Made available in DSpace on 2014-06-12T16:32:08Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo6388_1.pdf: 1812516 bytes, checksum: 276d9eeafba7a52a3f4099bc1ad2a899 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2007 / Um polissacarídeo extracelular foi produzido por via microbiológica, através da bactéria Zoogloea sp. utilizando como matéria prima o melaço de cana-de-açúcar resultando em uma membrana fibrosa que foi utilizado para preparar um gel contendo ácido úsnico, que apresenta atividade antimicrobiana. Um método de extração de ácido úsnico do gel de biopolímero foi validado. O ácido úsnico foi caracterizado puro e incorporado em gel de biopolímero por Calorimetria Diferencial Exploratória (DSC) e por análises termogravimétricas (TGA). O conteúdo de ácido úsnico no gel de biopolímero foi de 100.7%. As análises de DSC de filmes de gel de biopolímero puro e incorporado mostraram padrões térmicos comparáveis. As curvas de TGA demostraram que a presença de ácido de úsnico melhora a estabilidade térmica do biopolímero. Na realidade, uma perda de peso de 86.1% foi achada para o biopolímero, considerando que para o biopolímero que contém ácido úsnico uma perda de peso de 69.6% foi observada. Então a incorporação de ácido úsnico em gel de biopolímero oferece um sistema polimérico novo, facilmente disponível, economicamente viável e biocompatível para a entrega de drogas

Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2016-07-20T15:04:22Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Luiza Lima_Tese de Doutorado_2015.pdf: 5654099 bytes, checksum: da2a7cb303b6562f1bc8af5fc0c76f13 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-20T15:04:22Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Luiza Lima_Tese de Doutorado_2015.pdf: 5654099 bytes, checksum: da2a7cb303b6562f1bc8af5fc0c76f13 (MD5) Previous issue date: 2015-10-29 / CAPEs / Com o objetivo de criar um modelo biológico reprodutível e eficiente que possa mimetizar a interação proteína-carboidrato, nós reportamos o uso do ensaio quimiluminescente com lectinas conjugadas a éster de acridina (EA) para investigar a complexação da lectina ao carboidrato e para avaliação quantitativa da expressão de carboidratos em tumores cutâneos. Polissacarídeos de N-acetil-D-glicosamina (quitosana), glicose (phytagel) e galactose (carragenana) foram utilizados para sintetizar membranas (0,0314 – 0,6358 cm2). Concanavalina A-EA (Con A), Wheat germ aglutinina (WGA), Peanut aglutinina (PNA), Ulex europeaus aglutinina-I (UEA-I) e Maackia amurensis aglutinina (MAA) foram conjugadas a EA. A atividade hemaglutinante das lectinas-EA foi avaliada e a quimiluminescência quantificada e expressa em Unidades Relativas de Luz (URL). Biópsias de pele normal e de tumores cutâneos, tais como ceratose actínica (AK), ceratoacantoma (KA), carcinoma espinocelular (CEC) e basocelular (CBC), e as membranas foram incubadas com o conjugado lectina-EA (100 μL 100 μg mL-1) por 2h a 4°C. A emissão de fótons foi quantificada e correlacionada com a marcação de tecidos normais, transformados e das membranas. Inibições com carboidratos específicos foram realizadas. AK, KA , CBC e CEC apresentaram menor expressão de α -D- glucose/manose e resíduos de α-L-fucose, em comparação com o tecido normal. Os tumores cutâneos apresentaram maior expressão resíduos de β Gal-(1-3)-GalNAc que o tecido normal . AK e SCC exibiram maior expressão de resíduos Neu5Ac-α(2,3)Gal que a epiderme normal. KA e BCC apresentaram valores de URL equivalentes, em comparação com o tecido normal. Os valores de URL diminuíram quando as lectinas foram incubadas com seus carboidratos específicos. Os valores das constantes e os sítios de ligação foram calculados para cada lectina utilizando a equação obtida a partir das curvas hiperbólicas, 2,4 x 10-7 M-1 ± 0,8 x 10-7 M-1and 1,3 x 10-3 mol . mg-1 ± 0,3 x 10-3 mol . mg-1 (Con A); 0,9 x 10-6 M-1  0,4 x 10-6 M-1 and 0,021 x 10-3 mol . mg-1 ± 0,003 x 10-3 mol . mg-1 (WGA) and 2,0 x 10-6 M-1  0,9 x 10-6 M-1 and 0,069 x 10-3 mol . mg-1 ± 0,010 x 10-3 mol . mg-1 (PNA). O método quimiluminescente permitiu a avaliação quantitativa direta da expressão de carboidratos em neoplasias de pele e a investigação a complexação da lectina ao carboidrato através do modelo de Langmuir, combinando a especificidade desta interação e a sensibilidade dos ensaios quimiluminescentes. / Aiming to create a reproducible and efficient biological model that mimic the protein-carbohydrate interaction, we report the use of chemiluminescent assay with lectins labeled to acridinium ester (AE) to investigate the complexation of lectin to carbohydrate and for the quantitative evaluation of carbohydrates expression in cutaneous tumors. Polysaccharides made N-acetyl-D-glucosamine (chitosan), glucose (phytagel) and galactose (carrageenan) were used to synthetize membranes (0,0314 – 0,6358 cm2). Concanavalin A-AE (Con A), Wheat germ agglutinin (WGA), Peanut agglutinin (PNA), Ulex europeaus agglutinin-I (UEA-I) e Maackia amurensis agglutinin (MAA) were labeled to AE. The hemmagglutinating activity of lectins-AE was evaluated and the chemiluminescence was quantified and expressed in Relative Light Unit (RLU). Biopsies of normal skin and cutaneous tumors such as, actinic keratosis (AK), keratoacantoma (KA), squamous cell carcinoma (SCC) and basal cell carcinoma (BCC), and membranes were incubated with lectins-AE (100 μL 100 μg mL-1) for 2h at 4°C. Photon emission was measured and correlated to the labeling of the normal, transformed tissues and membranes. Inhibitions with specific carbohydrate were carried out. AK, KA, SCC and BCC showed lower expression of -D-glucose/mannose and -L-fucose residues compared to normal tissue. Cutaneous tumors displayed higher