Made available in DSpace on 2017-07-21T14:42:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AlfredoNetto.pdf: 18534989 bytes, checksum: c34b879de095b568295379822bc30650 (MD5) Previous issue date: 2009-02-26 / During many years the sportive events had been left of side for the social scientists, however, the sport/soccer blunt as one of the biggest social phenomena of the present time, involving in its bigger public events each time, which if they leave to take for the emotions, being generated innumerable acts of violence. In this context some studies concerning the violence of the twisted ones organized in soccer sta-diums are had, however this research retakes this quarrel under a new prism, that is, under the point of view of the military policemen. Being the generating problem of this study centered in the understanding that the military policemen possess of the vi-olence generated for the Twisted ones Organized. In the construction of the research proper methods to a qualitative research of exploratory matrix had been used. To reach the objective considered initially it was looked to understand the violence meaning, the violence in the sport and more specifically in the soccer, and for this a bibliographical research was carried through . After that, basing in the theoretical re-ferential of Elias, categories had been arisen that could support the quarrel with the collected data, in the objective to arrive at the understanding that the military police-men possess on the violence of the Twisted ones Organized, being raised the follow-ing categories: psycho genesis, socio genesis, to be able, outsiders and the control of the violence. Searching to deepen the thematic one of the violence of the twisted ones organized in soccer stadiums a study of case on the classic Atletiba was carried through (game between the Coritiba Foot Ball Club e the Club Athletic Paranaense) carried through in the seventeenth day of October of a thousand nine hundred and ninety and nine, in the stadium Major Antonio Couto Pereira, in the city of Curitiba, game this considered one of the most violent occurrences in the state of the Paraná. For this study initially one searched to rescue the history and origin of the Twisted ones Organized of the Coritiba Foot Ball Club and the Athletic Club Paranaense and the legality of the action of the Military Policy in sport's squares (stadiums), beyond portraying under the different perspectives the facts of occurred violence in this clas-sic. On the basis of the raised theory was become fulfilled interviews, half-structuralized, applied the five military policemen, who were working in that game specify, with the objective to verify the perception that they possess concerning the categories in relation to the described environment. After he analyzes of the data concluded that the military policemen possess knowledge who are the state repre-sentatives detainer of the monopoly of the violence, that they possess the knowledge of the use of the legal violence and the abuse, however in certain confrontations they finish if exceeding, and that they possess a preconception on the twisted ones orga-nized, seeing them as, people wilderness, riotous that goes to stadiums with the ob-jective to provoke tumults, fight. Being many times the favor of the extinguishing of these twisted ones. / Durante muitos anos, os eventos esportivos foram deixados de lado pelos cientistas sociais, no entanto, o esporte/futebol desponta como um dos maiores fenômenos sociais da atualidade, envolvendo em seus eventos públicos cada vez maiores, os quais se deixam levar pelas emoções, gerando inúmeros atos de violência. Neste contexto, têm-se vários estudos acerca da violência das torcidas organizadas nos estádios de futebol, entretanto esta pesquisa retoma a discussão sob um novo pris-ma, ou seja, sob o ponto de vista dos policiais militares. Estando o problema gerador deste estudo centrado na compreensão que os policiais militares envolvidos no con-flito entre as Torcidas Organizadas no Atletiba de outubro de 1999 possuem da vio-lência gerada pelas Torcidas Organizadas. Na construção da pesquisa foram utiliza-dos métodos próprios a uma pesquisa qualitativa de cunho exploratório. Para alcan-çar o objetivo proposto, inicialmente procurou-se entender o significado de violência, a violência no esporte e mais especificamente no futebol, e para isso foi realizada uma pesquisa bibliográfica. Em seguida, embasando no referencial teórico de Nor-bert Elias, levantaram-se categorias que pudessem sustentar a discussão com os dados coletados, no objetivo de chegar à compreensão que os policiais militares possuem sobre a violência das Torcidas Organizadas, sendo levantadas as seguin-tes categorias: psicogênese, sociogênese, poder, outsiders e o controle da violência. Buscando aprofundar a temática da violência das torcidas organizadas nos estádios de futebol foi realizado um estudo de caso sobre o clássico Atletiba (partida entre o Coritiba Foot Ball Club e o Clube Atlético Paranaense) realizado no dia dezessete de outubro de mil novecentos e noventa e nove, no estádio Major Antonio Couto Pe-reira, na cidade de Curitiba, jogo este considerado um dos mais violentos ocorridos no estado do Paraná. Para este estudo inicialmente buscou-se resgatar a história e origem das Torcidas Organizadas do Coritiba Foot Ball Club e do Clube Atlético Pa-ranaense e a legalidade da ação da Polícia Militar em praças desportivas (estádios), além de retratar sob as diferentes perspectivas os fatos de violência ocorrida neste clássico. Com base na teoria levantada realizaram-se entrevistas, semi-estruturadas, aplicadas a cinco policiais militares, que estavam trabalhando naquele jogo específi-co, com o objetivo de verificar a percepção que eles possuem acerca das categorias em relação ao ambiente descrito. Após análise dos dados concluiu-se que os polici-ais militares envolvidos neste estudo possuem conhecimento que são os represen-tantes estatais detentores do monopólio da violência, que possuem o conhecimento do uso da violência legal e do abuso, no entanto em certos confrontos acabam se excedendo, e que possuem um conceito sobre as Torcidas Organizadas, vendo-os como baderneiros, arruaceiros, pessoas que vão aos estádios com o objetivo de provocar tumultos, brigas, sendo muitas vezes a favor da extinção dessas torcidas.

