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Avaliação do perfil de citocinas no tecido subcutâneo de camundongos na presença de cimento endodôntico / Evaluation of Cytokine Profile in Subcutaneous Tissue of Mice in the Presence of Endodontic Cement

Pereira, Leonardo Biscaro 16 September 2013 (has links)
Avaliou-se a capacidade dos cimentos endodônticos: Sealapex®, Activ-GP® e AH-Plus® de alterarem o perfil das citocinas nas respostas Th1, Th2 e Th17, após a implantação destes em subcutâneo de camundongos. A quantificação das citocinas IL-2, IL-6, TNF-α, IFN-γ, IL-4, IL-10 e IL-17 foi realizada in vivo, no tecido reacional circundante aos implantes, os quais foram confeccionados a partir de sondas nasogástricas estéreis e apirogênicas de cloreto de polivinila preenchidas com os cimentos, tendo um grupo controle com sondas vazias. Utilizou-se camundongos isogênicos da linhagem C57BL/6 machos de 6/8 semanas de vida sendo que cada um recebeu 2 implantes na região dorsal (lado direito e esquerdo). Após os períodos experimentais de 7, 21 e 63 dias, com os camundongos anestesiados, os implantes foram removidos juntamente com o tecido circundante, e os animais sacrificados em seguida por deslocamento cervical. As amostras de cada grupo foram divididas sendo: duas, contendo implante/tecido, processadas histotecnicamente e as demais com apenas tecido (sem implante) foram homogeneizadas e centrifugadas com solução formada por tampão RIPA e inibidor de protease. O sobrenadante, fruto deste processo, foi coletado e a dosagem das citocinas realizada através do kit CBA mouse-Th1/Th2/Th17 Cytokine Kit (BD Cytometric Bead Array, San Jose, CA, USA) em análise por citometria de fluxo. Os parâmetros avaliados foram a concentração da citocina em função do cimento testado em cada período experimental. Submeteu-se os resultados à análise estatística por meio do teste t com a correção de Welch\'s. Para todos os testes o nível de significância foi de 5%. Com relação à IL-2 houve diferenças estatísticas significantes entre os grupos Activ-GP® e AH-Plus® (p=0,0391). No período de 21 dias foram detectadas diferenças entre o grupo controle e AH-Plus® (p=0,0402) e entre o grupo Sealapex® e AH-Plus® (p=0,0244). O AH-Plus® induziou um maior aumento na IL-6, aos 7 dias em relação ao Activ-GP® (p=0,0286) e aos 21 dias entre o grupo controle (p=0.0402) e Activ-GP® (p=0.0244). Os níveis de TNF-α foram estatisticamente superiores após 7 dias quando comparou-se o grupo AH-Plus® com os demais. Observou-se que no grupo controle aos 7 e 21 dias ocorreram diferenças estatísticas em relação ao Sealapex® e AH-Plus® respectivamente quando avaliadas as concentrações de IFN-γ. Houve também diferenças estatísticas entre o grupo controle e Sealapex® (p=0,0158) no período de 7 dias para a citocina IL-4. Os valores de IL-10 foram estatisticamente superiores para o grupo controle em relação ao Activ-GP® no período de 21 dias (p=0,0471). Com relação a IL-17 no período de 21 dias, observou-se os maiores valores para o grupo controle, seguido pelo Sealapex®, Activ-GP® e AH-Plus®. Foram detectadas diferenças entre os grupos controle e AH-Plus® (p=0,0121), controle e Activ-GP® (p=0,0262) e entre Sealapex® e Activ GP® (p=0,0314). Baseado nesses resultados podê-se concluir que: os cimentos endodônticos são capazes de modular as respostas Th1, Th2 e Th17 através da inibição ou estimulação da liberação das citocinas testadas. O cimento AH-Plus® promoveu as maiores diferenças no perfil de resposta Th1. / It was evaluated the capacity of the following endodontic sealers: Sealapex, Activ-GP and AH-Plus to modify the cytokine profile in Th1, Th2 and Th17 responses, after their implantation in the subcutaneous tissue of mice. Quantification of IL-2, IL-6, TNF-α, IFN-γ, IL-4, IL-10 and IL-17 was performed in vivo, in the reactional tissue surrounding the implants, which were made from sterile nasogastric probes and apyrogenic of polyvinyl chloride filled with sealer, and a control group of empty probes. It was used isogenic mice of C57BL/6 lineage, 6/8 weeks old males, each of which received two implants in the dorsal region (left and right). After the experimental time of 7, 21 and 63 days, the mice were anesthetized and the implants were removed along with the surrounding tissue, the animals were then sacrificed by cervical dislocation. Samples from each group were divided as follows: two containing implant / tissue processed histologically and with only the remaining tissue (without implant) were mixed and centrifuged with a solution formed by RIPA buffer and protease inhibitors. The supernatant result of this process was collected and cytokine dosage accomplished by mouse-Th1/Th2/Th17 Cytokine CBA Kit Kit (BD cytometric Bead Array, San Jose, CA, USA) for flow cytometry analysis. The evaluated parameters were the cytokine concentration in function of sealer tested in each trial. The results were submitted to statistical analysis using the t test with Welch\'s correction. For all tests the significance level was 5%. With respect to IL-2 there were significant statistical differences between groups-Activ GP and AH-Plus (p=0.0391). In the period of 21 days differences were found between the control group and AH-Plus (p=0.0402) and between the group Sealapex and AH-Plus (p=0.0244). The AH-Plus induced a greater increase in IL-6, at 7 days compared to Activ-GP (p=0.0286) and at 21 days between the control group (p=0.0402) and Activ-GP (p=0.0244). The levels of TNF-α were significantly higher after 7 days when the AH-Plus group was compared with others. It was observed that in the control group at 7 and 21 days there were statistical differences in relation to Sealapex and AH-Plus respectively when evaluated concentrations of IFN-γ. There were also significant differences between the control group and Sealapex (p=0.0158) within 7 days for the cytokine IL-4. The amounts of IL-10 were statistically higher in the control group compared to the Activ GP in a period of 21 days (p=0.0471). With respect to IL-17 in a period of 21 days, it was observed the highest values for the control group, followed by Sealapex, Activ-GP and AH-Plus. Differences were found between the control groups and AH-Plus (p=0.0121), control and Activ-GP (p=0.0262) and between Sealapex and Activ-GP (p=0.0314). Based on the presented results theendodontic sealers are able to promote changes in the response cytokine profile Th1, Th2 and Th17; Sealer AH-Plus produced the greatest changes, in the Th1 response profile.
