Submitted by ARTUR BLIKSTAD MAURO null (artur_mauro@hotmail.com) on 2016-06-21T19:22:25Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Artur Blikstad Mauro.pdf: 2817561 bytes, checksum: ccd976ac335f6622f5e8aacbac709e32 (MD5) / Rejected by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br), reason: Solicitamos que realize uma nova submissão seguindo as orientações abaixo: A data de defesa informada na capa e folha de rosto do trabalho está diferente da data que consta na folha de aprovação. Corrija estas informações e realize uma nova submissão contendo o arquivo correto. Agradecemos a compreensão. on 2016-06-22T16:37:46Z (GMT) / Submitted by ARTUR BLIKSTAD MAURO null (artur_mauro@hotmail.com) on 2016-06-28T17:19:23Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Artur Blikstad Mauro 28.06.2016.pdf: 2817191 bytes, checksum: f838027c3b62df1f42e5ba71a1973b9b (MD5) / Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2016-06-29T17:27:37Z (GMT) No. of bitstreams: 1 mauro_ab_me_rcla.pdf: 2817191 bytes, checksum: f838027c3b62df1f42e5ba71a1973b9b (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-29T17:27:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 mauro_ab_me_rcla.pdf: 2817191 bytes, checksum: f838027c3b62df1f42e5ba71a1973b9b (MD5) Previous issue date: 2016-05-19 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / A escassez de água potável está sempre em foco por ser um pré-requisito para a vida. Nas grandes cidades é evidente como uma preocupação que determina a vida de bilhões de cidadãos, sendo um recurso que movimenta a economia e a saúde pública. É fundamental nas indústrias movimentando a economia, e muitas vezes ao sair delas, como efluente, não é submetida aos tratamentos necessários antes de ser devolvida aos cursos hídricos, dos quais primeiramente foi retirada. Este trabalho visa aprimorar os métodos de remoção de corante Acid Red 114 e Acid Blue 40 do efluente de indústrias têxteis com o uso do processo de coagulação e floculação. Uma vez que os efluentes não tratados geram problemas ecológicos, com um grande impacto ambiental, seu tratamento é fundamental para evitar a contaminação de nossos mananciais. O método escolhido de tratamento foi o de coagulação/floculação por ser amplamente empregado em ETE (Estações de Tratamento de Efluentes) e possuir uma boa eficiência e baixo custo. Com o uso da espectrofotometria e testes de toxicidade foi avaliada a eficiência deste tratamento. Nos testes de toxicidade com S. cerevisiae na mistura dos corantes, Acid Blue 40 com Acid Red 114, mostraram que as leveduras são resistentes as concentrações as quais foram expostas. Nos testes de toxicidade com Artemia salina na mistura dos corantes, Acid Blue 40 com Acid Red 114, mostraram uma mortalidade de 23,33% na concentração de 0,100 g L-1 . Esta sensibilidade maior dos organismos expostos a combinação dos corantes é notada quando comparada com os organismos expostos aos corantes isolados. As sementes expostas a combinações dos corantes mostraram uma mortalidade similar as sementes expostas aos corantes isolados. / The shortage of drinking water is always in focus to be a prerequisite for life. In large cities it is evident as a concern that determines the lives of billions of people, and a feature that moves the economy and public health. It is essential in industries moving the economy, and many of them times out as effluent is not subjected to the necessary treatments before being returned to watercourses, which was first removed. This research aims to improve the stain removal methods Acid Red 114 and Acid Blue 40 from the effluent from textiles with the use of coagulation and flocculation process. Since untreated effluents generate ecological problems, with a large environmental impact, its treatment is essential to prevent contamination of our water sources. The chosen method of treatment was the coagulation / flocculation to be widely used in wastewater treatment plants (wastewater treatment plants) and have a good efficiency and low cost. With the use of spectrophotometry and toxicity tests evaluated the efficacy of this treatment. toxicity tests with S. cerevisiae in the mixture of dyes, Acid Blue 40 with Acid Red 114, showed that yeast concentrations which were exposed are tough. In toxicity tests with Artemia salina in the mixture of dyes, Acid Blue 40 with Acid Red 114, showed a mortality of 23.33% at a concentration of 0.100 g L-1. This increased sensitivity of the organisms exposed to the combination of dyes is noted when compared with organisms exposed to the isolated dye. Seeds exposed to combinations of dyes showed similar mortality seeds exposed to the isolated dye. / CNPq: 159040/2014-0

Dissertação(mestrado)-Universidade Federal do Rio Grande, Programa de Pós-Graduação em Aqüicultura, Instituto de Oceanografia, 2010. / Submitted by Cristiane Silva (cristiane_gomides@hotmail.com) on 2012-07-27T17:53:57Z No. of bitstreams: 1 dissertao de eduardo em pdf.pdf: 149902 bytes, checksum: 3c4a46e26293690177aa2d20d50a32ae (MD5) / Approved for entry into archive by Bruna Vieira(bruninha_vieira@ibest.com.br) on 2012-07-27T18:31:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 dissertao de eduardo em pdf.pdf: 149902 bytes, checksum: 3c4a46e26293690177aa2d20d50a32ae (MD5) / Made available in DSpace on 2012-07-27T18:31:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertao de eduardo em pdf.pdf: 149902 bytes, checksum: 3c4a46e26293690177aa2d20d50a32ae (MD5) Previous issue date: 2010 / Considerando a importância da tainha Mugil platanus Günther, 1880 como fonte de alimento e alternativa de emprego para comunidades locais, este estudo objetiva estabelecer a fauna parasitária e a forma de utilização de M. platanus pelos parasitos, definir a toxicidade do formol e a concentração eficaz para erradicar ou mesmo minimizar a parasitose e, por último, verificar quais as lesões causadas pelo formol e/ou pelos parasitos em juvenis da tainha M. platanus. Quarenta juvenis de tainha M. platanus com peso 1 ± 0,26g e comprimento 4,1 ± 0,4cm foram coletados em arroio na Praia do Cassino, no município de Rio Grande - RS - Brasil. Os hospedeiros foram necropsiados e os ectoparasitos foram fixados em formol 5 %, corados, clarificados e posteriormente montados em lâminas permanentes com bálsamo do Canadá para identificação. Outros foram montados em meio de Grey-Wess para verificação de estruturas esclerotizadas. Os endoparasitos foram fixados em AFA e corados em carmim de Semichon, clarificados e posteriormente montados em