Os nervos periféricos são extensões do sistema nervoso central e responsável pela interação das atividades entre as extremidades, em suas funções sensitivas e motoras. São vulneráveis aos mesmos tipos de traumas que afetam outros tecidos: contusão, compressão, esmagamento, estiramento, avulsão e laceração. As lesões de nervos periféricos situam-se entre as mais incapacitantes que acometem indivíduos em idade produtiva, em face dos múltiplos aspectos concernentes às sequelas deste tipo de afecção. Desta forma, a interrupção de continuidade da estrutura do nervo, como no caso da neurotmese, por algum tipo de trauma, resulta na interrupção de transmissão dos impulsos nervosos e na desorganização de suas atividades funcionais. Por meio da utilização da microcirurgia foi possível desenvolver técnicas reparadoras que vão desde simples neurorrafia término-terminal até sofisticados procedimentos cirúrgicos com a utilização de enxertos de nervos, veias e artérias invertidas, tubos sintéticos de materiais variados, tais como silicone e polietileno. Outro aspecto que intriga pesquisadores de todo mundo é a utilização de fatores neurogênicos capazes de acelerar ou melhorar a regeneração de nervos periféricos. A gordura autóloga tem sido continuamente referenciada pela sua abundante oferta, no próprio sitio cirúrgico, apresentando resultados promissores, visto que a adventícia dos vasos é constituída por tecido conjuntivo frouxo, rico em adipócitos. Assim, em um trauma, os neuritos oriundos do coto proximal do nervo lesado, ficam diretamente em contato com esses adipócitos. Seguindo este raciocínio, e com base em trabalhos anteriores onde foi usada veia preenchida com músculo esquelético a fresco como enxerto, decidiu-se testar a possibilidade de crescimento axonal por meio de enxerto com tubo de polietileno preenchido por tecido adiposo autólogo associado a protocolo de imersão em câmara hiperbárica, por meio de um estudo Randomizado Controlado. Para tanto utilizou-se um tubo com 12 mm de comprimento por 0,25 mm de diâmetro, com poros de 80 μm de diâmetro, preenchido com tecido adiposo in natura retirado das adjacências do referido nervo, na tentativa de se recuperar o nervo isquiático. Os resultados morfométricos demonstraram que, os grupos experimentais com e sem preenchimento de gordura tiveram resultados, do ponto de vista morfométrico e funcional sem diferenças estatisticamente significantes, contudo, quando estes foram confrontados ao grupo controle final, apresentaram diferenças estatisticamente significantes. Já relevando a avaliação funcional, por meio do Catwalk, constatou-se que não houve diferença estatisticamente significante entre os grupos experimentais, mas teve diferença ao comparar com o grupo controle final, Diante das evidências encontradas e apoiados na literatura pode-se concluir que a câmara hiperbárica trouxe resultados positivos verificados pela aproximação dos resultados dos grupos experimentais tanto morfométrica como funcionalmente. / The peripheral nerves are extensions of the central nervous system and are responsible for the sensory and motor functions of the limbs. These nerves are vulnerable to the same types of traumas that affect other tissues: contusion, compression, crushing, stretching, avulsion, and laceration. Amongst the most disabling kinds of injuries that affect working-age individuals are those of the peripheral nerves; due to the multifaceted characteristics of the aftereffects of the injury. The break in continuity of the nerve structure due to trauma, as in the case of neurotmesis, results in the disruption of the transmission of nerve impulses and the disorganization of their functions. Through the use of microsurgery, it was possible to develop reconstructive techniques that range from a simple end-to-end neurorrhaphy to sophisticated surgical procedures that utilize nerve grafts, inverted veins and arteries, and synthetic rods of varied materials such as silicone or porous polyethylene. Another aspect that intrigues researchers around the world is the utilization of neurogenic factors capable of accelerating or improving the regeneration of peripheral nerves. Autologous fat has been a constant reference in this field of surgery due to its abundant supply at the surgical site itself. The results are promising, as the adventitia of vessels consists of loose connective tissue rich in adipocytes. Thus in a trauma, the neurites derived from the proximal stump of the damaged nerve are in direct contact with these adipocytes. Following this reasoning, and based on previous studies where veins grafted with fresh skeletal muscle were used, we decided to conduct a randomized controlled study to test the possibility of axonal growth by means of grating with a polyethylene rod filled with autologous adipocytes associated with immersion in a hyperbaric chamber. In an attempt to recover the sciatic nerve, a rod 12 mm in length, with a diameter of 0.25 mm, and with pores of 80 μm in diameter, filled with adipose tissue in natura removed from the surroundings of said nerve, was used. The morphometric results showed that the experimental groups with and without fat fillings had results that, from the morphometric and functional point of view, were of no statistically significant difference. However, when these results were compared with the final control group, statistically significant differences were noted. Highlighting the functional evaluation through the use of Catwalk, it was found that there were no statistically significant differences between the experimental groups, but there was indeed a difference in comparison to the final control group. In light of the evidence found and supported by literature, one can conclude that the use of the hyperbaric chamber brought positive results verified by the proximity of both the morphometric and functional results of the experimental groups.