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Ausência de correlação entre a penetração do cimento AH Plus nos túbulos dentinários e a qualidade do selamento / Lack of correlation between AH Plus sealer penetration into dentinal tubules and sealability

Maria Cláudia Brandão de Souza 30 March 2010 (has links)
O presente estudo objetivou testar experimentalmente a existência da possível correlação entre a penetração de cimento nos túbulos dentinários e a qualidade do selamento. Foram utilizados 60 incisivos centrais superiores humanos que formaram um único grupo experimental. Após a eliminação das porções coronárias, as raízes foram padronizadas em 13 mm de comprimento. A instrumentação dos canais foi realizada no sentido coroa-ápice, e o comprimento de trabalho estabelecido a 1 mm aquém do forame apical. Como solução irrigadora foi empregado o NaOCl a 5,25% e ao final, EDTA a 17%. Em seguida, todos os canais foram obturados com guta-percha e cimento AH Plus marcado com um corante fluorescente. Para determinar a qualidade do selamento das obturações endodônticas, as amostras foram submetidas ao modelo de infiltração de glicose sob pressão. As raízes foram montadas em um dispositivo de dupla-câmara selada para permitir a infiltração da glicose. Como controle negativo foram utilizados 4 dentes hígidos, e como controle positivo, 2 dentes instrumentados porém, não obturados. Foram utilizados 0,75 mL de solução de glicose a 1 mol/L na câmara superior e 0,75 mL de água deionizada na câmara inferior. Os dispositivos foram conectados a um sistema de distribuição de pressão desenvolvido com o objetivo de permitir a infiltração de 32 amostras em uma mesma etapa. A solução de glicose foi forçada apicalmente sob uma pressão de 15 psi durante 1 hora. Uma alíquota de 50 L foi coletada da câmara inferior para quantificar a glicose infiltrada. A concentração de glicose foi determinada através de um método enzimático com o auxílio do Kit Glucose HK e de um espectrofotômetro em um comprimento de onda de 340 nm. Na sequência, as amostras foram desacopladas dos corpos de prova, embutidas em resina epóxi e cortadas em 3 secções transversais. Uma sequência de preparação metalográfica padrão foi realizada para permitir a observação da penetração de cimento nos túbulos dentinários por meio de microscopia confocal e óptica. Os dados obtidos nos 2 experimentos foram cruzados pelo teste de correlação de Spearman, o qual revelou a inexistência de qualquer possibilidade de correlação (r = 0,12). Com base nesses resultados, o presente trabalho concluiu que, dentro das condições experimentais usadas, a quantidade de cimento presente dentro dos túbulos dentinários não teve relação com a qualidade do selamento produzido. / The purpose of the present study was to experimentally test the potential correlation between tubular dentin sealer penetration and sealability. Sixty human maxillary central incisors were selected in order to compose a single experimental group. After removing of crowns, the roots were standardized at 13 mm in length. A crown-down root canal instrumentation was performed 1mm short of the apical foramen (working length). How irrigating solution was used 5.25% NaOCl and final, 17% EDTA. Then, all root canals were filled with gutta percha and AH Plus sealer labeled with a fluorescent dye. To determine the sealability pattern, samples were submitted to glucose leakage model under pressure. Four intact teeth were used as negative control while further 2 instrumented but nonfilled teeth was used as positive control. The roots were mounted in a double-chamber apparatus where 0,75 mL of 1 mol/L glucose solution was placed into the superior chamber and 0,75 mL of deionized water was placed into the inferior chamber. The devices were connected to a pressure distribution system that was developed in order to allow testing 32 specimens at the same experimental stage. The glucose solution was forced apically under a pressure of 15 psi during 1 hour. A sample of 50 L was taken from the inferior chamber and the glucose concentration was measured following an enzymatic reaction using a Glucose HK Kit readed under spectrophotometry (wave-length of 340 nm). After that, the samples were removed from the apparatus, embedded in epoxy resin and cut into 3 sections. Standard metallographic preparation was performed prior the observation of the sealer penetration into dentinal tubules by confocal and optical microscopy. Data provided by the evaluations were submitted to Spearman correlation test which revealed a lack of correlation between the two variables (r = 0.12). Therefore, the present study concluded that there was no correlation between tubular sealer penetration and sealability in non-bonding conventional root-fillings.
