Made available in DSpace on 2015-04-11T13:54:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jaqueline Gomes.pdf: 3380119 bytes, checksum: c2f5ebdd86761d38ccbed42052156d29 (MD5) Previous issue date: 2013-07-19 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / Waste electrical and electronic equipment (WEEE) have toxic compounds as well as materials susceptible of reutilization, deserving for instance an especial attention to the extent that there is a growing trend to sell such equipments, and consequently increasing the making of this kind of residues. By means of international and national levels it is possible to identify directives, specific laws, studies and several other proceedings ruling REEE problem. In this study, besides bibliographic survey, it was utilized data collected from actors interviews (customers, recycling and technical support enterprises, environmental control agencies), which turned possible to formulate REE flux, and estimate REEE production in 2020. In Manaus there is still a lack of investigation toward REEE thematic especially linked to post-consumption housing residues and inadequate logistical structure of several modals (aerial, roadway, and fluvial) imperiling the establishment of reverse logistical system. In regard to the estimate production for Manaus in 2020, it was found 0,03 kg/in habitant, computer 0,96 kg/in habitant television set 0,44 kg/in habitant and refrigerator 3,49 kg/in habitant the sum of that equipment totaling 4.92 kg/in habitant. As for REEE logistic practical reverse, we figured out that they are still very timid and actions identified were for the most part at international and national scenario. Results showed absence in Manaus of a system and/or plan of management for REEE post housing consumption, as well as enterprises and population inertia concerning the destination of this kind of residues, i.e. both of them wait for governmental initiative, in this sense REEE turned to donation is sent to sanitary levee together with domiciliary residues. / Os resíduos de equipamentos eletroeletrônicos (REEE) por terem em sua composição diversos materiais passíveis de recuperação e tóxicos merecem especial atenção, pois os números indicam sempre uma tendência crescente nas vendas destes equipamentos e como consequência aumenta também a geração deste tipo de resíduo. No âmbito internacional e nacional já é possível identificar diretivas, leis específicas, estudos e diversos eventos que tratam da questão dos REEE. Nesta pesquisa, além do levantamento bibliográfico, utilizou-se coleta de dados através de entrevistas junto aos atores (consumidores, empresas de reciclagem e assistências técnicas, órgãos de controle ambiental), permitindo a elaboração de um fluxo dos REEE, e a obtenção de um cálculo da estimativa de REEE (aparelho de celular, computador, geladeira e televisor) que serão gerados em 2020. No município de Manaus ainda há carência de pesquisas voltadas a temática dos REEE em especial aos resíduos residenciais de pós-consumo, bem como, a fragilidade na estrutura logística dos diversos modais (aéreo, viário e aquaviário), o que compromete a implantação de sistemas de logística reversa. Quanto à geração per capita estimada para a cidade de Manaus em 2020, obteve-se para celular 0,03 kg/hab, computador 0,96 kg/hab, televisor 0,44 kg/hab e geladeira 3,49 kg/hab, a soma destes equipamentos equivale ao total de 4,92 kg/hab. Sobre as práticas de logística reversa dos REEE, percebe-se que estas ainda são tímidas, as ações identificadas foram em sua grande maioria no âmbito nacional e internacional. Os resultados mostraram a inexistência em Manaus de um sistema ou plano de gerenciamento dos REEE pós-consumo gerados nos domicílios, bem como, a inércia das empresas e população quanto à destinação deste tipo de resíduos, pois ambos esperam por iniciativas dos governos, neste sentido, os REEE acabam tendo como destinação a doação e o envio para o aterro sanitário do município juntamente com os resíduos domiciliares.

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-04-25T15:43:12Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Larissa Juliana Patrocínio da Silva - 2017.pdf: 1537272 bytes, checksum: c1fc2b7ec4303e9dd7265a84ef53bc5e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-04-25T15:43:54Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Larissa Juliana Patrocínio da Silva - 2017.pdf: 1537272 bytes, checksum: c1fc2b7ec4303e9dd7265a84ef53bc5e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-25T15:43:54Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Larissa Juliana Patrocínio da Silva - 2017.pdf: 1537272 bytes, checksum: c1fc2b7ec4303e9dd7265a84ef53bc5e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-03-08 / To ensure the quality of the medicines that come from the supplier and go to clients, the distributors must check the quality of these at the time of receipt. At the conference during the receipt of medicines by the distributors, it is necessary to verify that the physical products correspond to those of the invoice of purchase and the conditions of transport, to see if there are damaged medicines. Not all medications received from suppliers by the distributor are in compliance. Some have problems, referred to in this study as Technical Deviations, so these medicines can not and should not be passed on to customers and must be identified as soon as possible and returned to the supplier. Technical deviations are conditions presented by the products that during the manufacturing, transportation or storage process deviated from the quality parameters established by ANVISA. But distributors face difficulties in performing reverse logistics, since some suppliers use the power of the brand and create obstacles and bureaucracy for this return, and also sometimes do not want to have extra costs, locking Processes and causing losses to the distributor. The present study aimed to identify, categorize and quantify technical and financial aspects of the deviations that generate returns in a medicine distributor. First, the work brings a theoretical reference and to achieve the objective of the study, a case study and documentary analysis of records was carried out at a medicine distributor. The Distributor provided the records of technical deviations made in the period of 2014 and 2015. Through the documentary analysis, a spreadsheet with the types of technical deviations and product name, quantity, class, lot, laboratory, price and expiration. Through the analysis were identified and characterized all the reasons why deviations were considered and generated devolution. Seven technical deviations were found: defect, lack, surplus, short validity, batch divergence, product exchange and packaging error from which its characteristics were presented. The total amount of loss found for the Distributor surveyed was R$ 914.864,57 in the studied period. A