Interactions between the Eph family of receptor tyrosine kinases, and their ligands, the ephrins, are required for the normal development and maintenance of many patterns of connectivity within the nervous system. Eph receptors and ephrins are expressed widely throughout both the developing and mature nervous system where they function as important regulators of cell migration and axon guidance. The studies presented in this thesis examine the role of one particular member of the Eph receptor family, EphA4, in regulating mechanisms that underlie the development and maintenance of certain neural connections within the nervous system. This thesis demonstrates that the EphA4 receptor is expressed within specific regions of the developing and mature nervous system, some of which are associated with the control of locomotor activity. Consistent with these observations are the locomotor defects exhibited by animals with a targeted disruption of the EphA4 gene. These animals exhibit abnormal bilateral limb movements and have severe disruptions of a number of major axonal pathways. One of these disrupted axonal pathways, the corticospinal tract (CST), is a particularly important mediator of locomotor activity. This thesis reveals that EphA4 is expressed on the axons that comprise the CST. It demonstrates that although EphA4 is not required for the initial development of the CST, repulsive interactions between EphA4-bearing CST axons and ephrinB3, a ligand for EphA4 that is expressed at the midline of the spinal cord, appear to prevent CST axons from aberrantly recrossing the spinal midline during development.

Interactions between the Eph family of receptor tyrosine kinases, and their ligands, the ephrins, are required for the normal development and maintenance of many patterns of connectivity within the nervous system. Eph receptors and ephrins are expressed widely throughout both the developing and mature nervous system where they function as important regulators of cell migration and axon guidance. The studies presented in this thesis examine the role of one particular member of the Eph receptor family, EphA4, in regulating mechanisms that underlie the development and maintenance of certain neural connections within the nervous system. This thesis demonstrates that the EphA4 receptor is expressed within specific regions of the developing and mature nervous system, some of which are associated with the control of locomotor activity. Consistent with these observations are the locomotor defects exhibited by animals with a targeted disruption of the EphA4 gene. These animals exhibit abnormal bilateral limb movements and have severe disruptions of a number of major axonal pathways. One of these disrupted axonal pathways, the corticospinal tract (CST), is a particularly important mediator of locomotor activity. This thesis reveals that EphA4 is expressed on the axons that comprise the CST. It demonstrates that although EphA4 is not required for the initial development of the CST, repulsive interactions between EphA4-bearing CST axons and ephrinB3, a ligand for EphA4 that is expressed at the midline of the spinal cord, appear to prevent CST axons from aberrantly recrossing the spinal midline during development.

Submitted by Socorro Pontes (socorrop@ufersa.edu.br) on 2017-05-23T13:58:52Z No. of bitstreams: 1 MaisaOF_DISSERT.pdf: 767871 bytes, checksum: d17c478d78b4175dd0a3f62dd37f0234 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-23T13:58:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MaisaOF_DISSERT.pdf: 767871 bytes, checksum: d17c478d78b4175dd0a3f62dd37f0234 (MD5) Previous issue date: 2013-08-29 / This study aimed to evaluate the regenerative and analgesic effects of the aqueous and hydroalcoholic extract of Caesalpinia ferrea pods – daily dosage of 300 mg/kg – on experimental sciatic neuropathy and non-neuropathic peripheral pain. An amount of 82 male Wistar rats was used in the experiment. There were 40 neuropathic rats divided in four groups of ten animals. They were treated with aqueous extract, hydroalcoholic extract, saline solution, and one them was pseudo-operated. The other 42 rats were distributed in six groups of seven animals. Three groups were led to writhing test induced by acetic acid administration, and the other three groups to termal test induced by carrageenan. The groups had different treatments with aqueous and hydroalcoholic extract and saline solution. Spontaneous (motor and pain) and induced (hyperalgesia and flare) behavioural studies were conducted. There were not significant difference between the groups treated or not with the extracts. However, in the third week, the induced behaviors of interdigital and lateral pinch presented significant difference between the groups treated with extracts and the ones treated with saline solution, which suggests analgesic effect for this behaviour. The dosage