O conhecimento da glicobiologia estrutural se mantém como a parte menos explorada do estudo de estrutras tridimensionais. Considerando que a glicosilação pode estar envolvida em processos biológicos como crescimento celular e inflamação o descrever das bases moleculares da interação proteína-carboidrato pode auxiliar na compreensão destes eventos. Neste sentido considerando o pequeno número de trabalhos avaliando o perfil conformacional de glicoproteínas por simulação de dinâmica molecular e RMN este trabalho demonstrou que o campo de força GROMOS43a1 é capaz de representar adequadamente um conjunto de glicoproteínas tendo como conformação inicial as estrutras determinadas por RMN. O próximo desafio foi simular dissacarídeos isolados em solução e comparar o seu perfil aos estudos anteriores, o que demonstrou que o conjunto de conformações de cada dissacarídeo representa as conformações obtidas em ambos os métodos. Para validar o uso de conformações de dissacarídeos como unidades de construção de glicanas em glicoproteínas foi descrita a forma glicosilada das enzimas Cox-1 e Cox-2, que não possuíam a estrutura da glicosilação, e as conformações das glicanas nestas simulações foram similares as dos dissacarídeos, comprovando que as conformações de dissacarídeos podem ser extrapoláveis para construção de glicoproteínas. Finalmente foi construída a forma glicosilada da AGP humana, uma proteína que possui diferenças funcionais associadas ao perfil das glicanas ligadas. Sabe-se que em casos de resposta inflamatória a concentração plasmática da AGP pode ser aumentada em até cinco vezes a concentração normal e durante este aumento há uma diferença no número de ramificações das glicanas e presença de resíduos de fucose. Foram simuladas três estrutras AGP, sem glicosilação e glicosilada com a presença e ausência de fucoses,. A flexibilidade da estrutura não glicosilada é muito maior que das glicoproteínas, mostrando o papel estrutural da glicosilação. Adicionalmente foi estudada a interação que a AGP com selectinas, proteínas envolvidas nos processos inflamatórios, fornecendo dados preeliminares do papel molecular da interação AGP-selectina. / The knowning of strucutural glycobiology still the less explored area in threedimensional structures. Considering the envolviment of glycosylation in biological process such cellular grown and inflammation describe the molecular basis interactions of protein-carbohidrate may facilitate understanding of these events. In this way considering the small number of works evaluated the conformational profile of glycoproteins by molecular dynamics simulations and NMR this work demonstrate that the GROMOS96 43a1 force field adequately represent a glycoprotein’s conformational ensemble taking as the starting geometries, the NMR determined structures. The next step is simulate isolated disaccharides in solution and compare these proflite with previous work, which demonstrate that the conformational ensamble of disaccharides represents the conformations obtain in both methods. To validate the use of disaccharides conformations such construct units of glycans in glycoproteins, the glycosylated form of Cox-1 and Cox-2 with no previous structure were simulated, and the conformations of glycans were similar to disaccharides, proving that disaccharides conformations can be extrapolated to construct glycoproteins. Finaly it was construct the glycosylated form of human AGP, a protein with functional differentces associated to glycan linked profile. In cases of inflammatory response the the plasma concentration can rise up to fivefold and in this case the glycans differ in the branching and presence of fucose residues. Three structures of AGP were construct, unglycosylated and glycosylated with and without fucoses. The structural flexibility of unglycosylated form was higher than the glycosylated forms, demonstrated the structural role of glycans. Additionally it was study the interaction of AGP with selectins, proteins envolved in inflammatory process, supply preliminary data to molecular role of AGP-selectin interaction.