ranking of the suppliers with the highest number of registrations was presented and a Check-list for distributor of medicines identifies possible technical deviations. / Para garantir a qualidade dos medicamentos que vem do fornecedor e vão para clientes, as distribuidoras precisam conferir a qualidade destes no ato do recebimento. Na conferência durante o recebimento de medicamentos pelas distribuidoras é preciso verificar se os produtos físicos correspondem aos da nota fiscal de compra e também as condições de transporte, para ver se há medicamentos danificados. Nem todos medicamentos recebidos dos fornecedores pela distribuidora estão em conformidade. Alguns possuem problemas, denominados neste estudo como desvios técnicos, desse modo, estes medicamentos não podem e não devem ser repassados aos clientes devendo ser identificados o quanto antes e devolvidos ao fornecedor. Desvios técnicos são condições apresentadas pelos produtos que durante o processo de fabricação, transporte ou armazenamento se afastaram dos parâmetros de qualidade estabelecidos pela ANVISA. Mas as distribuidoras enfrentam dificuldades em realizar a logística reversa, pois alguns fornecedores, já que possuem grande volume de vendas e criam empecilhos e burocracia para esta devolução, e também às vezes não querem ter custos a mais, travando processos e trazendo prejuízos para a distribuidora. O presente trabalho teve como objetivo identificar, categorizar e quantificar em relação aos aspectos técnicos e financeiros os desvios que geram devoluções em uma distribuidora de medicamentos. Primeiramente, o trabalho traz um referencial teórico a respeito do tema e para atingir o objetivo do trabalho foi realizado um estudo de caso e análise documental de registros em uma distribuidora de medicamentos. A Distribuidora forneceu os registros de desvios técnicos realizados no período de 2014 e 2015. Através da análise documental foi criada uma planilha com os tipos de desvios técnicos, nome do produto, quantidade, classe, lote, laboratório, preço e validade. Por meio da análise foram identificados e caracterizados todos os motivos pelos quais foram considerados desvios e geraram devolução. Foram encontrados sete desvios técnicos: avaria, falta, excedente, validade curta, divergência de lote, troca de produto e erro de embalagem dos quais foram apresentadas suas características. O valor total encontrado de prejuízo para a Distribuidora pesquisada foi R$914.864,57 no período estudado. Foi apresentado um ranking dos fornecedores com maior número de registros e um Check-list para que a distribuidora de medicamentos possam identificar possíveis Desvios Técnicos.

Made available in DSpace on 2016-03-15T19:36:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Celso Luchezzi.pdf: 3145897 bytes, checksum: 9bc68a1562b53f0848bb954c94689512 (MD5) Previous issue date: 2014-04-25 / The Construction is occupying its space industry and becoming a major industry on the national scene because its growth trend, driven by the Programa de Aceleração ao Crescimento (PAC), Minha Casa Minha Vida sponsored by Caixa Econômica, and also by the events of the World Cup in 2014 and Olympic Games 2016 in Rio de Janeiro. Due to these facts, there are initiatives for sustainable growth together with the National Solid Waste Policy, Law 12.305 , which is causing companies in the Construction sector begin to worry about the trash generated , giving due importance to recycling materials because these materials can generate many opportunities within the supply chain resulting from the revaluation of waste (rubble). Due to these facts, companies like Brazilian Associação Brasileira para Reciclagem de Resíduos da Construção Civil e Demolição (ABRECON), Estação Resgate, RMP Recicladora de Entulho e Recinert Abientale arise in the Brazilian market at the moment is no need to think of ways to sustainable disposal of waste (rubble) materials, who present solutions to recycling this waste (rubble) generated today. The challenge in this sector is to show the possibility of recycling materials and obtain financial and environmental gains preserving natural resources, not promoting accumulation of garbage in the works. The recycling of materials in Construction comes against the awareness of people involved in the generation of waste (rubble), in order to promote proper separation at source process, facilitating the work of collection and the consequent transformation into other products in order to reuse them within the production chain through structured Reverse Logistics. In this work, a case study was conducted in the works Construction, to identify the different types of waste generated, which will be classified and shown the possibilities for reuse, seeking their recycling. / A indústria da Construção Civil vem ocupando seu espaço e se tornando um setor importante no cenário nacional devido sua tendência de crescimento, impulsionada pelas obras do Programa de Aceleração ao Crescimento (PAC), programa Minha Casa Minha Vida patrocinando pela Caixa Econômica, e também pelos eventos da Copa do Mundo em 2014 e os Jogos Olímpicos em 2016 no Rio de Janeiro. Devido a estes fatos, surgem iniciativas de crescimento sustentável juntamente com a Política Nacional de Resíduos Sólidos (PNRS), a Lei 12.305, que está fazendo com que as empresas do setor de Construção Civil comecem a se preocupar com o lixo (entulho) gerado, dando a devida importância à reciclagem de entulhos, pois estes materiais podem gerar muitas oportunidades dentro da cadeia produtiva decorrente da revalorização dos resíduos. Devido a estes fatos, empresas como a Associação Brasileira para Reciclagem de Resíduos da Construção Civil e Demolição (ABRECON), Estação Resgate, RMP Recicladora de Entulho e Recinert Abientale, surgem no mercado brasileiro no momento em que há necessidade de se pensar em formas de descartes sustentáveis, de materiais e ou de resíduos da Construção Civil, sendo que hoje elas apresentam soluções para reciclagem desse lixo (entulho) gerado. O desafio desse setor é mostrar a possibilidade de reciclar materiais e obter ganhos financeiros e ambientais preservando recursos naturais, não promovendo acúmulos de lixo nas obras. A reciclagem de materiais na Construção Civil vem de encontro à conscientização das pessoas envolvidas no processo de geração do lixo (entulho), com o intuito de promover a separação correta na fonte geradora facilitando o trabalho de coleta e, consequente, transformação em outros produtos de forma a reutilizá-los dentro da cadeia produtiva da Construção Civil através de uma Logística Reversa estruturada. Neste trabalho foi realizado um estudo de caso em obras da Construção Civil, visando identificar os diferentes tipos de resíduos gerados, os quais devem ser classificados e mostrados as possibilidades de reuso na Construção Civil, visando sua reciclagem de modo a criar oportunidades na cadeia produtiva.

