O presente estudo investigou os efeitos da desnutrição protéica e estimulação ambiental sobre parâmetros bioquímicos em ratos. Foram quantificadas as concentrações de poliaminas no córtex frontal, estriado e hipocampo, corticosterona plasmática e atividade da sintase do óxido nítrico no hipocampo. O comportamento exploratório foi analisado no labirinto em cruz elevado (LCE). Os animais receberam dietas contendo 16% (controles - C) ou 6% (desnutridos - D) de proteína e foram divididos em grupos estimulados ou não estimulados. A desnutrição elevou o nível de corticosterona circulante, diminuiu o conteúdo protéico plasmático e diminuiu a ansiedade. Os ratos não estimulados testados no LCE apresentaram nível elevado de corticosterona circulante, diminuída atividade da NOS no hipocampo, menor conteúdo protéico e de poliaminas no córtex frontal, estriado e hipocampo. A estimulação diminuiu o número de entradas nos braços abertos no LCE nos animais do grupo D e aumentou o número de entradas nos braços fechados nos animais do grupo C. A estimulação aumentou a frequência e tempo gasto em comportamentos de avaliação de risco. Estes resultados sugerem que ambos, a desnutrição e o teste no LCE são situações estressantes, como indicado pela elevação dos níveis de corticosterona. Estes resultados são consistentes com menor ansiedade e/ou maior impulsividade nos animais do grupo D. / The present study investigated the effects of protein malnutrition and environmental stimulation on the biochemical and behavioral parameters in rats. It was measured the polyamines concentration in frontal cortex, striatum and hippocampus, as well as the plasma corticosterone levels. The exploratory behavior was analyzed using the elevated plus-maze (EPM) test. Rats received either 16% (well-nourished - W) or 6% (malnourished - M) protein diets and were divided into stimulated or non-stimulated groups. Malnutrition increased corticosterone levels, decreased plasma protein content and anxiety. Non-stimulated rats tested in the EPM increased corticosterone levels, decreased hippocampal NOS activity, decreased frontal cortex, striatum and hippocampus protein and polyamines contents. Stimulation decreased open arm entries in the EPM in M animals and increased the closed arm entries in the W ones. Stimulation increased frequency and time spent in risk-assessment behaviors. These results suggest that both malnutrition and EPM testing are stressing situations as indicated by increased corticosterone levels. These results are consistent with lower anxiety and/or higher impulsiveness in M animals.

Orientador: João Domingos Rodrigues / Resumo: Objetivando estudar os efeitos do estresse induzido por PEG 6000 no feijoeiro (Phaseolus vulgaris L.), através da avaliação de relações hídricas, trocas gasosas e metabolismo de compostos nitrogenados (prolina e poliaminas), foi conduzido um experimento em casa de vegetação, no Departamento de Botânica da UNESP, Campus de Rubião Júnior, em Botucatu, SP. Foram avaliados os cultivares Manteigão Fosco e Pérola e linhagem BAT 477 em dois regimes hídricos: sem estresse e com estresse, em um arranjo fatorial, em blocos casualizados, com quatro blocos. O estresse foi imposto no início da fase reprodutiva (32 DAT), pelo aumento da concentração relativa de PEG 6000 na solução nutritiva devido à perda de água por evapotranspiração. CRA, Ψhf, A, gs, E, Ci e teores de prolina e poliaminas nas folhas, foram determinados durante o período de estresse e reidratação. Medidas de trocas gasosas foram feitas com um IRGA 6200 da LI-COR, as 9 e 15 horas. Parâmetros biométricos foram determinados após a imposição do estresse em ambas as plantas sem e com imposição de estresse. O CRA foi mais eficiente indicador do status hídrico da planta do que o Ψhf, nas condições de estudo. O estresse reduziu drasticamente A, gs e E, levando a aumentos na EUA nos níveis iniciais de estresse. Ci foi um eficiente indicador de inibição mesofílica na fotossíntese em níveis mais elevados de estresse. O cultivar Manteigão Fosco foi mais sensível ao estresse induzido por PEG 6000, sendo o primeiro a apresentar sintomas visuais nas folhas, caracterizados por descolorações internervais que posteriormente evoluíram a necroses. Reduções em CRA, A, gs e E ocorreram de forma mais intensa eprecoce neste cultivar, que apresentou maior acúmulo relativo de prolina nas folhas, em reposta à deficiência hídrica. Os teores de poliaminas não... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico completo). / Abstract: One assay was carried out, in greenhouse conditions, to study the effects of induced stress by PEG 6000 in bean (Phaseolus vulgaris L.), by the evaluation of water relation, gas changes and metabolism of nitrogen compounds (proline and polyamines). The assay was conducted in the Botany Department of the College of Agronomic Science - UNESP - Botucatu, state of São Paulo. The cultivars evaluated were Manteigão Fosco and Perola and the inbred BAT477 under two water regimes: with and without stress in a factorial design, in randomized blocks with four replications. The stress was imposed at the beginning of the reproductive stage (32 DAT) increasing of the relative concentration of PEG 6000 in the nutritive solution proportional to the water loose by evapotranspiration. RWC, Ψhf, A, gs, E, Ci and amounts of proline and polyamines in the leaves were measured during the stress period and re-hydration. Measurements of gas exchange were done with an IRGA LI-COR (Li-6200), at 9 and 15 h. Biometric parameters were determined after imposition of the stress in both plants with and without stress. The RWC was the most efficient indicator of the plant water status than the Ψhf, in the study. The stress reduced drastically A, gs and E, increasing the WUE in the initial levels of stress. Ci was an efficient indicator of mesofilic inhibition of photosynthesis under severe stress. The cultivar Manteigão Fosco was the most sensitive to stress induced by PEG 6000 and it was the first to show visible symptoms on leaves characterized by internerval discoloration that became necrotic. The reduction in RWC, A, gs and E began early and was higher in this cultivar, which a greater accumulation of proline in the leaves, of stressed plants. The amounts of polyamines didn't show direct correlation with the stress imposition occurring a slight accumulation... (Complete abstract, click electronic address below). / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:27Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2001-03Bitstream added on 2014-06-13T20:40:24Z : No. of bitstreams: 1 guimaraes_vf_dr_botfca.pdf: 603069 bytes, checksum: ed0cbe93bc12453379094b244eaa59b0 (MD5) / Objetivando estudar os efeitos do estresse induzido por PEG 6000 no feijoeiro (Phaseolus vulgaris L.), através da avaliação de relações hídricas, trocas gasosas e metabolismo de compostos nitrogenados (prolina e poliaminas), foi conduzido um experimento em casa de vegetação, no Departamento de Botânica da UNESP, Campus de Rubião Júnior, em Botucatu, SP. Foram avaliados os cultivares Manteigão Fosco e Pérola e linhagem BAT 477 em dois regimes hídricos: sem estresse e com estresse, em um arranjo fatorial, em blocos casualizados, com quatro blocos. O estresse foi imposto no início da fase reprodutiva (32 DAT), pelo aumento da concentração relativa de PEG 6000 na solução nutritiva devido à perda de água por evapotranspiração. CRA, Ψhf, A, gs, E, Ci e teores de prolina e poliaminas nas folhas, foram determinados durante o período de estresse e reidratação. Medidas de trocas gasosas foram feitas com um IRGA 6200 da LI-COR, as 9 e 15 horas. Parâmetros biométricos foram determinados após a imposição do estresse em ambas as plantas sem e com imposição de estresse. O CRA foi mais eficiente indicador do status hídrico da planta do que o Ψhf, nas condições de estudo. O estresse reduziu drasticamente A, gs e E, levando a aumentos na EUA nos níveis iniciais de estresse. Ci foi um eficiente indicador de inibição mesofílica na fotossíntese em níveis mais elevados de estresse. O cultivar Manteigão Fosco foi mais sensível ao estresse induzido por PEG 6000, sendo o primeiro a apresentar sintomas visuais nas folhas, caracterizados por descolorações internervais que posteriormente evoluíram a necroses. Reduções em CRA, A, gs e E ocorreram de forma mais intensa eprecoce neste cultivar, que apresentou maior acúmulo relativo de prolina nas folhas, em reposta à deficiência hídrica. Os teores de poliaminas não... . / One assay was carried out, in greenhouse conditions, to study the effects of induced stress by PEG 6000 in bean (Phaseolus vulgaris L.), by the evaluation of water relation, gas changes and metabolism of nitrogen compounds (proline and polyamines). The assay was conducted in the Botany Department of the College of Agronomic Science – UNESP – Botucatu, state of São Paulo. The cultivars evaluated were Manteigão Fosco and Perola and the inbred BAT477 under two water regimes: with and without stress in a factorial design, in randomized blocks with four replications. The stress was imposed at the beginning of the reproductive stage (32 DAT) increasing of the relative concentration of PEG 6000 in the nutritive solution proportional to the water loose by evapotranspiration. RWC, Ψhf, A, gs, E, Ci and amounts of proline and polyamines in the leaves were measured during the stress period and re-hydration. Measurements of gas exchange were done with an IRGA LI-COR (Li-6200), at 9 and 15 h. Biometric parameters were determined after imposition of the stress in both plants with and without stress. The RWC was the most efficient indicator of the plant water status than the Ψhf, in the study. The stress reduced drastically A, gs and E, increasing the WUE in the initial levels of stress. Ci was an efficient indicator of mesofilic inhibition of photosynthesis under severe stress. The cultivar Manteigão Fosco was the most sensitive to stress induced by PEG 6000 and it was the first to show visible symptoms on leaves characterized by internerval discoloration that became necrotic. The reduction in RWC, A, gs and E began early and was higher in this cultivar, which a greater accumulation of proline in the leaves, of stressed plants. The amounts of polyamines didn’t show direct correlation with the stress imposition occurring a slight accumulation... (Complete abstract, click electronic address below).

