INTRODUÇÃO: A estimulação ovariana, parte fundamental dos tratamentos de fertilização in vitro, baseia-se no conhecimento da fisiologia deste órgão. Recentemente um novo modelo de foliculogênese, a teoria das ondas foliculares, foi descrito em humanos. A sincronização do início da estimulação com o surgimento de uma onda folicular melhora o desempenho dos tratamentos em animais. Os protocolos de estimulação ovariana para fertilização in vitro humana não são sincronizados com o início de uma onda folicular. O presente estudo tem como objetivos avaliar duas estratégias de controle da emergência de uma onda folicular (aspiração do folículo dominante e indução da ovulação mediada pelo hCG) e descrever a estimulação ovariana sincronizada com o início de uma onda. MÉTODOS: Participaram deste estudo controlado pacientes com indicação de fertilização in vitro (fatores tubário e/ou masculino de infertilidade), randomizadas em três grupos: controle, \"hCG\" e \"aspiração\". No grupo controle (n=6), a aplicação do FSH recombinante (150UI/d) teve início no terceiro dia do ciclo menstrual, seguindo o protocolo flexível do antagonista do GnRH. Nos grupos experimentais foram realizadas ultrassonografias transvaginais seriadas até a identificação de um folículo dominante >= 15mm. Neste momento, no grupo \"hCG\" (n=5) foi aplicada dose de 250ug de hCG recombinante e, após dois dias , retomado o seguimento ultrassonográfico seriado. No grupo \"aspiração\" (n=5) o folículo dominante e os subordinados > 10mm foram aspirados e o seguimento ultrassonográfico seriado foi retomado após um dia depois. Quando foi detectada o aumento do número de folículos < 10mm, caracterizando a emergência de uma onda folicular, iniciou-se a estimulação ovariana nos grupos experimentais seguindo o mesmo protocolo do grupo controle. Os embriões produzidos foram criopreservados para transferência posterior devido a assincronia endometrial. RESULTADOS: As duas intervenções resultaram na emergência de ondas foliculares em todas as mulheres, um dia após a aspiração do folículo dominante e dois dias após a aplicação do hCG. A dose total de gonadotrofinas utilizada, o tempo de estimulação, a variação dos níveis séricos de estradiol, a variação do número de folículos pequenos, médios e grandes durante o tratamento, o número de oócitos obtidos, a taxa de fertilização e o número de embriões de morfologia adequada e inadequada foram semelhantes nos três grupos. A velocidade de crescimento do maior folículo foi menor nos grupos experimentais até o 5o dia do estímulo, aumentando a partir daí. Os níveis séricos de progesterona foram maiores nos grupos experimentais a partir do quinto dia do estímulo até o final do tratamento. Não houve influência mecânica da presença do corpo lúteo na dinâmica folicular e nos desempenho laboratorial dos oócitos ipsilaterais. Oito pacientes realizaram transferências embrionárias e três apresentaram resultado positivo do betahCG, todas dos grupos experimentais. CONCLUSÕES: As intervenções propostas são capazes de desencadear a emergência de uma onda folicular, permitindo a sincronização do estímulo ovariano com a emergência de uma onda. O estímulo ovariano sincronizado com a emergência de uma onda folicular resultou na produção de embriões viáveis / INTRODUCTION: Ovarian stimulation, an important step of in vitro fertilization treatments, relies on the understanding of ovarian physiology. Recently, a new model of human folliculogenesis has been suggested, based on waves of coordinated follicular development. In animal studies, it has been shown that ovarian stimulation synchronized with the emergence of a follicular wave results in better treatment outcomes. Ovarian stimulation protocols for in vitro fertilization in humans are not synchronized with wave emergence. Therefore, the objectives of this study were to investigate two strategies to control a follicular wave emergence (aspiration of the dominant follicle and hCG mediated ovulation induction) and to describe the effects of synchronizing the beginning of stimulation with the start of a follicular wave. METHODS: Women with indications of in vitro fertilization due to tubal and/or male fator infertility were invited to participate in this controlled trial. Participants were randomized to the following groups: control, \"hCG\" and \"aspiration\". Patients on the control group (n=6) were submitted to the flexible GnRH antagonist protocol starting recombinant FSH administration (150 IU/d) on the third day of the menstrual cycle. Women on the experimental groups underwent serial transvaginal sonography until a dominant follicle >= 15 mm was identified. In the \"hCG\" group (n=5) 250ug of recombinant hCG was administered; serial transvaginal sonography was resumed two days later. In the \"aspiration\" group (n=5) the dominant and subordinated follicles larger than 10mm were aspirated; serial transvaginal sonography was resumed one day later. When a follicular wave emergence was detected (increase in the number of follicles < 10mm), patients were submitted to an ovarian stimulation protocol similar to the control group. Embryos were cryopreserved for future transfer due to endometrial asynchrony. RESULTS: A follicular wave emerged one day after the dominant follicle aspiration or two days after the administration of recombinant hCG in all women. Total dose of gonadotropins administered, stimulation length, variation of serum estradiol during stimulation, variation in the number of small, medium and large follicles during stimulation, number of oocytes harvested, fertilization rates and the number of embryos with adequate and inadequate morphology were similar in the three groups. The largest follicle growth rate was inferior for women in both experimental groups until day 5 of stimulation, increasing thereafter. Serum progesterone levels were superior in both experimental groups between the 5th day and the end of stimulation. The presence of the corpus luteum did not influence mechanically the follicular dynamics nor the laboratory performance of the ipsilateral oocytes. Eight patients have already been submitted to embryo transfers; three had a positive betahCG test, all from the experimental groups. CONCLUSIONS: Both interventions are able to induce a follicular wave emergence allowing the synchronization of ovarian stimulation. The synchronized ovarian stimulation resulted in the production of viable embryos

