Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-08-11T11:55:17Z No. of bitstreams: 1 Arthur Nascimento.pdf: 397417 bytes, checksum: 40f7d9ee2e954be3d6ecb575b4fe1359 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-11T11:55:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Arthur Nascimento.pdf: 397417 bytes, checksum: 40f7d9ee2e954be3d6ecb575b4fe1359 (MD5) Previous issue date: 2008-02-11 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / In order to achieve the identification of sex in fetal sheep, were subjected to the technique of Polymerase Chain Reaction (PCR), 45 samples of DNA extracted from amniotic fluid of pregnant uterus, 24 samples of males and 21 females. The amniotic fluid was obtained by amniocentesis guided by ultrasound for greater accuracy in aspiration and also for subsequent application of the technique in vivo, as simulation. Gestational age was laid on the measurement of fetuses with caliper, which showed variation of 3.3 to 46.5 cm. The samples were divided into three groups based in Kadu and Kaikini (1987): Group 1 (zero to 8.6 cm) from conception to the 60th day of gestation, group 2 (8.7 to 26 cm) among 61th and 105th day, and Group 3 (26,1 cm on) 106th day until the birth. The DNA was extracted using the method phenol-chloroform, obtaining a quantity of less than 50 ng per μL, quantified by comparing through - lambda and visualized in 1% agarose gel. For amplification of genetic material, were used "primers" to the SRY gene (116pb), found in the Y chromosome present only in males, and Aml-X (300pb), autosomal, present in both sexes. In all samples was possible to sex the fetuses and the primers used shown to be quite effective. The sex was confirmed by morphological analysis of fetuses, aside from the concept who genital tubercle still had not moved, proving the effectiveness of the PCR molecular tool for this examination. / Com o objetivo de realizar a identificação do sexo fetal em ovinos, foram submetidas à técnica de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), 45 amostras de DNA extraídas do líquido amniótico de úteros prenhes, sendo 24 amostras de machos e 21, fêmeas. O fluido amniótico foi obtido por amniocentese guiada por ultra-sonografia para maior precisão na aspiração, como também para posterior aplicação in vivo da técnica, com efeito de simulação. A idade gestacional foi estipulada a partir da medição dos fetos com paquímetro, a qual apresentou variação de 3,3 a 46,5 cm. As amostras foram divididas em três grupos segundo Kadu e Kaikini (1987): Grupo 1 (zero a 8,6cm) da concepção ao 60o dia de gestação, Grupo 2 (8,7 a 26 cm) entre o 61o e o 105o dia e Grupo 3 (26,1 cm em diante) 106o até o nascimento. O DNA foi extraído através do método fenol-clorofórmio, obtendo-se uma quantidade inferior a 50 ngpor μl ao ser quantificado por comparação através de -lambda e visualizado em gel de agarose 1%. Na amplificação do material genético, foram utilizados os “primers” referentes aos genes SRY (116pb), encontrado no cromossomo Y presente apenas em machos, e Aml-X (300pb), de caráter autossômico, presente em ambos os sexos. Em todas as amostras foi possível realizar a sexagem fetal e os primers utilizados demonstraram ser bastante eficientes. O sexo foi confirmado pela análise morfológica dos fetos, com exceção do concepto cujo tubérculo genital ainda não havia migrado, comprovando a eficácia da ferramenta molecular PCR para este exame.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-08-11T13:06:12Z No. of bitstreams: 1 Ana Lydia Vasco A Peixoto.pdf: 2392494 bytes, checksum: da169ddb32ab0f7830d6e65c01995e93 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-11T13:06:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ana Lydia Vasco A Peixoto.pdf: 2392494 bytes, checksum: da169ddb32ab0f7830d6e65c01995e93 (MD5) Previous issue date: 2007-02-12 / The antioxidant substances prevent the oxidative damages during freezing/thawing processes and incubation period caused by ROS to sperm cells, improving the sperm parameters (vigor, motility and acrosome integrity), besides avoid damages to DNA. The aim of this study was to evaluate the effect of vitamin C and Trolox addition to diluent used to ram semen cryopreservation. The ejaculates of eleven rams were harvested by artificial vagina. After macrocospic (aspect, color and viscosity) and microscopica (motility and vigor) evaluation the pool was diluted in Tris-egg yolk (Exp. 1, 2 and 3) and Fiser (Exp. 2) and supplemented with antioxidant substances: G1) Diluent (Control); G2) Diluent + 600 mM/L of vitamin C; G3) Diluent + 60 mM/L of Trolox and G4) Diluent + 600 mM/L of vitamin C + 60 mM/L of Trolox. The freezing was done by automatized method using two curves: fast(C2= –0.5 oC/minute of 25 to 5 oC, and -12.5 oC/minute of 5 to –120 oC) to the Exps. 1 and 2, and slow (C1= –0.25 oC/minute of 25 to 5 oC, and –20 oC/minute of 5 to –120 oC) to the Exp. 2, and by conventional method (90 minutes), where after the refrigeration (5 °C) the samples were placed in liquid nitrogen during 10 minutes until reaching -120 oC (Exp. 2 and 3). The straws with 100 (Exp. 1), 75 (Exp. 2 and 3) and 200 (Exp. 2) x 106 spermatozoa were transferred into the liquid nitrogen storage container (-196 oC). The semen samples were evaluated after thawing (0 min; Exp. 1, 2, and 3) and after 30 (Exp. 1 and 2) and 60 min (Exp. 1, 2 and 3) of the incubation at 37 ºC according to progressive motility, vigor, oxidative stress, acrosome and DNA integrity (Exp. 1, 2 and 3) and sperm kinetics (MT, MT, VSL,VCL, VAP, LIN, STR, ALH, and BCF; Exp. 3). In the Exp. 1, there was significant difference (p<0.05) among evaluation times (0, 30 and 60 min) in the parameters of acrosome integrity and oxidative stress for the groups supplemented with vitamin C and Trolox and the Control group (p>0.05). However, in the Exp. 2 the percentages of PM, vigor and acrosome integrity had significant difference (p<0.05) between incubation times (0 and 60 min), being that the group supplemented with Trolox (G3) presented greater cell percentages with oxidative stress (p<0.05) when compared to the vitamin C group (G2). On the Exp. 3, there was evidence that the incubation time intervened on the sperm kinetics (MT, MP, VSL, VAP, LIN and STR), acrosome integrity and oxidative stress of sperm cells, besides presenting negative correlation between acrosome integrity and oxidative stress for the G3 group(Trolox), positive correlation between acrosome integrity and progressive motility to the G2 group (vitamin C) and negative correlation