expression of Gal-(1-3)-GalNAc residues than normal tissue. AK and SCC exhibited higher expression ofNeu5Ac-(2,3)Gal residues than normal epidermis. KA and BCC showed equivalent RLU values compared to normal tissue. The RLU values decreased when the lectins were incubated with their specific carbohydrate. The constant values and maximum binding sites on the membranes were calculated for each lectin using the equation obtained from hyperbolic curves, 2.4 x 10-7 M-1 ± 0.8 x 10-7 M-1and 1.3 x 10-3 mol . mg-1 ± 0.3 x 10-3 mol . mg-1 (Con A); 0.9 x 10-6 M-1  0.4 x 10-6 M-1 and 0.021 x 10-3 mol . mg-1 ± 0.003 x 10-3 mol . mg-1 (WGA) and 2.0 x 10-6 M-1  0.9 x 10-6 M-1 and 0.069 x 10-3 mol . mg-1 ± 0.010 x 10-3 mol . mg-1 (PNA). The chemiluminescence method allowed quantitative assessment of the carbohydrate expression in cutaneous tissues and was an analytical technique efficient to investigate the complexation of lectin to carbohydrate through Langmuir model, combining the specifity this interaction and sensibility of chemiluminescent assays.

Orientadores: Jaime Aparecido Cury, Claudia de Mattos Bellato / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-04T22:02:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Leme_AdrianaFrancoPaes_D.pdf: 2753472 bytes, checksum: 173787317b0f0d3cfb8bd986c229086d (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: A cárie dental é uma doença biofilme-dependente e os carboidratos fermentáveis são considerados os fatores ambientais chaves envolvidos na iniciação e desenvolvimento desse processo. Algumas hipóteses baseadas na estrutura, composição e cinética dos íons no biofilme têm sido sugeridas para explicar a maior cariogenicidade do biofilme dental formado na presença de sacarose. Dentre estas, a expressão diferencial de proteínas bacterianas e presença ou ausência de proteínas salivares no biofilme formado na presença e ausência de sacarose tem sido sugerida. Essa tese é composta de dois artigos. O primeiro discute o papel da sacarose na formação do biofilme dental cariogênico e o segundo avalia as proteínas do biofilme formado in situ na presença da sacarose. Entre as várias hipóteses para explicar a menor concentração de íons no biofilme, a hipótese da ausência de proteínas ligadoras de cálcio no biofilme formado na presença de sacarose parece explicar esse fenômeno. No segundo estudo, proteínas ligadoras de cálcio foram identificadas somente no biofilme formado na ausência de sacarose, o que ajudaria a explicar a alta concentração de cálcio na sua matriz. Proteínas de origem bacteriana também foram identificadas e a maioria está associada com funções de manutenção do metabolismo energético, síntese de aminoácidos, tradução e proteínas relacionadas ao estresse. Diferentes proteínas de resposta ao estresse foram expressas nas duas condições avaliadas, sugerindo respostas específicas de adaptação para o biofilme formado na presença e ausência de sacarose. Nossos resultados mostram que a caracterização e estudo da função da proteína no biofilme dental podem ajudar a elucidar importantes aspectos envolvidos na iniciação e desenvolvimento da cárie dental / Abstract: Dental caries is a biofilm-dependent oral disease, and fermentable dietary carbohydrates are the key environmental factors involved with its initiation and development. Some hypotheses based on the structure, composition and ion kinetic aspects of biofilm have been suggested to explain the cariogenicity of biofilm formed in the presence of sucrose. Among them, the differential expression of bacteria proteins and the presence and absence of salivary proteins in biofilm formed in the presence and absence of sucrose has been suggested. Thus, this thesis was comprised by two manuscripts. The first discusses the role of sucrose in cariogenic dental biofilm formation and the second evaluates the proteins from biofilm formed in situ in the presence of sucrose. Among the hypotheses to explain the low inorganic concentration in the biofilm, the absence of calcium-binding proteins in biofilm formed in the presence of sucrose can help explain it. In the second study, calcium-binding proteins were identified only in biofilm formed in the absence of sucrose and help explain the higher calcium concentration in biofilm matrix. Proteins from oral microorganisms were also identified and most of them were associated to housekeeping functions, such as energy metabolism, amino acid biosynthesis, translation and stress-related proteins. Different stress-responsive proteins were expressed in the two conditions evaluated, suggesting specific adaptive-response in biofilms formed in the presence and absence of sucrose. Our results show that the characterization and the study of protein function in dental biofilm help explain important aspects involved with the initiation and development of dental carles / Doutorado / Cariologia / Doutor em Odontologia