of 300 mg/kg of aqueous and hydroalcoholic extracts of Caesalpinia ferrea pods in the experimental traumatic sciatic neuropathy may not be used as analgesic. This dosage suggests analgesic effects for the induced behaviour of pinch. It shows they may be tested in studies evaluating axonal regeneration. Histological results suggest a higher axonal integrity in animals treated with the extracts, similar to the sham group / Este estudo avaliou os efeitos regenerativo e analgésico do extrato aquoso (EACF) e hidroalcoólico (EHCF) da vagem do jucá na neuropatia ciática experimental e na dor periférica não neuropática em ratos, em uma dose diária de 300 mg/kg. Foram utilizados 82 ratos machos da linhagem Wistar, distribuídos da seguinte forma: 40 animais neuropáticos divididos em quatro grupos de dez animais, tratados com o EAFC, EHCF, solução salina e um pseudo-operado. Quarenta e dois animais foram distribuídos em seis grupos de sete animais cada, sendo três para realização de testes de contorção abdominal induzida por ácido acético e três para realização de teste térmico induzido por carragenina. Os grupos receberam tratamentos com EAFC, EHCF e solução salina. Estudos comportamentais espontâneos (motricidade e dor) e induzidos (hiperalgesia e reflexos) foram avaliados, não havendo diferença significativa entre os grupos tratados e não tratados, entretanto nos comportamentos induzidos de pinçar interdigital e lateral da região plantar, houve uma diferença significativa entre os grupos tratados com os extratos e tratados com solução salina, , sugerindo um efeito analgésico. A dose de 300mg/kg de EACF e EHCF na neuropatia traumática experimental não pode ser utilizada como analgésico, porém sugerem a existência de efeitos analgésicos para os comportamentos induzidos de pinçar. Os resultados histológicos sugerem uma maior integridade axonal dos animais tratados com os extractos, semelhante ao grupo Sham / 2017-05-23

Submitted by Leonardo Cavalcante (leo.ocavalcante@gmail.com) on 2018-07-17T18:53:07Z No. of bitstreams: 1 Arquivototal.pdf: 3232624 bytes, checksum: 559aa25bbe9205467b3fdd737354219e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-17T18:53:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Arquivototal.pdf: 3232624 bytes, checksum: 559aa25bbe9205467b3fdd737354219e (MD5) Previous issue date: 2016-02-29 / The high incidence of pain in the general population has encouraged research about this theme. Products derived from plant species have been widely used in the pharmacological treatment of pain relief. Recent studies have reported the important role of monoterpenes, active compounds found in the essential oils of aromatic plants, having relevant analgesic and anti-inflammatory potential. The geraniol (GER) is a monoterpenic alcohol, found in >160 essential oil of plant species, especially Cymbopogon gender. In the literature consulted, several biochemical and pharmacological properties are shown of GER: antitumor, antimicrobial, antiinflammatory, antioxidant, gastric and intestinal protector, neuroprotective and antiarrhythmic. In this study was evaluated the antinociceptive activity of GER, not yet reported, by animal behavioral and electrophysiological in vitro models. Male and female adult Swiss mice were used. Initially the acute toxicity of GER was investigated by calculating the lethal dose 50 (LD50) by intraperitoneal (i.p.) (= 199.9 mg/kg) and oral (p.o.) (> 1 g/kg). In psychopharmacological screening, after the administration of single doses of GER (i.p. and p.o.), behavioral changes were observed indicating a depressant profile on the central nervous system (CNS) and/or peripheral nervous system (SNP), and relevant antinociceptive effect of geraniol. Therefore, more specific antinociceptive property evaluation tests were performed. The GER (12.5, 25 or 50 mg/kg i.p. and 50 or 200 mg/kg p.o.) decreased (p<0.001) the number of abdominal contractions induced by i.p. injection of acetic acid, when compared with the control. The opioid antagonist naloxone (5 mg/kg) administered subcutaneously (s.c.) in mice, subsequently treated with GER (25 mg/kg i.p.), did not reverse its antinociceptive activity. The GER (12.5, 25 and 50 mg/kg i.p.) reduced (p<0.001) paw licking time in the second phase (15-30 min, inflammatory phase) of the formalin test. Also, in the glutamate test was reduced (p<0.01) paw licking time when GER 50 mg/kg i.p. administered. In a subsequent step, it was investigated the effect of GER on the excitability of peripheral nerve fibers through extracellular recording in the sciatic nerve in mice. The GER presented depressant effect of the compound action potential (CAP), which was reversed after washing and recovery period. The GER blocked components of the CAP concentration-dependent manner and exposure time to the drug: 1 mM after 120 min for the first component (Aγ and Aβ fibers) and 0.6 mM after 