La tesis contiene 6 capítulos y esta dividida en 4 partes correspondientes a objetivos diferentes. La primera parte está dedicada a una revisión exhaustiva del estado de los ensayos clínicos de fármacos y los avances producidos en la simulación de los mismos desde 1996 cuando se presentaron las "guidelines" de simulación de ensayos clínicos sobre estas técnicas, escasamente utilizadas en España. Se ha incidido especialmente en los aspectos más relacionados con los modelos de acción farmacológica (farmacocinética y farmacodinamia). Gracias a los avances en las técnicas computacionales y estadísticas como son el uso de los modelos estadísticos lineales y no lineales mixtos de medidas repetidas, así como las herramientas de simulación discreta. Actualmente ya es posible la realización de simulaciones realistas, basadas en los modelos de acción de los fármacos, así como modelos de enfermedades que tienen presente la variabilidad biológica inter e intra-individual. En la segunda parte se ilustra el proceso de construcción real de modelos de simulación de ensayos clínicos utilizando la simulación de eventos discretos mediante el entorno LeanSim y el paquete estadístico SAS. LeanSim es una herramienta flexible de simulación de propósito general desarrollada en C/C++ y con orientación a objetos. Estas características hacen que LeanSim sea el entorno escogido para su adaptación a la simulación de ensayos clínicos. Se realiza una breve introducción a su uso en la simulación clínica y a la adaptación realizada a partir de un ensayo clínico de SIDA, presentando diferentes modelizaciones y adaptaciones computacionales novedosas como es el uso de "scrips" para la transferencia al simulador de los modelos lineales mixtos. En esta parte también se sistematiza la metodología de simulación estadística de ensayos clínicos, a tenor de la disparidad de metodologías encontradas en los diferentes artículos revisados y se especifica mediante la modelización de un ensayo clínico sobre artritis reumatoide, una metodología sobre la modelización con modelos mixtos, la construcción de modelos computacionales, la validación y verificación de los modelos. Después de una revisión bibliográfica, se incide especialmente en las técnicas de validación y verificación estadísticas de los modelos conceptuales y computacionales, presentando aportaciones novedosas basadas en intervalos de confianza asintóticos normales y boostrap, uso de réplicas de simulación durante la validación y uso del criterio de la variación porcentual de la función de verosimilitud para comparar el modelo conceptual con las diferentes réplicas obtenidas durante las simulaciones. En la tercera parte se presenta un nuevo sistema informático "Hipócrates" construido para mejorar la calidad de los datos de los ensayos clínicos y lograr buenos modelos conceptuales y de simulación, con toda su problemática asociada.En la cuarta parte se presentan diferentes experimentos de simulación de ensayos clínicos prospectivos y retrospectivos de Fases I a III, que ilustran la metodología presentada en los apartados precedentes, especialmente la modelización de ensayos con objetivos PK/PD u otros objetivos complejos, mediante el uso de modelos lineales y no lineales mixtos, así como la optimización de los objetivos de los mismos, su validación y verificación con las técnicas estadísticas presentadas anteriormente, realizando réplicas de simulación, su cálculo, el uso de intervalos de confianza y los criterios de validación/verificación basados en la función de verosimilitud. / OPTIMIZATION OF THE CLINICAL TRIALS OF MEDICAMENTS BY MEANS OF SIMULATION OF DISCREET EVENTS, MODELING, VALIDATION, MONITORING AND THE IMPROVEMENT OF THE QUALITY OF ITS INFORMATION. The possibility of performing complete simulations of clinical trials, based on pharmacological action models (PK, PD), has been considered since the advent of the computer era, as a tool to optimise their practical realisation. Thanks to the advances in computation technology and in discrete event simulation tools, today it is possible to perform realistic, large-scale clinical trial simulations in a regular basis using suitable tools of simulation.In this doctoral research, we illustrate the process of constructing realistic simulation models (repeated measures mixed models) using SAS and the LeanSim framework. LeanSim is an object-oriented general purpose simulation tool, developed in C/C++, with a process-interaction modelling approach. These characteristics of LeanSim make it very flexible, facilitating its adaptation to simulate clinical trials. Some clinical trials were simulated (Phase I to Phase III) retrospectively and prospectively, and a methodology to construct models of clinical trials and to simulate, validate and verify statistically them was established. A second part of this project was centred on the statistical and data analysis facets of model validation and verification, based on the percentual variation of likelihood criteria comparing the conceptual model and the simulation replications. Also new data management software, "Hipocrates", was developed to assure the quality of data in clinical trials.