between oxidative stress and LIN to the G2 group(vitamin C) after 60 minutes of incubation. However, it can be concluded that the incubation time intervenes negatively on in vitro viability of the sperm cells independent of the vitamin C and Trolox adition; using the conventional method of cryopreservation of ram semen diluted in Tris-egg yolk, the vitamin C addition provides less oxidative stress on the spermatozoa after post-thawing; Using the automatized method of cryopreservation of ram semen diluted in Fiser, it should be used the slow curve of refrigeration (0.25 ºC/min) without necessity of vitamin C (600μM/L) and Trolox (60μM/L) addition and; Based on the kinetics, acrosome integrity, and oxidative stress, the addition of ascorbic acid and Trolox do not minimizes the negative effects of the cryopreservation and the incubation of ram semen at temperature of 37 oC after thawing. / Os antioxidantes previnem os danos oxidativos durante processos de congelação/descongelação e período de incubação causados pelas ROS/RNS às células espermáticas, melhorando os parâmetros espermáticos (vigor, motilidade e integridade acrossomal), além de evitar danos ao DNA. Objetivou-se com este estudo avaliar o efeito da adição de vitamina C e Trolox ao diluidor utilizado para criopreservação de sêmen ovino, utilizando o ejaculado de onze carneiros colhidos através de vagina artificial. Após avaliação macroscópica (aspecto, cor e viscosidade) e microscópica (motilidade e vigor), o pool foi diluído em Tris-gema (Exp. 1, 2 e 3) e Fiser (Exp. 2) e suplementado com antioxidantes: G1) Diluente (Controle); G2) Diluente + 600 mM/L de vitamina C; G3) Diluente + 60 mM/L de Trolox e G4) Diluente + 600 mM/L de vitamina C + 60 mM/L de Trolox. A congelação foi realizada pelo método automatizado utilizando duas curvas: Rápida (C2= –0,5 oC/minuto, de 25 oC a 5 oC, e a -12,5 oC/minuto, de 5 oC a –120 oC) para os Exp. 1 e 2 e Lenta (C1= –0,25 oC/minuto, de 25 oC a 5 oC, e a –20 oC/minuto, de 5 oC a –120 oC) apenas para o Exp. 2, e pelo método convencional (90 minutos), onde após a refrigeração (5 °C) as amostras foram colocadas em nitrogênio líquido por 10 minutos até atingirem –120 oC (Exp. 2 e 3). As palhetas foram envasadas com 100 (Exp. 1), 75 (Exp. 2 e 3) e 200 (Exp. 2) x 106 espermatozóides e, em seguida, armazenadas em botijão criobiológico (-196 oC). As amostras de sêmen foram avaliadas imediatamente após a descongelação (0 min; Exp. 1, 2, e 3) e depois de 30 (Exp. 1 e 2) e 60 min (Exp. 1, 2 e 3) de incubação a 37 ºC (30 e 60 minutos), quanto à motilidade progressiva (MP), vigor, estresse oxidativo, integridade de acrossoma e de DNA (Exp. 1, 2 e 3) e quanto a motilidade cinética espermática (MT, MP, VSL, VCL,VAP, LIN, STR, ALH, e BCF; Exp. 3). No Exp. 1, houve diferença significativa (p<0,05) entre os tempos de avaliação (0, 30 e 60 min) nos parâmetros de integridade de acrossoma e estresse oxidativo para os grupos tratados com vitamina C e Trolox e o grupo controle (p>0,05). Todavia, no Exp. 2 os porcentuais para MP, vigor e integridade de acrossoma diferiram (p<0,05) entre tempos de incubação (0 e 60 min), sendo que o grupo suplementado com Trolox (G3) apresentou maiores porcentuais de células com estresse oxidativo (p<0,05), quando comparado ao grupo suplementado com vitamina C (G2). Para o Exp. 3, constatou-se que o tempo de incubação interferiu na cinética espermática (MT, MP, VSL, VAP, LIN e STR), na integridade acrossomal e no grau de estresse oxidativo, além de apresentar correlação negativa entre integridade acrossomal e estresse oxidativo para o G3 (Trolox), correlação positiva entre integridade do acrossoma e MT para o G2 (vitamina C) e negativa para estresse oxidativo e LIN para o G2 (vitamina C), após 60 minutos de incubação. Contudo, pode-se concluir que o tempo de incubação interfere negativamente na viabilidade in vitro das células espermáticas independente da adição de vitamina C e Trolox; ao se utilizar o método convencional de congelação de sêmen ovino diluído em Tris-gema, a adição de vitamina C e Trolox proporciona menos estresse oxidativo às células espermáticas imediatamente após a descongelação; Ao se usar o método automatizado de congelação de sêmen ovino diluído em Fiser, deve-se utilizar a curva lenta de refrigeração (0,25 ºC/min), sem necessidade da suplementação de vitamina C (600 mM/L) e Trolox (60 mM/L) ao diluente e, Com base na avaliação da cinética, da integridade acrossomal e do estresse oxidativo, a adição de ácido ascórbico e Trolox não minimiza os efeitos negativos da criopreservação e da incubação de sêmen ovino à temperatura de 37 oC, pós-congelação.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-08-16T14:31:59Z No. of bitstreams: 1 Edivaldo Rosas.pdf: 659763 bytes, checksum: 489e95ded0734db81a8a937256c893d6 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-16T14:31:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Edivaldo Rosas.pdf: 659763 bytes, checksum: 489e95ded0734db81a8a937256c893d6 (MD5) Previous issue date: 2008-02-12 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The use of molecular biology in animal reproduction to identifying the sex genetic allows the producer has better reproductive planning, facilitating the coordination of actions aimed at rationalizing production and profitability. The objective of this study was to determine methods for the identification of the sex of the goats and sheep, using different concentrations of DNA (150, 100, 50, 1, 0.5, 0.2 and 0.1 ng) extracted from blood of both sexes, as a possibility for application in sexing embryos pre-implantating, sperm and animals pseudo-hermaphrodites. It was performed polymerase chain reaction (PCR) multiplex for the SRY gene (116bp) found in the Y chromosome, the gene for Aml-X (300pb) found on the X chromosome, in addition the sequences corresponding to genes ZFX / ZFY containing 445 and 447bp respectively. The use of these methods presented showed accuracy of 100% in samples of blood goat and sheep, in low concentrations, at least 0.2ng (SRY/Aml-X) and 1.0ng (SRY/ZFXZFY), which suggests the feasibility of the technique for determining sexual in these species. / A utilização de ferramentas moleculares na identificação do sexo genético permite ao produtor um melhor planejamento reprodutivo, elevando o valor dos animais avaliados e facilitando a coordenação de ações que visem racionalizar produção e lucratividade. Objetivou-se com o presente estudo determinar métodos que permitam a identificação do sexo genético das espécies caprina e ovina, utilizando diferentes concentrações de DNA (150, 100, 50, 1, 0,5, 0,2 e 0,1ng) extraído de sangue de ambos os sexos, como uma possibilidade de aplicação em exames embrionários pré-implantacionais, sexagem espermática e identificação do sexo em animais pseudo-hermafrotidas. Foram realizadas reações em cadeia da polimerase (PCR) multiplex para o gene SRY (116pb) encontrado no cromossomo Y, para o gene Aml-X (300pb) encontrado no cromossomo X, além das seqüências correspondentes aos genes ZFX/ZFY que contêm 445 e 447pb respectivamente. A utilização destes métodos apresentou acurácia de 100% nas amostras de sangue caprino e ovino, com eficiência em quantidades de DNA de até 0,2ng (SRY e Aml-X) e 1,0ng (SRY e ZFX/ZFY), o que sugere a viabilidade da técnica para determinação sexual embrionária destas espécies.