90 min for the second (Aγ and Aδ fibers). The concentration, which induces 50% inhibition of the peak-to-peak amplitude of the PAC (IC50) for the GER was calculated, being equal to 0.48±0.04 mM. The conduction velocity was also reduced by exposure to GER from the 0.3 mM concentration, for the 1st component [46.18±2.60 m/s to 36.04±1.60 m/s; p<0.05 (n=7)] and the 2nd component [18.37±1.31 m/s to 12.71±0.56 m/s; p<0.001 (n=7)]. In conclusion, the results obtained show that GER has antinociceptive activity, mainly in pain related to inflammation. Participation of the opioid pathway in its mechanism of action is unlikely, but the modulation of glutamatergic neurotransmission in a dose-dependent manner is a possible mechanism. Its antinociceptive activity is also related to the reduction in peripheral neuronal excitability, firstly in thinner fibers Aδ, which are directly connected to the conduction pain. / A elevada incidência da dor na população em geral tem incentivado as pesquisas entorno desse tema. Produtos oriundos de espécies vegetais têm sido amplamente utilizados no tratamento farmacológico de alívio da dor. Estudos recentes têm relatado o importante papel dos monoterpenos, princípios ativos encontrados nos óleos essenciais de plantas aromáticas, tendo relevante potencial analgésico e anti-inflamatório. O geraniol (GER) é um álcool monoterpênico, encontrado no óleo essencial de >160 espécies vegetais, especialmente do gênero Cymbopogon. Na literatura consultada, pesquisas apontam várias propriedades bioquímicas e farmacológicas para o GER: antitumoral, antimicrobiana, anti-inflamatória, antioxidante, de proteção gástrica e intestinal, neuroprotetora e antiarrítmica. Neste estudo foi avaliada a atividade antinociceptiva do GER, ainda não relatada, mediante modelos animais comportamentais e eletrofisiológicos in vitro. Foram utilizados camundongos machos e fêmeas Swiss adultos. Inicialmente, foi investigada a toxicidade aguda do GER mediante cálculo da dose letal 50 (DL50) pela via intraperitoneal (i.p.) (=199,9 mg/kg) e oral (v.o.) (>1 g/kg). Na triagem psicofarmacológica, após a subministração de doses únicas de GER (i.p. e v.o.) foram observadas alterações comportamentais que indicaram perfil depressor do sistema nervoso central (SNC) e/ou periférico (SNP), e relevante efeito antinociceptivo do geraniol. Portanto, foram realizados testes comportamentais de avaliação de propriedade antinociceptiva mais específicos. O GER (12,5; 25 e 50 mg/kg i.p. e 50 ou 200 mg/kg v.o.) reduziu (p<0,001) o número de contorções abdominais induzidas por injeção i.p. de ácido acético, quando comparado com o controle. O antagonista opióide naloxona (5 mg/kg) administrado pela via subcutânea (s.c.) em camundongos, subsequentemente tratados com GER (25 mg/kg i.p.), não reverteu sua atividade antinociceptiva. O GER (12,5; 25 e 50 mg/kg i.p.) reduziu (p<0,001) o tempo de lambida da pata na segunda fase (15-30 min, fase inflamatória) do teste da formalina. Também, no teste do glutamato houve redução (p<0,01) do tempo de lambida da pata quando administrado GER 50 mg/kg i.p. Em uma etapa subsequente, investigou-se o efeito do GER sobre a excitabilidade de fibras nervosas periféricas, mediante registro extracelular em nervo ciático de camundongo. O GER apresentou efeito depressor do potencial de ação composto (PAC), o qual foi parcialmente revertido após lavagem durante o período de recuperação. O GER bloqueou as componentes do PAC, de maneira dependente da concentração e do tempo de exposição à droga: 1 mM aos 120 min para a primeira componente (fibras Aγ e Aβ) e 0,6 mM aos 90 min para a segunda (fibras Aγ e Aδ). Foi calculada para o GER, a concentração que induz 50% de inibição da amplitude pico-a-pico do PAC (CI50), sendo igual a 0,48±0,04 mM. A velocidade de condução também, foi reduzida pela exposição ao GER, a partir da concentração de 0,3 mM para a 1ª componente [46,18±2,60 m/s para 36,04±1,60 m/s; p<0,05 (n=7)] e para a 2ª componente [18,37±1,31 m/s para 12,71±0,56 m/s; p<0,001 (n=7)]. Em conclusão, os resultados obtidos mostram que o GER tem atividade antinociceptiva, principalmente na dor relacionada à inflamação. A participação da via opióide no seu mecanismo de ação é pouco provável, mas a modulação da neurotransmissão glutamatérgica de maneira dependente da dose é um mecanismo possível. Sua atividade antinociceptiva tambèm, está relacionada à redução da excitabilidade neuronal periférica, primeiramente de fibras mais finas como Aδ, ligadas diretamente à condução da dor.