Os ácidos graxos poliinsaturados garantem a fluidez à membrana plasmática do espermatozóide. No entanto, as duplas ligações presentes, os tomam mais susceptíveis aos efeitos nocivos da peroxidação lipídica que produz grande quantidade de radicais livres. A adição do antioxidante Glutationa reduzida (GSH) poderia conferir proteção aos espermatozóides de ovinos submetidos a criopreservação contra danos, em membranas plasmáticas, acrossomais, DNA e atividade mitocondrial causados pelo estresse oxidativo. O objetivo do presente experimento foi: avaliar se a GSH protege os espermatozóides ovinos criopreservados contra danos causados pelo estresse oxidativo. Foram colhidos ejaculados de quatro carneiros adultos. As amostras foram avaliadas após a criopreservação (TI). As análises convencionais foram: concentração, motilidade, vigor e morfologia. As análises funcionais foram: integridade de membrana, integridade acrossomal, integridade de cromatina e atividade mitocondrial. O sêmen foi criopreservado utilizando o diluidor Tris-gema-critrato suplementado com GSH (controle, 1, 5 e 10mM). Uma alíquota de cada amostra foi submetida ao protocolo de peroxidação lipídica induzida e subseqüente quantificação das substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico(TBARS). As análises estatísticas foram realizadas utilizando o Sistema SAS para Windows. Os resultados indicam que não houve efeito do tratamento com GSH sobre as variáveis avaliadas pelos testes convencionais. A GSH diminuiu a proporção de acrossomas íntegros. Amostras tratadas com 5mM de GSH apresentaram menor percentual de células com membranas íntegras quando comparadas com as amostras controle e aquelas tratadas com 10 mM; , o percentual de células sem atividade mitocondrial foi influenciado pela GSH também não houve de efeito nas TBARS. As amostras do grupo controle foram mais susceptíveis à desnaturação da cromatina. Em conclusão, a adição do antioxidante Glutationa reduzida (GSH) confere proteção ao DNA e à atividade mitocondrial de espermatozóides de ovinos. / It is well known that sperm is extremely susceptible to the oxidative stress. This occurs especially due to the high content of poly-unsaturated fatty acids (PUF As) in its plasma membrane. The PUF As provide the necessary fluidity to the plasma membrane, which allows the sperm to move. However the double bonds present in those fatty acids are more susceptible to the oxidative stress. Therefore, sperm is highly dependent of the extra-celluIar environment antioxidant protection. Studies in human indicate that cryopreservation may lead to damages to the sperm due to the oxidative stress. The objective of this experiment was to study if the antioxidant glutathione (GSH) may protect ovine cryopreserved sperm against the damages caused by the oxidative stress. Semen samples of four rams were collected using an artificial vagina. Samples were then cryopreserved using Tris-egg yolk extender supplemented with different concentrations of reduced glutathione (control, 1, 5 and 10 mM). After thawing, samples were evaluated using conventional (motility and vigor) and functional tests (membrane integrity and mitochondrial activity). An aIiquot of each thawed sample was submitted to the protocol of induced lipid peroxidation using ascorbate (20 mM) and ferrous sulphate (4 mM), with the further measurement of the tiobarbituric acid reactive substances (TBARS), as an index of oxidative stress. This technique aims to evaIuate sperm oxidative status by its susceptibility to the lipid peroxidation. Statistical analysis was performed using SAS system for Windows. The results indicate that there was no effect of GSH on the variables assessed by conventional tests. GSH decreased the proportion of intact acrosomes. Samples treated with 5 mM GSH showed a lower percentage of cells with intact membranes when compared with control sampIes and those treated with 10 mM, the percentage of cells with mitochondriaI activity was affected by GSH and there was also no effect on TBARS. Samples from the control group were more susceptible to denaturation of chromatin. In conclusion, the addition of the antioxidant Glutathione (GSH) offers protection to DNA and mitochondrial activity of ovine sperm.

