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Influ?ncia da laserterapia na prolifera??o de c?lulas-tronco do ligamento periodontal humanoSoares, Diego Moura 25 January 2013 (has links)
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Previous issue date: 2013-01-25 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Low level laser irradiation (LLLI) has been used in Dentistry to promote wound
healing and tissue regeneration. The literature shows a positive effect of LLLI
on cell proliferation, but little is known about their effectiveness in promoting
stem cells proliferation. The aim of this study was to evaluate the effect of LLLI
on the proliferative rate of human periodontal ligament stem cells. Extracts of
periodontal ligament were isolated from two third molars removed by surgical
and/or orthodontic indication. After enzymatic digestion, the cells were grown in
α-MEM culture medium supplemented with antibiotics and 15% fetal bovine
serum. On the third subculture, the cells were irradiated with a InGaAlP-diode
laser, using two different energy densities (0,5J/cm
2
- 16 seconds and 1,0J/cm?
- 33 seconds), with wavelength of 660nm and output power of 30mW. A new
irradiation, using the same parameters, was performed 48h after the first. A
control group (non irradiated) was kept under the same experimental culture
conditions. The Trypan blue exclusion test and the mitochondrial activity of the
cells measured by MTT [3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-Diphenyltetrazolium
Bromide] essay were performed to assess the cell proliferation in the intervals
of 0, 24, 48 e 72 h after irradiation. The data of cell counts were submitted to
nonparametrical statistical tests (Kruskal-Wallis and Mann-Whitney),
considering a confidence interval of 95%. DAPI (4 -6-Diamidino-2-phenylindole)
staining of the cells was performed at 72h interval to evaluate possible nuclear
morphological changes induced by LLLI. The results of this study show that the
energy density of 1,0 J/cm? promoted greater cell proliferation compared to the
other groups (control and 0,5 J/cm?) at intervals of 48 and 72h. The
mitochondrial activity measured by MTT essay showed similar results to the
Trypan blue cell counting test. The group irradiated with 1,0J/cm? exhibited a
significantly higher MTT activity in the intervals of 48 and 72h, when compared
to the group irradiated with 0,5J/cm?. No nuclear morphological change was
observed in the cells from the three groups studied. It is concluded that LLLI
has stimulatory effects on the proliferation of human periodontal ligament stem
cells. Therefore, the use of laser irradiation in this cell type may be important to
promote future advances in periodontal regeneration / O laser de baixa intensidade (LBI) tem sido utilizado na Odontologia com a
finalidade de promover cicatriza??o e regenera??o dos tecidos. A literatura
mostra um efeito positivo do LBI na prolifera??o celular, por?m pouco se sabe
sobre a sua efic?cia na prolifera??o de c?lulas-tronco. O objetivo deste estudo
foi avaliar o efeito da irradia??o do LBI na taxa proliferativa de c?lulas -tronco do
ligamento periodontal humano. Extratos de ligamento periodontal foram
isolados de dois terceiros molares h?gidos removidos por indica? ?o cir?rgica
e/ou ortod?ntica. Ap?s a digest?o enzim?tica, as c?lulas foram cultivadas em
meio de cultura α-MEM suplementado com antibi?ticos e 15% de soro fetal
bovino. No terceiro subcultivo, as c?lulas foram irradiadas com um laser diodo
InGaAlP, utilizando-se duas diferentes densidades de energia (0,5J/cm
2
- 16
segundos e 1,0J/cm? - 33 segundos), comprimento de onda de 660nm e
pot?ncia de 30mW. Uma nova irradia??o, utilizando os mesmos par?metros, foi
realizada 48 h ap?s a primeira. Um grupo controle (n?o irradiado) foi mantido
nas mesmas condi??es experimentais de cultivo. O m?todo de exclus?o por
azul de Tripan e a atividade mitocondrial das c?lulas medida atrav?s do ensaio
de MTT [brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetraz?lio], nos intervalos
de 0, 24, 48 e 72 h p?s-irradia??o, foram utilizados a fim de avaliar a
prolifera??o celular. Os dados das contagens celulares foram submetidos a
testes estat?sticos n?o param?tricos de Kruskal-Wallis e Mann-Whitney,
considerando um intervalo de confian?a de 95%. Com o objetivo de verificar
poss?veis altera??es morfol?gicas nucleares induzidas pelo laser, as c?lulas
foram submetidas ? marca??o com DAPI (4 -6-Diamidino-2-phenylindole) no
intervalo de 72 h. Os resultados do presente estudo mostraram que a
densidade de energia de 1,0 J/cm? promoveu maior prolifera??o das c?lulas em
compara??o com os outros grupos (controle e laser 0,5 J/cm?) nos intervalos de
48 e 72 h. A atividade mitocondrial, medida pelo ensaio de MTT, apresentou
resultados semelhantes ?s contagem celulares com azul de Tripan, com o
grupo irradiado com 1,0 J/cm? exibindo uma atividade significativamente maior
do MTT nos intervalos de 48 e 72 h, quando comparado com o grupo irradiado
com 0,5 J/cm?. Nenhuma altera??o morfol?gica nuclear foi observada, tanto
das c?lulas do grupo controle quanto nas c?lulas irradiadas. Conclui-se que o
LBI apresenta efeitos estimulantes sobre a prolifera??o de c?lulas-tronco do
ligamento periodontal humano. Portanto, a aplica??o da laserterapia neste tipo
celular pode ser importante para futuros avan?os na regenera??o periodontal