A genotipagem do vírus da hepatite C (VHC) é a principal ferramenta para prognóstico e tempo de tratamento. Dependendo do genótipo infectado existem diferentes esquemas e tempo de tratamento. O objetivo deste trabalho foi desenvolver padronizar e validar um método de genotipagem por PCR em tempo real com base na análise da região NS5B. Esta região apresenta um grau de polimorfismo que permite identificar de modo mais acurado tanto os tipos como os subtipos do VHC. Para isto foram desenhados dois conjuntos de primers e sondas. Neste trabalho desenvolvemos um método one-step modificado em uma reação triplex em que ocorre a identificação dos genótipos (1a, 1b, 3a) e em outro set a identificação dos genótipos (2a, 2b, 2c). Os resultados obtidos pelo método de genotipagem em tempo real concordaram em 100% com os resultados de seqüênciamento da região NS5B quando excluímos amostras que foram identificados como mistura de genótipos no método desenvolvido e classificados somente como um único genótipo no seqüênciamento. Houve uma boa concordância entre o método desenvolvido e o seqüênciamento da região NS5B pelo coeficiente de Kappa (k= 0,6222; p=0,0020). O método de desenvolvido conseguiu detectar 97,93% (190/194) do genótipo 1, 86,11% (31/36) do genótipo 2 e 100% (80/80) do genótipo 3. A média da sensibilidade foi de 97%. Quando comparamos a genotipagem por PCR em tempo real e LiPA nas 310 amostras analisadas não houve resultados discordantes em relação ao genótipo. Entretanto, 26,24% (79/301) das amostras analisadas apresentaram resultados discordantes em relação ao subtipo quando comparados os dois métodos. Foi determinada a sensibilidade analítica do método através de um ponto do painel da OptiQuant que foi diluído de modo seriado e a sensibilidade relativa foi realizada através de amostras de plasma de pacientes com carga viral determinada pelo Cobas Amplicor. O limite mínimo de detecção determinado foi de 125UI/ml para o genótipo 3a, 250 UI/ml para o genótipo 1b e 2b e 500 UI/ml para o genótipo 1a. Somados a isso, o método desenvolvido tem um custo de R$ 58,00, um valor nove vezes menor que o método comercial utilizado em nosso laboratório. Além disso, no método desenvolvido, o tempo trabalhado cai para menos de 2 horas sem a necessidade de manipulação constante em comparação com LiPA que necessita em torno de 16 horas, devido ao vários passos de hibridizações e lavagens. No presente trabalho o método de genotipagem por PCR em tempo real para o VHC mostrou-se eficiente e capaz de identificar de um modo acurado os diferentes genótipos e seus subtipos e contribuir para um entendimento melhor do verdadeiro papel dos genótipos e seus subtipos e da variabilidade genética na história natural da infecção do VHC. / Hepatitis C virus (HCV) genotyping is the most significant predictor of response to antiviral therapy. Depending on the infecting HCV genotyping different antiviral regimens have been proposed as well as the length of different treatment. The aim of this study was to develop and evaluate a new real time PCR of HCV genotyping based in NS5B region. This region has sequencing heterogeneity and can accurately identify both type and subtype of HCV. Furthermore, we compared the real time PCR with LiPA and sequencing of NS5B region. We developed a new one-step modified method in triplex reaction where we identified in two sets genotypes (1a, 1b, 3a) and (2a, 2b, 2c). Results obtained by real time PCR agreed 100% with those obtained by NS5B sequencing when excluded samples with mixed of HCV genotypes identified by real time PCR genotyping and in NS5B sequencing all samples were classified only as only one genotype. We found a good concordance for the analysis of genotype concordance between genotyping by real time and sequencing of NS5B region through the coefficient kappa (k= 0,6222; p=0,0020). The method developed detected 97,93% (190/194) of genotype 1, 86,11% (31/36) of genotype 2 and 100% (80/80) of genotype 3, with the overall sensitivity of this new method being 97%. Among 310 samples only two samples had discordant results at type level when comparing real time PCR and LiPA. However, 26,24% (79/301) had discordant results at subtype level when comparing LiPA and real time PCR genotyping of HCV. In order to measure the analytical sensitivity of the real time assay, one member of the panel OptiQuant HCV RNA was diluted. The relative sensitivity was determined by analysis the clinical specimens based upon the initial HCV RNA concentration determined by Cobas Amplicor. The lower limit of detection was estimated to be 125 IU/ml for genotype 3a, 250 IU/ml for genotype 1b and 2b, and 500 IU/ml for genotype 1a. Finally, the cost of each reaction are about R$ 58,00 nine fold lower than the commercial method available in Brazil. Manipulation time of real time PCR genotyping is about 2 hours, in comparison to LiPA that requires about 16 hours due to various hybridization steps and washing. This study was demonstrated an efficient method of identification in a accurate way. HCV genotyping which is important to understand the role of genotypes and subtypes, as well as of genomic variability in the natural history of HCV infection.