Orientador: Vera Fernanda Martins Hossepian de Lima / Coorientador: Lindsay Unno Gimenes / Coorientador: Fuller Warren Bazer / Banca: Maria Emília Franco Oliveira / Banca: Marcelo Emílio Beletti / Banca: Benner Geraldo Alves / Banca: Amélia Katiane de Almeida / Resumo: A arginina é um aminoácido nutricionalmente essencial, importante na gestação de mamíferos, pois aumenta a sobrevivência, crescimento e desenvolvimento de embriões, fetos e neonatos. A arginina pode ser utilizada na síntese de poliaminas por uma via metabólica clássica, porém estudos recentes revelaram uma importante via alternativa. Todavia, ambas foram pouco investigadas. Nesse contexto, estudos são necessários a fim de identificar a ocorrência das vias metabólicas da arginina nos tecidos reprodutivos durante a gestação de ovelhas. Assim o presente estudo teve como objetivos: a) avaliar a expressão de genes das vias metabólicas da arginina em conceptos durante o período de peri-implantação em ovelhas; b) identificar a localização das proteínas das vias metabólicas da arginina em conceptos e no endométrio durante o período de peri-implantação em ovelhas; e c) identificar a localização das proteínas das vias metabólicas da arginina em placentomas em ovelhas. Para tanto, ovelhas da raça Rambouillet (n=72) foram sincronizadas e após detecção do estro por machos vasectomizados, foram cobertas por machos da raça Suffolk com fertilidade comprovada. No experimento 1, as ovelhas (n=20) foram histerectomizadas aos 13, 14, 15 ou 16 dias de gestação, e os fragmentos de conceptos coletados foram congelados em nitrogênio líquido a fim de se estudar a expressão gênica. No experimento 2, ovelhas (n=28) também foram histerectomizadas aos 13, 14, 15 ou 16 dias de gestação e, secções de conce... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Arginine is a nutritionally essential amino acid, important for pregnancy in mammalian, to increase the survival, growth and development of embryos, fetuses and neonates. Arginine can be used in the synthesis of polyamines by a classical metabolic pathway, though recent studies revealed an important alternative pathway, however, both have been poorly investigated. In this context, studies are necessary in order to identify an occurrence of arginine metabolic pathways in the reproductive tissues during a pregnancy in ewes. The present study had as objectives: a) evaluate the gene expression in the metabolic pathways of arginine, in concepts during the pre-implantation period of pregnancy in ewes; b) to identify the localization of proteins, from the metabolic pathways of arginine, in concepts and uterine endometrium during the pre-implantation period of pregnancy in ewes; and c) to identify the localization of proteins, from the metabolic pathway of arginine, in placentomes during the pre-implantation period of pregnancy in ewes. Rambouillet ewes (n=72) were synchronized and after estrus detection by vasectomized males, ewes were mated by Suffolk males with proven fertility. In experiment 1, ewes (n=20) were hysterectomized at days 13, 14, 15 or 16 of pregnancy, and the sections of concepts collected were frozen in liquid nitrogen in order to study gene expression. In the experiment 2, ewes (n=28) were also hysterectomized at days 13, 14, 15 or 16 of pregnancy, sections of conceptuses and uterine endometrium were fixed in order to identify the protein localization by immunohistochemical analysis. In experiment 3, ewes (n=24) were hysterectomized on days 40, 60, 80, 100, 120 or 140 days of pregnancy, placentomes were collected and fixed for immunohistochemical analysis. Data analysis of ge... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-12-24Bitstream added on 2014-06-13T19:54:08Z : No. of bitstreams: 1 destro_mvp_me_jabo.pdf: 321192 bytes, checksum: 2127c8e5aa73fa30f3aecc082ca22f9f (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação para o Desenvolvimento da UNESP (FUNDUNESP) / No presente trabalho foi verificado o efeito do estresse salino associado a aplicacao exogena de espermidina (Spd) nos teores de glicina betaina da parte aerea de genotipos de guandu, IAC Fava Larga e Caqui, visando: (a) a utilizacao da glicina betaina como marcador bioquimico-fisiologico da salinidade; (b) verificar se a aplicacao exogena de Spd atenua os efeitos do estresse salino e (c) avaliar o crescimento inicial do guandu sob estresse salino. O experimento foi conduzido em sala de crescimento, com irradiancia de 190 Êmol m-2 s-1, fotoperiodo de 12 horas, temperatura de 25C e U.R. de 40%. A semeadura foi realizada em areia esteril, com adequado suprimento hidrico. Apos 10 dias, as plantulas foram transferidas para solucao nutritiva durante 20 dias para aclimatacao. A seguir, as plantulas foram alocadas nos tratamentos, sendo utilizado o delineamento experimental em blocos casualizados em esquema