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Potencial de nanopartículas poliméricas de Delonix contendo isotretinoína para o tratamento da acne / Isotretinoin-loaded Delonix polymeric nanoparticles prospects as a delivery tool in the treatment of acneOgunjimi, Abayomi Tolulope 16 February 2018 (has links)
A administração oral de isotretinoína (IST) é eficaz no tratamento da acne; no entanto, seu uso está associado a efeitos adversos, como ressecamento da pele, epistaxe, distúrbios imunológicos e psiquiátricos, enquanto a eficácia da aplicação tópica é prejudicada pela intensa irritação causada na pele. Proteger a IST do contato direto com a pele e direcionar sua liberação para os folículos pilosos, local onde a acne se desenvolve, pode reduzir a irritação e aumentar a eficácia do tratamento. O polímero Delonix (DLX), galactomanano natural derivado da semente de Delonix regia, pode ser manipulado para produzir nanopartículas para a liberação direcionada de IST na pele. Desta forma, o objetivo deste estudo foi desenvolver nanopartículas poliméricas de DLX (IST-DLX) contendo IST e avaliar seu potencial para o tratamento tópico da acne. O DLX foi coletado, purificado e caracterizado quanto a composição de monossacarídeos e massa molecular (MM). Nanopartículas DLX sem IST (branco), nanopartículas fluorescentes de DLX (nanopartículas contendo BODIPY (BOD-DLX)) e nanopartículas IST-DLX foram preparadas e caracterizadas por tamanho, índice de polidispersividade (PdI), potencial zeta (pz) e eficiência de encapsulação (EE). O estudo de liberação in vitro das nanopartículas IST-DLX foi realizado utilizando células de difusão e membrana sintética, enquanto a penetração cutânea das nanopartículas BOD-DLX e IST-DLX foi avaliada por microscopia confocal e tape stripping diferencial em pele de orelha de porco dermatomizada, respectivamente. A influência das nanopartículas IST-DLX na modulação de IL-6, IL-10 e TNF-? foi avaliada in vitro utilizando células de macrófagos AMJ-2 estimuladas com lipopolisacarídeos (LPS) e a atividade antimicrobiana foi avaliada em meio de cultura de Propionibacterium acnes. In vivo, as nanopartículas IST-DLX foram avaliadas quanto a penetração e irritação cutânea em ratos Wistar (protocolo de aprovação CEUA-FCFRP nº 17.5.213.60.3). A MM do polímero DLX foi de ~177 kDa, contendo predominantemente manose e galactose na proporção de 6,3:1. O tamanho das nanopartículas IST-DLX, determinado por dispersão de luz, foi entre 215 a 232 nm, PdI < 0,2, pz < -30 mV e EE > 25%. As nanopartículas IST-DLX sustentaram a liberação da IST, com cerca de 37% de IST sendo liberado em 48 h. As imagens de microscopia confocal mostraram que as nanopartículas BOD-DLX concentraram-se na epiderme e nos folículos pilosos em comparação com a solução de BODIPY livre, a qual permeou até a derme. Foi observada uma penetração de IST significativamente maior e descontrolada em todas as camadas da pele de orelha de porco quando a solução de polímero de IST-DLX foi usada em comparação com um acúmulo de IST menor e controlado quando as nanopartículas IST-DLX foram aplicadas. As nanopartículas IST-DLX direcionaram a IST para os folículos pilosos (26%) em comparação com a solução de IST (6,5%) que permeou por todas as camadas da pele. As nanopartículas IST-DLX reduziram significativamente a produção de IL-6 em células de macrófagos estimuladas por LPS, mesmo após 48 h, em comparação com a solução de IST livre, que reduziu significativamente a produção de IL-6 apenas até 24 h. Tanto as nanopartículas ISTDLX quanto a solução de IST livre não inibiram o crescimento de P. acnes. Não foi observado nenhum sinal de eritema nos ratos tratados com nanopartículas IST-DLX, com ou sem irradiação UVA, enquanto os tratados com solução de IST apresentaram eritema. A espessura da epiderme dos ratos tratados com as nanopartículas foi significativamente menor do que daqueles tratados com IST livre, com ou sem irradiação UVA. Conclui-se que as nanopartículas IST-DLX direcionam e sustentam a liberação de IST na pele em concentrações ótimas, modulam a resposta inflamatória da IL-6 e previnem o eritema inflamatório relacionado ao IST in vivo. Sendo assim, o polímero DLX pode ser considerado um polímero promissor para a liberação sustentada e direcionada de fármacos. / Oral isotretinoin (IST) has been effective in acne treatment; however, its use is associated with side effects such as skin dryness, epistaxis, immune disorder and psychiatric concerns while its topical gel application\'s effectiveness is hampered by irritancy. Protecting IST from direct skin contact and targeting its release to the hair follicles where the acne develops can reduce irritation and increase the effectiveness of treatment. Delonix (DLX) polymer is a natural galactomannan derived from Delonix regia seed that may be engineered to yield nanoparticles for IST skin targeting. Therefore, the aim of this study was to develop IST-loaded DLX (IST-DLX) polymeric nanoparticles and assess its skin targeting prospects for acne treatment. DLX was collected, purified and characterized by monosaccharide composition and molecular weight (Mw). Blank DLX nanoparticles, fluorescent DLX nanoparticles (BODIPY-loaded (BOD-DLX) nanoparticles) and IST-DLX nanoparticles were prepared and characterized by size, polydispersibility index (PdI), zeta potential (zp) and encapsulation efficiency (EE). In vitro release study of IST-DLX nanoparticles was performed using diffusion cells and synthetic membrane, while skin targeting