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Papel dos receptores TLR2 e TLR4 na produção de citocinas em pacientes chagásicos crônicos / Role of TLR2 and TLR4 receptors in the production of cytokines in chronic Chagas disease patientsSilva, Laura Denise Mendes da [UNESP] 26 February 2016 (has links)
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DISSERTAÇÃO DEFESA VERDADEIRA 1.pdf: 2757941 bytes, checksum: a9f82a822862214aa32b687d969f2b0d (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br) on 2016-03-09T17:06:20Z (GMT) No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2016-02-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A doença de Chagas (DC), causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi (T. cruzi), é uma doença negligenciada e considerada um grave problema de saúde pública. A sua evolução no individuo infectado ocorre em duas fases distintas: a fase aguda que dura de 2 a 4 meses, caracterizada pela alta parasitemia, mas ausência de sinais e sintomas específicos, o que dificulta sua detecção, e a fase crônica na qual a maioria dos indivíduos é diagnosticada. Nessa fase, uma boa parte dos indivíduos apresenta a forma indeterminada ou assintomática da doença. No entanto, cerca de 30 a 40% dos indivíduos infectados desenvolvem a DC sintomática, que pode se apresentar na forma de doença cardíaca ou doença digestiva. Um dos desafios mais importantes no estudo da DC é a determinação dos mecanismos relacionados à resposta imune do hospedeiro que levam a essas diferentes apresentações clinicas. A resposta imune celular via liberação das citocinas pró-inflamatórias como IFN-y, TNF-α e IL-17 é considerada determinante na resistência do hospedeiro. No entanto, um fino controle da liberação dessas citocinas deve ocorrer para que a resposta não se intensifique ou não se perpetue e resulte em lesão tecidual, o que ocorre através da ativação de citocinas anti-inflamatórias como a IL-10 e o TGF-y. Esse controle de resposta seria responsável pelo não aparecimento de sintomas nos indivíduos com doença de Chagas assintomática. Os receptores de reconhecimento padrão (PRRs), particularmente os Toll-Like Receptors (TLRs) são extremamente importantes na definição do perfil de citocinas que será liberado em resposta a um microrganismo. Assim, a nossa hipótese foi de que pacientes com as formas sintomáticas e assintomáticas da doença liberam um padrão de citocinas mais inflamatório e anti-inflamatório respectivamente, devido ao fato de que os TLRs envolvidos na produção desses dois tipos de citocinas, com enfoque para o TLR2 e o TLR4, seriam diferentemente expressos ou ativados nesses dois grupos. Como esperado, detectamos que, células mononucleares de pacientes com a forma cardíaca liberam predominantemente IFN-y, TNF-α e IL-17 quando comparados com os demais grupos. Diferentemente, pacientes com a forma assintomática liberam níveis maiores de IL-10 e TGF-β. Detectamos ainda que o TLR2 e o TLR4 estão envolvidos tanto na produção de citocinas pró como anti-inflamatórias, detectadas respectivamente pelos pacientes sintomáticos e assintomáticos, o que nos permite concluir que a estimulação dos mesmos receptores pode levar a liberação de um padrão diferente de citocinas na dependência do grupo de pacientes testados. Os prováveis mecanismos que levam a essas diferenças são discutidos. / Chagas disease (CD), caused by the protozoan Trypanosoma cruzi (T. cruzi), is a neglected disease and considered a serious problem of public health. Its evolution in a infected host occurs in two distinct stages: the acute stage which lasts 2 to 4 months and is characterized by high parasitemia, but no detection of specific signs and symptoms, which difficult its detection, and the chronic stage in which most individuals are diagnosed. At this second stage, most individuals present the indeterminate or asymptomatic chronic disease. However, about 30 to 40% of them become symptomatic and present the cardiac or digestive disease. One of the most important challenges in the CD study is to determine the mechanisms related to the host immune response that lead to these different clinical manifestations. The cellular immune response characterized by the release of pró-inflammatory cytokines such as IFN-y, TNF-α and IL-17 is considered crucial in host resistance. However, it is suggested that a fine control of this response must occur in order to avoid a perpetuated inflammatory process which results in tissue injury. This control was found to be responsible by the absence of clinical symptoms in individuals with the indeterminate chronic form and depends on activation of anti-inflammatory cytokines such as IL-10 and TGF-β. The pattern recognition receptors (PRRs), particularly the Toll-Like Receptors (TLRs) are extremely important in defining the cytokine profile that will be released in response to a microorganism. Therefore, our hypothesis was that patients with symptomatic and asymptomatic disease release different profile of cytokines, i.e pró-inflammatory and anti-inflammatory respectively, because TLRs involved in the production of each profile of cytokines, would be differently expressed or activated in these two groups. As expected, we found that mononuclear cells of patients with the cardiac form release predominantly IFN-y, TNF-α and IL-17 when compared with other groups . In contrast, patients with asymptomatic disease release predominantly IL-10 and TGF-β. Of note, TLR2 and TLR4 were involved in the production of both, inflammatory and anti-inflammatory cytokines detected in symptomatic and asymptomatic patients, respectively. We conclude that stimulation of these receptors may lead to release of different profiles of cytokines in a dependency of the patients group that is being evaluated. Probable mechanisms involved in such differences are discussed.
