Orientador : Prof. Dr. Geraldo Picheth / Co-orientadores: Profa. Dra. Fabiane G. de M. Rego. Profa. Dra. Dayane Alberton / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa: Curitiba, 18/09/2015 / Inclui referências : f. 114-128 / Área de concentração: Análises clínicas / Resumo: O Diabetes mellitus tipo 2 (T2DM) e o Diabetes mellitus gestacional (GDM) estão associados à obesidade (Ob) e são processos patológicos de frequência crescentes no mundo, apresentando elevada morbimortalidade. Múltiplos fatores genéticos estão associados ao T2DM e GDM, embora sejam pouco estudados na população brasileira. Estudar variações genéticas e biomarcadores laboratoriais associados ao risco ou à proteção para o T2DM e GDM, caracteriza o objetivo do presente estudo. O Comitê de Ética e Pesquisa da Universidade Federal do Paraná (UFPR) aprovou esta pesquisa, CAAE: 01038012.2.0000.0102. Os parâmetros antropométricos e laboratoriais (perfis glicêmico e lipídico, bem como de função renal) foram igualmente avaliados. Os polimorfismos foram investigados com sondas fluorescentes (TaqMan®) ou por sequenciamento de DNA (Big Dye). Um estudo com gestantes incluiu 115 saudáveis (CTRL) e 112 portadoras de GDM e o polimorfismo rs2268574:T>C do gene da glucoquinase (GCK). O polimorfismo rs2268574:T>C foi associado à proteção para o GDM (alelo-T, CTRL 48,3% vs GDM 38,4%; P=0,034), com razão de chance de 1,5 (95%IC, 1,03-2,17). Outro estudo envolveu 313 mulheres (idade ? 40 anos) classificadas em grupo controle saudável (CTRL, n=141), T2DM obesas (ObT2DM, n=130; IMC>30kg/m2) e obesas não portadoras de T2DM (Ob, n=42). Os genes e polimorfismos estudados foram: PPARg (rs1801282:C>G), IGF2BP2 (rs4402960:G>T), GCK (rs144723656:C>T, rs2268574:T>C, rs2268575:A>G), GCKR (rs780094:C>T), TCF7L2 (rs7901695:T>C), LEP (rs7799039:A>G), LEPR (rs1137100:A>G, rs1137101:A>G), SLC30A8 (rs13266634:C>T), FTO (rs8050136:A>C, rs1421085:T>C, rs9930506:A>G), e GHRL (rs73125661:A>G, rs57221010:A>C, rs1629816:C>T, rs10490815:A>G, rs27498:C>T, rs27647:G>A, rs26802:A>C, rs55821288:G>A, rs35679:G>A, rs35680:G>A, rs35682:C>T, rs4684677:A>T, rs35683:C>T). Os polimorfismos não foram associados aos grupos em estudo. O gene da preprogrelina (GHRL) foi sequenciado por completo em uma subamostra contendo 20 indivíduos; CTRL=5, ObT2DM=10 e Ob=5). Foram identificados 13 polimorfismos (rs73125661:A>G, rs57221010:A>C, rs1629816:C>T, rs10490815:A>G, rs27498:C>T, rs27647:G>A, rs26802:A>C, rs55821288:G>A, rs35679:G>A, rs35680:G>A, rs35682:C>T, rs4684677:A>T e rs35683:C>T) sem que um marcador molecular (Tagging SNP) para os processos patológicos fosse identificado. Todas as variáveis estudadas avaliando o diabetes tipo 2 e/ou obesidade não mostraram associação (P>0,05) com estes processos patológicos avaliados, assim como parâmetros antropométricos e laboratoriais. Após análises in sílico, as variantes do gene GCK rs144723656:C>T e rs2268574:T>C foram identificadas em uma sequência considerada como facilitadora do processamento do RNA (splicing), enquanto que a variante rs2268575:A>G do mesmo gene, em região com potencial de silenciar este processo. As frequências alélicas dos polimorfismos em estudo foram em geral similares às descritas em outras populações Caucasoides. Vários polimorfismos têm neste estudo sua primeira descrição quanto à suas frequências em uma amostra da população brasileira. Palavras-chave: Diabetes mellitus Gestacional, Diabetes mellitus tipo 2, obesidade, genes-alvo, variabilidade genética. / Abstract: The Type 2 Diabetes mellitus (T2DM) and Gestational Diabetes mellitus (GDM) are associated with obesity (Ob) and are pathological processes of increasing frequency in the world, with high morbidity and mortality. Multiple genetic factors are associated with T2DM and GDM, although little of them are studied in the Brazilian population. The study of genetic variations and laboratory biomarkers associated with increased risk or protection for T2DM and GDM characterizes the aim of this study. The Ethics Committee of the Federal University of Paraná (UFPR) approved this research, CAAE search: 01038012.2.0000.0102. Anthropometric and laboratory parameters (glycemic and lipid profiles and kidney function) were assessed. The polymorphisms were investigated with fluorescent probes (TaqMan®) or by DNA sequencing (BigDye). The study included 115 healthy pregnant women (CTRL) and 112 women with GDM and the polymorphism rs2268574:T>C of the glucokinase gene (GCK). The polymorphism rs2268574:T>C was associated with protection for GDM (T-allele, CTRL 48.3% vs GDM 38.4%; P = 0.034), with an odds ratio of 1.5 (95% CI, 1.03 -2.17). The other study investigated 313 women (age ? 