of BOD-DLX and IST-DLX nanoparticles were assessed by confocal microscopy and differential tape stripping technique in dermatomed pig ear skin respectively. IST-DLX polymeric nanoparticles\' IL-6, IL-10 and TNF-? modulation was assessed in vitro using lipopolysaccharide (LPS) stimulated AMJ-2 macrophage cells and antimicrobial activity was assessed in Propionibacterium acnes culture medium. IST-DLX nanoparticles\' skin penetration and irritation were evaluated in vivo in Wistar rats (ethics committee approval protocol CEUA-FCFRP nº 17.5.213.60.3). DLX polymer Mw was ~177 kDa, containing predominantly mannose and galactose in ratio 6.3:1. IST-DLX nanoparticles\' size determined by light scattering was between 215 to 232 nm, PdI < 0.2, zp < -30 mV, EE > 25 %. IST-DLX nanoparticles sustained IST release, with about 37% IST being released in 48 h. Confocal images showed that BOD-DLX nanoparticles accumulated in the epidermis and hair follicles as compared to free BODIPY solution which permeated into the dermis. Significantly higher and uncontrolled IST penetration into all layers of pig ear skin with IST-DLX polymer solution was observed as compared to lower, controlled but optimum IST accumulation into the pig ear skin when IST-DLX nanoparticles were used. IST-DLX nanoparticles targeted the hair follicle (26 %) as compared to IST solution (6.5 %) which permeated through all skin layers. IST-DLX polymeric nanoparticles significantly reduced IL-6 production in LPS stimulated macrophage cells at 48 h as compared to free IST solution which significantly reduced IL-6 production only at 24 h. Both IST-DLX nanoparticles and free IST solution did not inhibit P. acnes growth. No sign of inflammatory erythema was observed in IST-DLX nanoparticles treated Wistar rats with or without UVA irradiation as compared to free IST treated ones. Epidermal thickness of rats treated with IST-DLX nanoparticles was significantly smaller than those treated with free IST with or without UVA irradiation. It can be concluded that IST-DLX nanoparticles can target, deliver and sustain IST release to the skin at optimum concentrations, modulate IL-6 inflammatory responses and may prevent IST related inflammatory erythema in vivo. DLX polymer could be promising polymer for drug delivery.
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Fungos micorrízicos arbusculares e nível de potássio no solo na absorção de 137césio e efeitos na resposta antioxidativa do feijoeiro / Arbuscular mycorrhizal fungi and soil potassium supply on the 137césio uptake and its effects on the antioxidative response of common beanDonha, Riviane Maria Albuquerque 28 February 2014 (has links)
Associações entre fungos micorrízicos arbusculares e plantas hospedeiras podem transferir césio (137Cs) para o vegetal. A mobilidade do césio (Cs+) nos solos e sua similaridade química com o potássio (K+) constituem a principal ameaça à contaminação da vegetação pelo radionuclídeo. Foi realizado experimento com plantas de feijão (Phaseolus vulgaris L.) variedade Iapar Tangará, com o objetivo de avaliar o coeficiente de transferência direta do 137Cs do solo para a planta, a absorção, o transporte e o acúmulo do radionuclídeo 137Cs nas folhas, caule e raízes das plantas, a produção de massa seca do feijoeiro, o diâmetro do caule das plantas, a peroxidação lipídica, avaliar as enzimas do sistema antioxidativo (catalase, ascorbato peroxidase, glutationa redutase e superóxido dismutase), o teor de clorofila em unidade SPAD, em função dos efeitos da: (I) inoculação ou não com fungos micorrízicos arbusculares (FMA) e (II) do nível de potássio em quatro tipos de solos: Nitossolo, Chernossolo, Argissolo e Gleissolo. O delineamento experimental foi o de blocos completos ao acaso, utilizando esquema fatorial de quatro tipos de solo x dois níveis de potássio x presença e ausência de micorrizas com três repetições, totalizando 48 unidades experimentais. Foi calculada a atividade específica do 137Cs no solo e na planta e, por fim, a determinação do coeficiente de transferência direta do 137Cs do solo para o vegetal. Nas plantas cultivadas em Argissolo, Chernossolo e Gleissolo, foi observada maior atividade específica de 137Cs nas raízes do feijão em relação às folhas e ao caule, na condição de baixo nível de potássio e ausência de inoculação de FMA. O coeficiente de transferência solo-planta do 137Cs e a atividade na planta foram maiores no Argissolo e Nitossolo, com baixo teor de potássio e sem a presença de FMA. Constatou-se interação entre os tipos de solo, teor de K e presença de FMA quanto à peroxidação de lipídeos, sendo que houve maior dano nas folhas das plantas cultivadas no Chernossolo, principalmente no tratamento sem aplicação de FMA e com baixo teor de K. Não foi observada interação entre os solos e a inoculação com FMA para a quantificação de peróxido de hidrogênio (H2O2) nas folhas, todavia, constatou-se efeito para os teores de K no solo. Quanto ao sistema enzimático antioxidativo, a atividade da catalase, glutationa redutase, ascorbato peroxidase e superóxido dismutase houve interação entre os tipos de solo, níveis de K e presença ou ausência de FMA. Maior atividade da superóxido dismutase (SOD) foi demonstrada nas plantas cultivadas no Argissolo, sem a presença de FMA, também independente dos teores de K. O aumento nos teores de K nos solos não impediu a transferência direta de 137Cs do solo para as plantas, porém, reduziu a absorção do nuclídeo pelo feijoeiro. O tipo de solo influenciou na