Introdução: As técnicas de reprodução assistida (TRA) são o principal tratamento para a infertilidade, que afeta 9-15% dos casais em idade reprodutiva. No entanto, o alto custo do tratamento, que se deve principalmente aos medicamentos utilizados para a estimulação ovariana (EO), muitas vezes é um fator limitante ao acesso e à continuação. O objetivo deste estudo é avaliar a viabilidade de um novo protocolo de OS simplificado e de custo reduzido, que inclui o uso de medicamentos orais e um menor número de injeções, a fim de idealizar um estudo clínico randomizado. Métodos: Foram convidadas a participar todas as mulheres que seriam submetidas a EO para TRA em um serviço de reprodução universitário no Brasil entre abril de 2015 e fevereiro de 2016 com <= 90 Kg, 18-40 anos e com uma contagem de folículos antrais (CFA) >=9. 40 pacientes que preenchiam aos critérios de inclusão concordaram em participar e iniciaram a EO no segundo ou terceiro dia da menstruação. O protocolo incluía letrozol 7,5mg/dia por 5 dias e citrato de clomifeno 100mg/dia até o dia da maturação folicular por via oral e uma injeção subcutânea única de corifolitropina alfa 100 mcg no terceiro dia de estimulação. O monitoramento com ultrassonografia foi feito no primeiro de estímulo, no oitavo dia e em seguida a cada dois dias. O desencadeamento da maturação final foi realizado com agonista do GnRH, leuprolida 1mg ou triptorelina 0,2mg, por via subcutânea. A captação de oócitos foi realizada 35-36 horas depois. Nenhum antagonista do GnRH foi usado na prevenção do pico precoce de LH. A maioria dos oócitos foi injetada e todos os embriões foram criopreservados para posterior transferência. Os resultados foram comparados com outras 40 pacientes submetidas à EO convencional no mesmo serviço e período de tempo, selecionadas aleatoriamente de acordo com os critérios de inclusão e exclusão. Ambos os grupos foram divididos em subgrupos de acordo com a CFA: 9-19 ou >19. Resultados: Não houve diferença entre o grupo controle e o da pesquisa quanto à idade, peso, índice de massa corporal e CFA. Os resultados para o novo protocolo foram: mediana de oócitos totais recuperados de 12 e de oócitos MII de 9. No subgrupo com CFA 9-19, as medianas foram de 9 e 7,5 e no subgrupo > 19 foram de 16 e 13. As taxas de fertilização e clivagem foram 72% e 93%, respectivamente. Não houve diferença estatísticaentre estes resultados e o grupo controle. A duração média da EO foi de 11 dias, 2 dias a mais em relação ao controle. Houve dois casos de síndrome de hiperestimulação ovariana, um moderado e um grave de acordo com os critérios de Golan. Ambos foram tratados clinicamente com hidratação, medicação sintomática e tromboprofilaxia, com melhora satisfatória em poucos dias. Conclusão: Apesar da duração mais longa da EO com o novo protocolo, o número de oócitos totais e MII recuperados e as taxas de fertilização e clivagem foram satisfatórios. Assim, este novo é viável para posterior avaliação em um estudo controlado randomizado. / Introduction: Assisted reproduction techniques are the main treatment for infertility, that affects 9-15% of couples at reproductive age. However, the high cost of the treatment, which is often a limiting factor to access and continuation, is mainly due to medications used for controlled ovarian stimulation (OS). The objective of this study is to evaluate the feasibility of a new friendly and low-cost OS protocol, including the use of oral and low-cost medications and reducing the number of injections, in order to enable the design of a large randomized controlled trial. Methods: All women undergoing ART with OS in a university fertility center in Brazil within abril-2015 to Feb-2016 with <= 90 Kg, 18-40 years, and with an antral follicle count (AFC) >= 9 were invited to participate. 40 patients which matched inclusion criteria agreed to participate and started OS on menstruation days 2 or 3. They received oral letrozole 7.5mg/day for 5 days and oral clomiphene citrate 100mg daily until the triggering. On stimulation day-3 they received a single dose of corifollitropin alfa 100mcg subcutaneously. Ultrasound monitoring started on day-8 and proceeded every other day. The final triggering was performed as usual with GnRH agonist, leuprolide 1mg or triptorelin 0.2mg, subcutaneously. The oocyte retrieval was performed 35-36 hours afterwards. No GnRH antagonist was used for prevention of LH surge. Most oocytes were injected and all embryos were cryopreserved for later transfer. Some patients decided for oocytes cryopreservation. The results were compared to other 40 patients who underwent conventional OS at the same service and period of time, randomly selected according to inclusion and exclusion criteria. Both groups were divided in two subgroups according AFC: 9-19 and >19. The primary outcome was the number of mature (MII) oocytes retrieved. Results: There was no difference in control and research group regarding age, weight, body mass index and AFC. The results for the new protocol were: the median number of total oocytes retrieved was 12 and of MII oocytes 9. In AFC 9-19 subgroup the median was 9 and 7.5 and in >19 AFC subgroup was 16 and 13. The fertilization and cleavage rates were respectively 72% and 93%. No statistical difference was found between this results and the control group. The median length of OS was 11 days, with a 2 days increase comparing tocontrol. There were two cases of ovarian hyperstimulation syndrome, one moderate and one severe according to the Golan criteria. Both were clinically treated with hyperhydration, symptomatic medication and thromboprophylaxis with satisfactory improvement within few days. Conclusions: Besides a longer duration in the OS, the number of total and MII oocytes, fertilization and cleavage rates were satisfactory. Thus this new friendly and low cost OS protocol is feasible for further evaluation in a randomized controlled trial.