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Contribuição ao entendimento dos mecanismos de rotura prematura de membranas pré-termoMartins, Ana Carolina Pereira [UNESP] 15 April 2013 (has links) (PDF)
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martins_acp_dr_botfm_parcial.pdf: 553327 bytes, checksum: c2410e255893ef752e174e125ce2c711 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-04-28T18:31:58Z: martins_acp_dr_botfm_parcial.pdf,Bitstream added on 2015-04-28T18:32:37Z : No. of bitstreams: 1
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Evidência da presença do sistema AGR, expressão de toxinas e resistência aos antimicrobianos em estafilococos coagulase-negativa isolados de hemoculturasPereira, Valéria Cataneli [UNESP] 28 February 2014 (has links) (PDF)
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000829511.pdf: 881174 bytes, checksum: 5862a5f3a939680b81d2d94e011d36fc (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Os estafilococos coagulase-negativos (ECN) são integrantes da microbiota normal da pele humana e os microrganismos mais frequentemente isolados de materiais clínicos. No ambiente hospitalar são a maior causa de bacteremias, na maioria dos casos em pacientes mantidos em unidades de tratamento intensivo. A patogenia das infecções causadas por estas bactérias é complexa e multifatorial, sendo vários os fatores de virulência envolvidos nas infecções. O biofilme é o principal fator de virulência dos ECN, conferindo proteção contra o sistema imune do hospedeiro e a ação dos antimicrobianos. As toxinas estafilocócicas denominadas superantígenos são classificadas antigenicamente em toxina 1 da síndrome do choque tóxico (TSST-1) e em enterotoxinas. Desencadeiam uma série de efeitos tóxicos, pois funcionam como potentes toxinas gastrointestinais e estimulam de forma inespecífica a proliferação de células T. Os sistemas regulatórios estafilocócicos, tais como o sistema agr, podem afetar a produção das toxinas e do biofilme agindo como indutores ou repressores de genes específicos para a produção de fatores de virulência. Além dos fatores de virulência, o aumento da resistência antimicrobiana nos últimos anos tem fundamental significância nas infecções hospitalares. As amostras resistentes à oxacilina deixam poucas alternativas para o tratamento das infecções causadas por estes patógenos. Uma das drogas de escolha tem sido a vancomicina, porém já são relatados casos de susceptibilidade reduzida e de resistência a esta. Assim, este estudo objetivou caracterizar as espécies de ECN provenientes de hemoculturas de pacientes do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Botucatu quanto à detecção e expressão dos fatores de virulência, ao sistema agr envolvido na regulação da virulência e à susceptibilidade aos antimicrobianos / Coagulase–negative staphylococci (CNS) are normal resident microbes of human skin, often isolated from clinical specimens. They are the major cause of bacteremia in inpatients, especially intensive care patients. Pathogenesis of infection caused by these organisms is complex and multifactorial, with several virulence factors involved in infection processes. Biofilm is key for CNS virulence, since it provides protection against the host’s immune system and the action of antimicrobial agents. Staphylococcal toxins known as superantigens are antigenically classified as toxic shock syndrome toxin 1 (TSST-1) and enterotoxins. They trigger a chain of toxic effects by acting as potent gastrointestinal toxins and nonspecifically stimulating T cell proliferation. Staphylococcal regulatory systems, such as agr, may affect toxin and biofilm production through induction or repression of genes coding for virulence factor production specifically. In addition to virulence factors, increasing resistance rates to antimicrobial agents is also highly significant in nosocomial infections. Oxacillin–resistant strains leave few treatment alternatives for infection caused by these pathogens. Vancomycin has shown to be one drug of choice, although decreased susceptibility, as well as resistance, to vancomycin have been reported lately. Therefore, the aim of this study has been to categorize CNS species in blood culture specimens from inpatients at the UNESP Hospital das Clínicas in Botucatu, Brazil, as per detection and expression of virulence factors, agr system involved in virulence regulation, and susceptibility to antimicrobial agents / CNPq: 470649/2011-9 / FAPESP: 2011/23746-2