40 years) classified in healthy control group (CTRL, n = 141), obese T2DM (ObT2DM, n = 130; BMI> 30kg/m2) and obese non T2DM carriers (Ob, n = 42). The studied genes and polymorphisms were: PPAR (rs1801282C>G), IGF2BP2 (rs4402960:G>T), GCK (rs144723656:C>T, rs2268574:T>C, rs2268575:A>G), GCKR (rs780094:C>T), TCF7L2 (rs7901695:T>C), LEP (rs7799039:A>G), LEPR (rs1137100:A>G, rs1137101:A>G), SLC30A8 (rs13266634:C>T), FTO (rs8050136:A>C, rs1421085:T>C, rs9930506:A>G), and GHRL (rs73125661:A>G, rs57221010:A>C, rs1629816:C>T, rs10490815:A>G, rs27498:C>T, rs27647:G>A, rs26802:A>C, rs55821288:G>A, rs35679:G>A, rs35680:G>A, rs35682:C>T, rs4684677:A>T, rs35683:C>T) polymorphisms were not associated to the study groups. The preproghrelin gene (GHRL) was completely sequenced on a subsample composed by 20 subjects, CTRL = 5, ObT2DM = 10 and Ob = 5). In this gene were identified 13 polymorphisms (rs73125661:A>G, rs57221010:A>C, rs1629816:C>T, rs10490815:A>G, rs27498:C>T, rs27647:G>A, rs26802:A>C, rs55821288:G>A, rs35679:G>A, rs35680:G>A, rs35682:C>T, rs4684677:A>T and rs35683:C>T) without identification of a molecular marker (Tagging SNP) for the studied pathological processes. All variables evaluating type 2 diabetes and/or obesity were not associated (P>0.05) with the studied pathological processes, as well as anthropometric and laboratory parameters. After in silico analyzes, variants of GCK gene (rs144723656:C>T and rs2268574:T>C were identified in a sequence considered as a enhancer of RNA processing (splicing), while the variant rs2268575:A>G at the same gene, in a potential region to silence this process. The allelic frequencies of the polymorphisms in the study were generally similar to those described in other Caucasian populations. Several polymorphisms have first described as to their frequencies in a sample of the Brazilian population. Keywords: Gestational Diabetes mellitus, Type 2 Diabetes mellitus, obesity, target-genes, genetic variability.

Orientadora : Profª Drª Fabiane Gomes de Moraes Rego / Coorientador : Prof. Dr. Geraldo Picheth / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa: Curitiba, 17/06/2015 / Inclui referências : f. 115-141 / Área de concentração: Análises clínicas / Resumo: O Diabetes mellitus (DM) é uma síndrome de etiologia múltipla e poligênica. A hiperglicemia crônica favorece a formação de produtos finais de glicação avançada, os AGEs (Advanced Glycation End-products). A interação AGE-RAGE (receptor for AGE), inicia uma cascata de processos pro-inflamatórios e pro-coagulantes que resultam em estresse oxidativo, base da disfunção endotelial envolvida nas complicações vasculares do DM. Isoformas solúveis de RAGE (sRAGE e esRAGE) têm sido apontadas como preditores de risco para estas complicações. Assim, a interação de fatores genéticos e ambientais na fisiopatologia do DM torna relevante a descoberta de biomarcadores e variantes genéticas que possam auxiliar no diagnóstico, monitoramento ou prognóstico da doença. O objetivo do trabalho foi investigar a presença e associação entre biomarcadores e variantes genéticas no DM tipo 1 (DM1), tipo 2 (DM2) e gestacional (DMG). O projeto foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa do Setor de Ciências da Saúde da UFPR (CAAE: 01038112.0.0000.0102). Neste estudo, 967 participantes foram subdivididos em grupos caso-controle: 100 DM1 e 117 controles saudáveis; 200 DM2 e 298 controles saudáveis; e, 127 DMG e 125 gestantes saudáveis. Biomarcadores de controle glicêmico, perfil lipídico, de inflamação e da função renal foram quantificados. Os polimorfismos rs17576 do gene MMP9 e rs3134945 do gene RAGE foram genotipados nos grupos caso-controle DM1 e DM2, e os polimorfismos rs1421085 do gene FTO, rs780094 do gene GCKR, rs1137100 e rs1137101 do gene LEPR, rs1801282 do gene PPARg e rs7901695 do gene TCF7L2, no grupo caso-controle DMG. Um subgrupo de pacientes com DM2 e complicações vasculares (n=44) foi selecionado e pareado por gênero e idade com controles saudáveis (n=44). Neste subgrupo (n=88), foram quantificadas sRAGE e esRAGE através de ensaio imunoenzimático para verificar associação dessas isoformas com outros biomarcadores ou com as variantes rs17576 do MMP9 e rs3134945 do RAGE. Todas as variantes estudadas estavam em equilíbrio de Hardy-Weinberg. O polimorfismo rs17576 do gene MMP9 não foi associado ao DM1(P=0,469) ou DM2 (P=0,269); assim como o rs3134945 do gene RAGE não está associado ao DM1(P=0,162) ou DM2 (P=0,659) na população em