A prevalência da obesidade tem aumentado em todo mundo, afetando também mulheres em idade reprodutiva. Estudos têm demonstrado que o acúmulo excessivo de tecido adiposo resulta em prejuízos à reprodução feminina. O mecanismo pelo qual a obesidade diminui a fertilidade não está totalmente estabelecido. Atualmente, são propostas a condição inflamatória e a indução de estresse oxidativo como potenciais mecanismos de ação para as patologias relacionadas à obesidade. Adicionalmente, a angiotensina II (Ang II) é mais um fator que tem sido relacionado com alterações associadas à obesidade, e os efeitos deste peptídeo incluem ações pró-inflamatórias e pró-oxidativas. O presente estudo analizou o efeito da obesidade na ovulação e no metabolismo oxidativo ovariano, e a participação da Ang II como um possível modulador da formação de espécies reativas de oxigênio em ovários de ratas obesas e seus efeitos na ovulação. Foram utilizadas ratas submetidas a uma dieta hipercalórica composta por alimentos palatáveis, conhecida como dieta de cafeteria, a partir do desmame até a idade adulta, por um período de 17 semanas. Os animais foram divididos em grupos: CTL (controle), CTL LOS (controle + losartan), CAF (cafeteria) e CAF LOS (cafeteria + losartan). Avaliamos o consumo de alimentos e líquidos, o peso corporal, o peso da gordura abdominal e retroperitonial, a concentração de insulina plasmática, o número de oócitos, as atividades das enzimas antioxidantes (superóxido dismutase e catalase), concentração de peróxido de hidrogênio (H2O2) e parâmetros de dano oxidativo (lipoperoxidação e oxidação de proteínas). As fêmeas obesas do grupo CAF apresentaram maior consumo de energia e reduzido consumo de água e ração padrão, hiperinsulinemia, aumento das gorduras abdominal e retroperitonial, e aumento de peso corporal. A obesidade não reduziu significativamente a ovulação, mas aumentou a atividade das enzimas antioxidantes e a concentração de H2O2 no ovário. A administração do losartan, em ratas alimentadas com a dieta de cafeteria, reduziu a ingestão energética total, a concentração plasmática de insulina e o ganho de gordura abdominal, mas não evitou o desenvolvimento da obesidade. O losartan inibiu a atividade da enzima antioxidante superóxido dismutase no ovário das ratas obesas do grupo CAF, porém não alterou a atividade da enzima antioxidante catalase. Os resultados deste estudo demonstram que a obesidade resulta em alterações no metabolismo e sugerem a participação da Ang II na formação de espécies reativas de oxigênio no ovário. / The prevalence of obesity has increased worldwide, also affecting women of reproductive age. Studies have shown that excessive accumulation of adipose tissue results in impaired female reproduction. The mechanism by which obesity reduces fertility is not fully established. Currently, proposals are the inflammatory condition and the induction of oxidative stress as a potential mechanism of action for diseases related to obesity. Additionally, angiotensin II (Ang II) is another factor that has been related to changes associated with obesity, and the effects of this peptide include pro-inflammatory and pro-oxidative actions. The present study considers the effect of obesity on ovulation and ovarian oxidative metabolism, and the participation of Ang II as a possible modulator of the formation of reactive oxygen species in ovaries of obese rats and their effects on ovulation. Female rats fed a diet consisting of high calorie foods palatable, known as cafeteria diet from weaning to adulthood, for a period of 17 weeks. The animals were divided into groups: Control (CTL) CTL LOS (control + losartan), CAF (cafeteria) and CAF LOS (losartan + cafeteria). We evaluate the consumption of food and fluids, body weight, abdominal and retroperitoneal fat weight, the plasma insulin concentration, the number of oocytes, the activities of antioxidant enzymes (superoxide dismutase and catalase), concentration of hydrogen peroxide (H2O2 ) and parameters of oxidative damage (lipid peroxidation and protein oxidation). The females of the CAF group had higher energy consumption and reduced consumption of water and standard chow, hyperinsulinemia, increased abdominal and retroperitoneal fat, and weight gain. Obesity not significantly reduced ovulation, but increased the activity of antioxidant enzymes and the concentration of H2O2 in the ovary. The administration of losartan in rats fed the cafeteria diet, reduced total energy intake, plasma insulin concentration and abdominal fat gain, but did not prevent the development of obesity. Losartan inhibited the activity of the antioxidant enzyme superoxide dismutase in the ovary of rats CAF group, but did not alter the activity of the catalase antioxidant enzyme. The results of this study demonstrate that the cafeteria diet results in changes in metabolism and suggests the involvement of Ang II in the formation of ROS in the ovary.