fatorial 2x2x4 com os fatores genotipos (IAC Fava Larga e Caqui), Spd (0,0 e 0,5 mM) e estresse salino (0, 20, 60 e 80 mM de NaCl). Apos 20 dias sob estresse, foram determinados o crescimento inicial e os teores de glicina betaina da parte aerea de ambos genotipos. Os resultados evidenciaram que, a glicina betaina pode ser indicada como um marcador bioquimico-fisiologico do estresse salino somente para eIAC Fava Larga. O estresse salino provocou reducao do crescimento inicial da parte aerea dos genotipos de guandu, IAC Fava Larga e Caqui. A aplicacao exogena de Spd nao atenuou os efeitos do estresse salino no crescimento, mas induziu o acumulo de glicina betaina no genotipo IAC Fava Larga sob menores niveis de NaCl. / In this work was undertaken to evaluate the effect of salt stress associated to exogenous spermidine (Spd) application on the level of glycine betaine in shoots of pigeonpea, genotypes IAC Fava Larga and Caqui (a) propose the use of this compatible osmolyte as a biochemical-physiological indicator of salinity; (b) to verify if the application exogenous of spermidine decreased the effects of salt stress and (c) to evaluate the initial growth of pigeonpea under salt stress. The experiment was carried in a grow room with irradiance of 190 Êmol m-2 s-1, photoperiod of 12 hours, with the temperature set to 25oC and the RH to 40%. Seeds were showed in sterile sand with adequate water supply. After ten days, seedlings were transferred to nutritive solution for twenty days for acclimation. The experiment was then arranged in randomized block design in a 2x2x4 factorial, corresponding to the genotypes (IAC Fava Larga and Caqui), Spd rates (control and 0.5 mM) and salt stress (0, 20, 60 and 80 mM NaCl). After 20 days under stress, was verified the effect of these treatments in the initial growth and determined the content of glycine betaine. The results showed that glycine betaine can be used as a biochemical-physiological marker of salt stress in IAC Fava Larga. The salt stress reduced initial growth of the both genotypes, IAC Fava Larga and Caqui. Exogenous Spd application did not attenuate the effects of salt stress on initial growth, but induced glycine betaine accumulation only in IAC Fava Larga under low NaCl levels.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:41Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-18Bitstream added on 2014-06-13T18:54:57Z : No. of bitstreams: 1 guimaraes_lrp_me_botfca.pdf: 1201666 bytes, checksum: 9ed042975a5d8cf990bd0a428bea82a1 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A cultura do tomateiro apresenta grande importância econômica para o Brasil e está sujeita a várias doenças que, dependendo do nível de resistência genética do cultivar usado, podem limitar sua produção. Os Tospovirus são considerados agentes causais de uma das doenças mais importantes da cultura do tomateiro, o vira-cabeça, acarretando enormes prejuízos econômicos. Diante disso, o objetivo do trabalho foi avaliar o efeito de indutores de resistência na incidência de vira cabeça e na produção do tomateiro. Os experimentos foram executados na Fazenda Experimental da UNESP, Campus Botucatu, em área de histórico de ocorrência da doença. Foram utilizadas 3200 plantas de tomateiro cv. Saladinha Plus. As bandejas foram divididas em 2 grupos, onde a metade recebeu um pré tratamento pela aplicação de Piraclostrobina+Metiram (3 g/L H2O) + Boscalida (0,3 g/L H2O) na bandeja e a outra metade sem nenhum produto aplicado. Após o transplantio, foram aplicados os tratamentos, através da pulverização de Piraclostrobina+Metiram 200g p. c./100L, Piraclostrobina+Metiram 400g p. c./100L, Bacillus subtilis 400mL p. c./100L e o procedimento convencional no qual foi aplicado o produto a base de Metamidófos. As pulverizações foram realizadas em todos os tratamentos aos 20, 35, 50 e 65 dias após o transplantio (DAT). Durante a condução do experimento foi realizada a avaliação da incidência da doença aos 30, 45 e 60 DAT, contando o número de plantas doentes. Com os resultados obtidos nas avaliações foi calculada a área abaixo da curva de progresso da doença (AACPD). Para as análises bioquímicas (atividade de peroxidase, polifenoloxidase, teor de proteínas totais solúveis e poliaminas), o material vegetal foi coletado aos 30, 40, 45, 55, 60, 70 e 75 DAT. A colheita dos frutos foi realizada aos 80 DAT, sendo selecionadas... / The tomato crop has great economic importance in Brazil and is subject of several diseases, and depending on the level of genetic resistance of the cultivar used, it can limit its production. The Tospovirus are considered causal agents of one of the most important diseases of tomato crops, resulting in enormous economic damage. The objective of this work was to evaluate the effect of resistance induction in the tomato crop, as well as the incidence of