Made available in DSpace on 2017-07-21T14:43:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 luiz Marcelo de Lara.pdf: 1670140 bytes, checksum: 9e2aaeb2157ff203c89b8521ac39ece9 (MD5) Previous issue date: 2014-08-22 / Sport plays an important role in development of society, acting as an object of identifying individuals, as we can see in football. Football is a field in which individuals notice a moment to live in groups, especially as fans. This dissertation aims to understand the role of violence in football organized cheer, with the understanding of how these groups of fans are formed. In Brazil, soccer is very present in the social context, in which different individuals can participate in various ways, from athletes to fans. However, that sport in its modern features allows us to visualize situations in which violence is established in a certain way and in a certain sense. We used the theoretical framework of Norbert Elias for understanding society. The methodological approach takes as its point of departure, using semi-structured interview, because it is a case study of an organized cheer of the city of Ponta Grossa, the Trem Fantasma Cheer of Operário Ferroviário Sport Club. Violence is present in organized groups of football, but in relation to these supporters we observed the category in some moments, not in a significantly way. / O esporte ocupa importante papel no processo de desenvolvimento da sociedade, sendo objeto de identificação de indivíduos, como se observa no futebol. O futebol é um campo em que os indivíduos notam um momento para viverem em grupos, principalmente enquanto torcedores. Esta dissertação tem como objetivo principal entender o papel da violência nas torcidas organizadas de futebol, junto com o entendimento de como estes grupos de torcedores se formam. No Brasil, o futebol é muito presente no contexto social, em que diferentes indivíduos podem participar de diversas formas nesse esporte, desde atletas, praticantes e até torcedores. Porém, faz-se uma ressalva de que o esporte, em suas características modernas, nos permite visualizar situações em que a violência se instaura de uma determinada forma e de um determinado sentido. Utilizou-se de alguns autores para construir o referencial teórico, aproximando-se das configurações como entendimento de sociedade. O caminho metodológico tem como ponto de partida, com auxílio de entrevista semiestruturadas, por se tratar de um estudo de caso, com enfoque exploratório de uma torcida organizada da cidade de Ponta Grossa, a Torcida Trem Fantasma do Operário Ferroviário Esporte Clube. A violência é presente em grupos organizados de futebol, gerando situações que acabam interferindo em nossa sociedade.

Este estudo versa sobre uma investigação de viabilidade da utilização de redes neurais auto-organizadas na classificação e exploração de dados macroeconômicos. Para tanto, foi elaborado um método no qual foram empregadas topologias neurais auto-organizadas, procurando assim explorar as características de melhor desempenho de cada um dos modelos, sob um enfoque seqüencial e com o intuito de se adquirir conhecimento intermediário em cada uma de suas fases, diminuindo o impacto da complexidade tanto no tempo requerido para realização da tarefa quanto na análise dos resultados. Os próprios resultados obtidos sugerem que a utilização de redes neurais artificiais auto-organizadas na aquisição de conhecimento sobre bases de dados aplicáveis às Ciências Econômicas apresenta desempenho análogo aos modelos paramétricos tradicionalmente empregados na construção de cenários com tais informações. / This study turns on an inquiry of viability of the use of self-organizing neural nets in classification and exploration of macroeconomic data. For this purpose, a method in which had been used self-organized neural topologies was elaborated, looking to explore the better characteristics of performance of each one of the models, under a sequential approach and with objective of acquiring intermediate knowledge in each one of its phases, diminishing the impact of the complexity as in time consuming as in analysis of results. Main results obtained suggest the use of self-organized artificial neural nets in acquisition of knowledge on Economic databases presents analog performance to traditional parametric models in scenarios building.