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Efeito de glucanas do fungo Caripia montagnei em modelo de inflama??o intestinal induzida por tnbs em ratos Wistar e em c?lulas de carcinoma de c?lon humano HT-29Santos, Marilia da Silva Nascimento 08 April 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014-04-08 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / Compounds derived from fungi has been the subject of many studies in order to broaden the knowledge of their bioactive potential. Polysaccharides from Caripia montagnei have been described to possess anti-inflammatory and antioxidant properties. In this study, glucans extracted from Caripia montagnei mushroom were chemically characterized and their effects evaluated at different doses and intervals of treatment. It was also described their action on colonic injury in the model of colitis induced by 2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid (TNBS), and its action on cells of the human colon carcinoma (HT-29). Compounds extracted of C. montagnei contain high level of carbohydrates (96%), low content of phenolic compounds (1.5%) and low contamination with proteins (2.5%). The (FT-IR) and (NMR) analysis showed that polysaccharides from this species of mushroom are composed of α- and β-glucans. The colonic damage was evaluated by macroscopic, histological, biochemical and immunologic analyses. The results showed a reduction of colonic lesions in all groups treated with the glucans of Caripia montagnei (GCM). GCM significantly reduced the levels of IL-6 (50 and 75 mg/kg, p < 0.05), a major inflammatory cytokine. Biochemical analyses showed that such glucans acted on reducing levels of alkaline phosphatase (75 mg/kg, p < 0.01), nitric oxide (p < 0.001), and myeloperoxidase (p < 0.001). These results were confirmed microscopically by the reduction of cellular infiltration. The increase of catalase activity suggest a protective effect of GCM on colonic tissue, confirming their anti-inflammatory potential. GCM displayed cytostatic activity against HT-29 cells, causing accumulation of cells in G1 phase, blocking the cycle cell progression. Those glucans also showed ability to modulate the adhesion of HT-29 cells to Matrigel? and reduced the oxidative stress. The antiproliferative activity against HT-29 cells displayed by GCM (p <0.001) can be attributed to its cytostatic activity and induction of apoptosis by GCM / Compostos derivados de fungos tem sido alvo de muitos estudos a fim de desenvolver o conhecimento acerca de seu potencial bioativo. Polissacar?deos de Caripia montagnei j? foram descritos por possu?rem propriedades anti-inflamat?ria e antioxidante. Neste estudo, os polissacar?deos extra?dos do fungo Caripia montagnei foram caracterizados quimicamente e seus efeitos sobre as les?es intestinais foram avaliados em diferentes intervalos de tratamento no modelo de colite induzida por ?cido 2,4,6 - trinitrobenzenossulf?nico (TNBS), verificou-se ainda sua a??o sobre c?lulas do carcinoma de c?lon humano, HT-29. Na an?lise realizada no extrato obtido de C. montagnei foi verificado que este ? formado principalmente, por carboidratos (96%) apresentando um baixo teor de compostos fen?licos (1,5%) e baixa contamina??o prot?ica (2,5%). As an?lises por espectroscopia de infra vermelho (FT-IR) e resson?ncia magn?tica nuclear (RMN) mostraram que os polissacar?deos desta esp?cie de fungo s?o α e β -glucanas. O dano col?nico foi avaliado por an?lises macrosc?picas, histol?gicas, bioqu?micas e imunol?gicas. Os resultados mostraram a redu??o das les?es no c?lon em todos os grupos tratados com as glucanas (GCM). GCM reduziram significativamente os n?veis de IL-6 (50 e 75 mg/Kg, p < 0,05), uma importante citocina inflamat?ria. As an?lises bioqu?micas mostraram que essas glucanas atuaram na redu??o dos n?veis de fosfatase alcalina (75 mg/Kg, p < 0,01), ?xido n?trico (p < 0,001) e mieloperoxidase (p < 0,001). Estes resultados foram confirmados pela redu??o da infiltra??o celular observado microscopicamente. O aumento da atividade da catalase, sugere um efeito protetor de GCM no tecido do c?lon, o que confirma o seu potencial anti-inflamat?rio. GCM mostraram atividade citost?tica sobre as c?lulas HT-29, causando ac?mulo de c?lulas na fase G1 e impedindo, assim, a progress?o do ciclo celular. As glucanas deste estudo tamb?m mostraram habilidade em modular a ades?o de c?lulas HT-29 ao Matrigel? e reduzir o estresse oxidativo nessas c?lulas. A atividade antiproliferativa contra c?lulas HT-29 exibida por GCM pode ser atribu?da ? sua a??o citost?tica ou indu??o da apoptose por essas glucanas
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Propriedades antioxidante, anti-hemost?stica e antiproliferativa de galactanas sulfatadas da alga vermelha hypnea musciformis (wulfen) j. V. LamourouxAlves, Monique Gabriela das Chagas Faustino 18 July 2011 (has links)
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Previous issue date: 2011-07-18 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / Marine algae are one of the major sources of biologic compounds. In
extracellular matrix of these organisms there are sulfated polysaccharides that
functions as structural components and provides protection against dehydration.
The fraction 1.0 (F1.0) rich in sulfated galactans obtained from red seaweed
Hypnea musciformis was physicochemical characterized and evaluated for
pharmacologic activity through antioxidant activity, cytotoxic action on
erythrocytes, anticoagulant, stimulatory action under antithrombotic heparan
sulfate synthesis and their effects on cell proliferation and cycle cell
progression. The main components of F1.0 were carbohydrates (49.70 ?
