A periodontite é uma doença infecciosa caracterizada pela inflamação dos tecidos de suporte dos dentes, perda de inserção e perda óssea. O diagnóstico convencional da periodontite é realizado por meio da avaliação dos parâmetros clínicos e radiográficos. Entretanto, novas modalidades diagnósticas para identificação do início e progressão da periodontite estão sendo estudadas, o que possibilitaria o diagnóstico precoce da progressão da doença, assim como avaliação da resposta ao tratamento periodontal. Este estudo se propôs a monitorar a atividade da doença periodontal e descrever as características clínicas e moleculares de sítios periodontais ativos em progressão em pacientes com periodontite crônica, a partir da avaliação da expressão gênica de sítios periodontais e da avaliação de proteínas inflamatórias salivares e do fluido gengival crevicular, antes e após a terapia periodontal básica. Foram selecionados 27 indivíduos e classificados em dois grupos: grupo Controle (n=9) - pacientes saudáveis; grupo DP (n=18) - pacientes com periodontite crônica. O exame clínico foi realizado por um único examinador experiente em três tempos: (i) quinze dias antes da terapia periodontal, (ii) no dia da terapia periodontal e (iii) 60 dias após a terapia periodontal. A coleta de fluido gengival foi realizada no baseline, 15 e 60 dias após a terapia; a coleta de saliva foi realizada no baseline e 60 dias após a terapia e a coleta de tecido gengival apenas no baseline. Para a coleta de fluido gengival e tecido gengival, os sítios foram classificados em: sítios com inflamação (PS &ge; 5 mm e presença de sangramento à sondagem nos dois exames clínicos iniciais); sítios sem inflamação (PS &le; 3 mm e ausência de sangramento à sondagem nos dois exames clínicos iniciais); e sítios controle (PS &le; 3 mm e ausência de sangramento à sondagem). Os sítios com e sem inflamação pertenciam ao mesmo paciente do grupo DP. A análise de expressão gênica de VEGF, MMP-8, IL-10, RANK-L, OPG e TGF-&beta;1 foi realizada através da Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real (RT-PCR). As análises de marcadores na saliva e fluido gengival foram realizadas pelo imunoensaio Multiplex Cytokine Profiling, exceto para MMP-8 que foi feito através do método ELISA. Os sítios com inflamação apresentaram maior expressão de RANK-L, OPG, IL-10 e TGF-&beta;1 (p < 0,05) e maior quantidade (pg) de VEGF (p=0,009) e IL-10 (p < 0,05) no fluido gengival. Os pacientes do grupo DP apresentaram maior quantidade (pg) de RANK-L (p=0,03) e OPG (p=0,0002) na saliva, antes da terapia. A atividade da doença em sítios periodontais a após terapia básica é um evento de baixa ocorrência, mas apenas uma pequena fração dos sítios permaneceu com perda de inserção progressiva. Os biomarcadores utilizados neste estudo podem ser úteis para detectar inflamação, mas não para identificar sítios ativos em progressão. / Periodontal disease is a chronic microbial infection characterized by inflammation of supportive tissues and alveolar bone loss. Because of the increasing prevalence of the disease, diagnostic modalities for the early identification of periodontitis initiation and progression are being studied. Cytokines associated to host defense has been identified in saliva, gingival crevicular fluids and gingival tissues of periodontal patients. In this study, we aimed to monitor periodontal disease activity and investigate clinical and molecular features of active sites through saliva, gingival crevicular fluid and gingival tissue samples. Fifty-seven subjects were enrolled for this study, 18 with chronic periodontitis (PD group) and 9 subjects that were periodontal and systemically healthy (control group). The patients underwent clinical examination and collection of saliva before and two months after the non-surgical periodontal therapy; collection of gingival crevicular fluid at baseline, 15 days and 2 months after therapy; and collection of gingival tissue samples at baseline. For collection of gingival crevicular fluid and gingival tissue samples, sites were classified as: inflamed (probing depth &ge; 5 mm and bleeding on probe); non-inflamed (probing depth &le; 3 mm without bleeding on probe); and control sites (probing depth &le; 3 mm without bleeding on probe from control group). Inflamed and non-inflamed sites belongs to the same patient PD group. Samples of whole saliva were collected for assessment of the levels of MMP-8, VEGF, IL-10, RANKL, OPG and TGF-&beta;1 using the multiplex cytokine profiling assay. Samples of gingival crevicular fluid were collected for assessment of the levels of MMP-8, VEGF and IL-10 using the multiplex cytokine profiling assay, except for MMP-8 (ELISA assay). Inflamed and non-inflamed lesion in each patient underwent biopsy for the Real Time PCR gene expression analysis for MMP-8, VEGF, IL-10, RANKL, OPG and TGF-&beta;1. At baseline, higher expression of mRNA for RANK-L, OPG, IL-10 e TGF-&beta;1 were found in inflamed sites (p < 0.05) and higher total amount of IL-10 (0,29 pg/sample) compared to non-inflamed (0,21 pg/sample) and control sites (0.21 pg/sample) (p < 0.05). 15 days after therapy, total amount of VEGF were higher in inflamed sites (11.43 pg/sample), compared to non-inflamed sites (7.38 pg/sample) (p=0.009). PD group showed higher total amount (pg) of RANKL (p=0.03) and OPG (p=0.0002) after periodontal therapy. Thus, we concluded that disease activity seems to be an event of relative low probability of occurrence, however, a small percentage of sites keeps showing progressive attachment loss even after basic periodontal therapy. The specific biomarkers used in this study may be helpful to detect inflammation but not to discriminate progressive active sites.

A periodontite é uma doença infecciosa caracterizada pela inflamação dos tecidos de suporte dos dentes, perda de inserção e perda óssea. O diagnóstico convencional da periodontite é realizado por meio da avaliação dos parâmetros clínicos e radiográficos. Entretanto, novas modalidades diagnósticas para identificação do início e progressão da periodontite estão sendo estudadas, o que possibilitaria o diagnóstico precoce da progressão da doença, assim como avaliação da resposta ao tratamento periodontal. Este estudo se propôs a monitorar a atividade da doença periodontal e descrever as características clínicas e moleculares de sítios periodontais ativos em progressão em pacientes com periodontite crônica, a partir da avaliação da expressão gênica de sítios periodontais e da avaliação de proteínas inflamatórias salivares e do fluido gengival crevicular, antes e após a terapia periodontal básica. Foram selecionados 27 indivíduos e classificados em dois grupos: grupo Controle (n=9) - pacientes saudáveis; grupo DP (n=18) - pacientes com periodontite crônica. O exame clínico foi realizado por um único examinador experiente em três tempos: (i) quinze dias antes da terapia periodontal, (ii) no dia da terapia periodontal e (iii) 60 dias após a terapia periodontal. A coleta de fluido gengival foi realizada no baseline, 15 e 60 dias após a terapia; a coleta de saliva foi realizada no baseline e 60 dias após a terapia e a coleta de tecido gengival apenas no baseline. Para a coleta de fluido gengival e tecido gengival, os sítios foram classificados em: sítios com inflamação (PS &ge; 5 mm e presença de sangramento à sondagem nos dois exames clínicos iniciais); sítios sem inflamação (PS &le; 3 mm e ausência de sangramento à sondagem nos dois exames clínicos iniciais); e sítios controle (PS &le; 3 mm e ausência de sangramento à sondagem). Os sítios com e sem inflamação pertenciam ao mesmo paciente do grupo DP. A análise de expressão gênica de VEGF, MMP-8, IL-10, RANK-L, OPG e TGF-&beta;1 foi realizada através da Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real (RT-PCR). As análises de marcadores na saliva e fluido gengival foram realizadas pelo imunoensaio Multiplex Cytokine Profiling, exceto para MMP-8 que foi feito através do método ELISA. Os sítios com inflamação apresentaram maior expressão de RANK-L, OPG, IL-10 e TGF-&beta;1 (p < 0,05) e maior quantidade (pg) de VEGF (p=0,009) e IL-10 (p < 0,05) no fluido gengival. Os pacientes do grupo DP apresentaram maior quantidade (pg) de RANK-L (p=0,03) e OPG (p=0,0002) na saliva, antes da terapia. A atividade da doença