Submitted by Edineia Teixeira (edineia.teixeira@unioeste.br) on 2018-03-05T18:00:17Z No. of bitstreams: 2 Evelin _Muller2017.pdf: 2060146 bytes, checksum: 1bcf8608f011e87afa4959a76f91fa80 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-05T18:00:17Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Evelin _Muller2017.pdf: 2060146 bytes, checksum: 1bcf8608f011e87afa4959a76f91fa80 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-02-09 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The growing demand for seeds and seedlings of native species, due to the restoration of degraded areas, leads to the need for studies on the storage of seeds for future use. The objective of this study was to evaluate the anatomical aspects, physiological quality and antioxidant enzymatic activity of Peltophorum dubium seeds during storage, and later submitted to methods of physical dormancy (T1 - without scarification, T2 - mechanical scarification and T3 - chemical scarification with sulfuric acid for 10 minutes). The seeds were stored at 5 ° C for 12 months. At pre-established intervals, these were evaluated by water content, anatomical analysis of the tegument, electrical conductivity, percentage of germination, initial development of seedlings, antioxidant enzymatic activity and lipid peroxidation. The integument underwent anatomical changes throughout the storage. The electrical conductivity did not correspond to the physiological quality of the seeds. The percentage of germination for treatments during storage did not differ significantly, presenting a mean of 6.8% for T1, 95% for T2 and 94% for T3. The rate of germination increased after 180 days of storage when associated with treatments T2 and T3. Initial seedling development was stimulated in all treatments. There was an increase in the activity of the catalase enzyme at 60 days, the enzyme superoxide dismutase at 360 days and malondialdehyde at 60 days for all treatments, followed by a significant decrease at 300 and 360 days of storage. The storage of the Peltophorum dubium seed promoted anatomical modifications of the skin, maintained the physiological quality of the seeds, and after 180 days of storage, in association with the treatments, increased the rate ofgermination and stimulated the initial development of the seedlings. The antioxidant enzyme system proved to be efficient, due to the activity of the catalase enzyme, in order to review the oxidative damages, promoting the control of the deterioration process. / A crescente demanda por sementes e mudas de espécies nativas, por conta da restauração de áreas degradadas, trás a necessidade de estudos a cerca da armazenagem das sementes para utilização futura. O estudo objetivou avaliar os aspectos anatômicos, a qualidade fisiológica e a atividade enzimática antioxidante de sementes de Peltophorum dubium, durante o armazenamento, e posteriormente submetidas à ação de métodos para superação de dormência física (T1 - sem escarificação, T2 - escarificação mecânica e T3 - escarificação química com ácido sulfúrico por 10 minutos). As sementes foram armazenadas a 5ºC por 12 meses. Em intervalos pré-estabelecidos, estas foram avaliadas pelo teor de água, análise anatômica do tegumento, condutividade elétrica, porcentagem de germinação, desenvolvimento inicial das plântulas, atividade enzimática antioxidante e peroxidação lipídica. O tegumento sofreu alterações anatômicas ao longo do armazenamento. A condutividade elétrica não foi correspondente à qualidade fisiológica das sementes. A porcentagem de germinação para os tratamentos durante armazenamento não diferiu significativamente, apresentando média de 6,8% para T1, 95% para T2 e 94% para T3. O índice de velocidade de germinação aumentou após 180 dias de armazenamento quando associado aos tratamentos T2 e T3. O desenvolvimento inicial das plântulas foi estimulado em todos os tratamentos. Houve aumento da atividade da enzima catalase aos 60 dias, da enzima superóxido dismutase aos 360 dias e de malondialdeído aos 60 dias para todos os tratamentos, seguido da diminuição significativa aos 300 e 360 dias de armazenamento. O armazenamento das sementes de Peltophorum dubium promoveu modificações anatômicas tegumentares, manteve a qualidade fisiológica das sementes, e a partir de 180 dias de armazenamento, em associação dos tratamentos, aumentou o índice de velocidade da germinação e estimulou o desenvolvimento inicial das plântulas. O sistema enzimático antioxidante se demonstrou eficiente, por conta da atividade da enzima catalase, a fim de rever os danos oxidativos, promovendo o controle do processo de deterioração.