CAPES / O mercado mundial de polissacarídeos tem atraído grandes companhias industriais interessadas em conquistar novos e rentáveis campos de atuação. Polissacarídeos com propriedades tecnológicas e biológicas podem ser obtidos a partir de plantas, algas e de microrganismos. Dentre os polissacarídeos com propriedades biológicas, as glucanas tem se destacado por apresentarem atividade imunoestimulante e potencialidades no tratamento de doenças como câncer, hipercolesterolemia, diabetes, esclerose múltipla e doenças cardiovasculares. Recentes estudos demonstram a produção extracelular de β-glucanas por fungos filamentosos em cultivos submersos. A modificação na estrutura química das glucanas por carboximetilação é considerada uma importante rota para melhorar suas propriedades, podendo contribuir para o aumento da solubilidade da molécula, bem como atividades biológicas, especialmente aquelas associadas a mecanismos de ação antioxidante e antiproliferativa. Nesse sentido, o presente trabalho teve como objetivo a produção de β-1,6-D-glucana (lasiodiplodana) pelo fungo Lasiodiplodia theobromae MMPI em cultivo submerso, bem como a carboximetilação da molécula, caracterização e avaliação da citotoxicidade e atividade antioxidante. A carboximetilação da molécula foi confirmada através da verificação de sinais químicos específicos identificados por espectroscopia de FT-IR e RMN 13C e a molécula carboximetilada apresentou grau de substituição (DS) de 1,27. A análise térmica (TG/DTA) indicou que a amostra bruta e carboximetilada apresentaram quatro estágios de perda de massa. O primeiro estágio ocorreu em 125ºC (perda de água) e houve dois eventos consecutivos de perda de massa (200ºC-400ºC) atribuídos à degradação da molécula. O quarto estágio ocorreu entre 425ºC e 620ºC (decomposição final) com pico exotérmico em 510ºC. Análise por MEV indicou que a lasiodiplodana bruta apresenta estruturas granulares que se rompem após carboximetilação. Análise de DRX demonstrou que o polímero bruto e carboximetilado apresentam estrutura não cristalina. A carboximetilação contribuiu para melhorar a hidrossolubulidade da molécula (aumento de 60%) e para melhorar a atividade antioxidante avaliada pela capacidade de captura dos radicais ABTS, DPPH e poder redutor do íon férrico (FRAP). Não foi verificado efeito citotóxico da lasiodiplodana bruta e modificada sobre hemácias. Os resultados obtidos sugerem que a carboximetilação da lasiodiplodana pode contribuir para melhoria das propriedades biológicas e para o potencial de uso biotecnológico da molécula. / The world market of polysaccharides has attracted large industrial companies interested in gaining new and profitable fields. Polysaccharides with technological and biological properties can be obtained from plants, algae and microorganisms. Among the polysaccharides with biological properties, glucans have been highlighted by demonstrate immunostimulatory activity and potential for treating diseases such as cancer, hypercholesterolemia, diabetes, multiple sclerosis and cardiovascular diseases. Recent studies demonstrate the production of exocellular β-glucans by filamentous fungi in submerged cultivations. Modifications in the chemical structure of glucans by carboxymethylation is considered an important route to improve its properties, may contribute to the increased solubility of the molecule as well as biological activities, especially those associated with antioxidant and antiproliferative mechanisms of action. Therefore, the present work aimed the production of β-1,6-D glucan (lasiodiplodana) by the Lasiodiplodia theobromae MMPI fungus in submerged cultivation and carboxymethylation of the molecule, characterization and evaluation of cytotoxicity and antioxidant activity. The carboxymethylation of the molecule was confirmed by checking specific chemical signals identified by FT-IR and NMR and 13C spectroscopy. Carboxymethylated molecule presented degree of substitution (DS) of 1.27. Thermal analysis (TG / DTA) indicated that native and carboxymethylated samples had four stages of mass loss. The first stage was at 125 ºC (loss of water) and there were two consecutive events of weight loss (200 ºC - 400 ºC) attributed to the degradation of the molecule. The fourth stage occurred between 425 ºC and 620 ºC (final decomposition) with exothermic peak at 510 ºC. SEM analysis indicated that the raw lasiodiplodan presents granular structures which are broken after carboxymetylation. XRD analysis showed that native and carboxymethylated biopolymers have no crystalline structure. Carboxymethylation aided to improve water solubility the molecule (60% increase) and to improve antioxidant activity assessed by ability to capture the ABTS, DPPH radical scavenging and the ferric ion reducing power (FRAP). There was no cytotoxic effect of raw lasiodiplodana and modified on the erythrocytes. The results suggest that the carboxymethylation of lasiodiplodan can contribute to improved biological properties and the potential biotechnological use of the molecule.