lâminas permanentes com bálsamo do Canadá para identificação. Foram identificados Ligophorus cf. uruguayense (Monogenoidea: Ancyrocephalidae) e Solostamenides cf. platyorchis (Monogenoidea: Microcotylidae) nas brânquias. Foram reportados Digenea e Nematoda nos intestinos. A prevalência (P %) de L. cf. uruguayense foi 100 %, a intensidade de infestação (II) variou entre 2 e 110, a intensidade média de infestação (IMI) foi 23,4 e a abundância média (AX) foi 23,4. A prevalência (P %) de S. cf. platyorchis foi 10 %, a intensidade de infestação (II) variou entre 1 e 3, a intensidade média de infestação (IMI) foi 1,5 e a abundância média (AX) foi 0,15. A prevalência (P %) de Digenea foi 92,5 %, a intensidade de infecção (II) variou entre 1 e 40, a intensidade média de infecção (IMI) foi 2,67 e a abundância média (AX) foi 2,47. A prevalência (P %) de Nematoda foi 6,7 %, a intensidade de infecção (II) foi 1, a intensidade média de infecção (IMI) foi 1 e a abundância média (AX) foi 0,07. Os elevados índices de infestação por Monogenoidea e de infecção por Digenea apontam o potencial dano que estes parasitos podem representar nos cultivos. Para analisar a toxicidade do formol para M. platanus e a eficácia deste quimioterápico no controle de parasitos, foram realizados quatro experimentos. Os juvenis foram mantidos em béqueres de 1 L, densidade 8 peixes/ béquer, temperatura da água 21 °C, fotoperíodo 12 h, salinidade da água 5, aeração suave e constante e mantidos em jejum e em observação para análise da sobrevivência. Para determinar a toxicidade do formol aos juvenis foi realizado um teste de toxicidade aguda 96 h, em que os tratamentos foram um controle (sem adição de formol na água) mais 5 concentrações: T1 (5), T2 (8), T3 (15), T4 (30) e T5 (50) mg/L de formol em triplicata. Para verificar a eficácia no controle parasitário foi administrado um banho profilático de 1 h de formol, em que os tratamentos foram um controle (sem adição de formol na água) mais 5 concentrações: T1 (25), T2 (50), T3 (100), T4 (150) e T5 (200) mg/L de formol na água em triplicata. No teste letal de toxicidade aguda, não houve diferença significativa (P > 0,05) entre as réplicas e a temperatura (°C), salinidade, pH, O2 dissolvido na água (mg/L), amônia total (mg/L) e a concentração letal mediana a 50 % (CL50) em 96 h foi estimada em 20,77 mg/L de formol. No banho profilático com formalina durante 1 h, todos os tratamentos foram eficientes eliminando 100 % dos parasitos, exceto no tratamento com 25 mg/L, em que foram identificados L. cf. uruguayense em 13,33 % dos peixes. Houve 100 % de sobrevivência dos hospedeiros em todos os tratamentos, exceto na concentração 200 mg/L em que a sobrevivência foi 87,5 %. Banhos com 25 mg/L de formol durante 1 h são indicados para o controle de S. cf. platyorchis e 50 mg/L para o controle de L. cf. uruguayense, por possuir menor concentração de formol e alta sobrevivência dos peixes. Porém, nenhuma das concentrações testadas é eficiente no controle de endoparasitos. Por último, para determinar as lesões causadas nas brânquias de formol e/ou pelos Monogenoidea, três peixes de cada tratamento, provindos do banho profilático com formol para o controle de parasitoses foram encaminhados para análise histológica. Foi observado que o aumento da concentração de formol causou lesões mais graves nas brânquias. Foi observada hiperplasia leve nos animais mantidos como controle, desprendimento do epitélio respiratório no T2, hiperplasia moderada no T3, aumento da atividade opercular no T4 e necrose, natação errática e mortalidade no T5. Os resultados histopatológicos deste estudo mostram que banhos de 50 mg/L de formol durante 1 hora podem ser aplicados em juvenis de M. platanus para o controle de Monogenoidea, pois nesta concentração, as lesões histológicas causadas nos hospedeiros são leves e a sobrevivência dos juvenis é alta. / Considering the importance of mullet Mugil platanus Günther, 1880 as a food source and alternative employment for local communities, this study aims to establish the parasitic fauna and how M. platanus use by the parasites to define the toxicity of formaldehyde and the effective concentration to minimize or even eradicate the parasites and, lastly, to evaluate the damages caused by formaldehyde and/or parasites in the juvenile mullet M. platanus. Forty juvenile mullet M. platanus weighing 1 ± 0.26 g and length 4.1 ± 0.4 cm were collected in the stream at Cassino Beach, in Rio Grande - RS - Brazil. The hosts were necropsied and the parasites were fixed in 5 % formaldehyde, stained, clarified and subsequently mounted on permanent slides with Canada balsam for identification. Others parasites specimens were mounted in the middle of Gray-Wess to check sclerotic structures. The endoparasites were fixed in AFA and stained with carmine Semichon, clarified and subsequently mounted on permanent slides with Canada balsam for identification. It was identified Ligophorus cf. uruguayense (Ancyrocephalidae) and Solostamenides cf. platyorchis (Microcotylidae) in the gills. It was reported Digenea and Nematoda in the intestines. The prevalence (P %) of L. cf. uruguayense was 100 %, the intensity of infestation (II) ranged between 2 and 110, the average intensity of infestation (IMI) was 23.4 and average abundance (AX) was 23.4. The prevalence (P %) of S. cf. platyorchis was 10 %, the intensity of infestation (II) ranged between 1 and 3, the average intensity of infestation (IMI) was 1.5 and mean abundance (AX) was 0.15. The prevalence (P %) of Digenea was 92.5 %, the intensity of infection (II) ranged between 1 and 40, the average intensity of infection (IMI) was 2.67 and the average abundance (AX) was 2.47. The prevalence (P %) of Nematoda was 6.7 %, the intensity of infection (II) was 1, the mean intensity of infection (IMI) was 1 and mean abundance (AX) was 0.07. High levels of infestation Monogenoidea and infection Digenea point to the potential damage that these bodies may represent the cultures. To analyze the toxicity of formalin to M. platanus and efficacy of chemotherapy in the control of parasites, four experiments were conducted. Juveniles were kept in beakers of 1 liter, density 8 fish/beaker, water temperature 21 °C, 12 h photoperiod, water salinity 5, smooth and constant aeration and maintained at fasting and under observation for survival analysis. To determine the toxicity of formaldehyde was carried out acute toxicity test, in which the treatments were a control (no added formaldehyde in water) and 5 more concentrations: T1 (5), T2 (8), T3 (15), T4 (30) and T5 (50) mg/L of formaldehyde in triplicate. To verify the effectiveness of formaldehyde on parasite control was given a bath of 1 h of the substance in which the treatments were a control (no added formaldehyde in water) and 5 more concentrations of formaldehyde: T1 (25), T2 (50) , T3 (100), T4 (150) and T5 (200) mg/L of formaldehyde in water in triplicate. In the test lethal acute toxicity, no significant difference (P > 0.05) between treatment and temperature (°C), salinity, pH, dissolved O2 in water (mg/L), total ammonia (mg/L) and lethal concentration to 50 % of the sample (LC50) at 96 h was estimated to be 20.77 mg/L of formaldehyde. In the final bath of formaldehyde for 1 h, all treatments were efficient by eliminating 100 % of parasites, except for treatment with 25 mg/L, which were identified L. cf. uruguayense in 13.33 % of the fish. There was 100 % survival of the hosts in all treatments, except at the concentration 200 mg/L in which survival was 87.5 %. Baths with 25 mg/L formaldehyde for 1 h are indicated for the control of S. cf. platyorchis and 50 mg/L for the control of L. cf. uruguayense, because it has lower concentration of formaldehyde and high survival of fish. However, none of the concentrations tested is effective against endoparasites. Finally, to determine the damage caused by formaldehyde in the gills and/or the Monogenoidea, three fish per treatment, coming the final bath of formaldehyde to control parasitosis were sent for histological analysis. It was observed that increasing the concentration of formaldehyde caused more severe lesions in the gills. Mild hyperplasia was observed in animals kept as control, detachment of the respiratory epithelium in T2, moderate hyperplasia in T3, increased opercular activity in T4 and necrosis, erratic swimming and mortality in T5. Histopathological results of this study show that bath of formaldehyde at a concentration of 50 mg/L for 1 hour can be applied to juveniles of M. platanus to control Monogenoidea, because in this concentration, histological lesions caused in the host are lightweight and survival of juveniles is high.

The irrigating solutions used in primary teeth pulpectomies are essential supporters in chemical mechanic preparation, for they come in contact with the dental and periapical tissues, evaluating their biocompatibility is necessary. The aim of this study was to evaluate the in vitro cytotoxicity and genotoxicity of irrigating solutions and pharmacological associations used for sanitizing the root canals of these teeth, by conducting four tests that evaluated the toxicity according to different parameters. Tests of Cell Viability (MTT), Lipid Peroxidation (TBARS), GEMO and Alkaline Comet Assay were performed in the evaluation of major solutions - 1% and 2.5% Sodium Hypochlorite, 2% Chlorhexidine -, auxiliary solutions - 6% Citric Acid and 17% EDTA - and of the associations between major and auxiliary solutions, exposing both human peripheral blood mononuclear cells (MTT, TBARS and Alkaline Comet Assay) in 24h and 72h, and exposing dsDNA, purified calf thymus DNA (GEMO). Data were assessed for normality by Kolmogorov-Smirnov and analyzed by ANOVA followed by post hoc Dunnett's, and Kruskal-Wallis test followed by post hoc Dunn. Values showing p<0.05 were considered statistically significant. Reduction in cell viability was observed in all groups at 24 hours. At 72 hours the reduction has continued, except for EDTA, combinations of (1% and 2.5%) sodium hypochlorite with EDTA (p<0.05) and Chlorhexidine with EDTA (p>0.05). EDTA and 2.5% sodium hypochlorite with EDTA caused lipid peroxidation in 24h, and 1% and 2.5% sodium hypochlorite and three associations with citric acid (p<0.05) had the same effect in 72h. All groups have caused breaks in DNA by Alkaline Comet Assay, 24h and 72h (p<0.05). In the GEMO Test, dsDNA damage was observed in all groups (p<0.05), except for Chlorhexidine with EDTA. Some degree of toxicity was observed in all tested groups. However, Chlorhexidine, among the major solutions, and EDTA, among the auxiliary solutions, were less cytotoxic. Also, the association of these two solutions had less potential toxicity. The results demonstrated the best in vitro biocompatibility in the combination of Chlorhexidine and EDTA. / As soluções irrigantes empregadas na pulpectomia de dentes decíduos são coadjuvantes essenciais no preparo químico mecânico, por entrarem em contato com os tecidos dentários e periapicais, é fundamental a avaliação da biocompatibilidade das mesmas. O objetivo deste estudo foi avaliar a citotoxicidade e a genotoxicidade, in vitro, de soluções irrigantes e associações farmacológicas empregadas na sanificação dos canais radiculares desses dentes, realizando quatro testes que avaliaram a toxicidade analisando diferentes parâmetros. Foram realizados os Testes de Viabilidade Celular (MTT), Peroxidação Lipídica (TBARS), GEMO e Ensaio Cometa Alcalino, na avaliação das soluções principais: Hipoclorito de Sódio 1% e 2,5%, e Clorexidina 2%; e soluções auxiliares: Ácido Cítrico 6% e EDTA 17% e das associações entre as soluções principais e auxiliares, frente às células mononucleadas do sangue periférico humano (MTT, TBARS e Ensaio Cometa Alcalino), em 24h e 72h, e frente ao dsDNA, DNA de timo de bezerro purificado (GEMO). Os dados obtidos foram avaliados quanto à normalidade pelo Kolmogorov-Smirnov e analisados por Anova seguido do post hoc de Dunnett, e Kruskal-Wallis seguido do post hoc de Dunn. Os valores de p<0,05 foram considerados estatisticamente significativos. Foi Observado em 24h, redução na viabilidade celular em todos os grupos. Em 72h a redução se manteve, exceto no EDTA, associações do Hipoclorito de Sódio (1% e 2,5%) com EDTA (p<0,05) e Clorexidina com EDTA (p>0,05). Causaram lipoperoxidação em 24h, EDTA e Hipoclorito de Sódio 2,5% com EDTA e, em 72h, Hipoclorito de Sódio (1% e 2,5%) e as três associações com Ácido Cítrico (p<0,05). Todos os grupos causaram quebra no DNA pelo Ensaio Cometa Alcalino, 24h e 72h (p<0,05). No Teste GEMO foi observado dano ao dsDNA em todos os grupos (p<0,05), exceto Clorexidina com EDTA. Foi observado algum nível de toxicidade em todos os grupos testados. Entretanto, a Clorexidina entre as soluções principais, e o EDTA entre as auxiliares, foram menos citotóxicas. Também, a associação dessas duas soluções apresentou menor potencial de toxicidade. A partir dos resultados ficou demonstrado a melhor biocompatibilidade in vitro da associação de Clorexidina e EDTA.

