Orientador: Beatriz Appezzato-da-Gloria / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-04T13:48:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fernando_JulianaAparecida_D.pdf: 4167657 bytes, checksum: 78dc365d5ec277447072a64005443c39 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: As células dos meristemóides são responsáveis pela expressão da via organogênica in vitro. Esses meristemóides podem ser formados no explante ou no calo originado do explante, caracterizando a organogênese direta e indireta, respectivamente. Tendo em vista que a organogênese in vitro é um pré-requisito ao desenvolvimento de estratégias de micropropagação e à transformação genética de plantas, o monitoramento histológico e ultra-estrutural das células envolvidas nesse processo de regeneração fornece subsídios para a otimização desses protocolos. Nesse contexto, a população FB ¿ 100 de Passiflora edulis Sims f. flavicarpa Deg. foi avaliada quanto ao processo de diferenciação dos meristemóides, à fonte de explante e à adição de água de coco ao meio de cultura. Para análises dos meristemóides, explantes foliares e hipocotiledonares foram inoculados em meio de cultura MS contendo 1,0 mg L-1 de BA e 5% de água de coco. Os estudos anatômicos dos explantes hipocotiledonares mostraram que os meristemóides eram formados a partir da camada epidérmica e das subepidérmicas. Os meristemóides originaram primórdios foliares e, esporadicamente, gemas. Em geral, os meristemóides continuavam o processo de divisão originando protuberâncias. Essas protuberâncias eram constituídas pela camada epidérmica e pelas subepidérmicas meristemáticas e células centrais parenquimáticas, sendo que somente as células periféricas eram capazes de originar gemas. Nos explantes foliares, o processo era similar ao descrito para os explantes hipocotiledonares. Porém, a camada epidérmica e as subepidérmicas das protuberâncias não eram definidas e o número de gemas formadas foi significativamente inferior ao obtido utilizando-se os explantes hipocotiledonares. Portanto, as análises estruturais e as análises estatísticas confirmaram a superioridade do explante hipocotiledonar em relação ao foliar. Os explantes hipocotiledonares desenvolveram um pequeno calo na superfície seccionada do explante. As camadas periféricas desse calo formaram meristemóides que originaram primórdios foliares, gemas esporádicas ou continuaram a se dividir formando protuberâncias. No presente trabalho foi caracterizada a ultra-estrutura das células das protuberâncias formadas diretamente nos explantes hipocotiledonares e aquelas originadas no calo. Os estudos mostraram que nas células meristemáticas das protuberâncias diretas o núcleo apresentou formato circular. Por sua vez, nas protuberâncias formadas no calo, o envoltório nuclear exibia grande quantidade de poros, profundas invaginações e fragmentação nuclear, caracterizando o processo amitótico. As análises ao microscópio eletrônico de varredura dos explantes hipocotiledonares inoculados em meio MS contendo 1,0 mg L-1 de BA suplementado ou não com 5% de água de coco mostraram que as gemas e as protuberâncias obtidas em ambas condições de cultivo apresentaram as mesmas características estruturais / Abstract: Meristemoids are responsible for the in vitro organogenesis expression. They may be formed from the explant (direct organogenesis) or from callus (indirect organogenesis). Once in vitro organogenesis is a prerequisite for developing micropropagation strategies and genetic transformation in plants, the ultrastructural analysis of the cells involved in such regeneration provides basic information that optimize protocols. In this context, FB - 100 population of Passiflora edulis Sims f. flavicarpa Deg. was evaluated as to the meristemoids differentiation, the source of explant and the coconut water supply to the culture medium. Meristemoids were analysed from leaf and hypocotyledonar explants cultured in MS medium supplemented with 1.0 mg L-1 BA and 5% coconut water. The histological analyses of the hypocotyledonar explants showed that meristemoids arose from epidermal and subepidermal layers. Meristemoids originated leaf primordia and, sometimes, buds. In general, meristemoids continued dividing, forming protuberances. Such protuberances consisted of meristematic epidermal and subepidermal cells, as well as central parenchymatic cells, although only peripheral layers of the protuberances originated buds. In leaf explants, this process was similar to the processes described for hypocotyledonar explants. However, epidermal and subepidermal layers of protuberances on leaf explants were not well-defined and the number of buds originated from leaf explants was significantly smaller than the number of buds from hypocotyledonar explants. Structural and statistical evaluations confirmed that the hypocotyledonar explants were better than leaf