La presència d’uns nivells insuficients d’activitat física (AF) en la població és un dels factors que contribueix al desenvolupament o instauració precoç de les patologies cròniques més prevalents de la societat moderna. Una de les línies prioritàries d’actuació del Sistema Sanitari Públic es reduir el percentatge de persones insuficientment actives, així com el sedentarisme. Objectiu. Avaluar l’efectivitat del PPAF com a instrument de promoció de la salut des dels Centres d’Atenció Primària (CAPs) a partir de l’increment del nivell d’activitat física (AF). Mètode. Disseny: assaig clínic aleatori controlat. Àmbit: CAPs de Barcelona Ciutat i rodalies. Mostra. Un total de 414 individus de 10 CAPs (72% dones) amb un nivell insuficient d’AF, ≥50 anys (65.68 ± 9.2 anys), amb algun diagnòstic de malaltia o condició crònica, una aptitud mínima per seguir el programa, i disposats a realitzar un programa d’AF com el PPAF (assistència mínima del 80%), que visitaven el CAP per qualsevol motiu, varen ser captats des de les consultes d’Atenció Primària (AP) i aleatoritzats en dos grups (grup intervenció, GI=221, i grup control, GC=). El GI va realitzar un programa d’exercici de 12 setmanes (2 sessions/setmana de 60 minuts/sessió). El CG va rebre el tracte habitual des de la consulta. Es varen avaluar: nivell d’AF (IPAQ), estats de canvi de Prochaska), qualitat de vida relacionada amb la salut (QVRS) (SF-12), suport social (Social Support for Physical Activity Scale, SSPAS) i freqüentació (registre de visites al CAP). El registre de dades es va fer a l’inici del programa (mes 0), al finalitzar el mateix (mes 3), i passats 6 (mes 9) i 12 mesos de la finalització del programa (mes 15). En el cas de la freqüentació es van comparar el total de visites realitzades l’any previ i posterior al programa d’AF. Resultats. Els principals resultats d’aquest estudi han estat que: un programa d'AF que inicia en els CAPs i es vincula amb recursos esportius de la comunitat és eficaç en: (1) la creació de l’hàbit de realitzar AF i mantenir-lo a llarg termini (mes 0= 749.45 ± 774.6, mes 15= 1312.96 ± 1782.2 METs minut/ setmana), (2) la millora de la percepció de la salut avaluada a partir de la qualitat de vida autopercebuda (mes 0: component físic, CF = 41.8 ± 7.6; component mental, CM= 34.6 ± 7.4; month 15: CF= 45.4 ± 6.4, CM= 38.9 ± 6.4), (3) un major suport social (mes 0= 20.37 ± 18.7, mes 9= 43.00 ± 26.6), i (4) la disminució del nombre total de visites al CAP en els pacients insuficientment actius (18.2 ± 7.4 - 14.8 ± 8.5). Conclusions. Els resultats obtinguts en el present estudi indiquen que el PPAF ha demostrat ser una intervenció econòmica i efectiva per augmentar els nivells d’AF dels pacients insuficientment actius que acudeixen a les consultes d’AP, tant a mig (mes 9) com a llarg termini (mes 15). / La inactividad es uno de los factores que contribuye al desarrollo e instauración de las enfermedades crónicas con más incidencia en la sociedad moderna. Una de las líneas prioritarias de actuación del Sistema Sanitario Público es reducir el número de personas insuficientemente activas, así como los niveles de sedentarismo. Objetivo. Evaluar la efectividad del PPAF como instrumento de promoción de la salud desde los Centros de Atención Primaria (CAPs) a partir del incremento del nivel de actividad física (AF). Método. Diseño: ensayo clínico aleatorio controlado. Ámbito: CAPs de Barcelona Ciudad y periferia. Muestra: 414 individuos de 10 CAPs (72% mujeres) con un nivel insuficiente de AF, ≥50 años (65.68 ± 9.2 años), con algún diagnóstico de enfermedad o condición crónica (diabetes mellitus tipo 2, hipertensión, dislipemia, obesidad i/o dolor crónico) y una aptitud mínima para seguir el programa, que visitaron el CAP per cualquier motivo, se captaron desde las consultas de Atención Primaria (AP) y fueron aleatorizados en dos grupos (grupo intervención, GI=221, y grupo control, GC=). El GI participó en un programa de ejercicio de 12 semanas (2 sesiones/semana de 60 minutos/sesión). El CG recibió el trato habitual desde la consulta. Se evaluaron: nivel de AF (IPAQ), etapas de cambio de Prochaska, calidad de vida relacionada con la salud (SF-12), apoyo social (Social Support for Physical Activity Scale, SSPAS) y frecuentación (registro de visitas al CAP). El registro de datos se realizó antes de iniciar el programa (mes 0), al finalizar el mismo (mes 3), y pasados 6 (mes 9) y 12 meses de su finalización (mes 15). Para la frecuentación se compararon el total de visitas realizada el año previo y posterior al programa de AF. Resultados. Los principales resultados de este estudio son: un programa de AF que se inicia en los CAPs y se coordina con recursos deportivos de la comunidad es eficaz en: (1) la creación del hábito de realizar AF y mantener-lo a largo plazo (mes 0= 749.45 ± 774.6, mes 15= 1312.96 ± 1782.2 METs minuto/semana), (2) la mejora de la percepción de la salud evaluada a partir de la calidad de vida autopercibida (mes 0: componente físico, CF = 41.8 ± 7.6; componente mental, CM= 34.6 ± 7.4; mes 15: CF= 45.4 ± 6.4, CM= 38.9 ± 6.4), (3) un mayor apoyo social (mes 0= 20.37 ± 18.7, mes 9= 43.00 ± 26.6), y (4) la reducción del número total de visitas al CAP en los pacientes insuficientemente activos (18.2 ± 7.4 - 14.8 ± 8.5). Conclusiones. Los resultados obtenidos en el presente estudio indican que el PPAF ha demostrado ser una intervención económica y efectiva para aumentar los niveles de AF de los pacientes insuficientemente activos que acuden a las consultas de AP, tanto a medio (mes 9) como a largo plazo (mes 15). / The decline of physical activity (PA) is associated with a rising burden of global chronic diseases. To reduce the percentage of inactive people as well as sedentarism is a public healthcare system priority. Purpose. To evaluate the effectiveness of PA promotion program (PPAF) in primary care (PC) as an instrument to increase PA levels in inactive population. Methods. Design: randomised controlled trial. Setting: 10 Primary Healthcare Centres (PHCs) in Barcelona Metropolitan area. Subject: four hundred and fourteen (n= 414) patients with a low level of PA (age ≥50 years, 65.68 ± 9.2, 72% women), presenting at least one chronic condition, were included. Participants from each PHC were randomly allocated to an intervention (IG= 221) and control group (CG=193). The IG went through a 3-month standardized PA program (24 sessions; 2 sessions a week, 60 minutes per session) led by PA specialists and linked to community resources. The CG followed the regular treatment. Measures: main outcome measure was the level of PA (IPAQ-short version). Secondary outcomes were: PA Prochaska’s stages of change, health-related quality of life (SF-12), level of social support for the PA practice (Social Support for Physical Activity Scale, SSPAS), and the total number of medical appointments to the PHC. There was a follow up in a face to face interview 3, 6 (9-month follow-up) and 12 months (15-month follow-up) after the programme. Participants’ frequency of visits was registered over the 12 months before and after the programme. Results. The main findings of this study were: (1) a standardized PA program linked to community resources was effective in increasing and maintaining PA level (month 0= 749.45 ± 774.6 , month 15= 1312.96 ± 1782.2 METs minute/ week), (2) the program induced improvements in self-reported quality of life related to health (month 0: physical composite score, PCS= 41.8 ± 7.6; mental composite score, MCS= 34.6 ± 7.4; month 15: PSC= 45.4 ± 6.4, MCS= 38.9 ± 6.4), (3) an increase of total social support (month 0= 20.37 ± 18.7, month 9= 43.00 ± 26.6) and (4) a decrease of the total number of visits to the PHC in previous inactive patients (18.2 ± 7.4 - 14.8 ± 8.5). The improvements were sustained 12 months after the end of the PA program (15-month follow-up). Conclusions. Our findings indicate that a 3-month physical activity program linked to community resources is a short-duration, sustainable and effective intervention in increasing PA levels in a 3, 9 and 15-month follow-up.