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Uso de saponina de quilaia (Quillaja saponaria Molina) em juvenis de pacuFernandes, Rosangela do Nascimento [UNESP] 25 February 2014 (has links) (PDF)
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000777720.pdf: 6089521 bytes, checksum: 7ec147b3fdf8cac086aea6811f78830a (MD5) / A saponina de quilaia (SQ) está presente na casca de árvores chilenas e brasileiras da mesma família, Rosaceae e, de acordo com relatos, melhora o desempenho zootécnico e atua no sistema imune de aves, ratos, camarões e peixes. Assim sendo, este estudo objetivou avaliar os efeitos da inclusão de níveis crescentes de extrato purificado de SQ (0,0; 100,0; 200,0; 300,0; 400,0 mg kg-1) para juvenis de pacu. O estudo teve três etapas experimentais distintas, compostas por períodos de consumo da dieta por sete, 15 e 30 dias. Em cada etapa, foram utilizados 350 peixes, totalizando 1050 peixes. Esses foram distribuídos em 25 aquários (200L), num delineamento inteiramente casualizado. No segundo capítulo, os peixes foram anestesiados para a coleta de sangue e órgãos (fígado e intestino). Os parâmetros avaliados foram desempenho (ganho de peso, conversão alimentar e consumo de ração), sobrevivência, parâmetros fisiológicos e histológicos [glicose, cortisol, proteína total, colesterol, triglicerídeos, índice hepatossomático (IHS) e histologia de intestino]. Houve alteração no perfil de lipídios circulantes, com redução do IHS aos 30 dias e das concentrações séricas de triglicerídeos aos sete dias de consumo de SQ, respectivamente. Com 15 dias, foram observados sinais de inflamação no intestino do pacu. Não houve mortalidade durante o período de alimentação dos peixes. No terceiro capítulo, após o período de alimentação, cerca de 325 peixes foram inoculados com a bactéria Aeromonas hydrophila e transferidos para outro sistema experimental, sendo distribuídos em 25 aquários (160L), onde foram observados durante seis dias, quanto aos sinais clínicos da doença e ocorrência de mortalidade. Os peixes foram anestesiados para a coleta de sangue antes e após o desafio bacteriano. As análises fisiológicas foram de glicose, proteína total, albumina e globulina ... / The quillaja saponin (QS) is present in the bark of Chilean and Brazilian trees of the same family, Rosaceae and, it´s able to promote performance and the immune system of animals. Thus, this study evaluated the effect of consuming diets containing increasing levels of QS (0,0; 100,0; 200,0; 300,0; 400,0 mg kg-1) by pacu. Three distinct steps in different consumption diets periods compound by seven, 15, and 30 days. At each step, was used a total of 350 fish, totaling 1050 fishes. These fishes were distributed into 25 cages (200L), in a completely randomized design. In the second chapter, after the feeding period (seven, 15 and 30 days), fish were anesthetized to blood collect and organs for physiological, histological and performance evaluation. The parameters evaluated were the performance (weight gain, apparent feed conversion and feed intake), survival, physiological and histological parameters [hepatosomatic index (HSI), blood cortisol, glucose, cholesterol, triglycerides and intestine histology]. The addition of all levels of QS in the diets of juvenile pacu reduced the triglycerides levels at seven days and HSI at 30 days of feeding. At 15 days of feeding QS diets were observed signals intestinal inflammation in pacu. There was no mortality during the experimental period. In the third chapter, after the feeding period (seven, 15 and 30 days), about 325 fishes were inoculated with the Aeromonas hydrophila and transferred to another experimental system, divided into 25 cages (160L) and during six days were observed clinical signs of disease and occurrence of mortality. The fishes were anesthetized for blood collection before and after bacterial challenge. The physiological analyzes were glucose, total protein and albumin. The immunological variables measured were activity serum lysozyme, leukocytes respiratory activity (LRA), differential and leukocyte count and globulin and ...