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-08-17T12:45:26Z No. of bitstreams: 1 Eduardo Levi Sousa Guarana.pdf: 2109954 bytes, checksum: f0acb1cbcb8908ca98a1cd46800161e4 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-17T12:45:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Eduardo Levi Sousa Guarana.pdf: 2109954 bytes, checksum: f0acb1cbcb8908ca98a1cd46800161e4 (MD5) Previous issue date: 2011-02-18 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / This study aimed to evaluate the dynamics of the intramammary infection on different stages of lactation (beggining, middle and ending) and its impact in the physical-chemical composition of milk from Santa Inês ewes. Thirty four primiparous and multiparous Santa Inês ewes raised under semi-intensive and submitted to the same sanitary and nutritional management during all lactation period were studied. The moments of evaluation and sampling were approximately 10 days before parturition (colostrum formation phase), 15 days postpartum (dpp), 30 dpp, 60 dpp and 90 dpp (weaning), moments in which it was conducted clinical examination of the mammary gland. The bacteriological and susceptibility profile of isolates were performed at all times; and in the postpartum moments also perform the direct counting of somatic cells (SCC) and physico-chemical evaluation of milk (fat, protein and lactose contents, density, Dornic acidity, electric conductivity, pH and chloride content). Based on bacterial growth samples were characterized as being from healthy (G1) or infected mammary glands (G2) in the respective moments. Variance analysis was employed and the F statistics with its respective level of significance (p) was calculated; in the descriptive study of the variables studied it was used a frequency distribution (%).All ewes were seronegative for lentiviruses. It was observed an elevation (P<0,05) in the somatic cell count, characterizing the inflammatory process with consequent elevation, although mild, in the fat, protein and chloride contents, pH elevation and reduction in lactose content, and those alterations were more significant in the final stage of lactation. The pre-parturition phase showed a high percentage of bacterial isolation from apparently healthy mammary glands, as well as at the end of lactation. Coagulase-negative Staphylococcus was the most frequently isolated from subclinical cases, which prevailed. The value of somatic cell direct count and the percentage of bacterial isolation which characterize the intramammary infection showed elevated values insofar as it intensifies the reaction of the CMT. A high antimicrobial sensitivity to ampicilin, cefalotin and cefoxitin was verified for Gram-positive bacteria. As for Gram-negative bacteria a good sensitivity to ampicilin, cefoxitin and sulphazotrin was verified. / Objetivou-se neste estudo, avaliar a dinâmica da infecção intramamária nas diferentes fases da lactação (início, meio e final) e seu impacto sobre a composição físico-química do leite em ovelhas da raça Santa Inês. Foram acompanhadas 34 ovelhas primíparas e multíparas da raça Santa Inês criadas em sistema semi-intensivo e submetidas ao mesmo manejo higiênico-sanitário e nutricional durante todo o período de lactação, sendo avaliadas aproximadamente 10 dias antes do parto (fase de formação do colostro), 15 dias pós-parto (dpp), 30 dpp, 60 dpp e 90 dpp (desmame), momentos em que foi realizado exame clínico da glândula mamária. O cultivo bacteriológico e o perfil de sensibilidade dos isolados foram realizados em todos os momentos; e nos momentos pós-parto realizou-se também a contagem direta de células somáticas (CCS) e avaliação físico-química do leite (teor de gordura, proteína, lactose, densidade, acidez Dornic, condutividade elétrica, pH e teor de cloretos). Baseado no crescimento bacteriano, as amostras foram caracterizadas como provenientes de glândulas sadias (G1) ou infectadas (G2) nos respectivos momentos. Foi empregada a análise de variância e calculada a estatística F e seu respectivo nível de significância (p), e no estudo descritivo das variáveis estudadas empregou-se a distribuição de frequências (%). Todas as ovelhas foram negativas na sorologia para lentivírus. Foi observada elevação (P<0,05) na contagem de células somáticas caracterizando o processo inflamatório, com consequente elevação, apesar de pequena intensidade no teor de gordura, proteína e cloretos e pH, e redução no teor de lactose, sendo estas alterações mais marcantes na fase final de lactação. A fase que precede o parto apresentou alto percentual de isolamento bacteriano de glândulas aparentemente sadias, bem como, na fase inicial da lactação. O Staphylococcus coagulase negativo foi o agente mais frequentemente isolado dos casos subclínicos, que prevaleceram. O valor da contagem direta de células somáticas e o percentual de isolamento bacteriano, que caracterizam a infecção intramamária, apresentaram valores aumentados à medida que se intensifica a reação do CMT. Uma alta sensibilidade antimicrobiana foi verificada para as bactérias Gram positivas frente à ampicilina, cefalotina e cefoxitina e para as bactérias Gram negativas houve uma boa sensibilidade frente à ampicilina, cefoxitina e sulfazotrim.