Orientador: Rosiane Lopes da Cunha / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-05T21:42:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Braga_AnaLuizaMattos_D.pdf: 3362536 bytes, checksum: 58d82bf888ded45f62114695be4bbf6e (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: A utilização de diversos biopolímeros é uma prática comum nas indústrias de alimentos, especialmente em produtos lácticos, embutidos e a base de soja. O objetivo geral deste trabalho foi estudar as interações entre proteínas e polissacarídeos em sistemas contendo, ou não, co-soluto, em solução aquosa (pH 7,0) ou géis acidificados. Dentre as proteínas e os polissacarídeos utilizados na indústria de alimentos, foram estudados mais profundamente a goma xantana, o caseinato de sódio e o isolado protéico de soja (tanto em solução quanto em géis). Os polissacarídeos jataí (LBG), gelana, Na-alginato e k-carragena foram estudados apenas em soluções. As interações entre os componentes foram estudadas 1) por microscopias confocal, de força atômica e de contraste de fases e rheo-SALS (¿small angle light scattering¿); 2) por reologia a baixas e altas deformações, em cisalhamento ou compressão; 3) por análises químicas para determinar o tipo de força das interações. Os estudos sobre as propriedades físicas de soluções puras de biopolímeros mostraram que soluções de proteína seguem um comportamento Newtoniano, enquanto que os polissacarídeos apresentam comportamento Newtoniano a baixa concentração e pseudoplástico com o aumento desta. O tratamento térmico de soluções de xantana bem como a adição de sacarose reduziram a elasticidade da solução, sendo que a adição de sacarose afetou as propriedades reológicas apenas de soluções anisotrópicas ou bifásicas (anisotropia e isotropia simultâneas). Um novo modelo baseado na equação de BST (Blatz, Sharda, Tschoegl, 1974) foi proposto para predizer um maior número de propriedades mecânicas dos géis biopoliméricos tendo sido observado um bom ajuste dos dados. Quanto mais lenta a acidificação promovida por GDL, mais interconectada e forte foi a rede protéica em géis puros de Na-caseinato e SPI. O aumento da tensão e deformação de ruptura de géis formados com GDL foi obtida pelo aumento da concentração de proteína em géis puros de SPI, pela adição de xantana ou pela redução do conteúdo de proteína em géis contendo xantana. Por outro lado, a adição de xantana enfraqueceu os géis térmicos de SPI, provavelmente devido a ligação deste polissacarídeo com a sub-unidade b-7S. Em soluções aquosas pH 7,0, a k-carragena foi mais compatível com o Na-caseinato e com SPI do que o Na-alginato. No entanto, os resultados de ¿rheo-SALS¿ e CLSM mostraram que misturas de caseinato e alginato apresentaram maior capacidade de formar emulsões do tipo água-água do que sistemas com carragena. Além disto, o sistema com SPI e Na-alginato também formou emulsão, mas com a fase dispersa de proteína gelificada. Misturas com gelana apresentaram-se homogêneas devido a baixa tensão interfacial do sistema. Palavras-chave: proteína, polissacarídeo, interação, gel, emulsão, biopolímero, solução, reologia, separação de fases, CLSM, ¿rheo-SALS¿ / Abstract: Biopolymers are widely used in dairy products, canned foods, bakery products, salad dressings, beverages, sauces, soups and other processed foodstuffs to improve textural characteristics, flavour and shelf life. The aim of the present Ph.D. thesis was to study the protein-polysaccharide interactions in aqueous systems (pH 7.0) or acidified gels. It was studied seven different biopolymers used in the food industry, being two proteins and five polysaccharides. Soy protein isolate (SPI), Na-caseinate and xanthan were studied in aqueous solutions and gels systems, while locust bean gum (LBG), gellan, Na-alginate and k-carrageenan were studied only in aqueous solutions. The protein-polysaccharide interactions were evaluated as following: 1) microstructures ¿ by using confocal (CLSM), atomic force and phase contrast microscopes and rheo-SALS (small angle light scattering); 2) macrostructures, evaluated trough small- and large-strain rheology under shear or compression; 3) chemical analysis - in order to determine the kind of interaction forces that maintained the gels structure. The results on the physical properties of pure biopolymers solutions revealed that the proteins showed Newtonian behaviour, while the polysaccharides showed either Newtonian or non-Newtonian behaviour depending on its type and solution concentration. The annealing temperature of xanthan solutions and the addition of sucrose caused a reduction on the solution elasticity. It was observed that sucrose affected the rheological properties over all frequency range studied for initially anisotropic or biphasic xanthan solutions. It was proposed a new model based on BST (Blatz, Sharda, Tschoegl, 1974) equation to predict a great number of mechanical properties, which revealed a very good fit to the data. The slower the acidification by GDL (glucone-delta-lactone) it was observed a more interconnected and harder network in Na caseinate and SPI pure gels. The increase of the breaking stress or strain was obtained by increasing the SPI concentration in pure gels, by adding xanthan or by increasing the protein concentration in gels made with xanthan. In another hand, the addtion of xanthan let to weaker heat-induced SPI gels, which was attributed to the electrostatic interactions between xanthan and the b-7S subunit of SPI. In mixed protein-polysaccharide solutions, the results indicated that k-carrageenan was more compatible with both soy protein and Nacaseinate than alginate. However, the Na-caseinate ¿ Na-alginate mixture showed a greater capacity to form water-in-water emulsions than Na-caseinate - carrageenan system as observed by rheo-SALS and CLSM. In addition, the system with SPI and Na-alginate also formed emulsions but with a gelified protein dispersed phase. The interfacial tension of systems containing gellan was very low resulting in homogeneous mixtures. Keywords: proteins, polysaccharides, interaction, gel, emulsion, biopolymer solution, rheology, phase separation, CLSM, rheo-SALS / Doutorado / Doutor em Engenharia de Alimentos

