Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Autor no autoriza el acceso a texto completo de su documento / Introducción: El fluoruro juega un rol principal en la prevención y control de la caries, pero también es un factor importante de casos de fluorosis dental, tanto en comunidades con agua potable fluorada como no fluorada. El fluoruro es eliminado principalmente por la orina y, por este motivo es considerado un biomarcador contemporáneo de exposición a fluoruro, es decir, una sustancia que indica un estado biológico. Se ha establecido que el periodo de tiempo mínimo recomendado para la recolección de orina es de 24 horas. Entre los métodos actuales utilizados para el análisis de fluoruro en orina se encuentran la concentración de fluoruro en una muestra única, la cantidad de fluoruro excretado en una muestra de orina de 24 horas, la cantidad de fluoruro excretado en cortos periodos de tiempo y la razón de Flúor/creatinina (F/Cr). Este último es ampliamente utilizado debido a que la creatinina es un buen índice del volumen del filtrado glomerular. Al comparar estos métodos se ha establecido que una sola muestra de orina matinal o muestra única conocida como spot es más fácil de recoger en comparación con la muestra de orina recolectada en 24 hrs. Por lo tanto, pese a existir estudios en relación a las medidas de concentración de fluoruros en la orina en niños preescolares y adultos de 16 a 79 años, su uso para adolescentes no se ha investigado y el contar con esta información nos permitirá evaluar la posibilidad de utilizar solo una muestra matinal en vez de una muestra de 24 hrs de orina para comparar poblaciones que habitan en zonas fluoradas y en zonas no fluoradas. Objetivos: Evaluar si existen diferencias entre la estimación de concentración de fluoruros en la orina matinal comparado con el volumen de orina de 24 horas en adolescentes de 12 años. Metodología: Muestras de orina matinal y de 24 hrs fueron obtenidas de 13 adolescentes de 12 años de edad. El análisis químico de las muestras se realizó mediante el protocolo electrodo ion específico selectivo para fluoruro y la reacción Jaffe para creatinina. El cálculo de la excreción urinaria de fluoruro (mg) estuvo basado en la recolección de muestras urinarias de 24 hrs y en la relación de masas de F/Cr de la muestra urinaria matinal. Resultados: Se obtuvo una correlación entre el valor de la masa de la excreción urinaria de Fluoruro (F) en las muestras de orina de 24 horas (mg/día) y la estimación de la masa de ión Fluoruro (F) excretado en orina 24 horas (mg/día) calculada a partir de la muestra de orina matinal utilizando la relación F/Cr, cuyos valores medios fueron 0,23 (± 0,05) mg/día y 1,22 (± 1,89) mg/día, respectivamente. La media de la comparación entre ambos valores fue de 1,02 (± 1,87) mg F. Las diferencias fueron comparadas con t de student y no se alcanzaron diferencias estadísticamente significativas con un p <0,01. Conclusión: No se encontraron diferencias estadísticamente significativas al comparar la estimación de concentración de fluoruros en la orina matinal con el volumen de orina de 24 horas en adolescentes de 12 años.

