Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2014-11-27T11:45:34Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Vanessa Sardinha dos Santos - 2013.pdf: 10089707 bytes, checksum: 69000ac14aa534080fd70a3327c6b93a (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2014-11-27T14:22:19Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Vanessa Sardinha dos Santos - 2013.pdf: 10089707 bytes, checksum: 69000ac14aa534080fd70a3327c6b93a (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-11-27T14:22:19Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Vanessa Sardinha dos Santos - 2013.pdf: 10089707 bytes, checksum: 69000ac14aa534080fd70a3327c6b93a (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2013-10-01 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Asteraceae is one of the most common families of cerrado herbs and subshrubs. Plants in this family vary widely in structure in response to environmental conditions. The present study aimed to characterize the morphoanatomy and histochemistry of aerial and underground organs of Chrysolaena simplex (Less.) Dematt and Lessingianthus buddleiifolius (Mart. ex DC.) H. Rob., assess the occurrence of certain classes of secondary metabolites through phytochemical analyses, and study the effects of seasonality on morpho-anatomical and physiological traits. The study was carried out in an area of campo rupestre in the Reserva Biológica Prof. José Ângelo Rizzo of Universidade Federal de Goiás, inside Parque Estadual da Serra Dourada (PESD). Adult individuals of C. simplex and L. buddleiifolius were collected in the dry and rainy seasons. Samples were analyzed using standard techniques of plant anatomy and scanning electron microscopy. Fresh material was used for histochemical tests. The phytochemical analysis used standard reactions to detect classes of secondary metabolites. C. simplex e L. buddleiifolius had similar anatomical traits, such as amphistomatic leaves, monostratified epidermis, thin cuticle, glandular and non-glandular trichomes, anisocytic stomata, dorsiventral mesophyll, collateral vascular bundles and hydathodes. Histochemical tests identified the presence of lipophilic substances and phenolic compounds in the studied species. Phytochemical screening of leaf and stem samples detected the presence of steroids, triterpenoids, flavonoids, and coumarins in both species. In contrast, saponins were only found in L. buddleiifolius. Seasonality affected the morpho-anatomy of the species studied, revealing their great phenotypic plasticity. The underground system of C. simplex was a rhizophore, while the system of L. buddleiifolius was a xylopodium. Secretory ducts were found in the adventitious roots of C. simplex, whereas the roots of L. buddleiifolius had secretory endodermis. Both species had lipophilic substances and inulin crystals. Crystals were observed in the entire rhizophore of C. simplex, but exclusively in the roots of L. buddleiifolius. The phytochemical analysis of the underground systems revealed the presence of flavonoids, saponins and coumarins, but steroids and triterpenoids were only detected in C. simplex. / A família Asteraceae destaca-se como uma das mais frequentes entre as espécies do estrato herbáceo e subarbustivo do Cerrado e apresenta uma ampla variação estrutural em resposta às condições ambientais. O presente estudo teve por objetivo caracterizar a morfoanatomia e investigar a presença de algumas classes de metabólitos secundários pela análise fitoquímica e histoquímica, bem como avaliar os efeitos da sazonalidade nas características morfoanatômicas e fisiológicas dos órgãos vegetativos aéreos e subterrâneos de Chrysolaena simplex (Less.) Dematt. e Lessingianthus buddleiifolius (Mart. ex DC.) H. Rob. O estudo foi realizado em área rupestre, na Reserva Biológica da Universidade Federal de Goiás “Prof. José Ângelo Rizzo”, situado no Parque Estadual da Serra Dourada (PESD). As coletas foram realizadas durante a estação seca e chuvosa em indivíduos adultos de C. simplex, e L. buddleiifolius. As amostras foram submetidas às técnicas usuais em anatomia vegetal e eletrônica de varredura. Testes histoquímicos foram realizados em material fresco. Na análise fitoquímica foram empregadas as reações clássicas de identificação das classes de metabólitos secundários. C. simplex e L. buddleiifolius apresentam caracteres anatômicos em comum, tais como folhas anfiestomáticas, epiderme uniestratificada, cutícula delgada, tricomas glandulares e tectores, estômatos anisocíticos, mesofilo dorsiventral, feixes vasculares colaterais e a presença de hidatódios. Testes histoquímicos evidenciaram substâncias lipofílicas e compostos fenólicos nas espécies estudadas. A prospecção fitoquímica realizada em amostras da folha e caule revelou a presença de esteróides, triterpenoides, flavonóides e cumarinas em ambas as espécies. A presença de saponinas foi detectada apenas em L. buddleiifolius. A sazonalidade influenciou na morfoanatomia das plantas estudadas, demonstrando assim a grande plasticidade fenotípica dessas espécies. O sistema subterrâneo de C. simplex foi identificado como rizóforo, enquanto o de L. buddleiifolius um xilopódio. Foram identificados canais secretores nas raízes adventícias de C. simplex. Endoderme secretora foi observada nas raízes de L. buddleiifolius. Substâncias lipofílicas e cristais de inulina ocorreram nas duas espécies. Em C. simplex os cristais foram observados em todo o rizóforo, enquanto em L. buddleiifolius, foram observados apenas nas raízes. A análise fitoquímica dos sistemas subterrâneos revelou a presença de flavonóides, saponinas e cumarinas, sendo que esteróides e triterpenóides foram encontrados apenas em C. simplex.