A modificação de eletrodos por sistemas auto-organizados (SAM) é um dos temas mais discutidos em eletroquímica e eletroanalítica, principalmente por elevar a biocompatibilidade destas superfícies. O foco principal deste trabalho está na transferência eletrônica através das SAMs de moléculas de alcanotióis sobre a superfície de eletrodos de ouro. Com a finalidade de investigar o comportamento eletroquímico do par redox [Fe(CN)6]3-/[Fe(CN)6]4-,, as superfícies de ouro foram modificadas com SAMs de alcanotióis com cadeias carbônicas de diferentes comprimentos e suas misturas. Desta forma, foi possível observar que as superfícies modificadas com monocamadas com 2, 3 ou 4 átomos de carbono em sua cadeia permitem que a transferência de elétrons ocorra através da SAM, produzindo perfis voltamétricos muito similares aos observados com a superfície de ouro sem a modificação. Com cadeias carbônicas longas (até 11 átomos de carbono), a transferência eletrônica é totalmente bloqueada e nenhum perfil voltamétrico foi observado. Com o objetivo de explorar o bloqueio total da superfície modificada de moléculas de alcanotióis de cadeias longas, os excessos superficiais foram calculados por meio da carga voltamétrica obtida da dessorção redutiva. Observaram-se valores de excesso superficial próximos a 9,0x10-10 mol/cm2, o que demonstra uma cobertura completa dos sítios ativos da superfície, justificando assim a ausência da resposta eletroquímica. A superfície modificada com as misturas de monocamadas de cadeias carbônicas longas e curtas promoveu respostas voltamétricas interessantes, desde que as moléculas de cadeias curtas contenham menos que 4 átomos de carbono. Neste caso, respostas voltamétricas sigmoidais similares às de ultramicroeletrodos (UMEs) foram obtidas. Este efeito foi associado com a formação de conjuntos de UMEs formados na superfície do eletrodo. O raio e a separação entre os UMEs nestas superfícies foram calculados como sendo 42 e 221 µm, respectivamente. Um total de 60 UMEs foi encontrado na superfície modificada. Estes UMEs foram formados por moléculas de cadeias menores totalmente emparedadas por cadeias maiores (moléculas de ácido 11- mercaptoundecanóico). Este comportamento reforça o propósito de que a transferência dos elétrons ocorra através das monocamadas de cadeia menor e que as moléculas de cadeia longa bloqueiam a superfície. Todos os experimentos voltamétricos foram seguidos de análises de espectroscopia de impedância eletroquímica os quais permitiram determinar a resistência de transferência de carga para cada modificação. Superfícies modificadas com alcanotióis de cadeia longa apresentaram elevados valores de transferência de carga, enquanto que as superfícies modificadas com alcanotióis de cadeia curta apresentam baixos valores de transferência eletrônica, em concordância com o comportamento voltamétrico observado. Finalmente, a organização de cada monocamada foi monitorada utilizando a microbalança eletroquímica de cristal de quartzo. Pela variação de massa com o tempo de imersão do eletrodo na solução contendo o alcanotiól de interesse foi possível observar etapas de adsorção/dessorção, com o aumento da organização da monocamada. Os valores teóricos de variação de massa calculados para a formação de uma monocamada completa na superfície eletroquímica, apresentaram excelente concordância com os dados experimentais obtidos pelo monitoramento do sistema ao longo dos experimentos (depois de aproximadamente 2 horas de imersão). / The modification of electrode surfaces with self-assembled monolayer (SAM) is one of the top subjects in electrochemistry and electroanalysis, mainly due to its much enhanced biocompatibility. In this study, the focuses are centered in the electron transfer through SAMs of alkanothiols assembled onto gold electrode surfaces. In order to investigate the electrochemical behavior of the redox couple [Fe(CN)6]3-/[Fe(CN)6]4-, Au surfaces were modified with SAMs of long and short carbon chains alkanethiols, as well as with their mixtures. In this way, it was possible to observe that surfaces modified with monolayers of 2, 3 or 4 carbon atoms in the chain allowed electrons transfer to occur through the SAM, generating a voltammetric profile very similar to those observed on bare Au surfaces. With longer carbon chains (up to 11 carbon atoms), the electron transfer was totally blocked and none voltammetric profile was observed. Aiming to explain the total blockage of the surface with long chain alkanethiols modifications, the surface excess of molecules were measured by the voltammetric charge required for their reductive desorption. It was always observed surface excesses near to 9.0x10-10 mol/cm2, which is related to a full coverage of the active sites on the surface, thus justifying the absence of electrochemical response. The surface modification with mixtures of long and short carbon chains monolayers promoted very interesting voltammetric responses, as long as the short chains contain less than 4 carbon atoms. In this case, sigmoidal voltammetric responses were obtained, very similar to those observed for ultramicroelectrodes (UMEs). Such effect was associated to the formation of UMEs arrays in the electrode surface. The radius and separation of each UME in this surface array was evaluated as 42 and 221 µm, respectively. A value of 60 UMEs were found for the entire surface. These UMEs were formed by the short chain molecules totally walled by the long chain ones (mercaptoundecanoic acid molecules). Such behavior reinforces the proposition of electron transference through the short chain alkanethiol layer and surface blockage by the long chain one. All the voltammetric experiments were followed by electrochemical impedance spectroscopic analysis which allowed were determined the charge transfer resistance for each modification. Very large values were determined for long carbon chains while for the short chains much smaller resistance values were found, as expected by the voltammetric behavior. Finally, the assembling of each monolayer was followed by quartz crystal microbalance measurements. By the electrode mass variation with time of immersion in a solution containing the alkanethiol of interest it was possible to observe several steps of adsorption/desorption, as the organization of the monolayer increases. The theoretical values for mass variation for a full monolayer in the electrochemical surfaces were found to be in highly agreement with the experimental ones, measured in long time experiments (after approximately 2 hours of immersion).