estudo. Os polimorfismos rs1421085 do gene FTO, rs1137100 e rs1137101 do gene LEPR, rs1801282 do gene PPARg e rs7901695 do gene TCF7L2 não foram associados ao DMG no presente estudo (P=0,420, P=0,687, P=0,228, P=0,851 e P=0,413, respectivamente). O polimorfismo rs780094 do gene GCKR foi associado ao DMG na população estudada, nos modelos codominante e dominante (P=0,022 e P=0,010, respectivamente), sendo o alelo T protetor (Odds ratio 1,41; 95%IC 0,97- 2,03). Os polimorfismos em estudo não foram associados aos parâmetros antropométricos, clínicos e laboratoriais estudados. As concentrações séricas de sRAGE e esRAGE não diferem entre gêneros e não foram associadas ao DM2 ou com os polimorfismos rs17576 do MMP9 e rs3134945 do RAGE; mas apresentaram correlação positiva e significativa (P<0,05) com a glicemia (r=0,335 e r=0,320, respectivamente) e com o 1,5 anidroglucitol (r=0,446 e r=0,563, respectivamente). Em conclusão, o gene GCKR é candidato à associação com DMG, e a presença do alelo T do polimorfismo rs780094 foi associada ao risco reduzido para o desenvolvimento da doença. Palavras-chave: Diabetes mellitus, biomarcadores, polimorfismos, sRAGE, esRAGE. / Abstract: Diabetes mellitus (DM) is a multifactorial and polygenic syndrome. The chronic hyperglycemia common in DM promotes the formation of Advanced Glycation Endproducts, AGEs. The interaction of AGEs with cellular receptor RAGE (receptor for AGE), initiates a cascade of pro-inflammatory and pro-coagulant processes which result in oxidative stress and endothelial dysfunction, basis of vascular complications. Thus, the soluble isoform of RAGE (sRAGE and esRAGE) have been identified as predictors of risk for DM complications. Because of the interaction of genetic and environmental factors in the DM pathophysiology it is relevant to search for serum or genetic biomarkers as tools for diagnosis, monitoring or prognosis of DM. The aim of this study was to investigate the association between serum biomarkers and genetic variants in type 1 DM (T1D), type 2 DM (T2D) and gestational diabetes (GDM) The study was approved by the Research Ethics Committee of the UFPR Health Sciences Sector (CAAE: 01038112.0.0000.0102). Were involved in this study 967 participants and the case-control groups were composed of 100 T1D and 117 healthy controls; 200 T2D and 298 healthy controls; and GDM 127 and 125 healthy pregnant women. Glycemic control biomarkers, lipid profile and inflammatory and renal function biomarkers were measured. The polymorphisms rs17576 of MMP9 gene and rs3134945 of RAGE gene were genotyped in the case-control groups T1D and T2D, and we genotyped, in GDM case-control group, the polymorphisms rs1421085 of FTO gene, rs780094 of GCKR gene, rs1137100 and rs1137101 of LEPR gene, rs1801282 of PPARg gene and rs7901695 of TCF7L2 gene. A set of T2D patients with vascular complications was selected and paired by gender and age with healthy controls. In this subgroup (n=88) we measured sRAGE and esRAGE by enzyme immunoassay to verify association with biomarkers or with the rs17576 and rs3134945 polymorphisms. All the studied variants were within the Hardy-Weinberg equilibrium. The rs17576 MMP9 gene polymorphism was not associated with T1D (P=0.469) or T2D (P=0.269); as well as rs3134945 RAGE gene polymorphism was not associated with T1D (P=0.162) or T2D (P=0.659) in the study population. The polymorphisms rs1421085 of FTO gene, rs1137100 and rs1137101 of LEPR gene, rs1801282 of PPARg gene and rs7901695 of TCF7L2 gene were not associated with GDM in this study (P=0.420, P=0.687, P=0.228, P=0.851 and P=0.413, respectively). The rs780094 GCKR gene polymorphism was associated with the GDM in the studied population, in codominant and dominant models (P=0.022 and P=0.010, respectively). We also observed the protective effect of T allele (odds ratio 1.41, 95%CI 0,97-2.03) in these patients. None of the studied polymorphisms were associated with anthropometric, clinical and laboratory parameters. Serum concentrations of sRAGE and esRAGE do not differ between genders and are not associated with T2D or with rs17576 of MMP9 gene and rs3134945 of RAGE gene; but they showed a positive and significant correlation (P < 0.05) with glucose (r=0.335 and r=0.320, respectively) and with 1.5 anhydroglucitol (r=0.446 and r=0.563, respectively). In conclusion, the GCKR gene is a candidate for association with GDM, and the presence of the T allele of the rs780094 polymorphism was associated with reduced risk for the disease. Key-words: Diabetes mellitus, biomarkers, polymorphisms, sRAGE, esRAGE.