Human urine is a   valuable resource which has good potential to be used as a fertilizer all   over the world. In the developing countries sanitation and food security are   both issues that need urgent attention.    A urine separation toilet can be constructed with minimal investment   in the Nicaraguan context, and the usage of the urine as a fertilizer can   help establish higher yields and is a good alternative to chemical   fertilizers. This field experiment is trying this in practice in the context   of rural Nicaragua, to determine the effect of urine on two plants on. For   this study, the common bean (Phaseolus vulgaris) and the Chaya (Cnidoscolus   aconitifolius) was selected and the results confirm that urine has potential   as a fertilizer in the Nicaragua context. The common bean yield was twice as   large after urine fertilization and the Chaya reacted positively to urine   fertilization. For urine separation purposes, two different separators were   constructed on the site to showcase the benefits with separating the urine   from the faeces, creating lower latrine volume and better sanitation in the   outhouse. The risks associated with human urine are low if the urine is   separated securely to avoid crosscontamination from faeces. If a   safety-barrier system is adopted, the overall risks with using urine as a   fertilizer are negligible. The spreading potential of urine separation and   fertilization in rural Nicaragua is high, but more experiments and   demonstrations are needed to reach adopters of the technology. / La orina humana es un recurso valioso que tiene un   buen potencial para ser utilizado como fertilizante en el mundo entero. En   los países en vías de desarrollo, el saneamiento y la seguridad alimentaria   son dos temas que necesitan atención urgente. Un inodoro de separación de   orina puede ser construido con una inversión mínima en el contexto   Nicaragüense, y el uso de la orina como fertilizante puede ayudar a   establecer mayores rendimientos y es una buena alternativa a los   fertilizantes químicos. Este experimento de campo está probando esto en la   práctica en el contexto de Nicaragua rural, para determinar  la diferencia en  crecimiento entre dos cultivos con y sin   fertilización de orina. Para este estudio se seleccionó el frijol común   (Phaseolus vulgaris) y la Chaya (Cnidoscolus aconitifolius) El rendimiento de   frijol fue dos veces mayor después de la fertilización de la orina y el Chaya   reaccionó positivamente a la fertilización de la orina. Para fines de   separación de orina, se construyeron dos separadores diferentes en el sitio   para mostrar los beneficios con la separación de la orina de las heces,   creando un menor volumen de letrina y un mejor saneamiento. Los riesgos asociados con la orina humana son bajos   si la orina se separa con seguridad para evitar la contaminación cruzada de   las heces. Si se adopta un sistema de barrera de seguridad, los riesgos   generales con el uso de orina como fertilizante son insignificantes. El   potencial de propagación de la separación de orina y la fertilización en   Nicaragua rural es alto, pero se necesitan más experimentos y demostraciones   para llegar a los usuarios de la tecnología. / <p>2017-06-02</p>

En la presente investigación, los valores de urea y creatinina de las huanganas (Tayassu pecari) mantenidas en cautiverio fueron determinadas usando el método colorimétrico para la determinación cuantitativa de urea y creatinina en suero y orina. Las muestras de sangre fueron colectadas de un total de 44 ejemplares albergados en el Zoológico “Parque de las Leyendas” en Lima. Los animales fueron sedados con clorhidrato de ketamina en dosis de 10 mg/kg de peso vivo, administrada vía intramuscular, usando un bastón jeringa, las muestras de sangre fueron tomadas de la vena cava superficial y colectadas en tubos al vacío sin anticoagulante. El análisis posterior fue realizado en el Laboratorio de Patología Clínica de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos, en Lima. Los valores encontrados para urea y creatinina son: 27.4 2.7 mg/dl y 2.8 0.2 mg /dl respectivamente. Estos resultados son específicos para los ejemplares objeto de este estudio. / --- In this research, the values of urea and creatinine for Peruvian peccaries (Tayassu pecari) in captivity were determined using the colorimetric assay. Blood samples were collected from 44 peccaries at “Parque de las Leyendas” Zoo in Lima. The animals received a tranquilizer containing clorhidrate of ketamine, administered at doses of 10mg. /kg., by IM, using a pole syringe; the blood samples were collected from the superficial cava vein using vacuteiners without anticoagulant. The Serum Chemistry analysis was made in the Pathology Clinical Laboratory, Faculty of Veterinarian Medicine of San Marcos University, in Lima. The values for urea and creatinine founded were respectively: 27.4 2.7mg/dl and 2.8 0.2 mg/dl. These results apply specifically to the animals, covered by this research.