Made available in DSpace on 2015-04-20T12:22:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 lucilene.pdf: 2070035 bytes, checksum: 37548e77c555e417869445a6db9275e5 (MD5) Previous issue date: 2011-12-15 / Rainforests represent a source of natural resources resulting from ecological interactions, especially among plant and microorganisms. There are times the product of the secondary metabolism of these beings is used by industry by virtue of its antimicrobial potential. This work has evaluated the structural aspects and there associated anatomical phytochemical survey of mycological and three medicinal plants, which are: Costus spicatus, Stachytarpheta cayennensis, Ayapana triplinervis. The anatomical results show that C. spicatus has amphihypostomatic leaf, stomats tetracitic and filamentous tectores trichomes; S. cayennensis has amphihypostomatic leaf, diacíticos stomats and anomocitic and tectores and glandular trichomes. A. triplinervis has amphihypostomatic leaf, stomats anomocitics, glandular trichomes and tectores, ducts and aerênquima. The histochemistry and chemical prospecting of three species indicated the presence of substances such as alkaloids, phenolics, saponins, tannins, heterosídeos cinogênicos and volatile acids and starch. The isolation of endophytes showed that C. spicatus has highest rate of colonization and the fungal genera more frequent in three species were: Phacelomyces, Aspergillus, Fusarium, Penicillium and Trichoderma / As florestas tropicais representam fonte de recursos naturais resultante das interações ecológicas, principalmente entre planta e micro-organismos. Há tempos o produto do metabolismo secundário destes seres é utilizado pela indústria em virtude de seu potencial antimicrobiano. Este trabalho avaliou os aspectos estruturais anatômicos e histoquímicos associados à prospecção fitoquímica e micológica de três plantas medicinais, sendo elas: Costus spicatus, Stachytarpheta cayennensis e Ayapana triplinervis. Os resultados anatômicos mostram que C. spicatus possui folha anfi-hipoestomática, estômatos tetracíticos e tricomas tectores filamentosos; S. cayennensis apresenta folhas anfi-hipoestomáticas, estômatos diacíticos e anomocíticos, tricomas glandulares e tectores; A. triplinervis possui folha anfi-hipoestomática, estômatos anomocíticos, tricomas glandulares e tectores, ductos e aerênquima. A histoquímica e a prospecção química das três espécies indicaram a presença de substâncias tais como alcaloides, compostos fenólicos, saponinas, taninos, heterosídeos cinogênicos e ácidos voláteis e amido. O isolamento dos fungos endofíticos evidenciou que C. spicatus apresenta maior taxa de colonização e os gêneros fúngicos mais frequentes nas três espécies foram: Phacelomyces, Aspergillus, Fusarium, Trichoderma e Penicillium

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-09-16T13:21:14Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Alex de Lima Cunha - 2016.pdf: 4593701 bytes, checksum: 97361a8ef0c3cb7b49c2e23583d576d4 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-09-16T13:21:49Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Alex de Lima Cunha - 2016.pdf: 4593701 bytes, checksum: 97361a8ef0c3cb7b49c2e23583d576d4 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-16T13:21:49Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Alex de Lima Cunha - 2016.pdf: 4593701 bytes, checksum: 97361a8ef0c3cb7b49c2e23583d576d4 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-08-01 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / Morphology, Micromorphology and Extrafloral Nectaries Anatomy in species of Senna Mill. and Chamaecrista Moench (Leguminosae, Cassinae). Extrafloral Nectaries (EFN) are nectar-secreting structures present in vegetative organs of various plant families. The EFN were identified in 113 families of Angiosperms, wherein Leguminosae was described with the greatest number of species with extrafloral nebulous in the world. The extrafloral nectaries’ shape and arrangement in plant organs are some of the effective tools that contribute to the taxonomic delimitation of several families of Angiosperms, especially the Leguminosae. This study aimed to carry out the morpho-anatomical, micromorphological and histochemical analysis of the extrafloral nectaries in Senna and Chamaecrista species, belonging to the subtribe Cassinae (Leguminosae). The plant material was collected in the following parks: Parque Estadual da Serra Dourada, Parque Estadual da Serra dos Pireneus and Parque Nacional da Chapada dos Veadeiros in the state of Goiás. The leaf samples containing EFN were subjected to photonic microtechniques and electronic scanning. We studied 17 taxa containing structured and high EFN arranged mainly in the leaves, and classified into eight different forms, ranging from sessile to stipitate. It has been found that the EFN location and shape of the studied species are a useful tool in group taxonomy, especially the generic level, since in Senna the EFN are located, usually in the rachis, the foliolar inserts, presenting conical, digitiform, fusiform, globular and ovoid, whereas in the Chamaecrista EFN are usually petiole, pateliform, obovoid and caliciform. The EFN varieties of C. desvauxii were studied in their anatomical structures and exhibited some similarities in the anatomical and histochemical organization. However, some characteristics distinguish themselves and can be used in the taxonomy of species, such as the nectariferous parenchyma presence in the NEF edge of Chamaecrista desvauxii var. peronadenia, feature not observed in other varieties; subnectariferous parenchyma cells elongated anticlinally in varieties Chamaecrista desvauxii var. langisdorffii and Chamaecrista desvauxii var. peronadenia; besides the occurrence of nucleated sclereids associated with vascular tissues in Chamaecrista desvauxii var. molissima. This study contributes to new information on the EFN species because the literature did not present information on the secreted chemical nature as well as its structural organization, confirming that the present secretory structures are really EFN. / Nectários extraflorais (NEFs) são estruturas secretoras de néctar presentes em órgãos vegetativos de várias famílias de plantas. Os NEFs foram identificados em 113 famílias de Angiospermas, sendo Leguminosae descrita com o maior número de