explants. Hypocotyledonar explants developed a callus in the cut region surface. Peripheral layers of the callus formed meristemoids that gave rise to leaf primordial and buds, or continued dividing to form protuberances. This work characterized the ultrastructure of protuberance cells originated directly on the hypocotyledonar explants, as well as those originated on callus. Meristematic cells of direct protuberances showed spherical nucleus. On the other hand, in indirectly-formed protuberances the nuclear envelope showed a large number of nuclear pore complexes, deep invaginations and nuclear fragmentation characterizing the amitotic process. Analyses under scanning electron microscope of the hypocotyledonar explants cultured on MS medium supplemented with 1.0 mg L-1 BA and either with or without 5% coconut water did not evidence structural differences between buds and protuberances. The quantitative evaluation demonstrated that coconut water was efficient to increase the number of buds / Doutorado / Biologia Vegetal / Doutor em Biologia Vegetal

Doenças causadas por virus do gênero Begomovirus (família Geminiviridae) são incomuns em espécies de passifloras. Nos últimos dez anos, entretanto, foram encontrados no Brasil begomovirus infectando passifloras em pomares nos municipios de São Fidelis (RJ), Paragominas (PA), Patos de Minas (MG) e Araguari (MG). Estes isolados foram transmitidos mecanicamente para plantas de Nicotiana benthamiana, que apresentaram sintomas de mosaico e deformação foliar. Também foi possível a transmissão para plantas de Sida rhombifolia através de inoculação por biobalística com o DNA amplificado do isolado de São Fidelis. Estas plantas demonstraram sintomas de mosaico amarelo e deformação foliar. O DNA total extraído de plantas infectadas foi amplificado por RCA, sendo que o componente A (DNA-A) dos isolados de Paragominas e Patos de Minas foram sequenciados diretamente por \"primer walking\". O DNA-A dos isolados de São Fidelis e Araguari foram clonados e sequenciados. As sequências de nucleotideos dos isolados de Paragominas e de São Fidelis apresentaram 90% de similaridade ao Sida mottle virus (SiMoV), enquanto a sequência de nucleotídeos do isolado de Araguari apresentou 96% de similaridade ao Sida micrantha mosaic virus (SimMV). Assim esses isolados encontrados em maracujazeiro podem ser considerados estirpes do SiMoV e SimMV, respectivamente. Não foi possivel a transmissão desses isolados através de Bemisia tabaci biótipo B, no entanto, os insetos foram capazes de adquirir o vírus. O isolado de São Fidelis foi detectado separadamente na região onde se encontra a glandula salivar (cabeça e protórax) e na região posterior do inseto, indicando que o vírus transpos a barreira do mesenteron e circulou pela hemolinfa do inseto. Alves (2008) obteve uma forma atenuada do isolado de São Fidelis através de inoculações mecanicas em plantas de N. benthamiana. O DNA-A desta forma atenuada foi sequênciado e apresentou 90% de identidade ao isolado do qual se originou. A forma atenuada do begomovirus foi capaz de proteger plantas de maracujazeiro contra a estirpe severa do vírus. / Diseases caused by begomoviruses (family Geminiviridae) are hardly found in Passiflora species. In the last years, however, begomovirus infected passionflowers were found in orchards in the counties of São Fidelis (state of Rio de Janeiro), Paragominas (Pará), Araguari and Patos de Minas (Minas Gerais). These isolates were mechanically transmitted to Nicotiana benthamiana plants, which showed variable symptoms of mosaic and leaf distortion. Another susceptible host is Sida rhombifolia, which was biolistic inoculated with amplified DNA of São Fidelis isolate, and showed symptoms of yellow mosaic and leaf distortion. Total DNA extracted from field infected passiflora was amplified by RCA, and the DNA-A of Paragominas and Patos de Minas isolates were directly sequenced by primer walking. The A component of São Fidelis and Araguari isolates were cloned and also completely sequenced. The complete nucleotide sequence of DNA-A of Araguari isolate shared 96% identity with that of Sida micrantha mosaic virus (SimMV), whereas the DNA-A of Paragominas and São Fidelis isolates shared 90% identity with that of Sida mottle virus (SiMoV). These viruses may be consider as strains of SiMoV and SimMV, respectively. It was not possible to transmit these isolates by Bemisia tabaci biótipo B, although the insects were able to acquire the virus. São Fidelis isolate could be detected separately at salivary gland region and posterior region of the insect, indicating that the virus could cross the digestive tract and circulate in the hemolymph. Alves (2008) obtained a mild strain of São Fidelis isolate by mechanical inoculation in N. benthamiana plants. The mild isolate was able to protect passionflower against the severe isoalte of this begomovirus.