O objetivo deste trabalho foi avaliar de maneira detalhada e sistemática os perfis hormonais sanguíneos, fecais, urinários e salivares das progestinas e estrógenos durante o ciclo estral induzido de ovinos. Foram colhidas amostras diárias durante um período de 60 dias de sete fêmeas adultas (n=8) saudáveis e sexualmente maduras. Antes do início da fase de colheita das amostras, todos os animais foram submetidos ao protocolo de tratamento hormonal para indução e sincronização do cio durante dozes dias. O primeiro ciclo ovariano de cada animal desse experimento, detectado logo após a indução do cio foi descartado e seus valores não foram utilizados nas análises hormonais, pois poderiam estar sob o efeito dos hormônios exógenos. A concentração dos progestágenos foi determinada pelas técnicas analíticas de Radioimunoensaio (RIE) e Enzimaimunoensaio (EIE) e os estrógenos por RIE. Houve correlações entre as concentrações de progesterona medidas nas matrizes sérica e fecal, sérica e salivar, fecal e salivar (r=0,90, p<0,0001; r=0,90, p<0,0001; r=0,92, p<0,0001, respectivamente) durante os ciclos estrais observados (n=15). Obtivemos correlação (r=0,74, p<0,0001) entre as concentrações dos estrógenos quantificados nas matrizes sérica e fecal, mas não entre estas concentrações e aquelas medidas na matriz salivar. Não obtivemos nenhuma correlação entre as concentrações medidas na matriz urinária com as quantificadas nas outras matrizes para nenhum dos hormônios estudados. Obtivemos correlação entre as concentrações de progesterona medidas na matriz fecal pelos métodos de RIE e EIE (r=0,78, p<0,0001) e também na matriz salivar pelos dois métodos empregados (r=0,81, p<0,0001). Os resultados do presente experimento indicam que os imunoensaios utilizados podem ser utilizados para a avaliação das concentrações de progestágenos nas matrizes fecal e salivar durante o ciclo estral em ovinos. / The aim of the present work was evaluate the hormonal profiles of progestins and estrogens in blood, feces, urine and saliva during the induced estral cycle in ovine. Samples were collected daily a 60-day period from eight adult (n=8) cycling ewes. The animals were previously submitted to a protocol of estrus induction and synchronization for twelve days. In order to avoid the effect of exogenous hormones, the first cycle immediately after the synchronization was not considered for hormonal analysis. Progestagen concentrations were quantified by two analytical techniques, radioimmunoassay (RIA) and enzyme immunoassay (EIA). Estrogen concentrations were assessed by radioimmunoassay. Correlations in progesterone concentrations were found to be significant for serum and feces, serum and saliva and feces and saliva (r=0.90, p<0.0001; r=0.90, p<0.0001; r=0.92, p<0.0001, respectively) during the estrous cycles (n=15). Estrogen concentrations in the serum and feces were also positively correlated (r=0.74, p<0.0001). Salivary concentrations of estrogens were not correlated with fecal or serum concentrations of the same hormone. No correlation was found between urinary concentrations and concentrations found in other matrixes for both progestagens and estrogens. Concentrations of progestagens obtained using RIA and EIA were correlated on feces (r=0.78, p<0.0001) and saliva (r=0.81, p<0.0001). Results indicate that both immunoassays used in the present experiment can be used to evaluate progestagen concentrations on fecal and salivary matrixes during the estrous cycle of sheep.

