Introdução: A necessidade de pacientes serem inseridos em protocolos de manutenção periodontais (PMP) após tratamento periodontal é bem estabelecida na literatura. No entanto, ainda não é bem estabelecido quais procedimentos são necessários para manter a saúde periodontal. O objetivo do presente estudo foi identificar quais os biomarcadores relacionados com a doença periodontal e comparar o efeito de dois PMPs nos níveis destes biomarcadores pró e antiinflamatórios do fluido crevicular gengival (FCG) durante 1 ano. Materiais e Métodos: Após o tratamento periodontal não-cirúrgico, 34 sujeitos (14H/20M, idade média 54 anos) diagnosticados com periodontite crônica foram randomicamente alocados em um dos seguintes grupos: a) somente raspagem supragingival; b) raspagem supra e subgengival. Todos os participantes receberam instruções de higiene oral personalizados e polimento dos dentes. Os indivíduos foram vistos em intervalos de três meses para a realização de exames clínicos, coleta de FCG e procedimentos de manutenção periodontal. As principais citocinas pró- e anti-inflamatórias e quimiocina relacionadas com a doença periodontal foram identificadas por meio de uma revisão sistemática da literatura com metanálise. Em seguida, os níveis de FCG de 16 citocinas e quimiocinas dos 34 sujeitos incluídos no estudo foram medidos por meio de um imunoensaio múltiplo. Resultados: Não foram observadas diferenças significativas nos parâmetros clínicos ou imunológicos entre os dois PMPs. Os níveis médios de concentração no FCG da maioria das citocinas pró-inflamatórias foram geralmente baixos / moderados durante todo o período de estudo, com exceção da IL-1β. Os níveis das citocinas anti-inflamatórias IL-4 e IL-13 foram moderado / alto. Entre as quimiocinas, os níveis de MIP-1α e MCP-1 foram altos, e a concentração de IL-8 foi muito alta durante todo o estudo. Conclusões: Os resultados sugerem que um PMP baseado apenas no controle do biofilme supragengival é tão eficaz na manutenção de baixos níveis de inflamação periodontal e estabilidade clínica após o tratamento quanto um PMP baseado em controle supra e subgengival. / Introduction: The need for patients to be enrolled into periodontal maintenance protocols (PMP) after periodontal treatment is well established in the literature. However, it is still unknown which interventions are necessary to maintain periodontal health. The aim of the present study was to identify the biomarkers related to periodontal disease, and to compare the 1-year effect of two periodontal maintenance protocols (PMP) on gingival crevicular fluid (GCF) levels of pro- and anti-inflammatory biomarkers. Material and Methods: Following non-surgical periodontal treatment, 34 subjects (14M/20F, mean age: 54 years) diagnosed with chronic periodontitis were randomly assigned into one of the following study arms: a) supragingival scaling only; b) supra and subgingival scaling. All subjects received personalized oral hygiene instructions and tooth polishing. Subjects were seen at 3 months intervals for periodontal maintenance, clinical data and GCF collection. The major pro-and anti-inflammatory cytokines and chemokine related to periodontal disease were identified through a systematic review of the literature with metaanalysis. After that, GCF levels of 16 different cytokines and chemokines from the 34 subjects included in the study were measured using a multiplex immunoassay. Results: No significant differences between PMPs were observed for any clinical parameters or immunological biomarkers. Median GCF concentration levels for most pro-inflammatory cytokines were generally low/moderate throughout the study period, with the exception of IL-1β. GCF levels of anti-inflammatory cytokines IL-4 and IL-13 were moderate/high. For chemokines, GCF levels for MIP-1α and MCP-1 were high, and concentration for IL-8 was very high. Conclusion: Our findings suggest that a PMP based on supragingival biofilm control alone is as effective in maintaining low levels of periodontal inflammation and clinical stability after treatment as a PMP based on combined supra/subgingival biofilm control.