disponibilidade de 137Cs às plantas de feijão e por sua vez, nas atividades das enzimas do sistema de defesa da planta. A inoculação com os FMA não foi efetiva para evitar a transferência e a absorção de 137Cs pelas plantas / Associations between arbuscular mycorrhizal fungi (AMF) and host plants might transfer cesium (137Cs) for the plant. The mobility of cesium (Cs+) in soils and their chemical similarity to potassium (K+) are the main threat to contamination of vegetation by radionuclide. Experiment with common bean (Phaseolus vulgaris L.) variety Iapar Tangara was conducted with the objective of evaluating the coefficient of direct transfer of 137Cs from soil to the plant, absorption, transport and accumulation of the radionuclide 137Cs in the leaves, stem and plant roots, the dry mass of bean stem diameter of plants, lipid peroxidation, evaluate the antioxidant system enzymes (catalase, ascorbate peroxidase, glutathione reductase and superoxide dismutase), the content of chlorophyll SPAD unit, due to the effects of: (I) or without inoculation with mycorrhizal fungi (AMF) and (II) the level of potassium in four types of soil: Nitosol Chernosol, Alfisol and Ultisol. The experimental design was a randomized complete block, factorial design using four soil types x two levels of potassium x presence and absence of mycorrhizae with three replications, totaling 48 experimental units. The specific activity of 137Cs in soil and plant and finally, the coefficient of 137Cs direct transfer from soil to plant was calculated. In plants grown in Alfisol and Ultisol Chernosol, higher specific activity of 137Cs in bean roots compared to the leaves and the stem was observed under the condition of low potassium and absence of AMF inoculation. The coefficient of soil-plant transfer of 137Cs activity and yield were higher in the Ultisol and Alfisol with low potassium and without the presence of AMF. Found an interaction between soil types, K content and the presence of AMF as to lipid peroxidation, and there was more damage on the leaves of plants grown at Chernosol, primarily in the treatment without application of AMF and low in K. No interaction between soil and AMF inoculation for quantification of hydrogen peroxide (H2O2) in the leaves was observed, however, it was found to effect the K in the soil. As for the antioxidant enzyme system, the activity of catalase, glutathione reductase, ascorbate peroxidase and superoxide dismutase was no interaction between soil types, levels of K and the presence or absence of AMF. Increased activity of superoxide dismutase (SOD) has been demonstrated in plants grown in Ultisol without the presence of AMF, independent of the levels of K. The increase of K in the soil did not prevent the direct transfer of 137Cs from soil to plants, however, reduced the uptake of the nuclide by bean. Soil type influenced the availability of 137Cs to bean plants and in turn, the enzyme activities of the plant defense system. Inoculation with AMF was not effective to prevent the transfer and uptake of 137Cs by plants
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Identificação de genes diferencialmente expressos em feijoeiro envolvidos na resistência ao estresse hídrico / Identification of differentially expressed genes in common bean involved in drought stress resistanceRecchia, Gustavo Henrique 03 June 2011 (has links)
O Brasil é o segundo maior produtor de feijão, sendo a espécie mais cultivada o Phaseolus vulgaris L. Entre as três possíveis safras exploradas no Brasil, aquela que gera a maior produção é a da seca. Por outro lado, como a maioria das lavouras emprega pouca tecnologia, um dos problemas desta cultura é o estresse hídrico, que leva a uma redução na produtividade. Dessa forma, a identificação de genes que controlam os mecanismos de defesa e adaptação do feijoeiro à falta de água seria de grande utilidade. Nos últimos anos, muitas informações ômicas do feijoeiro foram geradas, criando uma visão integrada deste organismo e oferecendo uma complexa rede de interações entre genes e seus produtos. Este trabalho teve como objetivo central à identificação de genes diferencialmente expressos no sistema radicular de um genótipo de feijoeiro resistente ao estresse hídrico (BAT 477), quando submetido a uma interrupção de irrigação durante seu desenvolvimento. Foi construída uma biblioteca subtrativa de cDNA (SSH), que representou os genes diferencialmente expressos no genótipo resistente, utilizando-se como driver o genótipo Carioca 80SH (suscetível a seca). Foram obtidos 1572 reads válidos, sendo 931 destes singletons e 189 contigs com uma média de seis reads por cluster. A anotação das sequências foi conduzida via BLASTX, sendo consideradas para anotação somente os melhores resultados dos produtos gênicos similares com E- Value \'<OU=\' 10-5. A classificação funcional foi feita tendo-se como base modelos descritos para plantas (modelo CS e MIPS) e os resultados foram agrupados em seis classes funcionais distintas. As análises de bioinformática ajudaram na identificação de genes descritos como envolvidos na resposta da planta ao estresse hídrico. Entre eles: proteínas do grupo LEA; fatores de transcrição como DREB, NAC e proteínas ricas em leucina; enzimas sintetizadoras de carboidratos incluindo trehalose, sacarose e rhamnose; proteínas ricas em prolina; receptores de hormônios (ABA, etileno); aquaporinas; chaperonas; ubiquitinas; nodulinas; e proteínas associadas à fotossíntese e à respiração. A fim de se obter a validação das