Este estudo teve como objetivo avaliar o efeito da presença de corpo lúteo (CL) no início do protocolo de inseminação artificial a tempo fixo (IATF), no diâmetro do folículo ovulatório (DFO), na expressão de estro e na taxa de prenhez usando cipionato de estradiol (CE) ou GnRH como indutor de ovulação em novilhas de corte. No dia 0, novilhas [n = 414; 317 ± 23 kg; 3,08 ± 0,21 escore de condição corporal (escala de 1 a 5) entre 22 e 24 meses de idade] receberam um dispositivo intravaginal contendo 1g de progesterona (P4) e foram administrados 2 mg de benzoato de estradiol, IM. No dia 8, o dispositivo foi removido e as novilhas receberam 500 μg de cloprostenol sódico IM e foram divididas em dois grupos: CE [n = 213; 0,5 mg de CE, IM, no dia 8] e GnRH [n = 201; 25 μg de Licerelina, IM, no dia da IATF] e a IATF foi realizada 50 h após a remoção do dispositivo. As novilhas tiveram a região sacral pintada para verificar a expressão do estro entre a remoção do dispositivo de P4 e a IATF. No dia 0, foram realizados exames ultrassonográficos para verificar a presença de CL (com CL = 213, sem CL = 202), no dia 10 para medir o DFO e no dia 11 para confirmar a ovulação. As novilhas foram classificadas em 3 grupos de acordo com o DFO: pequeno (≤ 9,5mm), médio (9,6-11,5mm) e grande (≥ 11,6mm) para avaliar seu efeito na expressão de estro e prenhez. A expressão de estro foi confirmada quando a tinta estava removida no dia 10. A expressão de estro foi maior (P <0,05) no grupo CE em comparação com o grupo GnRH. O DFO diferiu (P <0,05) de acordo com a presença de CL ( P < 0,05), mas foi semelhante entre os tratamentos. A taxa de ovulação não diferiu nos grupos CE e GnRH. As taxas de prenhez foram semelhantes (P> 0,05) entre os grupos CE e GnRH, no entanto, a taxa de prenhez foi maior nas novilhas que expressaram estro (P <0,05), do que naquelas que não expressaram. A presença de CL no início do protocolo de IATF esteve associada a maior taxa de prenhez (P <0,05) no grupo GnRH em relação ao grupo CE, mas não diferiu entre novilhas sem CL. A manifestação de estro para novilhas tratadas com GnRH aumenta de acordo com DFO. O grupo CE apresenta alta manifestação de estro independente do DFO. A taxa de prenhez é maior à medida que o DFO aumenta. Em conclusão, as novilhas com CL no início do protocolo de IATF possuem maior folículo ovulatório, e quando tratadas com GnRH como indutor de ovulação atingem maiores taxas de prenhez. O tamanho do folículo ovulatório foi associado com o comportamento de estro e as taxas de prenhez nos tratamentos de CE e GnRH. / The aim of this study was to evaluate the effect of presence of corpus luteum (CL) at the onset of timed AI (TAI) protocol in ovulatory follicle diameter (OFD), estrus expression and pregnancy rate using estradiol cypionate (EC) or GnRH as ovulation inductor in beef heifers. On day 0, heifers [n=414; 317±23 kg; 3.08±0.21 body condition score (1 to 5 scale) and 22-24 months of age] received a 1g progesterone (P4) intravaginal device and 2 mg of estradiol benzoate, IM,. On day 8, device was removed, heifers received 500 μg of sodium cloprostenol, IM, and were divided in two groups: EC [n=213; 0.5mg EC, IM, on day 8] and GnRH [n=201; 25 μg of Licerelin, IM, at TAI] TAI was performed 50 h after device removal. The heifers had the base of the tail painted to verify estrus expression between P4 device removal and IATF. On day 0, ultrasound examinations were performed to verify the presence of CL (with CL = 213, without CL = 202).On day 10 to measure OFD and on day 11 to confirm ovulation. Heifers were classified into three groups according to OFD: small (≤ 9.5 mm), medium (9.6-11.5 mm) and large (≥ 11.6 mm) to evaluate their effect on estrus expression and pregnancy rate. Estrus expression was confirmed when ink marking was removed on day 10. Estrus expression was higher (P <0.05) in the EC group compared to GnRH group. The OFD differed (P <0.05) according to the presence of CL (P <0.05), but was similar between the treatments. The ovulation rate did not differ in CE and GnRH groups. Pregnancy rates were similar (P> 0.05) between the EC and GnRH groups, however, the pregnancy rate was higher in heifers who expressed estrus (P <0.05) than in those who did not express it. The presence of CL at the beginning of the IATF protocol was associated with a higher pregnancy rate (P <0.05) in the GnRH group in relation to the EC group, but did not differ between heifers without CL. The estrus manifestation for heifers treated with GnRH increases as the DFO increases, while the EC heifers has a high estrus manifestation independent of the DFO. The pregnancy rate also increases as DFO increases. In conclusion, heifers with CL at the beginning of the IATF protocol have increased ovulatory follicle size, and when treated with GnRH, as an ovulation inducer, attained higher pregnancy rates. The size of the ovulatory follicle was associated with higher estrus behavior and higher pregnancy rates in the EC and GnRH treatments.

Introdução: com o adiamento da maternidade está aumentando a necessidade e busca por serviços de Reprodução Assistida. No entanto, esses tratamentos ainda são bastante onerosos e acabam, muitas vezes, sendo inacessíveis para grande parte da população. Objetivo: avaliar o custo-efetividade da estimulação ovariana mínima versus estimulação convencional, no que se refere à taxa de gestação por transferência de embrião, em pacientes más respondedoras submetidas à Fertilização in vitro (FIV). Delineamento: estudo de coorte prospectiva. Método: foram incluídas no estudo, 101 pacientes - classificadas como más respondedorasque realizaram FIV no período de dezembro de 2016 a setembro de 2017 no Centro de Reprodução Humana Insemine e no Projeto Maternus – Porto Alegre. Dessas 101 pacientes, 9 foram excluídas por apresentarem 35 anos de idade ou menos. Cinqüenta e sete pacientes foram submetidas à estimulação ovariana convencional e 35 à estimulação mínima. Resultados: Todos os resultados serão expressos em média e desvio-padrão (DP). Não houve diferença estatisticamente significativa entre o grupo da estimulação ovariana convencional e o da estimulação mínima no que se refere à idade da paciente (40,4 ± 2,8 versus 41,3 ± 2,4, respectivamente, p= 0,112), ao índice de massa corporal (24,05 ± 2,7 versus 24,11 ± 2,9, p=0,918) e ao valor do Hormônio Anti-Mulleriano (0,58 ±0,7 versus 0,81 ± 0,96, p=0,198). Em relação à dose total de gonadotrofinas utilizada, o grupo da estimulação convencional utilizou em média 2628UI ± 788,37 por ciclo enquanto que as pacientes do grupo da estimulação