Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2017 / Made available in DSpace on 2017-09-05T04:13:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2017Bitstream added on 2017-09-19T04:12:51Z : No. of bitstreams: 1 347029.pdf: 3964997 bytes, checksum: 6a5cf3566d12dedabcb724952988e5dd (MD5) / Nas últimas décadas, ampla variedade de metabólitos secundários bioativos tem sido isolada de invertebrados marinhos. Entre esses organismos, as esponjas são os maiores provedores de compostos bioativos até o presente momento. A esponja Raspailia bouryesnaultae foi selecionada para isolamento e elucidação estrutural de metabólitos secundários, tendo em vista que em estudos anteriores apresentou promissora atividade citotóxica em seus extratos orgânicos. Considerando que organismos marinhos da mesma espécie podem apresentar diversidade química significativa quando coletados em locais diferentes, amostras da esponja foram coletadas na Ilha do Coral e na Ilha das Aranhas, no estado de Santa Catarina. As amostras foram submetidas a maceração exaustiva com etanol e após concentração em rotaevaporador, foram feitas extrações com hexano (RBH) e etanol (RBE) para a amostra da Ilha do Coral e extrações com hexano (RBH), acetato de etila (RBAE) e etanol (RBE) para a amostra da Ilha das Aranhas. As frações obtidas foram avaliadas com relação às atividades citostática, anti-herpética, antiprotozoária, antibacteriana e antifúngica. As frações da Ilha do Coral, RBE e RBH, apresentaram atividade antitripanossoma e RBE também apresentou atividade anti-herpética. As frações da Ilha das Aranhas, RBAE e RBE, apresentaram atividade anti-herpética e RBAE antitripanossoma. As frações hexânicas foram selecionadas para dar prosseguimento ao isolamento porque apresentaram maior diversidade química, verificada através de cromatografia de camada delgada e ressonância magnética nuclear de ¹H. Foram isolados doze compostos pertencentes à classe dos diterpenos clerodanos, sendo que seis foram elucidados. Para o composto RB1 não foram encontrados relatos na literatura, muito provavelmente trata-se de composto inédito. RB2 foi identificado como isômero do éster metílico do ácido kerlínico e RB3 é o raspailol, substância anteriormente isolada das esponjas Raspailia sp e Raspailia topsenti. RB9 foi identificado como sendo isômero do anoneno, enquanto que RB6 é um aldeído derivado do anoneno e RB7 é o 6-hidroxianoneno. Em relação às atividades biológicas testadas, os compostos RB2 e RB3 apresentaram atividade antitripanossoma e o composto RB2 apresentou atividade anti-herpética para cepas KOS e 29R. Para os demais compostos isolados, os estudos não puderam ser concluídos devido à degradação das amostras. / Abstract: In the last decades, a wide variety of bioactive secondary metabolites has been isolated from marine invertebrates. Among these organisms, sponges are the largest suppliers of bioactive compounds to date. The sponge Raspailia bouryesnaultae was selected for isolation and structural elucidation of secondary metabolites considering that in previous studies it presented promising cytotoxic activity in its organic extracts. Considering that marine organisms of the same species may exhibit significant chemical diversity when collected at different sites, samples of the Raspailia bouryesnaultae sponge were collected in Coral Island and Aranhas Island, from the brazilian State Santa Catarina. The samples were submitted to exhaustive maceration with etanol. After rotavaporator concentration the Coral Island sample was extracted with hexane (RBH) and ethanol (RBE) and the Aranhas Island sample extracted with hexane (RBH) ethyl acetate (RBAE) and ethanol (RBE). The obtained fractions were evaluated in relation to cytostatic, antiherpetic, antiprotozoal, antibacterial and antifungal activities. For the fractions of Coral Island, both RBE and RBH presented antitrypanosomal activity and RBE also presented antiherpetic activity. For the fractions of Aranhas Island, RBAE and RBE presented antiherpetic activity and RBAE presented antitrypanosomal activity, too. The hexane fractions (RBH) were selected to proceed the isolation of the compounds because they presented greater chemical diversity verified by thin layer chromatography and nuclear magnetic resonance of ¹H. Twelve compounds belonging to the class diterpenes of clerodane type were isolated and six were elucidated. For the compound named RB1 no reports were found in the literature and most likely this is a new compound. RB2 was identified as an isomer of kerlinic acid methyl ester and RB3 is raspailol, a substance previously isolated from the a Raspailia sp and Raspailia topsenti sponges. RB9 was identified as an annonene isomer, while RB6 is an aldehyde derived from annonene and RB7 is 6-hydroxyannonene. Concerning the tested biological activities, the compounds RB2 and RB3 showed antitrypanosomal activity and RB2 compound presented antiherpetic activity for KOS and 29R strains. For the other isolated compounds the studies could not be concluded due to the degradation of the samples.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2017 / Made available in DSpace on 2017-09-19T04:11:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 347031.pdf: 2342562 bytes, checksum: ef4ef1a2889ba2fc29d03ffea93fcf73 (MD5) Previous issue date: 2017 / Fragaria x ananassa Duch., conhecida como morango-de-jardim, é consumida mundialmente in natura ou na forma de sucos, geleias e iogurtes produzidos pela indústria alimentícia. Diversos estudos têm demonstrado que o morango pode ter importantes atividades biológicas, como antioxidante, anti-hipertensivo e também anti-inflamatório. Neste sentido, avaliamos o efeito anti-inflamatório do extrato dos frutos de Fragaria x ananassa e seu principal composto, a pelargonidina-3-O-glicosídeo (P3G), analisando seus efeitos na migração de leucócitos, níveis de exsudação, atividades da mieloperoxidase (MPO), adenosina desaminase (ADA), concentração dos metabólitos do óxido nítrico (NOx), fator de necrose tumoral-alfa (TNF-a) e de interleucina-6 (IL-6), utilizando o modelo da pleurisia induzida pela carragenina em camundongos. Também foi realizado um estudo in vitro para identificar a ação específica de P3G em proteínas cinases ativados por mitógeno (p38MAPK), cinase c-Jun N-terminal (JNKMAPK), fator de transcrição nuclear kappa B (NF-?B) e proteína ativadora-1 (AP-1). Para realização dos ensaios in vivo, os frutos congelados de morangos foram sonicados com 25 mL de metanol acidificado (HCl 1%) durante 75 minutos. Os extratos foram filtrados, e o solvente evaporado sob pressão reduzida até à secura produzindo o extrato bruto (EB). O composto majoritário presente no EB (P3G) foi utilizado nos experimentos, em forma de padrão obtido a partir de fonte