Se realizó el estudio citooncológico, evaluando características de atipicidad y/o tumorales celulares en el sedimento de muestras de orina obtenidas de 210 bovinos hembra criadas de manera extensiva o semiextensiva en la provincia de Oxapampa (Pasco), zona con alta presencia del helecho Pteridium aquilinum y de la enfermedad Hematuria Vesical Enzoótica Bovina (HVEB). El proceso de toma, centrifugado, obtención de sedimento urinario, frotís y fijado de la muestra se realizó en campo, mientras que la tinción con colorante Wright y evaluación microscópica se efectuó en Laboratorio de Histología, Embriología y Patología de la Facultad de Medicina Veterinaria de la UNMSM. El punto significativo para la detección de animales positivos a la enfermedad fue el hallazgo por evaluación citooncológica urinaria principalmente de células epiteliales atípicas de citoplasma poligonal, basófilo o levemente basófilo con marcado incremento de la relación núcleo/citoplasma a favor del núcleo, membrana nuclear irregular y condensación de cromatina. Lo que manifiesta el hallazgo y relación a HVEB de células tumorales malignas de blastodermia orientada hacia la epitelial. Además, como dato se reporta el hecho de encontrar mayor cantidad de células uroteliales exfoliadas de apariencia normal, y acompañadas de escaso a leve número de eritrocitos maduros en la mayoría de muestras diagnosticadas positivas. Es así que por medio del presente estudio se comprueba que utilizando como método diagnóstico la citooncología urinaria la frecuencia de presentación de HVEB en la población estudiada es de 64 casos (30.47 %), demostrando la utilidad de la evaluación citooncológica urinaria, especialmente para el diagnóstico de la enfermedad en estadios iniciales. El presente trabajo apoya además el reporte de HVEB en nuestro país y la necesidad de determinar un método diagnostico precoz y desarrollable en campo para el monitoreo y control de la enfermedad en nuestro medio. Por lo tanto, la citooncología urinaria podría ser la prueba de ‘’oro’’ estándar para HVEB, necesitando de investigación futura que afine el método y demuestre esta posibilidad diagnóstica. Palabras Clave: Citooncología urinaria, Hematuria Vesical Enzoótica Bovina (HVEB), células atípicas, Bovinos, Pteridium aquilinum(Pa). / -- A cytooncologic test was performed in order to evaluate tumoral characteristics in the sediment of urine samples obtained from 210 bovine females, extensively or semiextensively bred in the province of Oxapampa (Pasco), area with a high presence of the bracken fern (Pteridium aquilinum) and a high prevalence of the Bovine Enzootic Vesical Haematuria (BEVH) disease. The processes of sample collection, centrifugation, urinary sediment collection, smear and fixation of the sample were performed in the field, while the Wright Test and the microscopic evaluation were done at the Laboratory of Histology, Embryology and Pathology at the School of Veterinary Medicine of the Universidad Nacional Mayor de San Marcos. The significant point in the detection of animals positive to this disease was mostly the finding of epithelial apaatypical cells with basophilic and polygonal cytoplasm. And with significant increasement of the nuclear-cytoplasm ratio favoring the nucleus. As an additional fact, it has been reported that most of the samples diagnosed as positive to the disease showed an increased number of apparently normal exfoliated urothelial cells accompanied by low number of mature erithrocytes. The present study demonstrated that using urinary cytooncology as a diagnostic method, 64 animals (30.47%) of the studied population show to be positive to the BEVH disease, thus demonstrating the usefulness of urinary cytooncologic evaluation, specially for the diagnose of the disease in its initial phases. In addition, the present work supports the BEVH report in our country and the need to determine a precocious and easy to develope “in the field” diagnostic method that may help monitoring and controling the disease in our environment. Therefore, urinary cytooncology could become the “golden” standard test to diagnose BEVH, although further research needs to be done in order to demonstrate the usefulness of this diagnostic tool. Key Words: Urinary Cytooncology, Bovine Enzootic Vesical Haematuria (BEVH), atypical cells, Bovine, Pteridium aquilinum (Pa).

