No presente trabalho foi estudada a viabilidade da fotometria em fase sólida usando cela de fluxo com caminho óptico de 3 mm e fotômetro de LED, para determinação de cobalto em suplementos vitamínicos digeridos em meio ácido. O método automatizado foi baseado na formação de um composto de cobalto(II) com o reagente cromogênico 1-(2\'-tiazolilazo)-2-naftol (TAN) retido em suporte sólido quimicamente modificado (C18) monitorado em 580 nm. O módulo de análise foi baseado no processo de multicomutação em fluxo. Após a definição das variáveis de controle, as amostras digeridas em meio ácido foram processadas. O procedimento permitiu a determinação de cobalto na faixa linear de 0,05 a 2,0 mg L-1. A precisão analítica, expressa como DPR, foi de 4,2% (n = 9) e freqüência de amostragem de 17 determinações por hora foram observadas. Os limites de detecção e quantificação foram estimados em 0,0166 e 0,055 mg L-1, respectivamente. / In the present work the viability of the solid phase photometry using a flow cell with optical pathway of 3 mm and a LED photometer for the determination o cobalt vitamin supplements digested in acidic medium was studied. The method automated was based on the compound formation of cobalt and the chromomeric reagent 1-(2\'-tiazolilazo)-2-naftol (TAN), which was immobilized on a solid support (C18) and monitored at 580 nm. The analysis module was based on the multicommutation flow analysis process. After definition of the variables control, samples digested in acid medium ware analyzed. The procedure allowed cobalt determination within the linear range 0.0 up to 2.0 mg L-1. The analytical precision, expressed as DPR, was 4.2 %, and the analytical frequency was 17 determinations per hour. Limit of detection and limit of determination were 0.0166 and 0.055 mg L-1, respectively.

Sistemas de análises químicas por injeção em fluxo envolvendo difusão gasosa foram projetados para a determinação espectrofotométrica de sulfeto e sulfito em melaços e caldos de cana de açúcar fermentados, visando a seleção de leveduras em função das quantidades destas espécies químicas produzidas durante o processo de fermentação. Os métodos para determinação de sulfeto e sulfito envolveram os reagentes N,Ndimetil- p-fenilenidiamino (DMPD) e verde de malaquita (MG), respectivamente. A reação entre DMPD e sulfeto, em presença de Fe(III) e em meio ácido, resulta na formação de azul de metileno (MB) que é monitorado a 668 nm. O sinal analitico é registrado sob forma de pico cuja altura é proporcional ao teor de sulfeto na amostra. A reação entre MG e sulfito, em meio alcalino, resulta na diminuição da absorbância de MG monitorada a 620 nm. O sinal analítico é registrado como pico invertido proporcional à concentração de sulfito. Os principais parâmetros envolvidos em ambas as determinações, tais como vazões, concentrações de reagentes, pH dos ambientes reacionais, temperatura, volume inserido da amostra, dimensões dos módulos de análises, bem como presença de tensoativos e eletrólitos concentrados foram investigados, permitindo a otimização dos sistemas. Devido às interações entre os analitos e os compostos contendo grupos carbonila existentes na matriz, bem como atrações eletrostáticas entre as espécies gasosas formadas e as partículas em suspensão, a etapa de volatilização dos analitos da amostra se constituiu em fator limitante quanto á utilização dos procedimentos em análises in situ. Neste sentido, a necessidade de tratamento prévio da amostra foi demonstrada. Os sistemas propostos são robustos e fornecem resultados precisos (d.p.r. < 2 %) com valocidade analítica de 30 eterminações por hora. As curvas analíticas se apresentam lineares até 5,0 mg L-1 S-S2- ou 25,0 mg L-1 S-SO2, os limites de detecção foram estimados como 0,04 e 0,7 mg L-1 de S-S2- e S-SO2, e os consumos de reagentes foram de 0,6 mg DMPD e de 0,002 mg MG por determinação. Emprego do método das adições-padrão foi sugerido parasuperação das interferências matriciais / Flow injection systems involving gas diffusion were designed for spectrophotometric determination of sulfide and sulfite in fermented sugarcane juices and molasses, aiming at yeast selection relying on their amounts produced during fermentation process. N,N-dimethyl-p-phenylenediamine (DMPD) e malachite green (MG) were used for sulfide and sulfite determinations, respectively. Reaction of sulfide with DMPD was developed in the presence of Fe(III) under acidic conditions, and yielded molybdenum blue (MB), which was monitored at 668 nm. The analytical signal was recorded as a peak with height proportional to the sulfide content in the sample. Reaction of sulfite with MG was developed under alkaline conditions, and caused a MG absorbance lessening monitored at 620 nm. The analytical