comercial (Sigma-Aldrich, Co.). Em ambos os experimentos a dexametasona (Dex) foi utilizada como medicamento de referência anti-inflamatório. Na análise estatística, utilizou-se a análise de variância (ANOVA) seguida pelo teste post-hoc de Newman-Keuls. Valores de p < 0,05 foram considerados significativos. Os resultados apresentados neste estudo demonstraram que o EB e P3G foram capazes de reduzir todos os parâmetros inflamatórios avaliados no modelo da pleurisia induzida pela carragenina (p < 0,05) e também na cultura celular de macrófagos murinos induzidos por lipopolissacarídeo (LPS) (p < 0,01), com exceção para a P3G, que não causou inibição na fosforilação da p38MAPK. Além disso, foi demonstrado que o mecanismo molecular desse efeito, envolve a inibição da ativação de IkB-a (p < 0,05) e a redução da fosforilação de JNKMAPK (p < 0,01). Esses efeitos levaram a uma redução da ativação do NF-?B (p < 0,05) e do AP-1 (p < 0,001), dois fatores de transcrição de destaque na cascata inflamatória desencadeada pela ativação do receptor de membrana Toll-like tipo 4 (TLR4). Esses resultados sugerem que o composto testado é um potencial candidato para o desenvolvimento de agentes anti-inflamatórios para utilização em patologias nas quais essa via exerce um papel de destaque.<br> / Abstract: Fragaria x ananassa Duch., known as garden strawberry, is worldwide consumed in natura or in the form of juices, jams or yogurts produced by the food industry. Studies have shown that strawberry may have important biological activities, such as antioxidant, anti-inflammatory and antihypertensive. We therefore evaluated the anti-inflammatory effect of Fragaria x anannassa fruit extract and its major compound, pelargonidin-3-O-glucoside (P3G), analyzing its effect on leukocyte migration, exudation levels, myeloperoxidase (MPO), adenosine deaminase (ADA) activities and nitric oxide (NOx), tumoral necrosis factor (TNF-a) and interleukin 6 (IL-6) levels, using an in vivo murine model of pleurisy. We also have carried out an in vitro study to identify the specific action of P3G in p38 mitogen-activated protein kinase (p38MAPK), c-Jun N-terminal kinase (JNKMAPK), nuclear transcript factors ?B (NF- ?B) and activated protein 1 (AP-1). To this end, the plant material was subjected to extraction. Briefly, frozen fruits of strawberry were sonicated with 25 mL of acidified (HCl 1%) methanol for 75 minutes. The extracts were filtered, and the solvent evaporated under reduced pressure to dryness yielding the crude extract (CE). The major compound present in CE (P3G) was used in our experiments as a standard obtained from commercial source (Sigma-Aldrich, Co.). In in vivo experiments, all inflammatory parameters were assessed 4 hours after pleurisy induction. In all of these work procedures, dexamethasone (Dex 0.5 mg / kg, p.o.) was used as anti-inflammatory reference drug. In in vitro experiments, the inflammatory parameters were measured by Western Blot, also using dexamethasone as reference drug (Dex 7 µM). For statistical analysis, we used the analysis of variance (ANOVA) followed by Newman-Keuls post-hoc test. P values < 0.05 were considered significant. The results presented in our study demonstrated that the crude extract (CE), and P3G are able to reduce the inflammatory parameters evaluated in the murine model of pleurisy (p < 0,05), and also in the cell culture of murine macrophages (p < 0,01), except for P3G, that did not cause inhibition in p38MAPK phosphorylation. Moreover, we demonstrated that the molecular mechanism of this effect involves the arrest of IkB-a activation (p < 0,05) and reduction in JNKMAPK phosphorylation (p < 0,01). These effects lead to a reduction in NF-?B (p < 0,05) and AP-1 activation (p < 0,001) of the transcription factors conductors of the inflammatory pathway triggered by the activation of TLR4. These results suggests that the tested compound is a potential candidate for a development of anti-inflammatory agent to treat diseases in which this pathway exerts a pivotal role.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2017 / Made available in DSpace on 2017-09-19T04:12:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 347028.pdf: 2777968 bytes, checksum: e2e99a611a7b5f21296a003c94110659 (MD5) Previous issue date: 2017 / O melanoma é o mais grave tipo de câncer de pele pela possibilidade de metástase e desde 1975, a dacarbazina continua a ser o tratamento padrão, mesmo apresentando muitas reações adversas. O número de candidatos a agentes antitumorais vem crescendo a cada ano, porém a falta de modelos in vitro representativos de um microambiente tumoral não acompanha este crescimento. A cultura tridimensional (3D) se mostra um dos melhores modelos in vitro para mimetizar o microambiente tumoral. Neste trabalho, utilizando a estratégia de formação de esferoide, desenvolveu-se um modelo celular 3D de melanoma murino isolado ou associado a macrófagos e fibroblastos. Para o melanoma, um modelo assim ainda não foi descrito na literatura. Dentre as tentativas, o modelo foi padronizado utilizando gel de agarose 2% como base e uma densidade celular de 1,2×104/poço para a formação dos esferoides. Os esferoides formados apresentaram tamanho médio de 300 µm compatível com a literatura. Além disso, o heteroesferoide composto pelas três linhagens celulares (melanoma, macrófagos e fibroblastos) mostrou-se mais rígido e estável aparentemente, em comparação com as outras condições testadas, características estas provavelmente provenientes da alta produção de matriz extracelular. Os esferoides supostamente demonstraram a formação de duas zonas: uma periférica de células viáveis e outra interna de células necróticas, que foram confirmadas pela contagem de células, a qual diminuiu no sétimo dia em relação ao quarto dia de cultivo 3D e pela presença de grandes espaços vazios no interior dos esferoides, observados pela microscopia. O perfil inflamatório dos macrófagos presentes nos esferoides foi induzido usando lipolissacarídeo (LPS) para polarização M1 e dexametasona (DEX) para polarização M2. Após caracterização dos esferoides, estes foram incubados com o sal de isotiourônio MF03 e a dacarbazina. Os resultados revelaram que o sal de isotiourônio MF03 mostrou-se mais citotóxico que a dacarbazina no modelo 3D de melanoma. Adicionalmente, observou-se diferenças importantes em termos de citotoxicidade das moléculas, comparando-se o modelo bidimensional (2D) com o 3D. Diante dos resultados, conclui-se que foi desenvolvido um modelo 3D de melanoma adequado para a triagem de possíveis agentes antitumorais, sendo que o sal de isotiourônio MF03 mostrou-se promissor para o tratamento antitumoral de melanoma.