Made available in DSpace on 2017-07-10T19:23:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vanessa _Taques Batista.pdf: 1631976 bytes, checksum: 3a24db303da25827a7f7b853df1cdc7b (MD5) Previous issue date: 2014-07-22 / The physiological quality of seeds is necessary for the success of rural activity condition. The soybean crop is the main crop sown in Brazil, which is one of the largest producers and exporters of this product. Despite the success of soybean in Brazil, it is still possible to observe, in rural properties in Cascavel, state of Paraná, the use of saved soybean seeds (named in this work as seeds for own consumption), grains that farmers keep with them for the next year sowing. In this attempt to reduce the cost process, the producer makes the treatment of seeds for own consumption with pesticides on his own farm, with the aid of an instrument called metal drum. This is meant to shelter the seeds and pesticides and, with a mechanical circular motion, distribute the defensives over the seeds. The objective of this study was evaluating the physiological quality of soybean seeds for own consumption under treatment in metal drums through germination, vigor tests and identification of mechanical damage. The experimental design was completely randomized, factorial 2 X 3 with three cultivars and two treatments: one with and another without treatment in drums. Means were compared statistically by Tukey test at 5% of probability. In the germination test, the N5909 and Apollo cultivars with treatment in drums had higher percentages of normal seedlings, but it was less than 80%. For vigor tests, treatments in drums exhibited higher percentage of abnormal and dead seedlings, indicating that, under stress conditions, damage to the seeds treated in metal drums have influence on the physiological quality of seeds. In the tetrazolium test for identifying damages, all three treated cultivars had mechanical damage. Thus, the seed for own consumption treated in drums showed low vigor and presence of mechanical damage. The seed for own consumption that has not been subjected to the treatment also showed low vigor, but also had lower mechanical damage when compared to the seeds who received treatment. / A qualidade fisiológica de sementes é condição necessária para o sucesso da atividade agrícola. A soja é a principal cultura semeada no Brasil, que é um dos maiores produtores mundiais e exportadores deste produto. Apesar do sucesso da cultura da soja no Brasil, ainda é possível observar, nas propriedades rurais do município de Cascavel PR, o uso de sementes de soja salvas (denominadas neste trabalho como sementes para consumo próprio), ou seja, grãos que os produtores rurais guardam para fazer a semeadura no próximo ano. Neste processo de tentativa de redução de custos, o produtor faz o tratamento das sementes de consumo próprio com defensivos na própria propriedade rural, com auxílio de um instrumento denominado tambor metálico, cuja função é abrigar as sementes e os defensivos e, em um movimento mecânico circular, distribuir os defensivos sobre as sementes. O objetivo deste trabalho foi avaliar a qualidade fisiológica de sementes para consumo próprio de soja, submetidas ao tratamento em tambores metálicos, por meio dos testes de germinação, testes de vigor e identificação de danos mecânicos nos grãos. O delineamento utilizado foi o inteiramente casualizado, em esquema fatorial 3 X 2, com três cultivares e dois tratamentos: com e sem tratamento em tambores. As médias foram comparadas estatisticamente pelo teste de Tukey, a 5% de probabilidade. No teste de germinação, os cultivares N5909 e Apollo, com tratamento em tambores, apresentaram maior porcentagem de plântulas normais, porém, inferior a 80%. Para os testes de vigor, os tratamentos em tambores apresentaram maiores médias de plântulas anormais e mortas, indicando que, em condição de estresse, os danos provocados nas sementes tratadas em tambores metálicos influenciam em sua qualidade fisiológica. No teste de tetrazólio para a identificação de danos, as três cultivares tratadas apresentaram danos mecânicos. Desta forma, a semente para consumo próprio tratada em tambor apresentou baixo vigor e presença de danos mecânicos. A semente para consumo próprio que não foi submetida ao tratamento também apresentou baixo vigor, porém apresentaram danos mecânicos

O presente trabalho teve como objetivos verificar os efeitos da radiação gama em grãos de milho contaminados artificialmente com Aspergillus flavus Link produtor de aflatoxinas; demonstrar a aplicação da técnica da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) no diagnóstico de A. flavus, bem como verificar o efeito da radiação no perfil das bandas de DNA. Vinte amostras de grãos de milho com 200 g cada foram irradiadas individualmente com 20 kGy, para eliminar a contaminação microbiana. Em seguida, as amostras foram inoculadas com A. flavus toxigênico (1 x 106 esporos / ml), incubadas por 15 dias a 25 °C em ambiente com umidade relativa ao redor de 97,5% e irradiadas com 0; 2; 5 e 10 kGy. As amostras, 5 para cada dose de irradiação, foram analisadas individualmente quanto ao número de células fúngicas, atividade de água, teste de viabilidade (diacetato de fluoresceína e brometo de etídio), PCR e detecção de aflatoxinas (AFB). Os resultados demonstraram que as doses utilizadas foram efetivas na redução do número de Unidades Formadoras de Colônias (UFC/g), principalmente as doses de 5 e 10 kGy. Em adição, o teste de viabilidade mostrou uma diminuição de células viáveis com o aumento das doses de irradiação. A redução de AFB1 e AFB2 foi mais eficiente com o emprego de 2 kGy, comparativamente à dose de 5 kGy, enquanto a dose de 10 kGy degradou