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β Defensinas em membranas corioamnióticas de gestações complicadas por prematuridade: expressão gênica e imunolocalizaçãoNoda, Nathália Mayumi [UNESP] January 2013 (has links) (PDF)
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000750044.pdf: 1066568 bytes, checksum: b9c9827836a3a05f6103e4c726fd72d6 (MD5) / Eventos inflamatórios na interface mateno-fetal estão pronunciados em gestações complicadas por prematuridade e a corioamnionite é reconhecida como a principal causa de morbimortalidade perinatal. As membranas corioamnióticas desempenham papel fundamental na imunidade inata local e inibem o crescimento de micro-organismos, em parte, pela expressão de β defensinas humanas (HBDs). Essas moléculas são antimicrobianos naturais que apresentam atividade antibatcteriana, antifúngica e antiviral e são produzidas por células epiteliais. Quantificar a expressão gênica e avaliar a imunolocalização de HBD-1, HBD-2 e HBD-3 em membranas corioamnióticas de gestações complicadas por prematuridade. Trata-se de um estudo prospectivo e transversal. Fragmentos das membranas corioamnióticas foram coletadas de gestantes atendidas no Serviço de Obstetrícia do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Botucatu, UNESP, Botucatu, São Paulo, Brasil. O grupo estudo foi constituído por 25 membranas corioamnióticas de gestantes em Trabalho de Parto Prematuro na presença ou não de Rotura Prematura de Membranas Pré-Termo que tiveram parto prematuro como desfecho gestacional. Como grupo controle, 27 membranas corioamnióticas de gestações de termo em trabalho de parto foram analisadas. Fragmentos das membranas corioamnióticas foram fixadas em formalina a 10%, embebidas em parafina e seccionadas para análise da imunolocalização de HBD-1, HBD-2 e HBD-3 pela técnica de imunoistoquímica. Outros fragmentos das membranas corioamnióticas foram congelados em nitrogênio líquido e submetidos à extração do RNA total para posterior quantificação da expressão de RNAm de HBD-1, HBD-2 e HBD-3 empregando-se a técnica de PCR em tempo real utilizando o sistema TaqMan Gene Expression Assays (Applied Biosystems). Os resultados obtidos no estudo foram submetidos aos testes z e de Mann Whitney. O software empregado... / Inflammatory events can be pronounced in the maternal-fetal interface in pregnancies complicated by prematurity and chorioamnionitis is a major cause of perinatal morbidity and mortality. The chorioamniotic membranes play fundamental role in the local innate immunity and inhibit the microorganisms growth, partly by the expression of human β defensins (HBDs). These molecules are natural antimicrobials that present antibacterial, antifungal and antiviral activities and are produced by epithelial cells. To quantify the expression and to evaluate the immunolocalization of HBD-1, HBD-2 and HBD-3 in chorioamniotic membranes from pregnancies complicated by prematurity. This was a prospective controlled study. Fragments of chorioamniotic membranes were collected from pregnant women admitted at the Obstetrics Unit of the Clinical Hospital of the Botucatu Medical School, São Paulo State University, Botucatu, São Paulo, Brazil. The study group consisted of 25 chorioamniotic membranes samples from pregnant women with preterm labor, in the presence or not of Preterm Premature Rupture of Membranes (PPROM), who delivery prematurely. In the control group, 27 chorioamniotic membranes from pregnancies at term in the presence at labor were analysed. Samples of the chorioamniotic membranes were fixed in 10% formalin, embedded in paraffin and sectioned for immunolocalization of HBD-1, HBD-2 and HBD-3 by immunohistochemistry technique. Other chorioamniotic membranes samples were collected in liquid nitrogen and total RNA was extracted to quantify mRNA expression of HBD-1, HBD-2 and HBD-3 using real time quantitative PCR employing the TaqMan Gene Expression Assays (Applied Biosystems). Statistical analyses were performed using z and Mann Whitney tests in SigmaStat Software and the level of significance adopted was of 5%. In relation to demographic and obstetrics data no statistically significant difference concerning maternal ...