<br> / Abstract: Melanomas is the most severe type of skin cancer, and since 1975, dacarbazine remains the standard treatment for most patients, even presenting many adverse reactions. The number of candidates to antitumor agents is increasing every year, although the lack of in vitro models to represent the tumor microenvironment disrupts the process. Three-dimensional (3D) culture is one the best in vitro models to mimic the tumor microenvironment. In this work, using spheroid strategies, a 3D murine melanoma cellular model isolated or associated with macrophages and fibroblasts was developed. Melanoma model has not been described previously. Among the attempts the model was standardized using agarose gel 2 % and a cell density of 1,2×104/well to spheroid formation. Spheroids size was around 300 µm, as described in the literature. In addition, heterospheroids composed of three cell lines (melanoma, macrophages and fibroblasts) showed more rigid and stable apparently when compared with other tried conditions, probably due to high extracellular matrix production. Spheroids supposedly showed two different regions: a peripheral zone containing viable cells and an internal zone containing necrotic cells which was demonstrated by the decrease in the number of cells on the seventh day when compared with the day four, and by presence of large empty spaces inside the spheroids, visualized by microscopy. The inflammatory profile associated with the macrophages-containing spheroids was induced using lipopolysaccharide (LPS) to M1 polarization and dexamethasone to M2 polarization. Following the characterization, spheroids were incubated with MF03 isothiouronium salt and dacarbazine. The results showed that MF03 was most cytotoxic than dacarbazine using the 3D melanoma model. Additionally, it was observed significant cytotoxic differences between bidimensional (2D) and 3D models. In conclusion, we developed a 3D melanoma model to improve the screening of new antitumor agents as well as the promising application of MF03 as a new anti-melanoma.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2017-10-17T03:19:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 347966.pdf: 2720589 bytes, checksum: 4de950d1ea96eee16d2f573fe9b0cfaa (MD5) Previous issue date: 2016 / O Melanoma é encontrado na camada basal da epiderme, e consiste em uma neoplasia maligna dos melanócitos. As mutações frequentemente encontradas em pacientes com câncer são do tipo B-RAF e N-RAS. Neste sentido, ter como alvo mutações que são super expressas em linhagens tumorais de melanoma é extremamente importante para melhorar a eficiência dos tratamentos. Anos atrás medicamentos foram aprovados para auxiliar o tratamento do melanoma, porém limitações foram mostradas por pacientes como efeitos colaterais e resistência aos medicamentos. Em 2014, a FDA (Food and Drug Administration) aprovou uma nova estratégia para tratamento de melanoma, o pembrolizumabe, o qual é baseado em um anticorpo monoclonal contra a proteína 1 (PD-1) relacionada a morte celular programada. Recentemente, em 2016 a Agência Nacional de Vigilância Sanitária (Anvisa) aprovou o uso do medicamento Tafinlar (dabrafenibe), um novo tratamento oral para pacientes com melanoma metastático ou irressecável, oriundo de mutação positiva dos genes BRAF V600E. Embora o tratamento de melanoma tenha tornado-se um grande desafio a superar, este trabalho tem como objetivo ampliar as possibilidades terapêuticas para o melanoma, prospectando novas moléculas ativas. Especificamente, avaliou-se o potencial antitumoral e antiangiogênico de um novo complexo mononuclear de Ga(III) com ligante não-simétrico em linhagens celulares de melanoma humano (SK-MEL-28 e SK-MEL-147) com diferentes mutações e linhagem imortalizada de células endoteliais de veia umbilical humana (HUVEC). O ligante não-simétrico H3LM3 e o complexo mononuclear de H3LM3 Ga apresentaram CC50 (concentração do composto que causa 50% de morte celular) entre 5 e 25 µM quando expostas as linhagens tumorais, similarmente ativos quando comparados ao vemurafenibe, um quimioterápico de referência. Quando as CC50 destes composos foram avaliadas em linhagens tumorais e não tumorais, não foi observada citotoxicidade para a linhagem celular não tumoral, em que 80% de células viáveis foram detectadas. Em relação a ação dos compostos sobre a atividade de caspases, os dados demonstram que não houve aumento da atividade de nenhuma das caspases, uma indicação de que a morte celular foi independente de caspases. De acordo com os resultados de um conjunto de ensaios específicos pode-se sugerir que o efeito citotóxico e antiproliferativo se dá através da indução de estresse oxidativo. Adicionalmente, foi mostrado que os compostos apresentaram atividade antimetastática, ao inibir a proliferação e invasão celular, bem como a propriedade de bloqueio da angiogênese. O complexo mononuclear de H3LM3 Ga sobre linhagem tumoral SK-MEL 28 apresentou a redução da expressão do gene VEGF em aproximadamente 20% em comparação ao controle. Concluindo, os compostos testados não somente apresentaram atividade citotóxica significativa, como também demonstraram efeitos anti-metastático e antiangiogênico in vitro/in vivo. De acordo com os dados obtidos, demonstra-se uma nova linha na exploração da atividade biológica de promissores agentes antitumorais.<br> / Abstract : Melanoma is found in the basal layer of the epidermis and consists in a malignant tumor of melanocytes. Mutations often found in patients with cancer are B-RAF and N-RAS type. Thus, targeting mutations which are super expressed in tumor melanoma strains are extremely important to improve the treatment efficacy. Years ago drugs were approved to help the melanoma treatment, however, some limitations were shown by patients such as side effects and drug resistance. In 2014 the FDA (Food and Drug Administration) approved a new strategy to treat melanoma, the pembrolizumab, which is based on a monoclonal antibody against protein 1 (PD-1) related to programmed cell death. Recently, in 2016 the National Agency of Sanitary Surveillance (ANVISA) approved the use of the drug Tafinlar (dabrafenib), a new oral treatment for patients with metastatic or unresectable melanoma, from a positive mutation of BRAF V600E genes. Although the melanoma treatment became a great challenge to overcome, this work aims to broaden the therapeutic possibilities for melanoma by prospecting new active molecules. Specifically, antitumor and antiangiogenic potential of a novel mononuclear Ga(III) complex with the non-symmetric ligand in human melanoma cell lines (SK-MEL-28 and SK-MEL-147) was assessed with different mutations and immortalized lineage of human umbilical vein endothelial cells (HUVEC). The non-symmetric linker H3LM3 and the mononuclear H3LM3 Ga complex showed CC50 (compound concentration causing 50% cell