em sítios periodontais a após terapia básica é um evento de baixa ocorrência, mas apenas uma pequena fração dos sítios permaneceu com perda de inserção progressiva. Os biomarcadores utilizados neste estudo podem ser úteis para detectar inflamação, mas não para identificar sítios ativos em progressão. / Periodontal disease is a chronic microbial infection characterized by inflammation of supportive tissues and alveolar bone loss. Because of the increasing prevalence of the disease, diagnostic modalities for the early identification of periodontitis initiation and progression are being studied. Cytokines associated to host defense has been identified in saliva, gingival crevicular fluids and gingival tissues of periodontal patients. In this study, we aimed to monitor periodontal disease activity and investigate clinical and molecular features of active sites through saliva, gingival crevicular fluid and gingival tissue samples. Fifty-seven subjects were enrolled for this study, 18 with chronic periodontitis (PD group) and 9 subjects that were periodontal and systemically healthy (control group). The patients underwent clinical examination and collection of saliva before and two months after the non-surgical periodontal therapy; collection of gingival crevicular fluid at baseline, 15 days and 2 months after therapy; and collection of gingival tissue samples at baseline. For collection of gingival crevicular fluid and gingival tissue samples, sites were classified as: inflamed (probing depth &ge; 5 mm and bleeding on probe); non-inflamed (probing depth &le; 3 mm without bleeding on probe); and control sites (probing depth &le; 3 mm without bleeding on probe from control group). Inflamed and non-inflamed sites belongs to the same patient PD group. Samples of whole saliva were collected for assessment of the levels of MMP-8, VEGF, IL-10, RANKL, OPG and TGF-&beta;1 using the multiplex cytokine profiling assay. Samples of gingival crevicular fluid were collected for assessment of the levels of MMP-8, VEGF and IL-10 using the multiplex cytokine profiling assay, except for MMP-8 (ELISA assay). Inflamed and non-inflamed lesion in each patient underwent biopsy for the Real Time PCR gene expression analysis for MMP-8, VEGF, IL-10, RANKL, OPG and TGF-&beta;1. At baseline, higher expression of mRNA for RANK-L, OPG, IL-10 e TGF-&beta;1 were found in inflamed sites (p < 0.05) and higher total amount of IL-10 (0,29 pg/sample) compared to non-inflamed (0,21 pg/sample) and control sites (0.21 pg/sample) (p < 0.05). 15 days after therapy, total amount of VEGF were higher in inflamed sites (11.43 pg/sample), compared to non-inflamed sites (7.38 pg/sample) (p=0.009). PD group showed higher total amount (pg) of RANKL (p=0.03) and OPG (p=0.0002) after periodontal therapy. Thus, we concluded that disease activity seems to be an event of relative low probability of occurrence, however, a small percentage of sites keeps showing progressive attachment loss even after basic periodontal therapy. The specific biomarkers used in this study may be helpful to detect inflammation but not to discriminate progressive active sites.

O presente trabalho avaliou o efeito do tratamento da superfície radicular por meio da instrumentação com curetas, US e US seguido de curetas, utilizando dentes mineralizados e desmineralizados conjugando a utilização de cítrico e tetraciclina. As superfícies dentais foram analisadas em MEV por um único examinador, sendo utilizados 66 dentes unirradiculares com presença de cálculo indicando doença periodontal. Os dentes foram divididos em 6 grupos experimentais com 10 dentes cada e um grupo controle com 6 dentes sem tratamento. O protocolo de tratamento dos grupos seguiu a seguinte orientação: grupo 1- dentes mineralizados instrumentados com curetas; grupo 2- dentes mineralizados instrumentados com US; grupo 3- dentes mineralizados instrumentados com US, seguindo-se instrumentação com curetas; grupo 4- dentes instrumentados com curetas, desmineralizados e novamente instrumentados com curetas; grupo 5 - dentes instrumentados com US, desmineralizados e novamente instrumentados com US; e, grupo 6- dentes instrumentados