O processo de diferenciação e ativação de osteoclastos, essencial para a manutenção da homeostasia do tecido ósseo e também envolvido na patogênese de diversas patologias caracterizadas pela atividade osteolítica, depende de um sistema central de controle que envolve a ligação das moléculas RANK/RANKL. Além do sistema RANK/RANKL, moléculas co-estimulatórias de osteoclastos, tais como os complexos DAP-12, TREM-2 e SIRP1, e FcR, OSCAR e PIR-A, também apresentam um papel importante na geração e ativação de osteoclastos. Entretanto, a possível contribuição de tais moléculas para a progressão da doença periodontal (DP) permanece desconhecida, assim como o possível impacto de citocinas na modulação de sua expressão no microambiente periodontal. Nosso objetivo foi investigar, por RealTimePCR, o padrão de expressão de moléculas co-estimulatórias de osteoclastos (DAP-12, TREM-2 e SIRP1, e FcR, OSCAR e PIR-A) na periodontite crônica em humanos, além de avaliar a cinética de expressão destas moléculas e a sua modulação por citocinas (TNF-, IFN-, IL-17 e IL-10) ao longo do curso da DP em camundongos em camundongos C57Bl/6 wild-type (WT) e geneticamente modificados (TNFp55KO, IFNKO, IL17KO, IL10KO. Nossos resultados demonstram que nas lesões periodontais crônicas a expressão de todas as moléculas co-estimulatórias de osteoclastos apresentaram-se significativamente aumentadas quando comparadas às amostras controle. Com relação à periodontite experimental, verificamos que todas as moléculas co-estimulatórias alvo apresentavam aumento em sua expressão após a indução de doença quando comparado aos controles. Nos camundongos para TNFp55KO, IFNKO e IL17KO, observamos uma redução na severidade da DP (reabsorção óssea e quantidade de células inflamatórias) e na expressão de moléculas co-estimulatórias, ao contrário do observado nos camundongos IL10KO. Entretanto, ao normalizarmos os níveis de expressão das moléculas co-estimulatórias de osteoclastos pelo número de células inflamatórias, verificamos que TNF- e IL-17 se mostram associados a uma maior expressão de moléculas co-estimulatórias, enquanto IFN- e IL-10 parecem regular negativamente a expressão de tais moléculas. Em termos gerais, demonstramos que a expressão de moléculas co-estimulatórias de osteoclastos se mostra aumentada na DP humana e experimental, e que citocinas parecem modular sua expressão por mecanismos diretos e indiretos, tais como a migração de células inflamatórias para os sítios de doença periodontal. / The osteoclast differentiation and activation are essential to bone tissue homeostasis and in the development of bone pathologies, which RANK/RANKL signaling molecules are the major osteoclastogenic factor. However, osteoclast co-stimulatory molecules, such as DAP-12, TREM-2, SIRP1, FcR, OSCAR and PIR-A, also present an important role in the osteoclastogenesis. However, the exact role and regulation of these molecules in human and mice periodontal diseases (PD) development have not completely known. Our aim was to investigate the pattern of osteoclast co-stimulatory expression (DAP-12, TREM-2, SIRP1, FcR, OSCAR and PIR-A) in human chronic periodontitis (CP), apart from analyze the kinetic of these molecules and their regulation by cytokines (TNF-, IFN-, IL-17 and IL-10) in the development of experimental periodontal disease in mice C57Bl/6 and knockout. Our results demonstrated that all osteoclast co-stimulatory molecules presented highly expressed in CP patients when compared with control. Similar results are presented about experimental PD, where all co-stimulatory molecules was presented highly expressed in infected mice when compared with control mice. We observed in TNFp55KO, IFNKO and IL17KO mice a decrease in PD scores and co-stimulatory molecules expression, the opposite of IL10KO mice. However, when we standardized the co-stimulatory molecules levels by the number of inflammatory cells, we found that TNF- and IL-17 are associated with increased expression of co-stimulatory molecules, while IFN- and IL-10 appear to negatively regulate the expression of such molecules. In conclusion, we demonstrated that osteoclast co-stimulatory molecules shown increased in human and experimental PD, and cytokines appear to modulate their expression by direct and indirect mechanisms, such as inflammatory cells migration to the PD infected tissue.

Background and Aims: There is little information about the epidemiology and risk factors of periodontal diseases in Latin America in general, and Brazil in particular. The principal aims of this study were to: 1) describe the prevalence and severity of periodontal attachment loss and gingival recession, and to assess the contribution of demographic, behavioral, and environmental exposures to the occurrence of periodontal disease outcomes in a sample representative of the urban population in the state of Rio Grande do Sul in south Brazil; and 2) report the epidemiology and risk indicators of aggressive periodontitis in this population. Methods: A representative sample consisting of 1,586 subjects 14-103 years of age (mean 38 y) and comprising 45.3% males and 54.7% females was selected using a multi-stage, probability, cluster sampling strategy. The subjects were interviewed using a structured questionnaire and underwent a full-mouth, six sites per tooth clinical examination in a mobile examination center. Results: Moderate and severe clinical attachment loss and gingival recession were widespread among adults in this population. The prevalence and extent of attachment loss ³5 and ³7 mm were 79% and 52% subjects, and 36% and 16% teeth; and for gingival recession ³3 mm and ³5 mm were 52% and 22% subjects, and 17% and 6% teeth, respectively. Aggressive periodontitis was diagnosed in 5.5% of subjects, which is significantly higher than the reported prevalence in most other populations. Among the main risk indicators for chronic as well as aggressive destructive periodontal diseases were: older age, low socioeconomic status, dental calculus, and smoking. Cigarette smoking accounted for an important part of periodontal disease burden, particularly in adults, and should be considered an important target in any prevention strategy aimed at reducing the burden of periodontal diseases. Partial recording methods consistently underestimated the prevalence of attachment loss in the population, and the extent of underestimation was dependent on the type of system used and the threshold of attachment loss. Conclusions: Destructive periodontal diseases are prevalent in this Brazilian population. Suitable disease prevention and health promotion programs should be established to improve the periodontal health in this population.