The purpose of this research was to develop and standardize a novel feeding bioassay with Macrobrachium rosenbergii for use in the laboratory and allowing it to be easily deployed under field conditions. Standardization of the test aimed to minimize feeding rate variations and to ensure that subsequent statistical analyses have sufficient power to consistently detect changes in feeding rates. These were accomplished through the development of a post-exposure feeding toxicity test under laboratory, microcosm and in situ/field conditions. This procedure was proven to be repeatable and economical. M. rosenbergii as test animals were available in terms of quantity and uniformity in sizes. The standard guidelines and procedures for M. rosenbergii bioassay developed from this study include the size of test animals (9-10 mm), density in exposure containers (10 animals in 500 mL of medium in the laboratory, 10 animals in field chambers with 98.6 mL volume), exposure time (24 hours), feeding period for post-exposure feeding (4 hours) and number of replicates for the feeding test (10 replicates for individual measurements). The tiered approach used in the preliminary risk assessment of pesticide using TOXSWA was capable of screening the risk level of pesticide in the study area, identifying profenofos and dimethoate as test chemicals for the lethal and sub-lethal experiments. This model was beneficial in the preliminary risk assessment of pesticides in the tropics, since it was not necessary to set up laboratory work. This method could also provide preliminary data to support the environmental planner and decision/policy maker. This is an alternative way to develop a cost efficient model to inform and warn the risk of pesticide use. The effects of pH, temperature and hardness on control post-exposure feeding rates of M. rosenbergii were assessed and indicated that M. rosenbergii was very sensitive to acidic and basic conditions. The use of post-exposure feeding inhibition as the endpoint under laboratory conditions revealed that prawns were sensitive to pesticides (chlorpyrifos, dimethoate and profenofos) and a heavy metal (zinc). Post-exposure feeding rate inhibition could be used as a sublethal endpoint as the EC50 values obtained for chlorpyrifos and zinc were lower than their lethal levels. Mortality of prawn was also another endpoint used to define the toxicity of pesticides such as carbendazim, in which mortality occurred during exposure, but post-exposure feeding rate of the surviving animals did not decrease. The microcosm experiments were able to link the laboratory toxicity tests and the effects observed in the field. Microcosm studies provided another dimension to studies looking at pesticide effects on aquatic systems. In this research, carbendazim affected feeding and survival rates in the microcosm set-up but in the laboratory only mortality showed a significant difference (P &lt; 0.05). In situ bioassays were able to show the effects of pesticides on post-exposure feeding rates using the methods developed. Post-exposure feeding rates were significantly lower than control in farms using pesticides while in uncontaminated sites (pesticide-free), the post-exposure feeding rates did not decrease. However, mortality was observed even in the uncontaminated sites which could be attributed to other factors such as low dissolved oxygen and presence of some other unidentified chemical substances. The degree of mortality and the effect on feeding rates depends not only on the type and concentration of the known pesticide but also on water quality parameters. The basic methods developed for in situ bioassay from this research is a simple, easy and fast way to determine the effect of pesticides because the results can be seen in the field. The procedures developed and results obtained from this study can be used as a basis for further toxicity studies on M. rosenbergii and other potential tropical species.

A intensificação da degradação ambiental impulsionada pelas atividades antrópicas tem comprometido a qualidade da água. A presença de metais potencialmente tóxicos no ambiente provoca diversos impactos na fauna e flora, como, por exemplo, o processo de magnificação trófica. Assim, é fundamental que estudos de adsorção desses contaminantes sejam realizados, a fim de buscar novos métodos que permitam a remoção dos mesmos no meio aquático. O metal crômio está nos efluentes de diversos processos industriais, como curtumes, refino de petróleo, galvanoplastia, soldagem e cromagem. Esse metal na forma hexavalente possuí efeito tóxico a biota e riscos à saúde humana, indicando a necessidade da realização de estudos para sua remoção de efluentes industriais e corpos d\'água. O biopolímero quitosana tem sido reportado em diversos estudos como bioadsorvente de alto potencial de retenção de metais, por conta da presença de amino-grupos em sua estrutura. Além disso, a quitosana possui propriedades singulares e é obtida da quitina, um dos biopolímeros mais abundantes na natureza. Com a finalidade de avaliar a capacidade de adsorção de Cr (VI) pelo biopolímero quitosana em forma de pérolas (P-QTS), realizou-se ensaios de adsorção em processo contínuo com diferentes concentrações do metal cromo em coluna de leito fixo, preenchida pelo material adsorvente (P-QTS). Além disso, realizou-se testes de toxicidade com os organismos Daphnia magna, Allonais inaequalis e Chironomus xanthus no afluente e efluente da coluna de adsorção, buscando avaliar a toxicidade dessas amostras para os organismos e a consequente eficácia do tratamento da solução de dicromato de potássio na coluna de leito fixo com as P-QTS. As curvas de ruptura indicaram que para as maiores concentrações de K2Cr2O7 houve intensificação da saturação da CALF (coluna de adsorção de leito fixo), e, consequentemente, a zona de transferência de massa (ZTM) se deslocou no sentido descendente do leito fixo da coluna de adsorção. A razão C/Co (concentração efluente/concentração afluente) aumentou de maneira significativa no decorrer do ensaio para as maiores concentrações afluentes (25 e 28,5 mg L-1) de K2Cr2O7 alcançando valores de até 0,4, e, isso demonstra a saturação de parte das P-QTS na coluna de leito fixo. De maneira geral, a remoção de Cr VI foi alta (superior a 50% e atingindo a máxima de 98%) para os tempos estudados na presente pesquisa, sendo maior nos menores tempos (60 e 120 min) do ensaio, estado em que os sítios ativos para adsorção das P-QTS provavelmente estavam livres. Da extração do cromo das P-QTS obteve-se valor máximo de 8,18 mg g-1 e mínimo de 0,42 mg g-1 de massa adsorvida por massa de adsorvente, o que indica variação de acordo com a concentração da solução de K2Cr2O7 afluente a CALF, ou seja, para as maiores concentrações, maior a quantidade adsorvida de Cr VI por massa de adsorvente (P-QTS). Alguns