0.10%) and sulfate (44.59 ? 0.015%), presenting phenolic compounds (4.79 ?
0.016%) and low protein contamination (0.92 ? 0.001%). Fraction 1.0 showed
polidisperse profile and signs in infrared analysis in 1262, 1074 and 930, 900
and 850 attributed to sulfate esters S=O bond, presence of a 3,6-
anidrogalactose C-O bond, non-sulfated ?-D-galactose and a C-O-SO4 bond in
galactose C4, respectively. The fraction rich in sulfated galactans exhibited
strong antioxidant action under lipid peroxidation assay with IC50 of 0.003
mg/mL. Besides the inhibition of hemolysis induced by H2O2 in erythrocytes
treated with F1.0, this fraction did not promote significant cytotoxity under
erythrocytes membranes. F1.0 exhibited low anticoagulant activity causing
moderate direct inhibition of enzimatic activity of thrombin. This fraction
promoted stimulation around of 4.6 times on this synthesis of heparan sulfate
(HS) by rabbit aortic endothelial cells (RAEC) in culture when was compared
with non treated cells. The fraction of this algae displayed antiproliferative action
under RAEC cells causing incresing on cell number on S fase, blocking the
cycle cell progression. Thus F1.0 presented cytostatic and no cytotoxic action
under this cell lineage. These results suggest that F1.0 from H. musciformis
have antioxidant potential which is a great effect for a compound used as food
and in food industry which could be an alternative to food industry to prevent
quality decay of lipid containing food due to lipid peroxidation. These
polysaccharides prevent the lipid peroxidation once the fraction in study
exhibited strong inhibitory action of this process. Furthermore that F1.0 present
strong antithrombotic action promoting the stimulation of antithrombotic HS
synthesis by endothelial cells, being important for thrombosis preventing, by its
inhibitory action under reactive oxygen species (ROS) in some in vitro methods,
being involved in promotion of hypercoagulability state. / Algas marinhas s?o uma das principais fontes de compostos
biologicamente ativos. Na matriz extracelular desses organismos existem os
polissacar?deos sulfatados que funcionam como componente estrutural
prevenindo-a contra desidrata??o. A fra??o 1,0 (F1,0) rica em galactanas
sulfatadas obtida da alga vermelha Hypnea musciformis foi caracterizada
fisicoquimicamente e avaliada quanto a atividade farmacol?gica por meio de
ensaios de atividade antioxidante, a??o citot?xica sobre hem?cias, atividade
anticoagulante, a??o estimulat?ria sobre a s?ntese de heparam sulfato
antitromb?tico e seus efeitos na prolifera??o e progress?o do ciclo celular. Os
principais componentes da F1,0 foram carboidratos (49,70 ? 0,10%) e sulfato
(44,59 ? 0,015%), apresentando compostos fen?licos (4,79 ? 0,016%) e baixa
contamina??o prot?ica (0,92 ? 0,001%). F1,0 mostrou perfil polidisperso e
sinais na an?lise de infravermelho em 1262, 1074 e 930, 900 e 850 cm-1
atribu?dos a liga??es S=O de ?steres de sulfato, presen?a de liga??o C-O de
3,6-anidrogalactose, ?-D-galactose n?o sulfatada e liga??o C-O-SO4 no C4 da
galactose, respectivamente. A fra??o rica em galactanas sulfatadas exibiu forte
a??o antioxidante sobre o ensaio de peroxida??o lip?dica com IC50 de 0,003
mg/mL. Al?m da alta inibi??o da hem?lise induzida por H2O2 em hem?cias
humanas tratadas com F1,0, esta fra??o n?o promoveu citotoxicidade
significativa sobre a membrana de hem?cias. F1,0 exibiu baixa atividade
anticoagulante, causando moderada inibi??o direta da atividade enzim?tica da
trombina. Esta fra??o promoveu estimula??o de cerca de 4,6 vezes na s?ntese
de heparam sulfato (HS) pelas c?lulas endoteliais da aorta de coelho (RAEC),
em cultura, quando comparadas com as c?lulas n?o tratadas com F1,0. A
fra??o dessa alga mostrou atividade antiproliferativa sobre as c?lulas RAEC,
causando aumento no n?mero de c?lulas na fase S, impedindo a progress?o
do ciclo celular. Assim, F1,0 apresentou a??o citost?tica e n?o citot?xica sobre
esta linhagem celular. Esses resultados sugerem que F1,0 de H. musciformis
tem potencial antioxidante, efeito importante para um composto utilizado como
alimento e na ind?stria aliment?cia, podendo ser uma alternativa na ind?stria
aliment?cia para a preven??o do decaimento da qualidade dos alimentos
contendo lip?dio devido a peroxida??o lip?dica, uma vez que a fra??o em estudo
exibiu forte a??o inibit?ria sobre a peroxida??o lip?dica. Al?m disso F1,0
apresenta forte a??o antitromb?tica promovendo a estimula??o da s?ntese de
HS antitromb?tico pelas c?lulas endoteliais, sendo ?til na preven??o da
trombose, devido tamb?m a sua a??o inibit?ria sobre as esp?cies reativas do
oxig?nio (ROS) em alguns sistemas in vitro, estando envolvidos na promo??o
de estado de hipercoagulabilidade.
