Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2016-09-20T04:46:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 341095.pdf: 11367627 bytes, checksum: 2c3b9f15845adbb7096b5aaf941d7ff5 (MD5) Previous issue date: 2016 / Os cocristais apresentam-se como uma estratégia que utiliza a química no estado sólido para modificar as propriedades físico-químicas de fármacos sem a necessidade de mudar sua estrutura molecular. Os cocristais também são conhecidos por apresentarem alta solubilidade aquosa em relação ao fármaco constituinte. Além disso, seu principal benefício está na habilidade em modular a solubilidade. Neste contexto, cocristais compostos de meloxicam, fármaco do tipo zwiteriônico, e coformers ácidos (ácido salicílico e ácido maleico) foram produzidos e utilizados como modelo nos estudos de solubilidade e de estabilidade termodinâmica de cocristais. Os resultados das técnicas de caracterização no estado sólido demonstraram que os cocristais de meloxicam foram obtidos com sucesso. Os diagramas de solubilidade de fases apresentados indicam que os cocristais estudados são mais solúveis que o meloxicam. O cocristal meloxicam-ácido salicílico apresentou aumento de solubilidade de 18 a 146 vezes em relação ao meloxicam em uma faixa de pH de 1 a 8, enquanto que o cocristal meloxicam-ácido maleico apresentou aumento de 305 a 41689 vezes na mesma faixa de pH. Atráves dos estudos de solubilização micelar com lauril sulfato de sódio foi possível observar que o meloxicam apresentou dependência linear da concentração de agente solubilizante, enquanto que os cocristais apresentaram dependência não linear. A vantagem de solubilidade do cocristal em relação ao fármaco (SA=Scocristal/Sfármaco) de meloxicam-ácido salicílico foi reduzida a 1 na presença de 104 mM de lauril sulfato de sódio. A presença deste aditivo induziu pontos de transição do cocristal (CSC e S*), acima dos quais a vantagem de solubilidade do cocristal foi eliminada. O cocristal meloxicam-ácido maleico apresentou redução da SA de 305 para 8 na presença de 104 mM de lauril sulfato de sódio. Estes resultados evidenciam a influência dos aditivos micelares na solubilidade e estabilidade destes sistemas. Os estudos de dissolução permitiram observar os estados de supersaturação promovidos pelos cocristais em soluções de pH 1,0 com aumento signifivo da concentração de meloxicam em solução. A presença de lauril sulfato de sódio em solução de pH 1,0, garantiu maior concentração de meloxicam por maior período de tempo durante a dissolução de meloxicam-ácido maleico em comparação com a solução sem o agente solubilizante. A utilização de Soluplus® prolongou a supersaturação deste mesmo cocristal e diminuiu a cristalização cinética, demostrando ser um aditivo promissor em formulações farmacêuticas com cocristais. Além disso, os modelos matemáticos desenvolvidos descrevem a solubilidade do fármaco e dos cocristais em soluções aquosas e micelares com ótimo poder preditivo, confirmado através da comparação dos valores calculados com os resultados experimentais.<br> / Abstract : Cocrystals have emerged as a useful strategy that uses solid-state chemistry to modify the physicochemical properties of drugs without changing their molecular structure. Aqueous cocrystal solubility can be orders of magnitude higher than that of the constituent drug. Furthermore, their main attribute consists in the ability of fine-tuning the solubility. In this context, cocrystals composed of meloxicam, a zwitterionic drug, and acidic coformers (salicylic acid and maleic acid) were obtained and used as a model for solubility and thermodynamic stability studies. The results of the solid state characterization techniques demonstrated that meloxicam cocrystals were successfully obtained. The phase solubility diagrams presented indicate that the cocrystals studied are more soluble than meloxicam. The meloxicam-salicylic acid cocrystal was 18 to 146 times more soluble than meloxicam at pH ranges from 1 to 8, whereas meloxicam-maleic acid cocrystal was 305 to 41689 times more soluble in the same pH range. Through micellar solubilization studies with sodium lauryl sulfate it was observed that meloxicam solubility is linearly dependent on solubilizing agent concentration, whereas cocrystal solubility exhibits nonlinear dependence. The cocrystal solubility advantage over drug (SA=Scocrystal/Sdrug) for meloxicam-salicylic acid was reduced to 1 in the presence of 104 mM sodium lauryl sulfate. The presence of this additive induced cocrystal transition points (CSC and S*), above which the cocrystal solubility advantage was eliminated. Meloxicam-maleic acid exhibited a SA reduction from 305 to 8 in the presence of 104 mM sodium lauryl sulfate. These results demonstrated the influence of micellar surfactants on the solubility and stability of these systems. Dissolution studies allowed the observation of the supersaturation generated by cocrystals in pH 1,0 solutions, with a significant increase of meloxicam concentration in solution. The presence of sodium lauryl sulfate in the pH 1,0 solutions assured a higher concentration of meloxicam for a longer period of time during meloxicam-maleic acid dissolution compared to solutions without solubilizing agent. The use of Soluplus® sustained the supersaturation of this same cocrystal and decreased the kinetic crystallization, showing to be a promising additive for pharmaceutical formulations with cocrystals. In addition, the mathematical models developed describe drug and cocrystals solubility in aqueous and micellar solutions with excellent predictive power, confirmed through the comparison of calculated values and experimental results.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Farmácia / Made available in DSpace on 2012-10-18T12:47:27Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-09-25T19:47:51Z : No. of bitstreams: 1 181634.pdf: 2824725 bytes, checksum: 3070c726a2610a2ca1f9822641b988f8 (MD5)