com US, desmineralizados e novamente instrumentados com curetas. Foram analisadas a quantidade de cálculo residual (ICR), a rugosidade da superfície radicular (IRS) e perda da substância dentária (IPSD). Os resultados demonstraram diferenças estatísticas significativas quanto ao ICR do grupo 2 em relação aos grupos 3, 4 e 6 e do grupo 5 com os grupos 4 e 6; quanto ao IRS houveram diferenças estatísticas significativas entre o grupo 2 e os grupos 1, 4 e 6 e entre o grupo 5 e os grupos 1 e 6; quanto ao IPSD, observou-se que não houve diferenças estatísticas significativas entre os grupos. O uso de curetas isoladamente ou após US parece melhor se ajustar aos critérios de preparo adequado da raiz, em função dos parâmetros avaliados. / The present work aimed at evaluating the effect of root treatment by instrumentation of not only mineralized teeth with curettes, ultra-sonics (US) and US followed by curettes, but also of teeth intermediately demineralized in combined instrumentations, by using citric acid and tetracycline. The dental surfaces were analysed on SEM by a unique examiner, being utilized 66 uniradicular teeth presenting calculus and thus indicating periodontal disease. The teeth were divided into 6 experimental groups with 10 teeth each and a control group consisting of 6 teeth with no treatment. The treatment protocol for the groups was as follows: group 1- mineralized teeth instrumented with curettes; group 2- mineralized teeth instrumented with US; group 3- mineralized teeth instrumented with US, followed by curette; group 4 - teeth instrumented with curettes, demineralized and again instrumented with curettes; group 5 - teeth instrumented with US, demineralized and again instrumented with US; and, group 6- teeth instrumented with US, demineralized and instrumented with curettes. The amount of residual calculus (RCI), roughness of the radicular surface (SRI) and loss of dental substance (LTSI) were assessed. The results demonstrated statistically significant differences regarding the RCI of group 2 in relation to groups 3, 4 and 6, and that of group 5 with groups 4 and 6; as for the SRI, there were statistically significant differences between group 2 and groups 1, 4 and 6, and between group 5 and groups 1 and 6; no statistically significant differences were observed for the LTSI among groups. The use of curettes, alone or following US, seems more suitable for the criteria of adequate root preparation, as a function of the parameters evaluated.

A síndrome de Sjögren primária (SSp) é uma doença crônica autoimune sistêmica que pode levar à hipossalivação e afetar negativamente o ambiente oral. Os objetivos deste estudo foram detectar a influência da SSp nos níveis de biomarcadores inflamatórios na saliva e no fluido gengival nas amostras de pacientes com periodontite crônica, avaliar o efeito do tratamento periodontal não cirúrgico sobre os valores do índice clínico de avaliação da atividade sistêmica de pacientes com SSp e do índice reportado pelo paciente com SSp. Amostras de fluido gengival, saliva e os parâmetros clínicos periodontais que consistiram de medida da profundidade de sondagem (PS), nível clínico de inserção (NCI), sangramento à sondagem (SS) e índice de placa (IP) foram coletadas no início do estudo e 45 dias após a terapia periodontal não-cirúrgica de pacientes sistemicamente saudáveis com periodontite crônica (PC, n = 7) e pacientes com SSp e periodontite crônica (SP, n = 7). Pacientes periodontalmente saudáveis com SSp (SC, n = 7) e sistemicamente saudáveis (C, n = 7) também foram avaliados no início do estudo. Os grupos C, PC e SC foram pareados em gênero, idade e critério socioeconômico com o grupo SP. Os níveis de interleucina-8 (IL-8), IL-10 e IL-1ß foram avaliados por ensaio multiplex. Os níveis de atividade da doença foram medidos usando o Gold Standard da literatura chamado Índice Eular de atividade da síndrome de Sjögren (ESSDAI). Já para avaliação dos sintomas reportados pelo paciente com SSp foi utilizado o Índice Eular reportado pelo paciente com Sjögren (ESSPRI). Os parâmetros clínicos melhoraram após a terapia periodontal (p <0,05). No entanto, o NCI em