A artroscopia tem função diagnóstica e terapêutica na doença articular. Mesmo com as modalidades de imagem mais modernas, ainda é considerada como padrão ouro no diagnóstico de problemas articulares em equinos. Sabe-se que as características físico-químicas das diferentes soluções de infusão podem determinar alterações estruturais na superfície da cartilagem. Apesar da existência de estudos baseados na busca de um fluido ideal para irrigação durante a artroscopia, com principal foco nas características bioquímicas do líquido, poucos trabalhos testaram características físicas destes fluidos, como a temperatura. Na primeira etapa deste trabalho foram avaliadas 24 articulações de ovinos submetidas à irrigação articular com solução de Ringer com lactato condicionado a quatro diferentes temperaturas (5, 12, 25 e 38 ºC). Para avaliação de cada grupo foram coletadas biopsias comparativas de membrana sinovial e de cartilagem com osso subcondral da articulação femoropatelar visando análise histológica e por microscopia eletrônica de varredura, respectivamente, imediatamente antes do início da infusão do líquido e após uma hora de infusão. Apesar de alterações na ultraestrutura da superfície articular terem sido observadas após lavagem das articulações, nenhuma diferença estatística entre os grupos foi identificada. Na segunda etapa do experimento foram testadas as temperaturas 5, 25 e 38 °C do Ringer com lactato utilizado para irrigação articular durante procedimentos artroscópicos em 12 articulações radiocárpicas de seis equinos. As articulações foram divididas em três grupos de quatro, sendo avaliados, além da membrana sinovial e cartilagem, o líquido sinovial previamente ao início da infusão com fluido condicionado e 12, 24 e 48 horas após o término da irrigação, visando análise comparativa das concentrações de IL-1&beta;, PGE2, TNF-&alpha;, condroitim sulfato (CS) e ácido hialurônico (AH). As alterações da superfície articular dos equinos decorrentes da irrigação também foram independentes da temperatura utilizada. Houve um aumento significativo das concentrações de PGE2 e IL-1&beta; no líquido sinovial às 12 horas em todos os grupos, exceto para IL-1&beta; no grupo de articulações irrigadas com fluido a 38 °C, que não apresentou alteração nas concentrações. A análise de TNF-&alpha; não revelou diferença significativa entre os grupos. As concentrações de CS aumentaram às 24 horas nos três grupos e foi estatisticamente maior no grupo irrigado a 38 °C. Não houve diferença significativa das concentrações de AH no líquido sinovial do grupo de articulações irrigadas a 25 °C, o que não ocorreu nos grupos 5 e 38 °C, havendo diminuição às 24 e 12 horas, respectivamente, retornando aos valores basais na coleta subsequente. As biopsias de membrana sinovial coletadas em ambas as etapas do experimento não demonstraram alteração estrutural ou migração celular que inferissem em resposta inflamatória ao insulto. As alterações da ultraestrutura da superfície da cartilagem estão mais relacionada ao fator mecânico da passagem do líquido que à temperatura de acondicionamento. Apesar de mais análises serem necessárias para definição da melhor temperatura a ser utilizada durante as artroscopias, a detecção de menores concentrações de IL-1&beta; nas articulações de equinos irrigadas com Ringer com lactato a 38 °C sugerem de que essa seja a temperatura menos deletéria para o ambiente articular. / Arthroscopy has a diagnostic and a therapeutic function in joint disease. Even with modern imaging modalities, it is still considered the gold standard for diagnosing equine joint problems. It is known that the physicochemical characteristics of different infusion solutions could influence structural modifications on cartilage surface. A number of studies have described the search for the ideal fluid to be used for irrigation during arthroscopy, focusing on the biochemical characteristics of the various liquids. However, few works have taken temperature into consideration when studying the physical characteristics of these fluids. Therefore, in the first phase of this study four different temperatures of Ringer lactate used for articular irrigation were assessed into four groups of six ovine joints each (5, 12, 25 and 38 ºC). To evaluate each group, comparative synovial membrane and osteochondral samples were collected from the patellofemoral joints for histological analysis and Scanning Electron Microscopy, respectively, immediately before and 1 hour after starting fluid infusion. Ultrastructural changes of the joint surfaces after irrigation were observed, but no statistical differences between groups were identified. In the second phase of this study, lactated Ringers solution was assessed at three different temperatures: 5, 25 and 38°C, for irrigation of 12 radiocarpal joints of six horses during arthroscopy. Three groups of four joints were studied to evaluate synovial membrane, cartilage and synovial liquid immediately before and 12, 24 and 48 hours after joint irrigation. These samples were subjected to comparative analysis of IL-1&beta, PGE2, TNF-&alpha, condroitin sulfate (CS) and hyaluronic acid (HA) concentrations. Changes of equine joint surfaces were also independent of temperature. There was a significant increase in the PGE2 and IL-1&beta; concentrations in the synovial liquid at 12 hours in all groups except for IL-1&beta; on the joints irrigated with fluid at 38°C, which did not show concentrations changes. There was no statistical difference of TNF-&alpha between groups. CS concentrations had a significant increase at 24 hours in all groups, meanwhile in the 38 °C group this increased was statistically greater. There was no statistical difference for HA concentrations on synovial liquid of the irrigated joints at 25 °C. In the 5 and 38 °C groups there were synovial fluid HA decrease at 24 and 12 hours, respectively, returning to basal values at the subsequent collect. The synovial membrane biopsies collected in the both steps of this study did not show any structural alterations or cellular migration that might interfere in response to inflammatory insult. Ultrastructural changes in articular most superficial zone are more related to mechanic action of fluid lavage than irrigation solutions temperature. Although more tests needs to be done, the lowest concentrations of IL-1&beta; in equine joints irrigated with Ringer lactate at 38 °C give some evidence that this is the less deleterious temperature to articular environment.