A presente tese ambiciona apresentar o fenômeno das torcidas organizadas de futebol do Brasil (TOBR) sob a ótica do Estado brasileiro. O objetivo deste estudo é apresentar não somente o protagonismo do Estado no processo que levou à fundação das primeiras TOBR nos anos 1940, mas também a influência de suas instituições para o crescimento e difusão das TOBR, que atingiram seu auge nos estádios de futebol nos anos 1990. Além de analisar a importância do Estado, esta tese também se dedica à compreensão das funções exercidas pela mídia esportiva, pelos clubes de futebol e pelos governing bodies do esporte brasileiro no que diz respeito à mediação da relação entre Estado e torcedores de futebol. Para a produção desse texto foram usadas fontes primárias como jornais de época, revistas de época, entrevistas, relatos e arquivos pessoais e também fontes secundárias como livros, dissertações, teses e artigos produzidos sobre as temáticas pertinentes a este estudo. Concluiu-se que as associações de torcedores no Brasil têm uma existência fortemente vinculada ao que se chamou de regime de Futebol de Estado, um arranjo político-institucional no qual o esporte de um país passa a ser usado como ferramenta política pelo Estado. O regime de Futebol de Estado é uma criação nazifascista que foi importada por Getúlio Vargas para o Brasil no início dos anos 1940. É durante este regime que se formam as primeiras associações de torcedores no Brasil. O expediente do Futebol de Estado foi também utilizado em toda a década de 1970 pelo Regime Militar, durante o qual as TOBR se desenvolveram de forma mais intensa. Foi também durante esse período que a violência entre torcedores se tornou mais frequente, o que contribuiu para que a relação entre Estado brasileiro e as TOBR entrasse em crise, uma consequência do fim do interesse estatal no esporte e da consolidação de um novo regime esportivo no Brasil nos anos 1990, o de Futebol para Mercado. / This study aims to present the phenomenon of football-supporters\' associations in Brazil (or TOBR, acronym in Portuguese language for torcidas organizadas de futebol brasileiras) on the historical perspective of the Brazilian State. It focuses not only on the State\'s role in the process that led to the foundation of the first TOBRs during the 1940\'s, but also on the influence of its institutions for the growth and diffusion of TOBRs, who experienced their golden age in football stadiums in the late 1980\'s and early 1990\'s. In addition to the analysis of the State\'s role within this process, this study is also dedicated to understand the role played by the sports media, the football clubs and the governing bodies of the Brazilian sport in mediating the relationship between the State and football supporters. This text was written upon primary sources such as coeval newspapers, magazines, periodicals, personal files, reports and non-coeval interviews, as well as secondary sources such as books, dissertations, theses and papers produced on the issues which are pertinent to this study. It was concluded that the TOBRs\' existence in Brazil is strongly linked to what was called a setting of Football of State, which is a political-institutional arrangement in which the sport of a nation is used as a political tool by its State. The Football of State\'s setting is a Nazi-fascist creation that was brought to Brazil by Getúlio Vargas in the early 1940\'s. It was precisely during this regime that the first TOBRs were founded. The device of the Football of State was also used during the military regime throughout the 1970\'s, and it was under this rule that the TOBRs developed more intensely. It was also during this period that violence among supporters started to happen more frequently. The violence among football-supporters increased substantially during the 1980\'s and led to a crisis between the TOBRs and Brazilian State in the early 1990\'s, which was also triggered by the end of State\'s interest in sports and the consolidation of a new sports setting in Brazil during the 1990s, the Football for the Market.