ESTs anotadas, foi conduzido um experimento de PCR em tempo real confrontando os padrões de expressão de 15 genes sob quatro tratamentos: ambos os genótipos sob estresse e respectivos controles. Três replicatas biológicas foram adotadas e dois genes de referência (act e skip2) foram escolhidos para normalização interna dos dados. Os padrões de expressão gênica obtidos confirmam a hipótese de que tais genes são mesmo mais expressos no genótipo resistente, embora não sejam exclusivos já que uma quantidade menor de tais transcritos também foi detectada no genótipo suscetível / Brazil is the second biggest producer of common bean, being Phaseolus vulgaris L. the most cultivated species. Among the three possible harvests exploited in Brazil, drought is the one which generates the greatest production. On the other hand, as the majority of the households employees low technology, one of the problems of this culture is drought stress that leads to a reduction in the productivity. So, the identification of gene that controls the mechanisms of defense and adaptation of common bean to the lack of water would be very useful. In the past years, many omics information of common bean have been generated, creating an integrated view of this organism and providing a complex network between genes and its products. The main goal of this work was the identification of differentially expressed genes in a genotype of common bean resistant to drought stress (BAT 477), when submitted to a interruption of irrigation during its development. It was build a cDNA suppression subtractive hybridization library (SSH), which represented the differentially expressed genes, on the resistant genotype, having as driver the genotype Carioca 80SH (susceptible to drought). It was obtained 1572 valid reads, being 931 singletons and 189 contigs, with the average of 6 reads per cluster. The sequences annotation was conducted via BLAST X, considering only the best similarity results with E value \'<OU=\' 10-5. The functional classification was done adopting models described for plants (CS and MIPS) and the results were grouped into six different functional classes. Bioinformatic analyses contribuited to the identification of genes described as involved on plants response to drought stress. Among them: LEA proteins; transcription factors like DREB, NAC and leucine-rich proteins; carbohydrates synthesizers enzymes like the ones for trehalose, sucrose and rhamnose; proline-rich proteins; hormone receptors (ABA and ethylene); aquaporins; chaperones; ubiquitins; nodulins; and proteins associated with photosynthesis and respiration. In order to validate the ESTs annotated, a RT-qPCR experiment was conducted comparing the expression patterns of 15 genes under four treatments: both genotypes under stress and their respective controls. Three technical replicates were used and two reference genes (act and skip2) were chosen for intern data normalization. The gene expression patterns obtained confirm the hypothesis that such genes are more expressed on the resistant genotype although they are not exclusive since a lower levels of these transcripts were also detected in the susceptible genotype
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Caracterização e síntese dos inibidores de α-amilase do feijão (Phaseolus vulgaris) / Characterization and synthesis of alpha amylase inhibitor from beans (Phaseolus vulgaris)Iguti, Antonia Miwa 30 April 1993 (has links)
Inibidores de alfa amilase de feijão (Phaseolus vulgaris) foram caracterizados. O inibidor da variedade Jalo apresentou peso molecular de 50kDa (por filtração em gel), ponto isoelétrico de 4,75 e 9,6% de carboidratos. O inibidor da variedade Argentino apresentou peso molecular de 48kDa, ponto isoelétrico de 4,90 e 7,6% de carboidratos. Ambos inibidores apresentaram pH ótimo de interação com alfa amilase pancreática de porco de 5,0 e, a pH 6,9, a complexação com a mesma enzima se deu na proporção de 1:1. Esses resultados, mais a composição de aminoácidos, indicaram que as características desses inibidores são semelhantes às de outros já purificados de diferentes variedades de feijão. As principais diferenças entre o IA do Jalo e do Argentino, foram observadas através de termogramas, do teor de carboidratos e dos ensaios imunológicos. Além disso, são sintetizados entre 20 e 30 dias após a floração, sendo que o processo ocorre simultaneamente ao da síntese das proteínas de reserva do grão. Inibidores purificados das variedades Jalo, Argentino e Rico 23, em diferentes fases do desenvolvimento, indicaram ausência de grandes alterações estruturais durante esse processo. / α-amylase inhibitors of bean (Phaseolus vulgaris) were characterized. The amylase inhibitor from Jalo had molecular weight of 50 kDa (by gel filtration), an isoeletric point of 4.75 and a carbohydrate content of 9.6%. Argentino presented molecular weight of 48 kDa, an isoeletric point of 4.90 and a carbohydrate content of 7.6%. The optimum pH for inhibition of porcine pancreatic α-amylase for both inhibitors was about 5.0 and they formed 1:1 stoichiometric complex. These results and the amino acid composition indicated that these inhibitors have characteristics similar to others already purified from beans. They were synthesized between 20 and 30 days after anthesis and this process occurred simultaneously to the storage proteins synthesis. Purified inhibitors from seeds in different phases of development indicated lack of great structural changes during this process.