signal was recorded as an inverted peak proportional to the sulfite concentration. For both determinations, the main involved parameters such as flow rates, reagent concentrations, pH of the reaction media, temperature, sample inserted volume, manifold geometry, as well as the presence of surfactants and concentrated electrolytes were investigated, allowing further system optimization. Due to analyte interactions with the carbonyl groups of some chemical species in the sample, as well as electrostatic attractions of the formed gaseous species by the solid suspended particles, the volatilization step constituted itself in a limiting factor for applying the procedures to in situ analysis. In this context, the need for a previous sample treatment was suggested. The proposed systems are rugged and yield precise results (r.s.d. < 2 %) at a sampling rate of 30 determinations per hour. Linearity of the analytical curves was noted up to 5.0 mg L-1 S-S2- or 25.0 mg L-1 S-SO2, detection limits were estimated as 0.04 mgL-1 S-S2- and 0.7 mg L-1 S-SO2, and the reagent consumptions were 0.6 mg DMPD and 0.002 mg MG per determination. Exploitation of the standard addition method for overcoming matrix effects was suggested

Busca-se em pesquisas e estudos avaliar a capacidade de adaptação e selamento entre a conexão implante/intermediário de diferentes sistemas de implantes odontológicos. Observou-se recentemente que implantes com abutments retidos com parafusos, diversos fenômenos como afrouxamento e fratura do parafuso, rotação e fratura do abutment com penetração bacteriana nas câmaras internas dos implantes, acontece como conseqüência da desadaptação interface implante/abutment. É descrito ao nível desta região um pequeno espaço microgap, fator relevante para remodelamento da crista óssea e longevidade da saúde dos tecidos moles periimplantares. O propósito do estudo foi investigar o extravasamento da solução do corante azul de Evan em três tipos de implantes e seus respectivos intermediários, durante um período de seis (6) dias, a cada vinte e quatro (24) horas, com intervalo em cento e vinte (120) horas, através da agitação proporcionada por uma mesa agitadora. Para tal, foram utilizados trinta (30) implantes, dez (10) de cada tipo, com seus respectivos intermediários protéticos, minipilares, sendo o Grupo Um (1) de implantes Hexágono Externo (HE), Grupo dois (2) de Hexágono Interno (HI) e Grupo três (3) de Cone Morse (CM). No interior de cada implante foi pipetado volume ou quantidade proporcional ao seu espaço interno uma solução de corante azul de Evan. Após a colocação do corante no interior dos implantes, os abutments ou intermediários foram acoplados e aparafusados com torque de vinte (20) Ncm, através do torquímetro de Gauge (Tohnichi), e estes depositados individualmente em micro tubos de cor âmbar na condição de intermediários voltados para baixo. Segui/se imediatamente a colocação de (1)ml de água deionizada. A seguir os tubos foram fechados hermeticamente e posicionados numa mesa suporte para microtubos e foram armazernados por 24 horas, sem agitação. Posteriormente foram agitados por 10 minutos com movimentos uniformes em mesa agitadora e a partir deste momento iniciou/se a coleta de uma pequena quantidade de água de cada micro tubo onde por sua vez estas amostras foram analisadas por absorbância através do método de fotometria, espectrofotometria, onde mostraram o extravasamento da solução do corante azul de Evan nos sistemas de implantes usados. Do inicio da coleta das amostras no tempo de (24 horas) até a condição no terceiro dia ou setenta e duas horas, os três sistemas não mostraram/se alterações estatisticamente significantes. A partir do tempo quarto dia ou 96 h., no sistema do grupo Cone Morse, revelou diferenças estatisticamente significantes entre o grupo HE e HI. Os resultados foram tabulados e o teste estatístico Anova há dois critérios e aplicados a eles o teste Tukey comparação entre todos, com o nível de significância de p<0.05. Os resultados do teste de vinte e quatro (24); quarenta e oito (48), setenta e duas (72), não havendo diferenças estatisticamente significantes, ao passo que no período de noventa e seis (96) e cento e quarenta e quatro(144) horas, mostrou a solução do corante de azul de Evan do sistema CM, o xtravasamento estatisticamente significante maior do que nos grupos HE e HI. Conclui/se, portanto, que houve extravasamento nos três sistemas na condição inicial. No tempo 96 houve um maior extravasamento do sistema CM perpetuando até o final do experimento, mostrando-se estaticamente diferente em relação aos sistemas HE e HI. / Research and studies seek to evaluate the capacity of adaptation and sealing between the implant-intermediate connections of different