A formação de redes colaborativas é uma importante forma das organizações estimularem a inovação, reduzirem custos e transferir conhecimentos. Uma forma particular de rede colaborativa, as redes auto-organizadas, demonstram grande capacidade de promover o aprendizado dos envolvidos, sistematizar o conhecimento e promover a inovação. Já os programas Seis Sigma, adotados por diversas organizações, possuem como objetivo principal a redução da variabilidade de um processo, resultando na redução de custos e melhoria da qualidade. A literatura sobre redes auto-organizadas pouco apresenta sobre a formação destas redes e a literatura sobre Seis Sigma é voltada a métodos estatísticos. Desta forma, o objetivo desta pesquisa é identificar os elementos para um modelo de referência baseado no programa Seis Sigma para a formação e gerência de redes de inovação auto-organizadas. Foram realizados cinco estudos de caso em diferentes organizações. Os programas Seis Sigma destas organizações foram modelos com o uso da metodologia Enterprise Knowledge Development (EKD). Com base na literatura estudada foram identificas as necessidades de mudanças que viabilizariam a formação de redes de inovação auto-organizadas. Como resultado tem-se os elementos para o modelo de referência para formação e gerência de redes de inovação auto-organizadas baseado no programa Seis Sigma. / The formation of collaborative networks is an important way for organizations to stimulate innovation, reduce costs and transfer knowledge. A particular form of collaborative network, the self-organized networks have shown great capability to promote the learning of those involved, systematize knowledge and lead to innovation. The Six Sigma programs, adopted by several organizations, have as main objective the process variability reduction, resulting in lower costs and quality improvement. The literature on self-organized networks presents little about the formation of these kind of networks and literature on Six Sigma is focused on statistical methods. Thus, the objective of this research is to identify the elements for a reference model based on the Six Sigma program for setting up and management of innovation selforganized networks. Five case studies were conducted in different organizations. The Six Sigma programs of these organizations were modeled using the Enterprise Knowledge Development (EKD) methodology. Based on the studied literature the needs for changes that enables the formation of innovation self-organized networks were identified. As a result there are the elements of the reference model for the formation and management of innovation self-organized networks based on the Six Sigma program.

O presente trabalho busca compreender a atuação das Torcidas Organizadas e, torantes especificamente, da Associação das Torcidas Organizadas do Rio de Janeiro, no contexto da anistia política vivenciada no Brasil. Esse também é um período onde se nota o esgotamento do Milagre econômico, com enorme inflação, que acarretou diretamente no aumento do custo de vida e, para os torcedores, na majoração do preço dos ingressos para os jogos de futebol. A alternativa encontrada é uma série de boicotes e greves das torcidas no afã de reduzir o valor das entradas, contando com ampla cobertura da mídia, especializada, Jornal dos Sports, Revista Placar, ou a mais geral, Jornal do Brasil. Nosso objetivo é compreender as diversas iniciativas tomadas pela ASTORJ para alcançar suas vitórias, o discurso presente em suas lideranças, e a maneira como foi construída essa relação dialética entre torcidas e órgãos da imprensa e, para tal, analisaremos reportagens de jornais, revistas e de colunas como A Voz da Galera, presente no Jornal dos Sports, que se somam a entrevistas realizadas por nós junto a figuraschave da Associação das Torcidas Organizadas do Rio de Janeiro. / This paper seeks to understand the role of association of football fans and torantes specifically , the Association of organized fans of Rio de Janeiro , in the context of political amnesty experienced in Brazil . This is also a period where we note the exhaustion of the "economic miracle " , with massive inflation, which led directly to the rising cost of living and, for fans , increase in the price of tickets to the football games .The alternative is found a series of boycotts and strikes twisted in his eagerness to reduce the value of the entries , with extensive media coverage , Specialty - Journal of Sports , Score Magazine - or more generally - Jornal do Brazil . Our goal is to understand the various initiatives taken by ASTORJ to achieve their victories , the present leaders in their speech, and the way it was constructed this dialectical relationship between supporters and media outlets , and for this , we will analyze reports from newspapers , magazines and columns - as " the Voice of Galera " , present in the Journal of Sports - that add up to interviews conducted by us with the key figures of the Association of organized fans of Rio de Janeiro.