Este trabalho foi realizado na área experimental de irrigação, na Fazenda Areão do Departamento de Engenharia Rural da Escola Superior de Agricultura "Luiz de Queiroz" - ESALQ/USP (Piracicaba-SP). Transplantaram-se mudas de maracujazeiro amarelo (Passiflora edulis Sims f. flavicarpa Deg), cv. IAC 275, com 83 dias após a germinação, para duas parcelas experimentais com espaldeiras na direção Norte-Sul e Leste-Oeste. O método da razão de Bowen foi utilizado na determinação dos fluxos de calor sensível e latente. Foram coletados dados de saldo de radiação, fluxo de calor no solo, gradientes de temperatura e pressão de vapor com objetivo de avaliar a partição da energia disponível e a evapotranspiração em cultivo de maracujazeiros. Em teste de laboratório e campo, avaliaou-se o desempenho das células de carga hidráulica, através de calibrações simultâneas em comparação as células eletrônicas, e por fim, verificou-se o funcionamento de um transdutor de pressão eletrônico acoplado às células para automação dos dados. Na determinação do consumo de água pelas plantas, utilizaram-se quatro lisímetros de pesagem hidráulica, iguais, sendo dois por parcela. Nos lisímetros de pesagem hidráulica o consumo medido, em litros planta-1 dia-1, foi ajustado de acordo com a área foliar da planta instalada, para hipoteticamente uniformizar o desenvolvimento vegetativo, permitindo assim, compará-las entre si. O saldo de radiação não foi influenciado pelo sistema de plantio, sendo equivalente a 60% da radiação global. O componente de maior contribuição no balanço de radiação foi o calor latente de evaporação. O fluxo de calor sensível teve valores mais significativos imediatamente após as chuvas ou irrigações. A utilização do modelo de análise e exclusão de intervalos em que o método de Razão de Bowen falha, melhora a estimativa da evapotranspiração. O arranjo das células de carga em forma de triangulo eqüilátero promoveu boa estabilidade e distribuição equilibrada de forças. O estabelecimento do volume ideal de fluído proporcionou calibrações lineares e consequentemente, melhor desempenho dos lisímetros. As correlações entre os valores de variação de massa observadas no piezômetro, célula eletrônica e transdutor de pressão apresentaram relação linear com alto coeficiente de determinação. A lâmina acumulada até o 450 DAP representativa para a parcela Norte-Sul foi de 1171 mm, superior a 1083 mm acumulado na parcela Leste-Oeste. Os valores extremos de consumo foram em média 5 L planta-1 dia-1, durante o outono e inverno, e 8 L planta-1 dia-1, no Verão. Não houve diferença significativa para a ETc das parcelas nos meses de menor disponibilidade energética. Foram determinados coeficientes de cultivo de 0,6 para a fase de crescimento vegetativo apical, 0,9 para a fase de crescimento vegetativo lateral, 1,2 para a fase de floração e frutificação, 1,0 para a fase de maturação dos frutos, 0,8 para a fase pósmaturação dos frutos. / This work was carried out at the experimental irrigation farm of the Engineering Department - College of Agriculture Luiz de Queiroz - ESALQ/USP in Piracicaba, São Paulo, State. The 83-day-old passiflora seedlings (Passiflora edulis Sims f. flavicarpa Deg cv. IAC 275) were transplanted to experimental units with rows planted based on North- South and East-West directions. The Bowen ratio method was used to determine both sensible heat and latent heat fluxes. It was collected micrometeorological data from net radiation, soil flux heat, temperature and vapor pressure gradient with the aim to evaluate the energy available partition and evapotranspiration of trees planted under two row directions. The performance of a hydraulic load cells and a pressure transductor were evaluated by calibration of electronic load cells in laboratory and field conditions. In order to determine the evapotranspiration, it was used four similar hydraulic weighing lysimeters, being two in each direction of plant row. The daily evapotranspiration in liters per plant was adjusted to the leaf area present in each lysimeter, to hypothetically uniform the vegetative development and compare the values themselves. The net radiation was not influenced by row directions, and it was 60% of global radiation. The latent heat of evaporation was the major role on energy balance and the significant values happened immediately after a rainfall or irrigation. The use of intervals and exclusion analyzes model, when the Bowen ratio fails, improve the estimative of evapotranspiration. The triangular design of load cells promoted a good stability and distribution of forces. The establishment of an ideal fluid volume leaded a liner calibrations and better performances. Relationships between mass variation read in piezometer, electronic load cells and pressure transductor showed linear relation and high determination coefficient. The accumulative depth at 450 DAP for North-South unit was 1171 mm higher than 1083 mm for East-West. The average of extremes values for evapotranspiration was 5 L plant-1 day-1 for autumn and winter and 8 L plant-1 day-1 for summer period. No significant differences were found for ETc for units in months of lower energetic availability. The values for crop coefficient were 0.6 for apex vegetative growth, 0.9 for lateral vegetative growth, 1.2 for flowering and fruit development, 1.0 for fruit maturation and 0.8 for post-maturation period.