Orientador: Gil Eduardo Serra / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-21T21:03:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Assis_ElaineMeirede_D.pdf: 4507712 bytes, checksum: 47b546d8fc82531b28946f071612f253 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: A parede celular de levedura de fermentação industrial de cerveja (Saccharomyces cerevisiae) é composta basicamente de polissacarídeos, representando um material que pode ter utilização industrial e importante valor econômico. Embora exista um considerável conhecimento da estrutura dos polissacarídeos componentes da parede celular de S. cerevisiae, neste trabalho foram estudadas duas fontes comerciais representadas por: a) células residuais de levedura de fermentação industrial de cerveja; b) parede celular residual de produção de extrato de levedura, com autólise das células referidas no item a. O processo de rompimento das células intactas de leveduras foi realizado em um moinho de esferas de vidro em escala piloto (Dyno-Milí) e otimizado, permitindo atingir aproximadamente 95% de rompimento. O fracionamento delineado permite uma separação seqüencial de frações a partir das paredes brutas, e, praticamente, isolar frações purificadas e homogêneas e assim determinar o polissacarídeo componente de cada uma e indiretamente sua ocorrência nas frações de origem. Cada fração foi quantificada, caracterizada quimicamente e o polissacarídeo teve sua estrutura identificada. Para a verificação da estrutura as amostras foram submetidas às análises por CG-EM, RMN13C e espectrometria de infravermelho (IR). A parede celular obtida por rompimento mecânico apresentou um rendimento de 30% do peso total da célula em base seca. As frações de polissacarídeos isoladas da parede celular obtida por rompimento e parede celular industrial residual apresentaram, respectivamente, um rendimento em peso seco em relação à parede celular de: 16,7 e 11,2% de glicoproteína; 7,1 e 7,8% de manana; 0,8 e 1,0% de glucana álcali solúvel; 59,2 e 63,8% de glucana insolúvel, e 1,8 e 2,2% de glucana ácido solúvel, respectivamente. Quanto à glicoproteína, quatro subtrações foram isoladas, com 1,3 e 2,7% (fração A), 56,3 e 44,2% (fração B), 10,5 e 12,0% (fração C) e, 10,6 e 12,7% (fração D). As três principais frações de polissacarídeos da parede celular, quantitativamente, foram a glicoproteína, a manana e a glucana insolúvel. As duas primeiras tiveram seu polissacarídeo confirmado como a-D-{1->6) manopiranana 2-O-substituída, com ramificações a-D-(1->2) manopiranosidicas e uma unidade terminal não redutora a-D-(1-»3) manopiranosídica; a glucana insolúvel foi confirmada como ß-D-(1->3) glucopiranana. Das subtrações isoladas a partir da glicoproteína através de fracionamento com Cetavlon, a fração mais abundante (Fração B) teve seu polissacarídeo identificado com estrutura idêntica à da fração de manana. O RNA presente na parede celular foi encontrado integralmente na fração A da glicoproteína, o que elimina tal composto das demais frações e subfrações. A parede celular constituída pelo subproduto industrial de autólise, mostrou características gerais similares à da parede separada por rompimento mecânico, ou seja, mesmo exposta a enzimas nativas e outras, durante a autólise, esta parede foi basimente preservada, embora seja possível observar seu comportamento diferenciado quanto à solubilização e dispersão durante as etapas de fracionamento. o trabalho consolida num texto único, novas informações em adição a outras, já descritas de forma segmentada e em condições diversas. / Abstract: The cell wall of yeast (S. cerevisiae) from industrial beer fermentation is composed of polissacharides which can be utilized in the food and others industries. Considerable information about the chemical structure of cell wall polissacharides of S. cerevisiae is related in the literature and was obtained from laboratory cell cultures grown in synthetic media. The aim of this work was to establish a parallel between the fractionation routine, the yield of each fraction and their compositions, using two commercial sources of raw material: a) residual yeast cells from industrial beer fermentation; b) residual cell wall material from the production of yeast extract, with autolysis of the cells referred to in item a. The rupture of the yeast cells was carried out in a pilot glass ball mill (Dyno Mill);this operation was optimized and reached near 95% of cell disruption. The fractionation design for the sequential separation of the fractions obtained from the cell wall, allowed for the isolation of virtually homogeneous purified fractions and the polysaccharide component's of each one could then be determined and indirectly their ocurrence in the original fractions. Each fraction was quantified, characterized chemically and identified structurally. The samples were subjected to GC-MS, 13C NMR and IR spectroscopy in order to determine the structure. The cell wall obtained mechanical rupture showed a yield of 30% of the dry cell weight. The purified polissacharide fractions of cell walls obtained from the mechanical rupture of cells and from the cell walls of industrial residues showed, respectively, the following yields in dry weight related to the cell wall: 16.7 and 11.2% of glycoprotein; 7.1 and 7.8% of mannan; 0.8 and 1.0% of alkali soluble glucan; 59.2 and 63.8% of insoluble glucan and 1.8 and 2.2% of acid soluble glucan. From the glycoprotein four subfractions were isolated with yields of: 1.3 and 2.7 %, fraction A; 56.3 and 44.2%, fraction B; 10.5 and 12.0 %, fraction C and 10.6 and 12.7 %, fraction D. The three quantitatively main fractions of cell wall polissacharides were glycoprotein, manan and insoluble glucan. The polissacharide of the former two fractions was confirmed as 2-O-substituted a-D- (1->6) mannopyranan with a-D-(1-»2) mannopyranosidic branches and a non- reducing terminal unit of a-D-(1->3) mannopyranoside; the insoluble glucan being ß-D-(1->3) glucopyranan. From the subfractionation of the glycoprotein using Cetavlon, the polissacharide of the most abundant subtraction (B) showed a structure identical to that of the mannan fraction. The RNA present in the cell wall was almost totally found in subtraction A, practically eliminated this compound from the other fractions and subtractions. The cell wall byproduct from industrial autolysis, showed almost the same general characteristics when compared to that from mechanical rupture, i.e., even when exposed to native and others enzymes during autolysis, it was basically preserved, although a different behaviour with respect to solubilization and dispersion during the fractionation procedures was observed. This work consolidates in one publication some new information together with information already described but in a fragmented form and obtained under a variety of conditions. / Doutorado / Doutor em Tecnologia de Alimentos