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-11-24Bitstream added on 2014-06-13T18:19:53Z : No. of bitstreams: 1 pereira_rn_me_jabo.pdf: 471924 bytes, checksum: 4ffda866a6bffc48af4632f12c8dd08f (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Lesões no Sistema Nervoso Periférico (SNP) são relativamente freqüentes. Apesar do SNP apresentar capacidade regenerativa em muitas situações não ocorre regeneração nervosa adequada levando a perdas funcionais. A Catuama é a associação de quatro extratos hidroalcoólicos obtidos de plantas brasileiras (Paullinia cupana, Trichilia catigua, Ptychopetalum olacoides e Zingiber officinale) com conhecida ação neuroprotetora, antiinflamatória, anti-oxidante e antidepressiva. O bilobalide é um componente extraído das folhas de Ginkgo biloba que tem demonstrada ação neuroprotetora nos sistemas nervosos central e periférico. O presente estudo avaliou a ação da Catuama e do bilobalide na regeneração nervosa periférica de ratos submetidos à secção do nervo isquiático e reparação com implante de tubo de silicone preenchido por colágeno deixando um intervalo entre os segmentos nervosos de 10mm. A Catuama foi administrada por via oral nos primeiros 28 dias de pós-operatório, nas doses de 100, 200 e 400mg/kg e comparada ao bilobalide na dose de 200μM adicionado ao colágeno líquido do implante e ao grupo controle. Os animais foram avaliados na primeira, quinta e décima semana de pós-operatório pelo teste de marcha e na décima semana pela avaliação eletrofiosiológica e pelas análises quantitativa e qualitativa dos cortes histológicos de amostras do nervo isquiático e do músculo gastrocnêmio. Em todas as análises utilizadas não foi encontrada diferença (P>0,05) entre os grupos experimentais o que indica que a Catuama e o bilobalide não interferiram na regeneração nervosa periférica nas condições experimentais. / Peripheral nerve lesions are common. Functional recovery after peripheral nerve injuries is frequently poor, despite the capacity for axonal regeneration, resulting in most cases in a functional loss of the nerve. The Catuama is composed of four brasilian plants extracts (Paullinia cupana, Trichilia catigua, Ptychopetalum olacoides e Zingiber officinale). The Catuama is known as having neuroprotector, antinflamatory, antioxidant and antidepressive effects. Bilobalide, extraction of the leaves of Ginkgo biloba, is known by it´s neuroprotector effect in the central and peripheral nervous system. The present study evaluates the effect of Catuama and bilobalide on peripheral nerve regeneration in rats following a sciatic nerve section. Sciatic nerve of adult rats was transected with a 10-mm gap and the proximal and distal nerve stumps were fixed in a silicone tube filled with collagen. The Catuama was oral administered along 28 days after the surgery. Three different treatment groups using doses of 100, 200 and 400mg/kg of Catuama were compared with one group using 200μM bilobalide associated with the liquid collagen in the silicone tube and the control group. Animals evaluations were done by a walk test on the first, fifth and tenth week after the surgery. Eletrophysiologic stimulation and quantitative and qualitative hystologic analysis of the sciatic nerve and gastrocnemius muscle were also realized on the tenth week after the surgery. No statistical difference was found in these variables between the five groups (P >0.05). These results suggest that there was no effect of Catuama or bilobalide on peripheral nerve regeneration regeneration.

Submitted by Maria Eneide de Souza Araujo (mearaujo@ipen.br) on 2015-10-08T14:17:04Z No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2015-10-08T14:17:04Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Dissertação (Mestrado em Tecnologia Nuclear) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP

Os nervos periféricos são extensões do sistema nervoso central e responsável pela interação das atividades entre as extremidades, em suas funções sensitivas e motoras. São vulneráveis aos mesmos tipos de traumas que afetam outros tecidos: contusão, compressão, esmagamento, estiramento, avulsão e laceração. As lesões de nervos periféricos situam-se entre as mais incapacitantes que acometem indivíduos em idade produtiva, em face dos múltiplos aspectos concernentes às sequelas deste tipo de afecção. Desta forma, a interrupção de continuidade da estrutura do nervo, como no caso da neurotmese, por algum tipo de trauma, resulta na interrupção de transmissão dos impulsos nervosos e na desorganização de suas atividades funcionais. Por meio da utilização da microcirurgia foi possível desenvolver técnicas reparadoras que vão desde simples neurorrafia término-terminal até sofisticados procedimentos cirúrgicos com a utilização de enxertos de nervos, veias e artérias invertidas, tubos sintéticos de materiais variados, tais como silicone e polietileno. Outro aspecto que intriga pesquisadores de todo mundo é a utilização de fatores neurogênicos capazes de acelerar ou melhorar a regeneração de nervos periféricos. A gordura autóloga tem sido continuamente referenciada pela sua abundante oferta, no próprio sitio cirúrgico, apresentando resultados promissores, visto que a adventícia dos vasos é constituída por tecido conjuntivo frouxo, rico