Orientadores: Sergio Marangoni, Luís Alberto Ponce Soto / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-20T20:51:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RomeroVargas_FreyFrancisco_D.pdf: 4482249 bytes, checksum: 951ba98ea20426e2308c178f17a7680d (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: Uma nova miotoxina fosfolipase A2 (BtTX-II) foi purificada a partir do veneno total de Bothriopsis taeniata através de dois passos cromatográficos, envolvendo inicialmente cromatografia de exclusão molecular, seguida de HPLC de fase reversa. BtTX-II foi caracterizada bioquimicamente através de eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) mostrando uma única banda eletroforética com massa relativa (Mr) de 14000 Da, em condições não reduzidas e reduzidas (DTT 1M). A pureza e massa molecular foram confirmadas por espectrometria de massa (MALDI-Tof MS), a qual determinou uma massa molecular de 13889,98 Da. BtTX-II apresentou atividade catalítica de 12,075 ± 0,138 nmoles/mg/min em presença do substrato cromogênico específico ácido 4-nitro-3-(octanoyloxy) benzoico. Análise de composição de aminoácidos da PLA2 (BtTX-II) corroborou seu caráter básico. A análise dos peptídeos trípticos foi determinada por ESI-QTof-MS/MS espectrometria de massa e as regiões contendo peptídeos internos mostraram semelhança com outras PLA2s miotóxicas botrópicas cataliticamente ativas. BtTX-II, pertencente à classe PLA2 D49, exibiu atividade ótima a pH 8,0 e temperatura de 37 ºC. Na ausência de Ca2+ e na presença de alguns íons divalentes, tais como Mg2+, Mn2+, Zn2+ e Cd2+ (10mM), a atividade fosfolipásica foi significativamente diminuída. Também foi demonstrado o efeito inibitório de crotapotinas crotálicas sobre a atividade PLA2 da BtTX-II. O efeito neurotóxico da BtTX-II foi analisado através de estudos miográficos em preparações neuromusculares "ex vivo", mostrando que BtTX-II induz um leve bloqueio na junção neuromuscular em preparações Biventer cervicis de pintainho. Tais preparações foram utilizadas para o estudo morfológico quantitativo da BtTX-II, o que mostrou uma leve atividade miotóxica "in vitro" com a concentração de 50?g de BtTX-II. O efeito miotóxico também foi avaliado através de ensaios de liberação de creatina kinase plasmática e análise histopatológica do músculo gastrocnêmio de camundongo "in vivo", com estes últimos testes foram observandos maiores mudanças morfológicas quando comparadas aos estudos "in vitro", mostrando estar diretamente relacionada com a liberação de CK. BtTX-II induz miotoxicidade local após injeção intramuscular, mas não produz miotoxicidade sistêmica após injeções intravenosa. O efeito edematogênico foi estudado através do modelo coxim plantar de camundongo e mostrou ser elevado nas primeiras horas após injeções subcutâneas, em todas as concentrações aplicadas (1- 20 ?g). O efeito citotóxico "in vitro" foi caracterizado utilizando uma cultura celular da linhagem de mioblastos/miotubos de músculo esquelético de camundongo. BtTX-II não induz citotoxicidade em mioblastos; mas BtTX-II evidenciou atividade citotóxica em miotubos, em uma concentração padrão de 20 ?g. Nossos resultados sugerem que BtTX-II atua no processo de regeneração muscular em baixas concentrações (10 ?g) durante o período de 28 dias após as injeções intramusculares no gastrocnêmio de camundongo, demonstrando ser apropriado para a análise na regeneração muscular, pois induz necrose e não acarreta lesão do tecido vascular nem nervoso, o que é de suma importância para o processo de regeneração muscular. Isto foi possível pela presença de células satélite envolvidas neste processo junto com o infiltrado inflamatório notório em todos os períodos da regeneração / Abstract: A new miotoxin phospholipase A2 (BtTX-II) was purified from Bothriopsis taeniata crude venom through two steps cromatográficos, involving molecular exclusion chromatography, as first step, and followed by RP-HPLC. BtTX-II, was characterized biochemically through electrophoresis in polyacrylamide gel (SDS-PAGE) showing a single eletrophoretic band, in reduced and not reduced conditions, with relative mass (Mr) of 14000 Da. The purity and molecular mass was confirmed by mass spectrometry mass (Maldi-Tof SM), showed a molecular mass of 13889.98 Da. BtTX-II showed catalytic activity of 12.075 ± 0.138 nmoles/mg/min upon of the specific chromogenic substrate acid 4-nitro-3-(octanoyloxy) benzoic. Analysis of aminoacid composition of PLA2 (BtTX-II) corroborated its basic character. Tryptic peptide analyse were determined for ESI-QTof-MS/MS mass spectrometry and the regions containing internal peptides showed similarity with other miotoxic botropics PLA2s. BtTX-II belonging to the class PLA2 D49 exhibited an optimal activity in pH 8.0 and at 37 ºC. In the absence of Ca2+ and in presence of some divalent íons such Mg2+, Mn2+, Zn2+ and Cd2+ (10mM), the phospholipasic activity was significantly decreased. Also, it was demonstrated the inhibitory effect of crotalics crotapotins upon activity PLA2 of the BtTX-II. The neurotoxic effect of the BtTX-II was analized through myographic studies in neuromuscular preparations "ex vivo", showing that BtTX-II induce a light blockade at the neuromuscular junction on chicken Biventer cervicis preparations. Such preparations were used for quantitatives morphologic studies, were shown a light myotoxic activity "in vitro" at higher concentration. On the other hand, the myotoxic effect was evaluated through release of plasmatic creatine kinase "in vivo" and was carry out histophatologic analyzes mouse gastrocnemius muscle, with these last tests were observed larger morphologic changes when compared to studies "in vitro", showing directly related with the CK liberation. BtTX-II induces local