Las propiedades beneficiosas del té (Camelia sinensis) son ampliamente conocidas. El té posee una gran capacidad antioxidante debida la presencia de polifenoles denominados catequinas. Estas catequinas poseen diversas propiedades que le permiten ejercer ciertos efectos de protección contra agentes oxidantes más allá de su capacidad antioxidante. Existen pocos estudios realizados a largo plazo y que, además, sean realizados con dosis similares a las que se ingieren normalmente en la sociedad. El factor de trascripción NRF2, se encuentra en el citoplasma unido a un represor (KEAP1) del cual se separa en condiciones de estrés oxidativo y penetra en el núcleo activando una serie de genes de respuesta antioxidante (respuesta ARE) entre los que se incluyen diversas enzimas antioxidantes y detoxificantes. Existen estudios que sugieren que algunas catequinas podrían activar esta respuesta. La adriamicina es un antibiótico de la familia de las antraciclinas, aislado de Streptomices peucetis hace más de 50 años. Posee la capacidad de detener la división celular, y por ello es utilizado contra una gran variedad de canceres y tumores. También tiene una gran capacidad de generar radicales libres in vivo. Los pacientes tratados con esta sustancia sufren daños en todos los órganos, en especial en el corazón debido a que esta molécula tiene gran afinidad con la cardiolipina. Se han realizados numerosos estudios para intentar neutralizar los efectos secundarios de este fármaco, con el fin de aumentar la supervivencia de los pacientes e incrementar la calidad del tratamiento. Objetivos: Por ello se pretende estudiar los efectos de la ingesta de té, así como la capacidad que posee el mismo para proteger a los tejidos de una situación de estrés oxidativo agudo. Materiales y método: Para ello, realizaremos primero un estudio en ratas de la raza Sprague Dawley en jaulas metabólicas que analice las posibles interferencias con la dieta de una ingesta continuada de té blanco. Posteriormente, comenzaremos con un tratamiento con diferentes dosis de té blanco (0, 15 y 45 mg de extracto de té blanco/kg de peso corporal al día que equivalen a 0, 4 y 12 mg de polifenoles /kg de peso corporal al día) en el agua de bebida. Tras 12 meses de tratamiento se administran a todas las ratas (excepto a la mitad de los animales control a los cuales se les inyecta solución salina) una inyección intraperitoneal de adriamicina (10mg /kg de peso corporal). Tras 48 horas se anestesian los animales se sacrifican obteniéndose muestras de sangre y tejidos (hígado, corazón, cerebro y riñón). Se obtuvo la fracción microsomal de algunos de ellos (hígado, corazón y cerebro) y el plasma. Se realizaron diferentes análisis: como la medición de la actividad antioxidante, los grupos carbonilo e hidroperóxidos. Además, se realizó un análisis de expresión génica en hígado y riñón de genes relacionados con el NRF2 y enzimas detoxificantes y antioxidantes. Se midieron también la actividad de las enzimas antioxidantes. Se realizaron también análisis en los perfiles de ácidos grasos del corazón y el hígado. Resultados y discusión: El té no interfiere en la eficiencia alimentaria de las ratas estudiadas, solo se encontró una ligera disminución en la absorción del Fe. Por otro lado, los resultados indicaron que la ingesta a largo plazo de té blanco protegió contra los efectos oxidantes de la adriamicina en todos los tejidos y órganos analizados activando además la repuesta ARE vía NRF2 en el hígado y no siendo necesaria la activación de la misma en el riñón. Estudios adicionales son necesarios para comprender todos los mecanismos implicados en la respuesta frente a un agente como la adriamicina. No se encontraron diferencias en los perfiles de ácidos grasos. / The beneficial properties of tea (Camellia sinensis) are widely known. The tea has a high antioxidant activity due the presence of polyphenols called catechins. Catechins have various properties that allow you to exert some protective effects against oxidizing agents beyond their antioxidant capacity. There are few long-term studies and also are made with doses similar to those normally consumed in society. The transcription factor Nrf2 is located in the cytoplasm bound to a repressor (KEAP1). This union is separated in conditions of oxidative stress and NRF2 enters the core by activating a series of antioxidant response genes (ARE) between those included various antioxidant and detoxifying enzymes. Studies suggest that some catechins could activate this response. Adriamycin is an antibiotic of the anthracycline family, isolated from Streptomyces peucetis over 50 years. It has the ability to stop cell division and therefore is used against a variety of cancers and tumors. It also has a great ability to generate free radicals in vivo. Patients treated with this substance suffer damage in all organs, especially the heart because adriamycin has great affinity with cardiolipin. Numerous studies have been undertaken to try to counteract the side effects of this drug, in order to increase patient survival and increase quality of treatment. Objectives: The aim of the present thesis is to study the different effects of white tea intake, and the ability to possess the same to protect tissues from a situation of acute oxidative stress. Matherials and method: With this purpose, we studied Sprague Dawley in metabolic cages to analyze the potential interference with an ongoing dietary intake of white tea. Later, we began a treatment with different doses of white tea (0, 15 and 45 mg of extract of white / kg body weight tea a day, equivalent to 0, 4 and 12 mg of polyphenols / kg of body weight per day) in the drinking water. After 12 months of treatment all rats was administered (except to half of control animals which are injected with saline) with an intraperitoneal injection of adriamycin (10mg / kg body weight). After 48 hours the animals are anesthetized and sacrificed, obtaining samples of blood and tissues (liver, heart, brain and kidney). The microsomal fraction of some organs (liver, heart and brain) and plasma was obtained. Different analyzes were realized: as antioxidant activity, hydroperoxides and carbonyl groups. Furthermore, gene expression in liver and kidney related NRF2 and detoxifying enzymes and antioxidant genes was measured. The activity of antioxidant enzymes was also analyzed. The fatty acid profiles of the heart and liver were measured. Results and discussion: Tea not interferes with the feed efficiency of the rats studied; we only found a slight decrease in the Fe absorption. Moreover, the results indicated that the long term intake of white tea protected against oxidative effects of adriamycin in all tissues and organs analyzed further activating ARE via NRF2 response in the liver and not activating it being necessary kidney. Additional studies are needed to understand all the mechanisms involved in the response to an agent such as adriamycin. No differences in fatty acid profiles were found.