pacientes com SSp não melhorou significativamente após a terapia (p> 0,05). Houve um aumento nos níveis de IL-1ß, IL-8 e diminuição dos níveis de IL-10 nas amostras de saliva de pacientes do grupo SC em comparação ao grupo C (p <0,05). Já em relação ao fluido gengival, pacientes do grupo SC tiveram maiores níveis de IL-1ß em comparação com o grupo C (p<0,05). Além disso, o tratamento periodontal não cirúrgico resultou num aumento dos níveis de IL-10 no fluido gengival no grupo SP e grupo PC em relação ao valor basal (p <0,05). O fluxo salivar foi significativamente aumentado após o tratamento periodontal apenas em pacientes do grupo SP (p = 0,039). Além disso, o tratamento periodontal não influenciou o índice ESSDAI (p = 0,35) e levou a uma diminuição significativa no índice ESSPRI (p = 0,03). Os presentes dados demonstraram que a SSp influencia os níveis salivares e de fluido gengival de biomarcadores inflamatórios em favor de um perfil próinflamatório, no entanto, este perfil parece não aumentar susceptibilidade dos indivíduos SSp à destruição periodontal. Além disso, os presentes dados demonstraram que o tratamento periodontal não-cirúrgico tem um impacto positivo sobre o fluxo salivar e sobre o índice ESSPRI de pacientes com SSp. Sugere-se assim que o tratamento periodontal pode melhorar a qualidade de vida de indivíduos com SSp. / Primary Sjögren\'s syndrome (pSS) is a chronic systemic autoimmune disease that might lead to hyposalivation and negatively affect the oral environment. The aims of this study were to detect the influence of pSS on the levels of inflammatory biomarkers in salivary and gingival crevicular fluid (GCF) samples of patients with chronic periodontitis and to evaluate the effect of non-surgical periodontal treatment on the disease activity index of patients with pSS, and on the reported index of patients with pSS. GCF and salivary samples and clinical parameters consisting of measuring probing depth (PD), clinical attachment level (CAL), bleeding on probing (BOP) and plaque index (PI) were collected at baseline and 45 days after non-surgical periodontal therapy from systemically healthy patients with chronic periodontitis (PC, n=7) and patients with pSS with chronic periodontitis (SP, n=7). Periodontally healthy patients with pSS (SC, n=7) and systemically healthy (C, n=7) were also evaluated at baseline. The groups C, PC and SC were pared on gender, years and socioeconomic status with the SP group. The levels of interleukin-8 (IL-8), IL-10, and IL-1ß were measured by using multiplex immunoassays. Disease activity levels were measured by using the Gold Standard called Eular Sjögren\'s syndrome disease activity index (ESSDAI). Also to evaluate the symptoms reported by the pacients with pSS we used the Eular Sjögren\'s syndrome patient reported index (ESSPRI). The clinical parameters improved significantly after periodontal therapy (p<0.05). However, CAL in pSS patients was not statistically improved after therapy (p>0.05). There was an increased expression of IL-1ß, IL-8 and decreased levels of IL-10 in the salivary samples of patients in the group SC compared to the group C (p<0.05). The GCF, patients in the group SC had bigger levels of IL-1ß in comparation with the C group (p<0.05). Moreover, nonsurgical periodontal treatment resulted in increased levels of IL-10 on GCF in the groups SP and PC in relation to the baseline (p<0.05). Salivary flow was significantly increased post-treatment only in the SP\'s group patients (p=0.039). In addition, periodontal treatment did not influence ESSDAI index (p=0.35) and led to a statistically significant decrease on the ESSPRI index (p=0.03). The present data demonstrated that pSS influences the salivary and GCF levels of inflammatory biomarkers in favour of a proinflammatory profile, however, this profile might doesn\'t increase the susceptibility of pSS subjects to periodontal breakdown. In addition, the present data demonstrated that non-surgical periodontal treatment has a positive impact on the salivary flow and ESSPRI index of pSS patients. Thus suggesting that periodontal treatment may improve the quality of life of pSS subjects.