miotoxicity after intramuscular injection, but it did not produce systemic miotoxicity after intravenous injections. The edematogenic effect was studied through the model mouse paw edema and showed to be high in the first hours after subcutaneous injections, in all applied concentrations (1-20 ?g). The cytotoxic effect "in vitro" was characterized using a cell culture of the rodent lineage of myoblasts/myotubes cells. BtTX-II did not induce citotoxicity in skeletal muscle myoblasts; however, BtTX-II showed cytotoxic activity in myotubes, both with a standard concentration of 20 ?g. Our results suggest that BtTX-II act in the process of muscular regeneration in low concentrations (10 ?g) during a period of 28 days after intramuscular injections in the mouse gastrocnemius muscle, This effect was to be appropriate for muscular regeneration analyzes because it induces necroses and it did not carry out lesion of the vascular nor nervous tissue, thus, it is of supreme importance for the process of muscular regeneration. Those results were possible by the presence of satellite cells involved in these processes together with notorious inflammatory infiltrate in every periods of the regeneration / Doutorado / Bioquimica / Doutor em Biologia Funcional e Molecular

Submitted by Ubirajara Cruz (ubirajara.cruz@gmail.com) on 2018-06-08T14:07:09Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) tese_tanise_fortes.pdf: 1277949 bytes, checksum: 4aec80165f53d0b2f587adbcc608f856 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2018-06-11T16:56:11Z (GMT) No. of bitstreams: 2 tese_tanise_fortes.pdf: 1277949 bytes, checksum: 4aec80165f53d0b2f587adbcc608f856 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-11T16:56:11Z (GMT). No. of bitstreams: 2 tese_tanise_fortes.pdf: 1277949 bytes, checksum: 4aec80165f53d0b2f587adbcc608f856 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-02-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / A leptospirose é uma zoonose de ocorrência mundial causada por membros patogênicos do gênero Leptospira. Em países em desenvolvimento, como o Brasil, a doença representa um grave problema de saúde pública. Os hospedeiros suscetíveis adquirem a doença através do contato com urina, água ou solo contaminados com a bactéria. Além dos roedores, os bovinos e os caninos se destacam como importantes reservatórios de Leptospira spp, tornando a vacinação dos animais suscetíveis uma das principais formas de prevenção da doença. As vacinas disponíveis comercialmente são bacterinas que induzem resposta imune humoral predominantemente contra o lipopolissacarídeo (LPS) bacteriano e que não são capazes de fornecer proteção de longo prazo contra a infecção. As proteínas da membrana externa de Leptospira spp tem sido avaliadas como candidatos vacinais em modelo animal e são uma alternativa promissora às formulações comerciais em uso. Dessa maneira, o objetivo deste estudo foi realizar a triagem de preparações vacinais contendo proteínas recombinantes de Leptospira spp, visando o desenvolvimento de uma vacina contra a leptospirose. Cinco genes, LIC11889, LIC10666, LIC10498, LIC12666 e LIC10463, foram identificados e amplificados a partir do genoma de Leptospira interrogans sorovar Copenhageni cepa Fiocruz L1-130. Desses genes, quatro (LIC11889, LIC10666, LIC10498 e LIC10463) foram eficientemente expressos em sistema de expressão heteróloga em Escherichia coli e purificados através de cromatografia de afinidade. Duas proteínas recombinantes, rLIC11889 e rLIC10666 foram empregados na formulação de preparações vacinais, utilizadas para imunizar hamsters posteriormente desafiados com dose letal de L. interrogans sorovar Copenhageni cepa Fiocruz L1-130. Todos os animais vacinados com as preparações contendo as proteínas recombinantes sobreviveram à leptospirose aguda, tornando promissora sua utilização para a criação de vacinas contra a doença. / Leptospirosis is a worldwide zoonosis caused by pathogenic members of the genus Leptospira. In countries under development, like Brazil, the disease represents a serious problem of public health. The susceptible hosts acquire the disease through contact with urine, water or soil contaminated with the bacteria. As well as rodents, cattle and dogs are important reservoirs of Leptospira spp, making the vaccination of susceptible animals one of the main. ways of preventing the disease. The commercially available vaccines are bacterins that induce humoral immune response predominantly against the bacterial lipopolysaccharide (LPS) and are unable to provide long term protection against the infection. The outer membrane proteins of Leptospira spp have been evaluated as vaccinal candidates in animal models and are a promising alternative to usual commercial formulae. In this way, the objective of this study was to perform a trial of vaccinal preparations containing recombinant proteins of Leptospira spp, to develop a vaccine against leptospirosis. Five genes, LIC11889, LIC10666, LIC10498, LIC12666 and LIC10463 were identified and amplified from the genome of Leptospira interrogans serovar Copenhageni strain Fiocruz L1-130. From these genes, four (LIC11889, LIC10666, LIC10498 and LIC10463) were efficiently expressed in an heterologous expression system in Escherichia coli and purified through affinity chromatography. Two recombinant proteins, rLIC11889 and rLIC10666 were employed in the formulation of vaccinal preparations, used to immunize hamsters that were later challenged with the lethal dose of L. interrogans serovar Copenhageni strain Fiocruz L1-130. All the animals vaccinated with the preparations containing the recombinant proteins survived acute leptospirosis, making their use for the development of vaccines against the disease promising.