El DCL constituye un colectivo de alto riesgo para desarrollar la EA. La EA es una demencia degenerativa primaria que constituye el 48% de todas las demencias. La información que nos proporciona la ERM sobre la función cerebral y química de los metabolitos tisulares es muy útil ya que es un método no invasivo que detecta alteraciones neuroquímicas incluso en ausencia de cambios estructurales.La ERM 1H en la EA se caracteriza por elevación del mI ,marcador astrocitario y un descenso del NAA, aminoácido marcador neuronal. Es particularmente específico en la EA la elevación del cociente mI/NAA que combina en un solo parámetro los dos más afectados en la EA.En base a todo ello la hipótesis principal era si la ERM 1H puede detectar cambios bioquímicos cerebrales específicos en los DCL y si alguno de ellos puede orientar hacia una próxima conversión a EA. Los objetivos se dividen entre caracterizar la ERM de un grupo de pacientes DCL para valorar qué diferencias se observaban respecto a los pacientes EA y a los sujetos control ancianos normales y más importante, siguiendo este grupo durante un periodo de 4 años si alguno de los metabolitos de la ERM puede sugerir una variación en el deterioro cognitivo hacia la demencia.Para ello se somete un total de 47 individuos divididos en tres grupos según criterios de DCL, EA o sujetos normales a una ERM 1H y a unos tests neuropsicológicos. La ERM se realiza a todos los sujetos localizando el volumen de interés a nivel del cíngulo posterior, una de las áreas primariamente afectadas por la EA, y que es la zona que permite obtener unos espectros con una buena calidad. Todas la ERM se realizan con los mismos parámetros, en un aparato de 1,5 T Signa de GE, con una adquisición en PRESS y siguiendo un control de calidad valorando el ruido de fondo, la línea basal y la supresión de agua. El post-procesado se hace con el software incorporado al aparato. Se valoran también las lesiones hiperintensas en la sustancia blanca en los cortes RM DP y T2.En el transcurso de 4 años se irá siguiendo únicamente a los DCL con todas las pruebas para probar la hipótesis de los cambios metabólicos en relación a los cognitivos.Siguiendo los resultados del estudio transversal y longitudinal observo que los DCL tiene un patrón espectroscópico muy semejante al de los EA y que ambos son claramente diferentes de los sujetos ancianos control y que en la valoración global del seguimiento de los DCL no se aprecian cambios significativos. En el grupo DCL cerca del 80% de los individuos van a convertirse en EA.Los resultados que he obtenido nos indican que el incremento de mI/Cr y en cierto grado el descenso de NAA/Cr preceden el deterioro cognitivo en la progresión del DCL hacia la patología de la EA. Sin embargo, la ERM de 1H no puede proporcionar información valiosa acerca de la progresión fisiopatológica de la enfermedad pero puede ayudar a detectar precozmente los pacientes DCL que van a sufrir una trasformación a EA a lo largo del seguimiento, consistente en la elevación del ratio de mI/Cr en aquellos sujetos que aún no muestran signos de demencia ni por clínica ni por los tests neuropsicológicos. Las lesiones hiperintensas de la sustancia blanca siguen una evolución paralela con el grado de deterioro cognitivo, de forma que a mayor número de lesiones más grado de demencia. Probablemente se halla correlacionado con el grado de desmielinización axonal y con el descenso del NAA, marcador de la función neuronal. / Mild cognitive impairment(MCI)is a transitional state between normal aging and AD(Alzheimer disease). 1H-MRS is a technique that measures brain metabolites and cerebral function in vivo and can detect neurochemical alterations even when structural changes are absent.1H-MRS studies reveal an increase in mI brains of AD patients. NAA is a neuronal marker and a decrease in its concentration in MRS of patients with AD suggests neuronal loss or dysfunction. The increase mI/NAA score is particularly specific in AD MRS and combines two of the metabolites involved in AD.The aim of the study was to identify biochemical brain changes in 1H-MRS of MCI and prove if one of them provides valuable information about progression of the disease. For this purpose a group of patients with MCI is explored with 1H-MRS to distinguish from AD and normal elderly people and the most important purpose is to investigate the utility of 1H-MRS in the follow up of this group during 4 years.A total of 47 patients participated in the study and were divided in three groups, following clinical criteria of MCI, AD and normal aging subjects. They underwent a MRI study with single voxel 1H-MRS and also neuropsychological tests. MRI was performed in a 1,5 T signa GE and the single voxel was localized in the posterior cingulated giri, one of the primary affected areas. The acquisition was performed with PRESS pulse sequence.Spectra were post processed by means of manufacturer provided software. Hyperintensities in white matter were evaluated in DP and T2 MRI sequences.In longitudinal and transverse studies MCI and AD have a similar pattern, which clearly differs from normal elderly controls. No significative changes are observed in MCI following probably because 80% will converse in AD.In conclusion, the results show an increase mI/Cr and a decrease NAA/Cr that preceded cognitive decline in the progression of MCI to AD. However 1H-MRS cannot provide valous information about the physiopathological progression of the disease but can detect MCI patients before they converse in AD.White matter hyperintensities correlate with cognitive decline.