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Estudo comparativo da citotoxicidade de cimentos obturadores sobre culturas de células endoteliais da linhagem ECV 304 / Comparative study of cytotoxicity of sealers on cultured endothelial cells line ECV 304

Vagner José Medeiros Martins 15 February 2011 (has links)
Este estudo teve como objetivo avaliar, in vitro, a citotoxicidade dos cimentos endodônticos Densell Endo, Pulp-Fill, Endofill, Sealer 26, Pulp Canal Sealer e GuttaFlow após 12, 24 e 72 horas de tempo de contato, utilizando-se uma linhagem de células endoteliais ECV-304. Para a avaliação da viabilidade celular, utilizou-se o teste de citotoxicidade MTT. Para cada cimento foram preparados 12 corpos de prova que foram distribuídos em seis grupos experimentais de acordo com as marcas comerciais, sendo quatro para cada tempo. Foi criado um grupo controle que não foi submetido à ação de cimento. Para avaliação do efeito dos cimentos sobre as células endoteliais, os corpos de prova foram inseridos nos poços da placa cultura, incubados a 37C em presença de 5% de CO2 e 100% de umidade. Os testes MTT foram realizados, em quadruplicata, após 12, 24 e 72 horas de contato das amostras com o tapete celular. Foi utilizada a prova Two-Way Anova com o teste Post Hoc de Bonferroni com nível de significância de 5%. Na análise de 12 horas, foi possível observar que o cimento GuttaFlow apresentou média de absorbância de 0,055, seguido do Sealer 26 (média = 0,038). Os cimentos Pulp Canal Sealer e Densell Endo apresentaram a mesma média de absorbância (0,031). O Pulp Fill e o Endofill foram os cimentos que apresentaram maior citotoxicidade (média de absorbância = 0,024 e 0,021, respectivamente). O grupo controle apresentou média de absorbância de 0,158. Em 24 horas observou-se que os cimentos GuttaFlow e Sealer 26 apresentaram as maiores médias de absorbância (0,041 e 0,037, respectivamente), seguidos pelo cimento Pulp Canal Sealer que apresentou média de absorbância de 0,035. Já os cimentos Densell Endo e Pulp Fill apresentaram médias de absorbância de 0,033 e 0,032, respectivamente. O cimento Endofill apresentou uma média de 0,026 e o grupo controle de 0,086. Quando analisados em 72 horas, o cimento Pulp Canal Sealer obteve média de absorbância de 0,049, seguido dos cimentos GuttaFlow e Pulp Fill, ambos com 0,048. Os cimentos Densell Endo, Sealer 26 e Endofill apresentaram respectivamente, médias de 0,044, 0,040 e 0,036. O grupo controle diferenciou-se significativamente de todos os grupos em todos os tempos. Quando analisadas as médias gerais de absorbância dos grupos analisados observou-se que o cimento GuttaFlow se apresentou como o cimento com menor índice de citotoxicidade, apresentando média de absorbência de 0,048. Logo após, apresentando médias de absorbância iguais (0,038) encontraram-se os cimentos Pulp Canal Sealer e Sealer 26; seguidos do Densell Endo e do Pulp Fill, com 0,036 e 0,035, respectivamente. O grupo controle apresentou média de absorbância de 0,098. Portanto, tendo como base os resultados obtidos, pôde-se concluir que o cimento Endofill foi o que apresentou maior citotoxicidade e o cimento GuttaFlow, o menos citotóxico. / This study aimed to evaluate, in vitro, cytotoxicity of root canal sealers Densell Endo, Pulp-Fill, Endofill, Sealer 26, Pulp Canal Sealer and GuttaFlow after 12, 24 and 72 hours of contact time, using a endothelial cell line ECV-304. For the assessment of cell viability, used the MTT cytotoxicity test. For any cement were prepared 12 specimens that were divided into six groups according to the trademarks, four for each time. Created a control group that was not subjected to action of cement. To assess the effects of cements on endothelial cells, the specimens were placed in culture plate wells, incubated at 37C with 5% CO2 and 100% humidity. MTT tests were performed, in quadruplicate, after 12, 24 and 72 contact hours of the samples with monolayers. Was used to test Two-Way Anova with Bonferroni Post Hoc test with significance level of 5%. In the analysis of 12 hours, was observed that the cement GuttaFlow had a mean absorbance of 0,055, followed by Sealer 26 (average = 0,038). Cements Pulp Canal Sealer and Densell Endo had the same mean absorbance (0,031). The Pulp Fill and Enfofill were the cements with higher cytotoxicity (mean absorbance = 0,024 and 0,021, respectively). The control group had a mean absorbance of 0,158. In 24 hours it was observed that the cements Sealer 26 and GuttaFlow had the highest average absorbance (0,041 and 0,037, respectively), followed by cement Pulp Canal Sealer that had a mean absorbance of 0.035. Already cements Densell Endo and Pulp Fill showed means absorbance of 0,033 and 0,032, respectively. Cement Endofill showed an average of 0,026 and the control group, 0,086. When analyzed at 72 hours, the cement Pulp Canal Sealer had an average absorbance of 0,049, followed by cement GuttaFlow and Pulp Fill, both with 0,048. Cements Densell Endo, Sealer 26 and Endofill showed respectively, averaging 0,044, 0,040 and 0,036. The control group differed significantly from all groups at all times. When analyzing the overall means of absorbance groups analyzed showed that the cement GuttaFlow introduced himself as the cement with a lower index of cytotoxicity, with a mean of 0,048 absorbance. Soon after, with averages of equal absorbance (0,038) met cements Pulp Canal Sealer and Sealer 26; followed by Endo Densell and Pulp Fill, with 0,036 and 0,035, respectively. The control group had a mean absorbance of 0,098. Therefore, based on the results, could conclude that the cement Endofill showed the highest cytotoxicity and cement GuttaFlow, the least cytotoxic.