espécies com nectários extraflorais no mundo. A forma e a disposição dos nectários extraflorais nos órgãos vegetais são algumas das ferramentas eficazes que contribuem para a delimitação taxonômica de várias famílias de Angiospermas, especialmente as Leguminosae. Objetivou-se realizar a análise morfoanatômica, micromorfológica e histoquímica de nectários extraflorais em espécies de Senna e Chamaecrista pertencentes à subtribo Cassinae (Leguminosae). O material vegetal foi coletado no Parque Estadual da Serra Dourada, no Parque Estadual da Serra dos Pireneus e no Parque Nacional da Chapada dos Veadeiros no Estado de Goiás. As amostras de folhas contendo NEFs foram submetidas às microtécnicas fotônica e eletrônica de varredura. Foram estudados 17 táxons contendo NEFs elevados e estruturados, dispostos principalmente nas folhas, e classificados em oito formas distintas, variando de sésseis a estipitados. Foi constatado que a localização e a forma dos NEFs das espécies estudadas constituem ferramenta útil na taxonomia do grupo, sobretudo ao nível genérico, pois em Senna os NEFs estão localizados, geralmente na raque, nas inserções foliolares, apresentando-se cônicos, digitiformes, fusiformes, globosos e ovoides, enquanto que em Chamaecrista os NEFs são usualmente peciolares, pateliformes, obovoides e caliciformes. Os NEFs das variedades de C. desvauxii foram estudados em suas estruturas anatômicas e exibiram algumas semelhanças na organização anatômica e histoquímicas. Entretanto, algumas características se diferenciaram e podem ser utilizadas na taxonomia da espécie, tais como a presença de parênquima nectarífero na borda do NEF de Chamaecrista desvauxii var. peronadenia, carcterística não verificada nas demais variedades; células do parênquima subnectarífero alongadas anticlinalmente nas variedades Chamaecrista desvauxii var. langisdorffii e Chamaecrista desvauxii var. peronadenia; além da ocorrência de esclereídes nucleadas associadas aos tecidos vasculares em Chamaecrista desvauxii var. molissima. O presente trabalho contribui com informações inéditas sobre os NEFs da espécie, pois a literatura não apresesntava infomações sobre a natureza química do secretado, bem como de sua organiação estrutural, confirmando que as estruturas secretoras presentes são realmente NEFs.

Em Mimosoideae (Leguminosae), glândulas em anteras são estruturas de destaque, pois ocorrem em muitos de seus representantes e provêm caracteres com valor taxonômico no clado. O conhecimento a respeito destas glândulas era baseado principalmente em observações de morfologia externa, faltando dados a respeito de sua anatomia, ontogenia, seu funcionamento e seus aspectos evolutivos, o que contribuiria para uma caracterização mais detalhada e uma classificação mais natural dessas estruturas, além da inferência de funções ecológicas mais objetivas. Assim, o objetivo do estudo foi revisitar a estrutura das glândulas nas anteras, investigar sua origem meristemática e o seu desenvolvimento, acompanhar seu funcionamento, inferir funções ecológicas e, então, reconstruir sua evolução em Mimosoideae. Para contemplar os objetivos propostos, o presente estudo investigou aspectos das glândulas em anteras em 25 espécies de Mimosoideae, que representam grupos com divergências mais antigas e recentes no clado. Foram encontrados quatro tipos principais de glândulas: (1) O tipo Piptadenia, caracterizado por uma glândula pedunculada com ápice esférico e que inclui três subtipos: Piptadenia, com ápice composto de células isodiamétricas; Adenanthera, com ápice composto de uma camada de células epidérmicas alongadas que delimitam células isodiamétricas; e Entada, com ápice composto de uma camada de células epidérmicas volumosas que delimitam um lúmen. (2) O tipo Pentaclethra, uma glândula robusta composta de uma camada de células epidérmicas em paliçada e células centrais isodiamétricas, com pedúnculo vascularizado. (3) O tipo Prosopis africana, uma glândula robusta, séssil e vascularizada. (4) Finalmente o tipo Gagnebina, uma glândula acuminada com células alongadas. Apesar da diversidade morfológica, as glândulas de anteras compartilham uma origem meristemática comum. Elas surgem de divisões simultâneas nas primeiras três camadas de células meristemáticas que cobrem a porção apical da antera jovem, sendo classificadas como emergências. Os tipos de glândulas podem apresentar diferenças quanto a: (1) estrutura na pré-antese e antese; (2) longevidade; (3) aspecto e composição química do exsudato e (4) forma de liberação do exsudato. Baseados na caracterização e forma de liberação do exsudato, e no comportamento dos visitantes florais, nossos dados apontam que as glândulas atuam principalmente (a) na produção de substâncias que atuam na adesão do pólen ao corpo do polinizador ou à antera e (b) na produção de fragrância floral atuando como osmóforos. A presença de glândulas em anteras parece ter uma origem única em Mimosoideae, com alguns eventos de perda. O estado ancestral da estrutura das glândulas provavelmente corresponde ao tipo Piptadenia subtipo Adenanthera. Ainda, parece existir uma relação positiva entre ausência de glândulas e a presença de inflorescências de eixo curto, de estames numerosos e de estames unidos. Nossos dados indicam que em Mimosoideae, as glândulas em anteras são caracteres com potencial significado filogenético. A origem meristemática conservada das glândulas além da origem única da presença de glândulas em anteras Mimosoideae favorece a hipótese de homologia dessas estruturas e apoia a monofilia do clado. / In Mimosoideae (Leguminosae), anther glands are prominent structures because they occur in many taxa and provide characters with taxonomic value in the clade. The knowledge about the anther glands was mainly based on external morphological observations, lacking data concerning the anatomy, ontogeny, function and evolutionary aspects of the glands, which would contribute to a more detailed characterization and a more natural classification of these structures, as well as the inference of more objective ecological functions. The aims of this study were to revisit the structure of the anther glands, to investigate their meristematic origin, and their developmental stages, their functioning mechanisms, to infer ecological functions, and thus reconstruct the evolutionary history of these glands in Mimosoideae. For