dental implant systems. It has recently been observed that in implants with screw-retained abutments, various phenomena, such as screw4 loosening and fracture, rotation and fracture of the abutment with bacterial penetration into the internal chambers of the implants have occurred as a result of maladaptatation at the implant-abutment interface. At the level of this region, a small space known as a microgap is described, and is a relevant factor in remodeling of the crestal bone and peri-implant soft tissue health in the long term. The purpose of this study was to investigate the extravasation of Evans blue dye solution in three types of implants and their respective intermediates during a period of six (6) days, every twenty-four (24) hours, with an interval in one hundred and wenty (120) hours, by means of agitation provided by an agitating table. To do this, thirty (30) implants were used, ten (10) of each type, with their respective prosthetic intermediates and mini-abutments, divided into groups as follows: Group One (1) External Hexagon implants (EH), Group Two (2) Internal Hexagon (IH) and Group three (3) Morse Cone (MC). Into the interior of each implant, Evans blue dye solution was inserted with a pipette in a volume or quantity proportional to its internal space. After the dye was put into the implants, the abutments or intermediates were coupled and the screws tightened to a torque of twenty (20) Ncm, with a Gauge torque meter (Tohnichi), and they were individually deposited in amber-colored microtubes positioned so that the intermediates faced downwards. This was immediately followed by the placement of (1)ml of deionized water. Next, the tubes were hermetically closed and placed on a table with a microtube holder and stored for 24 hours, without agitation. Afterwards they were agitated for 10 minutes on an agitating table making uniform movements and from then on, a small quantity of water began to be collected from each microtube, where in turn these samples were analyzed by absorbance method of photometry, spectrophotometry, in which they showed the extravasation of the Evans blue dye solution in the implant system used. From the beginning of sample collection at the time of (24hours) until the condition on the third day or at seventy-two hours, the three systems showed no statistically significant alterations. From the fourth day, or at the time of 96 h., in the Morse Cone Group system, statistically significant differences were revealed between Group EH and IH. The results were tabulated and the ANOVA statistical test for two criteria and the Tukey test were applied for comparison among all the groups, with a level of significance of p<0.05. The results of the twenty-four-hour (24); forty-eight (48), seventy-two hour tests (72), there were no statistically significant differences, whereas in the period of ninety-six (96) and one hundred and forty-four (144) hours, showed the Evans blue dye solution extravasation from the MC system to be greater with statistical significance than in Groups EH and IH. It was therefore concluded that there was extravasation in the three systems in the initial condition. At the time of 96 there was greater extravasation from the MC system, which was perpetuated up to the end of the experiment, showing it to differ statistically in comparison with the EH and IH systems.

Submitted by Rosangela Silva (rosangela.silva3@unioeste.br) on 2018-05-15T14:18:02Z No. of bitstreams: 2 André Coradini Corrêa.pdf: 994260 bytes, checksum: 895aa0122b211cc9de09ddb7f9a3cecb (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-15T14:18:02Z (GMT). No. of bitstreams: 2 André Coradini Corrêa.pdf: 994260 bytes, checksum: 895aa0122b211cc9de09ddb7f9a3cecb (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2018-03-07 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The development of new analytical methodologies is essential to create alternatives to the methods described in the pharmacopoeias, either for identification or quantification of drugs. The literature shows few methods of quantification of 5-aminosalicylic acid (5-ASA) in pharmaceutical forms, being the methodology most used by CLAE (High Performance Liquid Chromatography), which makes the procedure expensive and even unviable in certain sectors. Thus, it is justified the research by fast, efficient and low-cost methods for the analysis of this drug. This dissertation aimed to use the spectrophotometry technique for the determination of 5-aminosalicylic acid in different pharmaceutical forms, based on the formation reaction of a colored complex formed between 5-ASA and Fe3+ ions, which is known as the Trinder. Chapter 1 of this dissertation describes the methodology developed, as well as the results of this