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Caracteriza??o estrutural e avalia??o das atividades farmacol?gicas da fucana B extra?da da alga Dictyota menstrualisCosta, Thiago Gomes 06 February 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014-02-06 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Seaweeds are a major source of biologically active compounds . In the extracellular matrix of these organisms are sulfated polysaccharides that functions as structural components preventing it against dehydration. The fraction 0.9 (FucB) rich in sulfated fucans obtained from brown seaweed Dictyota menstrualis was chemical characterized and evaluated for pharmacological activity by testing anticoagulant activity, stimulatory action on the synthesis of an antithrombotic heparan sulfate, antioxidant activity and its effects in cell proliferation. The main components were FucB carbohydrates (49.80 ? 0.10 %) and sulfate (42.30 ? 0.015 %), with phenolic compounds ( 3.86 ? 0.016 %) and low protein contamination ( 0.58 ? 0.001 % ) . FucB showed polydisperse profile and analysis of signals in the infrared at 1262, 1074 and 930 cm -1 and 840 assigned to S = O bonds sulfate esters , CO bond presence of 3,6- anhydrogalactose , β -D- galactose non- sulfated sulfate and the axial position of fucose C4 , respectively. FucB exhibited moderate anticoagulant activity , the polysaccharides prolonged time (aPTT ) 200 ug ( > 90s ) partial thromboplastin FucB no effect on prothrombin time (PT), which corresponds to the extrinsic pathway of coagulation was observed. This stimulation promoted fraction of about 3.6 times the synthesis of heparan sulfate (HS) by endothelial cells of the rabbit aorta ( RAEC ) in culture compared with cells not treated with FucB . This has also been shown to compete for the binding site with heparin. The rich fraction sulfated fucans exhibited strong antioxidant activity assays on total antioxidant (109.7 and 89.5 % compared with BHT and ascorbic acid standards ) , reducing power ( 71 % compared to ascorbic acid ) and ferric chelation ( 71 , comparing with 5 % ascorbic acid). The fraction of algae showed cytostatic activity on the RAEC cells revealed that the increase of the synthesis of heparan sulfate is not related to proliferation. FucB showed antiproliferative action on cell lines modified as Hela and Hep G2 by MTT assay . These results suggest that FucB Dictyota menstrualis have anticoagulant , antithrombotic , antioxidant potential as well as a possible antitumor action, promoting the stimulation of the synthesis of antithrombotic HS by endothelial cells and is useful in the prevention of thrombosis, also due to its inhibitory action on species reactive oxygen ( ROS ) in some in vitro systems , being involved in promoting a hypercoagulable state / Algas marinhas s?o uma das principais fontes de compostos biologicamente ativos. Na matriz extracelular desses organismos existem os polissacar?deos sulfatados que funcionam como componente estrutural prevenindo-a contra desidrata??o. A fra??o 0,9 (FucB) rica em fucanas sulfatadas obtida da alga marrom Dictyota menstrualis foi caracterizada quimicamente e avaliada quanto a atividade farmacol?gica por meio de ensaios de atividade anticoagulante, a??o estimulat?ria sobre a s?ntese de heparam sulfato antitromb?tico, atividade antioxidante e seus efeitos na prolifera??o celular. Os principais componentes da FucB foram carboidratos (49,80 ? 0,10%) e sulfato (42,30 ? 0,015%), apresentando compostos fen?licos (3,86 ? 0,016%) e baixa contamina??o prot?ica (0,58 ? 0,001%). FucB mostrou perfil polidisperso e sinais na an?lise de infravermelho em 1262, 1074 e 930 e 840 cm-1 atribu?dos a liga??es S=O de ?steres de sulfato, presen?a de liga??o C-O de 3,6-anidrogalactose, β-D-galactose n?o sulfatada e sulfato na posi??o axial do C4 da fucose, respectivamente. FucB exibiu moderada atividade anticoagulante, este polissacar?deo prolongou o tempo de tromboplastina parcial activada (aPTT) a 200 ug (>90s) n?o foi observado qualquer efeito de FucB sobre o tempo de protrombina (PT), que corresponde a via extr?nseca da coagula??o. Esta fra??o promoveu estimula??o cerca de 3,6 vezes na s?ntese de heparam sulfato (HS) pelas c?lulas endoteliais da aorta de coelho (RAEC), em cultura, quando comparadas com as c?lulas n?o tratadas com FucB. Esta tamb?m demonstrou competir pelo s?tio de liga??o com a heparina. A fra??o rica em fucanas sulfatadas exibiu forte a??o antioxidante sobre os ensaios de antioxidante total (109,7 e 89,5% comparados com padr?es BHT e ?cido asc?rbico), poder redutor (71% comparado ao ?cido asc?rbico) e quela??o f?rrica (71,5% comparando com ?cido asc?rbico). A fra??o dessa alga mostrou atividade citost?tica sobre as c?lulas RAEC revelando que o aumento da s?ntese de heparan sulfato n?o est? relacionado ? prolifera??o. FucB apresentou a??o antiproliferativa sobre linhagens celulares modificadas como Hela e Hep G2 pelo ensaio de MTT. Esses resultados sugerem que FucB de Dictyota menstrualis tem potencial anticoagulante, antitromb?tico, antioxidante bem como uma poss?vel a??o antitumoral, promovendo a estimula??o da s?ntese de HS antitromb?tico pelas c?lulas endoteliais, sendo ?til na preven??o da trombose, devido tamb?m a sua a??o inibit?ria sobre as esp?cies reativas do oxig?nio (ROS) em alguns sistemas in vitro, estando envolvidos na promo??o de estado de hipercoagulabilidade
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Efeitos da laserterapia na atividade biol?gica de c?lulas de carcinoma epiderm?ide de l?ngua humanoHenriques, ?guida Cristina Gomes 09 October 2012 (has links)
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AguidaCGH_TESE_1-57.pdf: 2629224 bytes, checksum: 19fff6c5e19163ae1d9d46fdf2e5f708 (MD5)
Previous issue date: 2012-10-09 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / The low level laser therapy (LLLT) has shown to be effective in promoting the
proliferation of different cells in vitro, including keratinocytes, osteoblasts, endothelial
cells and stem cells. It has been speculated that the biostimulatory effect of LLLT could
cause undesirable enhancement of tumor growth in neoplastic diseases, since the
malignant cells are more susceptible to proliferative stimuli. Within this context, this
study evaluated the effect of LLLT on epidermoid carcinoma of the tongue cell line
(SCC25) proliferation and invasion. Cultured cells were irradiated with an InGaAIP
diode laser, 660nm, 30mW using two energy densities (0.5J/cm2 and 1.0J/cm2).