Orientador: Luiz de Souza Corrêa / Banca: Aparecida Conceição Boliani / Banca: Silvia Correa Santos / Resumo: O maracujazeiro por ser uma trepadeira necessita de suporte para seu desenvolvimento e produção, sendo que este pode afetar a qualidade, produção, bem como custos. Desta forma, o presente trabalho teve como objetivo avaliar o efeito de diferentes sistemas de condução sobre o crescimento, produção e qualidade dos frutos de maracujazeiro amarelo, bem como o custo de implantação das espaldeira utilizadas. O experimento foi conduzido na Fazenda Experimental, pertencente à Agência Paulista de Tecnologia dos Agronegócios, localizada no Município de Andradina-SP, em um Latossolo Vermelho, de abril 2006 a fevereiro de 2007. Foram utilizados os seguintes tratamentos: T1- Espaldeira Vertical com 1 fio arame e 1 cordão; T2- Espaldeira Vertical com 1 fio arame e 2 cordões (um para cada lado a 2,0 m); T3-Espaldeira Vertical com 2 fios arame e 2 cordões (1 para cada lado a 2,0 m); T4- Espaldeira Vertical com 2 fios arame e 2 cordões (só para um lado a 1,6 e 2,0m); T5- Espaldeira Vertical com 2 fios arame e 4 cordões (2 para cada lado); T6- Espaldeira em T com 2 fios de arame e 2 cordões (só para um lado a 2,0 m) e T7- Espaldeira em T com 2 fios de arame e 4 cordões (2 para cada lado), adotando-se o delineamento em blocos casualizados e três repetições. Em função dos resultados pode-se concluir que: a) O sistema de condução em espaldeira em T, com 2 fios de arame e 4 cordões, foi o que proporcionou maior número de ramos e maior produtividade de frutos; b) Houve superioridade na produção na espaldeira em T, não havendo diferenças nas espaldeiras verticais com um e dois fios de arame; c) O aumento do número de cordões promoveu o aumento da emissão de ramos produtivos, número de frutos colhidos e massa por hectare; d) As caracteristicas tecnológicas... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The passionfruit plant for being a semiligneous climbing plant needs support for its development and production, what can affect its, quality, production as well as its cost. Thus, the present work had as objective to evaluate the effects of different systems of conduction on the growth, production and quality of the yellow passionfruit plant fruits as well as the implementation cost of the Espalier used. The experiment was set up on the Experimental farm, which belongs to the Agência Paulista de Tecnologia dos Agronegócios, located in the Andradina county-SP in a red Latossol, april of 2006 even February of 2007. The following treatments were used : T1-Vertical Espalier with 1 wire and 1 string; T2- Vertical Espalier with 1 wire and 2 strings (one for each side at 2,0 m); T3-Vertical Espalier with 2 wires and 2 strings (1 for each side at 2,0 m); T4- Vertical Espalier with 2 wires and 2 strings (only for one side at 1,6 and 2,0m); T5- Vertical Espalier with 2 wires and 4 strings (2 for each side); T6- Espalier in T with 2 wires and 2 strings (for only one side at 2,0 m) and T7- Espalier in T with 2 wires and 4 strings (2 for each side),adopting the random block design and 3 repetitions. According to the results, it's possible to conclude that: a) The system of conduction in espalier in T, with 2 wires and 4 strings, was the one which provided the greatest number of branches and production of fruits per area; b) There was greater production in espalier in T, without any difference in the Vertical Espaliers with one or two wires; c) The increase in the number of strings promoted the increase on the growth of productive branches, number of fruit picked and mass per hectare; d) The technological characteristics were not influenced by the conduction system; e) The system of conduction of Espalier in T with 2 wires and 4 strings demosntrated better economic viability in relation to the other. / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-08-29Bitstream added on 2014-06-13T20:39:23Z : No. of bitstreams: 1 komuro_lk_me_ilha.pdf: 626052 bytes, checksum: 03cb2f9c533d084d6bdfde30c94057d7 (MD5) / O maracujazeiro por ser uma trepadeira necessita de suporte para seu desenvolvimento e produção, sendo que este pode afetar a qualidade, produção, bem como custos. Desta forma, o presente trabalho teve como objetivo avaliar o efeito de diferentes sistemas de condução sobre o crescimento, produção e qualidade dos frutos de maracujazeiro amarelo, bem como o custo de implantação das espaldeira utilizadas. O experimento foi conduzido na Fazenda Experimental, pertencente à Agência Paulista de Tecnologia dos Agronegócios, localizada no Município de Andradina-SP, em um Latossolo Vermelho, de abril 2006 a fevereiro de 2007. Foram utilizados os seguintes tratamentos: T1- Espaldeira Vertical com 1 fio arame e 1 cordão; T2- Espaldeira Vertical com 1 fio arame e 2 cordões (um para cada lado a 2,0 m); T3-Espaldeira Vertical com 2 fios arame e 2 cordões (1 para cada lado a 2,0 m); T4- Espaldeira Vertical com 2 fios arame e 2 cordões (só para um lado a 1,6 e 2,0m); T5- Espaldeira Vertical com 2 fios arame e 4 cordões (2 para cada lado); T6- Espaldeira em T com 2 fios de arame e 2 cordões (só para um lado a 2,0 m) e T7- Espaldeira em T com 2 fios de arame e 4 cordões (2 para cada lado), adotando-se o delineamento em blocos casualizados e três repetições. Em função dos resultados pode-se concluir que: a) O sistema de condução em espaldeira em T, com 2 fios de arame e 4 cordões, foi o que proporcionou maior número de ramos e maior produtividade de frutos; b) Houve superioridade na produção na espaldeira em T, não havendo diferenças nas espaldeiras verticais com um e dois fios de arame; c) O aumento do número de cordões promoveu o aumento da emissão de ramos produtivos, número de frutos colhidos e massa por hectare; d) As caracteristicas tecnológicas... / The passionfruit plant for being a semiligneous climbing plant needs support for its development and production, what can affect its, quality, production as well as its cost. Thus, the present work had as objective to evaluate the effects of different systems of conduction on the growth, production and quality of the yellow passionfruit plant fruits as well as the implementation cost of the Espalier used. The experiment was set up on the Experimental farm, which belongs to the Agência Paulista de Tecnologia dos Agronegócios, located in the Andradina county-SP in a red Latossol, april of 2006 even February of 2007. The following treatments were used : T1-Vertical Espalier with 1 wire and 1 string; T2- Vertical Espalier with 1 wire and 2 strings (one for each side at 2,0 m); T3-Vertical Espalier with 2 wires and 2 strings (1 for each side at 2,0 m); T4- Vertical Espalier with 2 wires and 2 strings (only for one side at 1,6 and 2,0m); T5- Vertical Espalier with 2 wires and 4 strings (2 for each side); T6- Espalier in T with 2 wires and 2 strings (for only one side at 2,0 m) and T7- Espalier in T with 2 wires and 4 strings (2 for each side),adopting the random block design and 3 repetitions. According to the results, it’s possible to conclude that: a) The system of conduction in espalier in T, with 2 wires and 4 strings, was the one which provided the greatest number of branches and production of fruits per area; b) There was greater production in espalier in T, without any difference in the Vertical Espaliers with one or two wires; c) The increase in the number of strings promoted the increase on the growth of productive branches, number of fruit picked and mass per hectare; d) The technological characteristics were not influenced by the conduction system; e) The system of conduction of Espalier in T with 2 wires and 4 strings demosntrated better economic viability in relation to the other.

