low progesterone (P4) concentrations. Therefore, this study evaluates the effects of body condition score (BCS) and ovarian condition (OC) on pregnancy rates (P/AI) in beef cows supplemented with long-acting P4 after timed artificial insemination (TAI). We used 1573 lactating Nellore cows at 30-60 days postpartum. The animals were pre-synchronized on Day -10 and inseminated on Day 0. On Day 4, they were evaluated for BCS, OC and parturition order and divided into two treatment groups: P4 supplementation (N= 786) and control group (N = 787). Ultrasound exams were performed on Days -10 and 0 to measure follicle diameter and on Day 4 to evaluate corpus luteum (CL) area. BCS was determined on Day -10. P/AI did not vary between P4 supplementation and control treatments (P = 0.49). Cows with BCS &gt; 2.75 had better P/AI than cows with BCS &le; 2.5 (P &lt; 0.05). Cows without CL and with follicle diameter &ge; 8 mm on Day -10 presented better P/AI than cows with follicle &lt; 8 mm or CL (P &lt; 0.05). In conclusion, P4 supplementation after TAI did not improve P/AI. However, BCS and OC affected P/AI and the animals with better BCS at the beginning of the experiment had better OC and P/AI.

A identificação do momento mais apropriado para realizar a inseminação artificial em tempo fixo (IATF) utilizando sêmen sexado pode aumentar a prenhez por inseminação (P/IA) e aumentar a utilização do sêmen sexado em fazendas de corte. Este trabalho teve por objetivo avaliar o melhor intervalo entre a inseminação e a ovulação na P/IA de vacas Nelore lactantes submetidas ao protocolo de IATF utilizando sêmen sexado. Um total de 339 vacas Nelore apresentando 30 a 60 dias pós-parto da fazenda experimental da APTA, em Colina-SP foram utilizadas. No início do tratamento as fêmeas receberam um dispositivo intravaginal contendo 1g de progesterona (Sincrogest®,Ourofino Saúde Animal) e a aplicação i.m de 2mg de BE (Sincrodiol®, Ourofino). Após oito dias, o dispositivo foi removido e aplicados via i.m 0,25 mg de cloprostenol sódico (Sincrocio® , Ourofino) e 300UI de eCG (Folligon® , Intervet-Schering Plough). As vacas foram homogeneamente distribuídas para receberem IATF com sêmen sexado de um único touro da raça Angus (2.1milhões de espermatozóides por dose) às 36, 48 e 60 horas após a retirada dos dispositivos. O intervalo entre as inseminações e ovulações foi determinado e as análises realizadas comparando a taxa de prenhez entre os intervalos. Exames ultrassonográficos (7.5MHz, CTS-3300V, SIUI, China) foram realizados duas vezes ao dia, a partir da retirada do implante até 96 horas após e aos 30 pós IA para realização do diagnóstico de gestação. A P/IA foi definida como o número de fêmeas prenhes divididas pelo número de fêmeas inseminadas em cada intervalo. Os dados encontrados foram analisados usando o programa estatístico SAS. A taxa de ovulação após o protocolo foi de 92.0 % (312/339), o diâmetro do folículo ovulatório de 14,7 ± 2,3 mm e o intervalo entre retirada do dispositivo e ovulação de 71.8 ± 7.7 horas [48 horas (6.73%; 21/312), 60 horas (0.64%; 2/312), 72 horas (80.77%; 252/312), 84 horas (11.22%; 35/312), e 96 horas (0.64%; 2/312)]. A P/IA aumentou conforme se atrasou o momento da inseminação: 36 horas (5,8%; 5/86)c, 48 horas (20.8%; 27/130)b e 60 horas (30.9%; 38/123)a. A P/IA foi maior quando as inseminações foram realizadas próximas ao momento da ovulação (0 a 12 horas antes da ovulação = 37,9 %; 35/95) do que as realizadas entre 12,1 a 24 horas (19,4%; 21/108; P = 0,05) ou com mais de 24 horas (5,8%; 5/87; P = 0,0001) antes da ovulação sincronizada. Vacas recentemente ovuladas tiveram P/IA semelhante às realizadas próximo ao momento da ovulação (36,4%; 8/22; P = 0,95). Concluiu-se que a P/IA utilizando sêmen sexado é aumentada quando as inseminações são realizadas próximas a ovulação sincronizada. No experimento 2, de ressincronização, foram avaliadas, as taxas de serviço, concepção e prenhez em vacas previamente sincronizadas e inseminadas em tempo fixo. Foram formados dois grupos: observação de estro e IATF, utilizando na IA sêmen sexado e convencional. Os resultados para