pesquisadores obtiveram relação de 2,6 mg de crômio (III) /g de quitosana indicando que as P-QTS na coluna de leito fixo possuem boa capacidade de adsorção. Os testes de toxicidade mostraram diferentes sensibilidades dos organismos-teste às soluções de dicromato de potássio, sendo na ordem decrescente: Chironomus xanthus < Allonais inaequalis < Daphnia magna. A coluna de adsorção de leito fixo diminuiu, de modo geral, a mortalidade dos organismos-teste comparando o afluente e efluente, principalmente das amostras efluentes de menor tempo (60 e 120 min) de ensaio de adsorção. A média de comprimento das larvas de C. xanthus reduziu (10,07 mm > 8,34 mm > 4,59 mm), de modo geral, a medida que o tempo de ensaio (60, 120 e 180 min) aumentou, indicando aumento da concentração de Cr VI nos efluentes. / The intensification of environmental degradation driven by anthropic activities has led to a decrease in water quality. The presence of potentially toxic metals in the environment causes several impacts on fauna and flora, such as the trophic magnification process. Thus, it is fundamental that adsorption studies of these contaminants are carried out in order to search for new methods that allow their removal in the aquatic environment. Chromium metal is in the effluents of various industrial processes, such as tanning, petroleum refining, electroplating, welding and chrome plating. The chromium in the hexavalent form has a toxic effect on biota and risks to human health, indicating the need to carry out studies to your removal of industrial effluents and water bodies. The biopolymer chitosan has been reported in several studies as bioadsorbent with high potential for metal retention, due to the presence of amino groups in its structure. In addition, chitosan has unique properties and is obtained from chitin, one of the most abundant biopolymers in nature. In order to evaluate the Cr (VI) adsorption capacity of the chitosan biopolymer in the form of beads (P-QTS), adsorption tests were carried out in continuous process with different concentrations of the chromium metal in a fixed bed column, filled by adsorbent material (P-QTS). Besides that, toxicity tests were carried out with the organisms Daphnia magna, Allonais inaequalis and Chironomus xanthus on the affluent and effluent of the adsorption column, seeking to evaluate the toxicity of these samples to the organisms and the consequent effectiveness of the treatment of potassium dichromate solution in the fixed bed column with the P-QTS. The breakthrough curves indicated that for the higher concentrations of K2Cr2O7 there was an increase in the saturation of the CALF (fixed bed adsorption column), and consequently the mass transfer zone (ZTM) moved downwards from the fixed bed of the column of adsorption. The C/Co (affluent concentration/effluent concentration) ratio increased significantly during the test for the highest affluent concentrations, reaching values of up to 0.4 for the affluent concentrations of 25 and 28.5 mg L-1 of K2Cr2O7, and this demonstrates the saturation of part of the P-QTS in the fixed bed column. The removal of Cr VI was high (higher than 50% and reaching a maximum of 98%) for the times studied in the present study, but it was higher in the lower times (60 and 120 min) of the test, in which the active sites for adsorption of P-QTS probably were free. From the extraction of chromium from P-QTS, a maximum value of 8.18 mg g-1 and a minimum of 0.42 mg g-1 was obtained, which indicates variation according to the concentration of the K2Cr2O7 solution affluent to CALF, i.e the adsorbed amount of Cr VI per adsorbent mass (P-QTS) is higher at higher concentrations. Some authors have obtained a ratio of 2.6 mg of chromium (III) / g of chitosan indicating that the P-QTS in the fixed bed column have good adsorption capacity. The toxicity tests showed different sensitivities of the test organisms to the solutions of potassium dichromate, being in descending order: Chironomus xanthus < Allonais inaequalis < Daphnia magna. The fixed-bed adsorption column decreased the mortality of the test organisms by comparing the affluent and the effluent, mainly from the effluent samples with the shortest adsorption test time (60 and 120 min). The mean length of the C. xanthus larvae decreased (10.07 mm> 8.34 mm> 4.59 mm), generally as the test time (60, 120 and 180 min) increased, indicating rise in Cr VI concentration in the effluents.

Ecossistemas marinhos e estuarinos são o destino final de muitos contaminantes, e a ecotoxicologia ainda enfrenta a falta de organismos modelo para esses ambientes. Para desenvolver e apresentar um organismo teste adequado para ser utilizado em estudos de laboratório e campo, métodos para o cultivo, endpoints e biomarcadores devem ser avaliados. O anfípode marinho Parhyale hawaiensis é um modelo para estudos de biologia evolutiva e embrionária, é mundialmente distribuído e fácil de manipular em laboratório e consequentemente um modelo interessante para estudos ecotoxicológicos. O objetivo desse trabalho é padronizar condições de cultivo, teste de toxicidade, e desenvolver biomarcadores no anfípode P. hawaiensis e aplicá-los para avaliar os efeitos de nanopartículas metálicas na exposição via alimentação. As condições de cultivo foram estabelecidas em água salina reconstituída (salinidade 30 ± 2), temperatura de 24 ± 2 oC, fotoperíodo de 12-12h luz/escuro, coral triturado como substrato, alimentação diária com ração de peixe, troca de água parcial e aeração constante. As condições de teste compreendem a utilização de microplaca de 96-poços, organismos <7 dias, um organismo por poço com 200 &#181;L de solução por 96 h. Zinco, cobre, prata, cádmio e amônia foram selecionados como substância teste e a sensibilidade de P. hawaiensis foi similar e dentro da faixa de outros anfípodes marinhos. As condições para expressão gênica em P. hawaiensis foram desenvolvidas para o gene de referência 18S, dois genes de metalotioneínas (MT) e dois genes de glutationa S-transferase (GST). Entretanto, os genes selecionados não foram diferencialmente expressos nas condições testadas. Sendo assim, a análise da expressão gênica global, RNA-seq, foi realizada com organismos adultos alimentados por 7 dias com alimento contaminado com nanopartículas de prata (Ag-NPs), AgCl e controle. A análise da expressão gênica global (RNA-seq) foi conduzida com sucesso e destacou diferenças na resposta entre machos e fêmeas, bem como nos tratamentos com AgCl e Ag-NP. A análise comparativa revelou genes comuns entre as duas formas de Ag estudadas, e mostrou respostas diferentes no tratamento com Ag-NP, portanto, efeitos adversos diferentes são esperados após a exposição à alimentação, e os genes diferencialmente expressos podem ser usados como potenciais biomarcadores. Os resultados demonstraram que P. hawaiensis é um bom modelo para