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ARRANJOS E POPULAÇÕES DE PLANTAS E SUA INFLUÊNCIA EM CARACTERÍSTICAS AGRONÔMICAS E NA PRODUTIVIDADE DE FEIJÃODrehmer, Mario Henrique 21 December 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-12-21 / The bean crop yield can be substantially affected by row spacing and sowing density. Aiming to evaluate the effect of different plant populations and row spacing in the yield components and bean crop yield, there were four experiments, differing by cultivars type and sowing time in the city of Ponta Grossa, PR, in the years 2013 and 2014. The experimental design in both sowing time (water and dry) and two cultivars (IPR-Uirapuru and IPR-Tangara) was a randomized block in a factorial scheme (2 x 5), two spacing (22 and 45 cm between rows) with five densities (5, 8, 11, 14, 17 plants per row meter). It was evaluated the components of yield and yield of crop. In the first sowing time in both cultivars it was observed that the reduction of row spacing resulted in reducing the number of pods per plant and number of grains per pod, while the thousand grain weight was little affected by variations in
arrangements population. In both cultivars yield differences were observed between seeding rates, however, only the cultivar IPR-Uirapuru had difference between the spacings. The yield was lower in the spacing of 45 cm between rows only in 5 plants per meter density. In the second sowing time the yield components and crop yield were affected by plant spacing, and
this influence was less about the weight of a thousand grains. In the second sowing time was not observed yield differences for cultivars depending on the row spacing. At this time, only
the IPR-Tangara showed yield differences between the plant densities. For both cultivars, in the first and the second sowing time, 11-14 plants per meter, which is the recommendation for
culture, obtained the best yields, while reducing the spacing between rows did not offer benefits because it did not increase cultivars yields and require greater investment in seeds
and possible machine adaptations for reduced spacing. The spacing and density of recommendations can be used in both sowing time. / A produtividade da cultura do feijão pode ser substancialmente afetada pelo espaçamento entre fileiras e a densidade de semeadura. Com o objetivo de avaliar a influência de diferentes
densidades de semeadura e espaçamentos entre fileiras nos componentes de produção e na produtividade da cultura do feijão, realizaram-se quatro experimentos, diferindo pela cultivar
e época de semeadura, no município de Ponta Grossa, PR, nos anos de 2013 e 2014. O delineamento experimental utilizado nas duas épocas (águas e secas) e nas duas cultivares
(IPR-Uirapuru e IPR-Tangará) foi de blocos casualizados, em esquema fatorial (2 X 5),espaçamentos de 22,0 e 45,0 cm entre fileiras com densidades de 5, 8, 11, 14 e 17 plantas por
metro de fileira. Foram avaliados os componentes da produção e a produtividade de grãos da cultura. Na primeira época de semeadura, em ambas as cultivares observou-se que a
diminuição do espaçamento entre fileiras resultou na redução do número de vagens por planta e número de grãos por vagem, enquanto que a massa de mil grãos foi pouco afetada pelas
variações de arranjos populacionais. Nas duas cultivares foram observadas diferenças de produtividade entre as densidades de semeadura, entretanto, somente na cultivar IPRUirapuru
ocorreu diferença entre os espaçamentos, em que, a produtividade foi menor no espaçamento de 45 cm entre fileiras somente na densidade de cinco plantas por metro linear.
Na segunda época de semeadura os componentes da produção e a produtividade foram afetados pelo arranjo de plantas, sendo que esta influência foi menor sobre a massa de mil grãos. Na segunda época de semeadura não foram observadas diferenças de produtividade para as cultivares em função do espaçamento entre fileiras. Nesta época, somente a cultivar IPR-Tangará apresentou diferença de produtividade entre as densidades de semeadura. Para as duas cultivares semeadas tanto na primeira quanto na segunda época, densidades de 11 a 14 plantas por metro linear, que é a recomendação para a cultura obtiveram as melhores produtividades, enquanto que a redução do espaçamento entre fileiras não ofereceu benefícios, pois não aumentou a produtividade das cultivares e exigiria um maior
investimento em sementes e possíveis adaptações de máquinas para o espaçamento reduzido. As recomendações de espaçamento e densidade podem ser utilizadas tanto na primeira como na segunda época de cultivo.
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Etude et optimisation de bioaccumulation de Mg2+ dans les microalgues « Chlorella vulgaris » / Bioaccumulation of Mg2+ by microalgae under different culture conditionsBen Amor, Hela 26 October 2015 (has links)
Des cultures de Chlorella vulgaris ont été réalisées en triplicata sur de longues périodes (15-30 jours) en autotrophie et en mixotrophie afin d’étudier l’effet de Mg2+ sur les microalgues et déterminer sa concentration dans la biomasse au cours de la croissance. Différentes concentrations ont été testées (de 8.9 à 465 mg L-1). Ceci a montré que le Mg2+ n’est pas toxique pour les algues à des concentrations élevées provoquant habituellement l’inhibition de la croissance dans le cas d’autres ions divalents (métaux lourds). Des bilans matière ont été établis et vérifiés avec une précision satisfaisante (écart moyen de 90%). La quantité de Mg2+ bioaccumulée augmente avec la concentration initiale de Mg2+ du milieu de culture. Une saturation en Mg2+ intracellulaire a été observée à partir d’environ 45 mg de Mg2+ L-1. Typiquement, la répartition entre le Mg2+ extracellulaire et intracellulaire est de 18% contre 51% dans le bioréacteur (5L) pour une concentration initiale de 16 mg L-1. En mixotrophie (addition de 10 g L-1 de glucose), une production de biomasse significativement plus importante et plus rapide que celle en autotrophie a été observée. En revanche, la quantité de Mg2+ accumulée dans les cellules est plus importante en autotrophie qu’en mixotrophie. Des mesures de chlorophylle a, de nitrate et de glucose ont été également réalisées. Afin de comprendre la cinétique relativement complexe de bioaccumulation du Mg2+, un modèle cinétique original a été élaboré couplant transfert (externe, membrane, interne) et réactions (ad/absorption) en milieu hétérogène. Le modèle a été validé expérimentalement. Il permet de rendre compte au mieux de l’ensemble des résultats obtenus. / Chlorella vulgaris cultures were grown in triplicate over 15-30 days under autotrophic or mixotrophic conditions in order to study Mg2+ uptake and accumulation into the biomass. The concentrations of Mg2+ tested were 8.9 to 465 mg L-1. The results showed that Mg2+ is not toxic to C. vulgaris even at 465 mg L-1 which is not the case for other divalent ions (especially heavy metals). The mass balances for Mg2+ accumulation were determined for the cultures and were confirmed to an average of 90%. Beyond 46.1 mg of Mg2+ L-1 in the culture medium, the cells became saturated at 4 mg of Mg2+ absorbed per g of dry biomass. In the bioreactor (5L), at an initial Mg2+ concentration of 16 mg L-1, the cells accumulated 69% of the initial concentration, in which 18% was adsorbed and 51% absorbed. The chlorophyll a, nitrate and glucose concentrations were measured during the experiments. Under mixotrophic conditions (glucose 10 g L-1), a greater and faster biomass production was obtained than under autotrophic conditions. The Mg2+ bioaccumulation was higher in the autotrophic rather than the mixotrophic phase. In order to understand the kinetics of Mg2+ uptake, an original kinetic model was developed coupling the transfer and reaction phenomena in heterogeneous media. This model was confirmed experimentally.