totalmente as aflatoxinas. Além disso, observou-se que AFB2 apresentou-se mais radiosensível. O emprego da técnica de PCR revelou a presença de bandas de DNA em todas as amostras. / The aim of this present study was to verify the effects of gamma radiation on the growth of Aspergillus flavus Link aflatoxins producer; to demonstrate the application of Polymerase Chain Reaction (PCR) technique in the diagnostic of A. Flavus, as well to verify the effect of radiation in the profile of DNA bands. Twenty samples of grains maize with 200 g each were individually irradiated with 20 kGy, to eliminate the microbial contamination. In following, the samples were inoculated with an toxigenic A. flavus (1x106 spores/ml), incubated for 15 days at 25 °C with a relative humidity of around 97,5% and irradiated with 0; 2; 5 and 10 kGy. The samples, 5 to each dose of irradiation, were individually analyzed for the number of fungal cells, water activity, viability test (fluorescein diacetate and ethidium bromide), PCR and aflatoxins (AFB) detection. The results showed that the doses used were effectives in reducing the number of Colony Forming Units (CFU/g) mainly the doses of 5 and 10 kGy. In addition, the viability test showed a decrease of viable cells with increase of irradiation doses. The reduction of AFB1 and AFB2, was more efficient with the use of 2 kGy in comparison with the dose of 5 kGy, while the dose of 10 kGy, degraded the aflatoxins. Thereby, it was observed that AFB2 showed to be more radiosensitive. The use of PCR technique showed the presence of DNA bands, in all samples

A literatura específica destaca a dormência das sementes como fator dificultador do estabelecimento das pastagens de gramíneas forrageiras tropicais. A imersão das sementes em ácido sulfúrico (H2SO4), apesar de funcionalmente admitida como eficiente para promover a redução da dormência em sementes de braquiária, apresenta inconveniências relacionadas à segurança do trabalhador envolvido na aplicação e, adicionalmente, à preservação do meio ambiente com o descarte dos resíduos provenientes da operação. Dessa maneira, objetivando identificar alternativas para a superação da dormência, o presente estudo realizou comparações entre os efeitos fisiológicos de tratamentos térmicos (55, 65, 75 e 85 o C/5, 10 e 15 h) e químico (imersão em H2SO4/15 minutos) em sementes de Brachiaria dictyoneura cv. Llanero (Brachiaria humidicola cv. Llanero, segundo Renvoize et al., 1996). Para tanto, as sementes foram qualitativamente avaliadas (teor de água, germinação, tetrazólio, primeira contagem de germinação, emergência de plântulas, comprimento da parte aérea das plântulas e índice de velocidade de emergência) em duas épocas experimentais (início e final do armazenamento de 6 meses). Os usos do calor e do ácido sulfúrico constituem-se em alternativas para a redução da dormência das sementes e conseqüente favorecimento do desempenho fisiológico. Contudo, particularmente em relação ao calor, a deterioração pode ser acelerada durante o armazenamento. / Seed dormancy is emphasized in the literature as a problem for the establishment of tropical pasture grasses. Immersion of seeds in sulfuric acid (H2SO4) has been widely used and is effective in breaking dormancy of Brachiaria seeds, although this treatment raises inconveniences relating to the operator safety during application. Moreover, refusal of residues from this chemical treatment may become harmful to the environment. This essay aims to evaluate alternative seed treatments for overcoming dormancy, comparing physiological effects from heating treatments (55, 65, 75 and 85 o C, for 5, 10 and 15 hour) and chemical scarification (immersion in H2SO4 for 15 minutes) in seeds of Brachiaria dyctioneura cv. Llanero (Brachiaria humidicola cv. Llanero, according to Renvoize et al., 1996). Therefore, seeds were evaluated for their quality attributes (water content, germination, tetrazolium, first count of germination, seedling emergence, shoot length of seedlings, and emergence speed index), twice during the experiment (in the beginning and at the end of a six-month storage). Heating and sulfuric acid are alternative treatments for overcoming seed dormancy, consequently favoring physiological performance. However, particularly for the heating treatment, seed deterioration may be accelerated during storage.

Em áreas onde o herbicida glyphosate é utilizado freqüentemente, populações da planta daninha trapoeraba (Commelina benghalensis L.) têm sido selecionadas, devido à tolerância da espécie à ação deste herbicida. Neste sentido, há necessidade de utilização de alternativas de manejo, as quais, por sua vez, são dependentes de conhecimentos profundos sobre a biologia da espécie; e também do controle químico eficiente em condições de pós-emergência, cuja eficácia depende, sobretudo, do estádio de desenvolvimento da planta daninha no momento da aplicação. Desta forma, este trabalho foi desenvolvido com o objetivo de avaliar: a germinação e a emergência das plântulas de sementes aéreas pequenas de trapoeraba (Commelina benghalensis L.) quando submetidas a diferentes temperaturas, condições de luz, superação de dormência e profundidade de semeadura; a competitividade com a cultura da soja; e avaliar a resposta biológica da C. benghalensis e da B. plantaginea a aplicações de diferentes doses do herbicida glyphosate em seis estádios fenológicos, ajustando-as aos modelos tradicionais e a funções de duas variáveis. Com relação à germinação, avaliouse o efeito da luz, temperatura, escarificação química e profundidade de semeadura no substrato. A temperatura ótima para germinação da trapoeraba foi de 25°C. Não houve efeito da luz na germinação das sementes. Não houve interferência