Doenças causadas por virus do gênero Begomovirus (família Geminiviridae) são incomuns em espécies de passifloras. Nos últimos dez anos, entretanto, foram encontrados no Brasil begomovirus infectando passifloras em pomares nos municipios de São Fidelis (RJ), Paragominas (PA), Patos de Minas (MG) e Araguari (MG). Estes isolados foram transmitidos mecanicamente para plantas de Nicotiana benthamiana, que apresentaram sintomas de mosaico e deformação foliar. Também foi possível a transmissão para plantas de Sida rhombifolia através de inoculação por biobalística com o DNA amplificado do isolado de São Fidelis. Estas plantas demonstraram sintomas de mosaico amarelo e deformação foliar. O DNA total extraído de plantas infectadas foi amplificado por RCA, sendo que o componente A (DNA-A) dos isolados de Paragominas e Patos de Minas foram sequenciados diretamente por \"primer walking\". O DNA-A dos isolados de São Fidelis e Araguari foram clonados e sequenciados. As sequências de nucleotideos dos isolados de Paragominas e de São Fidelis apresentaram 90% de similaridade ao Sida mottle virus (SiMoV), enquanto a sequência de nucleotídeos do isolado de Araguari apresentou 96% de similaridade ao Sida micrantha mosaic virus (SimMV). Assim esses isolados encontrados em maracujazeiro podem ser considerados estirpes do SiMoV e SimMV, respectivamente. Não foi possivel a transmissão desses isolados através de Bemisia tabaci biótipo B, no entanto, os insetos foram capazes de adquirir o vírus. O isolado de São Fidelis foi detectado separadamente na região onde se encontra a glandula salivar (cabeça e protórax) e na região posterior do inseto, indicando que o vírus transpos a barreira do mesenteron e circulou pela hemolinfa do inseto. Alves (2008) obteve uma forma atenuada do isolado de São Fidelis através de inoculações mecanicas em plantas de N. benthamiana. O DNA-A desta forma atenuada foi sequênciado e apresentou 90% de identidade ao isolado do qual se originou. A forma atenuada do begomovirus foi capaz de proteger plantas de maracujazeiro contra a estirpe severa do vírus. / Diseases caused by begomoviruses (family Geminiviridae) are hardly found in Passiflora species. In the last years, however, begomovirus infected passionflowers were found in orchards in the counties of São Fidelis (state of Rio de Janeiro), Paragominas (Pará), Araguari and Patos de Minas (Minas Gerais). These isolates were mechanically transmitted to Nicotiana benthamiana plants, which showed variable symptoms of mosaic and leaf distortion. Another susceptible host is Sida rhombifolia, which was biolistic inoculated with amplified DNA of São Fidelis isolate, and showed symptoms of yellow mosaic and leaf distortion. Total DNA extracted from field infected passiflora was amplified by RCA, and the DNA-A of Paragominas and Patos de Minas isolates were directly sequenced by primer walking. The A component of São Fidelis and Araguari isolates were cloned and also completely sequenced. The complete nucleotide sequence of DNA-A of Araguari isolate shared 96% identity with that of Sida micrantha mosaic virus (SimMV), whereas the DNA-A of Paragominas and São Fidelis isolates shared 90% identity with that of Sida mottle virus (SiMoV). These viruses may be consider as strains of SiMoV and SimMV, respectively. It was not possible to transmit these isolates by Bemisia tabaci biótipo B, although the insects were able to acquire the virus. São Fidelis isolate could be detected separately at salivary gland region and posterior region of the insect, indicating that the virus could cross the digestive tract and circulate in the hemolymph. Alves (2008) obtained a mild strain of São Fidelis isolate by mechanical inoculation in N. benthamiana plants. The mild isolate was able to protect passionflower against the severe isoalte of this begomovirus.