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Antagonismo a Macrophomina phaseolina e promoção do crescimento em feijoeiro mediados por Trichoderma spp. / Antagonism to Macrophomina phaseolina and growth promotion in common bean mediated by Trichoderma spp.Broetto, Laline 01 March 2013 (has links)
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Previous issue date: 2013-03-01 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Charcoal rot caused by Macrophomina phaseolina is a disease that occurs in a large number of plant species and besides not being economically controlled by fungicides, no genetic resistance has been found. On the other hand, there is a growing awareness of the proper handling of pesticides or of the search for new and environmentally safer technologies for handling of plant diseases. Therefore this study aimed to select isolates of Trichoderma sp. for biological control of M. phaseolina and to evaluate their mechanisms of antagonism, as well as its effect as growth promoter of common bean. Seventeen isolates of Trichoderma sp. were used, in two in vitro tests: direct confrontation with the pathogen and production of volatile compounds. After the in vitro tests, six isolates that showed increased aggressiveness to the pathogen were selected and tested in vivo for effectiveness in controlling M. phaseolina and capacity of promoting common bean growth. The isolates TI1, TM3, TM4, TLB2, TLB3, TLB9, TLB15 and TLB17 showed antagonism against M. phaseolina in direct confrontation, and the isolates TM2, TLB2, TLB12, TLB15 and TLB17 reduced the mycelial growth of the pathogen in the volatile compounds test. Regarding microsclerotia of the pathogen, all the isolates were capable of reducing their production. The isolates TI1, TM3, TLB3, TLB12 and TLB17 were good growth promoters of common bean and the isolates TI1, TM3, TLB2, TLB3, TLB12 and TLB17 increased production per plant, especially the isolate TLB12. Regarding the protection of common bean against M. phaseolina, the isolates TLB2, TLB3, TLB12 and TLB17 were efficient. Fungi of the genus Trichoderma show effectiveness in controlling M. phaseolina and stimulate growth and increase the production of common bean / Podridão de carvão causada por Macrophomina phaseolina é uma doença que ocorre em muitas espécies de plantas e, além de não ser controlada economicamente por fungicidas, nenhuma resistência genética foi encontrada. Por outro lado, existe uma crescente conscientização no manejo correto do uso de defensivos agrícolas ou na busca por novas tecnologias de manejo de doenças de plantas ambientalmente mais seguros. Sendo assim, este trabalho teve como objetivo selecionar isolados de Trichoderma sp. para controle biológico de M. phaseolina e avaliar seus mecanismos de antagonismo, bem como, seu efeito como promotor de crescimento do feijoeiro. Foram utilizados dezessete isolados de Trichoderma sp., em dois testes in vitro: confronto direto com o patógeno e produção de compostos voláteis. Após os testes in vitro, seis isolados que apresentaram maior agressividade ao patógeno foram selecionados e testados in vivo quanto à eficiência no controle de M. phaseolina e capacidade de promoção do crescimento do feijoeiro. Os isolados TI1, TM3, TM4, TLB2, TLB3, TLB9, TLB15 e TLB17 apresentaram antagonismo contra M. phaseolina no confronto direto, sendo que os isolados TM2, TLB2, TLB12, TLB15 e TLB17 reduziram o crescimento micelial do patógeno no teste dos compostos voláteis. Em relação aos microescleródios do patógeno, todos os isolados foram capazes de reduzir sua produção. Os isolados TI1, TM3, TLB3, TLB12 e TLB17 foram bons promotores de crescimento do feijoeiro, e os isolados TI1, TM3, TLB2, TLB3, TLB12 e TLB17 aumentaram a produção de grãos por planta, com destaque para o isolado TLB12. Em relação à proteção do feijoeiro contra M. phaseolina, os isolados TLB2, TLB3, TLB12 e TLB17 foram eficientes. Fungos do gênero Trichoderma apresentam eficiência no controle de M. phaseolina e estimulam o crescimento e aumento da produção do feijoeiro
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Atividade inseticida de produtos químicos e alternativos sobre insetos-praga da cultura do feijoeiro comum / Insecticide activity of chemicals and alternative products over pests-insects of common bean cropPratis, Samara Brandão Queiroz 19 February 2016 (has links)
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Previous issue date: 2016-02-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The study of ecosystem to be handled and the procedures that are realized which limiting the population pest is a determining factor to success of seed production. This analysis aim evaluate the pest fluctuation of beans crop (Phaseolus vulgaris L.) in two harvest, being submitted to application of chemical and alternative products with insecticide action in differents phenological stages of crop. The experiment was conducted in a randomized block design, with four replications and ten treatments, which were: water, pyroligneous extract, cassava, neem, spiromesifen, imidacloprid + beta-cyflutrin, zeta cypermetrin, thiamethoxam + lambda-cyalotrin, thiamethoxam e teflubenzuron. The entomological estimation were made accounting every living insects, with the aid of magnifying glass (10 times) and a shake cloth (1 m). Regarding the agronomic parameters that were analyzed: number of plants per area, height plant, pod numbers per plant, number of seeds per pod, thousand seeds weight and productivity. Was concluded that both chemical and alternative inseticide products have the potential to influence the populations of insect pests D. speciosa, B. tabaci, P. includens, E. kraemei e Orthoptera spp. in two different bean crop. Although low the population means of E. heros, N. viridula and P. includens, they diverged from the behavior of other species sampled , so why, if presented with rising populations, after receiving treatments spiromesifen, zeta