positiva na germinação por conseqüência do tratamento das sementes com ácido sulfúrico, em diferentes períodos de exposição, indicando que o lote de sementes de trapoeraba testado não possuía impermeabilidade do tegumento à água. A emergência das plântulas de trapoeraba é influenciada negativamente e de forma linear, pela profundidade de semeadura dos propágulos no substrato. Não houve emergência das plântulas quando as sementes foram depositadas a 80 mm de profundidade. O substrato areia favorece a emergência das plântulas. Com relação à competitividade, a habilidade competitiva da trapoeraba foi semelhante à das plantas de soja, com evidências que a competição intraespecífica teve maior importância para as espécies que a competição interespecífica. Com relação ao controle químico com glyphosate, observou-se que o desenvolvimento das plantas de trapoeraba comprometeu o controle, ou seja, melhores controles foram obtidos com a aplicação de glyphosate sobre plantas jovens. Quando em análise conjunta, a trapoeraba foi mais tolerante ao herbicida que o capim-marmelada. Houve ajuste dos dados a modelos tridimensionais, correlacionando estádio fenológico, dose e controle, contudo novas estimativas devem ser realizadas, sobretudo com a inclusão de doses mais elevadas de glyphosate / In areas where the herbicide glyphosate is used frequently, populations of the weed Bengal dayflower (Commelina benghalensis) have been selected, due to the species tolerance to the action of that herbicide. This way, the use of alternative management is necessary, which are dependent upon deep knowledge on species biology; as well as, the efficient chemical control in post emergence conditions, which efficacy depends on the growth development stage of the weed at the moment of herbicide application. Therefore, this work was carried out with the objective of evaluating: the germination and emergency of small aerial seeds of Bengal dayflower (Commelina benghalensis L.) when exposed to different temperatures, light conditions, dormancy overcoming and seeding depth; the competitive ability with the soybean crop; to evaluate the biological rates of the C. benghalensis and the B. plantaginea the applications of different rates of the herbicide glyphosate in six phenologic stages, adjusting them the traditional models and the functions of two variable. Related to germination, light, temperature, chemical scarification and depth of seeding effects were evaluated. The optimal temperature for Bengal dayflower germination was 25°C. Light effects were not observed on seed germination. Positive consequences of seed treatment with sulfuric acid were not identified, considering different periods of exposition; that indicates that the portion of Bengal dayflower seeds tested did not have tegument water impermeability. Seedling emergence is negative and linearly influenced by seeding depth in the substrate. Seedling emergence was not figured out when seeds were 80 mm depth placed. Sand substrate favored seedling emergence. Related to competitiveness, Bengal dayflower competitive ability revealed similar to soybean plants, with evidences that intraspecific competition was more important for species than interespecific competition. Studying chemical control with glyphosate, it was observed that the development of Bengal dayflower plants compromised the control, i.e., better results were obtained with glyphosate applications on young plants. When in joint analysis, Bengal dayflower was more tolerant than alexandergrass to the herbicide. Data were adjusted to tridimensional models, correlating phenologic stage, rate and control, although new estimative must be achieved, mainly including higher doses of glyphosate.

O milho (Zea mays) é um cereal amplamente cultivado no Brasil e no mundo. Sua produtividade pode ser afetada por diversos fatores incluindo a colonização fúngica. Em Fitopatologia, grãos afetados por fungos são denominados grãos ardidos e os gêneros mais encontrados em milho são Stenocarpella e Fusarium. Espécies de Fusarium podem causar podridões nas espigas e também podem produzir fumonisinas, toxina esta tóxica para animais e humanos e associadas ao desenvolvimento de diversas doenças. O presente trabalho teve como objetivo analisar a incidência de Fusarium ssp. com potencial toxigênico em amostras de grãos ardidos através da identificação da presença do gene fum5, responsável pela produção de fumonisinas pelo fungo, bem como quantificar os níveis de fumonisinas encontrados nessas amostras e comparação com os resultados obtidos de grãos assintomáticos. Um total de 100 amostras dos anos de 2006 e 2007 provenientes das principais regiões produtoras do Brasil foram submetidas à três análises. A primeira avaliou a incidência de Fusarium spp. nos grãos através do método do papel de filtro com congelamento e em 100% das amostras foi encontrado o fungo em níveis que variaram de 34 a 91%. A segunda análise utilizou a PCR para confirmação do gênero, identificação de espécies (F. verticillioides, F. proliferatum e F. subglutinans) e identificação da presença do gene fum5. A PCR confirmou 93% dos isolados como pertencentes ao gênero Fusarium. Os isolados negativos passaram por análise morfológica e todos foram confirmados. As PCRs para espécies identificaram 82% dos isolados como F. verticillioides, 3% como F. subglutinans e nenhum como F. proliferatum. A PCR para potencial toxigênico foi positiva para 81% dos isolados. A terceira análise consistiu na quantificação de fumonisinas (B1, B2 e B3 na proporção 5:3:1) através do método de ELISA e os níveis variaram de 4,4 a mais de 90 µg/g. Grãos assintomáticos da segunda safra de 2007 foram analisados separadamente para comparação. Em 100% das amostras