A Osteonecrose da cabeça do fêmur (ONCF) é uma patologia degenerativa que pode levar ao colapso da cabeça do fêmur tendo como conseqüência a necessidade de substituição da articulação coxofemoral. O objetivo principal no tratamento da ONCF é preservar a articulação coxofemoral e não substituí-la. Estudos realizados em pacientes humanos com ONCF demonstraram que os níveis de atividade e o número de células mesenquimais nos compartimentos hematopoiéticos e estromais da medula óssea estão deprimidos. Estes achados indicam a possibilidade da utilização de células-tronco mesenquimais (MSC) nas lesões necróticas da cabeça do fêmur. O presente trabalho propõe a utilização da terapia celular com MSC da medula óssea de ovinos e polpa dentária humana em 8 ovinos com ONCF induzida pela injeção intra-óssea de etanol, além da avaliação da reestruturação óssea através da microscopia de luz, e rastreamento das células transplantadas. Dois animais foram eutanasiados com 6 semanas após a indução da lesão e foram transplantadas as células-tronco mesenquimais em 4 animais, e realizada a descompressão central em 2 outros animais. Com dez semanas foram eutanasiados os animais restantes. O sucesso do transplante da medula óssea foi confirmado pela expressão do gene repórter LacZ na cabeça do fêmur dos animais transplantados macroscopicamente. A análise histológica evidenciou maior processo regenerativo na cabeça do fêmur do animal experimental submetido à terapia com células-tronco da polpa dentária imatura humana. / The osteonecrosis of femoral head (ONFH) is a degenerative disease that can lead to the collapse of the femoral head and necessity of total hip replacement. The main objective in the treatment of ONFH is to preserve the hip and not replace it. Studies in human patients with ONFH demonstrated that levels of activity and the number of mesenchymal cells in the hematopoietic and bone marrow stromal compartments are depressed. These findings indicate the possibility of the use of mesenchymal stem cells (MSC) in necrotic lesions on the head of the femur. This research proposes the use of cell therapy with MSC from ovine bone marrow and immature human dental pulp stem cell in ovine ONCF induced by intraosseous injection of ethanol, in addition, the assessment of bone restructuring by light microscopy and tracking of the transplanted cells. Two animals were euthanasied with 6 weeks after the induction of injury, and were transplanted mesenchymal stem cells in 4 animals, and held the central decompression in 2 other animals. After ten weeks were euthanasied the remaining animals. The successful of the bone marrow transplantation was confirmed by the macroscopic expression of the LacZ gene reporter in the femoral head of animals transplanted. The histological analysis showed an advanced regenerative process in the femoral head in the animal using human immature dental pulp stem cell.