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-08-25T13:14:10Z No. of bitstreams: 1 Elielete Maria Pires de Azevedo.pdf: 1214708 bytes, checksum: c870297fcafd480a47f0be9c7c4e26d3 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-25T13:14:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Elielete Maria Pires de Azevedo.pdf: 1214708 bytes, checksum: c870297fcafd480a47f0be9c7c4e26d3 (MD5) Previous issue date: 2007-02-26 / This work was divided in three chapters, had the objective to establish fetal measurement parameters that allow appreciate the age of gestation (IG) and birth fetal weight with one or two ultra-sonografic examinations with, to determine the ideal moment to sex goat and ovine embryos comparing the average migration period of the genital tubercle between sex, race and species, to evaluate the accuracy of the fetal sexing between sexes, as well as defining the best plans for sexing of goat and ovine embryos. In the first chapter experiment 156 Dorper, Morada Nova and Damara embryos had been monitored, from 30 to 45 days of gestation, being measured the céfalo-coccígeo length (CCC), area (AC), perimeter (PC) and volume (VC) of concept and area (AV), perimeter (PV) and volume (VV) of the embryonic vesicle. All you create them had been weighed after the birth immediately. The equations had not evidenced existence of relation (P > 0,05) between the photometric parameters and the fetal weight to the birth, however, they had shown to high correlation (P < 0,05) with the pregnancy age and amongst the parameters, the CCC were what it presented greater efficiency. In the experiment of as the chapter two 280 embryos in 24-hour intervals had been monitored, of the 30 to the 60 day of gestation in the sheep and of the 40 to the 60 day in goats, with ultrasound. The average time of migration of the TG in the ovine species (41, 3 ± 3,1 days) was lesser (P < 0.05) that in the goat species (47,2 ± 2,3 days) and in this species, the migration of the TG of the embryos of the race of Saanen was more delayed (P < 0.05) of that in the too much races. Ahead of the results concludes that the fetal sexing in the ovine is precocious of the one than in the goat ones and that the sex of the embryo does not influence in the average time of migration of the TG. In the experiment of the third chapter 280 embryos from 219 females were monitored , being examined goats between Days 40 and 60 and sheeps on Days 30 to 60 of pregnancy, with an ultrasound equipped with linear transducer (6.0 and 8.0 MHz), by transrectal via. Of the visualized plans, longitudinal the ventral was considered most efficient to sex foetus in both the species, a time that are acquired images of the initial period of genital tubercle migration, beyond the visualization of other structures, as umbilical lace, nipples, prepuce, mammary gland and escrotal bag. / Este trabalho, constituído de três capítulos, teve por objetivos estabelecer parâmetros fetométricos que permitam estimar a idade de gestação (IG) e o peso fetal ao nascimento com um ou dois exames ultra-sonográficos, determinar o momento ideal de sexar fetos caprinos e ovinos comparando o período médio de migração do tubérculo genital entre sexo, raça e espécies, avaliar a acurácia da sexagem fetal entre sexos, bem como definir os melhores planos de abordagem ultrasonográfica para sexagem de fetos caprinos e ovinos. No experimento do primeiro capítulo foram monitorados 164 fetos das raças Dorper, Morada Nova e Damara aos 30 e 45 dias de gestação, sendo mensurados o comprimento céfalo-coccígeo (CCC), área do concepto (AC), perímetro do concepto (PC) e volume do concepto (VC) e área da vesícula (AV), perímetro da vesícula (PV) e volume da vesícula (VV). Todas as crias foram pesadas imediatamente após o nascimento. As equações não evidenciaram existência de relação (P > 0,05) entre os parâmetros fetométricos e o peso fetal ao nascimento, todavia, mostraram alta correlação (P < 0,05) com a idade gestacional e dentre os parâmetros, sendo o comprimento céfalo-coccígeo o que apresentou maior eficiência. Baseado nos resultados concluiu-se que aquele ultra-som associado com equações de regressão lineares específicas, pode ser utilizado para determinar a idade gestacional. No experimento do segundo capítulo foram monitorados com ultra-som 317 fetos em intervalos de 24 horas, do 30º ao 60º dias de gestação em ovelhas e do 40º ao 60º dias em cabras, com ultra-som. O tempo médio de migração do TG na espécie ovina (41.3 ± 3.1 dias) foi menor (P < 0.05) que na espécie caprina (47.2 ± 2.3 dias) e nessa espécie, a migração do TG dos fetos da raça de Saanen foi mais tardia (P < 0.05) do que nas demais raças. Diante dos resultados conclui-se que a sexagem fetal nos ovinos é mais precoce do que nos caprinos e que o sexo do feto não influencia no tempo médio de migração do TG. No experimento do terceiro capítulo foram avaliadas imagens ultra-sonográficas de 280 fetos das espécies caprina e ovina submetidos à sexagem fetal entre o 40° e 60º dias em cabras e 30º e 60º dias em ovelhas. Conclui-se que dos planos visualizados, o longitudinal ventral foi considerado o mais eficiente para sexar fetos em ambas as espécies (52.86%), uma vez que são captadas imagens do período inicial de migração de tubérculo genital, além da visualização de outras estruturas, como cordão umbilical, tetas, glândula mamária e prepúcio e bolsa de escrotal. Palavras-chave: ultra-sonografia, fetometria, sexagem, planos ultra-sonográficos.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-06T12:44:45Z No. of bitstreams: 1 Ellen Cordeiro Bento Silva.pdf: 751581 bytes, checksum: b7e4f33697071f1105ffa3e9cf312bdc (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-06T12:44:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ellen Cordeiro Bento Silva.pdf: 751581 bytes, checksum: b7e4f33697071f1105ffa3e9cf312bdc (MD5) Previous issue date: 2010-02-26 / Aiming to evaluate the effect of adding different cryoprotectants (glycerol, ethylene glycol or acetamide) and antioxidants (resveratrol and quercetin) on in vitro viability of ram thawed semen samples, four adult males, Santa Ines crossbred, were used. After collect semen using an artificial vagina, aliquots of semen were evaluated macroscopic and microscopically and the pool of semen was divided and diluted in Tris-yolk medium, according to experiments and experimental groups. For the Experiment I, which evaluated the cryoprotectants addition, the experimental groups were classified as: G1 = Tris-yolk egg + 5% glycerol, G2 = Tris-yolk egg + 3% ethylene glycol, G3 = Tris-yolk egg + 5% ethylene glycol; G4 = Tris-yolk egg + 2% acetamide, G5 = Tris-yolk egg + 7% acetamide. However, the Experiment II, which were used the antioxidant treatments, was divided in three sub experiments: Exp 1 [resveratrol (0, 5, 10, 15 and 20 μg/mL, respectively, R0, R5, R10, R15 and R20)]; Exp 2 [quercetin (0, 5, 10, 15 and 20 μg/mL, respectively, Q0, Q5, Q10, Q15 and Q20)], and Exp 3 [without antioxidant (RQ0), 10 μg/mL of resveratrol (R10), 5 μg/mL of quercetin (Q5), and 10 μg/mL of resveratrol + 5 μg/mL of quercetin (R10Q5)]. After dilution, aliquots of semen were packed in straws (0.25 mL), frozen (-196 °C) and evaluated after thawing (37 oC/30 seconds) for progressive motility (PM), vigor, plasma membrane integrity (PMi), mitochondrial membrane potential (MMP) and acrosome integrity (ACi). It was found that in Experiment I, G1 showed higher PM (P<0.05) than G3, G4 and G5; vigor was higher (P<0.05) than G4 and G5; and PMi higher (P<0.05) than G2, G3, G4 and G5. However, there was no significant difference (P>0.05) among groups on the MMP and ACi parameters. In Experiment II, there was no difference among groups on the PM, vigor, PMi and ACi. MMP had significant difference (P<0.05) among experimental groups of their three sub experiments. So, in Exp 1, R0 group (36.67±8.01%) was higher than R20 (22.33±6.16%); in Exp 2, Q0 group (36.25±8.12%) was higher (P<0.05) than Q10 (9.33±6.54%), Q15 (6.25±5.98%) and Q20 (5.17±5.08%), and the Q5 (20.58±12.05%) was higher (P<0.05) than Q15 (6.25±5.98%) and Q20(5.17±5.08%) groups; and in Exp 3, RQ0 group (39.00±16.79%) was higher (P<0.05) than Q5 (18.00±13.76%) and R10Q5 (14.42±7.47%) groups. It can be concluded that glycerol (5%) is more effective in protecting ram spermatozoa submitted to deleterious effects of freezing than ethylene glycol (3 and 5%) and acetamide (2 and 7%); the addition of resveratrol and quercetin phenolic antioxidants, alone or in combination, reduces mitochondrial membrane potential of sperm frozen ram; and other studies should be performed to evaluate different concentrations and the effect of the addition on the fertility rate of ewes inseminated artificially. / Objetivando-se avaliar o efeito da adição de diferentes crioprotetores (glicerol, etileno glicol ou acetamida) e antioxidantes (resveratrol – R e quercetina – Q) na viabilidade in vitro de amostras congeladas de sêmen ovino, foram utilizados quatro reprodutores adultos, mestiços da raça Santa Inês. Após colheita com vagina artificial, alíquotas de sêmen foram avaliadas macroscópica e microscopicamente e o pool de sêmen foi subdividido e diluído em Tris-gema, de acordo com os experimentos e grupos experimentais. No Experimento I, no qual foram avaliados os crioprotetores, os grupos experimentais foram classificados como: G1 = Tris-gema + 5% de glicerol; G2 = Tris-gema + 3% de etileno glicol; G3 = Tris-gema + 5% etileno glicol; G4 = Tris-gema + 2% de acetamida; e G5 = Tris-gema + 7% de acetamida. Em contrapartida, o Experimento II, no qual foram utilizados os tratamentos com antioxidantes, foi dividido em três subexperimentos: Exp. 1 [resveratrol (0, 5, 10, 15 e 20 μg/mL, respectivamente, R0, R5, R10, R15 e R20)]; Exp. 2 [quercetina (0, 5, 10, 15 e 20 μg/mL, respectivamente, Q0, Q5, Q10, Q15 e Q20)]; e Exp. 3 [sem antioxidante (RQ0), 10 μg/mL de resveratrol (R10), 5 μg de quercetina/mL (Q5), e 10 μg/mL de resveratrol + 5 μg/mL de quercetina (R10Q5)]. As alíquotas de sêmen, devidamente diluidas, foram então envasadas em palhetas (0,25 mL) e congeladas (-196 oC), sendo avaliadas após descongelação (37 oC/30 segundos) quanto a motilidade progressiva (MP), vigor, integridade de membrana plasmática (iMP), potencial de membrana mitocondrial (PMM) e integridade do acrossoma (iAC). Constatou-se que no Experimento I, o G1 apresentou MP superior (P<0,05) a G3, G4 e G5; vigor superior (P<0,05) a G4 e G5 e iMP superior (P<0,05) a G2, G3, G4 e G5, sem evidenciar diferença significativa (P>0,05) para PMM e iAC. No Experimento II, não se verificou diferença significativa (P>0,05) entre os grupos para os parâmetros MP, vigor, iMP e iAC. O PMM apresentou diferença significativa (P<0,05) entre os grupos experimentais de seus três subexperimentos, de modo que no Exp. 1, o grupo R0 (36,67±8,01%) foi superior ao R20 (22,33±6,16%); no Exp. 2, o grupo Q0 (36,25±8,12%) foi superior (P<0,05) ao Q10 (9,33±6,54%), Q15 (6,25±5,98%) e Q20(5,17±5,08%), assim como o Q5 (20,58±12,05%) foi superior (P<0,05) ao Q15 (6,25±5,98%) e Q20 (5,17±5,08%); e no Exp. 3, o grupo RQ0 (39,00±16,79%) foi superior (P<0,05) ao Q5 (18,00±13,76%) e R10Q5 (14,42±7,47%). Conclui-se que o glicerol (5%) é mais eficaz na proteção dos espermatozoides ovinos submetidos aos efeitos deletérios da congelação do que o etileno glicol (3 e 5%) e a acetamida (2 e 7%), e que a adição dos antioxidantes fenólicos resveratrol e quercetina, isolados ou em associação, reduz o potencial de membrana mitocondrial de espermatozoides ovinos submetidos à congelação, devendo outros estudos serem realizados visando avaliar diferentes concentrações, bem como o efeito da adição na taxa de fertilidade de ovelhas inseminadas artificialmente.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-07T14:12:03Z No. of bitstreams: 1 Filipe Queiros Gondim Bezerra.pdf: 680484 bytes, checksum: 8941d5bb069bfda96fd37c2db5f99b53 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-07T14:12:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Filipe Queiros Gondim Bezerra.pdf: 680484 bytes, checksum: 8941d5bb069bfda96fd37c2db5f99b53 (MD5) Previous issue date: 2010-02-22 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / This study aimed to determine the effect of seasons on nuclear maturation in vitro and inductions of cell death by apoptosis in sheep oocytes as well as the effect on the ability of develop from oocytes in vitro sheep embryos. The ewes ovaries during the dry season (October to March) and rainy season (April-September) were collected in a slaughterhouse and transported to the Laboratory of Biotechnical Reproduction of UFRPE. The cumulus oophorus complexes (COCs) were collected by the technique of "slicing" of the follicles from 2 to 6 mm in diameter and selected based on morphology. In this stage were performed 12 repetitions, where the COCs were subjected to maturation, and in vitro fertilization. The percentage of cleaved oocytes was determined on day 3 (D-3) and the oocytes that developed to the stages of 8-16 cells (D-4), morula (D-5) and blastocyst (D-8) after fertilization. The blastocysts quality was assessed with the pigment DAPI and the determination of blastomeres positive for apoptosis and DNA fragmentation by TUNEL test. It was found significant difference (P <0.05) during D-3 and D-4 fertilization stages. No significant difference (P>0.05) was observed on morula and blastocyst in vitro maturation phases and DNA fragmentation (TUNEL). In the stage 25 oocytes were placed in maturity basic medium (MBM). After maturation, we determined the stage of maturity with the nuclear dye DAPI, the enzyme activity of