Orientadora : Profª. Drª. Sandra Maria W. Zanin / Coorientadores : Prof. Dr. Francisco de Assis Marques; Prof. Dr. Marcos Vinicius Ferrari / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa: Curitiba, 15/02/2017 / Inclui referências : f. 87-94 / Resumo: O tema carrapatos no Brasil e no mundo, tornou-se importante principalmente pelos aspectos negativos que estes ectoparasitas causam nas áreas de saúde, ambiental e econômica. Na saúde porque os hospedeiros sofrem pela infestação de carrapatos que também transmitem doenças. No ambiente por causa dos produtos químicos comerciais acaricidas usados e pela crescente resistência dos carrapatos a estes produtos disponíveis comercialmente, agravando o problema e econômicos pelos custos para controle e pelas perdas ocasionadas pelos carrapatos. O linalol e o cinamato de metila, componentes voláteis de óleos essenciais, possuem atividade comprovada sobre Aedes aegypti como também são bem menos agressivos ao meio ambiente que os acaricidas comerciais. Testes iniciais in vitro comprovaram a ação acaricida da mistura de linalol e cinamato de metila, provocando a morte de fêmeas ingurgitadas de carrapatos Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Canestrini, 1887), em 24 horas. A eficácia acaricida in vitro do linalol e cinamato de metila, misturados na proporção de 4:1 (m/m) respectivamente, identificado como ativo LCm, foi avaliada sobre fêmeas ingurgitadas de Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Canestrini, 1887) coletadas manualmente de gado holandês de lactação na Fazenda da UFPR. A ação acaricida, in vitro, com o ativo LCm nas concentrações de 10, 100, 250, 500, 750 e 1000 ?g/g em água e tween 80® como dispersante foi realizada. O ativo LCm emulsionado nas concentrações de 6, 10 e 12 mg/g foi aplicado sobre as fêmeas ingurgitadas. A aplicação do ativo LCm emulsionado foi realizada com o desenvolvimento de uma emulsão base estável com óleo mineral e goma arábica, sendo o ativo LCm adicionado à emulsão base no momento da aplicação sobre os carrapatos devido à sua volatilidade e instabilidade. O doseamento do ativo LCm foi desenvolvido no cromatógrafo líquido de alta resolução (CLAE). Após o banho de imersão, as fêmeas foram mantidas em placas de Petri no laboratório à temperatura ambiente. A atividade acaricida do ativo LCm diluído em água, mostrou-se inócua em relação a mortalidade e oviposição das fêmeas ingurgitadas. No teste acaricida com o ativo LCm emulsionado, a emulsão sem o ativo LCm, usada como branco no teste de imersão, apresentou atividade na mortalidade das fêmeas. A emulsão com o ativo LCm na concentração de 12 mg/g, apresentou no segundo dia do teste, mortalidade de 46,7 % acelerando o processo. A oviposição das fêmeas com a emulsão sem ativo LCm foi de 27,3 % e a da emulsão com 12 mg/g do ativo LCm foi de apenas 10,0 % de oviposição. A emulsão base foi diluída na proporção de 1:5 (m/m) em água e comparada novamente com a emulsão base sem diluição em um novo teste acaricida. A emulsão base, sem o ativo LCm, apresentou no terceiro dia de teste mortalidade de 48,3 % e a emulsão base diluída apresentou no quinto dia do teste mortalidade de 66,7 %, retardando o processo. A oviposição das fêmeas com a emulsão sem diluição foi de 37,9% e a da emulsão diluída foi de 100,0 % de oviposição das fêmeas. Novo teste deve ser realizado com a emulsão diluída como referência para verificação da ação acaricida específica do ativo LCm em concentrações de ativo LCm apropriadas. Os dados obtidos neste estudo revelam o uso promissor da emulsão com o ativo LCm e a necessidade de continuidade dos estudos da ação acaricida no controle de carrapatos Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Canestrini, 1887). Palavras - chave: acaricidas, carrapatos, Rhipicephalus (Boophilus) microplus, linalol, cinamato de metila, emulsão, CLAE. / Abstract: The matter of tick in Brazil and in the world has become relevant mainly due to negative effects that these ectoparasites have in health, environment and economics. Health is impaired as the hosts suffer due to infestation of ticks, who also transmit diseases. The environment is compromised by the use of commercial acaricidal chemicals and also by the increasing resistance of ticks to the products available, which aggravates the problem. The economic impacts are cause of the investment to control ticks and the occasional cattle loss. Linalool and methyl cinnamate, volatile components of essential oils, have a proven effect on Aedes aegypti and are less aggressive to the environment when compared to the commercial acaricides available. Initial in vitro tests confirmed the acaricidal action of the mixture of pure linalool and cinnamate, causing death of engorged females of Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Canestrini, 1887) ticks within 24 hours. The in vitro acaricidal efficacy of linalool and methyl cinnamate, mixed at a ratio of 4:1 (m/m) respectively, identified as LCm active, was evaluated on engorged females of Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Canestrini, 1887), collected manually from Dutch lactation cattle at the UFPR Farm. The acaricidal action, in vitro, was performed with the active LCm at the concentrations of 10, 100, 250, 500, 750 and 1000 ?g/g in water and tween 80® as a dispersant. The LCm active was also emulsified at the concentrations of 6, 10 and 12 mg/g and administered to the engorged females. The application of the emulsified LCm active was carried out with the development of a stable base emulsion with mineral oil and arabic gum, with the LCm active being added to the base emulsion at the time of application on the ticks due to its volatility and instability. The dosage of the LCm active was developed with high-performance liquid chromatography (HPLC). After the immersion bath, the females were kept in Petri dishes in the laboratory at room temperature. The acaricide activity of the active LCm diluted in water proved to be innocuous on mortality and oviposition of engorged females. In the acaricide test with the active LCm emulsified, the emulsion without the active LCm, used as white in the immersion test, showed activity in the mortality of the females. The emulsion with the LCm active at the concentration of 12 mg/g, presented, on the second day of the test, mortality of 46.7%, accelerating the process. The oviposition of the females with the emulsion without LCm active was 27.3% and that of the emulsion with 12 mg/g of the LCm active was only 10.0%. The base emulsion was diluted 1:5 (m/m) in water and compared again with the base emulsion without dilution in a new acaricide test. The base emulsion without the active LCm, presented, on the third day of the test, mortality 48.3% while the diluted base emulsion presented, on the fifth day of the test, mortality of 66.7%, delaying the process. The oviposition of the females with the emulsion without dilution was 37.9% while that of the diluted emulsion was 100.0%. Further testing should be performed with the diluted emulsion as a reference in order to verify the specific acaricidal action of the LCm active at appropriate concentrations. The data obtained in this study reveal the promising use of the emulsion with the LCm active and the need for continuity of the acaricidal action studies in the control of Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Canestrini, 1887) ticks. Key words: acaricides, ticks, Rhipicephalus (Boophilus) microplus, linalool, methyl cinnamate, emulsion, HPLC.