houve incidência de Fusarium spp, variando de 74 a 87%. A PCR para confirmação do gênero foi positiva para 87% dos isolados e os demais passaram por análise morfológica e então confirmados. As PCRs para identificação de espécies mostrou 60% dos isolados como sendo F. verticillioides, 3% como F. subglutinans e nenhum como F. proliferatum. A maior concentração de fumonisinas nos grãos assintomáticos foi de 2,1 µg/g e em 53% das amostras não foram detectadas fumonisinas. Os resultados mostraram que há uma alta incidência de Fusarium spp. em grãos ardidos e assintomáticos. Grãos ardidos e assintomáticos têm Fusarium spp. com potencial toxigênico mas os níveis de fumonisinas encontrados nos grãos assintomáticos foram muito baixos em comparação com os encontrados nos grãos ardidos mostrando que, em condições adversas, esse fungo deixa de ser endofítico e passa a ser patogênico, podendo causar doenças na planta e produzir toxinas. Pelo fato das fumonisinas estarem concentradas nos grãos ardidos, a redução dessas toxinas da dieta deve ser baseada na eliminação dos mesmos através do controle do beneficiamento. / Maize is a cereal widely cultivated in Brazil and worldwide. Its productivity can be affected by numerous factors including fungal colonization. In pathological terms, affected grains by fungi are denominated rot grains and the two most prevalent genera found in maize are Stenocarpella and Fusarium. Species of Fusarium can cause rotting in the stalks and also produce fumonisins, which are toxic both for animals and humans since their occurrence is associated to many diseases. The present work aimed to analyse the incidence of Fusarium ssp. with toxigenic potential in rot grains samples through the identification of the presence of the gene fum5, responsible for the production of fumonisins, as well as to quantify the levels of fumonisins found in these samples and compare with the results obtained in asymptomatic grains. A total of 100 samples from the 2006 and 2007 harvests were collected from the main producing regions of Brazil and were submitted to three analyses. The first evaluated the incidence of Fusarium ssp. in the grains through the method of filter paper and freezing, which revealed incidences that varied from 34 to 91%. The second analysis used specific primers and PCR to confirm the genus and species (F. verticillioides, F. proliferatum and F. subglutinans) and to detect the presence of the fum5 gene. The results indicated that 93% of the isolates belonged to the genus Fusarium. The PCR - negative isolates were confirmed as Fusarium after morphological analysis. Eigthy two percent of the isolates were classified as F. verticillioides, 3% as F. subglutinans and none as F. proliferatum using speciesspecific PCR. The fum5 gene was detected in eighty one percent of the isolates. The third analysis consisted in the quantification of the fumonisins (B1, B2 e B3 in the proportion of 5:3:1) through the ELISA method and the levels varied from 4,4 to more than 90 µg/g. Asymptomatic grains from the second cropping season of 2007 were analyzed separately for comparison purposes. The incidence of Fusarium spp. in these varied from 74 to 87%. The PCR for confirmation of the genus was positive for 87% of the isolates. The PCRs for species identification showed 60% of the isolated as being F. verticillioides, 3% as F. subglutinans and none as F. proliferatum. The greater concentration of fumonisins in the asymptomatic grains was of 2,1 µg/g and in 53% of the samples fumonisins were not detected. Rot and asymptomatic grains presented Fusarium spp. with toxigenic potential but the levels of fumonisins found in the asymptomatic grains were much lower compared with rot grains, showing that, in adverse conditions, this fungus changes from endophytic to pathogenic, being able to parasitize the plant and to produce toxins. The fact that fumonisins levels are much higher in rot grains, a simple measure to reduce the levels of these toxins in the animal diet would be to eliminate them during processing.

A produção de papel e celulose representa um importante componente do setor industrial brasileiro, com perspectivas a expandir-se nos próximos anos, sendo o Brasil o principal produtor de celulose a partir de eucalipto. A técnica de transformação genética pode contribuir significativamente para introduzir caracteres de interesse econômico que permitam: aumentar a produtividade da cultura, resistência a doenças e melhorar a qualidade da madeira. Os sistemas de transformação genética requerem um sistema de regeneração de plantasin vitro eficiente associado a um sistema de integração estável do transgene ao genoma das mesmas. Por este motivo o trabalho foi dividido em duas etapas. A primeira parte foi orientada para o desenvolvimento de um sistema de regeneração eficiente e reproduzível por organogênese indireta tanto para E. grandis como para o híbrido E. grandis x E. urophylla. Foram realizados experimentos para avaliar-se o efeito dos diferentes tipos de explantes, genótipos, concentrações de reguladores de crescimento e taxa regenerativa de diferentes clones. A regeneração de cotilédones e folhas de plântulas apresentou uma eficiência de 30 % e 25 respectivamente. Além destes sistemas, o protocolo de regeneração a partir de folhas de clones comerciais de E. grandis mostrou-se bastante eficiente. Na segunda parte do trabalho desenvolveu-se a metodologia de transformação genética de E. grandis e E. grandis x E. urophylla, via Agrobacterium tumefaciens. O efeito de diferentes tempos de pré-cultivo dos explantes, tempo de sonicação, influência dos meios de co-cultivo e dos agentes seletivos, foram avaliados. As sementes pré-cultivadas durante 2 e 15 dias apresentaram as