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Avaliação do crescimento e da atividade imune de tilápias alimentadas com dietas suplementadas com unha de gato (Uncaria tomentosa)Yunis, Jefferson Aguinaga [UNESP] 07 March 2013 (has links) (PDF)
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aguinaga_jy_me_jabo.pdf: 922561 bytes, checksum: 857d30077aaa1cd53504c609030be9b8 (MD5) / Neste estudo objetivou-se avaliar o efeito da unha de gato, Uncaria tomentosa, sobre a toxicidade em Hyphessobrycon eques e o efeito sobre o crescimento e a atividade imune em tilápias. Pela técnica da cromatografia líquida verificou-se a autenticidade da planta e quantificaram-se os principais componentes químicos. O extrato aquoso mostrou ser praticamente não tóxico para o H. eques, com CL50 de 18,16 mg/L. Na determinação do melhor tempo de suplementação pela análise do componente celular e dos parâmetros hematológicos na aerocistite em tilápias, verificou-se que o máximo do acúmulo celular ocorreu após três semanas. Para a análise do desempenho zootécnico e da resposta inflamatória aguda, tilápias foram alimentadas durante três semanas com dietas contendo: 0; 75; 150; 300 e 450 mg de extrato de unha de gato/kg da ração. Após o final do período experimental, os peixes foram desafiados com Streptococcus agalactiae inativado e as 6; 24 e 48 horas após o desafío foram coletadas as amostras. Às 6 horas observou-se incremento, dependente de dose, no número de leucócitos no sangue e às 24 horas incremento de leucócitos no local da inflamação. Além disso, os centros melanomacrófagos foram maiores em tamanho e número nos grupos tratados. Observou-se também aumento da expressão de Imunoglobulina M no baço após 24 horas do desafio nos grupos que receberam 300 e 450 mg/Kg. Não houve alterações histopatológicas em brânquias, intestino, baço e fígado. Verificou-se aumento no ganho de peso, que pode ter sido atribuído ao incremento do tamanho dos vilos intestinais. Finalmente, estes resultados são a primeira evidência do efeito da U. tomentosa sobre o ganho de peso e ativação do sistema imune inato e específico em tilápias. Os resultados histopatológicos sugerem que a planta pode... / This study aimed to evaluate the effect of the toxicity of U. tomentosa on H. eques and its effect on growth performance and innate immunity in tilapia. It was found, by the technique of chromatography, verified the authenticity of the plant and quantified the main chemical components. The aqueous extract was nontoxic to matogrosso, with LC50;48h of 18,16 mg/L. To determinate the best period of feeding, It was analyzed the cellular component and haematological parameters in aerocistite in tilapia and It was found that the maximum accumulation of cellular and best hematologic results occurred after three weeks. To evaluate the effect of this plant on immune activity and growth performance of Nile tilapia, we used 450 fish (81,3 ± 4,5g) randomly distributed at 25 fish per 1500-L tank and fed a diet containing 0.0, 75, 150, 300 and 450 mg ―uña de gato‖/kg diet for 3 weeks. It was used three replicates per treatment and control groups. After the 3-week experimental period, fish of each treatment were challenged by inactivated Streptococcus agalactiae. Samples were taken at 6, 24 and 48 hours after the inflammatory stimulus. We found a dose-dependent increase in blood leukocytes after 6 hours post-inoculation and a large dose-dependent increased of leukocytes at site of inflammation at 24 hours post-inoculation. Further, splenic melano-macrophage centers were significant higher in size and number in treated groups. Furthermore, a significant increase of IgM expression in spleen was detected at 24 hours post-bacterial challenge in supplemented fish with 300 and 450 mg U. tomentosa/Kg diet. There were no histopathological changes in any treatment in gills, intestine, spleen and liver. We found an unexpected increase of weight gain and feed conversion that would be explained, partially, due to increase of intestinal villus... (Complete abstract click electronic access below)
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Zinco na nutrição e saúde de frangos de corte / Zinc in nutrition and health of broiler chickensRezende, Juliana Cristina Ramos [UNESP] 18 November 2016 (has links)
Submitted by Juliana Cristina Ramos Rezende (julianacristina_rezende@yahoo.com.br) on 2016-12-07T16:45:31Z