Orientadora : Profª. Drª. Sandra Mara Woranovicz Barreira / Coorientador : Prof. Dr. Alan Guilherme Gonçalves / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa: Curitiba, 22/02/2013 / Inclui referências : f. 108-115 / Área de concentração: Insumos, medicamentos e correlatos / Resumo: A inativação fotodinâmica (PDI) consiste em um tipo de intervenção baseado na associação de luz, fotossensibilizador e oxigênio molecular (O2), que resulta na destruição de um alvo biológico específico. Dentre os fotossensibilizadores empregados na PDI, 5,10,15,20-tetraquis(N-metilpiridino-4-il)porfirina (Tetra-Py+ ) tem demonstrado ser efetivo na fotoinativação de diversos micro-organismos. Colletotrichum graminicola é um fitopatógeno que causa antracnose foliar e do colmo em milho (Zea mays L.). C. graminicola é altamente resistente em condições ambientais, sendo também resistente a fungicidas comumente empregados na agricultura. Dessa forma, a antracnose tem causado impacto importante nas culturas de milho do Brasil. Além disso, o uso abusivo de fungicidas na cultura do milho representa um problema de saúde pública. Assim, o objetivo do presente trabalho foi avaliação da fotoinativação de C. graminicola utilizando Tetra-Py +, além de quatro derivados porfirínicos com ambos os grupos N-metil-piridina catiônica meso-ligados e grupos fenil meso-ligados (Tri-Py+, Di -cis-Py+, Di-trans-Py+ e Mono-Py+). Com esse propósito, os experimentos foram realizados empregando suspensões de conídios padronizadas a 105 e 104 conídios / mL. As concentrações dos fotossensibilizadores foram 5, 10, 15 e 25 M e o tempo de irradiação máximo foi ajustado para 20 minutos. Além dos ensaios de fotoinativação, três tipos de experimentos controles foram executados simultaneamente: controle claro, branco e controle escuro. A fotoestabilidade das porfirinas e a produção de oxigênio singlete foram determinadas para todos os compostos. Entre as porfirinas avaliadas, apenas o derivado Di-cis-Py+ demonstrou toxicidade no escuro e, assim, não foi utilizado para estudos de PDI. As outras porfirinas evidenciaram propriedades fotoinativadoras em diferentes níveis, que foram relacionadas com o número de cargas e sua distribuição na estrutura da molécula. Estas características estruturais também refletiram na fotoestabilidade e produção de oxigênio singlete. As porfirinas Tri-Py+ e Di-trans-Py+ demonstraram os melhores resultados, ocorrendo fotoinativação completa na concentração de 5 M, com um tempo de irradiação de cinco minutos. A porfirina Tetra-Py+ mostrou uma propriedade fotoinativadora mais branda, para a qual a fotoinativação total foi evidente na concentração de 50 M, para o mesmo período de cinco minutos irradiação. Por sua vez, a porfirina Mono- Py+ foi o derivado menos eficaz (25 M, 20 minutos), inativando totalmente apenas a suspensão de conídios menos concentrada. Como conclusão, a fotoinativação de C. graminicola empregando meso-tetra-arilporfirinas catiônicas como fotossensibilizadores ocorreu em níveis significativos, demonstrando a possibilidade de utilização desses compostos em associação com a luz solar para inativação do micro-organismo. Esse processo pode contribuir para o controle da antracnose na cultura do milho no Brasil. Palavras-chave: Porfirinas. Síntese química. Inativação fotodinâmica. Colletotrichum. / Abstract: Photodynamic inactivation (PDI) is a type of intervention based on the association of light, photosensitizer and molecular oxygen (O2), which results in the destruction of a specific biological target. Among the photosensitizers utilized in PDI, 5,10,15,20- tetrakis(N-methyl pyridinium-4-yl)porphyrin (Tetra-Py+ ) has demonstrated to be effective in the photoinactivation of diverse microorganisms. Colletotrichum graminicola is a fungal pathogen that causes leaf and stalk anthracnose in maize (Zea mays). C. graminicola is highly resistant under environmental conditions, being also resistant to fungicides commonly used in agriculture. In this way, anthracnose has caused an important impact in Brazil's maize crops. In addition, the abusive use of fungicides in maize cultivation represents a public health issue. Thus, the objective of the present work was the evaluation of C. graminicola photoinactivation using Tetra-Py+, plus four porphyrin-derivatives having both meso-linked N-methyl-pyridine cationic centers and meso-linked phenyl groups (Tri-Py+, Di-trans-Py+, Di-cis-Py+ and Mono-Py+). For this purpose, experiments were performed with standardized conidial suspensions at 105 and 104 conidia/mL. The concentrations of the photosensitizers were 5, 10, 15 and 25 ?M and the maximum irradiation time was set to 20 minutes. In addition to the photoinactivation assays, three types of control experiments were simultaneously executed: blank, light