maiores porcentagens de expressão da???? -glucuronidase (GUS) (21,7 e 37,4 %, respectivamente), quando sonicadas. As sementes pré-cultivadas por 2 dias apresentaram mais de 90 % das áreas transformadas localizadas nos cotilédones e no colo. Já as sementes pré-tratadas por 15 e 17 dias apresentaram 60 % das áreas de transformação localizadas no primeiro par de folhas. A condição mais adequada para a transformação de cotilédones foi a sonicação por 120 s, de sementes pré-cultivadas por 2 dias, sendo o melhor meio de co-cultivo o MS. Plantas transgênicas de E. grandis e E. grandis x E. urophylla foram obtidas, abrindo assim uma grande perspectiva na área de melhoramento do eucalipto, com a introdução das técnicas de transformação gênica. / The pulp and paper industry is an important sector of Brazilian industry, showing good perspectives of expansion, once Brazil is the main cellulose producer from Eucalyptus. Genetic transformation may contribute to increase productivity by the introduction of desirable traits, such as pest resistance and improvement of wood quality. However, the prerequisite for the success of the transformation strategy is the establishment of an efficient, in vitro, regeneration system. The recovery of transgenic plants is only possible from cells that respond to both processes: the integration of the transgene and also the plant regeneration. Hence, this work was divided in two phases. The first study was carried out to develop an efficient and reproducible regeneration system by indirect organogenesis of E. grandis and the hybrid E. grandis x E. urophylla. The experiments were organized to evaluate the effect of the different seedling explants, genotypes, hormonal concentration and regenerative rate of clonal material. The regeneration efficiency of cotyledons and leaves of seedling explants was around 30 % and 25 %, respectively. In addition, an efficient regeneration protocol of Eucalyptus grandis was developed which uses leaf explants from clonal plants. In the second study the procedure for genetic transformation of E. grandis and E. grandis X E. urophylla using Agrobacterium is described. Several experimental parameters were evaluated such as the length of precultivation, the sonication effect, the cocultivation media and the selective agents. Germinating seeds of 2 and 15 days had the highest percentage of ? -glucuronidase (GUS) expression (21.7% and 37.4%, respectively), when sonicated. Germinating seeds imbibed for 2 days showed over 90% of the blue sectors localized in cotyledons and in the intersection of the hypocotyls and roots, whereas, seedlings that had germinated for 15-17 days had an average of 60% of the transformed sectors localized in the first pair of leaves. The best condition for an efficient genetic transformation was 2-day precultivation, associated with 120-s sonication and MS media for cocultivation. Transgenic plants of E. grandis and E. grandis x E. urophylla were obtained by this method, opening an important perspective for the breeding of Eucalyptus through genetic transformation techniques.

Orientador: Sandra Maria Carmello Guerreiro / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-25T23:22:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Milani_JulianaForesti_D.pdf: 4831941 bytes, checksum: 1e831abd54a3b76f7aa5f9a4b31ca239 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: A morfologia externa e interna dos frutos e sementes de Passifloraceae Juss. ex Roussel é pouco conhecida ou até desconhecida para muitas espécies. Estudos morfoanatômicos de frutos e sementes têm grande importância já que os mesmos exibem pequena plasticidade fenotípica. Neste contexto, este trabalho teve como objetivo elucidar a ontogenia do fruto e da semente de quatro espécies de Passiflora L. subgênero Decaloba (DC.) Rchb. superseção Decaloba (DC.) J.M. Macdougal & Feulliet seção Xerogona (Raf.) Killip que apresentam frutos do tipo cápsula, condição incomum na família. Para tanto, o material vegetal foi coletado e processado segundo técnicas convencionais em microscopia de luz e eletrônica, além da aplicação de técnica específica (TUNEL) para detecção de morte celular programada no estádio de deiscência do fruto. Foram estabelecidos estádios de desenvolvimento para os frutos e as sementes: Estádio I: Ovário e óvulo; Estádio II - fruto e semente em início de desenvolvimento: frequentes divisões celulares; Estádio III - fruto e semente jovens: alongamento celular; Estádio IV - fruto e semente maduros: diferenciação celular e deiscência do fruto. Nos estádios II a IV do fruto, o epicarpo e o endocarpo são uniestratificados e as maiores modificações decorrentes do desenvolvimento do fruto ocorrem no mesocarpo. Ao longo do desenvolvimento aumentam os espaços intercelulares a partir do endocarpo em direção ao epicarpo. Não há a formação de uma linha de deiscência. Os espaços intercelulares ocorrem devido à morte celular programada formando lacunas que acabam por romper o pericarpo. Os testes histoquímicos indicaram a presença de idioblastos contendo compostos fenólicos e proteínas no tecido fundamental do ovário e no mesocarpo. As sementes das espécies estudadas são bitegumentadas. A testa é constituída de duas camadas: exotesta e endotesta. O tégmen é composto por três camadas: exotégmen, mesotégmen e endotégmen. No início do desenvolvimento da semente observou-se o arilo de origem funicular, formado por células parenquimáticas e idioblastos contendo compostos fenólicos e amido. O desenvolvimento dos tegumentos da semente se dá pelo alongamento diferencial das células do exotégmen e da endostesta. Esse processo resulta na ruminação do endosperma. Na semente madura o tegumento externo formará a sarcotesta. Neste estádio, o