This study aimed to evaluate the partial substitution of concentrate for gliricidia silage (Gliricidia sepium) in diets of lambs during growth on nutrient intake, daily weight gain, and feed conversion. Were used 27 Santa Inês lambs not castrated, weaned, with an average initial live weight of 14.5 kg and aged approximately four months from the flock of Embrapa Semiárido‟. The animals were subjected to four treatments in relation to dry matter substitution, 1 - corn silage (60%) + concentrate (40%) 2 - corn silage (60%) + gliricidia silage (13.3% ) + concentrate (26.7%), 3 - corn silage (60%) + gliricidia silage (26.7%) + concentrate (13.3%) and 4 - corn silage (60%) + silage Gliricídia (40%). The experimental design was randomized with four treatments and variable number of 19 repetitions and the experimental unit was one lamb. The live weights were similar among the four different treatments in the initial weighing, showing a significant difference only in the final weight, where the lambs that were fed with diets containing concentrate, regardless of the level, showed similar or higher performance (P> 0.05) than lambs receiving only gliricidia. The daily weight gain of lambs was higher for those fed concentrate than other treatments. For body weight before and after fasting, treatments that consumed concentrate were higher (P <0.05) than the treatment without addition of concentrate, except for the exclusive treatment between the silage and the treatment they consumed fewer concentrated in body weight during fasting (P> 0.05) Losses in the fasting were not different (P> 0.05) between treatments. The hot and cold carcass weight were higher (P <0.05) for the treatment that did not consume gliricidia silage and in the treatment that consumed 26.7% concentrate related to the treatment that consumed silage gliricidia, and the treatment consumed 13.3% of concentrate. The hot and cold carcass yield were different (P <0.05) between treatments, where the two treatments who consumed more concentrate showed higher values than the others. Regarding the commercial cuts of carcasses treatments consuming concentrate had higher absolute weights, however, in the percent of weight, there was no significant difference (P> 0.05). / Objetivou-se avaliar a substituição do concentrado pela silagem de Gliricídia (Gliricidia sepium) em dietas de cordeiros em fase de crescimento sobre o consumo de matéria seca, ganho de peso, conversão alimentar . Foram utilizados 27 cordeiros da raça Santa Inês, não castrados, recém desmamados, com peso médio inicial de 14,5 kg e com idade aproximada de quatro meses, oriundos do rebanho da Embrapa Semiárido. Os animais foram submetidos a quatro tratamentos em relação a matéria seca, sendo estes: 1 - silagem de milho (60%) + concentrado (40%); 2 - silagem de milho (60%) + silagem de gliricídia (13,3%) + concentrado (26,7%); 3 - silagem de milho (60%) + silagem de gliricídia (26,7%) + concentrado (13,3%) e Tratamento 4 - silagem de milho (60%) + silagem de gliricídia (40%). O delineamento utilizado foi o Inteiramente Casualizado com 4 tratamentos e com número variável de repetições, sendo a unidade experimental o cordeiro. Os pesos foram iguais entre os diferentes tratamentos nas pesagens iniciais, apresentando diferença significativa apenas no peso final, onde os cordeiros que foram alimentados com a dieta contendo concentrado, independente do nível, apresentaram rendimento semelhante (P>0,05) e superior (P<0,05) a dieta que recebeu apenas gliricídia. Os ganhos médios de cordeiros foram maiores (P<0,05) para os animais que receberam concentrado em relação aos demais tratamentos. Para peso vivo antes e depois do jejum, os animais dos tratamentos que consumiam concentrado, obtiveram pesos maiores (P<0,05) que o tratamento onde os animais não consumiam concentrado. As perdas no jejum não foram diferentes (P>0,05) entre os tratamentos. Os pesos de carcaça quente e fria foram maiores (P<0,05) para os animais do tratamento que não consumia silagem de gliricídia e para os cordeiros do tratamento que consumia 26,7% de concentrado em relação ao tratamento que consumia silagem de gliricídia, sendo que o tratamento que consumia 13,3% de concentrado, não apresentou diferença dos demais (P>0,05). Os rendimentos de carcaça quente e fria, tanto de fazenda quanto comercial, apresentaram diferença significativa (P<0,05) entre os tratamentos, onde os dois tratamentos onde os animais consumiam mais concentrado apresentaram valores maiores que os demais. Em relação aos cortes comerciais, carcaças oriundas de tratamentos que ingeriam concentrado tiveram pesos absolutos mais elevado para os cortes, entretanto, em relação ao peso percentual, não existiu diferença significativa (P>0,05).