this, the present study investigated several aspects of the anther glands in 25 species of Mimosoideae representing groups with early and late divergences in the clade. We found four major types of glands in anther Mimosoideae: (1) Piptadenia type, characterized by a stalked gland with a spherical apex, and that includes three subtypes: Piptadenia, with the apex composed of isodiametrical cells; Adenanthera, with the apex composed a layer of elongated epidermal cells which delimits isodiametric cells; and Entada with the apex composed of a layer of epidermal bulky cells delimiting a lumen. (2) Pentaclethra type,a robust gland comprised of a layer of epidermal and palisade cells isodiametric central cells with vascularized peduncle. (3) The Prosopis africana type, a robust sessile and vascularized gland. (4) Finally, the Gagnebina type, an acuminate gland with elongated cells. Despite the morphological diversity, the anthers glands share a common meristematic origin. They arise from simultaneous divisions in the first three layers of meristematic cells covering the apical portion of the young anther, being classified as emergences. The types of glands may differ as to: (1) structure in the pre-anthesis and anthesis; (2) longevity; (3) aspect and chemical composition of exudate and (4) release form of exudate. Considering the characterization and release form of exudate, and behavior of floral visitors, our data show that the glands act mainly (a) in the production of substances that act on the accession of pollen to the bee body or anther and (b) in production of floral fragrance acting as osmophores. The presence of anther glands appears to have a single origin in Mimosoideae, with some loss events. The ancestral state of the structure of the glands probably corresponds to the type Piptadenia subtype Adenanthera. Still, there seems to be a negative relation between the presence of the glands, the presence of inflorescences with short axis, numerous stamens and united stamens. Our data indicate that in Mimosoideae, the glands in anthers provide characters with potential phylogenetic significance. The conserved meristematic origin of the anther glands beyond the single evolutionary origin of the presence of glands in anthers favor the hypothesis of homology of these structures and support the monophyly of Mimosoideae.

As copaíbas, pertencentes à família Leguminosae, subfamília Caesalpinioideae, são conhecidas pela produção de uma óleo-resina com propriedades antiinflamatórias, utilizada na medicina popular e pela indústria farmacêutica. A substância é retirada do tronco da árvore, através do uso de um trado que perfura o caule até que a óleo-resina escorra. Esta óleo-resina parece ser produzida, armazenada e secretada por dois tipos de estruturas secretoras, os canais e as cavidades secretores. Embora muitos trabalhos tratem das análises químicas e das atividades biológicas da óleo-resina de espécies de Copaifera, poucos são os que tratam dos mecanismos subcelulares da produção, do armazenamento e da secreção da óleo-resina. Assim, o objetivo deste trabalho foi estudar comparativamente a distribuição, a morfologia, o desenvolvimento e o conteúdo secretor dos canais e/ou cavidades secretores de óleo-resina no caule e na folha de Copaifera trapezifolia Hayne, única dentre as 35 espécies do gênero que ocorre na Floresta Atlântica. Foi testado se os canais e/ou cavidades secretores produzem óleo-resina na folha, assim como relatado para o caule, a fim de propor alternativas para a utilização do tronco da árvore como fonte da secreção. Como a natureza química da secreção já é conhecida para o caule, o estudo ultraestrutural visa relacionar as populações de organelas às substâncias produzidas, ampliando o conhecimento sobre os mecanismos de produção e secreção de óleo-resina pelas células epiteliais secretoras dos canais e/ou cavidades. Para tal, gemas axilares contendo primórdios foliares e caulinares e folíolos medianos completamente expandidos foram coletados de três indivíduos no Jardim Botânico do Rio de Janeiro, e processados para estudos anatômicos, de histolocalização de óleo-resina, ultra-estruturais e de diafanização de folhas inteiras. Os dados indicam que estruturas com forma isodiamétrica, denominadas cavidades secretoras, ocorrem na folha e no caule em estrutura primária e secundária. Na lâmina foliar, estão localizadas entre os parênquimas paliçádico e lacunoso e na face abaxial da nervura central; no pecíolo as cavidades ocorrem no córtex; no caule ocorrem imersas nos parênquimas cortical e medular. Originam-se de células do meristema fundamental, a partir de uma divisão periclinal seguida de duas anticlinais; o lúmen é originado por esquizogenia. O conteúdo das cavidades tanto do caule como da folha contém óleo e resina, conforme consta na literatura para o gênero. Isto permite inferir que a extração da óleo-resina seria menos prejudicial para a planta se extraída da folha. A presença de um epitélio bisseriado na folha e no caule, assim como o que foi encontrado em C. langsdorffii, constitui um dado inédito para Leguminosae e, provavelmente, representa a reposição das células epiteliais que já secretaram. As células epiteliais, no início da produção dos metabólitos, são polarizadas: núcleo próximo à parede periclinal interna e citoplasma próximo à parede periclinal externa. O citoplasma é rico em mitocôndrias e retículos endoplasmáticos liso e rugoso, associados a vesículas (folha) ou plastídeos (caule). Vesículas de conteúdo distinto (elétron-denso e elétron-opaco) são produzidas nos retículos, transportadas por entre as microfibrilas das paredes anticlinal e periclinal interna e liberadas para o lúmen. Produção e secreção de metabólitos para o lúmen não são sincronizadas nas células epiteliais de uma mesma cavidade. Sugere-se que o componente resinoso seja produzido nos retículos rugosos e plastídeos, e o oleoso nos retículos lisos. A comparação entre C. langsdorffii e C. trapezifolia utilizando caracteres com valor diagnóstico representa um resultado pioneiro se considerado o grande número de espécies e morfo-espécies do gênero. No entanto, a inclusão de um maior número de espécies nos estudos de estruturas secretoras de Copaifera permitiriam auxiliar a delimitação infragenérica do grupo. / Copaíbas (Leguminosae, Caesalpinioideae) are best known for the production