death) between 5 and 25 µM when exposed to tumor strains, similarly actives when compared to vemurafenib, a reference chemotherapeutic. When CC50 of these compounds were evaluated in tumoral and non-tumoral cell lines, they did not show cytotoxicity to the non-tumor cell line, in which 80% of viable cells were detected. Regarding the action of the compounds on the activity of caspases, the data demonstrated that there was no increase in the activity of any of the caspases, assuming that cell death was independent of caspases. According to the results of a specific set of tests the cytotoxic and antiproliferative effects occur by the induction of oxidative stress was suggested. In addition, the compounds exhibited anti-metastatic activity, inhibiting cell proliferation and invasion, as well as blocking angiogenesis. The mononuclear H3LM3 Ga complex on SK-MEL 28 tumor line showed a reduction of VEGF gene expression by approximately 20% compared to control. In conclusion, the compounds tested not only showed significant cytotoxic activity but also demonstrated in vitro/in vivo anti-metastatic and antiangiogenic effects. According to the data obtained, a new line in the exploration of biological activity as promising antitumor agents was evidenced.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2017. / Made available in DSpace on 2017-10-17T03:25:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 347965.pdf: 4874952 bytes, checksum: ded3a194ffe1180d3ebc6c5d77349c99 (MD5) Previous issue date: 2017 / A Fibrose Cística (FC) é considerada a doença hereditária letal mais comum em populações de origem caucasiana. A doença se manifesta clinicamente com várias formas de gravidade, moduladas por diferentes genótipos e o meio ambiente. Aproximadamente 2.000 mutações já foram descritas, sendo que a frequência destas variam de população para população em função de diferenças étnicas e geográficas. Dentre as inúmeras mutações do gene CFTR, a F508del é tida como a mais frequente na população mundial (66%). Entretanto, no Brasil a frequência desta mutação é reduzida, aproximadamente 47%, e no Estado de Santa Catarina ainda é desconhecida. Neste sentido, a determinação da frequência e distribuição das mutações do gene CFTR no Estado de Santa Catarina é fundamental para poder implementar ou adaptar estratégias diagnósticas, de manejo e tratamento, das crianças e jovens catarinenses afetados pela doença. Sendo assim, o objetivo do presente estudo foi determinar o perfil mutacional do gene CFTR da população catarinense. Além disso, amostras de pacientes com diagnóstico clínico de FC foram utilizadas para padronizar e validar protocolos de reação em cadeia da polimerase (PCR) do tipo Allele Specific Oligonucleotide (ASO). Adicionalmente, seis pacientes que previamente realizaram rastreio molecular com painel de 36 mutações foram submetidos ao sequenciamento. Foram identificadas 14 mutações, responsáveis por 69% dos alelos de FC em Santa Catarina: F508del (51,33%), G542X (4,87%), R334W (2,21%), R1162X (2,21%), N1303K (2,21%), 3120+1G>A (2,21%), CFTR dele2,3 (21 kb) (0,88%), R553X (0,44%), 1717-1G>A (0,44%), 2183AA>G (0,44%), I507del (0,44%), R1066C (0,44%), W1282X (0,44%), Y1092X (0,44%). Seis mutações (F508del, G542X, R334W, R1162X, N1303K, 3120+1G>A) apresentaram frequência alélica superior a 1%, totalizando em conjunto 65,04% dos alelos caracterizados. Estas 6 mutações foram selecionadas para o rastreio molecular em 21 pacientes e representaram um excelente painel para o rastreio da FC em Santa Catarina, com um poder de detecção de 66,67%, aproximando-se ao poder de detecção de outras metodologias mais completas como painéis de mutações importados e sequenciamento gênico. A análise por painel de sequenciamento de 6 amostras de pacientes do presente estudo contribuiu para o diagnóstico definitivo da doença em 3 casos e possibilitou a identificação de um alelo mutado em um paciente. Portanto, além de ser uma técnica laboriosa e com elevado custo por análise, é inapropriada para detectar mutações raras, pois as mutações de FC não são igualmente distribuídas entre as diferentes populações. Desta forma, os resultados obtidos com a presente pesquisa, além de possibilitarem a determinação do perfil mutacional do gene CFTR na população catarinense, também foram de extrema importância para a implementação de uma nova estratégia de rastreio molecular da FC em Santa Catarina, com eficiência diagnóstica e rapidez. Tal abordagem permitirá uma contribuição diagnóstica ao teste do suor e possibilitará a criação de uma diretriz que auxilie no manejo ambulatorial e tratamento dos acometidos pela doença.<br> / Abstract : The Cystic fibrosis (CF) is considered the most common inherited lethal disease at the Caucasian population. There are various forms of severity of CF modulated by different genotypes and the environment. Approximately 2,000 mutations have already been described, the frequency of which varies from population to population due to ethnic and geographical differences. Among the many mutations of the CFTR gene, F508del is considered the most frequent in the world population (66%). However, in Brazil the frequency of this mutation is reduced, approximately 47%, and in the State of Santa Catarina it is still unknown. In this context, the determination of the frequency and distribution of CFTR gene mutations in the State of Santa Catarina is fundamental to be able to implement or adapt diagnostic, management and treatment strategies of Santa Catarina children and young people affected by the disease. Thus, the objective of the present study was to determine the mutational profile of the CFTR gene of the population of Santa Catarina. In addition, samples of patients with clinical diagnosis of CF were used to standardize and validate Allele Specific Oligonucleotide (ASO) polymerase chain reaction (PCR) protocols. In addition, 6 patients who previously performed molecular screening with a panel of 36 mutations were submitted to sequencing. Fourteen mutations, responsible for 69% of CF alleles in Santa Catarina, were identified: F508del (51.33%), G542X (4.87%), R334W (2.21%), R1162X (2.21%), N1303K (2.21%), 3120 + 1G> A (2.21%), CFTR dele2.3 (21 kb) (0.88%), R553X (0.44%), 1717-1G> 44%), 2183AA> G (0.44%), I507del (0.44%), R1066C (0.44%), W1282X (0.44%), Y1092X (0.44%). Six mutations (F508del, G542X, R334W, R1162X, N1303K, 3120 + 1G> A) presented allele frequencies higher than 1%, totaling 65.04% of the alleles. These 6 mutations were selected for molecular screening in 21 patients and represented an excellent panel for the screening of CF in Santa Catarina, with a detection power of 66.67%, approaching the power of detection of other more complete methodologies such as Panels of imported mutations and gene sequencing. Sequencing panel analysis of 6 patient samples from the present study contributed to the definitive diagnosis of the disease in 3 cases and allowed the identification of a mutated allele in a patient. Therefore, in addition to being a laborious technique and with a high cost per analysis, it is inappropriate to detect rare mutations, since the mutations of CF are not equally distributed among the different populations. In this way, the results obtained with the present project, besides making possible the determination of the mutational profile of the CFTR gene in the population of Santa Catarina, were also extremely important for the implementation of a new strategy for the molecular tracing of CF in Santa Catarina, with diagnostic efficiency and speed. Such an approach will allow a diagnostic contribution to the sweat test and will enable the creation of a guideline that assists in the outpatient management and treatment of those affected by the disease.