control and dark control. Porphyrin photo-stability and production of oxygen singlet were also determined for all compounds. Among the porphyrins herein evaluated, only Di-cis- Py+ derivative demonstrated toxicity in the dark and thereby it was not employed for PDI studies. The other porphyrins presented photoinactivating properties at varying levels that were related to the number of charges and their distribution in the molecule structure. These structural features also reflected in the photo-stability and singlet oxygen production. Porphyrins Tri-Py+ and Di-trans-Py+ demonstrated the best results, giving complete photoinactivation at 5 ?M with an irradiation time of five minutes. Porphyrin Tetra-Py+ showed a milder photoinactivation property, which was complete at 50 ?M with the same irradiation time. Porphyrin Mono-Py+ was the least effective derivative (25 ?M, twenty minutes), resulting in total inactivation only for the less concentrated conidial suspension. In conclusion, the photoinactivation of C.. graminicola using cationic meso-substituted porphyrins occurred in significant levels, demonstrated the possibility of using these compounds in combination with sunlight for inactivation of microorganism. This process may contribute to the control of maize anthracnose qin Brazil. Key-words: Porphyrins. Chemical synthesis. Photodynamic inactivation. Colletotrichum

Orientadora : Profª. Drª. Cyntia Maria Telles Fadel-Picheth / Coorientador : Prof. Dr. Leonardo Magalhães Cruz / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa: Curitiba, 03/07/2017 / Inclui referências : f. 85-108 / Resumo: Aeromonas sao bacilos gram-negativos, encontrados em ambientes aquaticos, capazes de causar diversas infeccoes em humanos destacando-se a diarreia. Os objetivos deste trabalho foram sequenciar o genoma da estirpe A. caviae 8LM, isolada a partir de fezes diarreicas, e realizar analises de genomica comparativa. O sequenciamento foi realizado empregando os sistemas 454 GS Junior, Illumina MiSeq e PacBio. Nas analises de genomica comparativa foram empregadas diversas ferramentas de bioinformatica para analise estrutural e do conteudo genico de estirpes de Aeromonas. O genoma de A. caviae 8LM apresenta 4,6Mb, conteudo GC de 61,7%, dispondo de 4.101 CDS e 10 operons de rRNA distribuidos proximos da origem de replicacao. Foram identificados diversos genes relacionados com virulencia incluindo motilidade e adesao, toxinas, sistemas de secrecao tipo II e VI, entre outros. As analises de genomica comparativa mostram a similaridade do genoma de A. caviae 8LM com outras estirpes da especie. As analises realizadas indicaram divergencias na identificacao de algumas Aeromonas e outras, identificadas apenas ao nivel de genero puderam ser identificadas ao nivel de especie. O pan-genoma de Aeromonas e formado por 9.785 genes e o core genoma 701 genes. Foram detectadas regioes do genoma que podem conter possiveis marcadores moleculares para a especie A. caviae. Os resultados deste trabalho trazem informacoes sobre o genoma e virulencia de A. caviae 8LM, e sugerem a presenca de possiveis marcadores moleculares com potencial para o desenvolvimento de testes diagnosticos. Palavras-chave: Aeromonas. Genoma completo. Genomica comparativa. / Abstract: Aeromonas are gram-negative bacilli, found in aquatic environments, are capable of causing several human infections, highlighting diarrhea. The proposes of this work were to sequence the genome of strain A. caviae 8LM, isolated from diarrheal feces, and carry out comparative genomics analyzes. Sequencing was performed applying the 454 GS Junior, Illumina MiSeq and PacBio systems. In comparative genomics analyzes, several bioinformatics tools were applied for structural and gene content analysis of Aeromonas strains. The genome of A. caviae 8LM presents 4.6Mb, GC content of 61.7%, 4,101 CDS and 10 distributed rRNA operons close to the origin of replication. Several genes related to virulence including motility and adhesion, toxins, type II and VI secretion systems, among others were identified. Comparative genomics analyzes exhibited the similarity of the genome of A. caviae 8LM with other strains of the species. The analyzes indicated differences in identification of some Aeromonas and others that were only identified at genus level could be identified at species level. The pan-genome of Aeromonas consists of 9,785 genes and the core genome 701 genes. Genomic regions containing possible molecular markers for A. caviae species were detected. The results of this work provide information about the genome and virulence of A. caviae 8LM, and suggest the presence of possible molecular markers with potential for the development of diagnostic tests. Key-words: Aeromonas. Complete genome. Comparative genomics.