Orientador: Carlos Eduardo Pinheiro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-22T12:43:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_AlmenaradeSouzaFonseca_M.pdf: 2997804 bytes, checksum: a38c6684f77243ec7d052c713f98685d (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: Este trabalho teve como objetivo verificar a influência de carboidratos freqüentemente consumidos na dieta, como glicose, sacarose, frutose e dextrina, na fermentação e na síntese de polis sacarídeos extracelulares insolúveis pela placa dentária in vitro e a inibição destas atividades metabólicas promovida pelo íon citrato. Para tal, foi utilizada uma suspensão de placa dentária (10 mg / ml de tampão fosfato 0,01 pH 7,0), que foi incubada na presença dos substratos a 37°C, durante 2 horas para fermentação e 18 horas para a síntese de polissacarídeos extracelulares insolúveis (PEI). A fermentação foi medida por titulação com solução de NaOH 0,05N. A avaliação da síntese de PEI foi realizada pela dosagem de carboidratos totais. O citrato de sódio foi acrescentado aos meios de incubação, nas concentrações de 50 e 100 mM. Os resultados demonstraram que a glicose produziu a maior quantidade de ácidos e a sacarose sintetizou a maior quantidade de polissacarídeos extracelulares insolúveis, quando omparados com outros carboidratos. O capaz de inibir significativamente a polissacarídeos os extracelulares insolúveis, quando comparados com outros carboidratos. O capaz de inibir significativamente a polissacarídeos os extracelulares insolúveis / Abstract: The purpose of this work was to evaluate the influence of carbohydrates often consumed in diet, as glucose, sucrose, fructose and dextrio, on fermentation and synthesis of extracellular insoluble polysaccarides of dental paque, in vitro and the inhibition of these metabolic activities produced by citrate. So, it was used a suspension of dental paque (10 mg/ml of phosphate buffer 0,01M pH 7,0 ), that was incubated at presence of substrates at 37 'DEGREE' C, for 2 hours for fermentation and 18 hours for synthesis of insoluble, palysaccarides. The fermentation was measured by titration with 0.05N NaOH solution. The estimation of the synthesis of insoluble polysaccarides was achieved by dosage of total carbohydrates. The sodium citrate was increased in an incubation medium on 50 and 100 mM of concentration. The results indicated that the glucose showed the largest acid production activity and sucrose promoted the greatest synthesis of insoluble polysaccarides, when compared with the other carbohydrates. The citrate was able to inhibit the carbohydrate fermentation and showed itself a great inhibitor of synthesis of extracellular insoluble polysaccarides / Mestrado / Fisiologia e Biofisica do Sistema Estomatognatico / Mestre em Odontologia

Orientador: Jaime A. Cury / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-22T14:17:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ignacio_RosaFernanda_M.pdf: 2598353 bytes, checksum: db142b98904f9dc317e32a1605d0359d (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de um dentifrício contendo bicarbonato de sódio na contagem de estreptococos do grupo mutans, acidogenicidade e composição da placa dental. Vinte e três voluntários escovaram os dentes 3 vezes ao dia, tendo sido testadas três formulações de dentifrícios fluoretados (1500 ppm F), contendo ou bicarbonato de sódio (14%) mais carbonato de cálcio (CARB/BICAR), ou carbonato de cálcio (CARBONATO) ou silica (SÍLICA), num delineamento experimental do tipo duplo cego cruzado, em que cada cruzamento teve a duração de 30 dias, com um intervalo de 7 dias entre cada etapa, no qual foi utilizado o dentifrício SÍLICA... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: This investigation evaluated the effect of a baking soda-containing dentiftice on mutans streptococci counting, acidogenicity and composition of dental plaque. Twenty three volunteers brushing their teeth 3 times a day, tested 3 formulations oftluoride (1500 ppm F), containing or sodium bicarbonate (14%) associated with calcium carbonate (CARB/BICAR), or calcium carbonate (CARBONATE), or silica (SILICA), in a double blind crossover trial, done in 3 phases of 30 days each, with a 7-day washout period, during which SILICA dentiftice was used... Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Ciências