Este trabalho foi realizado na área experimental de irrigação, na Fazenda Areão do Departamento de Engenharia Rural da Escola Superior de Agricultura “Luiz de Queiroz” - ESALQ/USP (Piracicaba-SP). Transplantaram-se mudas de maracujazeiro amarelo (Passiflora edulis Sims f. flavicarpa Deg), cv. IAC 275, com 83 dias após a germinação, para duas parcelas experimentais com espaldeiras na direção Norte-Sul e Leste-Oeste. O método da razão de Bowen foi utilizado na determinação dos fluxos de calor sensível e latente. Foram coletados dados de saldo de radiação, fluxo de calor no solo, gradientes de temperatura e pressão de vapor com objetivo de avaliar a partição da energia disponível e a evapotranspiração em cultivo de maracujazeiros. Em teste de laboratório e campo, avaliaou-se o desempenho das células de carga hidráulica, através de calibrações simultâneas em comparação as células eletrônicas, e por fim, verificou-se o funcionamento de um transdutor de pressão eletrônico acoplado às células para automação dos dados. Na determinação do consumo de água pelas plantas, utilizaram-se quatro lisímetros de pesagem hidráulica, iguais, sendo dois por parcela. Nos lisímetros de pesagem hidráulica o consumo medido, em litros planta-1 dia-1, foi ajustado de acordo com a área foliar da planta instalada, para hipoteticamente uniformizar o desenvolvimento vegetativo, permitindo assim, compará-las entre si. O saldo de radiação não foi influenciado pelo sistema de plantio, sendo equivalente a 60% da radiação global. O componente de maior contribuição no balanço de radiação foi o calor latente de evaporação. O fluxo de calor sensível teve valores mais significativos imediatamente após as chuvas ou irrigações. A utilização do modelo de análise e exclusão de intervalos em que o método de Razão de Bowen falha, melhora a estimativa da evapotranspiração. O arranjo das células de carga em forma de triangulo eqüilátero promoveu boa estabilidade e distribuição equilibrada de forças. O estabelecimento do volume ideal de fluído proporcionou calibrações lineares e consequentemente, melhor desempenho dos lisímetros. As correlações entre os valores de variação de massa observadas no piezômetro, célula eletrônica e transdutor de pressão apresentaram relação linear com alto coeficiente de determinação. A lâmina acumulada até o 450 DAP representativa para a parcela Norte-Sul foi de 1171 mm, superior a 1083 mm acumulado na parcela Leste-Oeste. Os valores extremos de consumo foram em média 5 L planta-1 dia-1, durante o outono e inverno, e 8 L planta-1 dia-1, no Verão. Não houve diferença significativa para a ETc das parcelas nos meses de menor disponibilidade energética. Foram determinados coeficientes de cultivo de 0,6 para a fase de crescimento vegetativo apical, 0,9 para a fase de crescimento vegetativo lateral, 1,2 para a fase de floração e frutificação, 1,0 para a fase de maturação dos frutos, 0,8 para a fase pósmaturação dos frutos. / This work was carried out at the experimental irrigation farm of the Engineering Department - College of Agriculture Luiz de Queiroz - ESALQ/USP in Piracicaba, São Paulo, State. The 83-day-old passiflora seedlings (Passiflora edulis Sims f. flavicarpa Deg cv. IAC 275) were transplanted to experimental units with rows planted based on North- South and East-West directions. The Bowen ratio method was used to determine both sensible heat and latent heat fluxes. It was collected micrometeorological data from net radiation, soil flux heat, temperature and vapor pressure gradient with the aim to evaluate the energy available partition and evapotranspiration of trees planted under two row directions. The performance of a hydraulic load cells and a pressure transductor were evaluated by calibration of electronic load cells in laboratory and field conditions. In order to determine the evapotranspiration, it was used four similar hydraulic weighing lysimeters, being two in each direction of plant row. The daily evapotranspiration in liters per plant was adjusted to the leaf area present in each lysimeter, to hypothetically uniform the vegetative development and compare the values themselves. The net radiation was not influenced by row directions, and it was 60% of global radiation. The latent heat of evaporation was the major role on energy balance and the significant values happened immediately after a rainfall or irrigation. The use of intervals and exclusion analyzes model, when the Bowen ratio fails, improve the estimative of evapotranspiration. The triangular design of load cells promoted a good stability and distribution of forces. The establishment of an ideal fluid volume leaded a liner calibrations and better performances. Relationships between mass variation read in piezometer, electronic load cells and pressure transductor showed linear relation and high determination coefficient. The accumulative depth at 450 DAP for North-South unit was 1171 mm higher than 1083 mm for East-West. The average of extremes values for evapotranspiration was 5 L plant-1 day-1 for autumn and winter and 8 L plant-1 day-1 for summer period. No significant differences were found for ETc for units in months of lower energetic availability. The values for crop coefficient were 0.6 for apex vegetative growth, 0.9 for lateral vegetative growth, 1.2 for flowering and fruit development, 1.0 for fruit maturation and 0.8 for post-maturation period.