tospovirus. The experiment was carried out in the Experimental Farm of UNESP Botucatu, in an area of historical occurrence of the disease. Were used 3200 tomato plants cv. Saladinha Plus. Trays were divided into 2 groups, where half received a pretreatment Pyraclostrobin+ metiram (3 g / L H2O) + Boscalida (0, 3 g / L H2O) in the tray and the other half didn’t receive any product. After transplanting, treatments were applied by spraying Pyraclostrobin + metiram 200g p. c./100L, Pyraclostrobin + metiram 400g p. c./100L, Bacillus subtilis 400mL p. c./100L by conventional procedure in which the product methamidophos was applied. The spraying was carried in all treatments at 20, 35, 50 and 65 days after transplanting (DAT). During the experiment, an evaluation of the disease incidence was performed at 30, 45 and 60 DAT, counting the number of diseased plants. With the results obtained in the evaluations, was calculated the area under the disease progress curve (AUDPC). To biochemical analysis (peroxidase, polyphenoloxidase, total soluble protein and polyamines), the plant material was collected at 30, 40, 45, 55, 60, 70 and 75 DAT. The fruit harvest was performed at 80 DAT, 20 plants were selected of each treatment, and the analyses of total production were carried out, including average fruit weight, fruit number per treatment, percentage of the number of green... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Durvalina Maria Mathias dos Santos / Banca: João Suzuki / Banca: Sonia Cristina Juliano Gualtieri de Andrade Perez / Resumo: No presente trabalho foi verificado o efeito do estresse salino associado a aplicacao exogena de espermidina (Spd) nos teores de glicina betaina da parte aerea de genotipos de guandu, IAC Fava Larga e Caqui, visando: (a) a utilizacao da glicina betaina como marcador bioquimico-fisiologico da salinidade; (b) verificar se a aplicacao exogena de Spd atenua os efeitos do estresse salino e (c) avaliar o crescimento inicial do guandu sob estresse salino. O experimento foi conduzido em sala de crescimento, com irradiancia de 190 Êmol m-2 s-1, fotoperiodo de 12 horas, temperatura de 25C e U.R. de 40%. A semeadura foi realizada em areia esteril, com adequado suprimento hidrico. Apos 10 dias, as plantulas foram transferidas para solucao nutritiva durante 20 dias para aclimatacao. A seguir, as plantulas foram alocadas nos tratamentos, sendo utilizado o delineamento experimental em blocos casualizados em esquema fatorial 2x2x4 com os fatores genotipos (IAC Fava Larga e Caqui), Spd (0,0 e 0,5 mM) e estresse salino (0, 20, 60 e 80 mM de NaCl). Apos 20 dias sob estresse, foram determinados o crescimento inicial e os teores de glicina betaina da parte aerea de ambos genotipos. Os resultados evidenciaram que, a glicina betaina pode ser indicada como um marcador bioquimico-fisiologico do estresse salino somente para eIAC Fava Larga. O estresse salino provocou reducao do crescimento inicial da parte aerea dos genotipos de guandu, IAC Fava Larga e Caqui. A aplicacao exogena de Spd nao atenuou os efeitos do estresse salino no crescimento, mas induziu o acumulo de glicina betaina no genotipo IAC Fava Larga sob menores niveis de NaCl. / Abstract: In this work was undertaken to evaluate the effect of salt stress associated to exogenous spermidine (Spd) application on the level of glycine betaine in shoots of pigeonpea, genotypes IAC Fava Larga and Caqui (a) propose the use of this compatible osmolyte as a biochemical-physiological indicator of salinity; (b) to verify if the application exogenous of spermidine decreased the effects of salt stress and (c) to evaluate the initial growth of pigeonpea under salt stress. The experiment was carried in a grow room with irradiance of 190 Êmol m-2 s-1, photoperiod of 12 hours, with the temperature set to 25oC and the RH to 40%. Seeds were showed in sterile sand with adequate water supply. After ten days, seedlings were transferred to nutritive solution for twenty days for acclimation. The experiment was then arranged in randomized block design in a 2x2x4 factorial, corresponding to the genotypes (IAC Fava Larga and Caqui), Spd rates (control and 0.5 mM) and salt stress (0, 20, 60 and 80 mM NaCl). After 20 days under stress, was verified the effect of these treatments in the initial growth and determined the content of glycine betaine. The results showed that glycine betaine can be used as a biochemical-physiological marker of salt stress in IAC Fava Larga. The salt stress reduced initial growth of the both genotypes, IAC Fava Larga and Caqui. Exogenous Spd application did not attenuate the effects of salt stress on initial growth, but induced glycine betaine accumulation only in IAC Fava Larga under low NaCl levels. / Mestre