Orientador: Marcos Silveira Buckeridge / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-12T18:38:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lisboa_CesarGustavoSerafim_D.pdf: 1945488 bytes, checksum: 831197d663c65044a02bdfd7ba13598f (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: Aplicações biotecnológicas de polissacarídeos de plantas: uma estratégia sustentável para a produção em demanda. Atualmente, a busca por novas fontes de materiais pode levar ao depósito de patentes. Isto é importante para que novos produtos, que apresentem características inovadoras, potencial de redução de custos, rotas de produção ambientalmente corretas, partição de benefícios e, finalmente, possibilitem a exploração de novos mercados de maneira sustentável. Nesse contexto, o presente trabalho teve como objetivo avaliar o potencial de uso de polissacarídeos de plantas de diferentes fontes nos setores de alimentos, farmacosméticos e papel. Os resultados são apresentados na forma de um artigo e 4 patentes. Os xiloglucanos de sementes de espécies nativas de plantas (Hymenaea courbaril) e de plântulas de eucalipto foram aplicados no processo de confecção do papel, demonstrando que suas propriedades mecânicas podem ser melhoradas. Resultados similares foram obtidos com galactomananos de sementes de Sesbania virgata e Dimorphandra mollis. O xiloglucano de H. courbaril foi estudado mais profundamente e demonstrou-se que pode ser também aplicado em cosméticos, pois não é citotóxico, é capaz de espessar formulações e interfere na produção de colágeno pela pele. As propriedades reológicas do galactomanano de D. mollis foram estudadas em comparação a outros galactomananos já utilizados na indústria. Demonstrou-se que ele é apropriado para várias aplicações em alimentos. Como um todo, nossos resultados indicam que tanto os polissacarídeos de sementes de espécies nativas como o de eucalipto podem ser utilizados em várias aplicações de tal forma que possam fazer parte de programas de uso sustentável da biodiversidade, levando a benefícios tecnológicos e também sociais. / Abstract: Biotechnological applications of plant polysaccharides: a sutainable strategy for production and demand. Nowdays, the search for new sources of materials can lead to new patent deposits. This is important because new products that display innovative features, cost reduction potential, environmentally clean production routes, partition of benefits and finally, may turn possible to explore differential market shares. These may be excellent socio-environmental and market shares for biotechnology companies. In this context, the present work aimed at evaluating the potential of use of plant polysaccharides from different sources in the food, farmacosmetic and paper industrial sectors. In the present work, we present studies that focus on the use of seed polysaccharides on applications on paper, cosmetics and food industries. The results are presented in the form of one article and 4 patents. The xyloglucan from seeds of native tropical tree species (Hymenaea courbaril - jatobá, Copaifera langsdorffii - copaiba) and from seedlings of Eucalyptus grandis (eucalypt) were applied to paper making and we demonstrated that several properties of paper can be improved by using these xyloglucans during preparation. Similar results were obtained with galactomann ans from Sesbania virgata and Dimorphandra mollis, two fast-growing legume trees. The polymers increased paper resistance to mechanical stress so that they can be applied for applications where more resistant papers (such as rapping paper) are used. The xyloglucan from H. courbaril was studied more deeply, demonstrating that it can be applied in cosmetics as it is not cytotoxic and can be used to improve skin biochemistry such as collagen production. Galactomannan from D. mollis was studied from the rheological point of view and its properties were compared with other commercially used galactomannans. Our results showed that D. mollis galactomannan is appropriate to several applications in food industries. As a whole, our results indicate that both, native seeds and seeds of eucalyptus, might be used in several industrial applications so that these might be used as part of programs of sustainable use of biodiversity, leading to social and technological benefits to society. / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

O Streptococcus pneumoniae, também conhecido como pneumococo, é um importante agente etiológico causador de pneumonia, bacteremia, meningite e otite aguda do ouvido médio, acometendo especialmente crianças e idosos. A cápsula polissacarídica (PS) é o fator de virulência mais importante e localiza-se na superfície do microrganismo e tem ação anti-fagocítica in vivo. O pneumococo expressa pelo menos 91 cápsulas diferentes, que são química e sorologicamente distintas. Usualmente, a cápsula é o antígeno das vacinas anti-pneumocócicas, tanto como polissacarídeo livre ou conjugado a proteínas. O sorotipo 6B acomete principalmente crianças e é o segundo mais prevalente no Brasil, e a otimização das condições de cultivo buscando maior produtividade em PS é o alvo desta tese. Simultaneamente, também foi investigada a influência do inóculo e da glicose residual no instante do pulso ou do início da alimentação em cultivos descontínuos alimentados. Nos cultivos descontínuos alimentados foi observado que quanto menor a densidade óptica da cultura do inóculo, maior a concentração de PS obtida. A concentração da glicose residual no momento do pulso provavelmente influenciou a produção de PS: a produção foi maior quando o pulso foi dado ainda em altas concentrações de substrato. Por isso, obteve-se uma produção de PS ~390 mg/L em cultivo descontínuo alimentado com pulso, quando DO 600 nm da cultura do inóculo ~1,6 e o pulso de glicose e acetato de amônio ~15 g/L. Observou-se também que, mesmo com DO do inóculo ~1,65, a produção de PS foi somente 248 mg/L, devido à aplicação do pulso quando a concentração de glicose residual era ~4,5 g/L. A menor produção de PS foi obtida quando a DO da cultura do inóculo foi ~2,6 e a concentração de glicose residual ~3,4 g/L, gerando somente 194 mg/L de PS. Assim, cultivos descontínuos alimentados com pulso renderam melhores resultados que os cultivos descontínuos