Orientadora : Profª. Drª. Francinete R. Campos / Co-orientador : Prof. Dr. Roberto Pontarolo / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa: Curitiba, 28/02/2014 / Inclui referências / Área de concentração: Insumos, medicamentos e correlatos / Resumo: A epilepsia é uma doença caracterizada por crises convulsivas, cujo tratamento é realizado com drogas chamadas de anticonvulsivantes. O topiramato é um anticonvulsivante de nova geração que tem seu uso geralmente associado com outros anticonvulsivantes de terapia já bem estabelecida, como fenitoína e fenobarbital. A terapia combinada é uma das formas mais eficazes de controle da doença, porém podem ocorrer interferências na metabolização desses fármacos visto que apresentam a mesma via de metabolização: hepática. Além disso, fatores intrínsecos de cada paciente podem modificar a resposta esperada para cada um dos fármacos, aumentando a incidência de efeitos colaterais. Assim, há a necessidade de desenvolvimento de métodos capazes de monitorar a concentração de topiramato e suas associações na circulação de cada paciente possibilitando o delineamento de protocolos de tratamento individualizados. A saliva surge como matriz ideal para este tipo de análise, uma vez que permite uma coleta simples, fácil e bem aceita para os pacientes. Assim, foi desenvolvido e validado um método por cromatrografia líquida de alta eficiência acoplada a espectrometria de massas sequencial (CLAE-EM/EM) capaz de monitorar as concentrações de topiramato, fenitoína e fenobarbital em matrizes de plasma e saliva. Para isso 30 ?L de amostra de plasma e saliva branco foram fortificados com topiramato, fenitoína e fenobarbital, seguido do processo de extração por precipitação de proteína com solução acetonitrila:água (90:10 v/v) contendo 1 mM de formiato de amônio. Posteriormente, foram injetados 20 ?L do sobrenadanteem um cromatógrafo Agilent 1200 acoplado ao espectrômetro de massas do tipo triplo quadrupolo API 3200 da ABSciex, provido de fonte de ionização por electrospray (ESI), operado no modo negativo de ionização. Pelo experimento de Multiple Reaction Monitoring (MRM) foram definidas as transições dos íons a serem utilizadas nas análises: m/z 338?78 e m/z 338?96 para o topiramato, m/z 251?102 e m/z 251?77 para fenitoína, m/z 231?85 e m/z 231?188 para o fenobarbital e m/z 357?327 e m/z 357?123 para o padrão interno (prednisona). A separação cromatográfica foi obtida em uma coluna C18 XBridge (150 x 2,1 mm i.d; 5 ?m) e pré-coluna (XBridge C18, 10 x 2,1 mm i.d; 5 ?m), sendo a fase móvel constituída de solução de NH4HCO2 1mM pH7,4 (A) e ACN (B) submetidos ao seguinte gradiente de eluição: t0min.: 50% A; t0,01-4,5 min.: 25% A; t4,5-8,5 min.: 50% Aem um fluxo de 0,2 mL min-1. O método desenvolvido foi validado para as matrizes de plasma e saliva, com excelentes resultados de precisão, exatidão e linearidade (r>0,99) para análises na faixa de 2,5 a 300 ng mL-1 de topiramato, de 5 a 500 ng mL-1 de fenitoína e de 50 a 200 ng mL-1 de fenobarbital. Assim, foi disponibilizado um método confiável, simples, rápido e de baixo custo para monitoramento terapêutico de topiramato e associações em matrizes de plasma e saliva. Palavras chave: topiramato, fenitoína, fenobarbital, epilepsia, saliva, plasma, monitoramento terapêutico, CLAE-EM/EM. / Abstract: Epilepsy is a disorder characterized by seizures and the treatment is performed with drugs called anticonvulsants. Topiramate is an anticonvulsant of new generation which has its use generally associated with other already well established anticonvulsant, such as phenytoin and phenobarbital. Combination therapy is one of the most effective ways to control the disease, but interference may occur in the metabolism of these drugs since they exhibit the same metabolic pathway: liver. In addition, each patient's intrinsic factors can modify the expected response for each drug, increasing the incidence of side effects. Thus, there is a need to develop methods to monitor the concentration of topiramate and their associations in the plasma circulation of each patient allowing the design of individualized treatment protocols. The saliva appears as optimal for this type of array analysis, as it allows a simple, easy and well accepted way to collect samples from the patients. Thus, was developed and validated a method for high efficiency liquid cromatrografia coupled to tandem mass spectrometry (HPLC-MS/MS) able to monitor the concentrations of topiramate, phenytoin and phenobarbital in plasma and saliva matrices. To this 30 ?L of plasma and saliva sample were fortified white topiramate, phenytoin and phenobarbital, followed by the extraction process by protein precipitation solution with acetonitrile: water (90:10 v / v) containing 1 mM ammonium formate. Subsequently, 20 ?L of the supernatant was injected into a liquid chromatograph Agilent 1200 coupled to a triple quadrupole mass spectrometer API 3200 ABSciex, equipped with electrospray ionization source (ESI) operated in the negative ionization mode. For the experiment Multiple Reaction Monitoring (MRM) transitions of ions to be used in the analysis were identified: m / z 338 ? 78 and m / z 338 ? 96 for topiramate, m / z 251 ? 102 and m / z 251 ? 77 to phenytoin , m / z 231 ? 85 and m / z 231 ? 188 for phenobarbital and m / z 357 ? 327 and m / z 357 ? 123 for internal standard (prednisone ) . The chromatographic separation was obtained on a XBridge C18 column (150 x 2.1 mm id, 5 mM) and guard column ( XBridge C18, 10 x 2.1 mm id , 5 mM ), the mobile phase consisting of a solution of 1 mM NH4HCO2 pH 7,4 (A) and ACN (B) subjected to the following elution gradient : t0min : 50% A; t0.01- 4,5min : 25% A; t4,5 - 8,5min.: 50% A at a flow rate of 0.2 ml min- 1. The method was validated for plasma and saliva matrices, with excellent results of precision, accuracy and linearity (r> 0.99) for analysis in the range of 2.5 to 1 to 300 ng ml- 1 topiramate , 5 to 500 ng ml- 1 and phenytoin from 50 to 200 ng ml- 1 of phenobarbital . Thus was provided a reliable, simple, rapid and low cost method for therapeutic drug monitoring of topiramate and associations in plasma and saliva samples. Keywords: topiramate, phenytoin, phenobarbital, epilepsy, saliva, plasma, therapeutic monitoring, LC-MS/MS