Objetivo: Evaluar la prueba del Ácido Glutámico Descarboxilasa (GAD) modificado para la rápida identificación de Escherichia coli aisladas de urocultivos. Métodos: Se procesó un total de 257 aislamientos bacterianos a partir de urocultivos procedentes del laboratorio de microbiología del Hospital San Bartolomé. Como controles internos, también se evaluaron aislamientos de diferentes muestras clínicas y cepas ATCC. Para obtener la sensibilidad, especificidad y la exactitud de la prueba GAD modificado, se utilizó la identificación bioquímica convencional como pruebaGold Standard. Resultados: Todas las Escherichia coli mostraron una reacción positiva a la prueba GAD modificado, incluyendo aislados lactosa negativa, dando una sensibilidad del 100%. Otras enterobacterias, que incluyeron a Salmonella grupo C, Morganella morganii, Enterobacter cloacae y Enterobacter aerogenes y Proteus vulgaris, dieron un resultado negativo a la prueba GAD modificado, aún cuando fueron incubadas por un tiempo adicional de 24 horas, dando una especificidad del 100%. Sin embargo, la prueba GAD modificado presentó reacción positiva con aislamientos de Shigella flexneri (2) y Shigella sonnei (2). Conclusiones: La prueba GAD modificado permite identificar a Escherichia coli a partir de aislamientos de urocultivos con alta sensibilidad, especificidad y exactitud, y puede ser utilizado en cualquier laboratorio porsu rapidez y su bajo costo. Palabras clave: Escherichia coli;GADmodificado;Glutamato Monosódico;Urocultivo. / --- Objetive: To evaluate the Glutamic Acid Decarboxylase (GAD) modified Testforrapid identification of Escherichia coli fromurine cultures. Methods: A total of 257 bacterial isolatesfrom urocultures were tested. As controls, bacterial isolates from other clinical samples and ATCC strains were also tested. In order to determinate the sensibility, specificity and the exactitude of the GAD test, the conventional biochemical identification for enterobacteria were used as Gold Standard. Results: All isolated strains of Escherichia coli were positive by themodifiedGAD test, even the lactose‐negative E. coli strains, giving a sensitivity of 100%. Other enterobacteria strains were negative by the modified GAD, even when the period of incubation was 24 hours, giving a specificity of 100%. However, Shigella flexneri and Shigella sonnei strains showed positive results when it was assayed on the modified GADtest. Conclusion: The modified GAD test can identify correctly any isolate of E. coli from urocultures with a high sensitivity and specificity, and is suitable for carrying out in any laboratory. Keywords: Escherichia coli; modified GAD test; Monosodium Glutamate; Urine culture.

Desarrolla un método, altamente selectivo y específico, usando el equipo Cromatógrafo Líquido de Ultraperformance con detector Masa – Masa (UPLC – MS – MS) para la determinación de misoprostol éster a través de su metabolito misoprostol ácido en veinte muestras de orina de mujeres gestantes, provenientes de las Divisiones Médico Legales del Perú, que presumiblemente habrían ingerido tabletas de misoprostol. Se ensayan procedimientos de extracción líquido – líquido, cuyos resultados, en el presente estudio; no son reproducibles. Debido a ello se ensayan procedimientos de extracción en fase sólida (SPE) con cartuchos especiales HLB cuyos resultados son reproducibles. Este método logra cuantificar concentraciones hasta partes por billón (ppb), con una concentración promedio de 40,23 y demás valores que están dentro de los límites 11,5 y 81,6 ppb. El método es de gran utilidad para demostrar el uso de misoprostol como abortivo en investigaciones judiciales.

La hematuria vesical enzoótica bovina (HVEB) es una enfermedad crónica no infecciosa causada por el consumo continuo de pequeñas cantidades del helecho Pteridium aquilinum durante un tiempo aproximado de 2 a 3 años. Es un síndrome común en bovinos de 4 a 12 años de edad (Borzacchiello et al., 2003; França et al., 2002). La presentación de HVEB ha sido reportada en diversas partes del mundo, en especial en áreas templadas y asociadas a tierras poco fértiles o poco cultivadas (Sánchez et al., 1999). Se ha reportado en países como Brasil, Venezuela, Estados Unidos, Bulgaria, Escocia, Irán o Kenia (Anjos et al., 2008; Gaste y Sánchez, 2008; Sánchez et al., 1999 y 2008). En Perú, la HVEB ha sido reportada en la zona de Oxapampa, Cerro de Pasco y Pucallpa siendo una de las enfermedades que más afectan al ganado bovino de crianza al pastoreo (Gonzáles y Carpio, 1973; Gonzáles et al., 2004). P. aquilinum es una planta que pertenece a la familia de las