Tesis por compendio de publicaciones / Actualmente se sabe que hay una estrecha relación entre adicción y desórdenes cardiacos. Sin embargo, se conoce muy poco acerca de los mediadores y mecanismos implicados. Nuestros objetivos han sido: 1. Valorar la actividad simpática cardiaca, determinando los niveles de NA y normetanefrina (NMN). Como posibles mecanismos implicados evaluamos: -la expresión de las dos isoformas de la enzima COMT y - la expresión y fosforilación en serina 40 y 31 de la proteína TH. 2. Evaluar el grado de estrés que se produce durante la adicción a morfina valorando la respuesta del eje HHA y la puesta en marcha de mecanismos cardioprotectores. Se cuantificaron los niveles plasmáticos de ACTH y corticosterona y se valoró la expresión de Hsp27 y la fosforilación de la misma. 3. Investigar un posible nexo de unión entre Hsp27 y troponinas para ello valoramos la expresión de Hsp27, TnT y TnI, así como su co-localización. 4. Valorar el papel de los receptores de CRF1 en la actividad del sistema noradrenérgico cardiaco y del eje HHA. También se valoró la implicación de estos receptores en la expresión y fosforilación de Hsp27. Para ello se utilizó el antagonista selectivo de receptores de CRF1 (CP-154,526) y ratones genéticamente deficientes del receptor de CRF1 (CRF-/-, knockout, KO). Metodología Se han utilizado ratas (Sprague-Dawley) y ratones (B6,129 CRHtklee) macho (WT, CRF1R+/+) y homocigotos recesivos (KO, CRF1R-/-). La dependencia de morfina se indujo mediante la implantación subcutánea de pellets de morfina base (75mg) o mediante inyección i.p. de dosis crecientes de morfina (10-60 mg/kg). Para la precipitación del síndrome de abstinencia se utilizó naloxona (1 o 2 mg/kg, s.c.). El análisis de ACTH y corticosterona se realizó mediante un kit de radioinmunoanálisis (RIA). Se utilizó cromatografía liquida de alta resolución (HPLC) con detector electroquímico para la determinación de NA y NMN. Las proteínas Hsp27 total y fosforilada, las troponinas y la mu-calpaina se determinaron mediante western-blot. Se realizaron experimentos con inmunofluorescencia para determinar Hsp total y las troponinas TnT y TnI; así como para la co-localización de Hsp27 con TnT y TnI. Resultados y conclusiones -Durante el síndrome de abstinencia a morfina se produce un aumento de la expresión de las dos isoformas de COMT, que serían las responsables del aumento de NMN y, por tanto, del turnover de NA. Asimismo, observamos un aumento de la expresión y de la fosforilación de TH . Estos últimos resultados indicarían la puesta en marcha de mecanismos post-transcripcionales. -El síndrome de abstinencia a morfina cursa con una hiperactivación del eje HHA, como indica los elevados niveles plasmáticos de ACTH y corticosterona. Propranolol y SL-327 fueron capaces de antagonizar el incremento de ACTH y no de corticosterona, lo que sugiere que mecanismos independientes de la ACTH hipofisaria mediarían la respuesta de las suprarrenales. -Durante la dependencia de morfina se produce un aumento en la expresión de Hsp27, lo que corrobora que la adicción a opioides provoca un importante estrés celular. Además, nuestro estudio demuestra que los receptores β-adrenérgicos y la vía de señalización ERK estaría implicada en la fosforilación de Hsp27 y, por tanto, en los efectos cardioprotectores que induce esta proteína. Así mismo se evidencia una co-localización entre Hsp27 y cTnT, lo que sugiere la existencia de algún tipo de interacción entre ambas proteínas. -Estos resultados demuestran que el bloqueo selectivo de los receptores de CRF1 y la deleción genética de los receptores de CRF1 antagonizan los cambios adaptativos cardiacos, lo que sugiere que los fármacos antagonistas que tengan como diana el receptor de CRF1 podrían mejorar el estrés y los efectos nocivos cardiacos inducidos durante el síndrome de abstinencia a morfina. / There is a close relationship between addiction and cardiac disorders. However, very little is known about the mediators and mechanisms implicated. Our aims were: 1) To evaluate the cardiac sympathetic activity by determining the levels of NA and normetanephrine (NMN). Asses possible mechanisms involved:-expression of the two isoforms of COMT and - the expression and phosphorylation of TH at serine 40 and 31. 2) To assess the degree of stress that occurs during addiction to morphine assessing the response of the HPA axis and cardioprotective mechanisms. Plasma ACTH and corticosterone levels were quantified and Hsp27 expression and phosphorylation of TH was evaluated. 3) To investigate a possible link between Hsp27 and troponin. For it expression of Hsp27, TnT and TnI, and their co-localization was determined. 4) To evaluate the role of CRF1 receptors in the activity of cardiac noradrenergic system and the HPA axis. The involvement of these receptors in the expression and phosphorylation of Hsp27 was also assessed. Selective CRF1 receptor antagonist (CP-154, 526) and mice genetically deficient CRF1 receptor (CRF-/- knockout, KO) was used. Methods We used rats (Sprague-Dawley) and mice (B6, 129 CRHtklee) male (WT, CRF1R + / +) and homozygous recessive (KO, CRF1R-/ -). Morphine dependence was induced by subcutaneous implantation of pellets of morphine base (75mg) or by ip injection increasing doses of morphine (10-60 mg / kg). For precipitation of withdrawal naloxone (1 or 2 mg / kg, sc) was administered. The ACTH and corticosterone analysis was done using a radioimmunoassay kit (RIA). We used liquid chromatography (HPLC) with electrochemical detector for NA and NMN determination. Total and phosphorylated Hsp27 proteins, troponins and mu-calpain were determined by western-blot. Immunofluorescence experiments were performed to determine the total Hsp TnT and TnI and troponin, as well as for the co-localization of Hsp27 with TnT and TnI. Results and conclusions - During morphine withdrawal we observed an increased expression of the two isoforms of COMT, which are responsible of increased NMN and therefore the NA turnover. We also observed increased expression and phosphorylation of TH. These latter results indicate the involvement of post-transcriptional mechanisms. - Morphine withdrawal induced an activation of the HPA axis, as indicated by elevated plasma levels of ACTH and corticosterone. Propranolol and SL-327 were able to antagonize the increase in ACTH but not in corticosterone, suggesting that separate mechanisms mediate pituitary ACTH adrenal response. - Morphine dependence produced an increased Hsp27 expression, corroborating that opioid addiction causes major cellular stress. Furthermore, our study demonstrates that the β-adrenergic receptors and ERK signaling would be involved in the phosphorylation of HSP27 and therefore in the cardioprotective effects induced by this protein. Also colocalization between Hsp27 and cTnT is evidence suggesting the existence of some interaction between the two proteins. - These results demonstrate that selective blockade of CRF1 receptors and genetic deletion of CRF1 receptors antagonized the cardiac adaptive changes observed during morphine withdrawal, suggesting that CRF1 receptor antagonists may improve stress and harm cardiac induced during morphine withdrawal.