alimentados. A alimentação constante rendeu maior quantidade de PS quando comparada à alimentação exponencial. E tanto os ensaios descontínuos com ou sem pulso e os descontínuos alimentados foram melhores do que os cultivos contínuos, principalmente se considerarmos a facilidade de operação. O efeito da concentração residual da glicose no instante da alimentação na produção de PS é provavelmente influenciado pela presença de outros componentes do meio, devido aos requerimentos nutricionais do pneumococo. O estado fisiológico do inóculo determinou uma importante correlação entre a produção de PS nos cultivos descontínuos alimentados do sorotipo 6B: cultura do inóculo no meio da fase exponencial rendeu maior produção de PS. Esta correlação poderia ser conseqüência do perfil de crescimento do microrganismo in vitro e da ação de enzimas líticas após a fase exponencial. Foi observado, portanto, um efeito sinérgico entre a DO da cultura do inóculo, a concentração de glicose residual no momento de alimentação e produção de PS nos cultivos descontínuos alimentados. / Streptococcus pneumoniae is a major pathogen commonly responsible for pneumonia, bacteraemia, meningitis and otitis media, especially among young children and older adults. The most prominent pneumococcal virulence factor is the capsular polysaccharide (PS), which coats the surface of the bacterium and acts as an antiphagocytic factor in vivo. S. pneumoniae express at least 91 distinct capsules which are chemically and serologically distinct. The capsule is currently used as antigen in pneumococcal vaccines, either as free polysaccharide or conjugated to proteins. Pneumococcal serotype 6B is the second most prevalent in Brazil and the optimization of cultivation conditions is part of this study. Simultaneously we investigated the influence of the growth phase of the inoculum and the residual glucose concentration at the instant of the pulse or the start of feeding on PS production in batch and fed-batch cultivation. Streptococcus pneumoniae serotype 6B strain ST 433/03 was used. Bench scale experiments were carried out using a variant of the Hoeprich medium, containing glucose, acid-hydrolyzed casein, dialyzed yeast extract, L-glutamine and asparagine as nitrogen sources, choline as a growth factor and salts. The experiments were conducted in bioreactors monitored by the LabView 7.1program. It was observed in fed-batch cultivation, that the lower was the OD of the starter culture, the higher was the PS concentration obtained. The residual glucose concentration at the moment of the pulse also influenced the PS production: the PS production was higher when the pulse was given at higher residual glucose concentration. Hence, in fed-batch culture the highest PS production (387 mg/L) was obtained using an OD=1.6 of the starter culture and giving the pulse when the residual glucose was ~15 g/L. Using a similar inoculum (OD=1.65), the PS concentration reached 248 mg/L after giving the pulse when the residual glucose was 4.5 g/L. The lowest PS production was obtained when a culture with an OD=2.6 was inoculated into the reactor and the pulse was given when the residual glucose was 3.4 g/L (PS=194 mg/L). The effect of the residual glucose concentration at the instant of the start of feeding on PS production was probably influenced by the presence of other components in the concentrated feeding medium, which could better fit the nutritional requirements of the microorganism. The physiological state of the inoculum showed an important correlation to the PS production in batch and fed-batch cultivation of S. pneumoniae serotype 6B: mid-log phase inocula yielded high PS production. This correlation is consequence of the in vitro growth profile, the action of lytic enzymes after the log phase. In fed-batch cultivation, it was also observed a synergic effect of the inoculum OD and the residual glucose concentration in the moment of the pulse on PS production.

Submitted by Helena Bejio (helena.bejio@unioeste.br) on 2018-06-12T01:03:10Z No. of bitstreams: 2 Idiana_Silva_2018.pdf: 1212214 bytes, checksum: 5f97e888c82a91ecafe92923bd3081b9 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-12T01:03:10Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Idiana_Silva_2018.pdf: 1212214 bytes, checksum: 5f97e888c82a91ecafe92923bd3081b9 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2018-03-01 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The objective of this study was to evaluate the dry residue of cassava (DRC) and its inclusion, associated or not to the carbohydrase enzyme supplementation, on the production of broilers in the growth and finishing phases. In experiment I, a metabolism assay was performed using 144 birds from 22 to 32 days of age. Was used a 2x4 + RR factorial scheme, consisting of one reference diet without addition of RSF and four experimental treatments with increasing inclusion levels of DRC (10; 20, 30 and 40%) and the suplementation or not with an enzymatic blend of carbohydrases. The DRC was submitted to bromatological analysis and excreta were also submitted to bromatological analysis for the determination of AME, AMEn, CAME and CAMEn. In experiment II, a performance test was performed using 950 broiler chickens from 21 to 42 days, in a 2x5 factorial scheme consisting of five experimental treatments with increasing inclusion levels of DRC (0; 2,5; 5,0; 7 , 5, and 10%) and the supplementation or not with an enzymatic blend of carbohydrases. At 42 days of age, the performance, biochemical profile, carcass yield, cut and organs and evaluation of meat quality were evaluated. As a result, the composition found for DRC in experiment I in the natural material was 89.86% DM, 0.98% CP, 3519 