testes de toxicidade com um protocolo miniaturizado e o RNA-seq foi aplicado com sucesso para investigar as diferenças entre a exposição via alimentação com AgCl e Ag-NP e pode revelar potenciais biomarcadores. Além disso, este estudo desenvolveu protocolos e fornece informações moleculares que podem ser usadas em estudos futuros com P. hawaiensis. / Marine and estuarine ecosystems are the final destinations of many contaminants and ecotoxicology still faces the lack of model organisms for these environments. To develop and present a suitable test organism to be used in laboratory and field studies, methods for husbandry, ecotoxicity endpoints and biomarkers should be evaluated. The marine amphipod Parhyale hawaiensis is already a model for development and evolutionary studies, it is worldwide spread and easy to handle in the laboratory and so on an interesting model for ecotoxicology. The aim of this work is to standardize husbandry conditions, toxicity testing, and to develop molecular biomarkers in P. hawaiensis and apply them to evaluate the effect of metal nanoparticles in dietary exposure. The conditions for culturing were established in reconstituted seawater (30 ± 2 salinity), 24 ± 2 oC temperature, photoperiod 12-12 h light/dark, crushed coral as substrate, daily feeding with fish food, partial water exchange and constant aeration. Testing conditions comprised 96-well microplate, <7 days age organisms, one organism in each well containing 200 &#181;L of exposure media for 96 h. Zinc, copper, silver, cadmium and ammonia were selected as toxicants and sensitivity of P. hawaiensis were within the range of other marine amphipods. Gene expression conditions for P. hawaiensis were develop for the reference gene 18S, two metallothioneins (MT) and two glutathione-S-transferase (GST). However, selected target genes, analyzed by RT-qPCR, were not successful to detect differences in our treatment conditions. Thus, global gene expression analysis, RNA-seq, was conducted with adult organisms fed for 7 days to a contaminated food with silver nanoparticles (Ag-NPs), AgCl and control. Results highlighted differences between males and female\'s toxicity responses as well as AgCl and Ag-NP treatments. Comparison analysis revealed common genes expressed in both Ag forms, but also showed differences in Ag-NP treatment with both up and down regulated genes. Analysis are underway to better understand toxicity responses pathways. These results anticipate different responses to both Ag forms investigated, therefore different adverse effects are expected after feeding exposure to AgCl and Ag-NP and significative genes can be used as potential biomarkers. Our results demonstrated that P. hawaiensis is a good model for ecotoxicity tests with a miniaturized protocol and RNA-seq were successful applied to investigate the differences between AgCl and Ag-NP feeding exposure and could reveal promising biomarkers. Moreover, this study developed protocols and provide molecular information that can be used in future studies with P. hawaiensis.

A intensificação da degradação ambiental impulsionada pelas atividades antrópicas tem comprometido a qualidade da água. A presença de metais potencialmente tóxicos no ambiente provoca diversos impactos na fauna e flora, como, por exemplo, o processo de magnificação trófica. Assim, é fundamental que estudos de adsorção desses contaminantes sejam realizados, a fim de buscar novos métodos que permitam a remoção dos mesmos no meio aquático. O metal crômio está nos efluentes de diversos processos industriais, como curtumes, refino de petróleo, galvanoplastia, soldagem e cromagem. Esse metal na forma hexavalente possuí efeito tóxico a biota e riscos à saúde humana, indicando a necessidade da realização de estudos para sua remoção de efluentes industriais e corpos d\'água. O biopolímero quitosana tem sido reportado em diversos estudos como bioadsorvente de alto potencial de retenção de metais, por conta da presença de amino-grupos em sua estrutura. Além disso, a quitosana possui propriedades singulares e é obtida da quitina, um dos biopolímeros mais abundantes na natureza. Com a finalidade de avaliar a capacidade de adsorção de Cr (VI) pelo biopolímero quitosana em forma de pérolas (P-QTS), realizou-se ensaios de adsorção em processo contínuo com diferentes concentrações do metal cromo em coluna de leito fixo, preenchida pelo material adsorvente (P-QTS). Além disso, realizou-se testes de toxicidade com os organismos Daphnia magna, Allonais inaequalis e Chironomus xanthus no afluente e efluente da coluna de adsorção, buscando avaliar a toxicidade dessas amostras para os organismos e a consequente eficácia do tratamento da solução de dicromato de potássio na coluna de leito fixo com as P-QTS. As curvas de ruptura indicaram que para as maiores concentrações de K2Cr2O7 houve intensificação da saturação da CALF (coluna de adsorção de leito fixo), e, consequentemente, a zona de transferência de massa (ZTM) se deslocou no sentido descendente do leito fixo da coluna de adsorção. A razão C/Co (concentração efluente/concentração afluente) aumentou de maneira significativa no decorrer do ensaio para as maiores concentrações afluentes (25 e 28,5 mg L-1) de K2Cr2O7 alcançando valores de até 0,4, e, isso demonstra a saturação de parte das P-QTS na coluna de leito fixo. De maneira geral, a remoção de Cr VI foi alta (superior a 50% e atingindo a máxima de 98%) para os tempos estudados na presente pesquisa, sendo maior nos menores tempos (60 e 120 min) do ensaio, estado em que os sítios ativos para adsorção das P-QTS provavelmente estavam livres. Da extração do cromo das P-QTS obteve-se valor máximo de 8,18 mg g-1 e mínimo de 0,42 mg g-1 de massa adsorvida por massa de adsorvente, o que indica variação de acordo com a concentração da solução de K2Cr2O7 afluente a CALF, ou seja, para as maiores concentrações, maior a quantidade adsorvida de Cr VI por massa de adsorvente (P-QTS). Alguns pesquisadores obtiveram relação de 2,6 mg de crômio (III) /g de quitosana indicando que as P-QTS na coluna de leito fixo possuem boa capacidade de adsorção. Os testes de toxicidade mostraram diferentes sensibilidades dos organismos-teste às soluções de dicromato de potássio, sendo na ordem decrescente: Chironomus xanthus < Allonais inaequalis < Daphnia magna. A coluna de adsorção de leito fixo diminuiu, de modo geral, a mortalidade dos organismos-teste comparando o afluente e efluente, principalmente das amostras efluentes de menor tempo (60 e 120 min) de ensaio de adsorção. A média de comprimento das larvas de C. xanthus reduziu (10,07 mm > 8,34 mm > 4,59 mm), de modo geral, a medida que o tempo de ensaio (60, 120 e 180 min) aumentou, indicando aumento da concentração de Cr VI nos efluentes. / The intensification of environmental degradation driven by anthropic activities has led to a decrease