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Evaluation of physicochemical properties of a new epoxy resinbased root canal sealer / Avaliação das propriedades físico-químicas de um novo cimento obturador de canais radiculares à base de resina epóxica

Gislene Cristina Vertuan 10 July 2018 (has links)
Introduction: The aim of this study was to evaluate some of the physico-chemical properties of a new root canal sealer. Methodology: The sealers tested were Sealer Plus (MKLife, Porto Alegre, Rio Grande do Sul, Brazil), compared as AH Plus (Dentsply, DeTrey GmbH, Konstanz, Alemanha). For the radiopacity, flow, solubility and fabrication of test specimens relative to setting times the ANSI/ADA No. 57 (2000) and ISO 6876 (2012) specifications were followed. To measure the initial and final setting times the ASTM C266/2008 standard was used. pH was evaluated in the time intervals of 3, 24, 72 and 168 hours). Statistical tests were applied to the results obtained at a level of significance of 5%. Results: The results demonstrated that the Sealer Plus sealer showed a lower radiopacity value than AH Plus sealer (p<0.05), however, this was higher than the minimum value recommended by the specifications; that is 3 mm Al. Relative to flow, the value for Sealer Plus was 19.19 mm and for AH Plus, 19.81 mm (p>0.05). Sealer plus presented initial and final setting times of 138 min. and 210 min., respectively, while the values for AH Plus were 437 min. and 849 min., respectively, (p<0.05). Relative to solubility, Sealer Plus presented 0.21% and AH Plus, 0.27% (p>0.05). None of the sealers showed a significant increase in pH (p>0.05). Conclusion: Sealer Plus sealer presented physico-chemical properties in accordance with ANSI/ADA (2000) No.57 and ISO 6876 (2012) specifications. / Introdução: Este estudo objetivou avaliar algumas propriedades físico-químicas de um novo cimento obturador de canais radiculares. Metodologia: Para os testes de radiopacidade, escoamento, solubilidade e confecção dos corpos de prova para os tempos de presa foram seguidas as especificações nº57 da ANSI/ADA (2000) e ISO 6876 (2012). Para a medição dos tempos de presa, inicial e final, foi empregada a norma ASTM C266/2008. O pH foi avaliado nos períodos de 3, 24, 72 e 168 horas. Sobre os resultados foram aplicados testes estatísticos com nível de significância de 5%. Resultados: Os resultados demonstraram que o cimento Sealer Plus apresentou menor radiopacidade do que o cimento AH Plus (p<0.05), porém, superior ao mínimo recomendado pelas especificações, ou seja, de 3 mm de Al. Com relação ao escoamento, o do Sealer Plus foi 19,19 mm e do AH Plus 19,81 mm (p>0.05). O Sealer Plus apresentou tempos de presa inicial e final de 138 min. e 210 min., respectivamente, enquanto o AH Plus, 437 min. e 849 min., respectivamente, (p<0.05). Em relação à solubilidade, o Sealer Plus apresentou 0,21% e o AH Plus 0,27% (p>0.05). Nenhum dos cimentos apresentou aumento significativo do pH (p>0.05). Conclusão: O cimento Sealer Plus apresentou propriedades físico-químicas de acordo com as especificações nº 57 da ANSI/ADA (2000) e ISO 6876 (2012).
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Ausência de correlação entre a penetração do cimento AH Plus nos túbulos dentinários e a qualidade do selamento / Lack of correlation between AH Plus sealer penetration into dentinal tubules and sealability

Maria Cláudia Brandão de Souza 30 March 2010 (has links)
O presente estudo objetivou testar experimentalmente a existência da possível correlação entre a penetração de cimento nos túbulos dentinários e a qualidade do selamento. Foram utilizados 60 incisivos centrais superiores humanos que formaram um único grupo experimental. Após a eliminação das porções coronárias, as raízes foram padronizadas em 13 mm de comprimento. A instrumentação dos canais foi realizada no sentido coroa-ápice, e o comprimento de trabalho estabelecido a 1 mm aquém do forame apical. Como solução irrigadora foi empregado o NaOCl a 5,25% e ao final, EDTA a 17%. Em seguida, todos os canais foram obturados com guta-percha e cimento AH Plus marcado com um corante fluorescente. Para determinar a qualidade do selamento das obturações endodônticas, as amostras foram submetidas ao modelo de infiltração de glicose sob pressão. As raízes foram montadas em um dispositivo de dupla-câmara selada para permitir a infiltração da glicose. Como controle negativo foram utilizados 4 dentes hígidos, e como controle positivo, 2 dentes instrumentados porém, não obturados. Foram utilizados 0,75 mL de solução de glicose a 1 mol/L na câmara superior e 0,75 mL de água deionizada na câmara inferior. Os dispositivos foram conectados a um sistema de distribuição de pressão desenvolvido com o objetivo de permitir a infiltração de 32 amostras em uma mesma etapa. A solução de glicose foi forçada apicalmente sob uma pressão de 15 psi durante 1 hora. Uma alíquota de 50 L foi coletada da câmara inferior para quantificar a glicose infiltrada. A concentração de glicose foi determinada através de um método enzimático com o auxílio do Kit Glucose HK e de um espectrofotômetro em um comprimento de onda de 340 nm. Na sequência, as amostras foram desacopladas dos corpos de prova, embutidas em resina epóxi e cortadas em 3 secções transversais. Uma sequência de preparação metalográfica padrão foi realizada para permitir a observação da penetração de cimento nos túbulos dentinários por meio de