Made available in DSpace on 2016-01-26T18:55:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao.pdf: 163253 bytes, checksum: 0e35acc009cfd69c73f2502bda6e246f (MD5) Previous issue date: 2010-08-30 / The complex toxocariasis/larva migrans has been considered as one of the most important helminthosis wideworld. Human beings acquire the infection especially by ingestion of Toxocara spp. eggs present in contaminated soil. However, it is stated that human may become infected by ingesting raw or undercooked meat of paratenic hosts. The purpose of this study was to evaluate the frequency of anti-Toxocara antibodies in ovine from Presidente Prudente. Serum samples were obtained from 365 sheep of diverse breed and different ages. The collection of samples was done in a slaughter house as well as in some farms from Presidente Prudente, São Paulo. Three groups were evaluated. Group I: animals up to six months old; Group II: animals aging seven up to 10 months; Group III: animals aging more than 11 months. ELISA test was performed in order to detect antibodies (IgG) anti-Toxocara by using excretory-secretory antigens of T. canis (TES). One-hundred-three out of 365 animals (50.14%) showed antibodies anti-¬Toxocara. It was observed a significant difference among the analyzed groups, regarding age of animals. This finding suggests a proportional relationship between infection rate and aging. It is possible to assume that the high frequency of soropositive animals make possible the infection of human beings who consume ovine meat. It is also possible to consider the relevance of these animals in the epizootiology of Toxocara spp. / O complexo toxocaríase/larva migrans é considerado como uma das principais helmintoses. Embora seja considerada como uma geohelmintose, a zoonose pode ser adquirida por ingestão de carne crua ou mal cozida de hospedeiros paratênicos. Com objetivo de avaliar a freqüência de anticorpos anti-Toxocara, foram obtidas amostras de soro de 365 ovinos de diferentes raças, em um frigorífico e propriedades de ovinos da região de Presidente Prudente, São Paulo. Foram avaliados três grupos. Grupo I: animais até seis meses; Grupo II: animais de sete a 10 meses; Grupo III: ovinos acima de 11 meses de idade. Anticorpos (IgG) foram detectados pelo método de ELISA, utilizando-se antígenos excretórios-secretórios de T. canis (TES). Dos animais estudados, 50,14% (183/365) foram sororeagentes para anticorpos anti-¬Toxocara. Observou-se diferença significativa entre os grupos analisados sugerindo uma relação proporcional da taxa de infecção com o avanço da idade em ovinos. A alta frequência de ovinos sororegantes mostra a possibilidade de infecção de seres humanos que consomem carne destes animais e também a participação dos mesmos na cadeia epizootiológica de Toxocara spp.

Made available in DSpace on 2016-07-18T17:53:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao.pdf: 163253 bytes, checksum: 0e35acc009cfd69c73f2502bda6e246f (MD5) Previous issue date: 2010-08-30 / The complex toxocariasis/larva migrans has been considered as one of the most important helminthosis wideworld. Human beings acquire the infection especially by ingestion of Toxocara spp. eggs present in contaminated soil. However, it is stated that human may become infected by ingesting raw or undercooked meat of paratenic hosts. The purpose of this study was to evaluate the frequency of anti-Toxocara antibodies in ovine from Presidente Prudente. Serum samples were obtained from 365 sheep of diverse breed and different ages. The collection of samples was done in a slaughter house as well as in some farms from Presidente Prudente, São Paulo. Three groups were evaluated. Group I: animals up to six months old; Group II: animals aging seven up to 10 months; Group III: animals aging more than 11 months. ELISA test was performed in order to detect antibodies (IgG) anti-Toxocara by using excretory-secretory antigens of T. canis (TES). One-hundred-three out of 365 animals (50.14%) showed antibodies anti-¬Toxocara. It was observed a significant difference among the analyzed groups, regarding age of animals. This finding suggests a proportional relationship between infection rate and aging. It is possible to assume that the high frequency of soropositive animals make possible the infection of human beings who consume ovine meat. It is also possible to consider the relevance of these animals in the epizootiology of Toxocara spp. / O complexo toxocaríase/larva migrans é considerado como uma das principais helmintoses. Embora seja considerada como uma geohelmintose, a zoonose pode ser adquirida por ingestão de carne crua ou mal cozida de hospedeiros paratênicos. Com objetivo de avaliar a freqüência de anticorpos anti-Toxocara, foram obtidas amostras de soro de 365 ovinos de diferentes raças, em um frigorífico e propriedades de ovinos da região de Presidente Prudente, São Paulo. Foram avaliados três grupos. Grupo I: animais até seis meses; Grupo II: animais de sete a 10 meses; Grupo III: ovinos acima de 11 meses de idade. Anticorpos (IgG) foram detectados pelo método de ELISA, utilizando-se antígenos excretórios-secretórios de T. canis (TES). Dos animais estudados, 50,14% (183/365) foram sororeagentes para anticorpos anti-¬Toxocara. Observou-se diferença significativa entre os grupos analisados sugerindo uma relação proporcional da taxa de infecção com o avanço da idade em ovinos. A alta frequência de ovinos sororegantes mostra a possibilidade de infecção de seres humanos que consomem carne destes animais e também a participação dos mesmos na cadeia epizootiológica de Toxocara spp.