research, together with the relevant discussions. Experimental design (ED) and response surface methodology (RSM) were carried out in order to reduce the number of experiments and achieve the best conditions for complex absorbance procedure. Three factors at two levels were studied: 5-ASA concentration (150 mg/L; 275 mg/L and 400 mg/L), FeCl3 concentration (100 mg/L; 200 mg/L and 300 mg/L) and volume ratio (1:2; 1:1 and 2:1) between the amounts of 5-ASA and FeCl3. The developed method showed satisfactory values for linearity, precision and accuracy. The different drug formulations containing 5-ASA presented values that were in agreement with those specifications in the package. This spectrophotometric methodology proved to be low-cost, simple and fast to determine 5-ASA in pharmaceutical formulations. / O desenvolvimento de novas metodologias analíticas é essencial para criar alternativas aos métodos descritos nas farmacopeias, seja para identificação ou quantificação de fármacos. A literatura mostra poucos métodos de quantificação do ácido 5-aminosalicílico (5-ASA) em formas farmacêuticas. É considerada a metodologia mais utilizada, feita por CLAE (Cromatografia Líquida de Alta Eficiência), o que torna caro o procedimento e até inviável em determinados setores. Dessa forma, justifica-se a pesquisa por métodos rápidos, eficientes e de baixo custo para análise desse fármaco. Assim, esta dissertação teve como objetivo utilizar a técnica de espectrofotometria para a determinação de ácido 5-aminosalicílico em diferentes formas farmacêuticas, baseando-se na reação de formação de um complexo colorido formado entre 5-ASA e íons Fe3+, a qual é conhecida como técnica de Trinder. No Capítulo 1 dessa dissertação está descrita a metodologia desenvolvida, bem como os resultados dessa pesquisa, juntamente com as discussões pertinentes. O delineamento experimental (DOE) e a metodologia de superfície de resposta (RSM) foram realizados com o objetivo de reduzir o número de experimentos e obter as melhores condições para os procedimentos de medidas de absorbância do complexo. Foram estudados três fatores em dois níveis: concentração de 5-ASA (150 mg/L; 275 mg/L e 400 mg/L), concentração de FeCl3 (100 mg/L; 200 mg/L e 300 mg/L) e proporção de volume (1:2; 1:1 e 2:1) entre as quantidades de 5-ASA e FeCl3. O método desenvolvido apresentou valores satisfatórios de linearidade, precisão e exatidão. As diferentes formulações de drogas contendo 5-ASA apresentaram valores concordantes com os das especificações contidas na embalagem. A metodologia espectrofotométrica aplicada foi de baixo custo, simples e rápida para a determinação de 5-ASA em formulações farmacêuticas.

Made available in DSpace on 2016-08-19T12:56:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao PAULO ROBERTO BARROS GOMES.pdf: 750823 bytes, checksum: 6bcfd2cc25720b82e68f10aa3fb00c5a (MD5) Previous issue date: 2014-03-28 / International and national bodies require the development of analytical methods that are rapid, inexpensive and accurate for the determination of drugs. One way to meet these requirements a method of flow injection analysis employing multicommutation and spectrophotometric detection was used. In this paper an automated system was developed to determine diclofenac sodium in injectables. The reaction is based on the oxidation of diclofenac sodium with potassium permanganate in acid medium be-ing monitored at 465 nm this. The calibration curve was linear over the concentration range of 20-80 mg Lˉ¹ with a detection limit of 0.1 mg Lˉ¹ standard deviation of 0.9% (n = 20) and Sample Rate 80 samples per hour. The proposed method was applied successfully in three injectable solutions and the samples were compared with the official method and other automated methods employing the same reaction. / Os organismos internacionais e nacionais exigem o desenvolvimento de metodologi-as analíticas que sejam rápidas, baixo custo e precisas para a determinação de fár-macos. Uma forma de atender a essas exigências foi utilizado um método de análise por injeção em fluxo empregando multicomutação e com detecção espectrofotomé-trica. Neste trabalho um sistema automático foi desenvolvido para determinar o di-clofenaco de sódio em injetáveis. A reação é baseada na oxidação do diclofenaco de sódio com permanganato de potássio em meio ácido sendo esta monitorada a 465 nm. A curva de calibração foi linear no intervalo de concentração de 20-80 mg Lˉ¹, com um limite de detecção de 0,1 mg Lˉ¹, desvio padrão de 0,9% (n = 20) e taxa de amostragem de 80 determinações por hora. O método proposto foi aplicado com sucesso em três soluções injetáveis e as amostras foram comparadas com a meto-dologia oficial e outros métodos automáticos que empregam a mesma reação.