CAPES / O mercado mundial de polissacarídeos tem atraído grandes companhias industriais interessadas em conquistar novos e rentáveis campos de atuação. Polissacarídeos com propriedades tecnológicas e biológicas podem ser obtidos a partir de plantas, algas e de microrganismos. Dentre os polissacarídeos com propriedades biológicas, as glucanas tem se destacado por apresentarem atividade imunoestimulante e potencialidades no tratamento de doenças como câncer, hipercolesterolemia, diabetes, esclerose múltipla e doenças cardiovasculares. Recentes estudos demonstram a produção extracelular de β-glucanas por fungos filamentosos em cultivos submersos. A modificação na estrutura química das glucanas por carboximetilação é considerada uma importante rota para melhorar suas propriedades, podendo contribuir para o aumento da solubilidade da molécula, bem como atividades biológicas, especialmente aquelas associadas a mecanismos de ação antioxidante e antiproliferativa. Nesse sentido, o presente trabalho teve como objetivo a produção de β-1,6-D-glucana (lasiodiplodana) pelo fungo Lasiodiplodia theobromae MMPI em cultivo submerso, bem como a carboximetilação da molécula, caracterização e avaliação da citotoxicidade e atividade antioxidante. A carboximetilação da molécula foi confirmada através da verificação de sinais químicos específicos identificados por espectroscopia de FT-IR e RMN 13C e a molécula carboximetilada apresentou grau de substituição (DS) de 1,27. A análise térmica (TG/DTA) indicou que a amostra bruta e carboximetilada apresentaram quatro estágios de perda de massa. O primeiro estágio ocorreu em 125ºC (perda de água) e houve dois eventos consecutivos de perda de massa (200ºC-400ºC) atribuídos à degradação da molécula. O quarto estágio ocorreu entre 425ºC e 620ºC (decomposição final) com pico exotérmico em 510ºC. Análise por MEV indicou que a lasiodiplodana bruta apresenta estruturas granulares que se rompem após carboximetilação. Análise de DRX demonstrou que o polímero bruto e carboximetilado apresentam estrutura não cristalina. A carboximetilação contribuiu para melhorar a hidrossolubulidade da molécula (aumento de 60%) e para melhorar a atividade antioxidante avaliada pela capacidade de captura dos radicais ABTS, DPPH e poder redutor do íon férrico (FRAP). Não foi verificado efeito citotóxico da lasiodiplodana bruta e modificada sobre hemácias. Os resultados obtidos sugerem que a carboximetilação da lasiodiplodana pode contribuir para melhoria das propriedades biológicas e para o potencial de uso biotecnológico da molécula. / The world market of polysaccharides has attracted large industrial companies interested in gaining new and profitable fields. Polysaccharides with technological and biological properties can be obtained from plants, algae and microorganisms. Among the polysaccharides with biological properties, glucans have been highlighted by demonstrate immunostimulatory activity and potential for treating diseases such as cancer, hypercholesterolemia, diabetes, multiple sclerosis and cardiovascular diseases. Recent studies demonstrate the production of exocellular β-glucans by filamentous fungi in submerged cultivations. Modifications in the chemical structure of glucans by carboxymethylation is considered an important route to improve its properties, may contribute to the increased solubility of the molecule as well as biological activities, especially those associated with antioxidant and antiproliferative mechanisms of action. Therefore, the present work aimed the production of β-1,6-D glucan (lasiodiplodana) by the Lasiodiplodia theobromae MMPI fungus in submerged cultivation and carboxymethylation of the molecule, characterization and evaluation of cytotoxicity and antioxidant activity. The carboxymethylation of the molecule was confirmed by checking specific chemical signals identified by FT-IR and NMR and 13C spectroscopy. Carboxymethylated molecule presented degree of substitution (DS) of 1.27. Thermal analysis (TG / DTA) indicated that native and carboxymethylated samples had four stages of mass loss. The first stage was at 125 ºC (loss of water) and there were two consecutive events of weight loss (200 ºC - 400 ºC) attributed to the degradation of the molecule. The fourth stage occurred between 425 ºC and 620 ºC (final decomposition) with exothermic peak at 510 ºC. SEM analysis indicated that the raw lasiodiplodan presents granular structures which are broken after carboxymetylation. XRD analysis showed that native and carboxymethylated biopolymers have no crystalline structure. Carboxymethylation aided to improve water solubility the molecule (60% increase) and to improve antioxidant activity assessed by ability to capture the ABTS, DPPH radical scavenging and the ferric ion reducing power (FRAP). There was no cytotoxic effect of raw lasiodiplodana and modified on the erythrocytes. The results suggest that the carboxymethylation of lasiodiplodan can contribute to improved biological properties and the potential biotechnological use of the molecule.