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2017. / Made available in DSpace on 2017-12-05T03:10:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 349063.pdf: 2818592 bytes, checksum: 5c240e503909a7698d1c6f2ca73f0f4d (MD5) Previous issue date: 2017 / A baixa solubilidade aquosa de fármacos é um dos fatores que desafiam pesquisadores no desenvolvimento de medicamentos. Os sistemas liquissólidos têm apresentado eficácia na melhoria do perfil de dissolução de fármacos pouco solúveis, mantendo apropriadas características de fluxo e compressibilidade das formulações. A sinvastatina foi adotada, neste estudo, para aplicação desta tecnologia, pois apresenta problemas de solubilidade. O objetivo foi desenvolver sistemas liquissólidos contendo sinvastatina que apresentassem melhores perfis de dissolução e avaliar, através de um planejamento fatorial, os fatores relacionados aos componentes da formulação que influenciam no aumento da solubilidade aquosa do fármaco e nas propriedades de fluxo das formulações. A análise dos dados permitiu observar que o tipo de solvente não volátil e o estado do fármaco (solúvel ou disperso) foram os fatores com maior efeito sobre a resposta de solubilidade aquosa. Em relação as respostas que avaliaram as propriedades de fluxo, o tipo de solvente não volátil e de revestimento foram os fatores que influenciaram as respostas de índice de Carr e razão de Hausner, em que as formulações contendo Kollidon® mostraram-se mais eficientes do que as com Aerosil® (que é o material de revestimento mais utilizado para produção desses sistemas). A partir disso, as formulações 2, 3 e 14 foram granuladas via úmido e comprimidas, apresentando características adequadas em relação aos testes gerais, segundo a Farmacopeia Brasileira. As três formulações, na forma de pó, granulados e comprimidos, além da sinvastatina e o comprimido comercial foram submetidas ao ensaio de dissolução em meio farmacopeico em que o fármaco e o comprimido comercial liberaram em torno de 100 % em 30 min, o que indica que o meio de dissolução pode não ser discriminativo para os sistemas liquissólidos. A fim de evidenciar as diferenças entre comprimidos comerciais e os liquissólidos, utilizou-se um meio de dissolução contendo menor quantidade de tensoativo. Nesta condição os perfis de dissolução demonstraram que os comprimidos liquissólidos liberaram em torno de 45 %, sendo que a sinvastatina e comprimido comercial não liberaram nem 10 % em 30 min. Os resultados obtidos possibilitaram indentificar quais fatores foram mais influentes e avançar em direção da utilização de novos excipientes, no caso da Kollidon® permitindo que essa tecnologia seja considerada uma forma farmacêutica alternativa para fármacos pouco solúveis. / Abstract : The low aqueous solubility of drugs is one of the factors that challenge researchers in drug development. Liquisolid Systems have shown efficacy in improving the dissolution profile of poorly soluble drugs, while maintaining appropriate flow characteristics and compressibility of the formulations. Simvastatin was adopted in this study to apply this technology, since it presents solubility problems. The objective was to develop liquisolid systems containing simvastatin that presented better dissolution profiles. Also to evaluate, through a factorial design, the factors related to the components of the formulation that influence in the increase of the aqueous solubility of the drug and in the flow properties of the formulations. Analysing the data we observed that the type of non-volatile solvent and the state of the drug (soluble or dispersed) were the factors with greater effect on the aqueous solubility response. Regarding the responses that evaluated the flow properties, the type of non-volatile solvent and coating were the factors that influenced the Carr index and Hausner ratio responses, where the formulations containing Kollidon® were more efficient than Aerosil® (which is the most commonly used coating material for the production of such systems). From these, formulations 2, 3 e 14 were granulated wet and compressed, presenting suitable characteristics for tablets according to Brazilian Pharmacopoeia 5th ed. 2010. The three formulations, in the form of powder, granules and tablets, in addition to simvastatin and the commercial tablet were subjected to the dissolution test in the pharmacopoeial medium in which the drug and the commercial tablet release around 100 % in 30 min, indicating that dissolution medium may not be discriminative for liquisolid systems. In order to evidence the differences between commercials tablets and liquisolid, a dissolution medium containing lower amount of surfactant was used. In this condition, the dissolution profiles showed that the liquisolid tablets released around 45% and simvastatin and commercial tablet didn?t exceed 10% in 30 min. The results obtained made it possible to identify which factors were most influential and to move towards the use of new excipients in the case of Kollidon® allowing this technology to be considered as an alternative pharmaceutical for poorly soluble drugs.