exotégmen constitui a camada mecânica formada por macroesclereídes em paliçada, representando a esclerotesta. As informações encontradas no presente estudo revelam que as características morfoanatômicas de fruto e semente são bastante conservadas e unificadoras na seção. Diante do exposto, destaca-se a importância de novos estudos abrangendo mais espécies e abordando a evolução de caracteres e a inclusão de outros novos para facilitar a elucidação das relações infragenéricas de Passiflora que tem sido ampliada graças à cooperação de estudos morfoanatômicos e genéticos / Abstract: External and internal morphology of Passifloraceae Juss. ex Roussel fruits and seeds is little known or even unknown for many species. Morphological and anatomical studies of fruits and seeds have great importance since they exhibit little phenotypic plasticity. In this context, this study aimed to elucidate the fruit and seed ontogeny of four species of Passiflora L. Decaloba (DC.) Rchb. subgenus Decaloba (DC.) J.M. Macdougal & Feulliet supersection Xerogona (Raf.) Killip section that present capsule type of fruit, unusual condition in the family. For this, the plant material were collected and processed according to conventional techniques for light and electron microscopy; specific technique (TUNEL) were also applied to detect programmed cell death in the stage of fruit dehiscence. Four developmental stages were established: Stage I: Ovary and ovule; Stage II - fruit and seed in early development: frequent cell divisions; Stage III - young fruit and young seed: cell elongation; Stage IV - mature fruit and mature seed: cell differentiation and fruit dehiscence. In the stages II to IV of the fruit, epicarp and endocarp are unistratified and major changes from the development of the fruit occurs on mesocarp. During the development, the intercellular spaces increase from the endocarp towards the epicarp. There is no line of dehiscence. The intercellular spaces occur due to programmed cell death forming gaps that breaks the pericarp. Histochemical test indicated the presence of phenolic compounds and idioblasts containing proteins in fundamental tissue of ovary and mesocarp. The seeds of all species were bitegmic. The testa consists of two layers: exotesta and endotesta. The tegmen is composed of three layers: exotegmen, mesotegmen and endotegmen. At the beginning of seed development, aryl of funicular origin, formed by parenchyma cells that may containing phenolic compounds and starch, was observed. The development of the integument of the seed occurs by differential cell elongation of exotegmen and endostesta. This process results in a ruminate endosperm. In the mature seed, the outer integument forms the sarcotesta. At this stage, the exotegmen is the mechanical layer formed by macrosclereids in palisade, representing esclerotesta. Information found in this study reveals that morphoanatomical characteristics of fruit and seed are quite conserved and unified in the section. Given that, we highlight the importance of further studies including more species and addressing the evolution of characters and adding new ones to facilitate the elucidation of infrageneric relationships in Passiflora which has been expanded due to the cooperation of morpho-anatomical and genetic studies / Doutorado / Biologia Vegetal / Doutora em Biologia Vegetal

Orientador: Wesley Rodrigues Silva / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-23T01:10:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ramos_DanielleChristineTenorioLeal_M.pdf: 3214029 bytes, checksum: 790a26e0b392095e69aa0feb27c74277 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: Os recursos necessários à regeneração florestal frequentemente estão esgotados em áreas degradadas, onde a dispersão e o estabelecimento de plantas são limitados. Árvores isoladas assumem uma função importante nesses ambientes por promoverem a concentração da chuva de sementes e um microssítio favorável à germinação e estabelecimento de regenerantes nativos. Em estudo realizado em um pasto abandonado no sul do estado de São Paulo, investigamos os efeitos de características estruturais e funcionais de árvores isoladas e de suas circunvizinhanças na chuva de sementes. Para isso, instalamos coletores de sementes sob 50 árvores isoladas de diferentes espécies e síndromes de dispersão em um pasto aberto. Coletamos sob as copas das árvores uma alta densidade de sementes de, no mínimo, 47 espécies, maior do que a escassa chuva de sementes coletada em pasto aberto. A maioria das espécies de sementes possuía origem externa à área de trabalho. Tais resultados indicam o uso das árvores isoladas pelos dispersores para movimentação na paisagem. Com uso de modelos de equações estruturais, observamos que dentre altura, tamanho de copa e síndrome de dispersão das árvores focais e densidade da vegetação e abundância de plantas zoocóricas na circunvizinhança, apenas a primeira e a última tiveram efeito positivo significativo sobre a riqueza de sementes. Assim, apesar de não observarmos um efeito forte da síndrome de dispersão das árvores focais, nossos resultados demonstram a importância da disponibilidade de frutos para a intensidade da chuva de sementes. A importância relativa das características estruturais e funcionais da vegetação sobre a chuva de sementes descrita neste trabalho pode contribuir para o aprimoramento do manejo de áreas degradadas e conservação de florestas tropicais / Abstract: Necessary resources for forest regeneration are usually depleted in disturbed sites and seed dispersal and seedling establishment are limited. Isolated trees play a fundamental role in those sites by attracting dispersers and concentrating seed rain in micro sites