ResumoIntrodução: Foram avaliadas três anticitocinas utilizadas para o tratamento da artrite reumatoide. Essas drogas, chamadas de biológicas, fazem parte do grupo de medicamentos da atenção especializada e são fornecidos à população pelo Sistema Único de Saúde (SUS). Foi realizada uma avaliação econômica das anticitocinas e seu impacto orçamentário no Paraná, tomando como ano-base o ano de 2008. Objetivo: O objetivo desse trabalho foi definir se as anticitocinas adalimumabe, etanercepte e infliximabe apresentam diferenças de custo-efetividade para tratar da artrite reumatoide nãocontrolada, sob a perspectiva do SUS. Também se buscou determinar qual dessas alternativas terapêuticas apresenta melhor relação custo-utilidade e qual seria o impacto econômico da exclusão de algum(uns) desse(s) medicamento(s) do Programa de Atenção Especializada do Ministério da Saúde ou do crescimento do número de pacientes cadastrados que usam esses medicamentos, considerando as alternativas atualmente padronizadas no sistema. Metodologia: Dados de eficácia, segurança e tolerabilidade do uso das drogas foram obtidos de revisões sistemáticas e metanálises. O custo dos medicamentos foi calculado utilizando-se os preços pagos pelo Centro de Medicamentos do Paraná nas compras realizadas por licitações em 2008; outros custos diretos envolvidos no tratamento, como insumos e monitoração dos tratamentos foram obtidos da tabela do Sistema de Informação Ambulatorial do SUS - SIA/SUS, disponibilizada pelo DATASUS. O modelo de Markov foi utilizado para realizar a avaliação econômica. Valores como o escore de utilidade dos pacientes em cada estágio do tratamento foi calculado a partir dos valores de HAQ (Health Assesment Questionnaire) antes e depois do tratamento obtidos das mesmas revisões sistemáticas. Para o cálculo da relação custo-utilidade foi considerado horizonte temporal de 10 anos e ciclos de seis meses. A taxa de desconto aplicada foi de 5%. Foram realizadas análises de sensibilidade, variando a eficácia e o custo dos tratamentos. O impacto orçamentário das anticitocinas no Paraná foi calculado através da criação de diferentes cenários, considerando a taxa média de novos pacientes com artrite reumatoide incluídos no programa do SUS para receberem anticitocinas. Resultados: A avaliação de custo-utilidade, medida em Reais/Ano de Vida Ajustado por Qualidade (QALY) ganho, gerou os seguintes valores (em R$/QALY): 511.633,00, 437.486,00 e 657.593,00 para o adalimumabe, etanercepte e infliximabe, respectivamente. A análise de custo incremental resultou em 307.793,00 e 259.200,00, para o adalimumabe e para o etanercepte, considerando como comparador-base o infliximabe. As análises de sensibilidade somente levaram a alterações na ordem das relações custo-utilidade para variações da ordem de 15% (custo do adalimumabe, nesse caso). Nas análises de impacto orçamentário, fazendo uma projeção do número de novos pacientes para 2009, baseado no último trimestre de 2008, verificou-se que, considerando os pacientes incluídos para tratamento com anticitocinas, isso geraria um custo adicional de aproximadamente R$ 8.500.000,00, quando comparado ao ano de 2008. Isso representa um aumento anual de 3,3% dos gastos da SESA-PR com medicamentos. Conclusão: Observou-se uma grande discrepância entre os valores de custo-utilidade dos medicamentos; o tratamento com infliximabe custa aproximadamente 70% a mais por QALY, em comparação com o etanercepte. Essas informações devem ser avaliadas pelos tomadores de decisão para melhor alocação dos recursos. É interessante que as três opções de tratamento continuem sendo disponibilizadas por motivos de diferenças nas respostas clínicas dos pacientes, cabendo aos gestores estaduais e aos médicos a decisão do tratamento para cada paciente individualmente.