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2017. / Made available in DSpace on 2017-12-05T03:10:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 349061.pdf: 3005507 bytes, checksum: a29b38fab534d7f675c6c6b3e5dd0eb6 (MD5) Previous issue date: 2017 / O câncer representa um problema de saúde mundial. Apesar dos constantes esforços e significativos avanços na pesquisa e desenvolvimento de novos agentes quimioterápicos, a recidiva da doença devido à heterogeneidade do tumor e a resistência aos quimioterápicos permanece sendo um grande desafio na busca pela cura. Nesse contexto, os sais de isotiourônio vêm chamando atenção por diversas atividades biológicas, entre elas promissora atividade antitumoral. Em estudo anterior desenvolvido por nosso grupo de pesquisa foram testadas 28 moléculas com potencial atividade antitumoral, entre as quais se destacou o sal de isotiourônio brometo de (Z)-2-(isotioureidometil)-2-pentenoato de metila (SI-MF08) por apresentar significativa citotoxicidade em linhagem tumoral in vitro e um mecanismo de ação de morte celular que parece ativar diferentes sinalizações que levam à morte da célula tumoral. Esta ação multialvos pode vir a ser uma vantagem na busca por um futuro fármaco, possibilitando contornar a resistência ao tratamento desenvolvida por células tumorais. Assim, o objetivo deste trabalho foi caracterizar a citotoxicidade do SI-MF08 in vitro e realizar estudos pré-clínicos para avaliar a potencial atividade antitumoral. O primeiro capítulo deste trabalho mostra os estudos em linhagem celular de leucemia e mecanismo de ação envolvido na citotoxicidade do composto. Foi possível compreender que a molécula atua ativando a via extrínseca da apoptose via receptor de membrana Fas e ativação de caspases -8 e -3, além de causar bloqueio mitótico em fase G2/M do ciclo celular e geração de espécies reativas de oxigênio que leva ao estresse de retículo endoplasmático e perda do potencial de membrana mitocondrial. O estresse oxidativo gerado causa danos irreversíveis nas mitocôndrias levando à ativação de formação de vesículas ácidas para eliminação dessas organelas no intuito de reestabelecer a homeostasia da célula. O segundo capítulo do trabalho teve como objetivo avaliar a atividade citotóxica do composto em linhagem celular de melanoma para posterior aplicação em modelo de melanoma in vivo. Observou-se que o SI-MF08 também apresentou citotoxicidade para a linhagem celular de melanoma e o mecanismo de morte envolvido no processo foi semelhante ao encontrado nos resultados do primeiro modelo. O terceiro capítulo do trabalho refere-se aos estudos de citotoxicidade do composto em camundongos na busca pela dose máxima que não apresenta efeitos significativos. Dessa forma, observou-se no estudo de dose única que a dose limite para ser administrada é de 15 mg/kg do composto. Em seguida, no estudo de doses repetidas de 10 dias observou-se que a dose de 12 mg/kg de SI-MF08 representa a dose máxima de trabalho. O quarto capítulo deste trabalho teve como objetivo avaliar a atividade antitumoral do SI-MF08 em camundongos portadores de melanoma. Os animais administrados com a dose de 7,5 mg/kg do composto não apresentaram os efeitos deletérios da doença como perda de peso e anemia, contudo a dose não foi capaz de melhorar a sobrevida desses animais ou reduzir significativamente o crescimento tumoral. Entretanto a dose de 12 mg/kg não só inibiu os efeitos deletérios da doença como também aumentou a taxa de sobrevida desses animais e reduziu significativamente o crescimento tumoral, de acordo com padrões de institutos internacionais de pesquisa em câncer. / Abstract : Cancer is a global health problem. Despite the efforts and significant advances in the research and development for new chemotherapeutic agents, recurrence of the disease due to tumor heterogeneity and chemotherapy resistance remains a major challenge in the search for the cure. In this context, isothiouronium salts have been attracting attention due to its several biological activities, among those is the promisor antitumor activity. In a previous work performed by our research group, 28 molecules with potential antitumor activity were tested. Among those, the isothiouronium salt methyl (Z)-2-(isothioureidomethyl)-2-pentenoate hydrobromide (IS-MF08) displayed significant cytotoxicity in tumoral cell line and a mechanism that seems to triggers different signals that lead to tumoral cell death. This multi-targeting mechanism may be an advantage in the search for a future drug, making possible to circumvent the resistance to treatment developed by tumor cells. Thus, the objective of this work was to characterize the cytotoxicity of IS-MF08 in vitro and to perform preclinical studies to evaluate the potential antitumor activity. It made possible to understand that the molecule activates the extrinsic pathway of apoptosis via Fas membrane receptor and further activation of caspases -8 and -3, causing mitotic block in the G2 / M phase of the cell cycle and generation of reactive oxygen species that leads to endoplasmic reticulum stress and loss of mitochondrial membrane potential. The oxidative stress generated causes irreversible damage in the mitochondria, leading to the activation of acid vesicles formation in order to eliminate these organelles and reestablish the homeostasis of the cell. The second chapter of the study aimed to evaluate the cytotoxic activity of the compound in melanoma cell line to later application in in vivo melanoma model. IS-MF08 also showed to be cytotoxic to melanoma cell line and the mechanism of death involved in the process was similar to that founded in the results of the first model. The third chapter of the work refers to the cytotoxicity studies of the compound in mice in the search for the maximum dose that has no significant effects. Thus, it has been observed in the single dose study that the dose limit of the compound to be administered is 15 mg/kg. Following, in a 10-day repeated dose study, it was observed that 12 mg/kg of IS-MF08 represents the maximum working dose. The fourth chapter of this work aimed to evaluate the antitumor activity of IS-MF08 in melanoma bearing mice. Animals that were administered with the dose of 7.5 mg/kg of the compound did not exhibit the deleterious effects of the disease as weight loss and anemia, however the dose was not able to enhance the survival rate of these animals or even reduce tumor growth significantly. However, the dose of 12 mg/kg not only inhibited the deleterious effects of the disease but also increased the survival rate of these animals and significantly reduced tumor growth, according to the standards of international cancer research institutes.