group II caspases with reagent PhiPhiLux-G1D2 and DNA fragmentation (TUNEL). In the stages of nuclear maturation stages of germinal vesicle, metaphase I, telophase I and metaphase II showed no significant difference (P> 0.05). Significant difference (P <0.05) in enzyme activity of caspases in vitro matured oocytes. The DNA fragmentation was not significantly different (P> 0.05). Under the conditions observed in this study, the results indicate that there was no effect of season on in vitro nuclear maturation and apoptosis of oocytes as well as on the development of oocytes and in vitro production of sheep embryos. / Este estudo teve como objetivo determinar o efeito das estações do ano na maturação nuclear in vitro e na indução da morte celular por apoptose em oócitos ovino também como o efeito na capacidade de desenvolvimento de oócitos na produção in vitro de embriões da espécie ovina. Os ovários de ovelhas na estação seca (outubro a março) e chuvosa (abril a setembro) foram colhidos em abatedouro e transportados ao Laboratório de Biotécnicas da Reprodução da UFRPE. Os complexos cumulus oophorus (CCOs) foram colhidos pela técnica de “slicing” dos folículos entre 2 a 6 mm de diâmetro e selecionados com base na morfologia. Nesta etapa foram realizadas 12 repetições, onde os CCOs foram submetidos a maturação, fertilização e cultivo in vitro. A porcentagem de oócitos clivados foi determinada no dia 3 (D-3) e os oócitos que se desenvolveram aos estádios de 8-16 células (D-4), mórula (D-5) e blastocisto (D-8) após a fecundação. A qualidade dos blastocistos foi avaliada com o corante DAPI e a determinação deblastômeros positivos para apoptose e fragmentação de DNA através do teste de TUNEL. Foi encontrada diferença significativa (P < 0,05) nas fases fertilização, D-3 e D-4. Não apresentaram diferença significativa (P > 0,05) às fases de maturação in vitro, mórula e blastocisto e na fragmentação de DNA (TUNEL). Em outra etapa 25 oócitos foram colocados em meio básico de maturação (MBM). Após a maturação, foi determinado o estádio de maturação nuclear com o corante DAPI, a atividade das enzimas Caspases do grupo II com reagente PhiPhiLux-G1D2 e fragmentação de DNA (TUNEL). Nos estádios de maturação nuclear as fases de Vesícula Germinativa, Metáfase I, Telófase I e Metáfase II não apresentaram diferença significativa (P > 0,05). Foi encontrada diferença significativa (P < 0,05) na atividade das enzimas Caspases dos oócitos maturados in vitro. A fragmentação do DNA não apresentou diferença significativa (P > 0,05). Nas condições observadas neste estudo, os resultados permitem concluir que não houve efeito da estação do ano na maturação nuclear in vitro e na apoptose de oócitos também como na capacidade de desenvolvimento de oócitos e na produção in vitro de embriões da espécie ovina.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-11T16:07:20Z No. of bitstreams: 1 Iagmar Oliveira da Mota.pdf: 349531 bytes, checksum: c6a35db709ead17915cddfd33e74214e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-11T16:07:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Iagmar Oliveira da Mota.pdf: 349531 bytes, checksum: c6a35db709ead17915cddfd33e74214e (MD5) Previous issue date: 2009-02-11 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The Bluetongue is a non-contagious, infectious disease of ruminants, caused by the Bluetongue virus (BTV), transmitted by insects of the Culicoides genus. The gravity of the clinical signs of the Bluetongue varies according to the species, being the ovine the most severely affected. Serological survey carried out in Brazil indicate that the BT virus is widely diffused among bovine and bubaline; in caprine and ovine, there are few reports of serological survey and two outbreaks with clinical cases. Most publications discuss the epidemiology of the BT in temperate areas that suffer periodic outbreaks. This work was conducted with the objective of estimating the prevalence of antibodies against the BTV in caprine and ovine in the semi-arid region in the State of Pernambuco and to evaluate, preliminarily, the conditions for the maintenance of the Culicoides in semi-arid tropical environments. The serological survey was conducted by probabilistic sampling in two mesoregions of the State of Pernambuco (Semi-arid of Pernambuco and the São Francisco Semi-arid), where sampleswere collected from 41 caprine (n=410) and 40 (n=400) herds. Besides this, information was acquired about the main climate variables (pluviometric precipitation, maximum and minimum temperatures) which interfere in the dynamics of the population and competence of Culicoides to transmit the BTV. Seropositive animals to immunodiffusion in agar gel (IDGA) for the BT were found in 24.39% (11.25≤p≤37.54) of the caprine herds and in 27.5% (13.66≤p≤41.34) of ovines distributed in the mesoregions of Semi-arid region of Pernambuco, which presented 4.84% (2.53≤p≤7.47) of caprine and 4.14% (1.85≤p≤6.43) of seropositive ovine and of the São Francisco of Pernambuco area, 1.00% (0.00≤p≤2.95) of caprine and 4.55% (0.65≤p≤8.44) of seropositive ovine. The estimated prevalence was of 3.90% (2.03≤p≤5.78) and 4,25% (2.27≤p≤6.23) for caprine and ovine, respectively. It was observed that among caprine, positive results were registered in 4.18% (1.87≤p≤6.50) of the sources, 4.88% (0≤p≤11.47) of the reproducers and 2.44% (0≤p≤5.78) of the young animals, while among the ovine 4.29% (1.91≤p≤6.66) of the sources, 5.00% (0≤p≤11.75) of the reproducersand 3.75% (0≤p≤7.91) of the young animals presented positive serology for the BT. No significant differences were reported between positivity for the BT and the mesoregion, species and animal category (χ2; P>0.05). Based on the climatic variables, a rainy period waswell characterized, from December to May, and a dry period, from June to November. The evidence of the presence of antibodies for virus of the BT group distributed equally between herds and mesoregions, indicates that there are epidemiologic conditions for the maintenance of an arboviruses in the semi-arid region, which are discussed in this article. / A língua azul (LA) é uma doença infecciosa, não contagiosa, de ruminantes, causada pelo vírus da LA (VLA), transmitido por insetos do gênero Culicoides. A gravidade dos sinais clínicos da LA varia de acordo com a espécie, sendo os ovinos os mais gravemente afetados. Inquéritos sorológicos realizados no Brasil indicam que o vírus da LA está amplamente difundido entre bovinos e bubalinos; em caprinos e ovinos há poucos relatos de inquéritos sorológicos e