O objetivo do trabalho foi estudar uma forma alternativa para o controle do endurecimento dos frutos do maracujazeiro, pela produção de plantas transgênicas contendo o gene da proteína capsidial do Passionfruit woodness virus - PWV. O vetor de expressão foi construído utilizando-se os plasmídeos pCambia 2300 e pCambia 2301, que contêm o gene de seleção nptII, para resistência ao antibiótico canamicina. O plasmídeo pCambia 2301 contém também o gene repórter uidA (GUS). Os plasmídeos foram introduzidos em Agrobacterium tumefaciens, estirpes EHA 105 e LBA 4404, pelo método do choque térmico. Os explantes para transformação genética constituíram-se de discos de folhas jovens (6 mm de diâmetro), das variedades IAC 275 e IAC 277, coletados de plantas mantidas em sob fotoperíodo de 16 h luz, a 27 °C. Os explantes foram inoculados com suspensão bacteriana (5x108 UFC/mL) por 20 min e transferidos para placa de Petri contendo o meio de cultura MS + thidiazuron (TDZ - 0,25 mg/L) + nitrato de prata (AgNO3 - 4 mg/L) + acetoseringona (1 µM/L). O co-cultivo foi realizado à temperatura de 24 °C, em ausência de luz, por um período de 3 dias. Para seleção e regeneração de plantas os explantes foram transferidos para meio de cultura de seleção MS + TDZ (0,25 mg/L) + AgNO3 (4 mg/L) + canamicina (100 mg/L) + cefotaxime (500 mg/L). A incubação foi realizada a 27 °C, em ausência de luz, por um período de 4 - 6 semanas. As gemas adventícias desenvolvidas foram transferidas para o meio de cultura MSM + 10% de água de coco e incubadas sob fotoperíodo de 16 h de luz. A transformação genética foi identificada pelo teste histoquímico GUS e por PCR. Obteve-se um total de 22 plantas PCR positivas. Destas, 8 foram analisadas por Southern blot para confirmação da integração do transgene. A transcrição e expressão do transgene foram analisadas por Northern e Western blot, respectivamente. As plantas transgênicas avaliadas foram multiplicadas e inoculadas com 3 diferentes estirpes do PWV. A linhagem T2 apresentou resistência a infecção dos três isolados utilizados. / The main purpose of this work was to study an alternative way to control the Passionfruit woodiness virus - PWV through the production of transgenic plants which contained the Passionfruit woodness virus coat protein gene. The binary vector was built by using pCambia 2300 and pCambia 2301 plasmids, which contain the selection gene nptII. The pCambia 2301 plasmid also contains the reporter gene uidA (GUS). The plasmids were introduced into Agrobacterium tumefaciens, EHA 105 and LBA 4404 strains, via thermal shock method. The explants for the genetic transformation were young leaf disks (6 mm of diameter) of IAC 275 and IAC 277 varietys, extracted from plants kept under 16 h photoperiod, at 27 °C. The explants were inoculated with a bacterial suspension (5x108 UFC/mL) for 20 min and then transferred to Petri dishes containing cocolture medium MS + thidiazuron (TDZ - 0,25 mg/L) + silver nitrate (AgNO3 - 4 mg/L) + acetosyringone (1 µM/L). The co-culture was performed at 24 °C t, in the dark, for a three-day period. For the selection and regeneration of plants, the explants were transferred to the selection culture medium MS + TDZ (0,25 mg/L) + AgNO3 (4 mg/L) + kanamycin (100 mg/L) + cefotaxime (500 mg/L). The incubation was performed at 27 °C, in dark, for 4 - 6 weeks. The adventitious buds developed were then transferred to the culture medium MSM + 10% coconut water and kept incubated under 16 h photoperiod. The genetic transformation was identified through GUS and PCR tests. There were 22 PCR positive plants. Out of those, 8 were Southern blot analyzed for the confirmation of transgenc integration. The transgene transcription and expression were determined by Northern and Western blot respectively. The transgenic plants were then multiplied and inoculated with 3 different strains of PWV, and the line 2 showed resistance to the three strains used.

O avanço da cultura do maracujazeiro no país impulsionado pela agroindústria de suco e a crescente demanda de fruta fresca, acarretou o surgimento de problemas, principalmente de ordem fitossanitária, doenças causadas por fungos, bactérias e vírus. A espécie Passiflora cincinnata Mast. por apresentar resistência à doença da parte aérea causada pela ba ctéria Xanthomonas campestris f. sp. passiflorae e, potencial para a comercialização constitui um genótipo de interesse em programas de melhoramento. Visto que a cultura de tecidos tem sido ferramenta importante nesses programas, o presente projeto visa o estudo aspectos anatômicos e fisiológicos da organogênese in vitro dessa espécie. Os explantes utilizados: segmentos radiculares, discos foliares e a própria plântula, obtidos da germinação de sementes in vitro, foram inoculados em meio contendo diferentes concentrações de 6-BA (6-benziladenina) e acrescido de 5% de água de coco, a fim de estabelecer os protocolos de regeneração de plantas in vitro. A concentração de 0,5 mg.L -1 de 6-BA foi a mais adequada para os três explantes, porém, o tempo e a via (direta/indireta) de formação da gema diferiu para cada tipo de explante. Os eventos histológicos que levaram a formação de um novo órgão, via meristemóides (centros meristemáticos) foram descritos. Nos discos foliares a origem foi indireta, com formação de calo a partir das células subepidérmicas das camadas de parênquima clorofiliano. Nos segmentos de raiz e nas raízes das plântulas, a organogênese direta apresentou duas origens, a partir do periciclo, nas raízes com início da estrutura secundária, e a partir do câmbio vascular, nas raízes com estrutura secundária já estabelecida. Também nos segmentos de raiz observou-se a via indireta, esta a partir da proliferação do periciclo. / The progress of passionfruit culture in the country stimulated by the juice agroindustry and due to an increased demand of fresh fruit have brought phytosanitary problems, such as, diseases caused by fungis, bacterium and virus. The Passiflora cincinnata Mast. a resistant specie to Xanthomonas campestris f. sp. Passiflora bacterium shows a potential for commercialization creating an interest genotype in breedings programs. Whereas the tissue culture has been an important instrument for those programs, object of this program is to study the anatomical and physiologycal aspects of organogenesis "in vitro" of this specie. The explants used were: root segments, leaf discs and the seedlings obtained from germination of seeds "in vitro". They were placed in different solutions of 6-BA (benzyladenine) and with 5% of coconut water, in order to establish protocol for plant regeneration "in vitro". The concentration of 0,5 mg.L- 1 of 6-BA was the most adequate for all three explants, but the time and nourishement source (direct/indirect) to the shoots formation differed to each kind of explants. The histological events had lead the formation of a new organ, by meristemoids (meristematic centers) were described. In the leaf discs the indirect origin, was observed in which callus were formatted by the layer of chlorophyll parenchyma subepidermis cells. In the root segments and in the root plantets, the direct organogenesis showed two origins (source), from the pericycle, on the roots that starts at the secondary structure and from vascular cambium, on the roots that had already been established secondary structure. Also the root segments was seen by the indirect way, which callus were formatted by the pericycle proliferation.