of an oilresin with anti-inflammatory properties, used in the folk medicine and pharmaceutical industry. The substance is usually taken from the stem, through the use of an auger to drill the stem until the oilresin drips. This oilresin seems to be produced, stored and secreted by two types of secretory structures, canals and secretory cavities. Although many studies address the chemical analysis and the biological activity of the oilresin in species of Copaifera, the cellular mechanisms of production, storage and secretion have rarely been exploited. The objective of this study was to compare the distribution, morphology, development and secretion biology of oilresin-secreting canals and/or cavities, in the stem and in the leaf of Copaifera trapezifolia Hayne, unique among the 35 species of the genus that occurs in the Atlantic Rain Forest. The study tested wheather canals and/or cavities produce oilresin in the leaf, as reported to the stem, in order to propose alternatives to the use of the trunk of the tree as a source of secretion. Considering that the chemical nature of the secretion is already known to the stem, the ultrastructural study of canal/cavity in several stages of development aim at to associate subcellular components with substances produced and secreted. Data obtained can increase the knowledge on the production and secretion mechanisms of within epithelial cells of secretory canals and/or cavities. Materials include axillary buds containing leaf and stem primordial, besides mature middle leaflets and portions of stem in primary and secondary growth. They were collected from three individuals in the Botanic Garden of Rio de Janeiro and prepared to be employed in anatomy, histolocalization of oilresin, ultrastructure and clearing of whole leaves. Secretory cavities were observed in the leaf and the stem (primary and secondary growth), between the palisade and spongy mesophyll, petiole cortex, and shoot cortex and pith. Cavities originate from ground meristem cells by a periclinal division followed by two anticlinals; the lumen is formed by esquizogenous process. The content of the cavities of both the stem and leaf contains oil and resin, as shown in the literature for the genus. This suggests that the extraction of the oleoresin would be less harmful for the plant if extracted from the leaf. The presence of a biseriate epithelium in foliar and shoot cavities, as similarly found in C. langsdorffii, is a novelty for Leguminosae, and probably represents the replacement of epithelial cells that have secreted. In the beginning of substance production epithelial cells are polarized: nucleus near the inner periclinal wall and cytoplasm near the outer periclinal wall. The cytoplasm is rich in mitochondria, and smooth and rough endoplasmic reticulum associated to vesicles (leaf) or plastids (stem). There is a greater amount of smooth endoplasmic reticulum in cells of the leaf cavities and rough endoplasmic reticulum in cells of the stem cavities. Vesicles with different content (electron-dense and electron-opaque) are produced by the reticulum, transported through microfibrils of anticlinals and inner periclinal walls and released into the lumen. Production and secretion of metabolites are not synchronized in epithelial cells of the same cavity. It is suggested that the resin component is produced in the rough reticulum and plastids, and the oily component in the smooth reticulum. The comparison between C. langsdorffii and C. trapezifolia using characters with diagnostic value represents a pioneer result if considered the number of species and morpho-species of the genus. However, the inclusion of a greater number of species in studies of secretory structures of Copaifera would certainly help the complex infrageneric division of this group.

As espécies sul-americanas do gênero Viguiera Kunth foram transferidas para o gênero Aldama La Llave com base em estudos moleculares. Porém, a circunscrição de Aldama tenuifolia (Gardner) E.E.Schill. & Panero e A. kunthiana (Gardner) E.E.Schill. & Panero, pertencentes à Seção Paradosa, série Tenuifolieae ainda não está bem estabelecida, pois as espécies são morfologicamente muito próximas. O objetivo deste trabalho foi analisar a anatomia e o rendimento e a composição química do óleo essencial dos órgãos vegetativos das referidas espécies, visando fornecer dados que auxiliem na delimitação das mesmas. Para as análises anatômicas, as amostras de folhas, caules aéreos, xilopódios e raízes de três indivíduos de cada espécie foram fixadas em FAA 50 ou em solução de Karnovsky, infiltradas em hidroxi-etil-metacrilato, seccionadas em micrótomo rotativo, coradas e montadas em resina sintética. Também foram realizados testes histoquímicos em materiais frescos ou fixados incluídos ou não em hidroxi-etil-metacrilato Para a análise da superfície foliar utilizou-se a técnica de dissociação de epiderme e microscopia de luz e microscopia eletrônica de varredura, utilizando os procedimentos usuais de preparação. A extração do óleo essencial (OE) foi realizada por hidrodestilação em sistema do tipo Clevenger, separadamente para cada órgão e espécie. Os óleos essenciais (OE\'s) foram analisados em Cromatografia a Gás acoplada a Detector de Massas com amostras na concentração de 20mg/mL em acetato de etila. No estudo anatômico foi possível verificar que as folhas das duas espécies diferem quanto ao contorno da parede das células epidérmicas em secção paradérmica, ocorrência de canal secretor no floema primário e no parênquima fundamental da nervura central. Em relação ao caule, a diferença mais marcante foi a ocorrência de canais secretores no floema primário e secundário e, em relação à raiz, o grau de participação da atividade cambial no processo de tuberização. O xilopódio não apresentou diferenças estruturais entre as espécies. As duas espécies apresentaram em comum a ocorrência de estruturas secretoras, tais como tricomas glandulares, espaços secretores internos e hidatódios. Os maiores valores de rendimento dos OE\'s foram verificados para os órgãos subterrâneos. Nas folhas, xilopódios e raízes das duas espécies foram encontrados os mesmos compostos majoritários, apenas com variação de porcentagens relativas. Também foram identificados compostos exclusivos às espécies (?-felandreno, ?-patchouleno, ?