cypermetrin, thiamethoxam + lambda-cyalotrin and teflubenzuron, indicating a possible tolerance to insecticides. Regarding the agronomic analysis showed that the average yields, differ from one another, speculating that there was a phytosanitary control through the use of insecticide products, which indirectly influencing this variable / O estudo do ecossistema a ser manejado e dos procedimentos realizados que limitam a população de pragas é fator determinante para o sucesso da produção de grãos. O objetivo desse trabalho foi avaliar o comportamento da população de pragas no feijoeiro manejadas com inseticidas químicos e alternativos, além de avaliar o comportamento da cultura, manejada com a aplicação dos produtos inseticidas. O experimento foi conduzido em delineamento de blocos casualizados, com dez tratamentos e quatro repetições, os quais foram: água, extrato pirolenhoso, manipueira, nim, espiromesifeno, imidacloprido + beta-ciflutrina, zeta cipermetrina, tiametoxan + lambda-cialotrina, tiametoxan e teflubenzuron. As avaliações entomológicas foram feitas por meio de levantamentos das pragas, contabilizando-se todos os insetos vivos, com o auxílio de uma lupa (aumento de 10 vezes) e um pano de batida (1 m) de comprimento. Em relação ás variáveis agronômicas, foram analisadas as seguintes características: número de plantas por área, altura de plantas, números de vagens por planta, número de grãos por vagem, massa de mil grãos e produtividade. Conclui-se que ambos os produtos químicos e alternativos com ação inseticida, têm potencial de influenciar as populações dos insetos-pragas D. speciosa, B. tabaci, P. includens, E. kraemei e Orthoptera spp. na cultura do feijoeiro em duas safras. Apesar de baixas as médias populacionais de E. heros, N. viridula e P. includens, essas divergiram do comportamento das demais espécies amostradas, isso por que, apresentaram-se com populações ascendentes, após receberem os tratamentos espiromesifeno, zeta cipermetrina, tiametoxan + lambda-cialotrina e teflubenzuron, indicando uma possível tolerância aos inseticidas.
Em relação as análises agronômicas, observou-se que as médias das produtividades final, diferiram umas das outras, especulando ter havido um controle fitossanitário através do uso dos produtos inseticidas, influenciando indiretamente essa variável.
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Isolamento, identificação e avaliação do potencial de leveduras como agentes de proteção de plantas de feijoeiro ao crestamento bacteriano comum / Isolation, identification and evaluation of potential the yeast in bean crop agents to common bacterial blightHeling, Anderson Luis 24 February 2016 (has links)
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Previous issue date: 2016-02-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Various organisms can be used for biological control and host plant resistance induction to pathogens, among them, the yeasts. This study aimed to insulation and identify yeasts residents of phyloplan, test the potential of these insulator in production of volatile and non-volatile composts which can interfere with the development of colonies of X. axonopodis pv. phaseoli in vitro, and test these insulators in vivo in a greenhouse, for its effect on the severity of the common bacterial blight in beans, and also evaluate other factors related to productivity. The insulation of the yeast was carried from leaf and floral tissues of plants grown in environments, free use of pesticides. The identification of the insulator was based on biochemical tests and whose profile was compared to CBS-Knaw Fungal Biodiversity Centre. To evaluate the aggression of the insulator, was evaluated the production of volatile and non-volatile pairing and cultures. In a greenhouse all insulators were tested on bean plants where applied treatments on leaves and inoculated the pathogen on all leaf as well as in the first trifoliate. The severity of the common bacterial blight was evaluated in both sheets to verify that occurred the biological control of the disease and/or a possible induction of resistance. Based on this test was selected six insulators to be tested in the field in the dry season (2014/2015) and in rainy season (2015/2016), so that, there were three applications of treatments in all air part of the treated plants, and evaluated the severity of blight common bacterial as well as factors related to productivity. There was obtained 54 yeasts insulators, 42 of these were identified. All isolates showed in vitro production of non-volatile compounds capable of reducing the development of colonies of X. axonopodis pv. phaseoli. Of the 54 isolates, 47 had production of volatile compounds, in vitro, and were able to reduce the development of pathogen colonies. In greenhouse, 35 isolates had control of common bacterial blight. The Isolates Zygoascus hellenicus AH 05-5 and Rhodotorula aurantiaca AH12-3 promoted an induction susceptibility to disease. The Isolates Cryptococcus laurentii AH 01-1, Rhodotorula glutinis AH 14-3 and Sporidiobolus johnsonii AH 16-1 had reduced AUDPC of common bacterial blight in bean plants grown in the field, however, the control of this disease did not result in increased productivity / Diversos organismos podem ser utilizados para controle biológico de doenças e indução de resistência de plantas a patógenos, dentre estes, as leveduras. Este trabalho teve como objetivo isolar e identificar leveduras residentes do filoplano, testar o potencial destes isolados na produção de compostos voláteis e não voláteis que podem interferir no desenvolvimento de X. axonopodis pv. phaseoli in vitro, bem como em condições de casa de vegetação e a nível de campo, verificar seu efeito na severidade do crestamento bacteriano comum em feijoeiro, bem como outros fatores relacionados a produtividade. O isolamento das leveduras foi realizado a partir do filoplano e órgãos florais de plantas cultivadas em ambientes sem uso de agrotóxicos. A identificação dos