in water quality. The presence of potentially toxic metals in the environment causes several impacts on fauna and flora, such as the trophic magnification process. Thus, it is fundamental that adsorption studies of these contaminants are carried out in order to search for new methods that allow their removal in the aquatic environment. Chromium metal is in the effluents of various industrial processes, such as tanning, petroleum refining, electroplating, welding and chrome plating. The chromium in the hexavalent form has a toxic effect on biota and risks to human health, indicating the need to carry out studies to your removal of industrial effluents and water bodies. The biopolymer chitosan has been reported in several studies as bioadsorbent with high potential for metal retention, due to the presence of amino groups in its structure. In addition, chitosan has unique properties and is obtained from chitin, one of the most abundant biopolymers in nature. In order to evaluate the Cr (VI) adsorption capacity of the chitosan biopolymer in the form of beads (P-QTS), adsorption tests were carried out in continuous process with different concentrations of the chromium metal in a fixed bed column, filled by adsorbent material (P-QTS). Besides that, toxicity tests were carried out with the organisms Daphnia magna, Allonais inaequalis and Chironomus xanthus on the affluent and effluent of the adsorption column, seeking to evaluate the toxicity of these samples to the organisms and the consequent effectiveness of the treatment of potassium dichromate solution in the fixed bed column with the P-QTS. The breakthrough curves indicated that for the higher concentrations of K2Cr2O7 there was an increase in the saturation of the CALF (fixed bed adsorption column), and consequently the mass transfer zone (ZTM) moved downwards from the fixed bed of the column of adsorption. The C/Co (affluent concentration/effluent concentration) ratio increased significantly during the test for the highest affluent concentrations, reaching values of up to 0.4 for the affluent concentrations of 25 and 28.5 mg L-1 of K2Cr2O7, and this demonstrates the saturation of part of the P-QTS in the fixed bed column. The removal of Cr VI was high (higher than 50% and reaching a maximum of 98%) for the times studied in the present study, but it was higher in the lower times (60 and 120 min) of the test, in which the active sites for adsorption of P-QTS probably were free. From the extraction of chromium from P-QTS, a maximum value of 8.18 mg g-1 and a minimum of 0.42 mg g-1 was obtained, which indicates variation according to the concentration of the K2Cr2O7 solution affluent to CALF, i.e the adsorbed amount of Cr VI per adsorbent mass (P-QTS) is higher at higher concentrations. Some authors have obtained a ratio of 2.6 mg of chromium (III) / g of chitosan indicating that the P-QTS in the fixed bed column have good adsorption capacity. The toxicity tests showed different sensitivities of the test organisms to the solutions of potassium dichromate, being in descending order: Chironomus xanthus < Allonais inaequalis < Daphnia magna. The fixed-bed adsorption column decreased the mortality of the test organisms by comparing the affluent and the effluent, mainly from the effluent samples with the shortest adsorption test time (60 and 120 min). The mean length of the C. xanthus larvae decreased (10.07 mm> 8.34 mm> 4.59 mm), generally as the test time (60, 120 and 180 min) increased, indicating rise in Cr VI concentration in the effluents.

Biologiska toxicitetstester utförs genom att exponera en testorganism för olika koncentrationer av kemikalier under en bestämd period. Det finns akuta toxicitetstester och kroniska. Resultat från akuta studier presenteras som EC50-värde (Effect Concentration, affecting 50 % of the population). Tester som används som underlag för riskbedömningar ska utföras på kvalitetsmässigt acceptabelt sätt som grundas på International Organization for Standardization (ISO) och Good Labaratory Practice (GLP). Syftet med studien var att studera toxisk inverkan av kaliumdikromat på encellig sötvattenalg, R. subcapitata, genom att räkna cellantal med två olika instrument: flödescytometer och automatisk cellräknare. Vidare att jämföra testernas EC50 medelvärde mot ISO 8692 angivet värde i precisions syfte och att utvärdera de båda räknemetoderna gällande precision och analystid. Kaliumdikromat användes för tillväxtinhibering vid toxicitetstest. EC50-resultaten visade ingen statistiskt signifikant skillnad mellan de båda instrumenten (p=0,47). Den akuta toxicitetsanalysens precision kunde bekräftas som giltig då båda mätmetoders EC50 medelvärden vid jämförelse med ISO 8692 värde befanns inom bestämda 95% konfidensintervallet. Vid jämförelse av studiens två mätningsmetoder, observerades större spridning kring medelvärdet i cellräknarens resultat, där tre EC50 värden hamnade utanför 95% CI. Däremot visade resultatet från flödescytometern mindre spridning och högre noggrannhet jämfört med cellräknarens. Studien visade att flödescytometer skulle kunna användas i framtida toxikologiska tester med encelliga alger, men det krävs flera upprepade försök för att bekräfta fördelar med analysen i flödescytometern. / Biological toxicity tests are performed by exposing a test organism to different concentrations of chemicals over a certain period of time. Results from acute studies are presented as EC50 (Effect Concentration, affecting 50% of the population). Tests used as a basis for risk assessments shall be performed in a quality acceptable way based on the International Organization for Standardization (ISO) and Good Laboratory Practice (GLP). The aim of this study was to study the toxic effect of potassium dichromate on unicellular green algae R. subcapitata, by counting cells with two different apparatus: flow cytometer and automatic cell counter. Additionally, to compare the EC50 mean values against the ISO 8692 value for control of test precision and to compare accuracy and analytical time of two methods. Potassium dichromate was used for growth inhibition in toxicity tests. The EC50 results showed no statistically significant difference between the two instruments (p = 0.47). The accuracy of acute toxicity analysis was confirmed as valid as both EC50 average measurement values compared to ISO 8692 value were found within the 95% confidence interval. When comparing the two methods of the study, greater spread was observed around the mean value in the cell count's results, where three EC50 values were outside 95% CI. The result of the flow cytometer had less spread and higher accuracy compared to the cell count. The study showed that flow cytometers could be used in future toxicological tests with algae, but several repeated tests are required to confirm the benefits of analysis with the flow cytometer.