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TESE DEFINITIVA.pdf: 1039059 bytes, checksum: f82e6799ec6601ac15b298cc2de89414 (MD5) / Approved for entry into archive by Felipe Augusto Arakaki (arakaki@reitoria.unesp.br) on 2016-12-09T16:47:09Z (GMT) No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2016-11-18 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Foi realizado um experimento para avaliar o efeito dos níveis de zinco na dieta de frangos de corte, sobre o desempenho, a imunidade e saúde. O ensaio foi realizado em aviário experimental, o delineamento foi inteiramente casualisado com cinco níveis de zinco, totalizando 5 tratamentos com sete repetições, os tratamentos consistiram em 50, 75, 100, 125 e 150% da exigência de zinco segundo Rostagno et al. (2011), sendo o tratamento 100% (controle): 81,3; 71,5; 65 ppm de zinco nas fases pré-incial, inicial e crescimento, respectivamente. As aves foram divididas em boxes, sendo cada box uma unidade experimental com 33 aves cada. E aos 35 dias de idade foi realizado um desafio com LPS de E. coli. Foram avaliados os parâmetros de desempenho: conversão alimentar, consumo de ração, peso corporal, ganho de peso e viabilidade; bioquímicos: zinco no sangue, superóxido dismutase e glutationa peroxidase no soro sanguíneo; e imunológico: título de anticorpos para doença de Newcastle de 1 a 35 dias de idade. Após os 35 dias de idade foram avaliados peso relativo de órgãos, o teor de zinco na tíbia inteira, fêmur sem a medula óssea, medula óssea do fêmur e no fígado, atividade da superóxido dismutase e glutationa peroxidase no soro sanguíneo e no fígado e a produção de reativos de oxigênio e nitrogênio por macrófagos peritoniais; em todos os níveis de zinco em aves desafiadas por LPS ou não. Os dados foram avaliados pela análise de variância (ANOVA) através do procedimento General Lineal Model (GLM), com auxílio do programa estatístico SAS 9.3. O nível ótimo de zinco dietético foi determinado pela análise de regressão no modelo da Nova Compartimental (y=〖ae〗^(-bx)/((1+ e^(-c(x-d) )))) utilizando-se o programa Excel (xlsx) com exceção dos dados de Peroxido de Hidrogênio e Oxido Nítrico em que o nível ótimo de zinco dietético foi determinado pela análise de regressão, Broken Line, utilizando-se o procedimento Proc Reg do SAS 9.3, com o auxílio do programa Origin. A suplementação de zinco na forma de óxido de zinco em dietas de frangos de corte pode influenciar o ganho de peso, conversão alimentar e consumo de ração de 1 a 21 dias de idade, em aves criadas em galpão, com ponto ótimo 128% da exigência estimada por Rostagno et al. (2011). A mesma suplementação e nas mesmas condições, não influencia o desempenho de 1 a 35 dias de idade e não apresenta melhorias evidentes no status antioxidante e imunológico das aves. A partir dos 35 dias de idade em aves desafiadas verificou-se que a suplementação de zinco acima dos níveis recomendados para dietas de frangos de corte até 35 dias de idade influencia negativamente a produção de peróxido de hidrogênio e de oxido nítrico por macrófagos peritoneais, em aves desafiados ou não com o lipopolissacarídeo de Escherichia coli. Os melhores resultados para resposta imunológica primária foram obtidos com a suplementação de 100% da exigência estimada por Rostagno et al. (2011). Pode-se dizer que a suplementação de 139% de zinco da exigência preconizada por Rostagno et al. (2011) aumenta a atividade da glutationa peroxidase no soro, bem como aumenta o teor de zinco no fígado das aves. / An experiment was carried out to evaluate the effect of zinc levels on the broiler diet on performance, immunity and health. The experiment was carried out in experimental fowl, the design was completely randomized with five levels of zinc, totaling 5 treatments with seven replicates, treatments consisted of 50, 75, 100, 125 and 150% of the zinc requirement according to Rostagno et al. (2011), the treatment being 100% (control): 81.3; 71.5; 65 ppm of zinc in the pre-intial, initial and growth phases, respectively. The birds were divided into boxes, each box being an experimental unit with 33 birds each. And at 35 days of age a challenge was performed with E. coli LPS. Performance parameters were evaluated: feed conversion, feed intake, body weight, weight gain and viability; Biochemicals: zinc in the blood, superoxide dismutase and glutathione peroxidase in blood serum; And immunological: titer of antibodies to Newcastle disease from 1 to 35 days of age. After 35 days of age, relative body weight, zinc content in the entire tibia, femur without the bone marrow, bone marrow of the femur and liver, superoxide dismutase activity and glutathione peroxidase in blood serum and liver were evaluated. Production of oxygen and nitrogen reactives by peritoneal macrophages; At all levels of zinc in LPS challenged birds or not. Data were analyzed by analysis of variance (ANOVA) using the General Linear Model (GLM) procedure, using the statistical program SAS 9.3. The optimal level of dietary zinc was determined by the Regression analysis in the New Compartmental (y=〖ae〗^(-bx)/((1+ e^(-c(x-d) )))) using the program Excel (xlsx) with the exception of Hydrogen Peroxide and Nitric Oxide data in which the optimum level of dietary zinc was determined by the regression analysis, Broken Line, using the Proc Reg procedure of SAS 9.3, with the aid of the Origin program . Zinc supplementation in the form of zinc oxide in broiler diets can influence weight gain, feed conversion and feed intake from 1 to 21 days of age in poultry reared in shed, with a best point of 128% of the requirement Estimated by Rostagno et al. (2011). The same supplementation and under the same conditions does not influence the performance from 1 to 35 days of age and does not show evident improvements in the antioxidant and immunological status of the birds. From 35 days of age on challenged birds it was found that zinc supplementation above recommended levels for broiler diets up to 35 days of age negatively influences the production of hydrogen peroxide and nitric oxide by peritoneal macrophages in Birds challenged or not with Escherichia coli lipopolysaccharide. The best results for primary immune response were obtained with the 100% supplementation of the requirement estimated by Rostagno et al. (2011). It can be said that the 139% zinc supplementation of the requirement recommended by Rostagno et al. (2011) increases the activity of glutathione peroxidase in serum as well as increases the zinc content in the liver of birds. / CAPES: 50403001