Pelvic organ prolapse is characterized by the failure of vaginal wall support and protrusion of the pelvic organs through the vaginal orifice. Exact etiology of pelvic organ prolapse is not completely understood. The surgical procedures for pelvic organ prolapse utilize various biomaterials for holding the organs in place. However, the biomaterials used for restoring these organs have a high rate of failure in a complicated anatomical and biomechanical environment. With the given issues at hand, animal models are the best answer for understanding the pathophysiology of prolapse, and determining the cause of failure of these surgical interventions. For this study, we are investigating sheep as an animal model for human pelvic organ prolapse. We compared the anatomy of the sheep pelvic floor with humans. We found that anatomical parameters are a good measure/biomarker for estimating structural and anatomical changes in the body of the animal. As the anatomical measurements are applied to human vaginal prolapse, we can apply the same principles in sheep and further explore the feasibility of using sheep as an animal model for prolapse. Additionally, we evaluated location dependent biomechanical properties of the sheep vaginal tract. We have characterized the structure-property relationship of sheep vaginal wall tissue in the top third and middle third regions. We found that in contrast to current published research, sheep vaginal tissues are anisotropic in nature. This anisotropic characteristic of the sheep vaginal wall tissue is a direct function of the microstructural arrangement of collagen, elastin, smooth muscle and other extracellular matrix components. We also developed decellularized scaffolds as potential biomaterials, which can be potentially utilized in prolapse surgeries. We developed three different types of vaginal tissue scaffolds using SDS, Triton X-100, and trypsin for reconstructive surgery applications. During the decellularization, all of the cellular components are removed, which leaves the acellular ECM behind. We analyzed the biomechanical properties and microstructural properties of these scaffolds and found that the SDS samples were better in all aspects of the preclinical evaluation. Future studies will aim at applying the anatomical and biomechanical techniques used in this study to prolapsed sheep vaginal wall tissues.

Simultaneous maternal indirect blood pressure measurements, electronic fetal heart rate monitoring, and ultrasonographic biophysical profile testing were used to assess maternal-fetal homeostasis in gravid ewes during gestational days 127 to 134 (term 146), during a 72-hour fast, and during treatment with thromboxane synthetase inhibitors CGS13080 and CGS12970. Seventy-five percent of the ewes (12 of 16) developed clinical signs of ovine pregnancy-induced hypertension, including maternal hypertension and fetal depression. In three untreated hypertensive ewes, pregnancy was terminated by spontaneous premature delivery, and one maternal death occurred after an eclamptic seizure. All nine ewes treated with one of the two thromboxane synthetase inhibitors responded to therapy with decreases in blood pressure and resolution of fetal depression. These nine ewes completed gestation, and were delivered at term. These data indicate that therapy with thromboxane synthetase inhibitors in this animal model of preeclampsia results in profoundly beneficial effects and suggest that further studies of thromboxane synthetase inhibitors are warranted in preeclampsia.

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