-isocomeno e longifoleno-(V4) para A. tenuifolia; cipereno para A. kunthiana) que podem, em conjunto com os compostos comuns às duas espécies, fornecer um perfil químico característico para cada uma delas. Portanto, o estudo anatômico e da composição química dos OE´s dos órgãos vegetativos de A. tenuifolia e A. kunthiana, que são consideradas morfologicamente muito semelhantes, podem auxiliar na diferenciação dessas espécies. / South American species of Viguiera were transferred to the genus Aldama based on molecular studies. However, the circunscription of Aldama tenuifolia (Gardner) E.E.Schill. & Panero and A. kunthiana (Gardner) E.E.Schill. & Panero, belonging to Section Paradosa, series Tenuifolieae, is not yet well established because these species are morphologically very similar. The aim of the present study was to analyze the anatomy of the vegetative organs and the yield and chemical composition of essential oil of these species in order to provide data to help in their circumscription. For anatomical analyzes, leaves, aerial stems, xylopodia and roots from three individuals of each species were fixed in FAA 50 or in Karnovsky solution, infiltrated in hydroxyethyl methacrylate, sectioned with a rotary microtome, stained and mounted in synthetic resin. Histochemical tests were also performed on fresh or fixed material embedded or not in hydroxyethyl methacrylate. The analysis of the leaf surface was performed by light microscopy using the technique of dissociation of the epidermis and by scanning electron microscopy using the usual procedures of preparation. The extraction of essential oil (EO) was performed by hydrodistillation in a Clevenger-type system, separately for each organ of each species. Essential oils (EO\'s) were analyzed by Gas Chromatography coupled to Mass Detector with samples in 20mg/mL concentration in ethyl acetate. The anatomical study showed that the leaves of the two species differ in the outline of the epidermal cell wall in front view side and in the occurrence of secretory canals in primary phloem and ground parenchyma of the midrib. In relation to the stem, the most remarkable difference was the occurrence of secretory canals in the primary and secondary phloem and in relation to the root was the degree of cambial activity participation in tuberisation process. The highest OE\'s yields were verified to the underground organs. For the leaves, xylopodia and roots of both species, the same major compounds were found, varying only the relative percentages. In addition, unique compounds (?-phelandrene, ?-patchoulene, ?-isocomene and longifolene-(V4) for A. tenuifolia and cyperene for A. kunthiana) were also identified that can, along with the compounds common to all two species, provide a characteristic chemical profile for each of these species. Therefore, the studies of the anatomy and of the chemical composition of OE\'s of the vegetative organs of A. tenuifolia and A. kunthiana, which are considered morphologically very similar, may help differentiate these species.

A endometriose é uma doença caracterizada pelo crescimento de tecido endometrial ectópico histologicamente similar ao do endométrio eutópico. Dentre sua sintomatologia, encontra-se relatos de infertilidade a qual está relacionada à diminuição da receptividade endometrial e a resistência à progesterona, importante hormônio envolvido no estabelecimento desse processo e na manutenção da gestação. A etiologia da endometriose não é bem conhecida, mas estudos sugerem que essa desordem possa estar ligada a mecanismos epigenéticos de regulação da expressão genica, tais como a metilação do DNA. A receptividade endometrial à progesterona é mediada por receptores (PR-A e PR-B) a qual parece estar suprimida nessas pacientes, possivelmente por diminuição ou inatividade destes receptores, o que poderia ser um mecanismo envolvido na infertilidade associada à endometriose. Estudos de metilação no gene codificante das isoformas A e B do receptor de progesterona (PGR) mostram que o exon 1 da isoforma PR-B encontra-se hipermetilado e tem sua expressão silenciada em pacientes portadoras da doença. Entretanto ainda não foi avaliado o perfil de metilação deste gene em mulheres inférteis com a doença, o que poderia estar envolvido na infertilidade apresentada por essas pacientes. O objetivo desde estudo foi avaliar o padrão de metilação do gene PGR em endométrio eutópico de mulheres com infertilidade relacionada à endometriose e controles inférteis, durante a fase secretora. 10 Foram realizadas biópsias endometriais de 23 pacientes, divididas em dois grupos: 12 mulheres inférteis sem endometriose (Controle infértil) e 11 mulheres inférteis com endometriose (Endometriose). Todos os endométrios coletados foram confirmados na fase secretora do ciclo através de análise histológica clássica segundo os critérios de Noyes. O DNA genômico foi extraído com o QIAamp DNA Mini Kit e modificado utilizando o EpiTec Bissulfite Kit. O padrão de metilação das isoformas PR-A e PR-B foi avaliado pela técnica HRM (High Resolution Melting) A análise de metilação da isoforma PR-A mostrou que a região analisada encontra-se hipometilada, em que a porcentagem de metilaçao encontrada foi 0% em ambos os grupos com e sem endometriose. No entanto, no grupo com endometriose, a isoforma PR-B mostrou-se parcialmente metilada na maioria das pacientes com porcentagem de metilaçao de 50% (n=8), somente uma paciente apresentou 80% de metilacão na isoforma B. Para o grupo sem endometriose a isoforma PR-B mostrou-se hipometilada (0%). A hipometilação da isoforma PR-A sugere que este gene encontrar-se na sua forma ativa, sem alterações em sua expressão. No entanto, a hipermetilação da isoforma PR-B nas mulheres com endometriose pode estar relacionada com o silenciamento gênico ou redução da sua expressão, sugerindo que a baixa resposta à progesterona nas mulheres com endometriose pode estar diretamente ligada à redução do número de seus receptores nessas pacientes / Endometriosis is a disease characterized by ectopic growth of endometrial tissue histologically similar to the eutopic endometrium. Among this symptoms, is infertility accounts which is related to decreased endometrial receptivity and resistance to progesterone, important hormone involved in the establishment of this process and the maintenance of pregnancy. The etiology of endometriosis is not well known, but studies