isolados foi realizada com base em testes bioquímicos e cujo perfil foi comparado ao disponível no CBS-Knaw Fungal Biodiversity Centre. Para avaliar a capacidade dos isolados avaliou-se a produção de compostos voláteis e não voláteis e pareamento de culturas. Em casa de vegetação todos os isolados foram testados em plantas de feijoeiro onde se aplicou os tratamentos nas folhas primárias e inoculou-se o patógeno nestas folhas assim como no primeiro trifólio. Avaliou-se a severidade do crestamento bacteriano comum em ambas as folhas para se verificar se ocorreu o controle biológico da doença e/ou uma possível indução de resistência. Com base neste teste selecionou-se seis isolados para serem testados a campo na safra da seca (2014/2015) e também na safra das águas (2015/2016), para isto, foram realizadas três aplicações dos tratamentos em toda parte aérea das plantas tratadas, sendo avaliada a severidade do crestamento bacteriano comum além de fatores relacionados a produtividade. Obteve-se 54 isolados de leveduras, destes 42 foram identificados. Todos os isolados apresentaram, produção de compostos não voláteis capazes de reduzir o desenvolvimento de X. axonopodis pv. phaseoli. Dos 54 isolados, 47 apresentaram produção de compostos voláteis e foram capazes de reduzir o desenvolvimento do patógeno. Em casa de vegetação, 35 isolados apresentaram controle do crestamento bacteriano comum. Os isolados Zygoascus hellenicus AH 05-5 e Rhodotorula aurantiaca AH12-3 promoveram uma indução de suscetibilidade a doença. Os isolados Cryptococcus laurentii AH 01-1, Rhodotorula glutinis AH 14-3 e Sporidiobolus johnsonii AH 16-1 apresentaram redução da área abaixo da curva de progresso da doença em plantas de feijoeiro cultivadas a campo, no entanto, o controle desta doença não resultou no incremento de produtividade
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Aplicação de fungicidas e Trichoderma asperellum para o manejo de doenças do feijoeiro comum / Fungicide application in Trichoderma asperellum for the management of the common bean diseasesNunes, Meirieli 26 February 2016 (has links)
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Previous issue date: 2016-02-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The aim of this study was to evaluate the effects of the application of chemical and alternative products in the control of anthracnose and bacterial blight common and the agronomic characteristics of the bean. The experimental design was a randomized block design with eight treatments and four replications. The treatments were: control; Trichoderma asperellum; Copper hydroxide; Trifloxystrobin + Prothioconazole; Trifloxystrobin + tebuconazole; + Thiophanate methyl ester; Pyraclostrobin and Fentin Hydroxide, for both experiments (crop harvest of the waters and dry), all applied in V4 and R6 stage. The cultivar used was the IPR Tangara. Compared to control plants treated with copper hydroxide, the two growing seasons, in general, they had less severe in the pods, both anthracnose and for the common bacterial blight. Plants treated with T. asperellum, the two growing seasons, in general, showed the severity pods for both anthracnose and for the common bacterial blight similar plants that have been treated with Trifloxystrobin + Prothioconazole fungicides, Trifloxystrobin + Tebuconazole, thiophanate + Methyl, Fentin hydroxide and Pyraclostrobin. During the spring, plants treated with Trifloxystrobin + Prothioconazole showed higher grain yield, although not differ from other fungicides. During the spring, plants were treated with T. asperellum and plants that have been treated with fungicides, were statistically similar productivity except the plants treated with Trifloxystrobin + Prothioconazole. In the season of drought, plants treated with Trifloxystrobin + Tebuconazole, Thiophanate Methyl +, Pyraclostrobin Hydroxide and Fentin had higher grain yield, but did not differ from other chemical treatments and plants that have been treated with T. asperellum / O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da aplicação de produtos químicos e alternativo no controle da antracnose e crestamento bacteriano comum e nas características agronômicas do feijoeiro. O delineamento experimental utilizado foi o de blocos casualizados, com oito tratamentos e quatro repetições. Os tratamentos utilizados foram: Testemunha; Trichoderma asperellum; Hidróxido de cobre; Trifloxistrobina + Protioconazol; Trifloxistrobina + tebuconazol; Tiofanato + Metílico; Piraclostrobina e Hidróxido de Fentina, para ambos os experimentos (safra das aguas e safra da seca), todos aplicados no estádio V4 e R6. A cultivar utilizada foi a IPR Tangara. Em relação a testemunha, plantas tratadas com Hidróxido de Cobre, nas duas épocas de cultivo, de maneira geral, apresentaram menor severidade nas vagens, tanto para a antracnose, como para o crestamento bacteriano comum. Plantas tratadas com T. asperellum, nas duas épocas de cultivo, de maneira geral, apresentaram severidade nas vagens, tanto para a antracnose, como para o crestamento bacteriano comum semelhante as plantas que foram tratadas com os fungicidas Trifloxistrobina + Protioconazol, Trifloxistrobina + Tebuconazol, Tiofanato + Metílico, Hidróxido de Fentina e Piraclostrobina. Na safra das águas, plantas tratadas com Trifloxistrobina + Protioconazol, apresentaram maior produtividade de grãos, apesar de não diferir dos demais fungicidas. Na safra das águas, plantas que foram tratadas com T. asperellum e plantas que foram tratadas com fungicidas, tiveram produtividade estatisticamente semelhante, exceto as plantas tratadas com Trifloxistrobina + Protioconazol. Na safra da seca, plantas tratadas com Trifloxistrobina + Tebuconazol, Tiofanato + Metílico, Piraclostrobina e Hidróxido de Fentina apresentaram maior produtividade de grãos, porém não diferiu dos demais tratamentos químicos e das plantas que foram tratadas com T. asperellum
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