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Avaliação imunológica de idosos no pré e pós-operatório de correção de valvulopatia cardíaca / Immune evalution of elderly subjects submitted to valvulopathy correction surgeryIrina Ewers 19 March 2009 (has links)
Sabe-se que o sistema imune, através de um fenômeno denominado imunossenescência, gradativamente diminui a sua capacidade de resposta durante a vida. Este fato pode tornar o indivíduo mais suscetível a infecções e outras patologias. Neste contexto, seria útil procurar por fatores que alterassem esta evolução natural, principalmente os capazes de acelerar este processo. Por esta razão, nós procuramos por diferenças nos parâmetros imunológicos entre o antes e o depois da cirurgia de valva cardíaca em idosos com mais de 65 anos. Nossos resultados não apontaram, no pós-operatório, para uma diminuição da capacidade imune, uma vez que os testes cutâneos de hipersensibilidade para o PPD, tricofitina e candidina não se alteraram. Quando a resposta linfoproliferativa foi avaliada in vitro, também não apresentou diferença. Por outro lado, nós observamos um aumento na porcentagem de células T CD3 +, T CD4 + e monócitos no sangue periférico, quando comparamos os períodos. Sendo que os marcadores de ativação cellular CD25 +, CD69 + e o CD95 também se apresentaram elevados. Quanto a secreção de citocinas, nossos resultados apontam para um amento de IL-4 e IL-8. Inversamente, concentrações reduzidas de IL-2, IL-12 e IFN- foram detectadas no sobrenadante de PBMCs quando estimuladas in vitro. Em suma, nossos dados demonstram que a cirurgia de valva cardiaca é capaz de alterar vários parâmetros da resposta immune, com um aumenrto da porcentagem de células, quanto da expressão de marcadores de ativação celular e secreção de citocinas / It is known that the immune system, through a phenomenon called immunosenescence, undergoes functional changes during life which may culminate in a diminished capacity of response, turning the subject more susceptible to infections and other pathologies. In this context, it is useful to search for factors that alter this natural evolution, mainly able to delay this process. For this reason, we assessed different immunologic parameters before and after cardiac valve surgery in 65 year-old patients. Our results did not point to a postoperative immunedeficiency-like state, once that the cutaneous tests to PPD, candidin and tricophytin remained positive for most of the subjects. When the proliferative response was assessed in vitro, there were also no differences. On the other hand, we observed a post-surgical increase in the percentage of T CD3 +, T CD4 + cells and in monocytes from peripheral blood when we compare both periods. Moreover, it is important to highlight that activation markers, such as CD25, CD69 and CD95 were also presented in higher levels. According to the cytokine secretion, our results appointed to a greater secretion of IL-4 and IL-8 postoperative. Conversely, reduced concentrations of IL-2, IL-12 and IFN- were detected in supernatant of PBMCs when stimulated in vitro. In summary, our data reveal that the cardiac valve surgery with extra corporeal procedure and anesthesia is able to alter several parameters of the immune response, with an increased percentage of the major assessed cells, as well as in the expression of activation markers and cytokine secretion
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Respostas comportamentais e metabólicas à ativação do sistema imune por injeção de lipopolissacarídeo (LPS) em Scinax gr. perpusillus (Anura: Hylidae) / Behavioral and metabolic responses to immune system activation by lipopolysaccharide (LPS) in Scinax gr. perpusillus (Anura: Hylidae)Letícia Regina do Amaral Braga 26 November 2013 (has links)