El conocimiento y el manejo adecuado de las interacciones medicamentosas mejoran la calidad, seguridad y eficiencia de los tratamientos prescritos a los pacientes. Objetivos: 1. Determinar la prevalencia de tratamientos con interacciones farmacológicas (IF) potenciales en pacientes onco-hematológicos ingresados, distinguiendo tres grupos poblacionales (población pediátrica, población adulta hematológica y población adulta oncológica) y usando dos bases de datos, Micromedex® y Drug Interaction Facts® (DIF®). 2. Determinar la densidad de incidencia de IF potenciales en tratamientos de pacientes en las mismas poblaciones. 3. Describir las características de los pacientes, de los tratamientos y de las IF potenciales detectadas. 4. Determinar los factores de riesgo asociados a la presencia de interacciones totales y clínicamente relevantes para los 3 grupos poblacionales y las dos bases de datos. 5. Comparar el nivel de concordancia de dos bases de datos en cuanto a la detección de interacciones potenciales y su nivel de severidad. 6. Describir las interacciones con relevancia clínica más frecuentes y proponer alternativas farmacológicas o estrategias de reducción de riesgo. Metodología: Estudio observacional prospectivo descriptivo, durante 12 semanas, sobre IF potenciales detectadas en los tratamientos médicos de pacientes onco-hematológicos ingresados, adultos o pediátricos, independientemente de que recibieran tratamiento antineoplásico o no. Además de los tratamientos médicos se recopilaron datos demográficos, clínicos y analíticos. Para la detección de las IF, se cotejaron todas las líneas de prescripción del tratamiento en 2 bases de datos, Micromedex® y DIF®, y se registraron todas las IF detectadas por pares, junto con el grado de severidad y evidencia otorgados, el mecanismo de interacción y la descripción del efecto. Para establecer la relevancia clínica de las IF detectadas, se siguió el siguiente criterio: • Para las IF detectadas con Micromedex®, se consideraron clínicamente relevantes todas aquellas con nivel de severidad contraindicado, grave y moderado, independientemente del nivel de evidencia. • Para las IF detectadas con DIF®, se consideraron clínicamente relevantes todas aquellas con nivel de severidad grave y moderado, independientemente del nivel de evidencia y del grado de significación. Se realizó un análisis descriptivo, tanto numérico como nominal, de los datos demográficos, clínicos y analíticos, así como de los medicamentos prescritos en los tratamientos estudiados y de las IF potenciales totales y clínicamente relevantes detectadas por ambas bases de datos. Se recurrió a modelos de regresión logística y regresión lineal para identificar los factores de riesgo asociados con las IF, bien como probabilidad de aparición del evento (presencia/ausencia de la IF), bien para obtener la ecuación que determine el número de IF potenciales en función de factores de riesgo asociados. En la comparación entre las bases de datos, y para las interacciones comunes a ambas, se determinó la concordancia entre los grados de severidad otorgados por ambas a través del coeficiente kappa. Resultados: Se analizaron un total de 1.166 tratamientos médicos, pertenecientes a 341 pacientes. Se encontraron un total de 3.155 IF por la base de datos Micromedex®, y 1.989 por la base de datos DIF®. Los resultados correspondientes a los objetivos principales han sido: • Servicio de Oncología: la prevalencia de tratamientos con alguna IF potencial fue del 81,69% y 48,21% para Micromedex® y DIF®; y de tratamientos con alguna IF clínicamente relevante, del 80,97% y 32,62%, respectivamente. La densidad de incidencia promedio para las IF potenciales fue de 222,77 y 102,08 IF por 100 tratamientos-día; y para las IF clínicamente relevantes, de 218,63 y 61,72 IF por 100 tratamientos-día, respectivamente. • Servicio de Hematología: la prevalencia de tratamientos con alguna IF potencial fue del 74,45% y 69,40% para Micromedex® y DIF®; y de tratamientos con alguna IF clínicamente relevante, del 74,13% y 56,78%, respectivamente. La densidad de incidencia promedio para las IF potenciales fue de 437,28 y 331,95 IF por 100 tratamientos-día; y para las IF clínicamente relevantes, de 428,51 y 240,53 IF por 100 tratamientos-día, respectivamente. • Onco-hematología pediátrica: la prevalencia de tratamientos con alguna IF potencial fue del 56,67% y 58,00% para Micromedex® y DIF®; y de tratamientos con alguna IF clínicamente relevante, del 44,67% y 51,33%, respectivamente. La densidad de incidencia promedio para las IF potenciales fue de 155,70 y 153,82 IF por 100 tratamientos-día; y para las IF clínicamente relevantes, de 121,04 y 118,12 IF por 100 tratamientos-día, respectivamente. De forma general, el principal factor de riesgo asociado a la presencia de IF fue el número de fármacos, en unos casos como fármacos prescritos en total y en otros como fármacos distintos de los antineoplásicos, o incluso ambos. En la comparación de las bases de datos se observaron múltiples diferencias, tanto en la capacidad de detectar la presencia de alguna IF potencial hallando una concordancia débil (k=0,372 para IF totales y k=0,253 para las clínicamente relevantes, siendo p<0,0001 en ambos casos), como en el análisis de fiabilidad entre los grados de severidad otorgados por cada base de datos con respecto a las IF detectadas en común, hallando una concordancia nula con un valor de k=-0,062, siendo p<0,002. Por su gravedad potencial y frecuencia, destacan las siguientes IF: combinaciones de fármacos depresores del sistema nervioso central; el riesgo de aparición de reacciones extrapiramidales tras la asociación de fármacos antieméticos; síndrome serotoninérgico por asociación de 2 fármacos serotoninérgicos; la prolongación del intervalo QT, especialmente por combinaciones de antifúngicos azólicos, antagonistas de los receptores 5-HT3, antipsicóticos, fluoroquinolonas y antidepresivos tricíclicos; y la disminución o el aumento de los niveles sanguíneos de fármacos inmunosupresores. Conclusiones: La prevalencia y densidad de incidencia determinadas han sido elevadas para ambas bases de datos y en los tres grupos poblacionales. Existen diferencias importantes entre las bases de datos utilizadas, lo que hace que el grado de concordancia entre ellas sea bajo y, por tanto, dificulta la propuesta de alternativas terapéuticas y el establecimiento de estrategias de reducción de riesgo. / The knowledge and a suitable management of drug interactions improve the quality, safety and efficiency of treatments administered to patients. Objectives: 1. To determine the prevalence of potential drug-drug interactions (DDIs) in treatments from onco-haematological inpatients, distinguishing three population groups (paediatric patients, oncological adult patients and haematological adult patients). Two databases were used, Micromedex® and Drug Interaction Facts® (DIF®). 2. To determine the incidence density of potential DDIs in treatments from onco-haematological patients in the same population groups. 