Nesta tese estamos especificamente interessados no problema de engenharia re- versa de redes regulatórias genéticas a partir de dados de pós-genômicos, um grande desafio na área de Bioinformática. Redes regulatórias genéticas são complexos cir- cuitos biológicos responsáveis pela regulação do nível de expressão dos genes, desem- penhando assim um papel fundamental no controle de inúmeros processos celulares, incluindo diferenciação celular, ciclo celular e metabolismo. Decifrar a estrutura destas redes é crucial para possibilitar uma maior compreensão à nível de sistema do desenvolvimento e comportamento dos organismos, e eventualmente esclarecer os mecanismos de doenças causados pela desregulação dos processos acima mencio- nados. Devido ao expressivo aumento da disponibilidade de dados experimentais de larga escala e da grande dimensão e complexidade dos sistemas biológicos, métodos computacionais têm sido ferramentas essenciais para viabilizar esta investigação. No entanto, seu desempenho ainda é bastante deteriorado por importantes desafios com- putacionais e biológicos impostos pelo cenário. Em particular, o ruído e esparsidade inerentes aos dados biológicos torna este problema de inferência de redes um difícil problema de otimização combinatória, para o qual métodos computacionais dispo- níveis falham em relação à exatidão e robustez das predições. Esta tese tem como objetivo investigar o uso de técnicas de ensemble learning como forma de superar as limitações existentes e otimizar o processo de inferência, explorando a diversidade entre um conjunto de modelos. Com este intuito, desenvolvemos métodos computa- cionais tanto para gerar redes diversificadas, como para combinar estas predições em uma solução única (solução ensemble ), e aplicamos esta abordagem a uma série de cenários com diferentes fontes de diversidade a fim de compreender o seu potencial neste contexto específico. Mostramos que as soluções propostas são competitivas com algoritmos tradicionais deste campo de pesquisa e que melhoram nossa capa- cidade de reconstruir com precisão as redes regulatórias genéticas. Os resultados obtidos para a inferência de redes de regulação transcricional e pós-transcricional, duas camadas adjacentes e complementares que compõem a rede de regulação glo- bal, tornam evidente a eficiência e robustez da nossa abordagem, encorajando a consolidação de ensemble learning como uma metodologia promissora para decifrar a estrutura de redes regulatórias genéticas. / In this thesis we are concerned about the reverse engineering of gene regulatory networks from post-genomic data, a major challenge in Bioinformatics research. Gene regulatory networks are intricate biological circuits responsible for govern- ing the expression levels (activity) of genes, thereby playing an important role in the control of many cellular processes, including cell differentiation, cell cycle and metabolism. Unveiling the structure of these networks is crucial to gain a systems- level understanding of organisms development and behavior, and eventually shed light on the mechanisms of diseases caused by the deregulation of these cellular pro- cesses. Due to the increasing availability of high-throughput experimental data and the large dimension and complexity of biological systems, computational methods have been essential tools in enabling this investigation. Nonetheless, their perfor- mance is much deteriorated by important computational and biological challenges posed by the scenario. In particular, the noisy and sparse features of biological data turn the network inference into a challenging combinatorial optimization prob- lem, to which current methods fail in respect to the accuracy and robustness of predictions. This thesis aims at investigating the use of ensemble learning tech- niques as means to overcome current limitations and enhance the inference process by exploiting the diversity among multiple inferred models. To this end, we develop computational methods both to generate diverse network predictions and to combine multiple predictions into an ensemble solution, and apply this approach to a number of scenarios with different sources of diversity in order to understand its potential in this specific context. We show that the proposed solutions are competitive with tra- ditional algorithms in the field and improve our capacity to accurately reconstruct gene regulatory networks. Results obtained for the inference of transcriptional and post-transcriptional regulatory networks, two adjacent and complementary layers of the overall gene regulatory network, evidence the efficiency and robustness of our approach, encouraging the consolidation of ensemble systems as a promising methodology to decipher the structure of gene regulatory networks.

Orientador: Carol Hollingworth Collins / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Química / Made available in DSpace on 2018-08-26T17:56:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Nome_RenataCristiano_D.pdf: 3193413 bytes, checksum: 499dd8e787afa50c91a2295212001ca4 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Este trabalho apresenta o desenvolvimento de fases estacionárias (FE) para utilização em Cromatografia Líquida em Alta Eficiência em Fase Reversa (CLAE-FR) a partir da sorção e imobilização de poli(metiltetradecilsiloxano) (PMTDS) sobre suportes de sílica metalizada com alumínio.O preparo dos suportes de sílica aluminizada e a sorção/imobilização do PMTDS sobre o suporte por tratamentos térmicos foram otimizados com planejamento experimental. Uma reação de capeamento com trimetilclorosilano e hexametildisiloxano foi realizada para o preparo de FE capeadas. Os suportes, bem como as FE capeadas e não capeadas foram caracterizadas por técnicas físico-químicas e cromatográficas. Observou-se que para os suportes a base de sílica aluminizada apresentarem características de suportes adequados para a cromatografia, os mesmos devem ser constantemente agitados por vortex. As FE não capeadas (Si-Al(PMTDS)) submetidas a um planejamento de experimentos foram avaliadas com o objetivo de determinar a temperatura e tempo necessário de imobilização do polímero que resultasse em melhor desempenho cromatográfico. Observou-se que independentemente do modo de imobilização as novas FE apresentam eficiências baixas de aproximadamente 30000 pratos por metro, porém as colunas recheadas apresentam boa separação, com picos simétricos para compostos apolares. A presença de alumínio em novas FE não capeadas (Si-Al(PMTDS) foi confirmada pelo baixo desempenho na separação de compostos básicos, os quais apresentarem alta