favorable to native species establishment. Here we report the effect of trees and the vegetation's structure and function at their surroundings on the zoochorous seed rain promoted by frugivores in an abandoned pasture in Southeastern Brazil. We installed seed traps beneath 50 isolated trees of different species and dispersal syndromes. In one year, we collected a high seed density of, at least, 47 species underneath the isolated trees, and a scarce seed rain in the open field. The majority of the seed species was allochthonous in the study site, what points for the use of trees as stepping-stones in the landscape by dispersers. Structural equation modelingresulted that trees' canopy size and dispersal syndrome, vegetation cover, and number of surrounding zoochorous trees did not affect seed rain. Only trees' height and number of surrounding zoochorous shrubs and herbs positively affected seed rain richness. Therefore, despite isolated trees' dispersal syndrome was not determinant for seed rain, we concluded that fruits availability is crucial in intensifying it. The relative importance of vegetation structural and functional characteristics on seed rain we described in this study can potentially contribute to improve disturbed sites management and forest conservation / Mestrado / Ecologia / Mestra em Ecologia

Submitted by Maria Beatriz Vieira (mbeatriz.vieira@gmail.com) on 2016-08-10T13:09:20Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dissertacao_gladimir_pinto_da_silva.pdf: 3958390 bytes, checksum: a9cff259c429d9c8124516ddc0c38b4c (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2016-08-10T13:21:03Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dissertacao_gladimir_pinto_da_silva.pdf: 3958390 bytes, checksum: a9cff259c429d9c8124516ddc0c38b4c (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2016-08-10T13:21:16Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dissertacao_gladimir_pinto_da_silva.pdf: 3958390 bytes, checksum: a9cff259c429d9c8124516ddc0c38b4c (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-10T13:21:30Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dissertacao_gladimir_pinto_da_silva.pdf: 3958390 bytes, checksum: a9cff259c429d9c8124516ddc0c38b4c (MD5) Previous issue date: 2014-09-17 / Sem bolsa / O presente trabalho foi realizado com o objetivo de testar a viabilidade técnica de secagem estacionária com ar desumidificado por refrigeração sem fonte adicional de calor posterior ao resfriamento, tendo como única forma de reaquecimento do ar a compressão adiabática no soprador de ar. Foram realizadas quatro repetições, utilizando-se arroz IRGA 426 reidratado a 29% de umidade, com quatro silos com secagem a ar refrigerado e quatro silos testemunhas com secagem a ar ambiente. Utilizou-se um sistema de aquisição de dados baseado em microcontrolador PIC 18F877A, com três sensores de temperatura, tipo LM35, em cada silo para registrar as temperaturas no fundo, meio e topo e dois sensores de umidade tipo HIH4000 para registrar as umidades relativas de entrada e saída do ar de secagem em cada secador. Um conjunto de termômetros de bulbo úmido e bulbo seco foi utilizado para verificar a temperatura e a umidade relativa do ambiente de trabalho e um multímetro marca Icel, modelo AD-9901T equipado com termopar inserido no coletor de saída do condicionador de ar para registrar a temperatura de saída no trocador de calor. Para acompanhamento da secagem foram realizadas amostras com período de duas horas e analisadas em um medidor de umidade capacitivo marca Dickey-John, modelo GAC 2100, que forneceu os valores de umidade e temperatura do produto. As amostras do produto foram retiradas nas mesmas alturas dos sensores de temperatura do sistema de aquisição de dados. As temperaturas e umidades relativas do ar de secagem foram registradas, desde a saída do condicionador de ar até o topo do secador. Os resultados permitiram concluir que é possível secar sementes e grãos em secadores estacionários com temperaturas abaixo de 20°C, utilizando-se ar desumidificado por refrigeração e o calor gerado na compressão adiabática do soprador como única fonte de calor para reaquecimento do ar de secagem. / The present study was aimed testing the technical feasibility of stationary drying with air dehumidified by cooling without additional heat source after cooling, and heat of the air was just by the adiabatic compression in the air blower. Four replicates were performed, using rice IRGA426 rehydrated to 29% moisture, content with four silos with drying air cooling and four silos drying with ambient air. It was utilized an data acquisition system based on PIC18F877A microcontroller, with three temperature sensors, type LM35 in each silo to record the temperature at the bottom, middle and top and two humidity sensors type HIH4000 to record the humidity of inlet and outlet of the drying air in each silo. A set of thermometers wet bulb and dry bulb were used to check the temperature and the relative humidity of the working environment and a multimeter Icel brand, model AD-9901T equipped with thermocouple inserted into the output hopper air conditioner for record the temperature output in the heat exchanger. To follow the drying process, samples with two hours were performed and analyzed on a capacitive moisture meter Dickey-John, model GAC2100, which provided the values of humidity and temperature of the seeds sampled in the same height the sensors of acquisition system temperature. The results show that it is possible to dry seeds and grains with stationary dryer at temperatures below 20°C, using dehumidified air with cooling and the heat generated in the adiabatic compression of the blower as the sole heat source for heating the drying air.