Introdução: A necessidade de pacientes serem inseridos em protocolos de manutenção periodontais (PMP) após tratamento periodontal é bem estabelecida na literatura. No entanto, ainda não é bem estabelecido quais procedimentos são necessários para manter a saúde periodontal. O objetivo do presente estudo foi identificar quais os biomarcadores relacionados com a doença periodontal e comparar o efeito de dois PMPs nos níveis destes biomarcadores pró e antiinflamatórios do fluido crevicular gengival (FCG) durante 1 ano. Materiais e Métodos: Após o tratamento periodontal não-cirúrgico, 34 sujeitos (14H/20M, idade média 54 anos) diagnosticados com periodontite crônica foram randomicamente alocados em um dos seguintes grupos: a) somente raspagem supragingival; b) raspagem supra e subgengival. Todos os participantes receberam instruções de higiene oral personalizados e polimento dos dentes. Os indivíduos foram vistos em intervalos de três meses para a realização de exames clínicos, coleta de FCG e procedimentos de manutenção periodontal. As principais citocinas pró- e anti-inflamatórias e quimiocina relacionadas com a doença periodontal foram identificadas por meio de uma revisão sistemática da literatura com metanálise. Em seguida, os níveis de FCG de 16 citocinas e quimiocinas dos 34 sujeitos incluídos no estudo foram medidos por meio de um imunoensaio múltiplo. Resultados: Não foram observadas diferenças significativas nos parâmetros clínicos ou imunológicos entre os dois PMPs. Os níveis médios de concentração no FCG da maioria das citocinas pró-inflamatórias foram geralmente baixos / moderados durante todo o período de estudo, com exceção da IL-1β. Os níveis das citocinas anti-inflamatórias IL-4 e IL-13 foram moderado / alto. Entre as quimiocinas, os níveis de MIP-1α e MCP-1 foram altos, e a concentração de IL-8 foi muito alta durante todo o estudo. Conclusões: Os resultados sugerem que um PMP baseado apenas no controle do biofilme supragengival é tão eficaz na manutenção de baixos níveis de inflamação periodontal e estabilidade clínica após o tratamento quanto um PMP baseado em controle supra e subgengival. / Introduction: The need for patients to be enrolled into periodontal maintenance protocols (PMP) after periodontal treatment is well established in the literature. However, it is still unknown which interventions are necessary to maintain periodontal health. The aim of the present study was to identify the biomarkers related to periodontal disease, and to compare the 1-year effect of two periodontal maintenance protocols (PMP) on gingival crevicular fluid (GCF) levels of pro- and anti-inflammatory biomarkers. Material and Methods: Following non-surgical periodontal treatment, 34 subjects (14M/20F, mean age: 54 years) diagnosed with chronic periodontitis were randomly assigned into one of the following study arms: a) supragingival scaling only; b) supra and subgingival scaling. All subjects received personalized oral hygiene instructions and tooth polishing. Subjects were seen at 3 months intervals for periodontal maintenance, clinical data and GCF collection. The major pro-and anti-inflammatory cytokines and chemokine related to periodontal disease were identified through a systematic review of the literature with metaanalysis. After that, GCF levels of 16 different cytokines and chemokines from the 34 subjects included in the study were measured using a multiplex immunoassay. Results: No significant differences between PMPs were observed for any clinical parameters or immunological biomarkers. Median GCF concentration levels for most pro-inflammatory cytokines were generally low/moderate throughout the study period, with the exception of IL-1β. GCF levels of anti-inflammatory cytokines IL-4 and IL-13 were moderate/high. For chemokines, GCF levels for MIP-1α and MCP-1 were high, and concentration for IL-8 was very high. Conclusion: Our findings suggest that a PMP based on supragingival biofilm control alone is as effective in maintaining low levels of periodontal inflammation and clinical stability after treatment as a PMP based on combined supra/subgingival biofilm control.

Objetivos: avaliar a associação entre recessão gengival (RG) e qualidade de vida relacionada à saúde bucal (QVRSB) em uma população de adultos do sul do Brasil. Métodos: uma amostra representativa de Porto Alegre foi obtida em 2011 usando uma estratégia de amostragem probabilística de múltiplos estágios. Para este estudo, 740 indivíduos, 35-59 anos de idade e com ≥6 dentes foram incluídos. RG foi avaliada por dois examinadores calibrados em quatro sítios de todos os dentes presentes. O instrumento Oral Health Impact Profile (OHIP-14) foi utilizado para avaliar QVRSB. O OHIP-14 foi dicotomizado usando a resposta "repetidamente" como ponto de corte para impacto negativo. Modelos de regressão logística multivariados foram utilizados para avaliar a associação entre diversas limiares de RG com QV ajustando para idade, sexo, nível socioeconômico, fumo, cuidado odontológico e dentes perdidos. Resultados: a média do OHIP foi significativamente maior nos indivíduos com ≥1 dente com RG ≥2mm, ≥3mm, ≥4mm, e ≥5mm. Indivíduos com ≥1 dente com RG ≥2mm tiveram aproximadamente 2 vezes mais chance de ter impacto negativo quando comparado com indivíduos sem RG nesse limiar [odds ratio (OR)=1.99; 95% confidence interval (CI) 1.05-3.78]. Quando as faces vestibular e proximais foram analisadas separadamente, a presença de RG foi significativamente associada com pior qualidade de vida somente nos anteriores e não nos posteriores. RG na arcada inferior não causou impacto na QVRSB. Conclusões: QVRSB desta população adulta diminui na presença de RG, principalmente em dentes ântero-superiores. / Objectives: to assess the association between gingival recession (GR) and oral health-related quality of life (OHRQoL) in a Brazilian population of adults. Methods: a representative sample from Porto Alegre city was drawn in 2011 using a multistage probability sampling strategy. For this study, 740 individuals, 35-59 years of age and with ≥6 teeth were included. GR was assessed by two calibrated examiners at four sites in all present teeth. The Oral Health Impact Profile (OHIP-14) was used to assess OHRQoL. OHIP-14 was dichotomized using “fairly often” as the cut-off point for a negative impact. Multiple logistic regression models were fitted to define which descriptors of GR were associated with the dichotomous outcome of OHIP-14 adjusting for age, gender, socioeconomic status, smoking, dental care and missing teeth. Results: Mean OHIP was significantly higher for individuals with ≥1 tooth with GR ≥2mm, ≥3mm, ≥4mm, and ≥5mm. Individuals with ≥1 tooth with GR ≥2mm had approximately 2 times higher chance of having a negative impact compared to individuals without GR of this threshold [odds ratio (OR)=1.99; 95% confidence interval (CI) 1.05-3.78]. When buccal and proximal sites were analyzed separately, the presence of GR was significantly associated with worst quality of life only in anterior and not in posterior teeth. GR in the lower arch had no impact on OHRQoL. Conclusions: OHRQoL of this adult population decreases in the presence of GR, mainly in upper and anterior teeth.

Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2017-02-14T13:32:22Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertacao LUANA OSÓRIO FERNANDES.pdf: 1894600 bytes, checksum: 262777160a929e18e667f73cb8233ae7 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-14T13:32:22Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertacao LUANA OSÓRIO FERNANDES.pdf: 1894600 bytes, checksum: 262777160a929e18e667f73cb8233ae7 (MD5) Previous issue date: 2015-02-11 / Este estudo avaliouo desempenho daTomografia de Coerência Ópticaem1325nmcomoum método não invasivopara medir a profundidadedo sulco gengivalde indivíduossaudáveisem comparação comsondasperiodontaistradicionais emumambiente clínico.Dois observadoresavaliaram aprofundidade dosulco gengivalde 445sitios emdentes anteriores, tanto superior einferior,de 23 indivíduos saudáveis, por meio de três ferramentas: sonda periodontal Carolinado Norte (NC), sonda computadorizadaFloridaProbe (FP)eTomografia por Coerência Óptica(OCT). Foi obtido oíndice de refraçãogengival,necessário para correção dos valores obtidos por OCT,a partir da análisede19 amostras provenientes de cirurgia periodontal. Para cada técnica, foiregistradoo grau de desconforto/dor, através da escala verbal de 4 pontos(VRS-4) e Escala Numérica da Dor (END), e o tempo com auxílio de cronômetro digital.As imagens de OCT mostraramestruturas anatômicasclinicamente relevantes do ponto de vista periodontalnaáreaavaliada.O valor médiocalculadopara o índicede refraçãoda gengivafoi de 1,41±0,06, dado utilizado para realizar a correção dos valores obtidos pelo OCT, através de regra de três simples.As imagens de OCT proporcionaram analisar o correspondente ao sulco gengivalhistológicocom valor médiode 0,86±0,27 milímetros.A sondaNCresultou em maiores valores de profundidade(1,43 ±0,56 milímetros), seguido pelaFP(1,25±0,58 milímetros) que proporcionou umamaior frequência dedesconforto edor.O tempo registrado para cada técnica foi maior para o OCT (19,61±8,98 minutos) decorrente do caráter laboratorial do equipamento, seguido da FP (2,44±1,04 minutos) e NC (1,77±0,40 minutos), ambas adaptadas para aplicação clínica.Diante dos resultados, pode-se concluir que o OCTéummétodo promissorparaa análise in vivodasaúde periodontal, permitindoo diagnósticoprecoce e preciso, de maneiranão invasiva, e que sua influência e interferênciasobre a avaliaçãoclínicaéinexistente, diferente dousodeumasonda periodontal.Porém, ainda se faz necessário a adaptação do equipamento para utilização na clinica odontológica. / This study evaluatedthe performance ofOpticalCoherenceTomographyin 1325nmas a noninvasivemethodto measure the depthof the gingival sulcusof healthysubjects compared totraditionalperiodontalprobesin a clinical setting.Twoobservers evaluatedthe depth of thegingival sulcusof 445sitesin anterior teeth, both top and bottomof 23individuals, using threetools: periodontal probeNorth Carolina (NC), electronic probeFloridaProbe (FP) and Optical CoherenceTomography(OCT). Was obtainedgingivalindex of refractionneeded tocorrect thevalues obtained byOCT,from the analysisof 19samples fromperiodontalsurgery. For eachtechnique,the degree of discomfort/painwas recordedbyverbal4-point scale(VRS-4) and NumericalPainScale (NPS), andtimeusing a digitalstopwatch.The OCTimages showedclinically relevantanatomical structures of theperiodontalviewpoint in thearea evaluated.Theaverage value calculated forthegumrefractive indexwas 1.41± 0.06, as used to perform thecorrection of values obtainedbyOCT,throughsimple rule of three.TheOCTimagesprovidedanalyze thehistologicalsulcuscorresponding toan average valueof 0.86±0.27 mm.The CNproberesulted in greaterdepth values(1.43± 0.56millimeters), followed by FP(1.25±0.58 mm) which gavea higher frequency ofdiscomfort and pain.Thetime recordedfor each techniquewas higher fortheOCT(19.61 ±8.98 minutes) due to thecharacter oflaboratoryequipment, followed by FP(2.44±1.04 minutes) andNC (1.77 ±0, 40 minutes), bothadaptedfor clinical application. With the results, we can concludethatOCTis apromising method forin vivoanalysisof periodontalhealth, enabling early and accurate diagnosis, noninvasively, andthat its influenceandinterferenceon clinical evaluationis lacking,differentthe use ofa periodontalprobe.However,the upgrading of equipmentis still neededfor usein the dentalclinic.