Proliferative activity was assessed through trypan blue staining method and through cell
cycle analysis using flow cytometry. The invasive potential was measured through cell
invasion assay using matrigel. Cyclin D1, E-cadherin, -catenin and MMP-9
expressions were analyzed by immunofluorescence and flow cytometry and related to
the investigated biological activities. Proliferation curve demonstrated that SCC25
irradiated with 1.0J/cm2 had the highest proliferative rate when compared to the control
group and the group irradiated with 0.5J/cm2 (p<0.05). LLLT affected cell cycle
distribution and energy density of 1.0 J/cm2 promoted a higher percentage of cells in
S/G2/M phases, with statistically significant differences at 24h interval (p<0.05). LLLT,
mainly with 1.0J/cm2, revealed significantly higher potential for invasion and
influenced the expression of cyclin D1, E-cadherin, -catenin and MMP-9, promoting
the malignant phenotype. In conclusion, our results indicate that LLLT has an important
stimulatory effect on proliferation and invasion of SCC25 cells, likely due to altered
expression of proteins associated with these processes / O aumento da prolifera??o celular ap?s utiliza??o do laser de baixa pot?ncia (LBP) tem sido observado em muitos tipos de c?lulas in vitro, incluindo ceratin?citos, fibroblastos, osteoblastos, c?lulas endotelias e c?lulas-tronco. Tem sido especulado que
o crescimento de c?lulas malignas tamb?m pode ser estimulado pela irradia??o laser,
uma vez que estas c?lulas s?o mais suscept?veis aos est?mulos proliferativos. Assim, em
pacientes portadores de c?nceres de cabe?a e pesco?o, as c?lulas tumorais podem estar
presentes no campo de irradia??o ou pr?ximas a ele, sendo a laserterapia n?o intencional
um fator estimulante da progress?o tumoral. Neste contexto, este estudo avaliou o efeito
do LBP sobre o potencial de prolifera??o e invas?o de uma linhagem celular derivada
do carcinoma epiderm?ide de l?ngua (SCC25). As c?lulas cultivadas foram irradiadas
com um laser diodo (InGaAlP) com 30mW, 660nm e doses de 0.5 e 1.0J/cm2. A
atividade proliferativa foi investigada atrav?s da curva de prolifera??o utilizando o
m?todo de colora??o por azul de tripan e an?lise do ciclo celular atrav?s da marca??o
por iodeto de prop?dio em citometria de fluxo. O potencial invasivo das c?lulas SCC25
foi verificado atrav?s da realiza??o de um ensaio de invas?o celular utilizando o
matrigel. A an?lise da express?o da ciclina D1, E-caderina, -catenina e MMP-9,
atrav?s da imunofluoresc?ncia e citometria de fluxo, foi relacionada ?s altera??es nas
atividades biol?gicas estudadas. A curva de prolifera??o revelou maior crescimento das
c?lulas irradiadas com dose de 1.0 J/cm2 (p<0.05). O LBP influenciou a distribui??o do
ciclo celular, com destaque para a dose de 1.0J/cm2, a qual favoreceu a maior
porcentagem de c?lulas na fase S/G2/M com diferen?a estatisticamente significativa no
intervalo de 24 horas (p<0,05). O LBP, principalmente com dose de 1.0J/cm2,
promoveu maior invas?o das c?lulas estudadas e foi capaz de influenciar a express?o da
ciclina D1, -catenina, E-caderina e MMP-9, favorecendo o fen?tipo maligno. Dessa
forma, nossos resultados indicam que a laserterapia teve um importante efeito
estimulat?rio nas atividades de prolifera??o e invas?o das c?lulas SCC25,
provavelmente por influenciar a express?o de prote?nas que possuem papel importante
nestes processos.
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Uma contribui??o ao estudo das categorias internas e de sua prolifera??o em redes ARTMAPAlves, Robinson Luis de Souza 05 November 2012 (has links)
Made available in DSpace on 2014-12-17T14:55:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2012-11-05 / ART networks present some advantages: online learning; convergence in a few epochs of training;
incremental learning, etc. Even though, some problems exist, such as: categories proliferation,
sensitivity to the presentation order of training patterns, the choice of a good vigilance parameter, etc.