descrição apenas de dois surtos com casos clínicos. A maioria das publicações discute a epidemiologia da LA em áreas temperadas que sofrem surtos periódicos. Este trabalho foi conduzido com o objetivo de estimar a prevalência de anticorpos contra o VLA em caprinos e ovinos do sertão do Estado de Pernambuco e de avaliar, preliminarmente, as condições para a manutenção dos Culicoides em ambientes tropicais semiáridos. O inquérito sorológico foi conduzido por amostragem probabilística em duas mesorregiões do Estado de Pernambuco (Sertão Pernambucano e Sertão do São Francisco), onde foram colhidas amostras de 41 criações de caprinos (n=410) e 40 (n=400) de ovinos. Além disso, foram obtidasinformações sobre as principais variáveis climáticas (precipitação pluviométrica, temperaturas máxima e mínima) que interferem na dinâmica da população e competência dos Culicoides para transmitir o VLA. Animais soropositivos à imunodifusão em ágar gel (IDGA) para LA foram encontrados em 24,39% (11,25≤p≤) das criações de caprinos e em 27,5% (13,66≤p≤41,34) de ovinos distribuídas nas mesorregiões do Sertão Pernambucano, que apresentou 4,84%(2,53≤p≤7,47) de caprinos e 4,14% (1,85≤p≤6,43) de ovinos soropositivos e do São Francisco Pernambucano, 1,00% (0,00≤p≤2,95) de caprinos e 4,55% (0,65≤p≤8,44) de ovinos soropositivos. A prevalência estimada foi de 3,90% (2,03≤p≤5,78) e 4,25% (2,27≤p≤6,23) para caprinos e ovinos, respectivamente. Observou-se que dentre os caprinos, foram registrados resultados positivos em 4,18% (1,87≤p≤6,50) das matrizes, 4,88% (0≤p≤11,47) dos reprodutores e 2,44% (0≤p≤5,78) dos animais jovens, enquanto que entre os ovinos 4,29% (1,91≤p≤6,66) das matrizes, 5,00% (0≤p≤11,75) dos reprodutores e 3,75% (0≤p≤7,91) dos animais jovens apresentaram sorologia positiva para LA. Não foram registradas diferenças significativas entre positividade para LA e mesorregião, espécie e categoria animal (χ2; P>0,05). Com base nas variáveis climáticas ficou bem caracterizado um período de chuvas, distribuído nos meses de dezembro a maio, e um seco, de junho a novembro. A constatação da presença de anticorpos para vírus do grupo da LA distribuídos homogeneamente entre os rebanhos e mesorregiões evidencia que existem condiçõesepidemiológicas para manutenção de uma arbovirose no semiárido, que são discutidas no artigo.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-20T17:28:52Z No. of bitstreams: 1 Nivaldo de Azevedo Costa.pdf: 762873 bytes, checksum: 96d4b4fde0727128567693ca50f7bf2c (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-20T17:28:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Nivaldo de Azevedo Costa.pdf: 762873 bytes, checksum: 96d4b4fde0727128567693ca50f7bf2c (MD5) Previous issue date: 2009-02-20 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The aim of the present study was to evaluate the alterations on the protein screen and serum cupper, iron and zinc levels of Santa Inês primiparous ewes with mastitis experimentally induced with Staphylococcus aureus. The right mammary gland of ten healthy ewes was inoculated with 1,0x104 ufc/mL. The clinical exam; eletrophoresis profile in poliacrilamide gel (SDS-PAGE), concentration of serum cupper, iron and zinc and plasma fibrinogen were measured before the inoculation (baseline moment) and in the following moments: 12, 24, 36, 48, 60, 72, 84, 96, 108, 120, 132, 168, 180, 288 and 336 hours after the inoculation of the agent. All animals experimentally infected presented clinical mastitis and subsequent loss of functionality of the gland. The protein screen showed 23 proteins fractions with molecular weights (MW) varying from 26.000 to 185.000 daltons (Da) allowing the recognition of positive and negative acute-phase proteins, class A and G immunoglobulin’s and some non-identified proteins. A significant increase (P<0,05) in haptoglobin and ceruloplasmin concentration, IgG and IgA was observed. Antitrypsin and acid glicoprotein concentrations (P<0,05) did not alter. The average levels of iron and zinc decreased (P<0,05)and the cupper values increased (P<0,05). A positive correlation between plasma fibrinogen and ceruloplasmin (r=0,74), haptoglobin (r=0,62) and IgA (r=0,62) was also identified. Results showed the importance of ceruloplasmin and haptoglobin as acute-phase proteins in intramammary infections of ewes and reiterate fibrinogen as an inflammatory marker because of its high correlation with specific proteins. The serum alterations of Cu, Fe and Zn revealed the action of inflammatory mediators triggered by S. aureus. / Este estudo teve por objetivo avaliar as alterações no proteinograma e nos níveis de cobre, ferro e zinco no soro de ovelhas primíparas, da raça Santa Inês, com mastite induzida experimentalmente com Staphylococcus aureus. A glândula mamária direita de dez ovelhas sadias foi inoculada com 1,0x104ufc/ml. O exame clínico e da glândula mamária, o perfil eletroforético em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE), a determinação sérica do Cu, Fe e Zn e a concentração do fibrinogênio plasmático foram realizados antes da inoculação, estabelecendo-se o momento controle (baseline) e os seguintes a inoculação (12h, 24h, 36h, 48h, 60h, 72h, 84h, 96h, 108h, 120h, 132h, 168h, 180h, 288h e 336h). Todas as ovelhas infectadas experimentalmente apresentaram quadro clínico de mastite, havendo perda da funcionalidade da glandula mamária. O proteinograma revelou o fracionamento de 23 proteínas, cujos pesos moleculares (PM) variaram de 26.000 a 185.000 dáltons (Da), permitindo a identificação de proteínas de fase aguda positiva e negativa, imunoglobulinas da classe G e A e algumas proteínas não identificadas. Foi observado aumento significativo (P<0,05) na concentração da haptoglobina e ceruloplasmina, assim como de IgG e IgA. Nãohouve alteração nos níveis de antitripisina e glicoproteina ácida (P>0,05). Verificou-se diminuição nos valores médios dos níveis de ferro e zinco (P<0,05) e elevação nos níveis do cobre (P<0,05). Foi demonstrado correlação positiva entre o fibrinogênio plasmático e a ceruloplasmina (r=0,74), a haptoglobina (r=0,62) e a IgA(r=0,62). Os resultados obtidos demonstraram a importancia da ceruloplasmina e da haptoglobina como proteínas de fase aguda nas infecções intramamárias de ovelhas, assim como ratifica o fibrinogênio como marcador inflamatório pela alta correlação observada com as proteínas especificas. As alterações séricas do Cu, Fe e Zn demonstraram a ação de mediadores inflamatórios, desencadeados pelo S.aureus.