Orientadores: Pedro Luiz Rosalen, Gilson Cesar Nobre Franco / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-17T12:39:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Almeida_LucianaSallesBrancode_D.pdf: 18183834 bytes, checksum: 7e68ca8a08aa330701eecf3a55349a69 (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: A fluoxetina é um droga inibidora seletiva da recaptação de serotonina que apresenta propriedades imunomoduladoras e antiinflamatórias. O objetivo desse estudo foi avaliar os efeitos da fluoxetina sobre a resposta imuno-inflamatória relacionada à doença periodontal (DP). In vitro, avaliou-se a influência da fluoxetina sobre a capacidade das células dendríticas (DCs) em apresentar antígeno aos linfócitos T. As DCs foram obtidas da medula óssea de camundongos C57BL/6 e diferenciadas utilizando-se GM-CSF (20 ng/mL). As DCs foram tratadas com a fluoxetina (concentrações: 0,01, 0,1 ou 1 ?M) para análise da produção de citocinas e quimiocinas, bem como da expressão de MHC-II e moléculas co-estimuladoras (CD80, CD86, PD-L1, ICOS-L) aos linfócitos T, utilizando-se ensaios de ELISA e citometria de fluxo respectivamente. Culturas de DCs e linfócitos T reativos ao Aggregatibacter actinomycetemcomitans (×Aa-T) foram utilizadas para avaliação de proliferação/ativação de linfócitos T. A desipramina, um inibidor seletivo da recaptação de norepinefrina, também foi incluída nos ensaios in vitro para comparação. In vivo, avaliou-se os efeitos da fluoxetina sobre a resposta inflamatória e a destruição tecidual utilizando-se modelo de DP induzida por ligadura. Ratos Wistar machos (SPF) foram submetidos à colocação de ligadura em torno dos primeiros molares inferiores e divididos em 3 grupos experimentais (n=10 animais/grupo): 1) ratos sem ligadura e sem tratamento (grupo controle); 2) ratos com ligadura e tratados com solução salina (grupo ligadura); 3) ratos com ligadura e tratados com a fluoxetina (20 mg/kg/dia, grupo ligadura + fluoxetina). Análises de reabsorção óssea na região de furca (lâminas coradas com H&E) e de colágeno no tecido conjuntivo da mesial dos primeiros molares (coloração de picrosirius) foram realizadas nos ratos submetidos a 15 dias de indução da DP. Tecidos gengivais de ratos submetidos a 3 dias de indução da DP foram submetidos às seguintes análises: expressão de IL-1?, COX-2, MMP-9 e iNOS utilizando-se RT-PCR e atividade da MMP-9 utilizando-se zimografia. Como resultados, a fluoxetina diminuiu a produção de IL-12, IL-1?, TNF-?, RANTES e MIP-1??pelas DCs estimuladas com LPS (P < 0,05, ANOVA, teste t de Student), bem como diminuiu significativamente a expressão de ICOSL. Além disso, reduziu a proliferação de ×Aa-T estimulados com Aa pelas DCs. A serotonina (5- HT) aumentou a proliferação de ×Aa-T, indicando que os efeitos da fluoxetina são independentes da 5-HT. A desipramina apresentou perfil semelhante à fluoxetina nos ensaios in vitro. No estudo in vivo, a fluoxetina reduziu a perda óssea em região de furca quando comparada ao grupo ligadura (P < 0,05 ANOVA, teste t de Student) e manteve a porcentagem de fibras colágenas com níveis similares ao grupo controle (P > 0,05). Ainda, a fluoxetina reduziu a expressão de IL-1??e COX-2 e a atividade da MMP-9 quando comparada ao grupo ligadura (P < 0,05). Em conjunto, os dados demonstram que a fluoxetina diminuiu a capacidade de apresentação de antígeno das DCs, bem como a resposta inflamatória, a reabsorção óssea e a perda de colágeno na DP, indicando que ela pode constituir uma abordagem terapêutica promissora como moduladora da resposta do hospedeiro na DP / Abstract: Fluoxetine is a selective serotonin reuptake inhibitor presenting immunomodulatory and anti-inflammatory properties. The aim of this study was to evaluate the fluoxetine effects on immunoinflammatory response associated with periodontal disease (PD). The in vitro study evaluated the effects of fluoxetine on antigen-presentation capacity of dendritic cells (DCs). Bone marrow DCs obtained from C57BL/6 wild type mice were differentiated using GM-CSF (20 ng/mL). DCs were treated with fluoxetine (concentrations of 0.01, 0.1 or 1 ?M) for subsequent cytokine/chemokine assays (ELISA) and analysis of expression of MHC-class II and co-stimulatory molecules (CD80, CD86, PD-L1, ICOS-L) to T cell activation using flow cytometry. Fluoxetine was also applied to cultures with both DCs and Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa)-reactive T cells (×Aa-T), which were used for analysis of T cells proliferation/activation using thymidine and ELISA assays. Desipramine, a selective norepinephrine reuptake inhibitor, was also tested in vitro for comparison to fluoxetine. In vivo, male Wistar rats received ligature placement around mandibular first molars and were randomly assigned into three experimental groups (n=10/group): 1) Control rats (without ligature); 2) rats with ligature + placebo (saline; oral gavage); 3) rats with ligature + fluoxetine (20 mg/kg/day in saline; oral gavage). Histometric and histological analyses were performed for measurement of loss of bone in furcation region (H&E stain) and collagen fibers (picrosirius red stain) in the connective tissue of rats submitted to 15 days of PD induction. Gingival tissues were collected from animals submitted to 3 days of PD induction for analyses of mRNA expression of IL-1?, COX-2, MMP-9 and iNOS using RT-PCR, measurement of total protein concentration and MMP-9 activity using zymogram. Fluoxetine suppressed IL 12, IL-1?, TNF-?, RANTES and MIP-1??production by LPS-stimulated DCs (P < 0.05, ANOVA, Student's t test), as well as significantly reduced the expression of ICOS-L. Fluoxetine suppressed the proliferation of ×Aa-T stimulated with Aa-antigen presentation by DCs from co-cultures. When applied to ×Aa-T/DCs co-cultures, serotonin (5-HT) increased T cell proliferation, indicating that fluoxetine effects are independent of 5-HT. Desipramine effects were similar to those of fluoxetine. In the in vivo study, fluoxetine reduced alveolar bone loss as compared to ligature group (P < 0.05, ANOVA, Student's t test) and maintained collagen fibers levels similarly to control group (P > 0.05). Fluoxetine reduced IL-1??and COX-2 expression, as well as MMP-9 activity, from gingival tissues when compared to ligature group (P < 0.05). Altogether, data showed that fluoxetine can modulate the antigenpresentation capacity of DCs and reduce inflammatory response and loss of bone and collagen associated with PD. In conclusion, fluoxetine can modulate both immune and inflammatory responses on PD, suggesting that it may constitute a new therapeutic approach for modulation of host response in periodontal therapy / Doutorado / Farmacologia, Anestesiologia e Terapeutica / Doutor em Odontologia

Orientador: Reginaldo Bruno Gonçalves / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-05T08:24:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Napimoga_MarceloHenrique_D.pdf: 980827 bytes, checksum: d6e89bf1b359918d8c502f0a7367d2c1 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Porphyromonas gingivalis (Pg) sintetiza diversas classes de fosfolipídeos. Entretanto, pouco se sabe sobre os efeitos biológicos que estes lipídeos exercem sobre a reabsorção óssea. Células precursoras de osteoclastos de camundongos, incluindo RAW264.7 e células da medula óssea, foram estimuladas com um lipídeo recém caracterizado isolado de Pg (F24), LPS de Pg, RANKL e um isômero estrutural isolado de mamíferos (DMPE), seguida de coloração das células por fosfatase ácida (TRAP) para detecção de osteoclastos. A formação de lacunas de reabsorção em discos de dentina foi realizados para identificar a presença de osteoclastos maduros. Proteínas de células precursoras RAW264.7 com afinidade a F24 foram identificadas como sendo nucleolin através de espectometria de massa, e confirmada sua presença através de ensaio em microscopia confocal. Utilizando Western-blot e RNAi, a sinalização intracelular desencadeada pela F24 durante a osteoclastogênese foi analisada. A F24 mas não o LPS ou DMPE induziu números significantemente maiores de células multinucleadas TRAP+ quando comparado ao RANKL, assim como a formação de lacunas de desmineralização em discos de dentina, o qual não foi inibida pelo repressor do RANKL, a OPG. LPS de Pg, mas não a F24, induziu a produção de TNF-a, IL-1ß e IL-6 pelas células RAW264.7. Microscopia confocal mostrou que a F24 está co-localizada com este receptor na superfície de células RAW264.7. A F24 induziu a fosforilação de maior intensidade do p38 e JNK comparado ao RANKL. Este novo fosfolipídeo isolado de P. gingivalis, distinto do LPS, mostrou-se capaz de induzir osteoclastogênese utilizando nucleolin como a molécula receptora através de uma via independente do RANK / Abstract: Porphyromonas gingivalis (Pg) synthesizes several classes of complex phospholipids in addition to LPS. However, little is known about the biological effects of these phospholipids on bone resorption. Mouse osteoclast precursors cells including, RAW264.7 and bone marrow cells, were stimulated with phospholipids isolated from Pg (F24), Pg LPS, RANKL and a mammalian structural isomer (DMPE). Tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) staining and a dentine-pit formation assay were used for the identification of activated mature osteoclasts. F24¿s counter-ligand expressed on RAW264.7 cells were identified by affinity purification and mass-spectrometry based proteomics, and counter-examined by a confocal microscopy. Using Western-blot, signaling pathways triggered by F24 during osteoclastogenesis were examined with RNAi technology. F24, but not LPS or DMPE, induced significantly higher number of TRAP+ multinuclear cells from osteoclast precursors than RANKL, along with dentine-pit formation, which was not inhibited by RANKL decoy receptor OPG. Pg LPS, but not F24, induced TNF-a, IL-1ß and IL-6 by RAW264.7 cells. Proteomics analyses identified nucleolin as a ligand for F24. Confocal microscopy revealed the co-localization of F24 and its ligand on the surface of RAW264.7 cells. F24 induced stronger phosphorylation of p38 MAP kinase than RANKL. A novel P. gingivalis phospholipid that is distinct from LPS represents a new class of RANK-independent osteoclast differentiation factor / Doutorado / Microbiologia e Imunologia / Doutor em Biologia Buco-Dental