mínima usaram em média 409UI ± 495,60, apresentando uma diferença estatisticamente significativa (p=0,001). O número de oócitos capturados na punção ovariana foi significativamente maior no grupo da estimulação convencional (2,04 ± 1,8) quando comparado ao grupo da estimulação mínima (1,09 ± 1,2), p= 0,003. O mesmo ocorreu com o número total de embriões, 1,26 ± 1,3 versus 0,54 ± 0,9, p= 0,002, respectivamente. O grupo da estimulação convencional teve um custo total com medicação para indução de ovulação de R$ 3.932,25, enquanto que o grupo da estimulação mínima, de R$ 858,05. A taxa de gestação por transferência embrionária foi de 17,9% versus 8,3%, nos grupos de estimulação 9 tradicional e mínima, respectivamente (p=0,423). O risco relativo (RR) foi de 0,46, mostrando que o grupo da estimulação convencional apresentou 2,1 vezes mais gravidez por transferência embrionária que o da estimulação mínima, mas com um custo de gonadotrofinas 4 vezes maior. Dessa forma, o custo de uma gestação com estimulação tradicional por ciclo iniciado foi de R$ 31.458,00 e no grupo da estimulação ovariana mínima, cada gestação custou R$ 27.457,60. O incremento do custo-efetividade foi de R$32.791,47, ou seja, esse é o custo para se ter um desfecho de gestação a mais. Extrapolando nossos dados para o estado do Rio Grande do Sul (RS), numa tomada de decisão para o gasto com medicação em pacientes más respondedoras teríamos, se adotada estimulação convencional, 608 gestações com um custo total de R$ 13.318.531,00, enquanto que se usássemos a estimulação mínima, teríamos 282 gestações totalizando um custo de R$ 2.906.215,00. Conclusão: Embora o RR de gestação após o uso de tratamento convencional para induzir a ovulação em mulheres submetidas à FIV seja de 2,1, houve um gasto com medicação 4 vezes maior. Esses achados podem auxiliar na tomada de decisões, sejam elas de cunho individual ou de estratégias em saúde pública. Considerando o custo-efetividade (C/E) de se utilizar ciclos de estimulação mínima, em pacientes más respondedoras, um maior número de mulheres pode ser tratado e, consequentemente, pode-se obter um número maior de gestações, apesar da menor taxa de gravidez por transferência embrionária. / Introduction: with the delay of maternity, the need and demand for assisted reproduction services have been on the rise. However, these treatments are still quite expensive and often are not available to a large part of the population. Aim: to assess the cost-effectiveness of minimal ovarian stimulation versus conventional stimulation regarding the rate of pregnancy due to embryo transfer in poor responders submitted to in-vitro fertilization (IVF). Study Design: prospective cohort study. Method: 101 patients -classified as poor responders - who underwent IVF from December 2016 to September 2017 at Centro de Reprodução Humana Insemine and Maternus Project, in Porto Alegre, were included in the study. Of these 101 patients, nine were excluded because they were 35 years old or younger. Fiftyseven patients were submitted to conventional ovarian stimulation and 35 to minimal stimulation. Results: All results were expressed as mean and standard deviation. There was no statistically significant difference between the conventional ovarian stimulation and the minimal stimulation groups regarding patient age (40.4 ± 2.8 versus 41.3 ± 2.4, respectively, p = 0.112), body mass index (24.05 ± 2.7 versus 24.11 ± 2.9, p = 0.918) and anti-müllerian hormone value (0.58 ± 0.7 versus 0.81 ± 0.96, p = 0.198). Regarding the total dose of gonadotropins used, the conventional stimulation group took on average 2628.07 IU ± 788.37 per cycle, while the patients in the minimal stimulation group took on average 409.29 IU ± 495.60, showing a statistically significant difference (p = 0.001). The number of oocytes captured by ovarian puncture was significantly higher in the conventional stimulation group (2.04 ± 1.8) when compared with the minimal stimulation group (1.09 ± 1.2), p= 0.003. The same happened to the total number of embryos, 1.26 ± 1.3 versus 0.54 ± 0.9, p= 11 0.002, respectively. The conventional stimulation group had a total cost with ovulation inducing drugs of BRL 3,932.25, while for the minimal stimulation group it was BRL 858.05. The embryo transfer pregnancy rate was 17.9% versus 8.3% in the traditional and minimal stimulation groups, respectively (p=0.423). The relative risk was 0.46, showing that the conventional stimulation group had 2.1 times as many embryo transfer pregnancies as minimal stimulation, but at a four-fold cost for gonadotropins. Thus, the cost of a traditional stimulation pregnancy by initiated cycle was BRL 31,458.00, and in the minimal ovarian stimulation group, each pregnancy cost BRL 27,457.60. The increase in cost-effectiveness was BRL 32,791.47, that is, this is the cost for an additional pregnancy outcome. Extrapolating our data to the state of Rio Grande do Sul (south of Brazil), in a decision to spend on medication in poor responders; the choice of a conventional stimulation would reach a total of 608 pregnancies with a total cost of BRL 13,318,531.00. However, using minimal stimulation, we would have 282 pregnancies with a cost of BRL 2,906,215.00. Conclusion: Although the RR of pregnancies after use of conventional treatment to induce ovulation in women submitted to IVF was 2.1, there was an expense with drugs 4 times greater. These findings can help in a decision making, either individually or in public health strategies. Considering the cost-effectiveness of using minimal stimulation protocol in patients with poor responders, a greater number of women could be treated and, consequently, a greater number of pregnancies achieved, in spite of the lower embryo transfer pregnancy rate.