Orientador : Prof. Dr. Tomoe Nakashima / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa: Curitiba, 07/02/2014 / Inclui referências / Área de concentração: Insumos, medicamentos e correlatos / Resumo: O presente estudo descreve a análise fitoquímica, bem como algumas análises biológicas do óleo essencial, extratos de folhas, caule e cascas do tronco de Eucalyptus elata, espécie de origem australiana, porém cultivada e adaptada nas regiões Sul e Sudeste do Brasil. O seu principal uso reside na madeira de excelente qualidade que a espécie fornece, sendo a mesma utilizada para a produção de celulose e papel, pela indústria de madeira serrada e laminada, e por apresentar rápido crescimento pode ser utilizada para o reflorestamento. A espécie produz grandes quantidades de óleo essencial, fato também relacionado com outras espécies do mesmo gênero. Porém, não foram encontrados estudos na literatura a respeito de sua composição química, bem como, das atividades biológicas que seus extratos e óleo essencial poderiam apresentar. O intuito desta pesquisa foi realizar a abordagem fitoquímica de diferentes partes da planta, para investigar os metabólitos presentes e a possível atividade biológica de E. elata. O material vegetal foi coletado no período do outono na Embrapa Florestas, localizada no município de Colombo, região metropolitana de Curitiba, Paraná. Pela técnica de hidrodestilação foi realizada a extração do óleo essencial, na qual foi obtido um rendimento de 5,4 mL% de óleo essencial nas folhas secas e de 2,7 mL% nas folhas frescas. A análise fitoquímica, realizada com os extratos hidroalcoólicos e aquosos das folhas, caule e cascas do tronco, revelaram a presença de flavonóides, taninos hidrolisáveis e condensados, leucoantocianidinas, aminogrupos, ácidos fixos, esteróides e/ou triterpenos, saponinas e glicosídeos antociânicos. Pelo método do fosfomolibdênio, o padrão-referência ácido gálico foi o que apresentou a maior capacidade antioxidante total, bem como a maior porcentagem de atividade antioxidante relativa, seguido da fração acetato de etila das cascas e, sendo superior ao padrão-referência rutina. Entretanto, pelo método do DPPH, a fração butanol das folhas e o extrato bruto das cascas mostraram um maior valor de porcentagem de atividade antioxidante, valor este superior aos encontrados para os padrões-referência, ácido ascórbico, rutina e ácido gálico. Neste mesmo ensaio, a fração acetato de etila das folhas revelou o valor de CE50 próximo aos encontrados para os padrões-referência. Na avaliação da atividade antimicrobiana utilizando oito cepas comumente estudadas, sendo destas quatro bactérias gram-positivas, gramnegativas e quatro espécies de leveduras, para o método da difusão foi obtido resultado positivo apenas para o óleo essencial. Pela metodologia da microdiluição, os extratos exibiram atividade antimicrobiana, mas com valores de CIM apresentando uma atividade moderada a fraca em todos os casos. Para a avaliação da atividade hemolítica, foi realizado o teste da difusão em agar sangue, no qual o óleo essencial foi o único capaz de provocar a formação de halos de hemólise, entretanto, pelo ensaio em tubos de sangue, nenhuma das amostras provocou rompimento dos eritrócitos. Avaliando os resultados obtidos, são recomendados estudos adicionais visando à utilização desta espécie como um fitoterápico e matéria-prima para a indústria farmacêutica. / Abstract: The present study describes the phytochemical analysis, as well as some biological analyzes of the essential oil, extracts of leaves, stems and the trunk’s bark of Eucalyptus elata, species of Australian origin, but adapted and grown in the South and Southeast of Brazil. Its main use lies in the wood of excellent quality that provides the species, being the same used for the production of pulp and paper industry of lumber and laminate, and because of its rapid growth, can be used for reforestation. The species produces large amounts of essential oils, fact also related to other species of the same genre, but no studies were found in the literature regarding its chemical composition, neither biological activities of its extracts and essential oil could present, being thus, the aim of this research was to perform phytochemical screening of different parts of the plant, to investigate the metabolites present in them and the possible biological activity of E. elata. The plant material was collected in the autumn at Embrapa Forestry, located in the city of Colombo Curitiba’s metropolitan region, Paraná. The essential oil was extracted by hydrodistillation technique, which was obtained in a yield of 5.4 mL% essential oil in dry leaves and 2.7 mL% in fresh leaves. Phytochemical analysis, performed with the hydroalcoholic and aqueous extracts of leaves, stems and bark of the trunk, revealed the presence of flavonoids, hydrolysable tannins and condensed leucoanthocyanidins, amino groups, fixed acids, sterols and / or triterpenes, saponins, glycosides and anthocyanin. By the method of phosphomolybdenum the standard reference gallic acid showed the most antioxidant capacity as well as the highest percentage of relative antioxidant activity, followed by ethyl acetate fraction of the bark and, above the standard reference rutin. However, by the DPPH method, the butanol fraction of crude extract of leaves and bark showed a higher percentage of antioxidant activity, higher than those found for the standard references, ascorbic acid, gallic acid and rutin. In this same test, the ethyl acetate fraction of the leaves showed the EC50 value close to that found for the standard-reference. In the evaluation of antimicrobial activity using eight strains commonly studied, and these four gram-positive bacteria, gram-negative and four species of yeast, for the diffusion method, the only positive result was obtained with the essential oil. However, the microdilution methodology, the extracts also exhibited antimicrobial activity, but with MIC values showing a moderate to weak activity in all cases. To evaluate the hemolytic activity, a test was realized with the blood agar diffusion, in which the essential oil from the dried leaves was the only one capable of causing the formation of halos of hemolysis, however, with the test tubes of blood, none of the samples caused disruption of erythrocytes or showed hemolytic activity. Evaluating the results, additional studies are recommended to use this species as an herbal medicine and raw materials for the pharmaceutical industry.