Parasitas e agentes infecciosos devem representar uma importante pressão seletiva atuante sobre a evolução de aspectos da história de vida dos hospedeiros. Os desafios impostos aos hospedeiros pelos patógenos resultam em uma séria de respostas fisiológicas e comportamentais, respostas estas pouco conhecidas para a maioria das espécies de hospedeiros ectotermos, como anfíbios anuros. O objetivo deste estudo foi quantificar os efeitos da ativação do sistema imune via injeção de LPS (lipopolissacarídeo), em duas diferentes concentrações, sobre o comportamento alimentar, taxa metabólica de repouso, atividade locomotora espontânea e comportamento anti-predatório de machos adultos da perereca das bromélias: Scinax gr. perpusillus . O tratamento com LPS provocou redução na taxa de alimentos ingeridos, confirmando o efeito anorexigênico deste componente, e aumento na atividade locomotora espontânea, porém não apresentou efeito sobre a taxa metabólica de repouso ou sobre o comportamento anti-predatório das pererecas / Parasites and infectious agents should represent important selective pressure acting on the evolution of aspects of life history of the hosts. The challenges posed by pathogens to hosts result in a series of physiological and behavioral responses, which are not well known to most ecthoterm hosts species, such as anuran amphibians. The aim of this study was to quantify the effects of activation of the immune system via injection of LPS (lipopolysaccharide) in two different concentrations, on feeding behavior, resting metabolic rates, spontaneous locomotor activity, and antipredatory behavior of adult males of the bromeliad tree-frog: Scinax gr. perpusillus . Treatment with LPS caused a reduction in the rate of food intake confirming the anorexigenic effect of this component and an increase in spontaneous locomotor activity, but had no effect on the resting metabolic rate or in the the antipredator behavior of frogs
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O papel modulador do gene Aire (autoimmune regulator) sobre redes de expressão gênica em células tímicas epiteliais medulares / Promiscuous gene expression in medullary thymic epithelial cells is connected in network where the Aire gene is an upstream modulatorClaudia Macedo 28 March 2008 (has links)
A expressão de antígenos restritos a tecidos (TRAs do inglês tissue restricted antigens) no timo pelas células epiteliais medulares (mTECs de medullary thymic epithelial cells) é essencial para a tolerância central das células T. Devido à sua heterogeneidade em termos de representação de autoantígenos, esse fenômeno foi denominado como expressão gênica promíscua (PGE de promiscuous gene expression), no qual o gene Aire (de autoimmune regulator) desempenha um papel como principal regulador transcricional positivo sobre um grande conjunto de TRAs dependentes de Aire. A proteína Aire tem a capacidade de interagir com seqüências específicas de DNA desempenhando um papel como regulador direto. Neste estudo utilizamos o método dos cDNA microarrays para acessar a PGE em células mTEC CD80+ murinas cultivadas in vitro. O agrupamento hierárquico dos dados permitiu a observação de que os genes de TRAs foram diferencialmente expressos. Para testar essa hipótese, inicialmente silenciamos o gene Aire pelo método de RNA interferente (RNAi) nas células mTEC. O agrupamento hierárquico dos dados de cDNA microarray mostrou um conjunto de genes de TRAs dependentes de Aire, os quais foram reprimidos após o silenciamento deste último. Redes gênicas reconstruídas desses dados permitiram a identificação de um nó gênico (Gucy2d) estabelecendo regulação positiva sobre genes downstream nas células mTEC normais. Entretanto, sob efeito do silenciamento de Aire, Gucy2d passou a ser um repressor. Esses resultados evidenciaram que genes da PGE estão conectados em rede, que um nó gênico pode atuar como intermediário no seu controle e que Aire na rede PGE desempenha seu controle como regulador upstream. / The expression of tissue restricted antigens (TRAs) in thymus by medullary thymic epithelial cells (mTECs) is essential for the central selftolerance of T cells. Due to heterogeneity of autoantigen representation this phenomenon has been termed promiscuous gene expression (PGE), in which the autoimmune regulator (Aire) gene plays a role as main positive transcriptional regulator on a large set of Aire-dependent TRAs. Aire protein is able in binding to specific DNA sequence motifs and plays a role as a direct regulator. Here we used the cDNA microarray method to access PGE in murine CD80+ mTECs cultured in vitro. Hierarchical clustering of the data allowed observation that TRA genes were differentially expressed. To further investigate the control of PGE, we hypothesize that TRA genes establish networks contributing it selves to modulate their transcriptional levels. Aire in this case plays a role as upstream positive modulator. To test this hypothesis, initially we silenced Aire by gene knockdown (RNA interference) in mTECs. Hierarchical clustering of cDNA microarray data showed a set of Airedependent TRAs genes, which were down regulated after Aire silencing. Gene networks reconstructed from these data allowed the identification of a gene node (Gucy2d) establishing positive regulation upon downstream genes in normal mTECs. Nevertheless, under silencing of Aire, Gucy2d has become a repressor. These finding evidentiate that, genes features in PGE are connected in network; a gene node may act as intermediate in their control and that Aire in PGE network plays a role as an upstream regulator.
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