A inseminação artificial em tempo fixo (IATF), juntamente com a inseminação artificial pós-cervical (IAPC), permite uma redução expressiva da mão de obra e uma melhor utilização dos machos geneticamente superiores. O objetivo deste estudo foi avaliar a eficiência do eCG associado agonista de GnRH (buserelina) ou apenas buserelina para indução e sincronização da ovulação em porcas desmamadas e submetidos a apenas uma IATF. Um total de 495 femeas suínas desmamadas foram utilizadas, cuja detecção de estro foi realizada uma vez ao dia (07:30). As fêmeas foram divididas em três tratamentos: Controle (n = 165) - a primeira IA foi realizada no início do estro (0 h) e repetida a cada 24 h, posteriormente, durante o estro; Tratamento 2: eCG + GnRH (n = 165) – femeas receberam uma injeção intramuscular de 600 UI de eCG após o desmame, e uma injeção intramuscular de buserelina (10 μg) 86-89 h após a administração de eCG; Tratamento 3: GnRH - fêmeas receberam uma injeção intramuscular de buserelina (10 μg) 86-89 h após o desmame. Nos três grupos era realizada a exposição ao macho no dia seguinte ao desmame uma vez ao dia, e aquelas fêmeas que demostrassem estro eram retiradas dos protocolos de IATF. Os grupos tratados receberam uma única IA, 118-120 h após o desmame (30-33 h após a buserelina). A IAPC contou com doses homospérmicas (1,5 x 109 células de espermáticas/50 ml) que foram utilizadas nas femeas em todos os três tratamentos. Não houve diferenças entre os tratamentos quanto ao número de femeas em estro até o terceiro dia (P>0,05). O intervalo entre o desmame e a ovulação foi significativamente maior (P< 0,05) no grupo controle (141,5 ± 1,58 h) comparativamente aos tratamentos eCG+GnRH (133,3 ± 1,60 h) e GnRH (135,9 ± 1,57 h). As femeas do tratamento eCG+GnRH ovularam em média antes (P<0,05) em relação ao grupo GnRH (44,5 ± 1,74 vs 48,2 ± 1,73 h). A taxa de parto foi superior (P<0,05) no grupo de controle, comparativamente aos tratamentos eCG + GnRH e GnRH, mas não houve diferença (P>0,05) em leitões nascidos totais entre os tratamentos. O uso do GnRH, com ou sem a administração prévia de eCG, antecipa a ovulação nas fêmeas suínas desmamadas. Nas fêmeas tratadas com eCG+GnRH ou GnRH, há em maior percentual de fêmeas inseminadas fora do momento ideal, em relação à ovulação, o que pode prejudicar o desempenho reprodutivo, sendo necessários ajustes no momento de aplicação dos hormônios ou no momento da inseminação para estudos subsequentes. / Fixed-time artificial insemination (FTAI) together with post-cervical artificial insemination (PCAI), allows an expressive reduction in labor requirements and a wider use of higher indexing boars. The aim of this study was to evaluate the efficiency of eCG agonist of GnRH (buserelin) or just buserelin for induction and synchronization of ovulation in weaned sows and submitted to FTAI .A total of 495 weaned sows whose estrus detection was performed once daily (07:30 A.M), starting a day after weaning. The sows were allocated into three treatment groups: Control (n=165) – the first AI was performed at estrus onset (0 h) and repeated every 24 h thereafter during estrus; Treatment 2: eCG + GnRH (n=165) – sows received an intramuscular injection of 600 UI eCG after weaning, and an intramuscular injection of buserelin (10 μg) 86-89 h after eCG administration; Treatment 3: GnRH - sows received an intramuscular injection of buserelina (10 μg) 86-89 h after weaning. . In the three groups it was performed boar exposure in the following day to weaning once a day, and those sows that demonstrated oestrus were removed from FTAI protocols. Treated groups received a single AI, 118-120 h after weaning (30-33 h after buserelin). PCAI with homospermic doses (1.5 x 109 total of sperm cells/50 ml) were respectively performed in sows in all treatment group. There were no differences (P> 0,05) in number of sows that showed oestrus until the third day between treatments. The interval between weaning and ovulation was significantly higher (P< 0,05) in the control group (141,5 ± 1,58 h) comparatively the treatments eCG+GnRH (133,3 ± 1,60 h) and GnRH (135,9 ± 1,57 h). Sows of treatment eCG+GnRH ovulated earlier (P< 0,05) comparing to the GnRH group (44,5 ± 1,74 vs 48,2 ± 1,73 h). Higher (P<0,05) farrowing rate in control group comparatively to treatments eCG+GnRH e GnRH was observed, but there were no differences (P> 0,05) in total piglets born between treatments. Use of GnRH, with or without previous administration of eCG anticipates ovulation in sows weaned, in the sows treated with eCG + GnRH or GnRH, there is a greater percentage of females inseminated outside the ideal time, with respect to ovulation, it can harm the reproductive performance, with necessary adjustments at the time of application hormones or at the time of insemination for subsequent studies.

The efficiency of superovulation protocols with different levels of progesterone in dairy cows was evaluated on the ovulated follicles rate. Twenty five high producing female were distributed in control group (n = 5), and four treatments with progesterone device (CIDR). Used CIDR for 4 and 5 days, new CIDR for 4 and 5 days (n=5 in each treatment). All cows received a pre synchronization with prostaglandin F2α (PGF) and GnRH. On Day 10 of the estrous cycle started the follicle stimulating hormone (FSH) treatment in nine decreasing doses for 4.5 days. Two applications of PGF were also used along with the 5th and 6th FSH injection. Ovaries were evaluated daily by transrectal ultrasonography to determine the start of the second follicular wave, evaluation of recruitment, follicles growth, also for monitoring the ovulation. Superovulation with used CIDR 4 resulted in a higher ovulation rate between 36-60h after device removal (94.9%, P <0.0001) compared to the control group (49.5%), used CIDR 5 (68.3%), new CIDR 4 (52.8%), or new CIDR 5 (70.6%). Thus, artificial insemination could be performed within 24-36h after removal the used 4 days CIDR. The number of follicles in control cows (38 ± 9.27) was similar (P=0.739) to used CIDR 4 (31.4 ± 6.8), new CIDR 4 (31 ± 4.6), used CIDR 5 (33.4 ± 8.4), or new CIDR 5 (38.6 ± 10.6). Our finds supported the hypothesis that low levels of exogenous progesterone during superovulation were sufficient to allow pulses of luteinizing hormone to enable ovulation induction. / Protocolos de superovulação com diferentes concentrações de progesterona foram avaliados sobre o percentual de folículos ovulados em vacas leiteiras de alta produção. Vinte e cinco fëmeas foram distribuídas em grupo controle (não tratadas; n=5) e quatro tratamentos com uso de dispositivos intravaginais de progesterona (CIDR): CIDR novo ou usado, por 4 ou 5 dias (n=5 em cada tratamento). Todas as vacas receberam prostaglandina F2α (PGF) e GnRH via IM. No Dia 10 (D10) do ciclo estral iniciou o tratamento com hormônio folículo estimulante (FSH) em 9 doses decrescentes, por 4,5 dias. Concomitante com a 5ª e 6ª aplicação de FSH as vacas receberam PGF. Os ovários foram avaliados diariamente por ultrassonografia transretal para determinar o início da segunda onda folicular, o recrutamento e crescimento dos folículos, bem como o monitoramento das ovulações. O CIDR usado por 4 dias resultou em maior percentual de folículos ovulados entre 36 e 60h após a remoção do dispositivo (94,9%; P<0.0001) comparado ao controle (49,5%) e tratamentos: CIDR usado 5 (68,3%), CIDR novo 4 (52,8%) e CIDR novo 5 (70,6%). A inseminação artificial deste protocolo é recomendada entre 24 a 36h após a retirada do CIDR usado por 4 dias. O número de folículos das vacas controle (38±9,27), CIDR usado 4 (31,4±6,8), CIDR novo 4 (31±4,6), CIDR usado 5 (33,4±8,4) e CIDR novo 5 (38,6±10,6) foi similar (P=0.739). Confirma-se a hipótese de que baixo nível de progesterona exógena durante o tratamento com FSH permite pulsos de hormônio luteinizante suficientes para indução da ovulação.