O conhecimento da glicobiologia estrutural se mantém como a parte menos explorada do estudo de estrutras tridimensionais. Considerando que a glicosilação pode estar envolvida em processos biológicos como crescimento celular e inflamação o descrever das bases moleculares da interação proteína-carboidrato pode auxiliar na compreensão destes eventos. Neste sentido considerando o pequeno número de trabalhos avaliando o perfil conformacional de glicoproteínas por simulação de dinâmica molecular e RMN este trabalho demonstrou que o campo de força GROMOS43a1 é capaz de representar adequadamente um conjunto de glicoproteínas tendo como conformação inicial as estrutras determinadas por RMN. O próximo desafio foi simular dissacarídeos isolados em solução e comparar o seu perfil aos estudos anteriores, o que demonstrou que o conjunto de conformações de cada dissacarídeo representa as conformações obtidas em ambos os métodos. Para validar o uso de conformações de dissacarídeos como unidades de construção de glicanas em glicoproteínas foi descrita a forma glicosilada das enzimas Cox-1 e Cox-2, que não possuíam a estrutura da glicosilação, e as conformações das glicanas nestas simulações foram similares as dos dissacarídeos, comprovando que as conformações de dissacarídeos podem ser extrapoláveis para construção de glicoproteínas. Finalmente foi construída a forma glicosilada da AGP humana, uma proteína que possui diferenças funcionais associadas ao perfil das glicanas ligadas. Sabe-se que em casos de resposta inflamatória a concentração plasmática da AGP pode ser aumentada em até cinco vezes a concentração normal e durante este aumento há uma diferença no número de ramificações das glicanas e presença de resíduos de fucose. Foram simuladas três estrutras AGP, sem glicosilação e glicosilada com a presença e ausência de fucoses,. A flexibilidade da estrutura não glicosilada é muito maior que das glicoproteínas, mostrando o papel estrutural da glicosilação. Adicionalmente foi estudada a interação que a AGP com selectinas, proteínas envolvidas nos processos inflamatórios, fornecendo dados preeliminares do papel molecular da interação AGP-selectina. / The knowning of strucutural glycobiology still the less explored area in threedimensional structures. Considering the envolviment of glycosylation in biological process such cellular grown and inflammation describe the molecular basis interactions of protein-carbohidrate may facilitate understanding of these events. In this way considering the small number of works evaluated the conformational profile of glycoproteins by molecular dynamics simulations and NMR this work demonstrate that the GROMOS96 43a1 force field adequately represent a glycoprotein’s conformational ensemble taking as the starting geometries, the NMR determined structures. The next step is simulate isolated disaccharides in solution and compare these proflite with previous work, which demonstrate that the conformational ensamble of disaccharides represents the conformations obtain in both methods. To validate the use of disaccharides conformations such construct units of glycans in glycoproteins, the glycosylated form of Cox-1 and Cox-2 with no previous structure were simulated, and the conformations of glycans were similar to disaccharides, proving that disaccharides conformations can be extrapolated to construct glycoproteins. Finaly it was construct the glycosylated form of human AGP, a protein with functional differentces associated to glycan linked profile. In cases of inflammatory response the the plasma concentration can rise up to fivefold and in this case the glycans differ in the branching and presence of fucose residues. Three structures of AGP were construct, unglycosylated and glycosylated with and without fucoses. The structural flexibility of unglycosylated form was higher than the glycosylated forms, demonstrated the structural role of glycans. Additionally it was study the interaction of AGP with selectins, proteins envolved in inflammatory process, supply preliminary data to molecular role of AGP-selectin interaction.