microscopia confocal e óptica. Os dados obtidos nos 2 experimentos foram cruzados pelo teste de correlação de Spearman, o qual revelou a inexistência de qualquer possibilidade de correlação (r = 0,12). Com base nesses resultados, o presente trabalho concluiu que, dentro das condições experimentais usadas, a quantidade de cimento presente dentro dos túbulos dentinários não teve relação com a qualidade do selamento produzido. / The purpose of the present study was to experimentally test the potential correlation between tubular dentin sealer penetration and sealability. Sixty human maxillary central incisors were selected in order to compose a single experimental group. After removing of crowns, the roots were standardized at 13 mm in length. A crown-down root canal instrumentation was performed 1mm short of the apical foramen (working length). How irrigating solution was used 5.25% NaOCl and final, 17% EDTA. Then, all root canals were filled with gutta percha and AH Plus sealer labeled with a fluorescent dye. To determine the sealability pattern, samples were submitted to glucose leakage model under pressure. Four intact teeth were used as negative control while further 2 instrumented but nonfilled teeth was used as positive control. The roots were mounted in a double-chamber apparatus where 0,75 mL of 1 mol/L glucose solution was placed into the superior chamber and 0,75 mL of deionized water was placed into the inferior chamber. The devices were connected to a pressure distribution system that was developed in order to allow testing 32 specimens at the same experimental stage. The glucose solution was forced apically under a pressure of 15 psi during 1 hour. A sample of 50 L was taken from the inferior chamber and the glucose concentration was measured following an enzymatic reaction using a Glucose HK Kit readed under spectrophotometry (wave-length of 340 nm). After that, the samples were removed from the apparatus, embedded in epoxy resin and cut into 3 sections. Standard metallographic preparation was performed prior the observation of the sealer penetration into dentinal tubules by confocal and optical microscopy. Data provided by the evaluations were submitted to Spearman correlation test which revealed a lack of correlation between the two variables (r = 0.12). Therefore, the present study concluded that there was no correlation between tubular sealer penetration and sealability in non-bonding conventional root-fillings.
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Estudo comparativo da citotoxicidade de cimentos obturadores sobre culturas de células endoteliais da linhagem ECV 304 / Comparative study of cytotoxicity of sealers on cultured endothelial cells line ECV 304

Vagner José Medeiros Martins 15 February 2011 (has links)
Este estudo teve como objetivo avaliar, in vitro, a citotoxicidade dos cimentos endodônticos Densell Endo, Pulp-Fill, Endofill, Sealer 26, Pulp Canal Sealer e GuttaFlow após 12, 24 e 72 horas de tempo de contato, utilizando-se uma linhagem de células endoteliais ECV-304. Para a avaliação da viabilidade celular, utilizou-se o teste de citotoxicidade MTT. Para cada cimento foram preparados 12 corpos de prova que foram distribuídos em seis grupos experimentais de acordo com as marcas comerciais, sendo quatro para cada tempo. Foi criado um grupo controle que não foi submetido à ação de cimento. Para avaliação do efeito dos cimentos sobre as células endoteliais, os corpos de prova foram inseridos nos poços da placa cultura, incubados a 37C em presença de 5% de CO2 e 100% de umidade. Os testes MTT foram realizados, em quadruplicata, após 12, 24 e 72 horas de contato das amostras com o tapete celular. Foi utilizada a prova Two-Way Anova com o teste Post Hoc de Bonferroni com nível de significância de 5%. Na análise de 12 horas, foi possível observar que o cimento GuttaFlow apresentou média de absorbância de 0,055, seguido do Sealer 26 (média = 0,038). Os cimentos Pulp Canal Sealer e Densell Endo apresentaram a mesma média de absorbância (0,031). O Pulp Fill e o Endofill foram os cimentos que apresentaram maior citotoxicidade (média de absorbância = 0,024 e 0,021, respectivamente). O grupo controle apresentou média de absorbância de 0,158. Em 24 horas observou-se que os cimentos GuttaFlow e Sealer 26 apresentaram as maiores médias de absorbância (0,041 e 0,037, respectivamente), seguidos pelo cimento Pulp Canal Sealer que apresentou média de absorbância de 0,035. Já os cimentos Densell Endo e Pulp Fill apresentaram médias de absorbância de 0,033 e 0,032, respectivamente. O cimento Endofill apresentou uma média de 0,026 e o grupo controle de 0,086. Quando analisados em 72 horas, o cimento Pulp Canal Sealer obteve média de absorbância de 0,049, seguido dos cimentos GuttaFlow e Pulp Fill, ambos com 0,048. Os cimentos Densell Endo, Sealer 26 e Endofill apresentaram respectivamente, médias de 0,044, 0,040 e 0,036. O grupo controle diferenciou-se significativamente de todos os grupos em todos os tempos. Quando analisadas as médias gerais de absorbância dos grupos analisados observou-se que o cimento GuttaFlow se apresentou como o cimento com menor índice de citotoxicidade, apresentando média de absorbência de 0,048. Logo após, apresentando médias de absorbância iguais (0,038) encontraram-se os cimentos Pulp Canal Sealer e Sealer 26; seguidos do Densell Endo e do Pulp Fill, com 0,036 e 0,035, respectivamente. O grupo controle apresentou média de