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-11-03T14:12:07Z No. of bitstreams: 1 Sildivane Valcacia Silva.pdf: 2091723 bytes, checksum: a3f1920b1bf7539ac7a5652276f36b57 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-03T14:12:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sildivane Valcacia Silva.pdf: 2091723 bytes, checksum: a3f1920b1bf7539ac7a5652276f36b57 (MD5) Previous issue date: 2010-04-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The objective of this work was to evaluate the effect of addition of antioxidants superoxide dismutase (SOD), glutathione (GSH), catalase (CAT), vitamin E (Trolox), and the association between CAT and SOD to Tris egg-yolk ram semen freezing extender. We used five Santa Inês breed rams, with history of fertility, and the ejaculates obtained by artificial vagina. The pool of semen samples were diluted in Tris egg-yolk plus glycerol 5% supplemented with antioxidants, according to the experiments and experimental groups: Exp 1 (G1= control group, G2= 25 U/mL SOD; G3= 50 U/mL SOD; G4= 100 U/mL SOD; G5= 2 mM GSH; G6= 5 mM GSH and G7= 7 mM GSH) and Exp 2 (G1= control group, G2= 30 μM Trolox, G3= 60 μM Trolox, G4= 120 μM Trolox, G5= 25 U/mL CAT, G6= 50 U/mL CAT; G7= 100 U/mL CAT, G8= 100 U/mL SOD + 25 U/mL CAT), at concentration of 240 x 106 spermatozoa/mL. Semen was stored in straws (0.25 mL), frozen using an automated system and stored in liquid nitrogen (- 196 °C). After thawing (37 ºC/30 seconds), samples were analyzed for plasma membrane integrity (iMP), acrosome (IAC) and mitochondrial membrane potential (MMP) with fluorescent probes, kinematics sperm by CASA, and ultrastructure spermatozoa by transmission electron microscopy (TEM). In Exp 1, evaluation was performed in vivo, with the semen used in embryo transfer program. In the Exp 1, significant differences (P<0.05) were observed among groups for total motility (MT), straightness (STR) and oscillation index (WOB) and the GSH 7 mM was lower in MT and higher in STR, and GSH 5 e 7 mM groups were greater in WOB when compared to control, SOD 25 and 100 U/mL. Ultrastructure study showed acrosome better (P<0.05) preserved after freezing in SOD (50 and 100 U/mL) and GSH (5 and 7 mM), whereas mitochondria from control group together with 7 mM GSH suffered further damage. The plasma membrane remained preserved after freezing, regardless of group. For in vivo fertilization, SOD group gave better results than GSH (P>0.05). For Exp 2, CAT 100 U/mL showed a lower percentage (P<0.05) of spermatozoa with intact acrosome. Significant differences (P<0.05) were observed among groups on the kinematics sperm (progressive motility, linearity, straightness, oscillation index, straight line velocity and velocity average path), and were higher for Trolox (30 and 60 μM) and lower for CAT (50 and 100 U/mL). On ultrastructural evaluation, CAT (50 and 100 U/mL) had lower acrosome preservation (P<0.05) and CAT 25 U/mL was higher (P<0.05) than CAT 100 U/ml for the preservation of plasma membrane. Thus, we conclude that the addition of GSH at a concentration of 7mm and 50 CAT and 100 U/mL do not preserve the structural integrity of spermatozoa after cryopreservation; the addition of SOD 100 U/mL, Trolox 60 and 120 mM, and association of CAT 25 U/mL + SOD 100 U/mL provide better preservation of sperm membranes of ram after freezing. / Objetivou-se com este trabalho avaliar o efeito da adição dos antioxidantes superóxido dismutase (SOD), glutationa reduzida (GSH), catalase (CAT), vitamina E (Trolox), e a associação entre CAT e SOD ao diluente Tris-gema de congelação do sêmen ovino. Foram utilizados cinco reprodutores ovinos da raça Santa Inês, com histórico de fertilidade, sendo os ejaculados obtidos pelo método de vagina artificial. Os ejaculados foram avaliados e submetidos à formação do pool, diluído em Tris-gema e glicerol 5%, acrescido de antioxidantes de acordo com o experimento e o grupo experimental: Exp. 1 (G1= Controle; G2= 25 U/mL de SOD; G3= 50 U/mL de SOD; G4= 100 U/mL de SOD; G5= 2 mM de GSH; G6= 5 mM de GSH; G7= 7 mM de GSH) e Exp. 2 (G1= Controle; G2= 30 μM de Trolox; G3= 60 μM de Trolox; G4= 120 μM de Trolox; G5= 25 U/mL de CAT; G6= 50 U/mL de CAT; G7= 100 U/mL de CAT; G8= 25 U/mL de CAT + 100 U/mL de SOD), na concentração de 240 x 106 espermatozoides/mL. O sêmen foi acondicionado em palhetas (0,25 mL), congelado utilizando sistema automatizado e armazenado em nitrogênio líquido (- 196 ºC). Após descongelação (37 oC/30 segundos), as amostras foram submetidas à análise de integridade da membrana plasmática (iMP), acrossoma (iAc) e potencial de membrana mitocondrial (PMM) com sondas fluorescentes; cinética espermática, pelo CASA; e ultraestrutura dos espermatozoides, por microscopia eletrônica de transmissão. No Exp. 1, foi realizada avaliação in vivo, com o sêmen utilizado em programa de transferência de embriões. Diferenças significativas (P<0,05) foram observadas entre grupos para motilidade total (MT), retilinearidade (STR) e índice de oscilação (WOB), sendo o GSH 7mM inferior (P<0,05) na MT e superior na STR, e os grupos GSH 5 e 7 mM commaior (P<0,05) WOB em comparação ao controle, SOD 25 e 100 U/mL. Na análise ultraestrutural, evidenciou-se que o acrossoma foi melhor preservado (P<0,05), pós-congelação, nos grupos SOD 50 e 100 U/mL e GSH 2 e 5 mM, enquanto que o acrossoma e as mitocôndrias do grupo Controle, juntamente com o GSH 7 mM, sofreram maiores danos (P<0,05). Para a fertilização in vivo, o grupo SOD conferiu resultados numericamente superiores aos grupos controle e GSH. Para o Exp. 2, o CAT 100 U/mL apresentou menor porcentual (P<0,05) de espermatozoides com acrossoma íntegros. Diferenças significativas (P<0,05) foram observadas entre grupos na cinética espermática (motilidade progressiva, linearidade, retilinearidade, índice de oscilação, velocidade em linha reta e velocidade média do percurso), sendo superiores para os grupos Trolox 30 e 60 μM e inferiores para os grupos CAT 50 e 100 U/mL. Na avaliação ultraestrutural, os grupos CAT 50 e 100 U/mL apresentaram menor preservação (P<0,05) do acrossoma, enquanto o CAT 25 U/mL foi superior (P<0,05) ao CAT 100 U/mL para a preservação da membrana plasmática e o SOD 25 U/mL foi inferior (P<0,05) aos demais grupos na preservação da mitocôndria. Assim, conclui-se que a adição de GSH na concentração de 7mM e CAT 50 e 100 U/mL não preservam a integridade estrutural de espermatozoides ovinos pós-criopreservação; a adição de SOD 100 U/mL, Trolox 60 e 120 μM, e a associação de CAT 25 U/mL + SOD 100 U/mL proporcionam maior preservação das membranas de espermatozóides congelados de ovinos.