O conhecimento da glicobiologia estrutural se mantém como a parte menos explorada do estudo de estrutras tridimensionais. Considerando que a glicosilação pode estar envolvida em processos biológicos como crescimento celular e inflamação o descrever das bases moleculares da interação proteína-carboidrato pode auxiliar na compreensão destes eventos. Neste sentido considerando o pequeno número de trabalhos avaliando o perfil conformacional de glicoproteínas por simulação de dinâmica molecular e RMN este trabalho demonstrou que o campo de força GROMOS43a1 é capaz de representar adequadamente um conjunto de glicoproteínas tendo como conformação inicial as estrutras determinadas por RMN. O próximo desafio foi simular dissacarídeos isolados em solução e comparar o seu perfil aos estudos anteriores, o que demonstrou que o conjunto de conformações de cada dissacarídeo representa as conformações obtidas em ambos os métodos. Para validar o uso de conformações de dissacarídeos como unidades de construção de glicanas em glicoproteínas foi descrita a forma glicosilada das enzimas Cox-1 e Cox-2, que não possuíam a estrutura da glicosilação, e as conformações das glicanas nestas simulações foram similares as dos dissacarídeos, comprovando que as conformações de dissacarídeos podem ser extrapoláveis para construção de glicoproteínas. Finalmente foi construída a forma glicosilada da AGP humana, uma proteína que possui diferenças funcionais associadas ao perfil das glicanas ligadas. Sabe-se que em casos de resposta inflamatória a concentração plasmática da AGP pode ser aumentada em até cinco vezes a concentração normal e durante este aumento há uma diferença no número de ramificações das glicanas e presença de resíduos de fucose. Foram simuladas três estrutras AGP, sem glicosilação e glicosilada com a presença e ausência de fucoses,. A flexibilidade da estrutura não glicosilada é muito maior que das glicoproteínas, mostrando o papel estrutural da glicosilação. Adicionalmente foi estudada a interação que a AGP com selectinas, proteínas envolvidas nos processos inflamatórios, fornecendo dados preeliminares do papel molecular da interação AGP-selectina. / The knowning of strucutural glycobiology still the less explored area in threedimensional structures. Considering the envolviment of glycosylation in biological process such cellular grown and inflammation describe the molecular basis interactions of protein-carbohidrate may facilitate understanding of these events. In this way considering the small number of works evaluated the conformational profile of glycoproteins by molecular dynamics simulations and NMR this work demonstrate that the GROMOS96 43a1 force field adequately represent a glycoprotein’s conformational ensemble taking as the starting geometries, the NMR determined structures. The next step is simulate isolated disaccharides in solution and compare these proflite with previous work, which demonstrate that the conformational ensamble of disaccharides represents the conformations obtain in both methods. To validate the use of disaccharides conformations such construct units of glycans in glycoproteins, the glycosylated form of Cox-1 and Cox-2 with no previous structure were simulated, and the conformations of glycans were similar to disaccharides, proving that disaccharides conformations can be extrapolated to construct glycoproteins. Finaly it was construct the glycosylated form of human AGP, a protein with functional differentces associated to glycan linked profile. In cases of inflammatory response the the plasma concentration can rise up to fivefold and in this case the glycans differ in the branching and presence of fucose residues. Three structures of AGP were construct, unglycosylated and glycosylated with and without fucoses. The structural flexibility of unglycosylated form was higher than the glycosylated forms, demonstrated the structural role of glycans. Additionally it was study the interaction of AGP with selectins, proteins envolved in inflammatory process, supply preliminary data to molecular role of AGP-selectin interaction.