Submitted by Amanda Nonato null (amandanonato@zootecnista.com.br) on 2017-05-04T18:17:51Z No. of bitstreams: 1 Tese Amanda Nonato.pdf: 1885961 bytes, checksum: 3b20e5e85bd1ef0f045b36418344a412 (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-05-05T13:29:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 nonato_a_dr_jabo.pdf: 1885961 bytes, checksum: 3b20e5e85bd1ef0f045b36418344a412 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-05T13:29:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 nonato_a_dr_jabo.pdf: 1885961 bytes, checksum: 3b20e5e85bd1ef0f045b36418344a412 (MD5) Previous issue date: 2017-03-31 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A arginina é um aminoácido nutricionalmente essencial, importante na gestação de mamíferos, pois aumenta a sobrevivência, crescimento e desenvolvimento de embriões, fetos e neonatos. A arginina pode ser utilizada na síntese de poliaminas por uma via metabólica clássica, porém estudos recentes revelaram uma importante via alternativa. Todavia, ambas foram pouco investigadas. Nesse contexto, estudos são necessários a fim de identificar a ocorrência das vias metabólicas da arginina nos tecidos reprodutivos durante a gestação de ovelhas. Assim o presente estudo teve como objetivos: a) avaliar a expressão de genes das vias metabólicas da arginina em conceptos durante o período de peri-implantação em ovelhas; b) identificar a localização das proteínas das vias metabólicas da arginina em conceptos e no endométrio durante o período de peri-implantação em ovelhas; e c) identificar a localização das proteínas das vias metabólicas da arginina em placentomas em ovelhas. Para tanto, ovelhas da raça Rambouillet (n=72) foram sincronizadas e após detecção do estro por machos vasectomizados, foram cobertas por machos da raça Suffolk com fertilidade comprovada. No experimento 1, as ovelhas (n=20) foram histerectomizadas aos 13, 14, 15 ou 16 dias de gestação, e os fragmentos de conceptos coletados foram congelados em nitrogênio líquido a fim de se estudar a expressão gênica. No experimento 2, ovelhas (n=28) também foram histerectomizadas aos 13, 14, 15 ou 16 dias de gestação e, secções de conceptos e de endométrio, foram fixados a fim de avaliar a localização de proteínas por imunohistoquímica. No experimento 3, ovelhas (n=24) foram histerectomizadas aos 40, 60, 80, 100, 120 ou 140 dias de gestação e placentomas foram coletados e fixados para posterior análise imunohistoquímica. Os dados de expressão gênica foram analisados utilizando o procedimento GLM do SAS e as diferenças na intensidade da imunomarcação foram avaliadas com o software R, foi realizada a análise de variância (ANOVA). O nível de significância considerado foi <0,05. A expressão dos genes ADC e AGMAT (via alternativa), não foi alterada ao longos dos dias de gestação, e o mesmo ocorreu para o gene ARG1 (via clássica). O gene ODC1 (via clássica) apresentou maior expressão aos 13 dias de gestação (P=0,06). A análise imunohistoquímica identificou as proteínas ARG1, ODC1, ADC e AGMAT nos diferentes tecidos e dias de gestação, evidenciando a importância da ambas vias durante a gestação. A presença das proteínas no epitélio luminal do endométrio aumentou (p=0,038) após os 13 dias de gestação e foi significativamente maior aos 16 dias, sugerindo que essas proteínas são requeridas em maiores concentrações para o processo de alongamento do concepto e implantação. No epitélio glandular, a presença das proteínas não foi alterada (p=0,64) ao longo dos dias estudados. Não foi observada diferença (p=0,472) entre a identificação das proteínas no trofectoderma dos conceptos ao longo dos dias. Nos placentomas, a presença das proteínas foi menor (p<0,01) aos 40 dias de gestação, quando comparadas com os dias 60, 120 e 140. Os resultados do presente estudo evidenciam a importância de ambas vias metabólicas da arginina, para produção de poliaminas, durante o período gestacional de ovelhas. / Arginine is a nutritionally essential amino acid, important for pregnancy in mammalian, to increase the survival, growth and development of embryos, fetuses and neonates. Arginine can be used in the synthesis of polyamines by a classical metabolic pathway, though recent studies revealed an important alternative pathway, however, both have been poorly investigated. In this context, studies are necessary in order to identify an occurrence of arginine metabolic pathways in the reproductive tissues during a pregnancy in ewes. The present study had as objectives: a) evaluate the gene expression in the metabolic pathways of arginine, in concepts during the pre-implantation period of pregnancy in ewes; b) to identify the localization of proteins, from the metabolic pathways of arginine, in concepts and uterine endometrium during the pre-implantation period of pregnancy in ewes; and c) to identify the localization of proteins, from the metabolic pathway of arginine, in placentomes during the pre-implantation period of