Hipolepidáceas. Se desarrolla de manera rápida entre los pastizales perennes y a pesar de un bloqueo parcial de la luz solar (Sánchez et al., 1999). Este helecho está entre las cinco plantas más comunes del mundo y es la única planta superior que se conoce causa neoplasias naturalmente en los animales, como consecuencia de una considerable cantidad de componentes tóxicos, dentro de los cuales está el ptaquilósido (PT), un componente radiomimético glucósido sesquiterpenoide capaz de inducir clastogénesis en los cultivos celulares con actividad mutagénica y carcinogénica (Riet-Correa et al., 2001; Vargas et al., 2003). El PT es eliminado en la orina induciendo tumores vesicales y también es eliminado en la leche, con potencial riesgo para la salud humana (AlonsoAmelot, 1999). La incidencia global de la enfermedad no es muy grande, pero es importante en la ganadería porque causa un gran impacto económico debido a la pérdida prematura de animales. Por otro lado, no hay un tratamiento específico de la enfermedad por lo que se opta por el sacrificio de los animales afectados (Radostits et al., 2002; Giles y Andrews, 2004). Entre los signos clínicos y patológicos observados se encuentran la anemia, leucopenia, reducida hemoglobina, hemorragias de la pared vesical, disuria y escasa productividad del animal (Prasad e Iyer, 1986; Sandoval et al., 2002). El animal puede morir tras una enfermedad de 1 a 2 semanas en los casos agudos; en los casos menos graves con hematuria intermitente o subclínica persistente, se observa un empeoramiento progresivo del estado general del animal a lo largo de varios meses (Riet-Correa et al., 2001; Jackson y Cockcroft, 2002; Radostits et al., 2002). La enfermedad también está asociada con cambios neoplásicos en la mucosa de la vejiga. Las lesiones neoplásicas observadas generalmente son hemangioendoteliomas, adenocarcinomas, carcinomas de células transicionales, papilomas, fibromas, leiomiomas, carcinomas de células escamosas y mixomas (França et al., 2002; Vargas et al., 2003). Para el diagnóstico presuntivo bastan los signos clínicos con los datos epidemiológicos de la zona (Prasad e Iyer, 1986). Sin embargo, para llegar a un diagnóstico definitivo hay que tomar en cuenta la historia de la enfermedad, los signos clínicos y la histopatología hallada en las lesiones. En la actualidad se han desarrollado diversas pruebas diagnósticas como la histopatología (Vargas et al., 2003), patología clínica (Sánchez et al., 2004), ecografía (Hoque et al., 2002; Sandoval et al., 2002), tiras reactivas para orina, examen microscópico del sedimento urinario (Sánchez et al., 2006), PCR semi-anidada para la detección y tipificación de Papilomavirus bovino tipo 2 en las lesiones vesicales (Stocco dos Santos et al., 1998), hibridación por Southern blot (Saveria et al., 1992) detección de gangliósidos y glucoesfingolípidos que modulan la señalización celular esencial para la proliferación, invasión y metástasis tumoral (Roperto et al., 2007), e incluso la detección de aberraciones cromosomales relacionadas a la enfermedad (Lioi et al., 2004). / Tesis

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Se realizó el estudio citooncológico, evaluando características de atipicidad y/o tumorales celulares en el sedimento de muestras de orina obtenidas de 210 bovinos hembra criadas de manera extensiva o semiextensiva en la provincia de Oxapampa (Pasco), zona con alta presencia del helecho Pteridium aquilinum y de la enfermedad Hematuria Vesical Enzoótica Bovina (HVEB). El proceso de toma, centrifugado, obtención de sedimento urinario, frotís y fijado de la muestra se realizó en campo, mientras que la tinción con colorante Wright y evaluación microscópica se efectuó en Laboratorio de Histología, Embriología y Patología de la Facultad de Medicina Veterinaria de la UNMSM. El punto significativo para la detección de animales positivos a la enfermedad fue el hallazgo por evaluación citooncológica urinaria principalmente de células epiteliales atípicas de citoplasma poligonal, basófilo o levemente basófilo con marcado incremento de la relación núcleo/citoplasma a favor del núcleo, membrana nuclear irregular y condensación de cromatina. Lo que manifiesta el hallazgo y relación a HVEB de células tumorales malignas de blastodermia orientada hacia la epitelial. Además, como dato se reporta el hecho de encontrar mayor cantidad de células uroteliales exfoliadas de apariencia normal, y acompañadas de escaso a leve número de eritrocitos maduros en la mayoría de muestras diagnosticadas positivas. Es así que por medio del presente estudio se comprueba que utilizando como método