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The aim of this study was to develop a timed artificial insemination system (TAI) in suckled beef cows. For this, in 227 cows 60-80 days postpartum, received estradiol benzoate (5mg) and a vaginal device containing 250mg of medroxyprogesterone acetate (MAP; day 0). On day six, prostaglandin analogous (125μg), eCG (400IU) was administered and calves were removed for 88h. The device was removed on day seven (BioRep group) or on day eight (TAI group) and the cows of both groups received GnRH (100μg; day 9) 48h or 24h after device withdrawal, respectively. Experiment I: the follicular growth was daily monitored, from day 6 to day 9 (36h after GnRH), in 14 cows. The average of dominant follicle size on day nine was 11.1±0.99mm (BioRep, n=7) and 11.5±0.65mm (TAI, n=7) and all animals ovulated. Experiment II: in the BioRep group (n=106), the cows was observed for estrus behavior after withdrawal the device, twice a day during 48h and inseminated at 12h after detection; In the TAI group (n=107), the devices were withdrawn on day eight and after 24h these cows and those from the BioRep group, which were not stand in estrus, received 100μg of GnRH and TAI 16h later. The pregnancy rates were 57.6% (BioRep) and 52.3% (TAI). The time of MAP exposure and the period from MAP to GnRH did not affect the follicular dynamic and pregnancy rates. Furthermore, the treatment for eight days allows an efficient TAI system in suckled beef cows. / O objetivo deste estudo foi desenvolver um protocolo de inseminação artificial com tempo fixo (IATF) em vacas de corte amamentando, avaliando o intervalo entre a retirada do progestágeno e a aplicação de GnRH sobre a dinâmica folicular e a prenhez. Para isto, 227 vacas 60-80 dias pós-parto receberam benzoato de estradiol (5mg) e um pessário vaginal de acetato de medroxiprogesterona (250mg MAP; dia 0). No dia seis, cloprostenol sódico (125μg), gonadotrofina coriônica eqüina (400UI) e desmame temporário (88h). O MAP foi retirado no dia sete (Grupo BioRep) ou no dia oito (Grupo IATF) e, 48h ou 24h após os animais receberam GnRH (100μg; dia 9), respectivamente. No experimento I, o monitoramento das estruturas ovarianas de 14 vacas foi realizado a cada 24h, desde o dia seis até 36h após a aplicação de GnRH em ambos os grupos. O tamanho médio do folículo dominante no dia nove foi de 11,1±0,99mm (BioRep n=7) e 11,5±0,65mm (IATF n=7) e todos os animais ovularam. No experimento II, no grupo BioRep (n=106), após a retirada do MAP, as fêmeas foram inseminadas com detecção de estro durante 48 horas. O restante dos animais do grupo BioRep e todos do grupo IATF (n=107) receberam 100μg de GnRH (dia 9) e, após 16h, IATF. Os índices de prenhez foram de 57,6% (BioRep) e de 52,3% (IATF). O intervalo de 24h entre a retirada do MAP, mantido por 8 dias, e a aplicação de GnRH não interfere na dinâmica folicular e prenhez, viabilizando inseminar vacas de corte amamentando sem observação de estro.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 267486 bytes, checksum: 169841b6c3f32cc968c92239bcabfe56 (MD5) Previous issue date: 2006-09-14 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The objective of this research was to evaluate the effect of estradiol benzoate plus CIDR on estrus and ovulation synchronization and pregnancy rates in zebu lactating cows at postpartum. Two hundred and twenty six zebu cows, were randomly assigned to three different treatments: MN (n=77) - cows were submitted to a breeding season of 21 days, cows of the T1 (n=70) received an intravaginal progesterone device (CIDR) and an injection of estradiol benzoate (EB) (day 0 of treatment). On day 7, the CIDR s were removed and the animals received an injection of a PGF2&#945;. The cows were inseminated 12 hours after estrus detection. Females of the T2 (n=79) received the same protocol as T1, but plus another injection of EB on day 8 and were inseminated at 56 hours after the CIDR implant removal. The estrus induction rates for the treatments T1 and T2 were 96.7 and 100.0% respectively. The pregnancy rates were respectively 42.9, 18.3 and 42.7% for the MN, T1 and T2 groups. The progesterone plasma concentration were 11.71 ng/mL (day 0) and 8.87 ng/mL (day 7). The body condition score (BCS) did not affect pregnancy rates. Estradiol benzoate injected 24 hours after progestágeno removal gave a better response for lactating beef cows at post-partum. / O objetivo do estudo foi avaliar a influência do benzoato de estradiol, associado ao CIDR, na sincronização do estro e da ovulação sobre a taxa de sincronização e prenhez em vacas de corte zebuínas lactantes no pós-parto. Foram utilizadas 226 vacas zebuínas, previamente submetidas a avaliação para condição corporal, divididas aleatoriamente em três tratamentos: MN - monta natural (n=77) com estação de monta de 21 dias; T1 (n=70) as fêmeas receberam um dispositivo intra-vaginal de liberação de progesterona (CIDR) e uma injeção de benzoato de estradiol BE (dia zero do tratamento). No dia 7, foi removido o CIDR e aplicado uma dose única de PGF2&#945;. As vacas foram inseminadas 12 horas após a observação do estro; T2 (n=79) as fêmeas foram submetidas ao mesmo protocolo empregado no T1, adicionando outra dose de BE no dia 8 e todas as fêmeas foram inseminadas 56 horas após a retirada do CIDR. As fêmeas dos tratamentos T1 e T2 manifestaram o estro na proporção de 96,7 e 100,0% respectivamente, sendo que a taxa de prenhez foi de: 42,9, 18,3 e 42,7% para os tratamentos MN, T1 e T2 respectivamente. A concentração plasmática média de progesterona no dia 0 foi de 11,71 ng/mL e de 8,87 ng/mL, no dia 7. Não foi observado influência do escore de condição corporal (ECC) sobre as taxas de prenhez das vacas estudadas neste experimento. No presente estudo, a utilização da dose suplementar de BE, 24 horas após a retirada do implante contendo progestágeno foi o protocolo mais indicado para vacas de corte lactantes no período pós-parto.