Através do fato de que os silicones pigmentados utilizados na confecção de aloplastias para a reabilitação de pacientes portadores de defeitos faciais apresentam alteração cromática com o decorrer do tempo na experiência clínica, e pela escassez na literatura específica de trabalhos experimentais relacionados ao tema, principalmente quanto aos silicones industriais de cura acética, o presente trabalho tem como objetivo verificar o comportamento de três tipos de silicones diferentes coloridos com um determinado pigmento (pó para maquiagem facial), usados rotineiramente no atendimento de próteses faciais. Os silicones usados foram um de cura por calor (HTV) para finalidades médicas, um de cura acética (RTV) para fins industriais com especificações de normas alimentícias e outro também de cura acética (RTV), porém somente de normas industriais. Para a realização do experimento confeccionou-se 30 corpos de prova, sendo 10 para cada tipo de silicone, que foram analisados por espectrofotômetro. Após análise, cada grupo foi dividido em 2 subgrupos, de 5 unidades cada, um grupo exposto (E) e um grupo controle (C). Os 3 grupos (E) passaram por envelhecimento acelerado em exposição ambiental, enquanto os 3 grupos (C) ficaram acondicionados em um lugar totalmente escuro em temperatura ambiente. A leitura inicial foi considerada padrão, enquanto as seguintes foram aos 45 e 90 dias. Os dados obtidos nas três medições foram usados para avaliação das alterações cromáticas. Com os resultados estatísticos após análise, concluímos que todos os silicones expostos apresentaram alteração na cor clinicamente inaceitável, sendo que nos grupos controle somente o silicone de cura acética (RTV), industrial com especificações de normas alimentícias, apresentou mudanças cromáticas clinicamente aceitáveis, enquanto os outros dois se mantiveram estáveis. / Owing to the fact that pigmented silicons used in the making of facial prosthesis or the rehabilitation of patients with facial flaws present , in clinical experience, chromatic alteration as time passes by, and due to the shortage of experimental papers in the specific literature, specially in relation to industrial silicon of acetic cure, the present paper targets to verify the behavior of three types of different silicons colored with a determined pigment (facial make up powder), used as routine in facial prosthesis. The used silicons were: one of cure by heat (HTV) with medical purposes , one of acetic cure (RTV) for industrial purposes with specific nutritious rules and another one of acetic cure (RTV) with industrial rules only. To perform the experiment thirty bodies of proof were made , ten to each silicon type, which were analyzed through spectrophotometer. After analyzing, each group was divided into two sub groups, five units each, one group exposed (E) and one group control (C). The three groups (E) passed through accelerated environmental exposure aging, while the three groups (C) stayed in a totally dark place at normal temperature. The initial reading was considered pattern, while the following readings were within 45 and 90 days. The data from the three measurements were used for evaluating the chromatic alterations. With the statistic results at hand, we came to the conclusion that all silicons exposed showed unacceptable clinical color alteration, and in the control groups only the industrial acetic cure silicon (RTV) with specific nutritious rules, showed acceptable clinical chromatic changes while the other two remained stable.

A tese objetivou beneficiar pacientes usuários de lítio por meio de dois estudos: (1) análise da bioequivalência de duas formulações de lítio; e (2) investigação do uso do lítio na pediatria. Para o estudo de bioequivalência, voluntários sadios (N=24) foram tratados com comprimidos (300mg) de carbonato de lítio de duas formulações: teste-Neurolithium e referência-Carbolitium. Após administrar cada formulação em períodos diferentes, foram coletadas amostras de plasma para quantificar íons lítio, utilizando espectrofotometria de absorção atômica. O método desenvolvido neste estudo apresentou limite de quantificação de 0,07mg/L. A média geométrica e o intervalo de confiança de 90% teste/referência foi de 104,77 (98,60-111,33%) para Cmax e 101,99 (96,81-107,44%) para ASClast. Seguindo os parâmetros propostos pelo FDA e ANVISA, concluiu-se que o Neurolithium é bioequivalente ao Carbolitium. Desta forma, este estudo assegura a comercialização de uma formulação de qualidade e o possível registro de um medicamento genérico com custo reduzido. O