Made available in DSpace on 2014-06-12T17:35:16Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo3317_1.pdf: 2166498 bytes, checksum: d5bfcd3bc431cd02d014bbe1cd32b6f6 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2009 / A partir da calcinação da gipsita (CaSO4.2H2O) pode ser obtido o gesso α ou o gesso β, que possuem características distintas, podendo ser aplicados em diversas áreas, tais como na construção civil, na indústria química, na indústria farmacêutica, na odontologia, etc. A utilização de aditivos é uma prática utilizada para se obter produtos melhorados. No presente trabalho, estudou-se a adição de polissacarídeos. Foram feitos ensaios de consistência, calor de hidratação, tempo de pega e resistência à compressão para avaliar o efeito dos polissacarídeos adicionados. A microscopia eletrônica de varredura foi utilizada para visualizar as modificações ocorridas na microestrutura dos cristais formados após a adição de hidroxipropilmetilcelulose, carboximetilcelulose de sódio, celulose, amido e dextrina. O carboximetilcelulose de sódio e o hidroxipropilmetilcelulose foram os aditivos que apresentaram influências mais significativas na consistência, no tempo de pega e na resistência à compressão. A adição de 0,025% de carboximetilcelulose de sódio provocou o aumento no tempo de pega inicial e final de 4,2 e 6,7 para 4,7 e 10,2 minutos, respectivamente. Na concentração de 0,1%, o tempo de pega inicial e final passou para 83 e 103,5 minutos. A diferença de comportamento apresentada pelos polissacarídeos se deve à maior ou menor adsorção do aditivo à superfície do cristal. A facilidade de adsorção do grupo COO- do carboximetilcelulose de sódio nos íons de cálcio presentes na superfície do cristal de gesso promoveu o efeito retardante no tempo de pega

Submitted by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-04-13T22:17:37Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO Caio César de Andrade Rodrigues Silva.pdf: 4603467 bytes, checksum: 1a86c631228990f41725c8d4908495db (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-13T22:17:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO Caio César de Andrade Rodrigues Silva.pdf: 4603467 bytes, checksum: 1a86c631228990f41725c8d4908495db (MD5) Previous issue date: 2015-03-02 / FACEPE / Há alguns anos, tem-se crescente interesse pela obtenção de agentes terapêuticos com potencial imunoestimulante e antioxidante, capazes de ser utilizados no tratamento de doenças, como a espécie T. occidentalis. Dessa forma, este trabalho teve como propósito obter e avaliar a atividade farmacológica do extrato seco padronizado de Thuja occidentalis Linn. Para este fim, procedeu-se com a validação do método para doseamento de polissacarídeos, em seguida, realizou-se a otimização da extração. A partir do método validado e otimizado, obteve-se a solução extrativa rica em polissacarídeos, como também o extrato seco e fração polissacarídica. Além disso, avaliou-se a composição de monossacarídeos presentes no extrato seco e fração de polissacarídeos. Adicionalmente, foi avaliada a atividade imunoestimulante do extrato e fração, através da determinação da expressão de Interferon-gama (INF-γ) e Interleucinas (ILs) 6, 10, 17 e 22 em esplenócitos de camundongos e de INFγ e ILs 2, 4, 6 e 1β em PBMCs humanas. Do mesmo modo, avaliou-se a atividade antioxidante do extrato e fração de polissacarídeos através de testes in vitro pelo sequestro dos radicais 2,2-difenil-1-picril-hidrazil (DPPH•), 2,2'-azino-bis (ácido 3-etilbenztiazoline-6-sulfonico) (ABTS•+), hidroxila (OH•) e óxido nítrico (NO). Para o doseamento, foi aplicado o método de antrona. Pelos testes de fator-único, foram selecionadas as melhores condições de temperatura (85-95°C), tempo (4,0-5,0 h) de extração e proporção de droga vegetal:água (4 g: 30 mL). Os efeitos da temperatura e tempo sobre o teor de polissacarídeos foram estudados pelo planejamento fatorial. Os resultados demonstraram que o aumento simultâneo desses parâmetros ocasionou redução do teor dos polissacarídeos, de modo que as condições ótimas para obtenção da solução extrativa foram: temperatura de 95°C e tempo de 4 h. O extrato seco obtido mostrou-se como pó fino, higroscópico e com baixa capacidade de fluxo, demonstrando a necessidade da adição de excipientes que viabilizem sua utilização farmacêutica. A análise da composição dos monossacarídeos extrato e fração revelou a presença predominante, de glicose (extrato) e manose (fração). A avaliação da atividade imunoestimulante demonstrou que houve estímulo das citocinas: 6 e 1β. Além de viabilidade celular superior a 90%. Na avaliação antioxidante todos os testes demonstraram o potencial antioxidante superior do extrato em relação a fração. / For some years, increasing interest has been the achievement of therapeutic agents with immunostimulatory and antioxidant potential, able to be used in the treatment of diseases such as T. occidentalis species. Thus, this study aimed to obtain and evaluate the pharmacological activity standardized dry extract of Thuja occidentalis Linn. To this end, it proceeded with the validation method for determination of polysaccharides, and then extraction was performed optimization. From the validated and optimized method, we obtained the rich extraction solution in polysaccharides, as well as the dried extract and polysaccharide fraction. In addition, we evaluated the composition of monosaccharides present in the dry extract and fraction of polysaccharides. Additionally, the