Orientador : Prof. Dr. Obdulio Gomes Miguel / Co-orientadora : Profª. Drª. Marilis Dallarmi Miguel / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa: Curitiba, 31/03/2011 / Inclui referências / Área de concentração: Insumos, medicamentos e correlatos / Resumo: Solidago microglossa DC, conhecida popularmente como arnica do mato, é uma planta medicinal bastante utilizada na América do Sul graças às suas propriedades antiinflamatórias, analgésicas e cicatrizantes. Apesar do amplo uso, existem poucos relatos na literatura envolvendo sua composição química bem como estudos caracterizando suas atividades biológicas e toxicológicas. Neste contexto, o presente trabalho tem por objetivo atender a esses requisitos contribuindo para o controle de qualidade de um fitoterápico à base de arnica por meio do desenvolvimento de um método analítico por CLAE-DAD. Com base na caracterização fitoquímica desta espécie, isolou-se uma substância, a qual foi analisada por espectroscopia de absorção no ultravioleta, ressonância nuclear magnética de 1H e 13C e espectrometria de massas, sendo esta identificada como quercetina-3- ramnosídica (quercitrina). Este flavonóide possui propriedades antiinflamatórias comprovadas, fato este que pode justificar o uso popular deste extrato. Em virtude destas propriedades e da grande quantidade desta substância encontrada nos extratos medicinais, esta foi considerada o marcador fitoquímico desta espécie. Para sua quantificação um método rápido e sensível foi desenvolvido utilizando como fase estacionária uma coluna Zorbax Bonus RP (100 x 3,0 mm, 3,5 ..m de partícula). A fase móvel consistiu em um gradiente linear entre acetonitrila (A) e solução a 0,5% de ácido fórmico (B) iniciando com 10% de A até 60% de A em 8 min. O fluxo foi de 1,3 mL min-1 e o volume de injeção de 10 µL. A temperatura do forno foi mantida em 35º C e detecção realizada em 346 nm. Parâmetros de validação indicaram que o método é linear, preciso, exato e robusto dentro do intervalo compreendido entre 10 a 100 ..g.mL-1. Os ensaios de atividades biológicas revelaram uma potente capacidade antioxidante do extrato bruto e das frações clorofórmio, acetato de etila e hidroalcoólica por meio do método da redução do complexo do fosfomolibdênio e do radical DPPH. O extrato bruto exerceu ainda influência positiva sobre a atividade da enzima tirosinase, indicando uma possível utilização no tratamento de patologias pigmentares. Além dos efeitos benéficos, estudos de toxicidade revelaram que o extrato bruto é inativo frente ao microcrustáceo Artemia salina. A baixa toxicidade foi também observada por meio de ensaios pré-clínicos envolvendo a ingestão do extrato em ratos Wistar. Neste caso, não foram evidenciadas alterações significativas nos parâmetros bioquímicos e hematológicos, comprovando sua segurança no caso de exposição aguda ao fitoterápico. Palavras-chaves: Solidago microglossa, arnica do mato, quercitrina, atividade antioxidante, tirosinase, toxicidade, CLAE. / Abstract: Solidago microglossa DC, popularly known as arnica bush, is a medicinal plant widely used in South America because of its anti-inflammatory, analgesic and healing properties. Despite its widespread use, there are few studies about its chemical composition and the characterization of its biological and toxicological activities. In this context, the goal of this paper is to provide these requirements, and contribute to the quality control of a medicine based on arnica. This is possible by developing an analytical method by HPLC-DAD. Based on the phytochemical characterization of this species, a substance was isolated. It was analyzed by ultraviolet absorption spectroscopy, nuclear magnetic resonance of 1H and 13C NMR and mass spectrometry. It was identified as quercetin-3-rhamnosidic (quercitrin). This flavonoid has proven anti-inflammatory properties, a fact that may justify the popular use of its extract. Because of these properties and the large quantity of this substance found in medicinal extracts, this was considered the phytochemical marker of this species. To the quantification, a rapid and sensitive method was developed using as stationary phase Zorbax Bonus RP column (100 x 3.0 mm, 3.5 mm in particle). The mobile phase consisted of a linear gradient of acetonitrile (A) and a solution of 0.5% formic acid (B) starting with 10% A to 60% A in 8 min. The flow was 1.3 mL min-1 and the injection volume was 10 uL. The oven temperature was maintained at 35 ° C and the detection was performed at 346 nm. Validation parameters indicated that the method is linear, precise and accurate within the range from 10 to 100 ..g.mL-1. The biological activities test revealed a potent antioxidant capacity of the crude extract and chloroform, ethyl acetate and water-alcohol fractions, by the method of reducing the phosphomolybdenum complex and DPPH radical. The crude extract also demonstrated a positive influence on the activity of tyrosinase enzyme, indicating the possibility to use the extract in the treatment of pigmentary disorders. Besides the beneficial effects, toxicity studies revealed that the crude is inactive against brine shrimp. Low toxicity was also observed in pre-clinical trials involving the ingestion of the extract by rats. In this case, there were no significant changes in biochemical and hematological parameters, confirming its safety in cases of acute exposure to the herbal medicine. Key words: Solidago microglossa, arnica bush, quercitrin, antioxidant, tyrosinase, toxicity, HPLC

Orientadora : Profª. Drª. Tomoe Nakashima / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa: Curitiba, 05/09/2014 / Inclui referências / Área de concentração: Insumos, medicamentos e correlatos / Resumo