FDA não recomenda o uso de lítio em crianças menores de 12 anos, pois ainda não tem informações sobre segurança e eficácia da medicação nesses pacientes. Assim, o segundo estudo investigou o uso do lítio em pacientes pediátricos, divididos em dois grupos: (A) menores e (B) maiores de 12 anos. Pacientes que receberam prescrição de lítio no HC da Unicamp, entre 2000 e 2006, foram identificados e os prontuários médicos dos menores de 21 anos (N=77) foram revisados. Houve administração de menores doses nos pacientes do grupo A. Os níveis séricos e índice de efeitos colaterais não diferiram entre os grupos. O grupo A apresentou motivo de prescrição de lítio (agressividade) e eficácia (71%) diferentes do grupo B (alterações de humor; 83%). Uma vez que os índices de eficácia dos grupos foram condizentes com os da literatura e não houve diferença no aparecimento de efeitos colaterais, concluiu-se que é viável a utilização de lítio em menores de 12 anos. / The ideal of this thesis is to benefit patients that use lithium, through two studies: (1) comparison of the bioavailability of two lithium formulations; and (2) investigation of lithium use in children and adolescents. In order to analyze the bioequivalence, healthy volunteers (N=24), of both genders, were treated with two lithium carbonate formulations (300 mg): test ? Neurolithium and reference-Carbolitium. After administrate each formulation in separate periods, plasma samples were collected to quantify lithium, using atomic absorption spectrophotometry. The method was developed specially to this study and it showed 0,07mg/L quantification limit. The geometric media and the 90% confiance interval test/reference was 104,77 (98,60-111,33%) to Cmax and 101,99 (96,81-107,44%) to ASClast. Based on FDA and ANVISA parameters, we concluded that Neurolithium is bioequivalent to Carbolitium. Therefore, this study assures the commercialization of a qualified formulation and makes possible the register of a generic medication with low cost. Since information regarding the safety and effectiveness of lithium in children under 12 years of age is not available, its use in such patients is not recommended at this time. Therefore, the second study has investigated the use of lithium in pediatric patients, divided in two groups: (A) under and (B) over 12 years old. Patients that received lithium prescription inside of HC in Unicamp, between 2000 and 2006, were identified. Only clinical register of patients (N=77) under 21 years old, were revised. Fewer doses were administrated in group A. Seric levels and side effects indexes were not different between groups. Group A showed reason for lithium prescription (aggressiveness) and effectiveness (71%) different from group B (humor oscillation; 83%). Since indexes effectiveness from both groups were in accordance with those found in literature and there was no difference in side effects number per patient, we concluded that the use of lithium in patients under 12 years old is feasible.

O grau de hemólise (GH) é um dos parâmetros de qualidade de concentrados de hemácias (CH). Conforme a Portaria 158/2016, ao menos 1% da produção mensal de CH deve ser controlada para o GH e 75% desta parcela deve apresentar resultado inferior a 0,8% de hemólise em relação à massa eritrocitária no último dia de validade do CH. O GH é definido como a porcentagem de hemoglobina livre (HbL) em relação à hemoglobina total (HbT) com a devida correção do volume globular do CH. O método analítico utilizado para a dosagem da HbL pela maioria dos hemocentros da rede pública nacional não referencia a fonte bibliográfica consultada. A hemoglobina liberada dos eritrócitos devido à hemólise é tóxica e desencadeia reações fisiopatológicas, resultando em implicações clínicas com gravidade que varia em função do grau de hemólise e do volume de hemácias transfundidas. O objetivo deste estudo foi avaliar os resultados de três metodologias analíticas espectrofotométricas para a determinação da HbL. Foram comparados o método de espectrofotometria direta de Harboe, o método de espectrofotometria direta de Cinco comprimentos de onda (5CO) e o método espectrofotométrico de Primeira derivada (1ªD). Os métodos de Harboe e de 5CO utilizam fórmulas matemáticas que convertem diretamente as absorbâncias lidas no espectrofotômetro UV/Visível em concentração de HbL. O método de 1ªD requer espectrofotômetro de varredura para a visualização dos espectros e a concentração da HbL é dada pelo valor referente à distância entre o vale e o pico de absorção da hemoglobina e do fator de correção, resultante de curva de calibração. Nesse estudo foram testados os sobrenadantes de 187 CH com CPDA-1 e CH com solução aditiva de SAG-Manitol. As amostras foram diluídas segundo o aspecto visual de hemólise do sobrenadante. A cada corrida analítica foram incluídas amostras controle preparadas in-house a partir de CH com concentração de HbT conhecida. O método de Harboe emprega leituras espectrofotométricas em 380, 415 e 450 nm. Para o método de 5 CO as absorbâncias são lidas em 370, 415, 510, 577 e 600 nm. O método da 1ªD utiliza o espectro de absorção analisado em 568 nm e 580 nm. A correlação entre as três metodologias testadas foi considerada ótima, evidenciando a equivalência entre os métodos. O método de Harboe mostrou-se compatível para a dosagem de baixas e de altas concentrações de HbL. O intervalo de linearidade espectrofotométrica oscilou de 0,00041 a 0,06075 g/dL. Entretanto, para resultados confiáveis de HbL, é imprescindível que o espectrofotômetro tenha especificação de largura da banda espectral igual ou inferior a 5 nm. O método de Harboe é embasado cientificamente, de fácil execução e baixo custo. Este método proporciona resultados fidedignos, reprodutíveis e padronizados, além de dispensar o uso de substâncias químicas perigosas. Complementarmente, disponibilizou-se um Procedimento Operacional Padrão para a determinação da HbL pelo método de Harboe e um Guia visual de hemólise para assessorar os profissionais que atuam na área de controle de qualidade de hemocomponentes em hemocentros nacionais. / The hemolysis is one of the parameters of the red cell concentrate (RCC) control quality. According to the Brazilian Ordinance 158/2016, at least 1% of the monthly production of RCC should be controlled regarding hemolysis and 75% of this amount should present below than 0.8% of hemolysis in relation to the red cell mass at end of RCC storage. The hemolysis is defined as the percentage of free hemoglobin (FHb), relative to the total hemoglobin (THb), with the appropriate correction of the RCC hematocrit. The analytical method used by most the national public healthcare blood centers to dosage FHb does not reference the bibliography that has been consulted. Hemoglobin released from the erythrocytes due to hemolysis is toxic and triggers pathophysiological reactions, resulting in clinical implications whose severity varies depending on the hemolysis grade and the amount of transfused RCC. The aim of this study was to evaluate the results of three spectrophotometric analytical methodologies for the determination of FHb. The Harboe spectrophotometry method, the method of five wavelengths direct spectrophotometry (5Wa) and the first derivative spectrophotometric method (1stD) were compared to each other. The Harboe and the 5Wa methods use mathematical formulas that directly convert the absorbance read from the UV/visible spectrophotometer in FHb concentration. The 1stD method requires scanning spectrophotometer to visualize the spectra and concentration of the FHb is given by the value calculated from the distance between the valley and the peak absorption of hemoglobin and a correction factor, resulting from the calibration curve. One hundred eighty-seven (187) RCC supernatants with CPDA-1 and RCC with SAG-mannitol additive solution were tested in this study. The samples were diluted according to the visual appearance of supernatants hemolysis. For each analytical run in-house control samples, prepared from RCC with known THb concentration, were included. The Harboe method employs spectrophotometric readings at 380, 415 and 450 nm. Absorbance is read at 370, 415, 510, 577 and 600 nm with the 5 Wa method. In the 1stD method the absorption spectrum is analyzed at 568 and 580 nm. There was correlation between the three tested methodologies that were tested, demonstrating equivalence between the methods. The Harboe method was compatible for dosage of low and high FHb concentrations. The spectrophotometer linear range varied from 0.00041 to 0.06075 g/dL. However, in order to achieve reliable FHb dosages it is imperative that the spectrophotometer has a spectral bandwidth equal to 5 nm or below. The Harboe method is scientifically based, easy to perform and inexpensive. It provides reliable, reproducible and standardized results, dismissing the use of dangerous chemical substances. In addition, this study has provided an Operational Procedure to determine FHb by the Harboe method and a Visual Guide of hemolysis to assist professionals working in the quality control of blood products.

Orientador: Matthieu Tubino / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Química / Made available in DSpace on 2018-08-21T09:33:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silveira_EvaLuciaCardoso_D.pdf: 1544784 bytes, checksum: 21e0e9cae43209115424068ca5568476 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: Um método de baixo custo é proposto neste trabalho para a análise quantitativa do álcool residual em biodiesel através da determinação do ponto de fulgor. Foram analisados ésteres metílicos obtidos de óleos de soja, milho, girassol e de sebo bovino. Os ésteres etílicos foram obtidos de óleo de soja. Em todos os casos ficou evidente que há uma correlação entre o ponto de fulgor e o teor de álcool residual no biodiesel. Assim, o parâmetro ponto de fulgor pode ser usado diretamente para determinar o teor de álcool residual do biodiesel. Foi proposto também um método para a determinação de fósforo em biodiesel por espectrofotometria de absorção molecular UV-Vis. As amostras de biodiesel são mineralizadas por calcinação a 550 °C seguindo dissolução do resíduo em H2SO4 1,0 mol L. O procedimento analítico é baseado na formação do complexo azul de molibdênio. Empregou-se o ácido 1-amino-2-naftol-4-sulfônico como agente redutor. O método foi aplicado para amostras de biodiesel de soja, canola, girassol e de sebo bovino. Os limites de detecção e quantificação obtidos para fósforo foram de 0,57 mg kg e 1,71 mg kg, respectivamente. O desvio padrão relativo médio obtido foi cerca de 5 %. A simplicidade do procedimento adicionado à precisão, exatidão e o baixo custo indicam que é uma excelente opção para a determinação de fósforo em biodiesel. Um terceiro método, neste caso, para a determinação de ânions em biodiesel baseado na extração com água assistida por ultrassom também foi desenvolvido neste trabalho. Os extratos obtidos das amostras de biodiesel foram analisados por cromatografia de íons. Os limites de quantificação foram 0,97; 4,10; 0,30; 2,47 e 0,26 mg kg para acetato, formiato, cloreto, fosfato e sulfato, respectivamente. A técnica de cromatografia de íons mostrou-se viável para a separação e quantificação de ânions orgânicos e inorgânicos em biodiesel simultaneamente diminuindo assim o tempo de análise / Abstract: A low cost method is proposed in this work for the quantitative analysis of residual alcohol in biodiesel through determination of the flash point. We analyzed methyl esters obtained from oils such as soy, corn, sunflower and of bovine fat. The ethyl esters were obtained from soy oil. In all cases it became very evident that there is a correlation between the flash point and the residual alcohol content in the biodiesel. Therefore the parameter flash point can be used to directly determine the residual alcohol content of biodiesel. A method has been proposed for the determination of phosphorus in biodiesel by UV-vis molecular absorption spectrophotometry. The biodiesel samples are mineralized using an ashing procedure at 550 °C following dissolution of the residue in 1.0 mol L H2SO4. The analytical procedure is based on the formation of a blue molybdenum complex. 1-amino-2naphthol-4-sulfonic acid is used as reducing agent. The method was applied to biodiesel samples of soy, canola and sunflower oils and of bovine fat. The limits of detection and quantification are 0.57 mg kg and 1.71 mg kg, respectively. The average standard deviation obtained was about 5 %. The simplicity of the procedure added to its precision, accuracy and low cost indicate that it is an excellent option for the determination of phosphorus in biodiesel. A third method, in this case, for the determination of anions in biodiesel based on extraction with ultrasound assisted water has also been developed in this study. The extracts of biodiesel samples were analyzed by ion chromatography. The limits of quantification obtained were 0.97, 4.10, 0.30, 2.47 and 0.26 mg kg for acetate, formate, chloride, phosphate and sulfate, respectively. The technique of ion chromatography proved to be feasible for the simultaneously separation and quantification of organic anions in biodiesel, thereby reducing analysis time / Doutorado / Quimica Analitica / Doutora em Ciências

This work describes efforts to improve methodologies and instrumentation for investigation of the marine CO2 system. In the first section of my thesis, a method was developed that provides simple, calibration-free measurements of seawater carbonate saturation states (Ωspec) based solely on the use of a laboratory spectrophotometer. Measurements of pH are made in paired optical cells, one with and one without added nitric acid. The amount of added nitric acid is determined through the direct proportionality between nitrate concentration and UV absorbance. After an initial calibration, the method is calibration-free and requires no volumetric or gravimetric analyses thereafter. Saturation state measurements can be obtained in twelve minutes and attain Global Ocean Acidification Observing Network accuracy goals over a wide range of conditions. This simple one-step measurement protocol is ideal for monitoring ocean acidification conditions in coastal areas, fish hatcheries and shellfish farms. The second section of my thesis outlines the development of a next-generation handheld photometer for field measurements of seawater pH. The hand-held instrument is simple to use, inexpensive, and has a pH measurement accuracy of ±0.01. Each photometer is calibrated by relating pH-indicator absorbance ratios (RB) obtained with the broadband photometer to indicator absorbance ratios (RN) obtained with a high quality, narrowband scanning spectrophotometer. The RB vs RN relationship for each photometer is entered into the instrument’s software, providing discrete, real-time pH observations from measurements of RB, salinity and temperature. Measurement accuracy is assessed through comparisons of photometer pH with pH observations obtained using standard measurement procedures and high-quality spectrophotometers. The targeted user-groups for these instruments include middle and high school students, citizen scientists, and resource managers