os grupos observação de estro e IATF foram, respectivamente: taxa de serviço [(63,5% (61/96); 100% (88/88)], taxa de concepção [(41% (25/61); 11,4% (10/88)], taxa de prenhez [(26% (25/96); 11,4% (10/88)]. Os resultados para os grupos observação de estro e IATF de acordo com o tipo de sêmen utilizado foram, respectivamente: sêmen convencional taxa de concepção [(43,3% (13/30); 14,9% (7/47))]; taxa de prenhez [(27,49% (13/61); 14,9% (7/47))]; sêmen sexado taxa de concepção [(38,7% (12/31); 7,3% (3/41))]; taxa de prenhez [(24,57% (12/61); 7,3% (3/41))]. / The identification of most appropriate moment to perform the timed artificial insemination (TAI) using sex-sorted semen following synchronization protocol can be important to improve the fertility of sex-sorted semen and increase the use sexed semen technology in commercial beef farms. The aim of this study was evaluated the better interval to perform the TAI relative to synchronized ovulation in suckled cows. A total of 339 suckled multiparous Nelore cows from an experimental farm (APTA), in Colina-SP, were evaluated in this study. The protocol started between 30 and 60 days post-partum. Cows received one synchronization protocol using an intravaginal device containing 1.0g of progesterone (Sincrogest®, Ouro Fino) plus an i.m. injection of 2.0mg of EB (Sincrodiol®, Ouro Fino). Eight days later, the device was removed and 0.25mg i.m. injection of cloprostenol sodium (Sincrocio®, Ouro Fino) and 300IU of eCG (Folligon®, Intervet-Shering Plough) were administered. Cows were homogenously assigned to receive TAI using sex-sorted semen from a single sire (2.1 millions of sperm cell per straw) at 36, 48 or 60 hours after device removal. The TAI to ovulation interval of synchronized cows was determined and the analysis was performed to compare the pregnancy for TAI performed at various intervals before ovulation using 12 hours time intervals. Ovarian ultrasonographic examinations (CTS-3300V, SIUI, China) were performed twice daily from day of the device removal to 96 hours afterwards, to evaluate ovarian follicular dynamics and interval from device removal to ovulation. All females were examined for pregnancy 30 days after AI. The data were analyzed using the SAS program.Incidence of ovulation after the estrous synchronization protocol was 92.0 % (312/339). Diameter of ovulatory follicle was 14.7 ± 2.3 mm and the interval between the P4 device removal and synchronized ovulation occurrence was 71.8 ± 7.7 hours. The distribution of the synchronized ovulation relative to the device removal was: 48 hours (6.73%; 21/312), 60 hours (0.64%; 2/312), 72 hours (80.77%; 252/312), 84 hours (11.22%; 35/312), and 96 hours (0.64%; 2/312). The pregnancy per artificial insemination (P/AI) was increased (P <0.001) when the TAI was delayed 36 hours (5.8%; 5/86)c, 48 hours (20.8%; 27/130)b and 60 hours (30.9%; 38/123)a. Higher P/AI was achieved on TAI performed closer to ovulation (0 to 12 hours before ovulation = 37.9 %; 35/95) than TAI performed on 12.1 to 24 hours (19.4%; 21/108; P = 0.05) or > 24 hours (5.8%; 5/87; P = 0.0001) before the synchronized ovulation. Recently ovulated cows had P/AI similar to those performed around the time of ovulation (36,4%; 8/22). In conclusion, P/AI is increased when the TAI using sex-sorted is performed closer to synchronized ovulation in suckled Nelore cows. In experiment 2, resynchronization, were assessed the service rates, conception and pregnancy in cows previously synchronized and timed AI. Two groups were formed: estrous detection and TAI, using in AI, sexed and unsexed semen. The results for groups of estrus detection and TAI were, respectively, service rate [(63.5% (61/96) 100% (88/88)], conception rate [(41% (25/61), 11.4% (10/88))], pregnancy rate [(26% (25/96), 11.4% (10/88))]. The results for groups of estrus detection and TAI according the type of semen used were: conventional semen conception rate [(43.3% (13/30), 14.9% (7 / 47))] ; pregnancy rate [(27.49% (13/61), 14.9% (7 / 47))]; sexed semen conception rate [(38.7% (12/31) 7.3% (3 / 41))]; pregnancy rate [(24.57% (12/ 61), 7.3% (3 / 41))].