Among the problems, the most important is the category proliferation that is probably the most
critical. This problem makes the network create too many categories, consuming resources to store
unnecessarily a large number of categories, impacting negatively or even making the processing time
unfeasible, without contributing to the quality of the representation problem, i. e., in many cases, the
excessive amount of categories generated by ART networks makes the quality of generation inferior
to the one it could reach. Another factor that leads to the category proliferation of ART networks is
the difficulty of approximating regions that have non-rectangular geometry, causing a generalization
inferior to the one obtained by other methods of classification. From the observation of these
problems, three methodologies were proposed, being two of them focused on using a most flexible
geometry than the one used by traditional ART networks, which minimize the problem of categories
proliferation. The third methodology minimizes the problem of the presentation order of training
patterns. To validate these new approaches, many tests were performed, where these results
demonstrate that these new methodologies can improve the quality of generalization for ART
networks / As redes do tipo ART apresentam algumas vantagens: aprendizado online; converg?ncia em poucas
?pocas de treinamento; aprendizado incremental, etc. Contudo, alguns problemas existem:
prolifera??o de categorias, sensibilidade a ordem de apresenta??o dos padr?es, escolha de um bom
valor para o par?metro de vigil?ncia. O mais importante deles ? o problema da prolifera??o de
categorias e ? provavelmente o mais cr?tico. Esse problema faz com que a rede crie v?rias categorias
consumindo recursos (recursos para armazenar uma grande quantidade de categorias desnecess?rias
impactando negativamente ou at? mesmo inviabilizando o tempo de processamento da rede) sem
contribuir para a qualidade da representa??o do problema, ou seja, em muitos casos a quantidade
excessiva de categorias geradas pelas redes ART faz com que a qualidade da generaliza??o da rede
seja inferior. Outro fator que leva a prolifera??o de categorias das redes do tipo ART ? a dificuldade
de aproximar regi?es de classes que tem geometria n?o retangular, ocasionando uma generaliza??o
inferior a outros m?todos de classifica??o. A partir da observa??o desses problemas, foi desenvolvido
esse trabalho que prop?e tr?s metodologias. Duas dessas metodologias utilizam uma geometria mais
flex?vel do que a geometria regular retangular presente nas redes ART tradicionais e minimizam o
problema da prolifera??o de categorias. A terceira metodologia minimiza o problema da ordem de
apresenta??o dos padr?es e a prolifera??o de categorias. Com o objetivo de validar as novas
abordagens, v?rios testes foram realizados. Os resultados obtidos nesses testes demonstram a
viabilidade das metodologias propostas em reduzir o n?mero de categorias e melhorar a qualidade da
generaliza??o. Em muitos desses testes a quantidade m?nima de categorias necess?rias para classificar
corretamente as classes foi atingida ap?s o treinamento, o que demonstra uma significativa melhora
em rela??o aos m?todos j? existentes. Al?m disso, devido a nova geometria das categorias, utilizando
politopos convexos, a qualidade da generaliza??o melhorou em rala??o ao estado da arte
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Express?o imunoistoqu?mica de GLUT-1 e marcadores de prolifera??o e apoptose em anomalias vasculares oraisSilva Filho, Tiago Jo?o da 10 February 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014-02-10 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / Vascular anomalies constitute a distinct group of lesions, but they may present similar clinical and histopatological characteristics, which can lead to diagnostic mistakes. This study aimed by histopathology and immunohistochemical expression of human glucose transporter protein (GLUT-1), correctly identify and classify oral vascular anomalies, besides analyzing the immunoexpression of markers proliferation and apoptosis (Ki-67 and Bcl-2). All cases diagnosed as "oral hemangiomas" belonging to the archives of the Service of Pathological Anatomy from the subject of Oral Pathology of the Department of Dentistry (DOD), of the Federal University of Rio Grande do Norte (UFRN) were reviewed, totalizing 77 cases. Immunohistochemical analysis for GLUT-1 showed that only 26 (33.8%) of the specimens were true infantile hemangiomas (IHs). The 51 (66.2%%) GLUT-1 negative specimens were then reclassified as pyogenic granulomas (PGs) and vascular malformations (VMs) from their histopathologic characteristics,totalizing 26 (33.8%) cases of IHs, 20 (26.0%) of PGs and 31 (40.2) cases of oral VMs. The cases analyzed by the marker Ki-67 showed different median IH (13,85), PG (33,70) and VM (4.55) with statistically significant differences between them (p <0.001). In relation to the protein Bcl-2, the groups also showed different median of the established scores IH (1.00), PG (1.50), VMs (0.0) demonstrating statistically significant differences between them (p<0,001). No statistically significant correlation between the indexes of positivity for Ki-67 and the scores of immunoexpression of Bcl-2 were observed in any group. Thus, we can conclude that it is necessary a careful and parameterized review of cases of vascular anomalies making use of auxiliary tools such as GLUT-1, since the histopathological findings alone, sometimes, are