retentividade. Por outro lado, as FE capeadas (Si-Al(PMTDS)ec) mostraram-se mais adequados para separação de compostos de caráter ácido ou básico, apresentando picos mais simétricos para o composto N,N-dimetilanilina (pKa > 9,0). O aumento da estabilidade química das novas FE ((Si-Al(PMTDS) e Si-Al(PMTDS)ec) a base de sílica modifica com alumínio foi confirmada pelo uso prolongado de fases móveis em condições drásticas de pH (pH < 2,0 e pH > 10,0) quando comparado com FE sem modificação metálica. As novas FE foram testadas na separação de uma ampla série de fármacos (pKa > 9,0) e agrotóxicos e os resultados indicam que podem ser potencialmente utilizadas nestas separações / Abstract: This work describes the development of stationary phases (SP) for Reversed Phase High Performance Liquid Chromatography (RP-HPLC) through sorption and immobilization of poli(methyltetradecylsiloxane) (PMTDS) over silica supports metalized with alumina. The preparation of aluminized silica supports and PMTDS sorption/immobilization by thermal treatment were both optimized by experimental planning. A capping reaction with trimethylchlorosilane and hexamethyldisiloxane was performed to prepare capped SP. Supports, capped SP as well as non capped SP were all characterized by physicochemical and chromatographic techniques. It was observed that constant vortex stirring of the support was necessary to yield aluminized silica-based supports suitable for chromatographic applications. The non capped SP (Si-Al(PMTDS)) were submitted to experimental planning to define the temperature and time needed to immobilize the polymer and to lead to better chromatographic performance. Regardless of the type of immobilization, it was observed that the new SP exhibited low efficiency of approximately 30000 plates per meter. However, the resulting columns exhibited good separation with symmetrical peaks for polar compounds. The presence of aluminum in the non capped SP (Si-Al(PMTDS)) was confirmed by the poor performance in the separation of basic compounds, which exhibited high retention. On the other hand, the capped SP (Si-Al(PMTDS)ec) were more suitable for the separation of acidic or basic compounds, with more symmetric peaks for N,N-dimethylaniline (pKa > 9,0). The increase in chemical stability of the new SP ((Si-Al(PMTDS) and Si-Al(PMTDS)ec) based on aluminized silica was confirmed through the extended use of mobile phases in drastic pH conditions (pH < 2,0 and pH < 10,0) when compared with SP without metalic modification. The new SP were tested for the separation of a wide range of pharmaceutical compounds (pKa > 9,0) and agrochemicals, and the results indicate that the new SP may be potentially used for such separations / Doutorado / Quimica Analitica / Doutora em Ciências

Orientador: Marco Aurélio Cremasco / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Química / Made available in DSpace on 2018-08-27T20:23:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ramos_AlexMartins_D.pdf: 2631980 bytes, checksum: 6ae843a3d8311ad1d248269d9eb22659 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: O piperonal é uma molécula de grande valor econômico, pois é utilizado como matéria-prima nas indústrias de cosméticos e de fármacos. Uma das formas de obtenção do piperonal é por meio de síntese cujo substrato é o safrol. O safrol é o principal constituinte químico do óleo essencial de pimenta-longa (Piper hispidinervum, C. DC), espécie que é abundante na região Amazônica. Após os processos de síntese aplicados diretamente no óleo de pimenta longa, obtém-se o piperonal, como produto principal, e os coprodutos safrol, isosafrol glicol, cis-isosafrol, trans-isosafrol e terpinoleno. O rendimento dessa rota sintética é cerca de 84% de piperonal. Por este motivo, e considerando o alto valor agregado ao piperonal é que se propôs separá-lo por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) com injeção empilhada. Nesse tipo de separação são essenciais as definições de tempo de ciclo e tempo de coleta. Para isso, foram empregadas duas abordagens: a abordagem experimental, na qual o tempo de ciclo e o tempo de coleta foram obtidos diretamente do cromatograma e a abordagem teórica que surgiu em decorrência do modelo proposto nesta Tese, onde os tempos de ciclo e coleta foram obtidos a partir dos parâmetros da curva gaussiana. Para essa última abordagem, são necessárias as constantes de equilíbrio e os parâmetros de transferência de massa (Dp, Def, Ds e Eb), que foram obtidos experimentalmente. Foram empregados três sistemas cromatográficos de separação: o primeiro e segundo foi constituido de fase móvel acetonitrila/água ¿ 70/30 (v/v) a 25 e 35 oC e o terceiro, de fase móvel etanol/água ¿ 70/30 (v/v) a 35 oC, com detecção em 245 nm para todos os sistemas. Utilizou-se coluna analítica de 25 x 0,46 cm e coluna semipreparativa de 25 x 1,0 cm recheadas com fase estacionária C18 cujo tamanho médio de partícula foi 20 ?m. Na coluna analítica foram determinadas a porosidade total e as constantes de equilíbrio do piperonal, safrol, isosafrol e terpinoleno, nas vazões de 0,6 ¿ 1,4 mL.min-1. Na coluna semipreparativa foram determinadas a porosidade total bem como os parâmetros de transferência de massa, nas vazões de 4,0 ¿ 6,0 mL.min-1. Para realização da abordagem teórica, foi preparado uma solução na qual a concentração foi de 0,2 g.L-1. Já na abordagem experimental, preparou-se uma solução de 9,50 g.L-1. Os resultados quanto aos parâmetros cromatográficos e às constantes de equilíbrio mostraram que os componentes têm a seguinte ordem crescente de eluição: piperonal, safrol, isosafrol e terpinoleno. O piperonal tem a menor afinidade com a fase estacionária C18 enquanto o terpinoleno possui a maior. Quanto aos parâmetros de transferência de massa, todos os valores foram próximos àqueles previsto na literatura, sendo o coeficiente de difusão efetivo da ordem de 10-6 cm2.s-1 e o coeficiente de dispersão axial da ordem de 10-3 cm2.s-1. Em relação à abordagem experimental, o piperonal apresentou pureza e recuperação superiores a 98% e 97%, respectivamente, em que a fase móvel acetonitrila/água à 25 oC, constitui-se como o melhor sistema de separação. O mesmo resultado foi obtido para a abordagem teórica quanto ao sistema de separação, sendo a pureza e recuperação de aproximadamente 100% de piperonal. A CLAE semipreparativa com injeção empilhada mostrou-se bastante eficiente em termos de produção de piperonal com elevado grau de pureza. Os resultados indicaram também que uma quantidade maior de amostra pode ser injetada e as informações operacionais bem como os parâmetros determinados neste estudo podem