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2017. / Made available in DSpace on 2017-12-05T03:11:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 349067.pdf: 1729185 bytes, checksum: 97a152c8691c22ec5ed039ef36f5d9ca (MD5) Previous issue date: 2017 / Os carotenoides são compostos naturais, amplamente estudados por suas atividades biológicas. Haematococcus pluvialis é uma microalga pertencente à classe Chlorophyceae conhecida por sintetizar e acumular grandes quantidades de carotenoides, principalmente astaxantina. Tal composto é um poderoso agente fotoprotetor contra os efeitos deletérios decorrentes da exposição à radiação UV. Entretanto, o uso tópico de carotenoides contra os processos fotodegradativos possui certas limitações devido à baixa estabilidade e biodisponibilidade inerentes a estes compostos. Assim, o presente trabalho teve como objetivo o desenvolvimento de suspensões coloidais de nanocápsulas poliméricas contendo uma solução extrativa de H. pluvialis, visando à obtenção de uma formulação farmacêutica de uso tópico cutâneo que permita o aumento da estabilidade e eficácia terapêutica dos carotenoides. A solução extrativa foi obtida a partir da biomassa de H. pluvialis por um método de ruptura celular seguida por extração com solventes. As suspensões de nanocápsulas foram preparadas pela técnica da nanoprecipitação com os polímeros PCL e PLGA e a incorporação de diferentes concentrações de solução extrativa foi avaliada. Dentre elas, a formulação preparada com o polímero PLGA contendo 15 mL de solução extrativa (PLGA-SE15) mostrou-se a mais estável, apresentando altos teores de carotenoides totais e astaxantina, com uma eficiência de encapsulação de astaxantina superior a 98%. Essa formulação exibiu uma atividade antioxidante pelo ensaio do radical DPPH cerca de 9 vezes maior que a encontrada para o ácido ascórbico, utilizado como controle positivo, demonstrando o seu potencial biológico contra o estresse oxidativo. Hidrogeis termossensíveis de poloxamer 407 foram preparados e caracterizados com a formulação PLGA-SE15, os quais exibiram uma estabilidade satisfatória frente à separação de fases. Os ensaios de liberação in vitro dos carotenoides totais demonstraram um perfil de liberação controlado com cinética de ordem zero para o hidrogel preparado com a formulação PLGA-SE15, apresentando um percentual liberado de aproximadamente 50% após as 72 horas de experimento. Assim, a suspensão de nanocápsulas contendo carotenoides da microalga Haematococcus pluvialis, juntamente com o hidrogel preparado com essa formulação, mostrou ser uma estratégia promissora para obtenção de um produto de uso tópico cutâneo, visando às atividades fotoprotetora e a quimiopreventiva. / Abstract : Carotenoids are natural compounds, widely studied by their biological activities. Haematococcus pluvialis is a microalgae belonging to the class Chlorophyceae known for synthesizing and accumulating large amounts of carotenoids, mostly astaxanthin. Such compound is a powerful photoprotective agent against deleterious effects resulting from UV radiation exposure. Nevertheless, topical administration of carotenoids against photodegradation processes has some limitations due to its inherent low stability and bioavailability. Therefore, the main purpose of the present work was to develop colloidal suspensions of polymeric nanocapsules containing an extractive solution from H. pluvialis, aiming to obtain a pharmaceutical formulation for topical cutaneous application, which provides an improvement in carotenoids stability and therapeutic efficacy. The extractive solution was obtained from H. pluvialis biomass by a cell rupture method followed by solvent extraction. Nanocapsules suspensions were prepared by the nanoprecipitation technique with PCL and PLGA polymers, and the incorporation of different concentrations of extractive solution was evaluated. Among them, nanocapsules suspension prepared with PLGA containing 15 mL of the extractive solution (PLGA-SE15) exhibited higher stability, showing an elevated total carotenoid and astaxanthin content, with an astaxanthin encapsulation efficiency superior than 98%. This formulation displayed an antioxidant activity by the DPPH radical assay about 9 times higher than that found for ascorbic acid, which was used as a positive control, demonstrating its biological potential against oxidative stress. Thermosensitive poloxamer 407 hydrogels were prepared and characterized with the nanocapsules formulation PLGA-SE15, which exhibited a satisfactory stability against phase separation phenomena. In vitro release experiments of total carotenoids demonstrated a controlled release profile with zero order kinetics for the hydrogel prepared with the formulation PLGA-SE15, presenting a released percentage of approximately 50% after 72 hours of experiment. In view of that, the nanocapsules suspension containing carotenoids from Haematococcus pluvialis, jointly with the hydrogel prepared with this formulation, demonstrate to be a promising strategy to obtain a topical cutaneous product, aiming at photoprotective and chemopreventive activities.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2017. / Made available in DSpace on 2017-12-05T03:13:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 349066.pdf: 1604822 bytes, checksum: 6dcad9000b8ad0336f60ea146c481e2e (MD5) Previous issue date: 2017 / A resistência aos carbapenêmicos por meio da produção de enzimas denominadas carbapenemases tem sido amplamente relatada em espécies pertencentes à família Enterobacteriaceae, estando relacionadas a altas taxas de mortalidade. Neste sentido, o presente trabalho teve por objetivo investigar enterobactérias resistentes a carbapenêmicos (ERC) pelo período de um ano em um hospital de Blumenau (SC), levando em conta os aspectos clínicos, relacionados à internação dos pacientes, e microbiológicos, avaliados por meio de metodologias fenotípicas e genotípicas. Ao término da coleta, foram obtidas 152 amostras isoladas de 147 pacientes, provenientes de swab anal de vigilância, urina, aspirado traqueal e sangue, entre outros sítios em menor proporção. A espécie predominantemente isolada foi Klebsiella pneumoniae (84,2%), seguida das espécies Serratia marcescens (9,9%), Enterobacter cloacae (3,9%), Escherichia coli (1,3%) e Enterobacter aerogenes (0,7%). Os resultados indicam que 55,9% dos isolados caracterizam colonizações, enquanto os demais 43,4% resultaram de processos infecciosos e 0,7% não foram caracterizados quanto à natureza da sua presença. Dos pacientes analisados, 60% apresentaram processos de colonização/infecção com origem na instituição hospitalar analisada, das quais 78% ocorreram quando o paciente se encontrava internado na Unidade de Terapia Intensiva (UTI). Os fatores de risco significativamente relevantes para a obtenção de uma cultura positiva para ERC incluem o uso de instrumentos invasivos (cateteres venosos centrais e vesicais, ventilação mecânica), a realização de procedimentos invasivos e a prévia exposição aos antimicrobianos de amplo espectro do grupo das penicilinas/inibidores de betalactamases. Em relação ao desfecho clínico, 31% dos pacientes vieram a óbito, sendo a utilização de instrumentos invasivos, a realização de procedimentos invasivos, a admissão em UTI e prévias internações fatores significativamente associados à mortalidade dos pacientes. Em relação às enterobactérias isoladas em processos infecciosos, destaca-se o considerável índice de sensibilidade aos aminoglicosídeos amicacina e gentamicina. Já