not sufficient to differentiate some anomalies. Furthermore, analysis of the expressions of markers involved in the levels of proliferation of lesions is important for a better understanding of its biological behavior aspect / As anomalias vasculares constituem um grupo de les?es distintas, mas que podem apresentar caracter?sticas cl?nicas e histopatol?gicas semelhantes, que podem levar a equ?vocos diagn?sticos.Este estudo objetivou por meio da histopatologia e da express?o imuno-histoqu?mica daprote?na humana transportadora de glicose (GLUT-1), identificar e classificar corretamente as anomalias vasculares orais, al?m de analisar a imunoexpress?o de marcadores de prolifera??o e apoptose (Ki-67 e Bcl-2).Todos os casos diagnosticados como hemangiomas orais pertencentes aos arquivos do Servi?o de Anatomia Patol?gica da disciplina de Patologia Oral do Departamento de Odontologia (DOD) da Universidade Federal do Rio Grande do Norte (UFRN) foram revisados, totalizando 77 casos. A an?lise imuno-histoqu?mica para GLUT-1 revelou que apenas 26 (33,8%) dos esp?cimes tratavam-se de hemangiomas da inf?ncia (HIs) verdadeiros. Os 51 (66,2%%)esp?cimes GLUT-1 negativos foram ent?o reclassificados em granulomas piog?nicos (GPs) e malforma??es vasculares (MVs) a partir de suas caracter?sticas histopatol?gicas, totalizando 26 (33,8%) casos de HIs, 20 (26,0%) de GPs e 31 (40,2) casos de MVs orais. Os casos submetidos ? an?lise do marcador Ki-67 apresentaram medianas diferentes HI (13,85), GP (33,70) e MV (4,55) com diferen?as estatisticamente significantes entre elas (p<0,001). Em rela??o ? prote?na Bcl-2, os grupos tamb?m apresentaram diferentes medianas dos escores estabelecidos HI (1,00), GP (1,50), MVs (0,0), demonstrando diferen?as estatisticamente significantes entre elas (p<0,001). N?o foi observada correla??o estatisticamente significante entre os ?ndices de positividade para o Ki-67 e os escores de imunoexpress?o de Bcl-2 em nenhum grupo.Dessa maneira, podemos concluir que se faz necess?rio uma revis?o criteriosa e parametrizada dos casos de anomalias vasculares utilizando ferramentas auxiliares, como a GLUT-1, uma vez que os achados histopatol?gicos sozinhos, ?s vezes, n?o s?o suficientes para diferenciar algumas anomalias. Al?m disso, a an?lise das express?es de marcadores envolvidos nos n?veis de prolifera??o das les?es ? um aspecto importante para o melhor entendimento do seu comportamento biol?gico
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Estudo in vitro dos efeitos da BMP-2 e do seu antagonista Noggin sobre a prolifera??o e migra??o celulares em carcinoma epiderm?ide de l?nguaCarvalho, Cyntia Helena Pereira de 27 February 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014-02-27 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / Oral squamous cell carcinoma (OSCC) is the most prevalent malignancy in the oral cavity and
reach a large number of individuals, has become an important public health problem. Studies
have demonstrated changes in pathway components BMP in various types of cancers as
prostate, colon, breast, gastric and OSCCs. Is the current knowledge that these proteins may
exert pro-tumor effect in more advanced stages of neoplastic development coming to favor
progression and invasion tumor. The inhibition of the signaling pathway BMP-2 through its
antagonists, have shown positive results of antitumor activity and use of Noggin may be a novel
therapeutic target for cancer. Given this evidence and the few studies with BMP-2, Noggin and
OSCC, the objective of this research was to evaluate the effect of BMP-2 and its antagonist
Noggin on proliferation and migration cell in line of cell cultures of human tongue squamous
cell carcinoma (SCC25). The study was divided in three groups, a control group, where SCC25
cells suffered no treatment, a BMP-2 group, in which cells were treated with 100ng/ml of BMP-2 and a group of cells that were treated with 100ng/ml of Noggin. For the proliferation assay
and cell cycle were established three time intervals (24, 48 and 72 hours). Proliferative activity
was investigated by trypan blue and cell cycle analysis by staining with propidium iodide flow
cytometry. The potential for migration / invasion of SCC25 cells was performing by a cell
invasion assay using Matrigel in a 48-hour interval. The proliferation curve showed a higher
proliferation in cells treated with BMP-2 in 72 hours (p < 0.05), and lower overgrowth and cell
viability in Noggin group. Recombinant proteins favored a greater percentage of cells in cell
cycle phase Go/G1 with a statistically significant difference in the interval of 24 hours (p <
0.05). BMP- 2 produced a greater invasion of cells studied as well as its antagonist Noggin
inhibits invasion of cells (p < 0.05). Thus, these results indicate that BMP-2 promotes malignant
phenotype, dues stimulates proliferation and invasion of SCC25 cells and, its antagonist Noggin
may be an alternative treatment, due to inhibit the tumor progression / O carcinoma epiderm?ide oral (CEO) representa a neoplasia maligna mais prevalente na
cavidade oral e por atingir um grande n?mero de indiv?duos, acaba se tornado um relevante
problema de sa?de p?blica. Muitos estudos demonstram altera??es nos componentes da via
BMP em v?rios tipos de tumores, como os de pr?stata, c?lon, mama, g?stricos e CEOs. ? do
conhecimento atual que essas prote?nas podem exercer efeito pr?-tumoral em est?gios mais
avan?ados do desenvolvimento neopl?sico vindo a favorecer a progress?o e invas?o tumoral.