Submitted by JELENA PURIC (jelena0puric@gmail.com) on 2018-04-16T12:39:06Z No. of bitstreams: 1 Jelena Puric Dissertação de Mestrado.pdf: 2830343 bytes, checksum: 555cfd034f96e02e12c50107d2077d5f (MD5) / Rejected by Adriana Aparecida Puerta null (dripuerta@rc.unesp.br), reason: Prezada Jelena, Solicitamos que realize uma nova submissão seguindo as orientações abaixo: 1) A folha de aprovação está em local errado. No arquivo enviado, está em primeiro lugar, antes da capa. O correto de acordo com as normas vigentes é que a folha de aprovação venha após a ficha catalográfica (que o seu arquivo também não tem) e venha antes do Resumo. 2) Falta a ficha catalográfica, que deve ser solicitada pelo site da biblioteca da Unesp de Rio Claro e inserida após a folha de rosto no arquivo pdf e no verso da folha de rosto na versão impressa. O documento enviado não foi excluído. Para revisá-lo e realizar uma nova tentativa de envio, acesse: https://repositorio.unesp.br/mydspace Agradecemos a compreensão e aguardamos o envio do novo arquivo. Atenciosamente, Biblioteca Campus Rio Claro Repositório Institucional UNESP on 2018-04-16T14:20:27Z (GMT) / Submitted by JELENA PURIC (jelena0puric@gmail.com) on 2018-04-16T14:31:14Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Jelena Puric.pdf: 2938364 bytes, checksum: b7379106bbe1a2cdf5ce930d5337096b (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Aparecida Puerta null (dripuerta@rc.unesp.br) on 2018-04-16T18:28:58Z (GMT) No. of bitstreams: 1 puric_j_me_rcla.pdf: 2383486 bytes, checksum: e2cb2e6c5d3d71426040a339c65c55ce (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-16T18:28:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 puric_j_me_rcla.pdf: 2383486 bytes, checksum: e2cb2e6c5d3d71426040a339c65c55ce (MD5) Previous issue date: 2018-02-22 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Este trabalho teve como objetivo obter extratos contendo metabólitos secundários de fungos filamentosos isolados de sedimentos marinhos da Antártica e avaliar sua potencial atividade antibacteriana em Xanthomonas citri subsp. citri, Xanthomonas euvesicatoria e Xanthomonas axonopodis pv. passiflorae (bactérias fitopatogênicas que causam doenças em cítricos, pimenta e tomate, e maracujá, respectivamente). Entre os 90 extratos brutos intracelulares e extracelulares obtidos a partir de fungos, 19 mostraram a capacidade de impedir o crescimento de X. citri subsp. citri e X. euvesicatoria in vitro e 22 mostraram a capacidade de dificultar o crescimento de X. axonopodis pv. passiflorae in vitro. Os extratos extracelulares inibiram em média 97,12% de X. citri subsp. citri, 95,94% de X. euvesicatoria e 96,58% de X. axonopodis pv. passiflorae a 3,0 mg / mL. / This work aimed to obtain extracts containing secondary metabolites from filamentous fungi isolated from marine sediments from Antarctic and assess their potential antibacterial activity on Xanthomonas citri subsp. citri, Xanthomonas euvesicatoria and Xanthomonas axonopodis pv. passiflorae (phytopathogenic bacteria causing diseases in citrus, pepper and tomato, and passionfruit, respectively). Among the 90 raw intracellular and extracellular extracts obtained from fungi, 19 showed the ability to hamper the growth of Xanthomonas citri subsp. citri and X. euvesicatoria in vitro and 22 showed the ability to hamper the growth of X. axonopodis pv. passiflorae in vitro. The extracellular extracts inhibited on average 97,12% of Xanthomonas citri subsp, 95,94% of X. euvesicatoria and 96,58% of X. axonopodis pv. passiflorae at 3,0 mg/mL.