Este estudo teve como objetivo avaliar o efeito da presença de corpo lúteo (CL) no início do protocolo de inseminação artificial a tempo fixo (IATF), no diâmetro do folículo ovulatório (DFO), na expressão de estro e na taxa de prenhez usando cipionato de estradiol (CE) ou GnRH como indutor de ovulação em novilhas de corte. No dia 0, novilhas [n = 414; 317 ± 23 kg; 3,08 ± 0,21 escore de condição corporal (escala de 1 a 5) entre 22 e 24 meses de idade] receberam um dispositivo intravaginal contendo 1g de progesterona (P4) e foram administrados 2 mg de benzoato de estradiol, IM. No dia 8, o dispositivo foi removido e as novilhas receberam 500 μg de cloprostenol sódico IM e foram divididas em dois grupos: CE [n = 213; 0,5 mg de CE, IM, no dia 8] e GnRH [n = 201; 25 μg de Licerelina, IM, no dia da IATF] e a IATF foi realizada 50 h após a remoção do dispositivo. As novilhas tiveram a região sacral pintada para verificar a expressão do estro entre a remoção do dispositivo de P4 e a IATF. No dia 0, foram realizados exames ultrassonográficos para verificar a presença de CL (com CL = 213, sem CL = 202), no dia 10 para medir o DFO e no dia 11 para confirmar a ovulação. As novilhas foram classificadas em 3 grupos de acordo com o DFO: pequeno (≤ 9,5mm), médio (9,6-11,5mm) e grande (≥ 11,6mm) para avaliar seu efeito na expressão de estro e prenhez. A expressão de estro foi confirmada quando a tinta estava removida no dia 10. A expressão de estro foi maior (P <0,05) no grupo CE em comparação com o grupo GnRH. O DFO diferiu (P <0,05) de acordo com a presença de CL ( P < 0,05), mas foi semelhante entre os tratamentos. A taxa de ovulação não diferiu nos grupos CE e GnRH. As taxas de prenhez foram semelhantes (P> 0,05) entre os grupos CE e GnRH, no entanto, a taxa de prenhez foi maior nas novilhas que expressaram estro (P <0,05), do que naquelas que não expressaram. A presença de CL no início do protocolo de IATF esteve associada a maior taxa de prenhez (P <0,05) no grupo GnRH em relação ao grupo CE, mas não diferiu entre novilhas sem CL. A manifestação de estro para novilhas tratadas com GnRH aumenta de acordo com DFO. O grupo CE apresenta alta manifestação de estro independente do DFO. A taxa de prenhez é maior à medida que o DFO aumenta. Em conclusão, as novilhas com CL no início do protocolo de IATF possuem maior folículo ovulatório, e quando tratadas com GnRH como indutor de ovulação atingem maiores taxas de prenhez. O tamanho do folículo ovulatório foi associado com o comportamento de estro e as taxas de prenhez nos tratamentos de CE e GnRH. / The aim of this study was to evaluate the effect of presence of corpus luteum (CL) at the onset of timed AI (TAI) protocol in ovulatory follicle diameter (OFD), estrus expression and pregnancy rate using estradiol cypionate (EC) or GnRH as ovulation inductor in beef heifers. On day 0, heifers [n=414; 317±23 kg; 3.08±0.21 body condition score (1 to 5 scale) and 22-24 months of age] received a 1g progesterone (P4) intravaginal device and 2 mg of estradiol benzoate, IM,. On day 8, device was removed, heifers received 500 μg of sodium cloprostenol, IM, and were divided in two groups: EC [n=213; 0.5mg EC, IM, on day 8] and GnRH [n=201; 25 μg of Licerelin, IM, at TAI] TAI was performed 50 h after device removal. The heifers had the base of the tail painted to verify estrus expression between P4 device removal and IATF. On day 0, ultrasound examinations were performed to verify the presence of CL (with CL = 213, without CL = 202).On day 10 to measure OFD and on day 11 to confirm ovulation. Heifers were classified into three groups according to OFD: small (≤ 9.5 mm), medium (9.6-11.5 mm) and large (≥ 11.6 mm) to evaluate their effect on estrus expression and pregnancy rate. Estrus expression was confirmed when ink marking was removed on day 10. Estrus expression was higher (P <0.05) in the EC group compared to GnRH group. The OFD differed (P <0.05) according to the presence of CL (P <0.05), but was similar between the treatments. The ovulation rate did not differ in CE and GnRH groups. Pregnancy rates were similar (P> 0.05) between the EC and GnRH groups, however, the pregnancy rate was higher in heifers who expressed estrus (P <0.05) than in those who did not express it. The presence of CL at the beginning of the IATF protocol was associated with a higher pregnancy rate (P <0.05) in the GnRH group in relation to the EC group, but did not differ between heifers without CL. The estrus manifestation for heifers treated with GnRH increases as the DFO increases, while the EC heifers has a high estrus manifestation independent of the DFO. The pregnancy rate also increases as DFO increases. In conclusion, heifers with CL at the beginning of the IATF protocol have increased ovulatory follicle size, and when treated with GnRH, as an ovulation inducer, attained higher pregnancy rates. The size of the ovulatory follicle was associated with higher estrus behavior and higher pregnancy rates in the EC and GnRH treatments.