A formação de redes colaborativas é uma importante forma das organizações estimularem a inovação, reduzirem custos e transferir conhecimentos. Uma forma particular de rede colaborativa, as redes auto-organizadas, demonstram grande capacidade de promover o aprendizado dos envolvidos, sistematizar o conhecimento e promover a inovação. Já os programas Seis Sigma, adotados por diversas organizações, possuem como objetivo principal a redução da variabilidade de um processo, resultando na redução de custos e melhoria da qualidade. A literatura sobre redes auto-organizadas pouco apresenta sobre a formação destas redes e a literatura sobre Seis Sigma é voltada a métodos estatísticos. Desta forma, o objetivo desta pesquisa é identificar os elementos para um modelo de referência baseado no programa Seis Sigma para a formação e gerência de redes de inovação auto-organizadas. Foram realizados cinco estudos de caso em diferentes organizações. Os programas Seis Sigma destas organizações foram modelos com o uso da metodologia Enterprise Knowledge Development (EKD). Com base na literatura estudada foram identificas as necessidades de mudanças que viabilizariam a formação de redes de inovação auto-organizadas. Como resultado tem-se os elementos para o modelo de referência para formação e gerência de redes de inovação auto-organizadas baseado no programa Seis Sigma. / The formation of collaborative networks is an important way for organizations to stimulate innovation, reduce costs and transfer knowledge. A particular form of collaborative network, the self-organized networks have shown great capability to promote the learning of those involved, systematize knowledge and lead to innovation. The Six Sigma programs, adopted by several organizations, have as main objective the process variability reduction, resulting in lower costs and quality improvement. The literature on self-organized networks presents little about the formation of these kind of networks and literature on Six Sigma is focused on statistical methods. Thus, the objective of this research is to identify the elements for a reference model based on the Six Sigma program for setting up and management of innovation selforganized networks. Five case studies were conducted in different organizations. The Six Sigma programs of these organizations were modeled using the Enterprise Knowledge Development (EKD) methodology. Based on the studied literature the needs for changes that enables the formation of innovation self-organized networks were identified. As a result there are the elements of the reference model for the formation and management of innovation self-organized networks based on the Six Sigma program.

Submitted by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-01-07T12:40:01Z No. of bitstreams: 2 joao_gabriel_guimares_luz.pdf: 5854830 bytes, checksum: 3b384576c220fecec7431b8c107b9ea1 (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-01-07T12:40:28Z (GMT) No. of bitstreams: 2 joao_gabriel_guimares_luz.pdf: 5854830 bytes, checksum: 3b384576c220fecec7431b8c107b9ea1 (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-01-07T12:40:47Z (GMT) No. of bitstreams: 2 joao_gabriel_guimares_luz.pdf: 5854830 bytes, checksum: 3b384576c220fecec7431b8c107b9ea1 (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-01-07T12:40:47Z (GMT). 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Na sua constru??o, as concentra??es de cada alcanotiol, bem como a propor??o de cada um deles na composi??o das SAMs mistas foram definidas atrav?s de c?lculos de cobertura de superf?cie Posteriormente, o ant?geno em diferentes concentra??es foi imobilizado sobre as SAMs mistas ativadas constru?das em disco de ouro e, a varia??o do ?ngulo de SPR (??SPR) decorrente dessa etapa foi monitorada em tempo real. O imunosensor desenvolvido foi ent?o eletroquimicamente caracterizado por voltametria c?clica (VC) e espectroscopia de imped?ncia eletroqu?mica (EIE) e as respostas do mesmo frente a um pool de soros de indiv?duos infectados e n?o infectados pelo T. cruzi foram avaliadas. Em seguida, foram determinados par?metros para otimiza??o do dispositivo, incluindo tempo de imobiliza??o e concentra??o do ant?geno, bloqueio e regenera??o da superf?cie sensora e tempo envolvido nas an?lises do imunoensaio. Por fim, a dilui??o de trabalho do soro e o ponto de corte do imunosensaio foram escolhidos e os ?ndices de desempenho do mesmo como t?cnica para o imunodiagn?stico da DC foram calculados empregando 171 soros, sendo 99 de indiv?duos infectados pelo T. cruzi, 30 de n?o infectados e 42 portadores de outras infec??es. Os maiores valores de foram encontrados para a concentra??o 1.0 mmol L-1 de 11-MUA e 3-MPA e para as SAMs mistas formadas na propor??o de 1:10. A imobiliza??o dos ant?genos foi conduzida com ?xito, de modo que houve linearidade entre a concentra??o utilizada e o ??SPR. Por VC e EIE, foi demonstrado que a liga??o covalente das prote?nas aumentou a resist?ncia ? transfer?ncia eletr?nica quando