3. To describe the characteristics of patients, treatments and detected potential DDIs. 4. To determine the risk factors associated with the presence of both total and clinically relevant DDIs by each population group and database. 5. To compare the agreement between both databases regarding to identified potential DDIs and their severity rating. 6. To describe the most frequent clinically relevant DDIs and to propose pharmacological alternatives or risk reduction strategies. Methodology: A prospective, observational and descriptive study was carried out during a 12 weeks period, to detect potential DDIs in medical treatments from onco-haematological inpatients, both adults and children, regardless antineoplastic treatment were administered to patients. Apart from treatment sheets, demographical, clinical and analytical data were recorded. Each medication list was screened through Micromedex® and DIF®. All identified potential DDIs were recorded and graded by their level of severity and scientific evidence, with a description of the pharmacological mechanism and their effects. Any DDI detected by each database was considered a potential DDI. A clinically relevant DDI (CR-DDI) was defined according to the level of severity irrespective to the scientific evidence: • For Micromedex® database, those DDIs classified as contraindicated, major and moderate. • For DIF®, those DDIs classified as major and moderate. A descriptive analysis, both quantitative and qualitative, of demographical, clinical and analytical data was carried out. A list of prescribed drugs and both total and clinically relevant identified DDIs by each database was executed too. Logistic and linear regression models were used to identify risk factors associated with DDIs, well as probability of DDI occurrence (presence/absence), well as to obtain an equation that determine the number of potential DDIs according to associated risk factors. When comparing both databases, and in the context of commonly detected DDIs, kappa statistic was used to evaluate the agreement between their assigned severity ratings. Results: A total of 1,166 treatment sheets, belonging to 341 patients, were analysed. The total number of identified DDIs was 3,155 by Micromedex® and 1,989 by DIF®. Results for the main objectives were described as follows: • Oncology Department: prevalence of medical orders with any potential DDI was 81.69% and 48.21% by Micromedex® and DIF® respectively; and prevalence of treatments with any potential CR-DDI was 80.97% and 32.62%, respectively. Mean incidence density considering all potential DDIs was 222.77 and 102.08 DDI per 100 treatments-day; regarding to CR-DDIs, 218.63 and 61.72 DDIs per 100 treatments-day, respectively. • Haematology Department: prevalence of medical orders with any potential DDI was 74.45% and 69.40% by Micromedex® and DIF® respectively; and prevalence of treatments with any potential CR-DDI was 74.13% and 56.78%, respectively. Mean incidence density considering all potential DDIs was 437.28 and 331.95 DDIs per 100 treatments-day; regarding to CR-DDIs, 428.51 and 240.53 DDIs per 100 treatments-day, respectively. • Onco-haematological Paediatric Section: prevalence of medical orders with any potential DDI was 56.67% and 58.00% by Micromedex® and DIF® respectively; and prevalence of treatments with any potential CR-DDI was 44.67% and 51.33%, respectively. Mean incidence density considering all potential DDIs was 155.70 and 153.82 DDIs per 100 treatments-day; regarding to CR-DDIs, 121.04 and 118.12 DDIs per 100 treatments-day, respectively. Globally, the main risk factor associated with the presence of DDIs was the drugs number, sometimes as total prescribed drugs, others as non-antineoplastic drugs, or even both. Several differences were observed when comparing both databases, such as the ability to detect any potential DDI finding a weak congruence (k=0.372 by total DDIs and k=0.253 regarding to CR-DDIs; p<0.0001 in both instances), or analyzing the reliability of severity ratings in the context of commonly detected DDIs by both databases, finding a null congruence (k=-0.062; p<0.002). Given their potential severity and frequency, we would like to highlight the following DDIs: combinations of central nervous system depressants; increased risk of extrapyramidal reactions when antiemetics are associated; serotoninergic syndrome when 2 serotoninergic agents are co-administered; QT interval prolongation, especially if some drugs are combined, such as azole antifungals, 5-HT3 antagonists, antipsychotics, fluoroquinolones and tricyclic antidepressants; and an increase or a decrease in serum concentrations of immunosuppressant agents. Conclusions: Prevalence and incidence density of DDIs were elevated, considering both databases and all three population groups. There are important differences between databases, so the congruence of severity ratings was low. This fact makes difficult a proposal based on alternative drugs and the establishment of risk reduction strategies.

Los problemas relacionados con los medicamentos (PRM) son problemas de salud vinculados al tratamiento farmacológico del paciente y que interfieren o pueden interferir con los resultados esperados en su salud. La prevalencia de PRM es alta y en un alto porcentaje evitable. El presente estudio tiene como objetivo determinar la prevalencia de los PRM que son causa de ingreso en el Hospital Clínico de Barcelona de los pacientes procedentes del Centro de Salud (CS) Les Corts, su evitabilidad y los medicamentos relacionados. La metodología es una revisión de la historia clínica del paciente ingresado y la del centro de salud que permitirá la detección y evaluación de PRM a cargo de una pareja de médico y farmacéutico.Las conclusiones son las siguientes:1. El 13,4 % de todas las altas (médicas y quirúrgicas) producidas en el hospital de referencia de los pacientes adscritos al CS Les Corts presentan PRM, estando éstos mayoritariamente implicados en el ingreso hospitalario.2. Las altas con PRM corresponden mayoritariamente a varones mayores de 75 años, a diferencia de las altas sin PRM, donde predominan las mujeres menores de 65 años.3. La inefectividad es la categoría de PRM mayoritaria, seguida de la seguridad y por último la necesidad.4. Los servicios de medicina interna, cardiología y neumología son los que presentan una mayor probabilidad de recibir ingresos debidos a PRM.5. Los problemas de salud motivo de ingreso hospitalario son mayoritariamente circulatorios (38,5%) y respiratorios (11,5%). Entre los primeros destacan la insuficiencia cardiaca congrestiva, el accidente cerebrovascular y el infarto agudo de miocardio, y entre los segundos las infecciones respiratorias.6. En una 57,3% del total de altas con un PRM como responsable del ingreso hospitalario se ha considerado que dicho PRM es evitable.7. El 80% de los PRM son de gravedad moderada.8. Los grupos terapéuticos más frecuentemente implicados en los PRM son el cardiovascular (C), hematológico (B), antiinfeccioso vía sistémica (J) y sistema nervioso (N).