As histatinas são uma família de peptídeos presentes nas secreções salivares humanas tendo como membros mais importantes da família as histatinas 1, 3 e 5. Diversos trabalhos demonstraram atividade inibitória das histatinas sobre produtos bacterianos e derivados do hospedeiro envolvidos na doença periodontal, sugerindo uma função importante de defesa das histatinas na cavidade bucal na presença de doença periodontal. Este estudo teve por objetivo comparar as quantidades de histatinas 1, 3 e 5 e o total de histatinas presentes na saliva da parótida entre sujeitos com doença periodontal e sujeitos sem história prévia de doença periodontal. Participaram do estudo 20 sujeitos da pesquisa com doença periodontal e 20 sujeitos sem história prévia de doença periodontal. As coletas da secreção da parótida foram realizadas sob condições de estimulação gustativa com balas ácidas com auxílio de um coletor de saliva Carlson-Crittenden posicionado sobre o ducto de Stenson e conectado a um cilindro de borracha resfriado em gelo. A quantificação de histatinas presentes nas secreções salivares foi realizada pelo procedimento de precipitação por zinco seguido por quantificação utilizando-se cromatografia líquida de alta pressão de fase reversa. Não foram encontradas diferenças significativas nas quantidades de histatinas na saliva da parótida entre sujeitos com doença periodontal e sujeitos sem história prévia de doença periodontal, indicando que a doença periodontal não estimula o sistema não imune ou inato do hospedeiro a uma maior produção e liberação de histatinas na cavidade bucal. / Histatins are a family of peptides present in human salivary secretions. The major members of this family are histatins 1, 3, and 5. Several studies have shown inhibitory properties of histatins on bacterial and host-derived products which suggest an important role of defense for histatins in the presence of periodontal disease. This study aimed at comparing the levels of histatins 1, 3, and 5, and the total histatins in parotid saliva between periodontally healthy and compromised subjects. Twenty subjects with periodontal disease and twenty subjects with no previous history of periodontal disease had saliva samples collected from the parotid gland under gustatory stimulation using sour candies with the aid of a Carlson-Crittenden device positioned over the Stenson’s duct and connected to a polypropylene graduated cylinder chilled on ice. Histatins levels were quantified using the two-step procedure using zinc precipitation of histatins followed by reversed-phase high performance liquid chromatography. No statistical differences were found for levels of histatins 1, 3, and 5, and for the total histatins between periodontally healthy and compromised subjects, showing that the periodontal disease does not trigger a higher production and output of histatins by the innate host defense system.

O objetivo desta pesquisa foi avaliar a reparação de defeitos de furca classe II em cães tratados com o retalho deslocado coronariamente, sozinho ou em associação com a regeneração tecidual guiada e o enxerto de tecido reparativo de alvéolos utilizando uma análise imuno-histoquímica. Os defeitos foram criados nos 2os, 3os e 4os pré-molares direitos e esquerdos mandibulares em quatro cães sem raça definida. No lado teste de cada cão, após a instrumentação radicular, os defeitos foram enxertados com o tecido reparativo, removidos de locais de extração dental com cinco dias de reparação. As áreas cirúrgicas foram recobertas com membranas absorvíveis e o retalho deslocado coronariamente suturado. No lado controle, após a instrumentação radicular, o retalho também foi deslocado coronariamente e suturado. Após 45 dias os cães foram sacrificados. As análises imuno-histoquímicas para osteonectina, osteopontina e sialoproteína óssea foram feitas no plano vestíbulo-lingual das furcas dos 3os pré-molares. As marcações imuno-histoquímicas foram similares entre os grupos demonstrando que eles provavelmente estavam em um estágio reparativo semelhante. / The aim of this research was to evaluate the repair of class II furcation defects in dogs treated with the coronally positioned flap alone or in association with guided tissue regeneration and post extraction tissue graft using an immunohistochemical analysis. The defects were created on the lower jaw right and left 2nd, 3rd and 4th premolars on four mongrel dogs. On the test side of each dog, after root instrumentation, the defects were grafted with a alveolar socket reparative tissue removed from five days healing teeth extraction sites. The surgical areas were covered with absorbable membranes and a coronally positionated flap was sutured. At the control side, after root instrumentation the coronally positionated flap was sutured. After 45 days, the dogs were sacrificed. The immunohistochemical analyses for osteonectin, osteopontin and bone sialoprotein were done on the bucal-lingual plane extent of the 3rd premolars furcations. The immunohistochemical expressions were similar among the two groups showing that they probably were in a similar healing stage.