comparado com o comportamento da sonda eletroqu?mica sobre as SAMs mistas. Ademais, o imunosensor se mostrou, semelhante ao ELISA, capaz de detectar anticorpos anti-T. cruzi em amostras de soros dilu?das at? 1280 vezes. J? em rela??o aos soros negativos, o dispositivo detectou ??SPR significativas apenas at? a dilui??o 1:160, o que demonstrou razo?vel capacidade do m?todo em distinguir indiv?duos infectados de n?o infectados. Dentre os par?metros anal?ticos avaliados ficou definido o tempo de imobiliza??o e a concentra??o do ant?geno em 20 minutos e 30 ?g mL-1, o bloqueio da superf?cie por 10 minutos com solu??o de BSA 1.0%, a regenera??o pela inje??o de SDS 1.0% e o tempo de avalia??o da resposta do dispositivo em 20 minutos. A dilui??o do soro em 1:320 e o ponto de corte a 17.2 m? foram os crit?rios metodol?gicos definidos para o imunosensaio. Os ?ndices de desempenho calculados determinaram um excelente potencial do imunosensor no diagn?stico sorol?gico da doen?a de Chagas, com valores de sensibilidade de 100%, especificidade de 97.2%, valor preditivo positivo igual a 98%, valor preditivo negativo de 100% e acur?cia global estimada em 99.6%. O n?mero de rea??es cruzadas em soros de indiv?duos com leishmaniose visceral foi menor no m?todo proposto (1/7) do que no ELISA (6/7). A partir dos resultados ? poss?vel afirmar que foi desenvolvido com ?xito um imunosensor sens?vel, espec?fico, r?pido, simples e de f?cil execu??o para o diagn?stico sorol?gico da doen?a de Chagas. / Disserta??o (Metrado) ? Programa de P?s-gradua??o em Ci?ncias Farmac?uticas, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2014. / ABSTRACT The aim of the present study was to describe the development of an unpublished SPR-based immunosensor for detection of anti-T. cruzi antibodies in human serum through the covalently immobilized T. cruzi antigen on a mixed SAM of 11-mercaptoundecanoic acid (11-MUA) and 3-mercaptopropionic acid (3-MPA) on a SPR sensor chip. In its construction, the concentrations of each alkanethiol, and the proportion of each in the composition of the mixed SAMs were defined by calculation of surface coverage Subsequently, the antigen at different concentrations was immobilized on the activated mixed SAMs built on gold disc, and the change in the SPR angle (??SPR) resulting from this step was monitored in real time. The imunosensor developed was electrochemically characterized by cyclic voltammetry (CV) and electrochemical impedance spectroscopy (EIS), and the responses of a pool of sera from individuals infected and not infected with T. cruzi were also evaluated. Then, some parameters for the optimization of the device were defined, including immobilization time and antigen concentration, blocking and regeneration of the sensor surface and time involved in the analysis of the immunoassay. Finally, the working dilution of the serum and the cut-off point were chosen and the performance indices of the technique were calculated using 171 sera - 99 individuals infected with T. cruzi, 30 not infected and 42 with other infections. The highest values ??of ? were found for the 1.0 mmol L-1 concentration of 11-MUA and 3-MPA and mixed SAMs formed at 1:10 proportion. The immobilization of antigens was conducted successfully, so there was linearity between the concentration used and ??SPR. For VC and EIS has been demonstrated that covalent attachment of the protein increased the electron transfer resistance when compared with the behavior of the electrochemical probe on the mixed SAMs. Furthermore, imunosensor showed, similarity to ELISA, capable of detecting anti-T. cruzi in sera diluted up 1280 times. In relation to the negative sera, the device detected significant ??SPR only until dilution 1:160, which demonstrated the ability of the method to distinguish infected from uninfected individuals. The following analytical parameters were defined: time of immobilization and antigen concentration at 20 minutes and 30 mg mL-1, blocking surface for 10 minutes with 1.0% BSA solution, regeneration by injection of 1.0% SDS and time evaluation of the response of the device in 20 minutes. The serum dilution at 1:320 and cut-off point at 17.2 m? were the methodological criteria for immunoassay. The performance indices calculated for the imunosensor demonstrated a great potential in serological diagnosis of Chagas' disease, with a sensitivity of 100%, specificity of 97.2%, positive predictive value of 98%, negative predictive value of 100% and global accuracy estimated in 99.6%. The number of cross-reactivity with sera from individuals with visceral leishmaniasis was lower (1/7) than in ELISA (6/7). Based on the results, it is possible to stay that a sensitive, specific, rapid, simple and easy immunosensor was successfully with potential application at serological diagnosis of Chagas disease.