A inibi??o da via de sinaliza??o da BMP-2, atrav?s dos seus antagonistas, tem mostrado
resultados positivos de a??o antitumoral e que assim, o uso do Noggin pode ser um novo alvo
terap?utico contra o c?ncer. Diante destas evid?ncias e dos escassos trabalhos com BMP-2,
Noggin e CEO, o objetivo desta pesquisa foi avaliar o efeito da BMP-2 e seu antagonista
Noggin sobre a prolifera??o e migra??o celulares em culturas de c?lulas de carcinoma
epiderm?ide de l?ngua humana (SCC25). Foi feita a divis?o em tr?s grupos de estudo, um grupo
controle, onde as c?lulas SCC25 n?o sofriam tratamento com subst?ncia alguma, um grupo
BMP-2, no qual as c?lulas eram tratadas com 100ng/ml de BMP-2 e um grupo de c?lulas que
eram tratadas com 100ng/ml de Noggin. Para o ensaio de prolifera??o e ciclo celular foram
estabelecidos tr?s intervalos de tempo (24, 48 e 72 horas). A atividade proliferativa foi
investigada por azul de tripan e a an?lise do ciclo celular atrav?s da marca??o por iodeto de
prop?dio em Citometria de fluxo. O potencial de migra??o/invas?o das c?lulas SCC25 foi
avaliado atrav?s da realiza??o de um ensaio de invas?o celular utilizando o matrigel em um
intervalo de 48 horas. A curva de prolifera??o revelou maior crescimento celular nas c?lulas
tratadas com BMP-2 no intervalo de 72 horas (p<0.05) e menor crecimento e viabilidade celular
no grupo Noggin. As prote?nas recombinantes favoreceram a maior porcentagem das c?lulas na
fase do ciclo celular Go/G1 com diferen?a estatisticamente significativa no intervalo de 24
horas (p<0,05). A BMP-2 promoveu uma maior invas?o das c?lulas estudadas, assim como o
seu antagonista Noggin inibiu a invas?o das c?lulas estudadas (p<0,05). Dessa forma, os
resultados indicam que a BMP-2 favorece o fen?tipo maligno, pois estimula a prolifera??o e
invas?o das c?lulas SCC25 e seu antagonista Noggin pode ser uma alternativa terap?utica pois
inibiu essas caracter?sticas pr?-tumorais
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Estudo comparativo da express?o imuno-histoqu?mica do Ki-67 em carcinoma epiderm?ide de l?ngua em pacientes jovens e idososBenevenuto, Tha?s Gomes 26 February 2010 (has links)
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Previous issue date: 2010-02-26 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / The squamous cell carcinoma (SCC) is the most common malignant neoplasm of epithelial origin in oral cavity and present high capacity to invade adjacent structures. Traditionally, SCC has a predominance of 50 years male patients with long-time use of tobacco and alcohol, and the tongue is the most affected anatomic site. At present, there is an increasing incidence of SCC in patients below 40 years of age, who has been exposed or not to risk factors, mainly for tongue lesions. This study aims to analyze cell proliferation index using Ki-67 antigen in SCC of the tongue for two groups of different age range: until 40 years and older than 50 years. The first group was composed by 16 patients and the second one was
composed by 20 patients. Clinicopathological features of the cases were also assessed. There was a male predominance in both groups. Tobacco and alcohol habits were common for
patients until 40 years (72,2%), as well as for patients older than 50 years (52,9%). The first group had statistical association with the presence of regional metastases (p = 0,036) and with the most advanced stages of the disease (p = 0,012). Considering the histological malignancy grading, there was higher incidence (56,2%) of high malignancy grade tumors in the group of patients until 40 years old, but no statistical difference has found between groups and histologic malignancy grading. Regarding the immunohistochemical expression of Ki-67,
there was no statistically significant difference between the antibody expression of the groups, as well as between other clinical and histopathological parameters. This study identified no
significant difference regarding cell proliferation between the analyzed groups / O Carcinoma Epiderm?ide (CE) ? a neoplasia maligna de origem epitelial que
mais ocorre na cavidade oral, com alta capacidade de invadir estruturas adjacentes. Classicamente, o CEO ocorre mais em homens com idade acima de 50 anos, que fazem uso de tabaco e ?lcool por longos per?odos de tempo, sendo a l?ngua, o s?tio anat?mico mais frequentemente acometido. Atualmente, vem se percebendo um aumento na incid?ncia dessa les?o em pacientes com idade abaixo dos 40 anos expostos ou n?o a fatores de risco, principalmente as les?es de l?ngua. O objetivo desta pesquisa foi analisar o ?ndice de prolifera??o celular, utilizando o anticorpo Ki-67em CEs de l?ngua em dois grupos de faixas
et?rias distintas. Tamb?m, avaliaram-se as caracter?sticas cl?nico-patol?gicas dos casos constantes do estudo. A amostra se constituiu de 16 casos de pacientes com idade at? 40 anos e 20 casos de pacientes com idade acima de 50 anos. Em rela??o ?s caracter?sticas cl?nicopatol?gicas das les?es, o sexo masculino foi o mais acometido para os dois grupos, sendo evidenciado que o h?bito de beber e fumar foi frequente tanto para os pacientes com idade at?
40 anos (72,7%) como para os pacientes com idade acima dos 50 anos (52,9%). Foi poss?vel observar que houve uma associa??o estatisticamente significativa entre o grupo de pacientes com idade at? 40 anos e a presen?a de met?stase regional (p = 0,036), bem como entre o mesmo grupo e os est?gios mais avan?ados da doen?a (p = 0,012). Em rela??o ? grada??o histol?gica de malignidade, houve uma maior frequ?ncia de tumores classificados em alto
grau de malignidade no grupo de pacientes com at? 40 anos (56,2%), mas n?o foi evidenciada diferen?a estat?stica entre os grupos e a grada??o histol?gica de malignidade. Quanto ? an?lise da express?o imuno-histoqu?mica pelo Ki-67, n?o houve diferen?a estatisticamente significativa entre a express?o do anticorpo para os grupos et?rios estudados nesta pesquisa, assim como n?o houve associa??o do ?ndice de positividade para o Ki-67 com os par?metros
cl?nicos e histomorfol?gicos. Pode-se concluir que a prolifera??o celular n?o foi
significativamente diferente entre os grupos que constitu?ram o presente estudo
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