diagnóstico la citooncología urinaria la frecuencia de presentación de HVEB en la población estudiada es de 64 casos (30.47 %), demostrando la utilidad de la evaluación citooncológica urinaria, especialmente para el diagnóstico de la enfermedad en estadios iniciales. El presente trabajo apoya además el reporte de HVEB en nuestro país y la necesidad de determinar un método diagnostico precoz y desarrollable en campo para el monitoreo y control de la enfermedad en nuestro medio. Por lo tanto, la citooncología urinaria podría ser la prueba de ‘’oro’’ estándar para HVEB, necesitando de investigación futura que afine el método y demuestre esta posibilidad diagnóstica. Palabras Clave: Citooncología urinaria, Hematuria Vesical Enzoótica Bovina (HVEB), células atípicas, Bovinos, Pteridium aquilinum(Pa). / A cytooncologic test was performed in order to evaluate tumoral characteristics in the sediment of urine samples obtained from 210 bovine females, extensively or semiextensively bred in the province of Oxapampa (Pasco), area with a high presence of the bracken fern (Pteridium aquilinum) and a high prevalence of the Bovine Enzootic Vesical Haematuria (BEVH) disease. The processes of sample collection, centrifugation, urinary sediment collection, smear and fixation of the sample were performed in the field, while the Wright Test and the microscopic evaluation were done at the Laboratory of Histology, Embryology and Pathology at the School of Veterinary Medicine of the Universidad Nacional Mayor de San Marcos. The significant point in the detection of animals positive to this disease was mostly the finding of epithelial apaatypical cells with basophilic and polygonal cytoplasm. And with significant increasement of the nuclear-cytoplasm ratio favoring the nucleus. As an additional fact, it has been reported that most of the samples diagnosed as positive to the disease showed an increased number of apparently normal exfoliated urothelial cells accompanied by low number of mature erithrocytes. The present study demonstrated that using urinary cytooncology as a diagnostic method, 64 animals (30.47%) of the studied population show to be positive to the BEVH disease, thus demonstrating the usefulness of urinary cytooncologic evaluation, specially for the diagnose of the disease in its initial phases. In addition, the present work supports the BEVH report in our country and the need to determine a precocious and easy to develope “in the field” diagnostic method that may help monitoring and controling the disease in our environment. Therefore, urinary cytooncology could become the “golden” standard test to diagnose BEVH, although further research needs to be done in order to demonstrate the usefulness of this diagnostic tool. Key Words: Urinary Cytooncology, Bovine Enzootic Vesical Haematuria (BEVH), atypical cells, Bovine, Pteridium aquilinum (Pa).

En la presente investigación, los valores de urea y creatinina de las huanganas (Tayassu pecari) mantenidas en cautiverio fueron determinadas usando el método colorimétrico para la determinación cuantitativa de urea y creatinina en suero y orina. Las muestras de sangre fueron colectadas de un total de 44 ejemplares albergados en el Zoológico “Parque de las Leyendas” en Lima. Los animales fueron sedados con clorhidrato de ketamina en dosis de 10 mg/kg de peso vivo, administrada vía intramuscular, usando un bastón jeringa, las muestras de sangre fueron tomadas de la vena cava superficial y colectadas en tubos al vacío sin anticoagulante. El análisis posterior fue realizado en el Laboratorio de Patología Clínica de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos, en Lima. Los valores encontrados para urea y creatinina son: 27.4 2.7 mg/dl y 2.8 0.2 mg /dl respectivamente. Estos resultados son específicos para los ejemplares objeto de este estudio. / In this research, the values of urea and creatinine for Peruvian peccaries (Tayassu pecari) in captivity were determined using the colorimetric assay. Blood samples were collected from 44 peccaries at “Parque de las Leyendas” Zoo in Lima. The animals received a tranquilizer containing clorhidrate of ketamine, administered at doses of 10mg. /kg., by IM, using a pole syringe; the blood samples were collected from the superficial cava vein using vacuteiners without anticoagulant. The Serum Chemistry analysis was made in the Pathology Clinical Laboratory, Faculty of Veterinarian Medicine of San Marcos University, in Lima. The values for urea and creatinine founded were respectively: 27.4 2.7mg/dl and 2.8 0.2 mg/dl. These results apply specifically to the animals, covered by this research.