Orientador: Celia Marisa Rizzati-Barbosa / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-05T08:23:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mengatto_CristianeMachado_M.pdf: 911060 bytes, checksum: 2e1e0d90cd78db26bbc3b3ab221b99f9 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: A maioria dos estudos anteriores a respeito dos efeitos do uso de próteses parciais removíveis (PPRs) sobre as condições periodontais dos dentes retentores demonstraram resultados contraditórios, e variabilidade nos métodos de padronização e avaliação. O objetivo desse estudo foi avaliar clinica e radiograficamente as condições periodontais dos dentes retentores diretos de prótese parcial removível (PPR) em pacientes edêntulas na arcada superior, e parcialmente dentadas (Classe I de Kennedy) na arcada inferior. Foram investigados: Índice Dicotômico de Placa (IPL), Índice de Sangramento à Sondagem (ISS), Mobilidade Dental (MD), Nível Clínico de Inserção Relativo (NCIR), Profundidade de Sondagem (PS), Nível da Margem Gengival (NMG), e Altura da Crista Óssea Percentual (ACOP). As avaliações foram feitas antes (t0) e após seis meses (t1) da instalação das próteses, com auxílio de sonda periodontal eletrônica de pressão controlada, guias para sondagem, registro oclusal em silicone para padronização das radiografias, e de um software (Image Tool®) para mensuração das radiografias periapicais. Para comparações que atenderam as pressuposições das análises paramétricas, utilizou-se o teste-t para amostras pareadas, para as que não atenderam, utilizou-se o teste de Wilcoxon para amostras pareadas, a 5% de significância. Entre t0 e t1, houve aumento estatisticamente significativo do IPL, ISS e MD (p<0,05); diminuição da ACOP distal (p<0,05); perda do NCIR e aumento da PS para as faces mesial, distal e lingual (p<0,05); perda do NCIR e diminuição do NMG para a face vestibular (p<0,05). Não houve diferença estatística significativa entre t0 e t1 para PS na face vestibular, ACOP mesial e NMG para a face lingual, mesial e distal (p>0,05). Considerando as condições deste estudo, concluiu-se que houve piora do acúmulo de biofilme e inflamação gengival, e das condições periodontais clínicas e radiográficas dos dentes retentores diretos após seis meses de uso da PPR de extensão distal / Abstract: Most previous studies about the influence of removable partial dentures (RPD) in periodontal conditions of abutment teeth have shown contradictory results, and variability regarding the methods of standardization and evaluation. Consequently, few comparisons can be made with the literature, as there is little systematic approach about the information reported. The aim of this study was to evaluate periodontal conditions of abutment teeth of 19 female patients (45 to 79 years old) rehabilitated with distal extension mandibular RPD and maxillary complete denture. Initially all were given oral hygiene instructions and motivation. Plaque index (PI), bleeding on probing (BOP), tooth mobility (TM), relative attachment level (RAL), probing depth (PD), gingival margin level (GML), and radiographic height of alveolar bone crest (HAC) were assessed immediately prior to (t0) and six months after (t1) prosthesis setting. Evaluations were carried with electronic periodontal probe, acrylic probing stents, and customized silicone occlusal stents to facilitate standardized periapical radiographs of abutment teeth. Radiographic measurements were taken by special software (Image Tool). Data were submitted either to paired Wilcoxon test or paired t-test, at 5% significance. There were increase in PI, BOP and TM; reduction of HAC for distal surface; attachment loss and increase in PD for mesial, distal and lingual surfaces; attachment loss and reduction in GML for buccal surface (p<0.05). There was no significant statistical difference between t0 and t1 in PD for buccal surface, HAC for mesial surface, and GML for lingual, mesial and distal surfaces (p>0.05). Within the limitations of the present study, it was concluded that biofilm accumulation, gingival inflammation, and periodontal and radiographic conditions of abutment teeth deteriorated six months after prosthesis setting / Mestrado / Protese Dental / Mestre em Clínica Odontológica