A través de una revisión sistemática, en la que se incluyen tres metaanálisis que integran 101 estudio observacionales, esta tesis aborda la adherencia al tratamiento antirretroviral de gran actividad (TARGA) con los objetivos de estimar el porcentaje medio de personas que afirma adherirse ≥90% del TARGA prescrito, así como determinar las variables asociados a dicha adherencia Los resultados obtenidos son: 1/ La adherencia al TARGA se evalúa mayoritariamente con una única estrategia, el autoinforme es la estrategia más empleada. 2/ El porcentaje medio de personas que en el mundo afirma tomar ≥90% del TARGA prescrito es del 62%, en España ese porcentaje medio es del 55%. En mujeres este porcentaje medio es menor (62%) que en los hombres (67%), aunque no se obtienen diferencias significativas. 3/ Las variables que modulan la adherencia varían de unas regiones a otras y en función del sexo. / Through a systematic review, which includes three meta-analyses formed by 101 observational studies, this thesis addresses adherence to highly active antiretroviral therapy (HAART). Its aims are to estimate the overage percentage of people claiming to adhere to ≥ 90% prescribed HAART, and to identify the variables associated with such adherence. The results obtained are: 1 / Adherence to HAART is assessed mainly with a single method, being the self-report the most commonly method used. 2 / The average percentage of people in the world that claims to take ≥ 90% of prescribed HAART is 62%, in Spain that average percentage is 55%. In women this percentage is lower (62%) than in men (67%), although no significant differences are obtained. 3 / The variables that modulate adherence vary from region to region, and according to gender.

La contaminació química planteja un gran perill per als ecosistemes naturals i té un gran impacte en la disponibilitat dels recursos d'aigua. Els contaminants amb activitat biològica específica que interaccionen amb el metabolisme dels sistemes reguladors i/o hormonals dels éssers vius reben el nom general de xenobiòtics. Donada la seva toxicitat potencial a baixes concentracions, és fonamental desenvolupar les eines capaces de detectar les interaccions entre aquests xenobiòtics i els receptors cel·lulars. Els bioassaigs basats en la utilització de llevats modificats genèticament, també coneguts com a RYA, han demostrat ser una eina excel·lent per a la detecció de xenobiòtics. En aquest treball s'han desenvolupat i analitzat diferents versions de RYA a fi d'implementar un protocol automatitzable per a l'avaluació i el control de l'impacte ambiental causat per diferents xenobiòtics. El RYA s'ha utilitzat per a correlacionar la presència de xenobiòtics amb activitats biològiques potencialment nocives en mostres ambientals i per a establir relacions entre l'estructura química i l'afinitat de diferents compostos químics i dels seus derivats per diferents receptors nuclears de vertebrats. Finalment, s'ha realitzat un exercici d'intercalibració del sistema RYA per a la detecció d'estrogenicitat en mostres d'aigua a nivell europeu i s'ha aplicat en la detecció de xenobiòtics en mostres ambientals i en la monitorització de mètodes de tractament d'aigües residuals. / Chemical pollution represents a great danger to the natural ecosystems and has a major impact in the availability of water resources. Those pollutants with specific biological activity and able to interact with the metabolism of hormonal systems of living beings are generally named xenobiotics. Given its potential toxicity in lower concentrations, it is essential to develop specific tools to detect the connections between these xenobiotics and cellular receptors. The bioassays based on genetically modified yeast strains, also known as RYA, are excellent tools for xenobiotic detection. In this work, different versions of RYA were developed and analysed in order to implement a mechanised protocol to evaluate and control the environmental impact caused by different xenobiotics. These protocols have been used to connect the presence of xenobiotics with biological activities of environmental relevance and to correlate chemical structure of chemical components and of their derivatives and their capacity to interact with nuclear receptors. Finally, we conducted an interlaboratory exercise on the use of RYA for detection of estrogenicity in waters at European level. All these techniques have multiple applications to detection of xenobiotics in environmental samples and in the surveillance of the efficiency and the routinely control of residual water treatment plants.

El objetivo de este trabajo es el estudio del paso transplacentario de sustancias de abuso durante el primer trimestre de la gestación mediante el análisis en matrices no convencionales de las principales drogas de abuso y sus metabolitos. Hemos analizado la exposición intrauterina a estas sustancias utilizando cuestionarios estructurados y la presencia de biomarcadores de exposición en la placenta y los restos fetales procedentes de 258 mujeres que interrumpieron voluntariamente su embarazo en la semana 12 de la gestación. Se hallaron 93 muestras pareadas positivas (36%), 65 en placenta y 50 en restos fetales. El 1.6% de los casos fueron positivos a cannabis, 2.7% a cocaína, 25.6% a tabaco y 5.8 % casos presentaban policonsumo. Los biomarcadores estudiados evidencian la capacidad de estas sustancias de atravesar la barrera placentaria en distinta extensión y demuestran que existe una infradeclaración del consumo de drogas de abuso entre la población estudia da. / The aim of this study is to analyze the transplacental transfer of drug abuse substances during the first trimester of pregnancy by analyzing the mainly substances of abuse and metabolites in unconventional matrices. We have analyzed intrauterine exposure to these substances with structured questionnaires and exposure biomarkers in placenta and fetal remains from 258 women who voluntarily terminated their pregnancy at 12 weeks of gestation. 93 matched samples were found positive (36%), 65 in placenta and 50 in fetal remains. 1.6% of the cases were positive for cannabis, 2.7% for cocaine, 25.6% for tobacco and 5.8% to more than one drug. These biomarkers show the capacity of these substances to cross the placental barrier to several extent and they also confirm that participants do not self-report drug abuse reliably.