Orientador : Prof. Dr. Roberto Pontarolo / Co-orientadora : Profª. Drª. Ana Carolina Melchiors / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa: Curitiba, 24/02/2014 / Inclui referências / Área de concentração: Insumos, medicamentos e correlatos / Resumo: Serviços farmacêuticos quando centrados no cuidado ao paciente têm sido associados a uma melhoria nos resultados de saúde. Além disso, o acesso aos serviços farmacêuticos é facilitado por meio das farmácias comunitárias, que estão abertas todos os dias e devem dispor, sempre, de um profissional farmacêutico responsável para atender a população. Assim, para que o proposto seja alcançado, faz-se necessário o estabelecimento de padrões de qualidade para garantir que os serviços sejam eficazes, permitam o acesso aos pacientes e que ainda identifique os aspectos que necessitam de melhorias. Entretanto, não há no Brasil um modelo com critérios de qualidade para serviços farmacêuticos, cuja aplicação possa ser visualizada por meio de uma análise espacial. Desse modo, o objetivo geral do trabalho foi realizar uma análise espacial da qualidade dos serviços farmacêuticos prestados em farmácias comunitárias, da satisfação dos usuários com os mesmos e correlacioná-los. Para o desenvolvimento da matriz de indicadores de qualidade, procedeu-se consulta a um conjunto de pesquisadores da área, via e-mail, para que pudessem avaliar se os critérios levantados, por meio de uma revisão da literatura científica, contribuíam para a avaliação da qualidade do serviço farmacêutico. Além da seleção, os pesquisadores deveriam avaliar a contribuição de cada critério para qualidade do serviço. Após os ajustes necessários, dos indicadores de qualidade considerados válidos, foram construídos questionários para avaliação da qualidade. Os questionários foram aplicados aos farmacêuticos atuantes nas farmácias comunitárias localizadas no município de São Mateus-ES, bem como, avaliou-se a satisfação do usuário, por meio da aplicação do Questionário de Satisfação com os Serviços da Farmácia, aos usuários que haviam acabado de receber o serviço e, também, com aqueles presentes em locais públicos do município. Para análise espacial, obtiveram-se as coordenadas geográficas das farmácias e procedeu-se a digitalização da área de estudo utilizando o SIG Idrisi Andes edition®. A análise estatística foi realizada com auxílio do software estatístico SPSS v17.0. Após a análise dos pesquisadores a matriz final de indicadores de qualidade continha 77 critérios distribuídos em cinco indicadores de qualidade: estrutura, processos, acessibilidade, serviços farmacêuticos e atualização farmacêutica. Os critérios pertencentes a cada indicador possuem pesos de acordo com a intensidade de importância para a qualidade do serviço farmacêutico. Das 51 farmácias participantes, apenas 29,4% (15) eram de rede e 90,2% (46) funcionavam de 8 a 16 horas por dia. As farmácias apresentaram alto grau de similaridade entre si e ainda não realizavam serviços farmacêuticos clínicos, não seguindo padrões básicos de qualidade, ofertando ao público um pouco mais do que um serviço aceitável. A disposição geográfica das mesmas ressalta a importância de uma distribuição homogênea e coerente desses estabelecimentos. Os resultados de satisfação dos usuários confirmam com os dados de qualidade obtidos nas farmácias, pois a maioria dos usuários não sabe ou não são atendidos pelos farmacêuticos e, ainda, consideram como fator de preferência a qualidade do atendimento e a localização da farmácia. Palavras chaves: Serviços farmacêuticos. Farmácias comunitárias. Avaliação da qualidade. Indicadores. Análise espacial. Satisfação dos usuários. / Abstract: Pharmaceutical services when centered in patient care have been associated with an improvement in health outcomes. Furthermore, access to pharmaceutical services is facilitated through community pharmacies, which are open every day, and should have, always, a pharmacist in charge to serve the population. So to that proposed to be achieved, it is necessary to establish quality standards to ensure that services are effective, enabling access to patients and to identify the aspects that still need improvement. However, in Brazil there is a model with quality standards for pharmaceutical services, the application of which can be viewed through a spatial analysis. Thus, the overall objective was to perform a spatial analysis of the quality of pharmaceutical services in community pharmacies, their satisfaction with them and correlate them. For the development of quality indicators matrix, proceeded to query a set of researchers, via email, so they could assess whether the criteria obtained through a review of scientific literature, contributing to the assessment the quality of pharmaceutical services. Besides the selection, researchers should assess the contribution of each criterion for quality of service. After the necessary adjustments, quality indicators considered valid questionnaires to assess quality were built. The questionnaires to acting in community pharmacies located in São Mateus- ES pharmacists were applied as well, we evaluated user satisfaction through the application of Questionnaire Satisfaction with Pharmacy Services, users who had just receive the service and also to those found in public places in the municipality. For spatial analysis, we obtained geographical coordinates of pharmacies and proceeded to scan the study area using GIS Idrisi Andes edition®. Statistical analysis was performed using the statistical software SPSS v17.0. After analyzing the researchers the final array of quality indicators contained 77 criteria divided into five quality indicators: structure, processes, accessibility, pharmaceutical services and pharmaceutical update. The criteria belonging to each display feature weights according to the intensity of importance to the quality of service pharmacist. Of the 51 participating pharmacies, only 29.4% (15) was 90.2% and the network (46) operated from 8 to 16 hours a day. Pharmacies presented a high degree of similarity and not performed clinical pharmacy services, not following basic quality standards, offering the public a little more than acceptable service. The geographical arrangement of the same underscores the importance of a coherent and homogeneous distribution of these establishments. The results of user satisfaction with confirmed quality data obtained in pharmacies because most users do not know or are not serviced by pharmacists and also considered as the preferred service factor and the location of the pharmacy. Key-words: Pharmaceutical services. Community pharmacies. Quality assessment. Indicator matrix. Spatial analysis. User satisfaction.