ser facilmente implementados em cromatografia preparativa, tanto em batelada quanto contínua, para obter grandes quantidades de piperonal puro / Abstract: Piperonal is a molecule of great economic value because it is used as raw material in the cosmetic and pharmaceutical industries. One way of obtaining piperonal is through synthesis which substrate is safrole. Safrole is main constituents of the essential oil of long pepper (Piper hispidinervum, C. DC), specie that is abundant in Amazon region. After synthesis processes applied directly to the long pepper oil, piperonal is obtained as the main product and coproducts safrole, isosafrole glycol, isosafrole cis, trans-terpinolene, and isosafrole. The throughput for this synthetic route is about 84% of piperonal. For this reason, and considering the high added value at the piperonal is proposed that separate it by High Performance Liquid Chromatography with stacked injection. For this, two approaches were used: the experimental approach, in which the cycle time and the time of collection were obtained directly from the chromatogram in concentrated solution and the theoretical approach that arose due to proposed model in the thesis on condition of infinite dilution, where cycle times and collection were obtained from the parameters of the gaussian curve. In this last approach, the equilibrium constants and parameters of mass transfer (Dp, Def, Ds and Eb), which were obtained experimentally are needed. Três chromatographic separation systems were used: the first and second, consisted of mobile phase acetonitrile/water ¿ 70/30(v/v) at 25 and 35 oC and the third, ethanol/water ¿ 70/30 (v/v) at 35 oC, with detection in 245 nm all systems. It was used analytical column of 25 x 0,45 cm and semipreparative column of 25 x 1,0 filled with stationary phase C18 which size particle is 20 ?m. In analytical column were determined the total porosity and equilibrium constants of piperonal, safrole, isosafrole and, terpinoleno, in flow rate of 0.6 ¿ 1.4 mL.min-1. In semipreparative column were determined the total porosity as well as the parameters of mass transfer, in flow rates 4.0 ¿ 6.0 mL.min-1. For the performance of theoretical approach, was prepared a solution in which the concentration 9.50 g.L-1. The results regarding to chromatographic parameters and equilibrium constants showed that the components has a followed ascending order of elution: piperonal, safrole, isosafrole, terpinolene. The piperonal has a lowest affinity in respect to stationary phase C18 while terpinoleno has the greatest. Regarding mass transfer parameters, all values are close to those predicted in the literature, the effective diffusion coefficient of about 10-6 cm2.s-1 and the axial dispersion coefficient of the order of 10-3 cm2.s-1. With respect to experimental approach, piperonal presented purity and recovery greater than 98% and 97%, respectively, in which mobile phase acetonitrile/water at 25 ° C, was established as the best separation system. The same result was obtained to theoretical approach regarding to separation system, being purity and recovery about 100% of piperonal. The semipreparative HPLC with stacked injection proved to be very efficient in terms of producing piperonal with high purity. The results also indicate that a greater amount of sample may be injected, and the operational information¿s and the parameters determined in this study may be easily implemented in preparative chromatography, either batch or continuous, to obtain large quantities of pure piperonal / Doutorado / Engenharia de Processos / Doutor em Engenharia Química

The concern of society about the environmental impact mainly post-consumer waste is increasing every day. The degradation that the environment suffers from the dump this waste and the lack of sustainability that the current economic model predicts, are factors that influence the search for alternatives to solve or minimize these effects. The objective of this paper is to present the application of Lean Six Sigma in packaging reverse logistics activities in a soft drink industry. The Reverse Logistics has become important in organizations because it deals with the reverse flow of resources among members of the traditional supply chain. Can help the most points explored by organizations: maximize profit while minimizing costs. The Lean Philosophy and Methodology Six Sigma are two important and innovative trends in business and the joint application of the two methodologies can bring significant benefits to organizations. The research methods were Bibliographic Search, Documentary Research and Case Study. Applied to Lean Philosophy in the process to reduce waste and also applied up to the practical Six Sigma reduce variability. After the diagnosis of waste and variability, we applied the solutions proposed in the improvement plan and the gains were the reduction of operating costs and reduced lead time of the process. The conclusion was that Lean Six Sigma process improvement and provided significant financial gains for the organization. / A preocupação da sociedade com o impacto ambiental principalmente dos resíduos de pós-consumo vem aumentando a cada dia. A degradação que o meio ambiente sofre com o despejo destes resíduos e a ausência de sustentabilidade que o atual modelo econômico prevê, são fatores que influenciam a busca por alternativas que solucionem ou minimizem esses efeitos. O objetivo deste trabalho é apresentar a aplicação do Lean Seis Sigma nas atividades de Logística Reversa de embalagens em uma indústria de refrigerantes. A Logística Reversa tornou-se importante nas organizações, pois trata do fluxo reverso de recursos entre os integrantes da cadeia produtiva tradicional. Pode auxiliar nos pontos mais explorados pelas organizações: maximizar o lucro ao mesmo tempo minimizando custos. A Filosofia Lean e a Metodologia Seis Sigma são duas importantes e inovadoras tendências no mundo dos negócios e a aplicação conjunta das duas metodologias pode trazer benefícios significativos para organizações. Os métodos de pesquisa foram a Pesquisa Bibliográfica, a Pesquisa Documental e o Estudo de Caso. Aplicou-se a Filosofia Lean no processo para reduzir os desperdícios e aplicou-se também as praticas Seis Sigma para reduzir a variabilidade. Após a realização do diagnóstico dos desperdícios e da variabilidade, foram aplicadas as soluções propostas no plano de melhorias e os ganhos obtidos foram a redução do custo operacional e diminuição do lead time do processo. A conclusão foi que o Lean Seis Sigma proporcionou melhoria do processo e ganhos financeiros significativos para organização.