em adipócitos. Assim, em um trauma, os neuritos oriundos do coto proximal do nervo lesado, ficam diretamente em contato com esses adipócitos. Seguindo este raciocínio, e com base em trabalhos anteriores onde foi usada veia preenchida com músculo esquelético a fresco como enxerto, decidiu-se testar a possibilidade de crescimento axonal por meio de enxerto com tubo de polietileno preenchido por tecido adiposo autólogo associado a protocolo de imersão em câmara hiperbárica, por meio de um estudo Randomizado Controlado. Para tanto utilizou-se um tubo com 12 mm de comprimento por 0,25 mm de diâmetro, com poros de 80 &#x3BC;m de diâmetro, preenchido com tecido adiposo in natura retirado das adjacências do referido nervo, na tentativa de se recuperar o nervo isquiático. Os resultados morfométricos demonstraram que, os grupos experimentais com e sem preenchimento de gordura tiveram resultados, do ponto de vista morfométrico e funcional sem diferenças estatisticamente significantes, contudo, quando estes foram confrontados ao grupo controle final, apresentaram diferenças estatisticamente significantes. Já relevando a avaliação funcional, por meio do Catwalk, constatou-se que não houve diferença estatisticamente significante entre os grupos experimentais, mas teve diferença ao comparar com o grupo controle final, Diante das evidências encontradas e apoiados na literatura pode-se concluir que a câmara hiperbárica trouxe resultados positivos verificados pela aproximação dos resultados dos grupos experimentais tanto morfométrica como funcionalmente. / The peripheral nerves are extensions of the central nervous system and are responsible for the sensory and motor functions of the limbs. These nerves are vulnerable to the same types of traumas that affect other tissues: contusion, compression, crushing, stretching, avulsion, and laceration. Amongst the most disabling kinds of injuries that affect working-age individuals are those of the peripheral nerves; due to the multifaceted characteristics of the aftereffects of the injury. The break in continuity of the nerve structure due to trauma, as in the case of neurotmesis, results in the disruption of the transmission of nerve impulses and the disorganization of their functions. Through the use of microsurgery, it was possible to develop reconstructive techniques that range from a simple end-to-end neurorrhaphy to sophisticated surgical procedures that utilize nerve grafts, inverted veins and arteries, and synthetic rods of varied materials such as silicone or porous polyethylene. Another aspect that intrigues researchers around the world is the utilization of neurogenic factors capable of accelerating or improving the regeneration of peripheral nerves. Autologous fat has been a constant reference in this field of surgery due to its abundant supply at the surgical site itself. The results are promising, as the adventitia of vessels consists of loose connective tissue rich in adipocytes. Thus in a trauma, the neurites derived from the proximal stump of the damaged nerve are in direct contact with these adipocytes. Following this reasoning, and based on previous studies where veins grafted with fresh skeletal muscle were used, we decided to conduct a randomized controlled study to test the possibility of axonal growth by means of grating with a polyethylene rod filled with autologous adipocytes associated with immersion in a hyperbaric chamber. In an attempt to recover the sciatic nerve, a rod 12 mm in length, with a diameter of 0.25 mm, and with pores of 80 &#x3BC;m in diameter, filled with adipose tissue in natura removed from the surroundings of said nerve, was used. The morphometric results showed that the experimental groups with and without fat fillings had results that, from the morphometric and functional point of view, were of no statistically significant difference. However, when these results were compared with the final control group, statistically significant differences were noted. Highlighting the functional evaluation through the use of Catwalk, it was found that there were no statistically significant differences between the experimental groups, but there was indeed a difference in comparison to the final control group. In light of the evidence found and supported by literature, one can conclude that the use of the hyperbaric chamber brought positive results verified by the proximity of both the morphometric and functional results of the experimental groups.