A obturação do canal radicular é uma etapa fundamental para o sucesso do tratamento endodôntico. É desejável que os materiais empregados nesta fase não interferiram negativamente com o reparo tecidual, mas preferencialmente estimulem a regeneração dos tecidos periapicais. Recentemente, cones de guta-percha combinados com material biocerâmico foram desenvolvidos com esta finalidade. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi investigar o potencial citotóxico e biomodulador de cones de guta-percha convencionais, de cones de guta-percha contendo biocerâmica e de cones de polímero sobre células de ligamento periodontal in vitro. Cultura de fibroblastos de ligamento periodontal foi estabelecida a partir de terceiro molar humano. As células foram estimuladas com extratos de cones de guta-percha convencional, de cones de guta-percha contendo biocerâmica e de cones de polímero em diluição seriada para teste de viabilidade celular por meio do método MTT (Brometo de Difeniltetrazólio 3-(4,5-Dimetiltiazol-2-yl) após 72 h. Em seguida, a diluição de 1/5 foi empregada para estimulação das células por 72 h para detecção da expressão gênica de colágeno tipo I e proteína cementária 1 (CEMP-1) por RT-qPCR. Os dados foram estatisticamente analizados por meio de ANOVA sendo considerados significativos valores de p < 0,05. Os resultados observados de forma que, em extrato puro em extrato puro 1:1, houve comprometimento da viabilidade celular tanto para o extrato de cone de guta-percha quanto para o extrato do cone Cpoint podendo ser considerados citotóxicos. Nas outras diluições não houve diferença significativa neste parâmetro. Em relação à expressão gênica de colágeno, não foram observadas diferenças significativas quando da presença dos extratos. Para CEMP-1, significativa indução da expressão gênica foi observada para o cone de guta-percha. Conclui-se, através da análise dos resultados, que o cone de guta-percha e o cone de polímero são os mais citotóxicos em extrato puro, porém a guta-percha foi o único material que induziu uma expressão significativa de CEMP-1 que auxilia no reparo tecidual. O Col1 não foi induzido em nenhuma das amostras, porém também não foi inibido que indica que nenhum dos 3 tipos de cone interfere no reparo tecidual. / Root canal obturation is a fundamental step for successful endodontic treatment. It is desirable that the materials employed at this stage did not adversely interfere with tissue repair but rather stimulate the regeneration of the periapical tissues. Recently, gutta-percha points combined with bioceramic materials were developed for this purpose. Thus, the objective of this study was to investigate the cytotoxic and biomodulatory potential of conventional gutta-percha points, gutta-percha points containing bioceramics and polymer points on periodontal ligament cells in vitro. Culture of periodontal ligament fibroblasts was established from one human third molar. The cells were stimulated with extracts of cones of conventional gutta-percha points, gutta-percha containing bioceramics and polymer points in serial dilution for cell viability test using the MTT assay [Diphenyltetrazolium Bromide 3- (4,5)]. Next, the 1/5 dilution was used to stimulate the cells for 72 h to detect the gene expression of type I collagen and cement protein 1 (CEMP-1) by RT-qPCR. Data were statistically analyzed by means of ANOVA being considered significant values of p <0.05. The results observed was that in a pure 1: 1 extract, there was impairment of cell viability for both the guta-percha cone extract and the Cpoint cone extract and could be considered cytotoxic. At the other dilutions, no significant difference on this parameter was observed. Regarding the gene expression of collagen, no significant differences were observed at the presence of extracts. For CEMP-1, significant induction of gene expression was observed for gutta-percha points. In conclusion, the analysis of the results showed that the gutta-percha and polymer points are the most cytotoxic at pure extract, however gutta-percha was the only material that induced a significant expression of CEMP-1 which assists the tissue repair. Col1 was not induced in any of the samples but was also not inhibited indicating that none of the 3 cone types interfere in tissue repair.

A doença periodontal (DP) compreende um grupo de lesões que afeta os tecidos periodontais de proteção e de suporte e pode acarretar na perda dentária. Interações entre patógenos microbianos e vários sistemas desempenham um papel crítico no desenvolvimento e progressão da DP via liberação de vários mediadores inflamatórios e imunológicos. Experimentos recentes de nosso grupo de pesquisa mostraram que existe a expressão de RNAm para todos os componentes do Sistema Renina-Angiotensina (SRA), presença da renina e atividade da Enzima Conversora de Angiotensina (ECA) em tecido gengival de ratos e que o losartan inibe a perda óssea no modelo de DP induzida experimentalmente em ratos. Portanto, o presente trabalho propõe-se a investigar os mecanismos pelos quais o losartan (antagonista do receptor AT1) possui efeitos anti-inflamatórios no modelo da DP induzida