kcal kg -1 GE, 0.19% EE, 27% of NDF, 19.5% of ADF, 0.33% of calcium, 0.43% of phosphorus, 0.46% of potassium and 0.12% of magnesium. The analysis of variance showed no interaction between the addition of carbohydrases and the inclusion of increasing levels of DRC for the energetic values and the metabolizability coefficients, however, the inclusion of enzymes independent of the DRC levels provided a significant increase in the AME and AMEn. There was a quadratic effect for the increasing levels of inclusion of DRC, resulting in a higher value of AME and CAME at the estimated level of 35.47% and for AME and CAME at the estimated level of 35.86% inclusion of DRC. For the variables determined in experiment II, interaction between levels of inclusion of DRC and enzymatic supplementation for feed conversion (FC) was observed for the performance variables. Birds receiving carbohydrate-free diets presented a linear decrease of FC with the increased inclusion levels and birds that was supplemented with carbohydrates maintained the FC. There was interaction between DRC inclusion levels and the addition of enzymes to breast yield. A linear reduction in the relative weight of the gizzard was observed as there was an increase in inclusion levels, and a linear increase in the relative weight of the small intestine and the enzyme effect on this parameter were observed. The blood profile had significant results for Creatinine and GammaGT. The "b *" coloration variable of the breast meat and poultry feet presented a linear reduction as the DRC inclusion levels increased. For meat quality, the water retention capacity behaved in a quadratic manner as the DRC inclusion levels increased. For the other variables, no significant difference was found. It was concluded that the highest levels of AME and AMEn were found for the mean inclusion level of the DRC of 35% and that enzymatic supplementation could promote increase of these parameters by up to 12% in broiler diets in the growth phase and that DRC can be used in the diet of broiler chickens up to the 10% level, provided that they are supplemented with carbohydrases to maintain the feed conversion of broiler chickens in the growth and finishing phase. / A realização deste estudo teve como objetivo avaliar o resíduo seco de fecularia (RSF) e sua inclusão associada ou não à suplementação de enzimas carboidrases sobre a produção de frangos de corte nas fases de crescimento e terminação. No experimento I, foi realizado um ensaio de metabolismo utilizando 144 aves dos 22 aos 32 dias de idade. Foi utilizado um esquema fatorial 2x4 mais uma ração referência (RR), a qual ração referência sem adição de RSF e quatro tratamentos experimentais com níveis crescentes de inclusão do RSF (10; 20; 30 e 40%) e a suplementação ou não com um blend enzimático de carboidrases. O RSF foi submetido à análises bromatológicas e as excretas também foram e submetidas à análises bromatólogicas para determinação da EMA, EMAn, CMA e CMAn. No experimento II, foi realizado um ensaio de desempenho utilizando 950 frangos de corte de 21 a 42 dias de idade, em esquema fatorial 2x5 constituído de cinco tratamentos experimentais com níveis crescentes de inclusão do RSF (0; 2,5; 5,0; 7,5; e 10%) e a suplementação ou não com um blend enzimático de carboidrases. Aos 42 dias de idade, foi avaliado o desempenho, perfíl bioquímico, rendimento de carcaça, corte e órgãos e avaliação da qualidade da carne. Como resultados, a composição encontrada para o RSF no experimento I, na matéria natural, foi de 89,86% de MS, 0,98% de PB, 3519 kcal kg-1 de EB, 0,19% de EE, 27% de FDN, 19,5% de FDA, 0,33% de cálcio, 0,43% de fósforo, 0,46% de potássio e 0,12% de magnésio. A análise de variância não demonstrou interação entre a adição de carboidrases e a inclusão de níveis crescentes de RSF para os valores energéticos e os coeficientes de metabolizabilidade, entretanto, a inclusão de enzimas, independente dos níveis de RSF proporcionou aumento significativo nos valores de EMA e EMAn. Houve efeito quadrático para os níveis crescentes de inclusão do RSF, resultando em um maior valor de EMA e CMA ao nível estimado de 35,47% e para EMAn e CMAn ao nível estimado de 35,86% de inclusão do RSF. Para as variáveis determinadas no experimento II, para o desempenho foi constatada interação entre os níveis de inclusão do RSF e a suplementação enzimática para a CA. As aves que receberam dietas isentas de carboidrases apresentaram piora linear da CA conforme aumento dos níveis de inclusão e as aves que receberam suplementação enzimática mantiveram a CA. Houve interação entre os níveis de inclusão do RSF e a adição de enzimas para rendimento de peito. Observou-se redução linear do peso relativo da moela à medida que houve aumento dos níveis de inclusão, e, oposto à isso, observou-se aumento linear do peso relativo do intestino delgado e efeito da enzima sobre este parâmetro. O perfil sanguíneo teve resultados significativos para Creatinina e GamaGT. A variável de coloração “b*” da carne do peito e pés das aves, apresentou redução linear conforme aumento dos níveis de inclusão do RSF. Para qualidade de carne, a capacidade de retenção de água se comportou de forma quadrática conforme o aumento dos níveis de inclusão do RSF. Para as demais variáveis não foi constatada diferença significativa. Conclui-se que os maiores níveis de EMA e EMAn foram encontrados para o nível de inclusão médio do RSF de 35%, que a suplementação enzimática pode promover aumento desses parâmetros em até 12% em dietas para frangos de corte na fase de crescimento e que o RSF pode ser utilizado nas dieta de frangos de corte até o nível avaliado de 10% desde que suplementados com carboidrases para manutenção da conversão alimentar.