em relação aos isolados bacterianos provenientes de processos de colonização, índices de sensibilidade elevados foram verificados em relação ao antimicrobiano fosfomicina. A pesquisa genotípica para carbapenemases apresentou resultados positivos para o gene blaKPC em 98,6% dos isolados. As metodologias fenotípicas de inibição enzimática e BlueCarba, utilizadas para a pesquisa de carbapenemases, apresentaram, ambas, ótimos resultados de sensibilidade e especificidade quando comparadas à metodologia genotípica PCR. Já a metodologia de tipagem molecular rep-PCR pôde ser aplicada com sucesso na avaliação da clonalidade dos isolados das espécies K. pneumoniae, S. marcescens, E. cloacae e E. coli. / Abstract : Resistance to carbapenems mediated by enzymes called carbapenemases has been widely reported in species belonging to the Enterobacteriaceae family, being related to high mortality rates. The present study aimed to investigate carbapenem-resistant Enterobacteriaceae (CRE) for a one year period in a hospital in Blumenau (SC), taking into account the clinical aspects, related to the patients hospitalization, and microbiological aspects, evaluated by phenotypic and genotypic methodologies. By the end of the study, 152 samples from 147 patients were obtained, isolated from surveillance anal swab, urine, tracheal aspirate and blood, among other sites to a lesser extent. The predominant isolated species was Klebsiella pneumoniae (84.2%), followed by Serratia marcescens (9.9%), Enterobacter cloacae (3.9%), Escherichia coli (1.3%) and Enterobacter aerogenes (0.7%). The results indicate that 55.9% of the isolates characterize colonizations, while the remaining 43.4% resulted from infectious processes and 0.7% were not characterized about the nature of their presence. About the analyzed patients, 60% had colonization/infection processes originated in the analyzed hospital institution, of which 78% occurred when the patient was admitted in the Intensive Care Unit (ICU). Significant risk factors related to a positive culture for CRE include the use of invasive instruments (central venous and bladder catheters, mechanical ventilation), invasive procedures and prior exposure to broad spectrum antimicrobial agents from the penicillin/betalactamase inhibitors group. Regarding the clinical outcome, 31% of the patients died. The significant risk factors related to the patients mortality were the use of invasive instruments, invasive procedures, admission to ICU and previous hospitalizations. About the susceptibility profile of the enterobacteria isolated in infectious processes, the sensitivity to aminoglycosides, including amicacin and gentamicin stands out. Regarding the bacterial isolates from colonization processes, a high sensitivity index was verified for the antimicrobial fosfomycin. Genotypic research for carbapenemases showed positive results for the blaKPC gene in 98.6% of the isolates. The phenotypic methodologies of enzymatic inhibition and BlueCarba, used for the research of carbapenemases, presented, both, excellent results of sensitivity and specificity when compared to the genotypic methodology. The rep-PCR molecular typing methodology could be applied successfully for the clonality evaluation of the isolates of K. pneumoniae, S. marcescens, E. cloacae and E. coli.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Assistência Farmacêutica, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2015-11-24T03:10:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 336208.pdf: 1669335 bytes, checksum: 86d6abe459a13f1be0f4168c3a9bb361 (MD5) Previous issue date: 2015 / Esta dissertação teve como objetivo principal analisar as percepções de usuários sobre a clínica homeopática no município de Florianópolis, Santa Catarina, bem como levantar os medicamentos homeopáticos aviados em Farmácias Homeopáticas dos municípios de Florianópolis e de Itajaí, Santa Catarina. Trata-se de uma pesquisa exploratória e descritiva, com abordagens qualitativa e quantitativa, que, inicialmente, foi desenvolvida junto a quatro farmácias homeopáticas instaladas em Florianópolis e uma em Itajaí, e, num segundo momento, junto a 23 usuários de homeopatia, de clínica pública e privada, de Florianópolis. Os resultados apontam que os medicamentos policrestos são os mais prescritos tanto nas receitas aviadas no Sistema Único de Saúde (SUS) como nas advindas da clínica privada, reforçando a importância de manter esse grupo de medicamentos em estoque na Farmácia. A forma farmacêutica gotas, em doses repetidas foram as mais prescritas assim como a quantidade de 30 e 50 em volume ou massa nos dois municípios. Porém quando se analisa apenas receitas SUS, Florianópolis avia mais formulações complexas. Este estudo ressalta a importância da acessibilidade e do acesso ao medicamento homeopático no município de Florianópolis. Na percepção dos usuários, a maioria mulheres, idade média de 45,4 anos, se diferenciando apenas no grau de escolaridade, não houve diferenças entre os atendimentos da clínica pública ou privada. Os pacientes se sentiram acolhidos e confiantes com os prescritores, pois buscavam a clínica principalmente por desencanto com a alopatia e por um tratamento integral, bem como consideraram o medicamento eficaz.<br> / Abstract : This dissertation has as main objective - to analyze the perception of user about the homeopathic clinic in Florianópolis, Santa Catarina, Brazil, as well as find out which are the dispensed homeopathic medicines in Homeopathical Pharmacies in Florianópolis and Itajaí, Santa Catarina, Brazil. This is an exploratory and descriptive research, with quantitative and qualitative approaches, that, at first, was developed with four Homeopathically pharmacies installed in Florianópolis and in Itajaí, and, in a second moment, with 23 homeopathy users of public and private clinics of Florianópolis, Santa Catarina, Brazil. The outcomes point out that the polychrests drugs are the most prescribed in the dispensed SUS prescription and also in the private prescription, reinforcing the need of keeping this medicine group stored on the pharmacy. The pharmaceutical form drops, in repeated doses were the most prescribed as it was the quantity of 30 and 50 in volume or mass in both towns, but when it is evaluate only SUS prescriptions, Florianópolis dispenses more complex formulations. In the users perceptions, most women, with average age group of 45,4 years, only different in education degree. There were no difference between the public and private clinics treatment, all the patients felt welcomed and confident with prescribers, that is, because they seek the clinic, mainly for dissatisfaction with allopathic medicine, for lhe wish of a holistic treatment and also, because they consider this medicine effective.