suggest that this disorder can be linked to epigenetic mechanisms of regulation of gene expression such as DNA methylation. The endometrial responsiveness to progesterone is mediated by receptors (PR-A and PR-B) which seem to be suppressed in these patients, possibly reducing or inactivity of these receptors, which could be a mechanism involved in the infertility associated with endometriosis. Studies in methylation of the gene encoding the A and B isoforms of progesterone receptor (PGR) showed that exon 1 of the PR-B isoform is hypermethylated and silenced have its expression in patients with the disease. However it has not been rated the methylation profile of this gene in infertile women with the disease, which could be involved in the infertility presented by these patients. The goal from study was to evaluate the methylation pattern of the PGR gene in eutopic endometrium of women with infertility related to endometriosis and infertile controls during the secretory phase. Endometrial biopsies were performed on 12 23 patients, divided into two groups: 12 infertile women without endometriosis (infertile Control) and 11 infertile women with endometriosis (Endometriosis). All endometrium collected were confirmed in the secretory phase of the cycle by classical histological analysis according to the criteria of Noyes. Genomic DNA was extracted with the QIAamp DNA Mini Kit and using the modified EpiTec Bissulfite Kit. The methylation pattern of PR-A and PR-B isoforms was assessed by HRM technique (Melting High Resolution) Methylation analysis of PR isoform The analyzed showed that the region is hipometilada, wherein the percentage of methylation was found 0% in both the groups with and without endometriosis. However, in the group with endometriosis, the PR-B isoform showed partially methylated in most patients with methylation percentage of 50% (n = 8), only one patient showed methylation in 80% of isoform B. In the group without endometriosis the PR-B isoform was shown hipometilada (0%). The hypomethylation of PR-A isoform suggests that this gene be in its active form, without change in his expression. However, hypermethylation of the PR-B isoform in women with endometriosis may be associated with gene silencing or reducing the expression, suggesting that the low response to progesterone in women with endometriosis can be directly linked to the reduction of its receptors in these patients

Orientadores: Beatriz Appezzato da Glória, Fernando Batista da Costa / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-25T23:31:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lusa_MakeliGaribotti_D.pdf: 111212555 bytes, checksum: dcca67728c1e6b3b3529dd3542283773 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Asteraceae é uma das maiores famílias entre as angiospermas, possuindo de 24.000 a 30.000 espécies, o que representa, aproximadamente, 10% da flora mundial. Atualmente são reconhecidas 21 subtribos pertencentes à Vernonieae. Entre elas, Lychnophorinae tem uma distribuição quase restrita ao Brasil, ocorrendo nos campos rupestres e cerrados do Planalto Central. A subtribo apresenta 18 gêneros e 104 espécies, distribuídos entre os mais variados hábitos: ervas perenes, arbustos, subarbustos, arvoretas, árvores e caulirosuletum. Estudos filogenéticos recentes indicam que a subtribo é monofilética. As linhagens mais basais e mais derivadas são bem sustentadas, contudo, as relações entre os demais clados persistem apenas parcialmente resolvidas. Por esse motivo, nesse estudo são investigadas espécies da subtribo em relação à morfoanatomia e à química dos principais metabólitos de caules aéreos e folhas, buscando-se novos caracteres que possam ser úteis para um melhor entendimento evolutivo do grupo, inclusive possíveis sinapomorfias. Para tanto, foram eleitas espécies chaves dentro de Lychnophorinae, representantes das principais linhagens. Para as análises estruturais e histoquímicas, amostras de caules e de folhas foram processadas de acordo com as técnicas usuais em anatomia vegetal. Para as análises fitoquímicas, os extratos foram analisados por cromatografia liquida e espectrometria de massas. As reconstruções dos estados ancestrais dos caracteres foram efetuadas em uma filogenia baseada em dados morfológicos e moleculares. Em Lychnophorinae, os principais locais de síntese dos metabólitos secundários são: tricomas glandulares, idioblastos epidérmicos e tecidos parenquimáticos das folhas e dos caules. As análises fitoquímicas evidenciaram a presença de flavonoides, derivados do ácido trans-cinâmico, lactonas sesquiterpênicas e poliacetilenos. A reconstrução dos estados ancestrais dessas substâncias na filogenia da subtribo indicam possíveis sinapomorfias químicas. No decorrer das análises morfoanatômicas foram observadas duas importantes novidades em Lychnophorinae. A primeira relata a ocorrência de fitomelanina em caules aéreos e folhas de Lychnophorinae. As reconstruções dos estados ancestrais dos caracteres sugerem que o ancestral comum mais recente das Lychnophorinae já apresentava fitomelanina no caule espessado. A segunda novidade morfoanatômica diz respeito a um modo não usual de retenção de água sobre ápices caulinares, onde uma substância hialina é resultado da degradação parietal de tricomas não glandulares, tendo natureza hidrofílica. Essa substância possivelmente apresenta a função de proteger os órgãos jovens contra dessecação. Durante as investigações anatômicas de caules e folhas de Lychnophorinae, nós observamos características peculiares, frequentemente relatadas como xéricas, e procuramos entender se tais características mostravam algum padrão que agrupava as espécies. Nós realizamos análises multivariadas levando em consideração tais características. Os resultados indicaram quatro grupos funcionais em Lychnophorinae e sinalizaram que as espécies agrupadas, ocupavam os mesmos nichos, os quais refletiam condições específicas nos diferentes ambientes. Finalmente, após a conclusão das análises anatômicas, as características foram mapeadas na filogenia de Lychnophorinae e geraram importantes informações, como a identificação de oito possíveis sinapomorfias. As informações geradas nesse estudo sugerem que a evolução da diversidade morfológica e anatômica em Lychnophorinae pode ter sido direcionada por pressões adaptativas, derivadas de fatores ecofisiológicos dos