immunostimulatory activity of the extract and fraction was evaluated by determining the expression of interferon-gamma (IFN-γ) and interleukins (ILs) 6, 10, 17 and 22 in splenocytes of mice and INFγ and ILs 2, 4 6 and 1β in human PBMC. Likewise, we evaluated the antioxidant activity of the extract and polysaccharides fraction through in vitro tests for the kidnapping of radical 2,2-diphenyl-1-picryl-hydrazyl (DPPH•), 2,2'-azino-bis (3-etilbenztiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS • +), hydroxyl (OH•) and nitric oxide (NO). For the assay, it applied the anthrone method. For single-factor tests, the best temperature conditions were selected (85-95 °C) time (4.0-5.0 h) extraction and proportion of vegetable drugs: water (4 g: 30 mL). The effects of temperature and time on polysaccharide content were studied by factorial design. The results demonstrated that the simultaneous increase in these parameters caused reduction of the content of the polysaccharide, so that the optimum conditions for obtaining the extraction solution were: temperature 95 °C and time 4 h. The dry extract obtained proved to be a fine powder, hygroscopic and with low flow capacity, demonstrating the need for the addition of excipients that enable its pharmaceutical use. The analysis of the composition of the extract and monosaccharide fraction revealed the predominant presence of glucose (extract) and mannose (fraction). The evaluation of the immunostimulant activity showed that there was stimulation of cytokines: 6 and 1β. In addition to greater than 90% cell viability. In assessing antioxidant all tests have demonstrated the superior antioxidant potential of the extract compared to fraction.

Orientadores: Gil Eduardo Serra, Telma Teixeira Franco / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-23T02:44:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rodrigues_NadiaRegina_M.pdf: 3135301 bytes, checksum: f59aeebf7fbf2be117b0d82a8987eb9c (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: O galactomano extraído de sementes de Dimorphandra mo/lis teve seu peso molecular e sua distribuição de pesos moleculares determinados através de diversas metodologias envolvendo cromatografia líquida de alta eficiência com colunas de permeação em gel e detector de índice de refração com uso de software e fotômetro de espalhamento de luz (LALLS). A D. mollis é popularmente conhecida como faveiro ou faveira. A obtenção de sementes de D. mollis pode ser feita através de extrativismo, pois é uma espécie importante em cerrados e caatinga nordestina, e a extração de tecidos do endosperma, ricos em galactomanano, é possível de ser feita com sucesso; as sementes apresentam alto teor de galactomanano, atingindo mais de 40% do seu peso. A razão manose: galactose do galactomanano de D. mo/lis foi determinada com auxílio de cromatografia líquida de alta eficiência, coluna HPX - 87P à temperatura de 84°C com água deionizada como eluente, fluxo de 1,0 mL/min e detector de índice de refração. A cromatografia líquida de alta eficiência foi testada para determinação do peso molecular do galactomanano de D. mollis com diferentes metodologias para cálculo, primeiro sem auxílio de software específico para análise de cromatografia de permeação em gel, com colunas de exclusão SEC XL 40 e 30 em um fomo a 55°C, 0,02% azida sódica como eluente e detector de índice de refração. Foi testado um software acoplado a um integrador, colunas de permeação em gel dispostas em, 'série (KS 805, 804 e 803, e pré coluna KS-G), num fomo com 55°C, 0,02% azida sódica como eluente, com fluxo de 1,0 mL/min e detector de índice de refração. Como os resultados obtidos foram pouco coerentes, foi testado um software de GPC acoplado a um micro-computador (programa Millenium) nas mesmas condições que os citados anteriormente. O valor de peso molecular obtido foi de aproximadamente 1,9 x 106 Da para o galactomanano em estudo. Para comparação dos pesos moleculares do galactomanano de D. mollis, foi usado um fotômetro de espalhamento de luz "low angle laser light scatering" (LALLS), o qual deu como resultado do peso molecular do galactomanano em estudo aproximadamente 1,9 x 106 Da. O galactomanano presente na D. mollis apresentou um peso molecular próximo a 2x106 Da e razão manose : galactose de 2 : 1, valores estes similares àqueles obtidos para goma guar. Dentre as metodologias que permitem a determinação do Peso Molecular do galactomanano de D. mollis aquelas que usam GPC - Millenium (Waters) e de fotômetro de luz (LALLS) são recomendadas devido à sua aplicação para polímeros diversos / Abstract: The galactomannan extracted from seeds of Dimorphandra mollis had its molecular weight and its distribution of molecular weight determined by various methods including high performance