absorbância de 0,098. Portanto, tendo como base os resultados obtidos, pôde-se concluir que o cimento Endofill foi o que apresentou maior citotoxicidade e o cimento GuttaFlow, o menos citotóxico. / This study aimed to evaluate, in vitro, cytotoxicity of root canal sealers Densell Endo, Pulp-Fill, Endofill, Sealer 26, Pulp Canal Sealer and GuttaFlow after 12, 24 and 72 hours of contact time, using a endothelial cell line ECV-304. For the assessment of cell viability, used the MTT cytotoxicity test. For any cement were prepared 12 specimens that were divided into six groups according to the trademarks, four for each time. Created a control group that was not subjected to action of cement. To assess the effects of cements on endothelial cells, the specimens were placed in culture plate wells, incubated at 37C with 5% CO2 and 100% humidity. MTT tests were performed, in quadruplicate, after 12, 24 and 72 contact hours of the samples with monolayers. Was used to test Two-Way Anova with Bonferroni Post Hoc test with significance level of 5%. In the analysis of 12 hours, was observed that the cement GuttaFlow had a mean absorbance of 0,055, followed by Sealer 26 (average = 0,038). Cements Pulp Canal Sealer and Densell Endo had the same mean absorbance (0,031). The Pulp Fill and Enfofill were the cements with higher cytotoxicity (mean absorbance = 0,024 and 0,021, respectively). The control group had a mean absorbance of 0,158. In 24 hours it was observed that the cements Sealer 26 and GuttaFlow had the highest average absorbance (0,041 and 0,037, respectively), followed by cement Pulp Canal Sealer that had a mean absorbance of 0.035. Already cements Densell Endo and Pulp Fill showed means absorbance of 0,033 and 0,032, respectively. Cement Endofill&#61650; showed an average of 0,026 and the control group, 0,086. When analyzed at 72 hours, the cement Pulp Canal Sealer had an average absorbance of 0,049, followed by cement GuttaFlow and Pulp Fill, both with 0,048. Cements Densell Endo, Sealer 26 and Endofill showed respectively, averaging 0,044, 0,040 and 0,036. The control group differed significantly from all groups at all times. When analyzing the overall means of absorbance groups analyzed showed that the cement GuttaFlow introduced himself as the cement with a lower index of cytotoxicity, with a mean of 0,048 absorbance. Soon after, with averages of equal absorbance (0,038) met cements Pulp Canal Sealer and Sealer 26; followed by Endo Densell and Pulp Fill, with 0,036 and 0,035, respectively. The control group had a mean absorbance of 0,098. Therefore, based on the results, could conclude that the cement Endofill showed the highest cytotoxicity and cement GuttaFlow, the least cytotoxic.
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Avaliação da resposta inflamatória e processo de reparo do tecido subcutâneo de ratos, em contato com diferentes cimentos endodônticos

Cunha, Thaís Christina 30 June 2011 (has links)
Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais / The aim of this study was to evaluate the inflammatory response and repair process in subcutaneous tissue from the rats to four different sealers: Sealer 26, Epiphany, AH Plus and Endofill. Polyethylene tubes filled with fresh sealer were implanted in the four separate pockets created by blunt dissection in regions of the dorsum of each one of the third five male Wistar rats used. After 7, 14, 21, 42 and 60 days of post operatory, the implants were removed with the surrounding tissue, processed for inclusion in paraffin for the analysis histopatological. Qualitative and quantitative analysis was performed on HE sections as well as picro sirius (PS) sections. The intensity of the inflammatory response was evaluated and were scored as: 0- no inflammation;1- mild inflammation; 2- moderate inflammation or 3- severe inflammation. Fibrous capsule thickness was evaluated on PS sections using polarization. The measurements were subject to non parametric analysis. Results: In seven days the subcutaneous tissue of all animals showed characteristics corresponding to the severe inflammatory reaction (p> 0.05). At 14 and 21 days the response inflammatory tissued obtained with the Epiphany and AH Plus sealers showed statistically significant differences compared to the response of Endofill (p = 0.0005, p = 0.0003, respectively). This sealer remained the most aggressive at 42 (p = 0.0203) and 60 days (p = 0.0072) compared to Epiphany. There were no significant differences in the quantity of fibrous collagens among the sealers in the five periods. Conclusion: All tested sealers caused a severe inflammatory reaction in initial periods which decreased along the time. Endofill was the most aggressive sealer on all analyzed periods. The fibrous capsule was formed in all interfaces analyzed, presented himself as a protection developed by the tissue to the presence of an irritating material. / A presente pesquisa teve como objetivo verificar a resposta inflamatória e o processo de reparo em tecido subcutâneo de ratos a quatro cimentos endodônticos de composições distintas: Sealer 26®, Epiphany®, AH Plus® e Endofill. Neste estudo foram utilizados 35 ratos Wistar, sendo que em cada animal foram confeccionadas 4 lojas cirúrgicas subcutâneas na região dorsal. Em cada loja foi implantado um tubo de polietileno preenchido com um dos cimentos em teste. Após 7,14,21,42 e 60 dias de pós operatório, a região da pele em contato com