experimentalmente em ratos. Para tanto, foi utilizado o modelo de indução da DP por colocação de ligadura ao redor do primeiro molar inferior de ratos divididos em treze grupos com 15 animais cada, que foram tratados com losartan (50 mg/kg/dia) via gavage. As técnicas utilizadas neste trabalho foram: indução da DP em ratos, a análise tomográfica da perda óssea alveolar (MicroCT), análise 2D com uso de software específico (ImageJ), RT-PCR e análise histológica do tecido periodontal. Após a coleta, os dados foram devidamente analisados por meio de gráficos e tabelas, sendo utilizado ANOVA, seguida de um pós-teste para determinar a significância da diferença entre os grupos dentro de um mesmo ensaio. Foi adotado nível de significância de 5%. O losartan foi capaz de atuar no aumento da expressão de enzimas, citocinas, quimiocinas e receptores, tais como: AT2, MAS, AT1a, AT1b, AGT, OPG, ALP, PHEX, RUNX2, BGLAP, IL-18, IL-21 e MMPs. Além disso, promoveu a diminuição de citocinas pró-inflamatórias como IL-6, IL-10 e INF, indicando assim seu papel anti-inflamatório, dados observados na análise molecular do tecido gengival e ósseo. Macroscopicamente foi confirmado que o tratamento com losartan foi capaz de atenuar a perda óssea. Os achados histológicos corroboram com as análises de MicroCT e RT-PCR. Concluiu-se então que o losartan possui efeito protetor na preservação do periodonto em animais submetidos à DP devido à diminuição de moléculas envolvidas na inflamação. / Periodontal disease (PD) comprises a group of lesions that affect the periodontal tissues of protection and support and can lead to tooth loss. Interactions between microbial pathogens and various systems play a critical role in the development and progression of PD through release of various inflammatory and immunological mediators. Recent experiments from our research group have shown that mRNA expression exists for all components of the Renin-Angiotensin System (RAS), presence of renin and Angiotensin Converting Enzyme (ACE) activity in rat gingival tissue and that losartan inhibits the bone loss in the experimentally induced PD model in rats. Therefore, the present work aims to investigate the mechanisms by which losartan (AT1 receptor antagonist) has anti-inflammatory effects in the PD model induced experimentally in rats. For this, the PD induction model was used by placing ligation around the lower first molar of rats divided into thirteen groups with 15 animals each, which were treated with losartan (50mg / kg / day) via gavage. The techniques used in this work were: induction of PD in rats, tomographic analysis of alveolar bone loss (MicroCT), 2D analysis using specific software (ImageJ), RT-PCR and histological analysis of periodontal tissue. After the data collection, the data were analyzed by means of graphs and tables, using ANOVA, followed by a post-test to determine the significance of the difference between groups within the same trial. A significance level of 5% was adopted. Losartan was able to increase the expression of enzymes, cytokines, chemokines and receptors, such as AT2, MAS, AT1a, AT1b, AGT, OPG, ALP, PHEX, RUNX2, BGLAP, IL-18, IL-21 and MMPs. In addition, it promoted the reduction of proinflammatory cytokines such as IL-6, IL-10 and INF, thus indicating its anti-inflammatory role, data observed in the molecular analysis of gingival and bone tissue. Macroscopically it was confirmed that treatment with losartan was able to attenuate bone loss. Histological findings corroborate with MicroCT and RT-PCR analyzes. It was concluded that losartan has a protective effect on the preservation of the periodontium in animals submitted to PD due to the decrease of the molecules involved in the inflammation.

Copies of author's previously published articles inserted. Bibliography: leaves 175-194. Eikenella corrodens, a Gram-negative rod, is a normal inhabitant of the human oral cavity. It is one of the most commonly detected cultivable bacteria from sub- and supra-gingival plaque and is often isolated in elevated proportions from sites exhibiting destructive periodontal disease compared with healthy sites. The primary aim of this study was to investigate the metabolism of E. corrodons, with particular reference to energy generation, and to determine the effect of physical environmental parameters on its growth.

Copies of author's previously published articles inserted. / Bibliography: leaves 175-194. / xiii, 195 leaves : ill. ; 30 cm. / Title page, contents and abstract only. The complete thesis in print form is available from the University Library. / Eikenella corrodens, a Gram-negative rod, is a normal inhabitant of the human oral cavity. It is one of the most commonly detected cultivable bacteria from sub- and supra-gingival plaque and is often isolated in elevated proportions from sites exhibiting destructive periodontal disease compared with healthy sites. The primary aim of this study was to investigate the metabolism of E. corrodons, with particular reference to energy generation, and to determine the effect of physical environmental parameters on its growth. / Thesis (Ph.D.)--University of Adelaide, Dept. of Dentistry, 2000