Foram avaliadas as concentrações plasmáticas de leptina e IGF-I do 8° ao 16° mês de idade de 36 novilhas Nelore e comparadas com a idade à primeira ovulação e precocidade sexual. Para a quantificação da leptina, foi validado um radioimunoensaio (RIA) utilizando anticorpo produzido contra leptina recombinante eqüina após inoculação em coelho. A especificidade, estabilidade, taxa de recuperação e efeito matriz indicaram que o ensaio foi adequado para a quantificação de leptina plasmática bovina. O IGF-I foi quantificado por Kit comercial (DSL). As amostras de sangue foram colhidas em intervalos de 4 dias e avaliadas nos 60 dias retrospectivos à primeira ovulação e de amostras mensais do 8° ao 16° mês de idade. A maioria das novilhas (83,3%) ovulou até o final do experimento e foram divididas em prenhes até os 16 meses de idade (33,3%), formando o grupo precoce (P), e não prenhes (50%), formando o grupo Não Precoce (NP) 16,7% das novilhas não ovularam (chamadas de NO) até o final do experimento. Não houve diferença (P > 0,05) na idade à primeira ovulação entre os grupos P (439±27,9 dias) e NP (445±36,8 dias). O peso aumentou (P < 0,01) nos 3 grupos, não diferiu (P > 0,05) entre as novilhas P e NP durante o experimento, mas as NO apresentaram peso inferior aos outros grupos a partir do 12°mês (P < 0,01). Nos 60 dias que antecederam a primeira ovulação, a concentração de leptina plasmática aumentou (P < 0,01) no grupo P, mas não nos grupos NP e NO (P > 0,5), porém não houve diferença entre os grupos (P > 0,5). Houve correlação entre a concentração de leptina plasmática e o peso corporal nos grupos P (r=0,36; P < 0,01) e NP (r=0,4313; P < 0,01), mas não no grupo NO (r=0,095; P > 0,5). A concentração plasmática de IGF-I aumentou (P < 0,01) nos 3 grupos do 8° ao 16° mês de idade, mas foi maior no grupo P (P < 0,01) do que nos NP e NO, que não diferiram entre si. Antes da primeira ovulação, não foi verificado aumento (P > 0,1) na concentração de IGF-I em nenhum dos grupos, porém a concentração foi maior no grupo P (P < 0,05). Pode-se concluir que a concentração de leptina, junto com o peso corporal foram importantes na primeira ovulação, enquanto o IGF-I, na determinação da precocidade sexual. / Plasmatic leptin and IGF-I were quantified from 36 Nelore heifers, and compared to age at first ovulation and sexual precocity. For leptin quantification, a radioimmunoassay, using antibody against recombinant equine leptin inoculated in rabbit was validated. The specificity, stability, recuperation tax and matrix effect showed that the assay was able to quantify for plasmatic bovine leptin quantification. The IGF-I was quantified with a commercial Kit (DSL). Blood samples were taken every 4 days and analyzed retrospectively 60 days before first ovulation and from mensal samples from 8th to 16th month of age. Most of the heifers ovulated (83.3%) until the end of experiment, those were divided in heifers that became pregnant until the 16° month of age (33.3%), named Precocious group (P), 50% that did not became pregnant were the non precocious group (NP) 16% of the heifers did not ovulated and were named NO. There was no difference (P > 0.05) in the first ovulation age between P (439±27.9 days) and NP (445±36.8 days) groups. The weight of the 3 groups increased (P < 0.01), but did not differ (P > 0.05) between P and NP heifers but NO showed lower weight (P < 0.01) after the 12th month (P < 0.01). Sixty days before first ovulation, plasmatic leptin concentration increased (P < 0.01) in P group, but did not in NP or NO (P > 0.5), and there were no difference between groups. (P > 0.5). There was correlation between plasmatic leptin and body weight in P (r=0.36; P < 0.01) and NP (r=0.4313; P < 0.01), but did not in NO group (r=0.095; P > 0.5). Plasmatic IGF-I concentration increased (P < 0.01) in the 3 groups, from 8th to 16th month of age, but was higher in P (P < 0.01) than NP and NO, that did not differ among themselves. Before first ovulation there was, no increase (P > 0.1) in IGF-I in none of groups, but concentration was higher in P (P < 0.05) group. It could be concluded that leptin concentration as well as body weight were important in first ovulation, while IGF-I, in the sexual precocity determination.