pregnancy in ewes. Rambouillet ewes (n=72) were synchronized and after estrus detection by vasectomized males, ewes were mated by Suffolk males with proven fertility. In experiment 1, ewes (n=20) were hysterectomized at days 13, 14, 15 or 16 of pregnancy, and the sections of concepts collected were frozen in liquid nitrogen in order to study gene expression. In the experiment 2, ewes (n=28) were also hysterectomized at days 13, 14, 15 or 16 of pregnancy, sections of conceptuses and uterine endometrium were fixed in order to identify the protein localization by immunohistochemical analysis. In experiment 3, ewes (n=24) were hysterectomized on days 40, 60, 80, 100, 120 or 140 days of pregnancy, placentomes were collected and fixed for immunohistochemical analysis. Data analysis of gene expression was analyzed using GLM procedure of SAS and differences in the intensity of the immunostaining were evaluated using software R, analysis of variance (ANOVA) was performed. Significance level was declared < 0.05. The expression of ADC and AGMAT genes (alternative pathway) did not alter across days of pregnancy, and the same happened with ARG1 gene (classic pathway). The ODC1 gene (classic pathway) showed greater expression at 13 days of pregnancy (P=0.06). The immunohistochemical analysis identified ARG1, ODC1, ADC and AGMAT proteins in all tissues and days of pregnancy studied, evidencing the relevance of both pathways during pregnancy. The identification of proteins on lumen epithelia from endometrium improved (p=0.038) after Day 13 of pregnancy and it was significantly greater on Day 16, suggesting that these proteins are required in higher concentrations for conceptuses elongation and implantation. On glandular epithelia, the proteins identification did not change (p=0.64) across days of pregnancy. No difference was observed (p=0.472) between the proteins identification on trofectoderm across days. On placentomes, the proteins identification was lower (p<0.01) on Day 40 of pregnancy compared with Days 60, 120 and 140. The results of the experiment indicate that relevance of both metabolic pathways of arginine to polyamines production during the pregnancy period in ewes.

Orientador: Elizabeth Orika Ono / Banca: João Domingos Rodrigues / Banca: Marco Antonio Tecchio / Banca: Manoel Abilio de Queiroz / Banca: Cacilda Marcia Duarte Rios Faria / Resumo: Este trabalho objetivou estudar a produção de mudas dos cultivares Niagara Rosada no ambiente de Botucatu, SP, Isabel Precoce e Thompson Seedless sobre o porta-enxerto'IAC 766', nos ambientes de Petrolina, PE e Juazeiro, BA utilizando-se reguladores vegetais,poliaminas e citocininas (CK), e fungicida (piraclostrobina). Para tanto, o experimento foi dividido em três etapas: o primeiro, instaladoem viveiro telado na FCAUNESP, Botucatu - SP de agosto a outubro de 2013 com o cv. Niagara Rosada. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com oito tratamentos e cinco repetições. O segundo experimento foiconduzido em ambiente protegido (casa de vegetação) na Embrapa Semiárido - Petrolina, PE de setembro a novembro de 2014 em esquema fatorial 2 x 8, dois cultivares (Isabel Precoce e Thompson Seedless) e oito tratamentos com reguladores vegetais e fungicidas, com cinco repetições e o terceiro, conduzido em ambiente protegido (viveiro telado) em área comercial da RKF Mudas - Juazeiro, BA de dezembro/2014 a fevereiro/2015 em esquema fatorial 3 x 8, com três cultivares,Niagara Rosada, Isabel Precoce e Thompson Seedless, e oito tratamentos. Em todos os experimentos os tratamentos utilizados foram: T1- Testemunha (água); T2- Putrescina (Put, 2 mM); T3- Citocinina (CK, 6-BA 20 mg L-1); T4- Piraclostrobina (Pira, 200 g 100 L-1); T5- Put + CK; T6- Put + Pira; T7- Pira + CK; T8- CKvia foliar (20 mg L-1) + via solo (40 mg L-1), com aplicações realizadas uma vez p... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This work aimed to study the production of seedlings of 'Niagara Rosada', on rootstock 'IAC 766', in environments located in Botucatu, state of São Paulo, and Juazeiro, state of Bahia, as well as the production of seedlings of the cultivars Isabel Precoce and Thompson Seedless, on rootstock 'IAC 766', in environments in Petrolina, state of Pernambuco, and Juazeiro, state of Bahia, using plant growth regulators polyamines and Cytokinin (CK) and fungicide (pyraclostrobin). Therefore, the experiment was divided in three stages, the first being conducted in a shaded nursery at FCA-UNESP, Botucatu (SP), from August to October 2013 with the cv. Niagara Rosada. The experimental design was completely randomized, with eight treatments and five repetitions. The second experiment was conducted in protected environment (greenhouse) at Embrapa Semiárido, Petrolina (PE), from September to November 2014, using factorial design (2 x 8), two cultivars (Isabel Precoce and Thompson Seedless) and eight treatments with five repetitions; while the third one, also in protected environment (shaded nursery), was conducted in the commercial nursery of RKF Mudas, Juazeiro (BA), from December 2014 to February 2015, using factorial design (3 x 8), three cultivars (Niagara Rosada, Isabel Precoce and Thompson Seedless) and eight treatments. The treatments for all experiments consisted of: T1- Control (water); T2- Putrescine (Put, 2 mM); T3- Cytokinin (CK, 6-BA 20 mg L-1 ); T4- Pyraclostrobin (Pira, 200 g 100 L-1 ); T5- Put + CK; T6- Put + Pira; T7- Pira + CK; T8- CK via leaves (20 mg L-1 ) + applied to soil (40 mg L-1 ), with applications carried out once a week, at a total of three applications. In order to assess the effectiveness of the treatments, morphological and physiological parameters of the cultivars were evaluated as follows ... / Doutor

Orientador: Marcelo Agenor Pavan / Coorientador: Giuseppina Pace Pereira Lima / Coorientador: Julio Massaharu Marubayashi / Banca: Alexandre Moura Guimarães / Banca: João Domingos Rodrigues / Resumo: A cultura do tomateiro apresenta grande importância econômica para o Brasil e está sujeita a várias doenças que, dependendo do nível de resistência genética do cultivar usado, podem limitar sua produção. Os Tospovirus são considerados agentes causais de uma das doenças mais importantes da cultura do tomateiro, o vira-cabeça, acarretando enormes prejuízos econômicos. Diante disso, o objetivo do trabalho foi avaliar o efeito de indutores de resistência na incidência de vira cabeça e na produção do tomateiro. Os experimentos foram executados na Fazenda Experimental da UNESP, Campus Botucatu, em área de histórico de ocorrência da doença. Foram utilizadas 3200 plantas de tomateiro cv. Saladinha Plus. As bandejas foram divididas em 2 grupos, onde a metade recebeu um pré tratamento pela aplicação de Piraclostrobina+Metiram (3 g/L H2O) + Boscalida (0,3 g/L H2O) na bandeja e a outra metade sem nenhum produto aplicado. Após o transplantio, foram aplicados os tratamentos, através da pulverização de Piraclostrobina+Metiram 200g p. c./100L, Piraclostrobina+Metiram 400g p. c./100L, Bacillus subtilis 400mL p. c./100L e o procedimento convencional no qual foi aplicado o produto a base de Metamidófos. As pulverizações foram realizadas em todos os tratamentos aos 20, 35, 50 e 65 dias após o transplantio (DAT). Durante a condução do experimento foi realizada a avaliação da incidência da doença aos 30, 45 e 60 DAT, contando o número de plantas doentes. Com os resultados obtidos nas avaliações foi calculada a área abaixo da curva de progresso da doença (AACPD). Para as análises bioquímicas (atividade de peroxidase, polifenoloxidase, teor de proteínas totais solúveis e poliaminas), o material vegetal foi coletado aos 30, 40, 45, 55, 60, 70 e 75 DAT. A colheita dos frutos foi realizada aos 80 DAT, sendo selecionadas... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The tomato crop has great economic importance in Brazil and is subject of several diseases, and depending on the level of genetic resistance of the cultivar used, it can limit its production. The Tospovirus are considered causal agents of one of the most important diseases of tomato crops, resulting in enormous economic damage. The objective of this work was to evaluate the effect of resistance induction in the tomato crop, as well as the incidence of tospovirus. The experiment was carried out in the Experimental Farm of UNESP Botucatu, in an area of historical occurrence of the disease. Were used 3200 tomato plants cv. Saladinha Plus. Trays were divided into 2 groups, where half received a pretreatment Pyraclostrobin+ metiram (3 g / L H2O) + Boscalida (0, 3 g / L H2O) in the tray and the other half didn't receive any product. After transplanting, treatments were applied by spraying Pyraclostrobin + metiram 200g p. c./100L, Pyraclostrobin + metiram 400g p. c./100L, Bacillus subtilis 400mL p. c./100L by conventional procedure in which the product methamidophos was applied. The spraying was carried in all treatments at 20, 35, 50 and 65 days after transplanting (DAT). During the experiment, an evaluation of the disease incidence was performed at 30, 45 and 60 DAT, counting the number of diseased plants. With the results obtained in the evaluations, was calculated the area under the disease progress curve (AUDPC). To biochemical analysis (peroxidase, polyphenoloxidase, total soluble protein and polyamines), the plant material was collected at 30, 40, 45, 55, 60, 70 and 75 DAT. The fruit harvest was performed at 80 DAT, 20 plants were selected of each treatment, and the analyses of total production were carried out, including average fruit weight, fruit number per treatment, percentage of the number of green... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre