Les parasites protozoaires du genre Leishmania sont responsables de différentes pathologies et représentent une cause importante de morbidité et de mortalité au niveau mondial. En absence de vaccins, le contrôle de la leishmaniose repose sur l’administration d’agents chimiothérapeutiques. Les médicaments disponibles sont peu nombreux et la plupart d’entre eux sont associés à des facteurs limitants, comme une toxicité relative à leur administration ou un coût trop élevé pour être utilisés de routine au niveau des zones endémiques les plus pauvres. Les composés à base d’antimoine pentavalent sont utilisés en thérapie depuis plusieurs décennies et demeurent encore aujourd’hui un traitement de première ligne contre les différentes formes de leishmanioses. Cependant, l’augmentation du nombre d’infections réfractaires au traitement, associée à la présence de foyers épidémiques de résistance, amenuisent le potentiel thérapeutique de ces molécules. Les mécanismes impliqués dans la résistance sont partiellement élucidés et ont révélé l’importance de la famille des protéines ATP-binding cassette (ABC) dans la résistance. De plus, l’étude de mutants résistants sélectionnés en laboratoire indique la présence de mécanismes de résistance supplémentaires, pour lesquels les gènes impliqués n’ont pas encore été identifiés. Les objectifs de cette thèse étaient i) de définir la famille des protéines ABC chez Leishmania et d’en effectuer l’analyse phylogénique, pour ensuite ii) étudier l’implication de la sous-famille ABCC dans la résistance à l’antimoine chez ce parasite, et finalement iii) de profiter de la disponibilité de la séquence du génome de Leishmania pour évaluer le profil d’expression génique associé au phénotype de résistance à l’antimoine à l’échelle génomique. L’analyse phylogénique a d’abord permis de démontrer la diversité de la famille des protéines ABC chez Leishmania, qui semble avoir évoluée par des événements de duplication génique suite à la divergence évolutive du parasite. Ensuite, des études de localisation protéique, associées à des expériences de surexpression génique, ont permis de déterminer la localisation intracellulaire de l’ensemble des protéines appartenant à la sous-famille ABCC chez Leishmania et de démontrer l’implication de deux d’entre elles dans la résistance à l’antimoine chez ce parasite. Enfin, une étude transcriptomique a confirmé l’importance du gène MRPA dans la résistance à l’antimoine et a permis d’identifier les mécanismes de recombinaison homologue impliqués dans son amplification chez une souche de L. infantum hautement résistante. Finalement, l’analyse transcriptomique a également révélé la présence de chromosomes aneuploïdes chez différents mutants résistants à l’antimoine, alors que la sélection d’une souche révertante partielle a permis d’observer une bonne corrélation entre les niveaux de résistance et le nombre de copies des chromosomes aneuploïdes. / The parasite Leishmania is responsible for considerable morbidity and mortality around the world. No effective vaccine is yet available against this parasite and treatment thus relies on chemotherapy. Few drugs are available and most of them are associated with limitations such as toxicity and high cost. Pentavalent antimonials have been used for decades in the treatment of leishmaniasis and remain the mainstay against all forms of Leishmania infections in most endemic regions. However, the efficacy of these compounds is compromised by the selection of resistant parasites that are now described on a frequent basis in several endemic regions. The mechanisms involved in antimony resistance are partly understood and have pinpointed the role of ATP-binding cassette (ABC) proteins. Moreover, drug resistance studies with different in vitro-selected mutants have suggested the presence of unidentified mechanisms involved in antimony resistance. The objectives of this thesis were i) to define the complete ABC protein family in Leishmania and to analaze their evolution by phylogenetic analyses, ii) to assess the role of the entire ABCC subfamily in antimony resistance, and iii) to take advantage of the availability of the Leishmania genome sequence to study the gene expression profile associated with an antimony resistance phenotype at the genomic level. Phylogenetic analyses revealed the magnitude of the ABC gene family in Leishmania, which seemed to have undergone gene duplication events following the divergence of the Leishmania lineage. Moreover, subcellular localization experiments indicated that the entire ABCC protein subfamily is located to intracellular compartments in Leishmania, and gene overexpression experiments revealed the involvement of two of these proteins in antimony resistance. Finally, a whole-genome transcriptomic study confirmed the involvement of MRPA in antimony resistance and revealed the recombination events associated with its amplification in the highly resistant L. infantum Sb2000.1 mutant. More importantly, the transcriptomic study revealed the presence of aneuploid chromosomes in at least two different antimony-resistant mutants and selection of a partial revertant strain allowed the observation of a good correlation between the antimony resistance levels and the copy number of the aneuploid chromosomes.

La curiethérapie et la protonthérapie sont toutes deux des méthodes permettant de traiter des mélanomes oculaires. Une différence majeure entre ces deux méthodes est la façon de les appliquer. En effet, la curiethérapie est une modalité de radiothérapie interne qui utilise des implants, plus spécifiquement des plaques dans le cas du mélanome oculaire, tandis que la protonthérapie utilise un faisceau externe de radiation ionisante. Pour ces deux méthodes de traitement, il est essentiel de déterminer leurs distributions de dose de radiation associées. La méthode Monte Carlo est reconnue pour être le standard dans le calcul de distribution dose. TOPAS (TOol for Particle Simulations) est un logiciel de simulation utilisant un algorithme Monte Carlo qui a initialement été développé pour des applications de protonthérapie. Le but de ce projet est de comparer d'un point de vue dosimétrique la curiethérapie et la protonthérapie pour des traitements du mélanome oculaire. Une première étape à été de valider et d'étendre TOPAS pour des applications de curiethérapie. Pour ce faire, 11 modèles de sources et les modèles de plaques oculaire de type COMS (10 à 22 mm de diamètre) ont été modélisés, puis caractérisés selon leur paramètres TG-43et TG-129. L'étape suivante est de créer et valider une géométrie d'œil contenant un mélanome oculaire dans ce même logiciel dans le but d'avoir un référentiel anatomique commun pour les méthodes de traitements. La validation de celui-ci est faite en le simulant conjointement avec une plaque oculaire de type COMS. Finalement, la comparaison dosimétrique des deux méthodes de traitement est effectuée après avoir simulé le traitement de deux formes de mélanomes oculaires par protonthérapie et par curiethérapie. Les cartes de distributions de dose, les doses moyennes des structures d'intérêt les points de dose spécifiques et les histogrammes cumulatifs sont extraits pour pouvoir tirer des informations quantitatives servant à la comparaison de la curiethérapie versus la protonthérapie.

Titre de l'écran-titre (visionné le 16 janvier 2024) / L'insomnie est un trouble répandu dans la population ayant une influence négative sur la qualité de vie. Les rêves des personnes en souffrant possèdent une valence émotionnelle plus négative que ceux des bons dormeurs et cet aspect peut influencer le stress diurne. Toutefois, la valence émotionnelle des rêves est rarement ciblée par les méthodes de traitement actuelles. Puisque le rêve lucide peut permettre d'influencer le contenu des rêves et leur valence émotionnelle, et que cette compétence s'acquiert, il s'agit d'une piste de traitement méritant d'être explorée. Le premier objectif était de vérifier l'effet de la Technique d'Induction de Lucidité (TIL) sur la lucidité et la valence émotionnelle dans les rêves, le stress diurne, ainsi que sur la qualité du sommeil, grâce à un protocole à cas unique avec niveaux de base multiples. Neuf participants ont complété des questionnaires quotidiennement pendant quatre à huit semaines. Des améliorations entre le pré-traitement et le post-traitement sont notées chez la plupart des participants quant à l'efficacité du sommeil et le temps d'éveil après endormissement. Des effets positifs moins importants sont également observés quant à la lucidité, au stress diurne et à la valence émotionnelle positive et négative. Le second objectif était de vérifier l'évolution dans le temps de la qualité du sommeil, de la sévérité des symptômes d'insomnie, de la lucidité, et de l'humeur diurne suivant la TIL, à l'aide d'analyses de variance (ANOVAs) à mesure répétée. Les résultats montrent des améliorations significatives persistantes quant à la qualité du sommeil et la sévérité des symptômes de l'insomnie. Dans l'ensemble, les résultats montrent la pertinence de s'intéresser à l'induction de lucidité dans le traitement de l'insomnie.

L'obésité et les maladies métaboliques telles que le diabète de type 2 sont associées à une inflammation chronique de faible intensité. Plusieurs études ont démontré qu’un régime riche en gras induit une modification de la composition du microbiote intestinal ainsi qu'une augmentation de la concentration en lipopolysacharides (LPS) dans la circulation sanguine. Ces LPS sont considérés comme étant le facteur déclencheur d'une inflammation chronique induisant un ensemble de désordres métaboliques. Selon des études récentes, les probiotiques contribueraient à la prévention de ces maladies métaboliques en réduisant l'inflammation provoquée par les LPS. Toutefois, ce processus inflammatoire est complexe et seules quelques pistes sont évoquées à ce jour. Ce mémoire a pour but 1) d'identifier et de caractériser de nouvelles souches probiotiques appartenant aux genres Lactobacillus, Propionibacterium et Bifidobacterium isolées à partir du fromage, du lait cru et de fèces de bébé et d'adultes et 2) d'étudier in vitro l'activité anti-inflammatoire des bactéries tuées par la chaleur et du surnageant de culture de chacune de ces souches en utilisant le modèle de macrophage murin J774.1. L'effet anti-inflammatoire de ces extraits bactériens a été évalué en mesurant la production d'oxide nitrique (NO) et des cytokines pro-inflammatoires (TNF-α et IL-6) et anti-inflammatoire (IL-10) en absence et en présence de LPS d'Escherichia coli serotype O55:B5. Parmi les cinquante-deux souches testées, trois souches de Lactobacillus, deux souches de Bifidobacterium et une souche de Propionibacterium ont démontré des effets anti-inflammatoires en réduisant la production de NO et d'IL-6 et en stimulant la production d'IL-10 en condition basale et en présence de LPS. Ces souches feront prochainement l’objet d’une étude in vivo chez des souris obèses insulino-résistantes pour confirmer leurs profils anti-inflammatoires. / Obesity and related metabolic diseases such as type 2 diabetes are associated with chronic low-grade inflammation. Several studies have shown that a high-fat diet induces a change in the composition of the intestinal microbiota and an increase in lipopolysaccharides (LPS) serum levels. LPS are considered as the trigger for chronic inflammation inducing a set of metabolic disorders. According to recent studies, probiotics contribute to the prevention of metabolic diseases by reducing inflammation caused by LPS. However, the inflammatory process is complex and only a few tracks are discussed. This study aims to 1) identify and characterize new probiotic strains of Lactobacillus, Propionibacterium and Bifidobacterium isolated from cheese, raw milk and feces of infants and adults and 2) to study in vitro the anti-inflammatory activity of heat-killed bacteria and the conditioned media of each of these strains using the murine macrophage cell line J774.1. The anti-inflammatory effect of these bacterial extracts was evaluated by measuring the production of nitric oxide (NO), the pro-inflammatory cytokines (TNF-α and IL-6) and the anti-inflammatory cytokine (IL-10) in the absence and presence of LPS from Escherichia coli serotype O55:B5. Among the fifty two strains tested, three Lactobacillus, two Bifidobacterium and one Propionibacterium showed anti-inflammatory effects by reducing the production of NO and IL-6 and stimulating the production of IL-10 in basal condition and in presence of LPS. These strains will be used in an in vivo study in obese insulin resistant mice to confirm their anti-inflammatory profiles.

La présente étude se propose, comme premier objectif, d'évaluer les relations entre l'attachement du client au thérapeute, la personnalité et la symptomatologie du client et diverses dimensions de l'alliance thérapeutique, ainsi que les relations entre ces trois construits. Le deuxième objectif vise à déterminer la contribution indépendante de l'attachement du client au thérapeute, des facteurs de personnalité et de la symptomatologie du client dans la prédiction de l'alliance thérapeutique. Quatre-vingts clients participent à cette étude et complètent l'Inventaire de l'Alliance de Travail, version abrégée (WAI, Horvath & Greenberg, 1989; Tracey et Kokotovic, 1989), l'Échelle d'Alliance Thérapeutique de Californie (CALPAS; Mannar & Gaston, 1988), le Questionnaire de la Relation d'Aide (HAQ; Alexander & Luborsky, 1986), l'Échelle d'Attachement du Client au Thérapeute (CATS; Mallinckrodt, Gantt, & Coble, 1995), le Questionnaire de Personnalité en Six Facteurs (6FPQ; Jackson, Paunonen, & Tremblay, 2000) et l'Inventaire Bref des Symptômes (BSI; Derogatis & Spencer, 1982). Les résultats indiquent que les styles d'attachement sécurisé et évitant-craintif sont fortement reliés aux trois mesures de l'alliance (sous-échelles et scores globaux), que les facteurs de personnalité sont en général non reliés et que seuls trois indices pathologiques (dépendance, aliénation sociale et hostilité) sont associés à une sous-échelle du HAQ. Les variables de l'attachement et de la personnalité sont non interreliées alors que le style

Le glaucome est la seconde cause de perte de vision dans le monde. L’augmentation de la pression intraoculaire constitue un important facteur de risque associé au glaucome. Actuellement, des médicaments permettant de réduire la pression intra-oculaire sont administrés chez les patients présentant une pression intraoculaire élevée. De plus, seule une petite fraction des médicaments (<0,06%) peuvent atteindre leurs sites d’action dans la chambre antérieure de l’oeil. En effet, le film précornéen ainsi que le drainage lacrymal rapide empêchent la pénétration du médicament dans l’oeil. Pour résoudre ce problème majeur en ophtalmologie, nous proposons d’utiliser des nanoparticules d’or. Notre hypothèse est que les nanoparticules d’or sont mucoadhésives et relarguerons plus lentement leur contenu médicamenteux dans la cornée, augmentant ainsi le temps de résidence des molécules administrées. Cela permettrait d’augmenter l’efficacité du traitement. Objectifs : Dans un premier temps, plusieurs nanoparticules d’or stables et biocompatibles ont été synthétisées. Ensuite, leurs propriétés mucoadhésives et d’encapsulation ont été étudiées. Finalement, les nanoparticules produites ont été testées dans un modèle de souris in vivo en comparaison avec le travoprost. Matériels et méthodes : Plusieurs différents types de nanoparticules ont été synthétisées en utilisant une méthode de Brust modifiée dans laquelle un mélange de solvants contenant de l’acétonitrile permet au polymère de bien stabiliser la nanoparticule en formation. Les nanoparticules sont stabilisées par des polyéthylènes glycol (PEG) de différents poids moléculaires : 800, 2000 et 6000 Da. Les nanoparticules sont caractérisées par spectroscopie UV visible, diffusion dynamique de la lumière, microscopie électronique en transmission et analyse élémentaire. Un médicament couramment utilisé dans le traitement du glaucome, le travoprost (TV), a été encapsulé dans les nanoparticules d’or (GNP) en chauffant le mélange pour évaporer le solvant contenant le travoprost et forcer le médicament à s’insérer dans les cavités à la fois hydrophiles et hydrophobes formées par la couronne de PEG. L’encapsulation a ensuite été évaluée par spectroscopie UV-visible et chromatographie en phase liquide à haute performance. La mucoadhésion a été évaluée par spectrométrie de fluorescence. Enfin, un modèle de glaucome utilisant des injections de microbilles chez la souris a été utilisé pour comparer le temps d’action du travoprost utilisé en clinique et notre solution de GNP médicalisée. Résultats : Le diamètre du coeur métallique des GNP est de 2,2 nm à 5,2 nm et le diamètre hydrodynamique a été mesuré entre 8,5 et 18,9 nm, selon la méthode de synthèse et le PEG qui a été utilisé. Il a aussi été observé qu’une petite quantité de GNP (77 pmol) peut encapsuler 0,004% travoprost (concentration utilisée sur le marché). De plus, 77 pmol de GNP réduisent de 17% à 27% la fluorescence des mucines en fonction du PEG utilisé, suggérant la possibilité de l’adhésion aux muqueuses comme la cornée. En fonction du protocole développé, le travoprost du marché semble avoir une durée d’action supérieure à celle des solutions médicamenteuses de GNP préparées. Conclusion : Nos résultats montrent que les GNP peuvent efficacement encapsuler le TV et interagir avec les mucines. Plus d’analyses sont nécessaires pour comprendre les résultats inattendus obtenus in vivo. Les propriétés de mucoadhésion des GNP pourraient éventuellement mener à l’amélioration de l’efficacité des traitements pharmacologiques dans une gamme étendue de maladies ophtalmiques. / Glaucoma is the second cause of blindness worldwide. Elevated intraocular pressure (IOP) is the highest risk factor associated with glaucoma. Currently, hypotensive drugs can be administered topically to decrease the elevated IOP in patients. However, only a small fraction of the drugs (<0.06%) can reach their site of action in the anterior chamber of the eye. The corneal barrier and rapid drainage prevent drug penetration in the eyeball. To solve this major issue in ophthalmology, we propose to use gold nanoparticles (GNP). Our hypothesis suggests that GNP can be mucoadhesive and thus increase the residence time of glaucoma medication on the cornea, leading to the improvement of the drug efficacy. Objective: Firstly, several biocompatible and stable GNP will be synthesized. Secondly, their mucoadhesion and encapsulation properties will be studied. Lastly, the prepared medicated GNP will be analyzed in vivo with a mouse model, in comparison with marketed travoprost formulation. Methodology: Several GNP were synthesized using a modified one-step Brust method. The modification involves the use of acetonitrile to stabilize GNP during polymer capping. GNP were capped with thiolated polyethylene glycol (PEG) of different lengths: 800, 2000 and 6000 Da. GNP were then characterized by UV-visible spectroscopy, dynamic light scattering, transmission electron microscopy and elemental analysis. A commonly used glaucoma medication, travoprost (TV), was encapsulated in the GNP by heating the mixture to remove TV solvent and entrapping the drug in the PEG hydrophobic pockets. The encapsulation was thus evaluated by UV and high-performance liquid chromatography. Mucoadhesion was evaluated by spectrofluorimetry. A microbead injection glaucoma model was used to compare the duration of action of the marketed travoprost and the medicated GNP solution. Results: The core diameter of GNPs were found to be 2.2 nm to 5.2 nm whereas the hydrodynamic size was found to be between 8.5 and 18.9 nm depending on the PEG used. It was also found that as little as 77 pmol of GNP can encapsulate 0.004% travoprost (marketed concentration). Moreover, 77 pmol of GNPs quenched by 17% to 27% mucins fluorescence depending on the PEG used, thus suggesting their possible binding to mucosae such as the cornea. According to the developed protocol, marketed travoprost appears to have a longer duration of action than the prepared medicated GNP. Conclusion: Our results show that GNP can efficiently encapsulate TV and interact with mucins. More analysis is needed to understand the unexpected in vivo results. The mucoadhesive properties of GNP could lead to the improvement of the efficacy of pharmacological treatments in a large spectrum of ophthalmic diseases.

Nous avons étudié la régulation par les stéroïdes de la prolifération des cellules de la lignée de cancer du sein humain ZR-75-1. Les stéroïdes C l9~A5 surrénaliens exercent une action estrogénique chez ces cellules dont le A s-androstène-3p,17f}-diol (A5-diol) semble être l'unique agent responsable . Les stéroïdes C lg-A5 surrénaliens, et en particulier le A 5-diol, sont estérifiés à des acides gras à chaîne longue qui conduisent à la séquestration intracellulaire de ces stéroïdes, et représentent la forme majeure sous laquelle on les retrouve chez les cellules ZR-75-1. Les androgènes inhibent fortement la prolifération de cette lignée via leur interaction avec le récepteur des androgènes et antagonisent l'effet mitogénique des estrogènes. Une partie de ce dernier effet peut être attribué à la suppression observée de l'expression du récepteur des estrogènes par l'activité spécifique des androgènes. L'interaction des progestatifs avec les récepteurs de la progestérone conduit à une inhibition de l'effet mitogénique des estrogènes et à une augmentation des récepteurs de l'insuline chez les cellules ZR-75-1, et l'insuline renverse complètement ces effets à des concentrations physiologiques. Les progestatifs synthétiques exercent tous une action androgénique plus ou moins marquée sur les cellules ZR-75-1 accompagnée d'un potentiel antiandrogénique inversement proportionnel. L'activité progestative propre de ces composés est inversement proportionnelle à leur activité androgénique, possiblement à cause de la suppression du récepteur de la progestérone par la composante androgénique. Ces ‘stéroïdes exercent aussi des effets antiprolifératifs spécifiquement dûs à leur interaction avec le récepteur des glucocorticoïdes. La noréthindrone et le norgestrel, deux progestatifs synthétiques utilisés pour la contraception orale, ont en plus un potentiel estrogénique probablement dû à une activation métabolique. Chez les cellules ZR-75-1, 1'antiestrogène stéroïdien ICI164384 exerce des effets purement antagonistes alors que deux antiestrogènes non stéroïdiens différents ont une activité agoniste partielle. L'interaction de l'ICI164384 avec le récepteur des estrogènes est rapidement réversible, contrairement à celle observée avec les antiestrogènes non stéroïdiens.

Les relations entre la force de l'alliance telle que mesurée lors de la première entrevue et l'abandon prématuré de la psychothérapie ont été examinées. Les participants sont 60 patients d'un service de consultation universitaire servant de lieu de formation aux étudiants post-gradués en psychologie. Trente de ces sujets ont abandonné la psychothérapie à l'intérieur de cinq entrevues et trente l'ont menée à terme. L'alliance a été évaluée par des observateurs indépendants à l'aide du California Psychotherapy Alliance Scales (Marmar & Gaston, 1988). Le degré de fonctionnement global des sujets a été contrôlé (Global Assessment of Functionning Scale,DSM-111-R). Le niveau d'Engagement du Patient et le degré de Consensus sur les Stratégies de Travail (deux échelles du CALPAS) sont reliés au type de terminaison. Il est suggéré que l'alliance lors de la première session est cruciale dans la compréhension du phénomène de terminaison unilatérale.

À travers l'étude evaluative et rétrospective des cas de névralgie du trijumeau recensés entre 1995 et 2005 dans les services de neurochirurgie et de chirurgie buccale et maxillo-faciale de l'Hôpital de l'Enfant-Jésus, nous avons caractérisé la cohorte des patients suivis et traités par neurolyse périphérique à l'alcool pour identifier l'utilité clinique de cette modalité thérapeutique dans le cadre global de l'approche de cette pathologie. Cette recherche vise d'abord à cerner l'indication, sinon la pertinence, de ce type d'intervention et en circonscrire le cadre d'utilisation, au vu des particularités de l'évolution naturelle ou altérée de la maladie. Après revue de la littérature et analyse de l'échantillon, nous proposons une conduite standardisée pour éventuellement guider une intervention concertée, en situant objectivement le type de procédure en fonction de sa rentabilité thérapeutique avérée.

La cavité buccale offre un espace en perpétuelles interactions. Différentes structures y sont présentes dont les muqueuses, l'émail, la salive, les matériaux de restaurations et la microflore. Ces microorganismes peuvent s'organiser en biofilms, échapper à la défense immunitaire et provoquer plusieurs pathologies, dont les candidoses. L'objectif de cette étude est d'analyser les interactions entre Candida albicans et plusieurs matériaux de restauration dentaire. Nos résultats ont montré que C. albicans adhère et prolifère moins bien sur le verre ionomère comparativement aux autres biomatériaux utilisés. L'adhésion est suivie d'une formation de biofilms dépendant du type de matériau. Nous avons aussi démontré que le fluor réduit de façon significative l'adhésion, la croissance et la transformation de C. albicans. C'est la première étude qui rapporte l'effet du fluor sur la virulence de Candida. Ceci suggère le choix de matériau dentaire pour des restaurations pérennes et la possibilité d'utiliser du fluor pour réduire les candidoses.