liquid chromatography (HPLC) with permeation columns gel and refraction index detector making use of software and low angle laser light scattering (LALLS). "Faveiro" or "faveira" is the popular name by which D. mollis is known. Because of the importance of the species in the Brazilian Cerrado and Northe-astem Caatinga, its seeds can be easily obtained by extractivism. The extraction of endosperm tissue, which is rich in galactomannan, is possible to be done successfully. The seeds contain high quantities of galctomannan representing more than 40% of its net weight. HPLC was tested to determined the D. mollis galactomannan molecular weight with different calculating methods. Initia11y, it was tested without the aid of a specific software to permeation gel chromatography analyses, with exclusion columns SEC 40 and 30 in a oven at 550C, using 0.02% sodic azide mobile phase and refraction index detector. Afterwards, a software was coupled to the integrator with gel permeation columns' settled in series (KS 805, 804, 803, and pre-column KS-G) in an oven at 550C, using 0.02% sodic azide as mobile phase with a flow rate of 1.0 mL/min and an refraction index detector. Since the data obtained were not accurate, a GPC software was coupled to a microcomputer (Millenium program) was tested with the 'same conditions employed previously. An approximated molecular weight of 1.9 x 10 6 Da was determined for galactomannan under study. A photometer (LALLS) compared the molecular weight of the galctomaiman from D. mollis giving a weight of approximately 1.9xl06 Da. The galactomannan found in D. mol/is showed molecular weight near 2,0 x 106 Da and the ratio manose/galactose of 2: 1, these figures are similar to those determined for guar gum. Within the methodologies studied to determine the galactomannan molecular weight, those which make use of the GPC-millenium (Waters) and the light scattering photometer methods are recommended since they can be applied to different types of polymers / Mestrado / Mestre em Tecnologia de Alimentos

Orientador: Jaime Aparecido Cury / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-23T17:54:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rebelo_MariaAugustaBessa_D.pdf: 7582675 bytes, checksum: ab511aea76c0a38860b6fe51592f5eec (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: O objetivo deste estudo foi analisar a composição da placa dental formada na presença de sacarose ou glicose+frutose e sua relação com cariogenicidade. Doze voluntários adultos participaram deste estudo cruzado realizado em 03 etapas de 28 dias. Para cada fase do estudo, um dispositivo palatino de acrílico contendo 04 blocos de esmalte dental humano foi confeccionado para os voluntários. Uma solução de sacarose 20% ou glicose 10% + fiutose 10% foi gotejada sobre os blocos de esmalte 8 x/dia, enquanto no grupo controle não foi utilizada nenhuma das soluções. Durante o período experimental, todos os voluntários utilizaram dentifrício não fluoretado, não escovaram os blocos dentais e ingeriram água fluoretada a 0,60 ppm F. Concentrações de cálcio, fósforo, flúor, carboidrato total e proteína (assim como eletroforese) foram determinadas na placa dental após cada fase. Nos blocos dentais analisou-se a concentração de flúor e microdureza superficial e interna do esmalte...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The aim of this study was to analyze the composition of dental plaque formed in the presence of sucrose or glucose+fructose and its relation with cariogenicity. Twelve adult volunteers took part in this crossover study done in three phases of 28 days each. For each phase of the study, an acrylic resin appliance containing four human dental enamel blocks was constructed for the volunteers. Solutions containing 20% sucrose or 10% glucose + 10% fructose were dripped onto the enamel blocks 8 times/day, while in the contraI group nothing was used. During the experimental period alI the subjects used fluoride-free dentimce, refrained from brushing the enamel blocks and drank water fluoridated at 0.6 ppm F. The concentrations of calcium, phosphorus, fluoride, total carbohydrate, and protein ( as well as electrophoresis) were determined in dental plaque after each phase. The concentration of fluoride and microhardness were analyzed in the dental blocks...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Doutorado / Biologia e Patologia Buco-Dental / Doutor em Ciências

Orientadores : Sylvio Luis Honorio, Jose Moure Gil / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Agricola / Made available in DSpace on 2018-07-28T01:24:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CarvalhoFilho_CelsoDuarte_D.pdf: 3185694 bytes, checksum: 23d27993f04d811f89d4d9d92cdeb44f (MD5) Previous issue date: 2000 / Doutorado