ambientes restritos em que habitam a maioria das espécies / Abstract: Asteraceae is one of the largest flowering plants families, with 24,000-30,000 species, representing approximately 10% of the world's flora. Currently, 21 subtribes are recognized in Vernonieae. Among them, Lychnophorinae is nearly endemic to Brazil, occurring in campos rupestres areas and savannas of Central Plateau. The subtribe has 18 genera and 104 species distributed among the various habits: perennial herbs, shrubs, subshrubs, treelets, trees and caulirosuletum. Recent phylogenetic studies show that the subtribe is monophyletic. The most "basal" and more "derived" strains are well supported, however, relationships between the remaining clades persist partially unresolved. Therefore, in this study, species of the subtribe are investigated in relation to morphoanatomy and chemistry of the main metabolites of aerial stems and leaves, searching for new characters that might be useful for a better understanding of the group evolution, including possible synapomorphies. To this aim, key species were chosen in Lychnophorinae, representing the principal lineages. For structural and histochemical analyzes, samples of leaves and stems were processed according to usual plant anatomy techniques. For phytochemical analysis, the extracts were analyzed by liquid chromatography and mass spectrometry. Reconstructions of ancestral states of the characters was performed using parsimony in a phylogeny based on morphological and molecular data. In Lychnophorinae, the major sites of synthesis of secondary metabolites are: glandular trichomes, epidermal idioblasts and parenchyma of the leaves and stems. The phytochemical analysis revealed the presence of flavonoids, derivatives of trans-cinnamic acid, sesquiterpene lactones and polyacetylenes. The reconstruction of ancestral states of these substances in the phylogeny of the subtribe indicate possible chemical synapomorphies. During the morphoanatomic analyzes two important events in Lychnophorinae were observed. The first reports the occurrence of phytomelanin aerial stems and leaves of Lychnophorinae. Reconstructions of ancestral states of the characters suggest that the most recent common ancestral of Lychnophorinae presented phytomelanin in thickened stem. The second morphoanatomical novelty relates to a method of unusual water retention of apexes, where a substance hyaline is a result of parietal degradation of non glandular trichomes, and it has hydrophilic nature. This substance probably has the function to protect young organs from desiccation. During the anatomical investigations of stems and leaves of Lychnophorinae, we observed frequently reported as xeric peculiar characteristics, and seek to understand whether these characteristics showed some pattern that grouped species. We performed multivariate analysis taking into account the peculiar characteristics. The results indicated four functional groups Lychnophorinae and signaled that grouped species occupy the same niche, which reflect specific conditions in different environments. Finally, after completing the anatomical analyzes, the features were mapped on the phylogeny of Lychnophorinae and generated important information such as the identification of eight possible synapomorphies. The information generated in this study suggest that the evolution of morphological and anatomical diversity in Lychnophorinae may have been driven by adaptive pressures, derived from ecophysiological factors of restricted environments in which most species inhabit / Doutorado / Biologia Vegetal / Doutora em Biologia Vegetal

Pancreas is known to be an organ producing a variety of exocrine and endocrine substances, where also insulin belongs. This hormone is produced in the body almost solely by specialized β-cells of the Langerhans islets and is stored here in secretory granules. As the β-cells contain large number of these vesicles, an organism can quickly respond to the glucose stimulation. Completely processed insulin is formed in the secretory granules probably as a hexamer, where six insulin molecules are coordinated along two zinc bivalent cations. Appropriate β-cell response to higher glucose level and following insulin secretion is one of the key processes that regulate metabolism in the body. In order to study insulin production, its effects or secretion, permanent pancreatic cell lines are often used as biological models, out of primary cells from islets of Langerhans. This diploma thesis is focused on two permanent cell lines INS-1E and BRIN-BD11. We searched for the ability of the cells to produce insulin, if the hormone is fully processed, as well as zinc content, which could have a great influence on insulin's processing. Using different methods we compared these two cell lines with cells from the Langerhans islets. We succeeded in isolation of secretory granules from all three cell types and we plan to...

Atrial natriuretic factor (ANF) is a cardiac hormone that helps maintain cardiovascular homeostasis. ANF secretion is linked to the constitutive, regulated and constitutive-like pathways. Presence of a monensin-sensitive pool that may follow constitutive-like secretion has previously been identified in an isolated atrial perfusion study. The intracellular ANF storage pools linked to each secretory pathway have not been identified. In this study, ANF storage and secretion was characterized in HL-1 atrial cardiomyocytes through the use of pharmacological agents, density gradient and RP- HPLC analysis. Treatment of HL-1 cells with monensin followed by cell fractionation was unsuccessful in identifying the monensin-sensitive pool. RP-HPLC analysis identified presence of low molecular weight ANF in low density gradient fractions that were defined by the presence of organelle markers of Golgi, early endosome, clathrin and corin. Since the monensin-sensitive pool was thought to be of a constitutive-like nature, targeting this pathway with pharmacological inhibitors of clathrin coat vesicle (CCV) formation and endosomal trafficking failed to prevent stimuli-independent secretion. Based on an inability to prevent ANF secretion by targeting the constitutive-like pathway and the presence of low molecular weight ANF in low density gradient fractions, stimuli- independent ANF secretion seems to be through a constitutive pathway.