Orientadora : Profa. Dra. Shirley Ramos da Rosa Utiyama / Coorientadora : Profa. Dra. Iara Taborda de Messias-Reason / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa: Curitiba, 30/09/2014 / Inclui referências / Área de concentração: Análises Clínicas / Resumo: A artrite reumatoide (AR) e uma doenca autoimune inflamatoria cronica, com distribuicao familiar, fortemente associada ao aparecimento precoce de autoanticorpos, cuja concomitancia se relaciona a um pior prognostico da doenca. A via alternativa (VA) do sistema complemento tem importante participacao no processo inflamatorio da AR e o fator B (BF) constitui a proteina central de ativacao dessa via. Neste estudo, investigou-se a variabilidade alotipica de BF em pacientes com AR e familiares, visando associa-la com biomarcadores sorologicos e aspectos clinicos da doenca. Foram estudados 210 pacientes com AR (178 Š; 32 ‰; 18-84 anos) e 198 familiares (121 Š; 77 ‰; 7-91 anos). O grupo controle incluiu 98 individuos sadios (81 Š; 17 ‰; 23-81 anos) da mesma area geografica. Os alotipos de BF foram determinados por eletroforese em gel de agarose, sob alta voltagem e refrigeracao constante, seguida de imunofixacao com anticorpo anti-BF humano. Investigou-se a presenca dos autoanticorpos anti-peptideo ciclico citrulinado (anti-CCP), anti-vimentina mutada citrulinada (anti-MCV) e fator reumatoide IgA (FR-IgA) por ensaio imunoenzimatico (ELISA) e o FR-IgM por aglutinacao em latex. A positividade total dos anticorpos foi maior nos pacientes comparado a familiares e controles (p<0,0001). O anti-CCP foi o biomarcador mais comum nos pacientes (75,7%) e o FR-IgA nos familiares (14,6%), diferindo significativamente dos individuos sadios (5,4%; p=0,030; OR=2,98). A positividade concomitante para os quatro biomarcadores predominou entre os pacientes (46,2%; p<0,0001), enquanto nos familiares e controles predominou apenas um autoanticorpo (p<0,0001; p=0,016, respectivamente). Nao ocorreu associacao entre o numero de biomarcadores positivos e idade de diagnostico, classe funcional e tabagismo nos pacientes. A Sindrome de Sjogren secundaria (SS) foi mais frequente entre pacientes com tres biomarcadores positivos simultaneamente (p=0,018; OR=2,73), enquanto pacientes soronegativos apresentaram diminuicao de manifestacoes extra-articulares (MEA; p=0,017; OR=0,28). Nos familiares, a ocorrencia de artralgia esteve significativamente associada a positividade dos biomarcadores. A ausencia de associacao na distribuicao dos fenotipos e alotipos de BF entre pacientes/controles e familiares/controles mostrou que nao houve relacao entre as variantes alotipicas de BF e o desenvolvimento da doenca nos individuos em estudo, assim como nao houve relacao entre tais variantes e o genero dos pacientes, idade de inicio e classe funcional da AR. O fenotipo BF FS07 e alotipo BF*S07 associaram-se significativamente as MEA nos pacientes (p=0,0487; p=0,021; OR=6,62, respectivamente). Uma diminuicao significativa na positividade do anti-MCV nos pacientes com fenotipo BF F (p=0,021; OR=0,22), e aumento naqueles com alotipo BF*S (p=0,017; OR=3,77), caracterizou uma possivel relacao dessas variantes com a presenca do anti-MCV. A maior frequencia de FR-IgA nos familiares com BF FS07 (p=0,018; OR=7,78), e a associacao deste fenotipo e do alotipo BF*S07 com as MEA nos pacientes (p=0,021; OR=6,62), sugerem esta variante de BF como um marcador de mau prognostico na doenca e, aliado aos demais resultados, reforcam a importante participacao da VA na fisiopatogenia da AR. Palavras chave: artrite reumatoide, via alternativa do complemento, fator B, autoanticorpos, doencas autoimunes. / Abstract: Rheumatoid arthritis (RA) is a chronic inflammatory autoimmune disease with familiar distribution and strong correlation with early development of autoantibodies, whose coexistence is associated with a worse prognosis. The alternative pathway of the complement system plays an important role in the inflammatory process of RA. Factor B (BF) is a protein that exerts a central role in the activation of this pathway. This study investigated the allotypic variability of BF in RA patients and relatives, aiming to associate it with serological biomarkers and clinical aspects of the disease. Serum samples of 210 patients with RA (178 Š; 32 ‰; 18-84 years) and 198 relatives (121 Š, 77 ‰, 7-91 years) were evaluated. The control group included 98 healthy individuals (81 Š, 17 ‰, 23-81 years) from the same geographic area. The BF allotypes were determined by high-voltage agarose gel electrophoresis, under constant cooling, followed by immunofixation with anti-human BF antibody. Anti-cyclic citrullinated peptide (anti-CCP), anti-mutated citrullinated vimentin (anti-MCV) and IgA-rheumatoid factor (RF) were determined by ELISA and IgM-RF by latex agglutination. Total positivity of antibodies was higher in patients compared to relatives and controls (p<0.0001). Anti-CCP was the most common biomarker in patients (75.7%) and RF-IgA the most common in relatives (14.6%) differing significantly from controls (5.4%, p=0.030, OR=2.98). Concomitant positivity for the four biomarkers was more common in patients (46.2%, p<0.0001), while most relatives and controls were positive for just one of them (p<0.0001; p=0.016, respectively). No association was observed between the number of positive biomarkers and age of disease onset, functional class and tobacco exposure in patients. Secondary Sjogren syndrome was more frequent in patients with 3 simultaneous positive biomarkers (p=0.018, OR=2.73), while seronegative patients presented less extra articular manifestations (EAM, p=0.017, OR=0.28). In relatives, the occurrence of arthralgia was significantly associated with positive biomarkers. There was no difference in the distribution of BF phenotypes and allotypes between patients and controls and relatives and controls, as well as in relation to gender, age of onset and functional class of RA. The increase of BF S (p=0.0391) in patients compared to relatives turned not significant after logistic regression correction. The BF FS07 phenotype and allotype BF*S07 were significantly associated with EAM in patients (p=0.0487, p=0.021, OR=6.62, respectively). A significant decrease in positivity of anti-MCV in patients BF F (p=0.021, OR=0.22), and increased in those with allotype BF*S (p=0.017, OR=3.77), characterized a possible relationship of these variants with anti-MCV. The highest frequency of RF-IgA in relatives BF FS07 (p=0.018, OR=7.78), and the association of this phenotype and allotype BF*S07 in patients with EAM (p=0.021; OR=6.62), suggests that this BF variant is a marker of poor prognosis in disease and, in addition with the other results, stresses the important role of the alternative pathway in RA pathogenesis. Keywords: rheumatoid arthritis, alternative pathway of complement, factor B autoantibodies, autoimmune diseases.

Orientador : Prof. Dr. Aguinaldo José do Nascimento / Co-orientadora : Profª. Drª. Aline Borsato Hauser / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa: Curitiba, 05/09/2014 / Inclui referências / Área de concentração: Análises clínicas / Resumo: A análise de urina é um dos exames mais solicitados na rotina laboratorial, por ser um procedimento não invasivo, com facilidade na obtenção da amostra, simples execução e de grande auxílio no diagnóstico das patologias do sistema urinário. Apesar de ser um exame antigo e que deu início à medicina laboratorial, ainda faltam critérios de padronização no preparo e na execução das análises. Devido aos constantes avanços tecnológicos, a automação na urinálise vem sendo utilizada por muitos laboratórios com metodologias distintas e que justificam estudos para a padronização dos resultados. Objetivo: Comparar os resultados laboratoriais fornecidos pelo equipamento IQ200® com os métodos manuais da Câmara de Neubauer e Kcell®. Material e Métodos: O equipamento IQ200® foi comparado com dois métodos de quantificação celular por meio de câmaras de contagem, K Cell® e Neubauer, em microscopia ótica tradicional, utilizando amostras de urina não centrifugadas. Também foram comparados os dados fornecidos pela tira reativa nas reações de esterase leucocitária e hemoglobina, com as contagens celulares no IQ 200®. Resultados: A contagem em câmara Neubauer apresentou boa correlação com o equipamento IQ200® para a contagem de leucócitos (R=0,778) e para a contagem de eritrócitos (R=0,757). A contagem em Câmara KCell® apresentou boa correlação com o equipamento IQ200® para a contagem de leucócitos (R=0,693) e para a contagem de eritrócitos (R=0,888) As duas metodologias tradicionais também apresentaram boa correlação entre si na contagem de eritrócitos (R=0,868) e de leucócitos (R=0,932). A reação de esterase leucocitária comparada com a contagem de leucócitos apresentou diferença significativa (p<0,001), assim como a reação de hemoglobina (p=0,019) quando comparada com a contagem de eritrócitos no IQ 200®. Foi verificado que o equipamento IQ200® relata a presença de eritrócitos dismórficos e cilindros com inclusões como "elementos não classificados". Discussão: Em relação às contagens celulares, os métodos se correlacionam, mas foi verificado que o IQ 200® não conseguiu identificar eritrócitos dismórficos sendo necessária a intervenção do profissional para reclassificação, assim como no caso dos cilindros com inclusões. Conclusão: O IQ200® demonstrou ser uma ferramenta útil na urinálise desde que seja operado por profissionais capacitados e treinados na identificação dos elementos urinários. A KCell ® demonstrou ser uma boa alternativa na urinálise tradicional pela rapidez com que as amostras são analisadas. Ressaltamos que as metodologias utilizadas devem ser complementadas com a microscopia, para que os resultados sejam os mais fidedignos possíveis em relação à condição clínica do paciente. Palavras-chave: Urinálise. Câmara de Neubauer. KCell®, IQ 200®. Eritrócitos dismórficos / Abstract: Urine analysis is one of the most requested exams in laboratorial routine, for being a non invasive procedure, its facility to get samples, simple execution, and for being a great help to diagnose pathologies in the urinary system. Even though it is an old form of examination, which started laboratorial medicine, it is still missing standardization criteria for preparing and executing the analysis. Due to the constant technology breakthrough, the automation of urinalysis is being conducted by many laboratories with distinctive methodologies, justifying this way the studies for the result standardization. Objective: To compare the lab results provided for the equipment IQ200® with the manual methods from the Neubauer Chamber and Kcell®. Material and Methods: The IQ200® equipment was compared with two methods of cellular quantification by chamber counting, K Cell® and Neubauer, in traditional optical microscopy, using not centrifuged urine samples. It was also compared the data provided by the relative strips of the leukocyte esterase and hemoglobin with the cellular counting at the IQ 200®. Results: The counting at the Neubauer Chamber showed a good correlation with the equipment IQ200® for the leukocyte counting (R=0.778) and for the erythrocyte counting (R=0.757). Counting at the KCell® Chamber showed a good correlation with the equipment IQ200® for the leukocyte counting (R=0.693) and for the erythrocyte counting (R=0,888).The two traditional methodologies also shower a good correlation between them at the erythrocyte (R=0.868) and leukocyte (R=0.932) counting. The leukocyte esterase reaction compared to the leukocyte counting showed a significant difference (p<0.001), as well as the hemoglobin reaction (p= 0.019) when compared to the erythrocyte counting at the IQ 200®. It was verified that the IQ200® equipment shows the presence of dysmorphic erythrocytes and casts with inclusions as "non-classified elements". Discussion: Concerning to the cellular counting, the two methods were correlated, but it was verified that the IQ 200® was not able to identify dysmorphic erythrocytes, being needed a professional intervention for reclassification, well as in the casts with inclusions case. Conclusion: The IQ200® demonstrated to be a useful tool for the urinalysis, as long it is operated by qualified professionals who were trained in the identification of the urine elements. The KCell® demonstrated to be a good alternative in traditional urinalysis due to the speed as samples are analyzed. We highlight that the used methodologies must be complemented by microscopy, so that more reliable results in relation to the patient’s clinical condition should be obtained. Key words: Urinalysis, Neubauer Chamber, KCell®, IQ 200®, Dysmorphic Erythrocytes

Orientador : Prof. Dr. Itamar Francisco Andreazza / Co-orientador : Prof. Dr. Mayumi Sato / Co-orientador : Prof. Dr. Fábio Seigi Murakami / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação e m Ciências Farmacêuticas. Defesa: Curitiba, 26/02/2015 / Inclui bibliografia / Área de concentração: Insumos, medicamentos e correlatos / Resumo: O melasma é caracterizado pelo aumento de melanina, cujo tratamento se faz com a utilização de agentes despigmentantes como o ácido kójico. As farmácias magistrais preparam formulações contendo este ativo a partir de bases pré-elaboradas disponíveis no mercado que possuem uma composição de excipientes bastante diversas, proporcionando preparações tópicas com constituição e consistência diferenciadas. As características físico-químicas da formulação interferem na liberação do ativo, etapa primordial para o fármaco atingir seu local de ação. Neste contexto, o presente trabalho teve como objetivo preparar quatro diferentes formulações a partir de bases magistrais comerciais, avaliando suas características reológicas, espalhabilidade e a liberação in vitro de ácido kójico. As formulações foram preparadas com veículos comerciais de grande utilização como a base Lanette N®, base não-iônica e uma base comercial composta por fosfolipídios. As formulações apresentaram comportamento de espalhabilidade semelhantes, sendo maior quanto maior o peso adicionado. Na reologia evidenciou-se a característica pseudoplástica em todas as formulações com G' (módulo de armazenamento) superior a G" (módulo de perda). A validação da metodologia foi realizada em ultravioleta-visível em 269nm, em solução tampão fosfato pH 7,4, levando-se em consideração os aspectos do teste de liberação in vitro, obtendo-se linearidade, precisão, exatidão e robustez para o método. Diferentes comportamentos de liberação do fármaco foram obtidos, sendo que a F4, composta por base com fosfolipídios, apresentou a maior liberação, seguido da F3, F2 (base não iônica) e F1(base Lanette N®) com a menor taxa de liberação do ácido kójico. Observou-se uma relação entre a taxa de liberação e a viscosidade, sendo que quanto menor a viscosidade maior a taxa de liberação do fármaco. As membranas de polietersulfona e acetato de celulose não apresentaram diferença estatística significativa (pvalue > 0,05) de liberação do ácido kójico, sugerindo-se a intercambialidade das mesmas para o estudo do fármaco. Palavras-chave: ácido kójico, espalhabilidade, liberação in vitro, reologia. / Abstract: The melasma is characterized by the increase in melanina and its treatment is by topical with depigmentation agents like kojic acid. The dosage form containing this isolated pharmaco are generally prepared in pharmacies from prebuilt bases available in the market with a very diverse composition, providing differentiated and varied topical preparations. The physicochemical characteristics of the formulation influences on the release of the drug, primordial stage for it to reach the site of action. In this context, the present work aimed to assess the in vitro release of kojic acid. The formulations were prepared with commercial vehicles, base Lanette N®, non-ionic base and a commercial base consists of phospholipids. The formulations showed similar behavior spreadability, being greater with the weight added. In the rheology characteristic is evidenced the pseudoplastic behavior in all formulations with G' (elastic modulus) greater than G " (viscous modulus). The validation of the method was performed in an ultraviolet-visible at 269nm, in phosphate buffer pH 7.4, resulting in linearity, precision, accuracy and robustness to the method. Different drug release behavior was obtained, and F4, base consisted of phospholipids, showed the greatest release, followed by the F3, F2 (non-ionic base) and F1 (Lanette N®) with a lower rate release of kojic acid. The membranes of polyethersulfone and cellulose acetate showed no statistically significant difference (p-value> 0.05) release of kojic acid, suggesting the interchangeability. Key words: kojic acid, spreadability, in vitro release test, rheology.