o implante foi removida e os fragmentos foram processados para inclusão em parafina e posterior análise histopatológica. Metade dos cortes obtidos foram avaliados de acordo com a intensidade da resposta inflamatória atribuindo scores: 0= ausente,1= leve, 2=moderada e 3=severa que foram submetidos à análise estatística. A outra metade dos cortes foi corada em Picro-sirius Red para a análise da quantidade de fibras colágenas utilizando polarização ótica. Em sete dias, o tecido subcutâneo em todos os animais apresentou reação inflamatória severa, não sendo observadas diferenças estatísticas significantes entre os grupos (p>0.05). Aos 14 e 21 dias, os espécimes com os cimentos Epiphany® e AH Plus® mostraram diferenças estatísticas significantes quanto à intensidade da reação inflamatória quando comparados aos do cimento Endofill (p=0.0005, p=0.0003, respectivamente). Os espécimes com cimento Endofill mantiveram reação inflamatória intensa aos 42 (p=0.0203) e 60 dias (p=0.0072) comparado aos do cimento Epiphany®. Não foram encontradas diferenças quanto à quantidade de fibras colágenas na cápsula fibrosa entre os cimentos, em todos os tempos avaliados. Todos os cimentos testados provocaram uma reação inflamatória inicialmente severa que decresceu ao longo dos períodos avaliados. O Cimento Endofill se mostrou com maior potencial irritante em todos os períodos avaliados. A cápsula fibrosa, presente em todas as interfaces analisadas, se apresentou como uma proteção desenvolvida pelo tecido à presença do material irritante. / Mestre em Odontologia
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"Efeito da terapia com laser em baixa intensidade (LILT) na produção de proteínas por macrófagos estimulados por cimentos endodônticos" / Effect of low level laser therapy (LILT) on the protein secretion by endodontic sealers stimulated macrophages

Lorena Ribeiro de Sousa 08 March 2006 (has links)
A terapia endodôntica visa o selamento biológico do complexo sistema apical, contribuindo para isso, as substâncias usadas no tratamento e a resposta imune do paciente. A LILT tem mostrado atividade antiinflamatória, favorecendo o processo reparacional. Sendo assim, este trabalho objetivou analisar o efeito da LILT na atividade secretória de macrófagos, previamente ativados por IFN-? e LPS de E.coli, e estimulados por substâncias liberadas de três tipos de cimentos endodônticos, um a base de óxido de zinco e eugenol, outro a base de hidróxido de cálcio e um terceiro resinoso. A citotoxicidade dessas substâncias foi avaliada usando a técnica de análise do MTT. Macrófagos ativados foram estimulados por essas substâncias ou não (controle) e então, irradiados ou não (controle) e a secreção de proteínas próinflamatórias (interleucina-1 b, fator de necrose tumoral-a e metaloproteinase da matriz-1) foram analisadas pelo teste ELISA. As irradiações foram realizadas com um laser GaAlAs (780 nm, 70 mW, ponta da fibra de 4 mm2, 1.67 seg, 3 J/cm2). Foram usadas duas aplicações de irradiação com intervalo de 6 h. Os dados obtidos foram tratados por Análise de Variância, quando de distribuição normal, ou teste de Friedman, quando de distribuição não normal, com nível de significância de 5 % (p = 0,05). A viabilidade dos controles e células tratados pelos cimentos endodônticos foi similar. Produção de IL-1 b e TNF-a foram observadas. Houve alta produção de MMP-1. Entretanto, sem diferenças estatísticas entre os grupos experimentais. Os grupos irradiados apresentaram resultados similares aos não irradiados. Substâncias liberadas pelos cimentos endodônticos testados não se mostraram citotóxicas nas condições deste experimento. Essas substâncias, bem como a LILT, no parâmetro utilizado, não causam alteração na atividade de secreção de MMP-1, IL-1 b e TNF-a por macrófagos ativados. / The endodontic therapy seeks the dental root canal biological sealing, depending on substances used in this process and patient’s defense immune factors. LILT has shown an anti-inflammatory activity, improving the periapical repair process. This in vitro study aimed to analyze the effect of LILT at the secretory activity of macrophages previously activated by interferon-gamma and lypopolisaccharide from E.coli, and stimulated by substances leached from three endodontic sealers (zinc oxide-eugenol based, resinous and calcium hydroxide-based). Cytotoxicity of these substances was assessed by the MTT test. Activated macrophages were stimulated by the substances or not (control) and then, irradiated or not (control) and the secretion of pro-inflammatory proteins (interleukin-1 b, tumor necrosis factor-a and matrix metalloproteinase-1) was analyzed by ELISA test. The LILT was performed using a GaAlAs laser (780 nm, 70 mW, focal spot of 4.0 mm2, 1.67 sec, 3 J/cm2). Two irradiations with 6 h-intervals were done. The data was compared by either ANOVA test or Friedman’s test. The cell viabilities of controls and cells treated by the sealers were similar. Production of IL -1 b and TNF-a were observed. There was a high production of MMP-1. However, statistical differences were not observed amongst the groups. The irradiated groups presented results similar to those of non irradiated groups. Substances leached from the endodontic sealers are non cytotoxic at these experiments conditions . These substances, as well as the LILT, at the parameter used, were not able to change the secretion of MMP-1, IL-1 b e TNF-a by activated macrophages.
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Influência do hidróxido de cálcio na resistência de união de cimentos endodônticos resinosos à dentina radicular / Influence of calcium hydroxide in the bond strength of root canal sealers to dentin: push-out testing

Ceci Nunes Carvalho 01 July 2010 (has links)
Avaliou-se a influência do uso do hidróxido de cálcio como medicação intracanal na resistência de união de obturações endodônticas à dentina radicular quando realizadas com o cimento AH Plus ou Epiphany. Raízes palatinas de primeiros molares superiores humanos foram preparadas com sistema rotatório EndoSequence, e divididas em 4 grupos: G1 fatias preenchidas com AH Plus; G2 - fatias preenchidas com Epiphany; G3 - dentes que receberam medicação intracanal com hidróxido de cálcio por 14 dias e posterior preenchimento das fatias com AH Plus; G4 - dentes que receberam medicação intracanal com hidróxido de cálcio por 14 dias e posterior preenchimento das fatias com Epiphany. Para o teste de pushout as raízes foram fixadas, cortadas e delas obtidas secções seriadas das regiões cervical, média e apical. Após a manobra de preenchimento das fatias, essas permaneceram armazenados por 7 dias em câmara a vácuo a 37º C sob condições de umidade ambiental. Decorrido esse período, os dentes foram preparados para o ensaio mecânico. Os corpos-de-prova foram adaptados a um suporte fixado à base da máquina de ensaios mecânicos universal, onde aplicou-se uma carga à velocidade de 0,5 mm/min no sentido ápico-cervical até o completo deslocamento do material obturador. Após a realização dos ensaios, foi feita análise do padrão de fraturas dos corpos de prova utilizando a microscopia eletrônica de varredura. A análise de variância revelou diferença estatisticamente significante entre os grupos (p<0,05). O teste de Tukey identificou que a resistência de união obtida pelos grupos Epiphany e Epiphany + hidróxido de cálcio foi estatisticamente menor do que a dos grupos AH Plus e AH Plus + hidróxido de cálcio; e, a comparação entre grupos mostrou que o grupo AH Plus + hidróxido de cálcio mostrou-se estatisticamente superior ao grupo AH Plus, portanto o hidróxido de cálcio influencia positivamente apenas na adesão do cimento AH Plus. / We evaluated the influence of calcium hydroxide as an intracanal dressing in the bond strength of root canal filling to the root dentin when performed with AH Plus sealer or Epiphany. Palatal roots of maxillary first molars were prepared with rotary system EndoSequence and divided into 4 groups: G1 - slices filled with AH-Plus G2 - slices filled with Epiphany, G3 - teeth that received root canal dressing with calcium hydroxide for 14 days and then filling out the slices with AH-Plus; G4 - teeth that received root canal dressing with calcium hydroxide for 14 days and then filling out the slices with Epiphany. To test push-out the roots were fixed, cut them and obtained serial sections of cervical, middle and apical. After the maneuvers fills the slices, they remain stored for 7 days in a vacuum chamber at 37°C under conditions of environmental humidity. After this period the teeth were prepared for mechanical testing. The samples were adapted to a bracket attached to the base of the testing machine universal where we apply a load at a speed of 0.5 mm/min towards apicocervical to the complete displacement of the filling material. After the testing, analysis was made of the pattern of fractures of the specimens using scanning electron microscopy. Analysis of variance revealed a statistically significant difference between groups (p < 0,05). The Tukey test indicated that the bond strength obtained by the groups Epiphany and Epiphany + Calcium hydroxide was lower than that of groups AH Plus and AH-Plus + Calcium hydroxide; and, the comparison between groups showed that group AH-Plus + Calcium hydroxide was statistically higher than the AH-Plus group, so the Calcium hydroxide has a positive effect only in the adhesion of AH-Plus sealer.
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Evaluation of physicochemical properties of a new epoxy resinbased root canal sealer / Avaliação das propriedades físico-químicas de um novo cimento obturador de canais radiculares à base de resina epóxica

Vertuan, Gislene Cristina 10 July 2018 (has links)
Introduction: The aim of this study was to evaluate some of the physico-chemical properties of a new root canal sealer. Methodology: The sealers tested were Sealer Plus (MKLife, Porto Alegre, Rio Grande do Sul, Brazil), compared as AH Plus (Dentsply, DeTrey GmbH, Konstanz, Alemanha). For the radiopacity, flow, solubility and fabrication of test specimens relative to setting times the ANSI/ADA No. 57 (2000) and ISO 6876 (2012) specifications were followed. To measure the initial and final setting times the ASTM C266/2008 standard was used. pH was evaluated in the time intervals of 3, 24, 72 and 168 hours). Statistical tests were applied to the results obtained at a level of significance of 5%. Results: The results demonstrated that the Sealer Plus sealer showed a lower radiopacity value than AH Plus sealer (p<0.05), however, this was higher than the minimum value recommended by the specifications; that is 3 mm Al. Relative to flow, the value for Sealer Plus was 19.19 mm and for AH Plus, 19.81 mm (p>0.05). Sealer plus presented initial and final setting times of 138 min. and 210 min., respectively, while the values for AH Plus were 437 min. and 849 min., respectively, (p<0.05). Relative to solubility, Sealer Plus presented 0.21% and AH Plus, 0.27% (p>0.05). None of the sealers showed a significant increase in pH (p>0.05). Conclusion: Sealer Plus sealer presented physico-chemical properties in accordance with ANSI/ADA (2000) No.57 and ISO 6876 (2012) specifications. / Introdução: Este estudo objetivou avaliar algumas propriedades físico-químicas de um novo cimento obturador de canais radiculares. Metodologia: Para os testes de radiopacidade, escoamento, solubilidade e confecção dos corpos de prova para os tempos de presa foram seguidas as especificações nº57 da ANSI/ADA (2000) e ISO 6876 (2012). Para a medição dos tempos de presa, inicial e final, foi empregada a norma ASTM C266/2008. O pH foi avaliado nos períodos de 3, 24, 72 e 168 horas. Sobre os resultados foram aplicados testes estatísticos com nível de significância de 5%. Resultados: Os resultados demonstraram que o cimento Sealer Plus apresentou menor radiopacidade do que o cimento AH Plus (p<0.05), porém, superior ao mínimo recomendado pelas especificações, ou seja, de 3 mm de Al. Com relação ao escoamento, o do Sealer Plus foi 19,19 mm e do AH Plus 19,81 mm (p>0.05). O Sealer Plus apresentou tempos de presa inicial e final de 138 min. e 210 min., respectivamente, enquanto o AH Plus, 437 min. e 849 min., respectivamente, (p<0.05). Em relação à solubilidade, o Sealer Plus apresentou 0,21% e o AH Plus 0,27% (p>0.05). Nenhum dos cimentos apresentou aumento significativo do pH (p>0.05). Conclusão: O cimento Sealer Plus apresentou propriedades físico-químicas de acordo com as especificações nº 57 da ANSI/ADA (2000) e ISO 6876 (2012).

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