Submitted by Maria Eneide de Souza Araujo (mearaujo@ipen.br) on 2015-10-08T14:17:04Z No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2015-10-08T14:17:04Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Nas áreas médica e odontológica existem situações clínicas e cirúrgicas que podem ter, como consequência, um dano ao tecido conjuntivo nervoso, chamado de neuropatia. O objetivo deste trabalho é avaliar terapias para tratamento das neuropatias causadas por manipulação do feixe nervoso periférico, minimizando ou eliminando sintomas causados pela lesão. O estudo foi feito em 60 ratos machos Wistar, com a avaliação morfológica da degeneração Walleriana e da regeneração do tecido nervoso no 15º e 30º dia após o trauma. A lesão consistiu na exposição e compressão do nervo isquiático da pata direita do animal, através de três nós consecutivos com fio de sutura e distância entre eles de ~ 2mm. Três tratamentos sobre a lesão foram comparados: o uso do biomaterial 3-NERVE®, a laserterapia de baixa potência e a associação dos dois. Os resultados histológicos revelaram que o biomaterial aumentou o processo inflamatório, mas modulou a degeneração inicial, através do surgimento de células de neoformação, favorecendo a regeneração nervosa no decorrer dos trinta dias. A laserterapia foi um tratamento favorável para a parestesia porque modulou os danos do processo de degeneração inicial e estimulou o reparo do tecido desde os 15 primeiros dias. Ao atingir os 30 dias o tecido se apresentou organizado e com uma quantidade menor de tecido neoformado quando comparado com o uso do biomaterial. A associação das terapias associou as propriedades das duas terapias, pois modulou a inflamação inicial, propiciou o aumento do número de células de neoformação do tecido nervoso e favoreceu a regeneração dos feixes nervosos nas amostras de 15 e 30 dias. Conclui-se que o não tratamento dificulta ou impede a regeneração nervosa, pois qualquer uma das terapias citadas modula os eventos desencadeados pela lesão. A associação do uso da laserterapia com o 3-NERVE® mostrou melhores resultados. / Dissertação (Mestrado em Tecnologia Nuclear) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / A dor neuropÃtica possui mecanismos de difÃcil compreensÃo que se modificam com a sua evoluÃÃo dificultando a terapÃutica. O modelo por constriÃÃo crÃnica do nervo ciÃtico (CCNC) simula esta condiÃÃo. A gabapentina (GBP) à um anticonvulsivo muito utilizado como analgÃsico na dor neuropÃtica e existem poucos relatos sobre seus efeitos na atividade inflamatÃria e regenerativa do nervo. As citocinas TNF-&#945; e IL-1&#946; estÃo relacionadas à dor, inflamaÃÃo e regeneraÃÃo neural. à objetivo deste estudo avaliar os efeitos antinociceptivos, inflamatÃrios e regenerativos do tratamento preventivo e contÃnuo (80 min antes da CCNC e depois ao longo de 5 dias de 12 em 12h) com a GBP (30, 60, 120 mg/kg, via oral) atravÃs da observaÃÃo (antes, no 3 dia e no 5 dia apÃs a CCNC) dos seguintes comportamentos: (1) espontÃneos sugestivos de dor crÃnica: Scrathing (coÃar-se) e Biting(morder-se) (2) relacionados à motriciadade e exploraÃÃo: Climbing(escalar), Rearing(empinar-se), Walking(andando) (3) de dor induzida: alodÃnia mecÃnica (von Frey eletrÃnico) e alodÃnia ao frio (10Â) em ratos machos Wistar (250-300g) com CCNC. Animais com CCNC tratados com salina e animais pseudo-operados foram utilizados como controles. Para avaliar os efeitos anti ou prÃ-inflamatÃrios da GBP (60, 120mg/kg, via oral) utilizou-se o modelo de edema de pata induzido por carragenina em animais sem CCNC e a dosagem de mieloperoxidase no nervo sob constriÃÃo crÃnica. Os efeitos neuro-regenerativos da GBP foram avaliados indiretamente atravÃs da expressÃo de TNF-&#945;, IL-1&#946;, IL-10, e da proteÃna bÃsica de mielina (PBM) no mesmo protocolo, sendo que no 5 dia de tratamento apÃs CCNC, foram feitas coletas dos nervos para dosagem destas citocinas atravÃs de ELISA e imunohistoquÃmica, e no 5 e 15 dia para expressÃo de PBM atravÃs de Western Blot e imunohistoquÃmica. Resultados: No 5 dia, as doses de GBP 30, 60 e 120mg provocaram reduÃÃo de 86,76%*; 83,82%*; 80,09%* (*p < 0,01) no tempo de Scratching da pata ipslateral e uma inibiÃÃo de 56,27%; 90,53%*; 65,06% (*p < 0,01) no tempo do Biting lado direito em relaÃÃo ao grupo salina. Aliviaram a alodÃnia mecÃnica provocando aumentos do limiar de retirada da pata de 225,42%*, 246,01%*, 309,20%* (*p <0,001) e provocaram reduÃÃo do escore de dor na alodÃnia ao frio em 18,19%; 21,29%; 42,26%* (*p < 0,01) em relaÃÃo ao grupo salina. As doses de GBP 60 e 120mg provocaram aumentos significativos na motricidade espontÃnea de animais com CCNC e intactos sugerindo efeitos estimulantes e nÃo sedativos. A GBP 60mg/kg tambÃm provocou efeitos relevantes (p<0,001) na migraÃÃo de cÃlulas visto pelo aumento de 982,16% na expressÃo da mieloperoxidase no nervo e pelo aumento de 53% no edema de pata em relaÃÃo ao controle salina. Quanto à expressÃo do TNF-&#945; no nervo as doses de 60 e 120mg provocaram aumentos de 120,95 % e de 91,99% em relaÃÃo ao grupo salina (P< 0,01). Na expressÃo de IL-1&#946; a dose de 60mg/kg provocou aumento de 59,26% em relaÃÃo ao grupo salina (P< 0,05). No Western Blot ocorreu um aumento significativo de 158,06% da expressÃo de PBM (0,298 + 0,069 PBM/Act.) no nervo no 15 