Orientador: Mario Jose Abdalla Saad / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-07T07:17:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Higa_KarenCristiane_M.pdf: 2248937 bytes, checksum: 985d6be8df78440d12226577db008021 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Existem indicações de que há uma relação bidirecional entre diabetes mellitus e doença periodontal. Tanto o diabetes quanto a doença periodontal podem estimular a liberação crônica de citocinas pró-inflamatórias que têm um efeito deletério nos tecidos periodontals e na sensibilidade à insulina. Entretanto, não se investigou ainda o efeito da doença periodontal na via de sinalização insulínica. Portanto, os objetivos do presente estudo são: avaliar o efeito da doença periodontal na via de transmissão do sinal insulínico em ratos Wistar machos. Utilizou-se a extração de tecidos hepáticos e muscular após estimulação com insulina e imunoprecipitação seguida de "immunoblotting" com anticorpos anti receptor de insulina, anti-ERS-1, anti-IRS-2, antifosfotirosina, anti-p-Akt, anti-p-ERK Vi, anti-p-JNKl/2, anti-lKfi-o: e anti- fosfoserina 307 IRS-1 nos grupos controle e com periodontite. Os resultados mostraram que a concentração do receptor de insulina, do IRS-1, do IR.S-2, da Akt, da JNK1/2, da ERK 112 estimulada e não estimulada pela insulina no fígado e músculo permaneceram inalteradas nos dois grupos. No músculo, os animais com periodontite estimulados com insulina sofreram uma redução de 15±33% na fosforilação em tirosina do receptor de insulina, de 55±3% na fosforilação em tirosina do IRS-1, de 48±1,5% na fosforilação em tirosina do IRS-2, de 34 ±2,8% na fosforilação em serina da Akt e de 20±1% na fosforilação em tirosina da ERK1/2 (p< 0,05). Além disso, nos ratos com periodontite houve um aumento de 40±0,4% na fosforilação em tirosina da JNK 1/2, de 60±5,4% na fosforilação em serina 307 do IRS-1 e a expressão do iKp-a foi reduzida em 70±4,2% (p< 0,05). No fígado, os animais com periodontite estimulados com insulina sofreram uma redução de 62±2% na fosforilação em tirosina do receptor de insulina, de 45±3,8% na fosforilação em tirosina do IRS-1, de 55±0,5% na fosforilação em tirosina do IRS-2, de 31 ±3% na fosforilação em serina da Akt e de 22±4% na fosforilação em tirosina da ERK1/2 (p< 0,05). Além disso, nos ratos com periodontite houve um aumento de 50±0,5% na fosforilação em tirosina da JNK 1/2, de 40±4% na fosforilação em serina 307 do IRS-1 e a expressão do iKp-ct foi reduzida em 55±4,2% (p< 0,05). Além disso, ao realizar o teste de tolerância a glicose (ITT), o Kitt dos ratos com periodontite apresentaram valores menores como de 2,17± 0.38 em relação aos controles 4,88+ 0.56. No teste oral de tolerância a glicose (oGTT) a área sobre a curva da glicemia dos ratos com periodontite foi 18,7% maior em relação aos controles e a área sobre a curva da insulinemia dos ratos com periodontite foi 43,4% maior em relação aos controles. Tais resultados sugerem que alterações na via de sinalização da insulina no fígado e no músculo, podem estar envolvidas na resistência a insulina apresentada nesse modelo animal / Abstract: Traditional thinking/paradigms have maintained that periodontits is na oral disease and that the tissue destructive response remains localized within the periodontium, limiting effects of the disease to oral tissues supporting the teeth. Recent studies have indicated that periodontits may produce any number of alterations in systemic health and in the present study we investigated the pathophysiological relationships between periodontitis and insulin resistance. However, the exact molecular mechanism in unknown. We have examined the levels and the tirosine phosphorylation status of insulin receptor (IR), IRS-1, IRS-2, ERK1/2, JNK1/2, the serine phosphorylation status of Akt , IRS-1 and the expression of IicjJ-a, in liver and muscle of rats with periodontitis by immunoblotting with specific antibodies. The results show that the levels of the insulin receptor, IRS-1, IRS-2, Akt, JNK1/2, ERK 1/2 with and without insulin stimulated remains unchanged in both tissues. In the muscle, animals with periodontits, the insulin stimulated IR tirosine phosphorylation was decrease to 15±33%, the IRS-1 tirosine phosphorylation was decrease to 55±3%, the IRS-2 tirosine phosphorylation was decrease to 48±1,5%, the Akt serine phosphorylation was decrease to 34 ±2,8%, the ERK1/2 tirosine phosphorylation was decrease to 20±1% (p< 0,05). In addition, rats with periodontitis had a increase of 40±0,4% in tyrosine phosphorylation of JNK. 1/2, 60±5,4% in serine phosphorylation of IRS-1 and the expression of Ik(3-o. was reduced in 70±4,2% (p< 0,05). In the liver, animals with periodontite insulin stimulated had a decrease of 62±2% in tirosine phosphorylation of insulin receptor, the IRS-1 tirosine phosphorylation was decrease to 45±3,8%, the IRS-2 tirosine phosphorylation was decrease to 55±0,5%, the Akt serine phosphorylation was decrease to 31 ±3%, the ERK1/2 tirosine phosphorylation was decrease to 22±4% (p< 0,05). In addition, rats with periodontitis had a increase of 50±0,5% in tirosine phosphorylation of INK 1/2, 40±4% in serine phosphorylation of IRS-1 and the expression of Ik(3-o; was reduced in 55±4,2% (p< 0,05). In addition, the thirty minute insulin tolerance test (ITT), the rats with periodontitis had a decrease of 50% in the value of Kitt. In the oral glucose tolerance test (oGTT) the area under the glucose curve was 18,7% higher in rats with periodontitis and the area under the insulin curve was 43,4% higher in rats with periodontitis. These data suggest that periodontitis impair insulin signaling in muscle and liver of rats Wistar / Mestrado / Medicina Experimental / Mestre em Fisiopatologia Médica