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:34:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 4462.pdf: 4273464 bytes, checksum: 0edd147ff165382e58073330d180f98d (MD5) Previous issue date: 2012-07-23 / Universidade Federal de Sao Carlos / This work shows development of immunosensors for agronomic interest and public heath. The first was a piezoeletric immunosensor to detect a cysteine peptidase, a potencial biomarker for Xanthomonas citri subsp. citri that cause a citrus Canker. Another was electrochemical immunosensor based on gold nanoparticles as a label and magnetic beads as capture phase of Salmonella enterica subsp. enterica sorovar Typhimurium LT2 (S). The piezoelectric immunoassay was based on immobilization of polyclonal antibody against CPXaC (anti-CPXaC), produced in rabbit, onto three different monolayers that modified gold quartz crystal, which were evaluated by monitoring frequency and energy dissipation in real time when 64.5×10-8 mol L-1 of CPXaC was added. The better relation between analytical response and energy dissipation was obtained with immobilization onto 11- mercaptoundecanoic acid which presented a detection limit of 13.0 nmol L-1 as well as good values for the kinetic and equilibrium binding constant. The immunosensor showed good specificity with no response for different proteins include another cysteine peptidase that is used as a target for detects Xylella fastidiosa bacterium responsible for other important disease in citrus. For detection of Salmonella using a magneto-immunoassay and gold nanoparticles (AuNPs) as label was developed based on the use of a screen-printed carbon electrode (SPCE) that incorporates a permanent magnet underneath. Salmonella spiked in milk samples (i.e. skimmed milk) have been tested by using anti-Salmonella magnetic beads (MBs-SAb) as capture phase and sandwiching afterwards with AuNPs modified antibodies (SAb-AuNPs). AuNPs detection using differential pulse voltammetry (DPV) following a previous established procedure is performed. And a detection limit of 143 CFU mL-1 and a linear range of from 103 to 106 CFU mL-1 of Salmonella, with a coefficient of variation of about 2.4%, was obtained. Recoveries of the sensor by spiking skimmed milk with different quantities of Salmonella of about 83 and 94 % for xviii 1.5 x 103 and 1.5 x 105 CFU mL-1 were obtained, respectively. This work demonstrated the possibility to detect CPXaC with a piezoelectric immunosensor as well as electrochemical immunosensor to detect Salmonella spiked in milk samples. / No presente trabalho estudou-se o desenvolvimento de imunossensores para aplicação em amostras de interesse agronômico e de saúde. Foram desenvolvidos um imunossensor piezelétrico para cisteíno peptidase (CPXaC), um potencial biomarcador para Xanthomonas citri subsp. citri (Xcc) causadora do Cancro cítrico, e um imunossensor eletroquímico baseado em nanopartículas de ouro como marcador e utilizando partículas magnéticas para separação e pré-concentração de Salmonela enterica subsp. enterica sorovar Typhimurium LT2 (S). O imunoensensor piezelétrico foi baseado em três estratégias de imobilização do anticorpo policlonal anti-CPXaC, produzido em coelho, contra CPXaC sobre a superfície de ouro do cristal de quartzo. As superfícies de imobilização foram avaliadas monitorando a variação da frequência ressonante do cristal de quartzo (Δ ) e o valor da dissipação de energia (ΔD) em tempo real adicionando 645×10-9 mol L-1 CPXaC. A melhor relação entre resposta analítica e dissipação de energia do imunossensor foi obtida com a imobilização do anticorpo sobre ácido 11-mercaptoundecanóico (MUA), o qual apresentou um limite de detecção de 13,0 nmol L-1, bem como valores de constante cinética e de equilíbrio para interação antígeno-anticorpo concordantes com os da literatura. Por fim, o imunossensor apresentou boa especificidade não apresentando resposta para diferentes proteínas estudas, incluindo outra cisteíno peptidase que é usada com alvo para detectar Xylella fastidiosa, bactéria responsável por outra importante doença de cítrus. A detecção de Salmonela utilizando um magneto-imunoensaio e nanopartículas de ouro (AuNPs) como marcador foi desenvolvido utilizando um eletrodo de carbono impresso (SPCE) que incorpora um ímã permanente. Amostras de leite desnatado fortificadas com Salmonela foram testadas usando partículas magnéticas modificadas com anti-Salmonela (MBs-SAc), para a fase de separação e pré-concentração, e marcadas posteriomente com nanopartículas de ouro (AuNPs) modificados com anticorpo secundário anti-salmonela (SAcxvi AuNPs), o qual foi detectado usando voltametria de pulso diferencial (DPV). Um limite de detecção de 143 CFU mL-1 e um intervalo linear 103-106 CFU mL-1 de Salmonela, com um coeficiente de variação de cerca de 2,4%, foram obtidos. As recuperações do sensor em leite desnatado foram de 83 e 94% para 1,5 x 103 e 1,5 x 105 CFU mL-1, respectivamente. Este trabalho demonstrou com sucesso a possibilidade do uso de imunossensores piezelétricos para detectar CPXaC, bem como um imunossensor eletroquímico para detectar Salmonela em amostras de leite fortificadas.