dia de tratamento com GBP em relaÃÃo ao grupo salina (0,116 + 0,034 PBM/Act). ConclusÃes: O tratamento com GBP ao longo de cinco dias, apesar de seus efeitos prÃ-inflamatÃrios, demonstrou no 5 dia efeitos analgÃsicos significativos ao reduzir comportamentos espontÃneos de dor crÃnica e aliviar a alodÃnia mecÃnica e tÃrmica em estÃgio precoce da neuropatia. Considerando-se os efeitos relevantes da GBP no 5 dia de neuropatia no aumento da migraÃÃo de cÃlulas para o local da lesÃo, no aumento da expressÃo de TNF e IL-1&#946; no nervo, o que levaria a maior ativaÃÃo das cÃlulas de Schwann, macrÃfagos, e maior liberaÃÃo de fator de crescimento do nervo, e no aumento da expressÃo de PBM indicando uma ativa fragmentaÃÃo da mielina, sugere-se que a GBP pode acelerar o processo de remoÃÃo dos fragmentos de mielina e axÃnios contribuindo assim para o posterior alongamento dos axÃnios e remielinizaÃÃo. / Neurophatic pain conveys mechanisms of difficult understanding, which changes with the disease progress, jeopardizing the therapeutics. The chronic constriction of the sciatic nerve (CCSN) model mimics this condition. Gabapentin (GBP) is an anti-convulsive drug often used as analgesics to control neurophatic pain. Few reports exist on their effects in the inflammatory and regenerative activity of the nerve. TNF-&#945; and IL-1&#946; cytokines, although related to pain and inflammation, are also associated with early myelin and axonal fragmentos removal after nerve injury and thus contribute to nerve regeneration. This study aimed at evaluating the analgesics early treatment (80 min prior to CCSN and along 5-day treatment, 12h/12h) effects of GBP (30, 60, 120 mg/kg, given orally) by monitoring (before surgery, on the 3rd day and 5th day of post-surgery treatment, 12h to12h) the following behaviors (1) spontaneous behavior, suggestive of chronic pain: Scratching and Biting (2) motor and exploratory-related behaviors: Climbing, Rearing, and Walking, (3) induced-pain behaviors: mechanical allodynia (electronic von Frey) and cold allodynia (10ÂC) in Wistar male rats (250-300g) with CCSN. CCSN animals treated with saline and pseudo-operated were used as controls. Another aim of this study was to evaluate the pro and anti-inflammatory effects of GBP (60 and 120mg/kg, given orally) by carragenin-induced paw edema in CCSN-free animals and yet nerve myeloperoxidase measurements under chronic constriction. The neural regenerative effects of GBP were indirectly evaluated by measuring TNF-&#945;, IL-1&#946;, IL-10, and myelin basic protein (PBM) expressions in the same protocol, as follows: 5th day of treatment following CCSN to draw nerves in order to quantify cytokines by ELISA and immunohistochemistry, and for MPB expression detected by Western blot and immunohistochemistry on the 5th and 15th. Results: On the 5th day, GBP, at doses of 30, 60 and 120mg, reduced the scratching time in the ipslateral paw of 86.76%*; 83.82%*; 80.09%* (*p<0.01) and an inhibition of the biting time of 56.27%; 90.53%*; 65.06% (*p<0.01) in the right side in comparison with the saline group. In addition, GBP alleviated mechanical allodynia causing increase paw retrieval thresholds of 225.42%*, 246.01%*, 309.20%* (*p <0.001) and the reduction of the pain scores for cold allodynia in the range of 18.19%; 21.29%; 42.26%* (*p < 0.01) in comparison with the saline group. GBP, at doses of 60 and 120mg, significantly increased spontaneous motricity in CCSN animals and controls suggesting excitatory effects rather than sedation. GBP (60 mg/kg) also caused relevant effects (p<0.001) in peritoneal cell migration, and a 982.16% increase in nerve myeloperoxidase expression and 53% increase in paw edema, as opposed to the saline control. Regarding nerve TNF-&#945; expression, doses of 60 and 120mg caused significant increase of 120.95 % and 91.99% in comparison with the saline group (p<0.01). A dose of 60mg/kg caused 59.26% increase in IL-1&#946; expression compared with the saline group (p<0.05). We found a 158% significant increase in PBM expression by western blots (0.298  0.069 PBM/Act) on the 15th treatment-day with GPB in comparison with the saline control (0.116  0.034 PBM/Act). Conclusions: 5-day GBP treatment, although with pro-inflammatory effects, was found to have significant pain killing effects by reducing chronic spontaneous pain behaviors and by alleviating mechanical and thermal allodynia in the early neuropathy course. By taking our relevant findings of increasing migration cell rates to the nerve injury site on the 5th day of the neuropathy and the nerve TNF and IL-1&#946; expression with more macrophage and Schwann cell activation and supposedly more nerve growth factor release, along with higher PBM expression, altogether suggest that GBP may hasten the myelin and axonal fragmentos withdrawn, therefore contributing to axonal outgrowth and ultimately remyelinization.