The aim of this thesis was to assess the effects of long-term nitrite exposure on mortality, growth rate and blood biochemistry in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss). Furthermore, acute toxicity tests with nitrite were performed on rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) and sheatfish (Silurus glanis). The theoretical part focuses on aquatic toxicology including toxicity evaluation of substances and preparations for water organisms. Detailed information on nitrite are summarized there, namely information on nitrite occurrence and sources in aquatic environment and the mechanism of their uptake and toxic influence on fish including factors influencing their toxicity. The practical part consists of methodology and results of acute toxicity tests on rainbow trout and sheatfish and sub-chronic test on rainbow trout. According to the acute toxicity tests results, 96hLC50 values were estimated at 11.2 mg.l-1 NO2- for rainbow trout and 15.3 mg.l-1 NO2- for sheatfish. Sub-chronic exposure of rainbow trout to nitrite concentrations ranging from 0.01 to 3.0 mg.l-1 lasting 28 days caused an increase of glucose concentration and a decrease of potassium concentration in the blood plasma among all experimental fish compared to control. Elevated nitrite levels were found in the plasma of the fish exposed to concentrations of 0.6 mg.l-1 NO2- and greater. The plasma nitrite levels did not reach those applied in any experimental group in the present study. At highest nitrite concentration (3.0 mg.l-1 NO2-), 42 % growth inhibition and 65 % mortality among fish was noticed. On the basis of growth rate inhibition data, the values of NOEC and LOEC were estimated at 0.01 mg.l-1 and 0.2 mg.l-1 NO2-, respectively.

Ecossistemas marinhos e estuarinos são o destino final de muitos contaminantes, e a ecotoxicologia ainda enfrenta a falta de organismos modelo para esses ambientes. Para desenvolver e apresentar um organismo teste adequado para ser utilizado em estudos de laboratório e campo, métodos para o cultivo, endpoints e biomarcadores devem ser avaliados. O anfípode marinho Parhyale hawaiensis é um modelo para estudos de biologia evolutiva e embrionária, é mundialmente distribuído e fácil de manipular em laboratório e consequentemente um modelo interessante para estudos ecotoxicológicos. O objetivo desse trabalho é padronizar condições de cultivo, teste de toxicidade, e desenvolver biomarcadores no anfípode P. hawaiensis e aplicá-los para avaliar os efeitos de nanopartículas metálicas na exposição via alimentação. As condições de cultivo foram estabelecidas em água salina reconstituída (salinidade 30 ± 2), temperatura de 24 ± 2 oC, fotoperíodo de 12-12h luz/escuro, coral triturado como substrato, alimentação diária com ração de peixe, troca de água parcial e aeração constante. As condições de teste compreendem a utilização de microplaca de 96-poços, organismos <7 dias, um organismo por poço com 200 &#181;L de solução por 96 h. Zinco, cobre, prata, cádmio e amônia foram selecionados como substância teste e a sensibilidade de P. hawaiensis foi similar e dentro da faixa de outros anfípodes marinhos. As condições para expressão gênica em P. hawaiensis foram desenvolvidas para o gene de referência 18S, dois genes de metalotioneínas (MT) e dois genes de glutationa S-transferase (GST). Entretanto, os genes selecionados não foram diferencialmente expressos nas condições testadas. Sendo assim, a análise da expressão gênica global, RNA-seq, foi realizada com organismos adultos alimentados por 7 dias com alimento contaminado com nanopartículas de prata (Ag-NPs), AgCl e controle. A análise da expressão gênica global (RNA-seq) foi conduzida com sucesso e destacou diferenças na resposta entre machos e fêmeas, bem como nos tratamentos com AgCl e Ag-NP. A análise comparativa revelou genes comuns entre as duas formas de Ag estudadas, e mostrou respostas diferentes no tratamento com Ag-NP, portanto, efeitos adversos diferentes são esperados após a exposição à alimentação, e os genes diferencialmente expressos podem ser usados como potenciais biomarcadores. Os resultados demonstraram que P. hawaiensis é um bom modelo para testes de toxicidade com um protocolo miniaturizado e o RNA-seq foi aplicado com sucesso para investigar as diferenças entre a exposição via alimentação com AgCl e Ag-NP e pode revelar potenciais biomarcadores. Além disso, este estudo desenvolveu protocolos e fornece informações moleculares que podem ser usadas em estudos futuros com P. hawaiensis. / Marine and estuarine ecosystems are the final destinations of many contaminants and ecotoxicology still faces the lack of model organisms for these environments. To develop and present a suitable test organism to be used in laboratory and field studies, methods for husbandry, ecotoxicity endpoints and biomarkers should be evaluated. The marine amphipod Parhyale hawaiensis is already a model for development and evolutionary studies, it is worldwide spread and easy to handle in the laboratory and so on an interesting model for ecotoxicology. The aim of this work is to standardize husbandry conditions, toxicity testing, and to develop molecular biomarkers in P. hawaiensis and apply them to evaluate the effect of metal nanoparticles in dietary exposure. The conditions for culturing were established in reconstituted seawater (30 ± 2 salinity), 24 ± 2 oC temperature, photoperiod 12-12 h light/dark, crushed coral as substrate, daily feeding with fish food, partial water exchange and constant aeration. Testing conditions comprised 96-well microplate, <7 days age organisms, one organism in each well containing 200 &#181;L of exposure media for 96 h. Zinc, copper, silver, cadmium and ammonia were selected as toxicants and sensitivity of P. hawaiensis were within the range of other marine amphipods. Gene expression conditions for P. hawaiensis were develop for the reference gene 18S, two metallothioneins (MT) and two glutathione-S-transferase (GST). However, selected target genes, analyzed by RT-qPCR, were not successful to detect differences in our treatment conditions. Thus, global gene expression analysis, RNA-seq, was conducted with adult organisms fed for 7 days to a contaminated food with silver nanoparticles (Ag-NPs), AgCl and control. Results highlighted differences between males and female\'s toxicity responses as well as AgCl and Ag-NP treatments. Comparison analysis revealed common genes expressed in both Ag forms, but also showed differences in Ag-NP treatment with both up and down regulated genes. Analysis are underway to better understand toxicity responses pathways. These results anticipate different responses to both Ag forms investigated, therefore different adverse effects are expected after feeding exposure to AgCl and Ag-NP and significative genes can be used as potential biomarkers. Our results demonstrated that P. hawaiensis is a good model for ecotoxicity tests with a miniaturized protocol and RNA-seq were successful applied to investigate the differences between AgCl and Ag-NP feeding exposure and could reveal promising biomarkers. Moreover, this study developed protocols and provide molecular information that can be used in future studies with P. hawaiensis.