Made available in DSpace on 2016-05-11T12:03:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000478505-Texto+Completo-0.pdf: 2728715 bytes, checksum: 93bb3d4fcee10a1e8abba33e2e0e8996 (MD5) Previous issue date: 2016 / Introduction: Cutaneous leishmaniasis is caused by Leishmania protozoan and transmitted through the female of Lutzomyia sandflies. The disease can manifest itself in different clinical forms: localized cutaneous leishmaniasis, disseminated cutaneous leishmaniasis, recidivans and diffuse cutaneous leishmaniasis. The North and Northeast (Brazil) are the most affected area by the disease. Pentavalent antimonials and amphotericin B have been the most used drugs for the treatment of this disease but may cause many side effects, which leads the patients to discontinue treatment. Control or progression of the disease has been related to the immune response triggered by the individual. PNP (purine nucleoside phosphorylase) is the key enzyme in the purine salvage route catalyzing the reversible phosphorolysis of purine nucleosides such as deoxyinosine or deoxyguanosine producing their respective bases and deoxyrribose-1-phosphate. The PNP inhibitors can be used for treating diseases caused by disorder mediated by T cells. Immucillin - DI4G (4th generation Immucillin ; 7-((bis(2-hydroxyiethyl)amine)methyl)-1,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-4-one) is considered as a potent inhibitor of PNP. Objective: development of pre-formulation and formulation studies of a pharmaceutical form for topical use containing Immucillin-DI4G as drug candidate for Cutaneous Leishmaniasis treatment. Material and Methods: Characterization of the compound was performed by NMR, FTIR-ATR and HRMS. The stability of the amorphous powder was evaluated over 90 days using a HPLC method for quantification. Formulations have been developed for stability, rheological and spreadability studies over 30 and 90 days. A method for the quantification of Immucillin-DI4G in the formulation was developed and validated using the HPLC. Results and discussion: The Immucillin - DI4G (amorphous powder) was stable up to 30 days when stored at 4 °C and 25 °C. Formulation 1 (Immucillin - DI4G 1. 1% Carboxyvinylpolymer gel 2%) was stable only when stored at 4 °C for a period of 60 days. Formulation 1 was considered as a non-Newtonian fluid with pseudoplastic behavior and no alterations in viscosity was observed over 90 days. On the other hand, significant changes in spreadability was observed when topical formulation was stored at 45 °C. The formulation containing additives (formulation 2) showed an improvement in stability when stored at 45 °C for a period of 30 days, but there was a significant decrease in drug content when stored at 4 °C and 25 °C. Formulations 3 (Immucillin-DI4G a 1,1% Gel-Cream) and 4 (Immucillin-DI4G 1. 1% in Hydroxypropylcellulose polymer at 2%) presented significant loss in the drug content in 30 days when stored at 45 °C. The results shows that further studies should be conducted in order to analyze the possible degradation products looking for design of novel formulations. / Introdução: A Leishmaniose Cutânea é causada por protozoários do gênero Leishmania e transmitidas através das fêmeas dos mosquitos do gênero Lutzomyia. A Leishmaniose cutânea pode se manifestar de diferentes formas clínicas: cutânea localizada, cutânea disseminada, recidiva cútis e cutânea difusa. A região Norte e Nordeste são as mais acometidas pela doença. Os antimoniais pentavalentes e a anfotericina B são os medicamentos mais utilizados para o tratamento desta doença, porém podem causar vários efeitos adversos fazendo com que muitos pacientes abandonem o tratamento. O controle ou a progressão da doença estão diretamente relacionados com a resposta imunológica desencadeada pelo indivíduo. A PNP é a enzima chave na rota de salvamento de purinas, catalisa a fosforólise reversível de nucleosídeos purínicos como deoxinosina e deoxiguanosina formando suas respectivas bases e deoxirribose-1-fosfato. Os inibidores da PNP podem ser utilizados para tratamento de doenças causadas por desordem mediada pelas células T, através da inibição segura e seletiva da proliferação da célula T. O Immucillin-DI4G (Immucillin de 4ª geração; 7-((bis(2-hidroxietil)amino)metil)-1,5-diidro-4H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-ona) é considerado como um potente inibidor da PNP. Objetivo: desenvolver estudos de pré-formulação e formulação de uma forma farmacêutica de uso tópico contendo o Immucillin-DI4G como candidato a fármaco para tratamento da Leishmaniose Cutânea. Materiais e Métodos: Foi realizada a caracterização do composto através do RMN, EMS e FTIR-ATR. A estabilidade do pó amorfo foi avaliada durante 90 dias, o doseamento foi realizado através do CLAE. Formulações foram desenvolvidas para o estudo de estabilidade, estudos reológicos e espalhabilidade durante 30 e 90 dias. Um método para o doseamento do fármaco nas formulações foi desenvolvido e validado empregando o método de CLAE. Resultados e discussão: O Immucillin-DI4G (pó amorfo) mostrou-se estável até 30 dias quando armazenado a 4 °C e 25 °C. A formulação 1(Immucillin-DI4G a 1,1% em Gel polímero Carboxivinílico a 2% ) mostrou-se estável apenas quando armazenada a 4 °C por um período de 60 dias; é considerada como um Fluído Não-Newtoniano de comportamento pseudoplástico, sem alterações na viscosidade durante 90 dias, porém com alterações significativas na espalhabilidade quando armazenada a 45 °C. A formulação que continha aditivos (formulação 2) apresentou uma melhora na estabilidade quando armazenada a 45 °C num período de 30 dias, porém apresentou queda significativa no teor do fármaco quando armazenada a 4 °C e 25 °C. As formulações 3 (Immucillin-DI4G a 1,1% em Creme-Gel) e 4 (Immucillin-DI4G a 1,1% em Gel Polímero Hidroxipropilcelulose a 2%) apresentaram perdas significativas no teor do fármaco em 30 dias quando armazenadas a 45 °C. Os resultados demonstram que novos estudos devem ser realizados para a análise de possíveis produtos de degradação, para possíveis ajustes nas formulações.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2016-09-20T04:09:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 340691.pdf: 2617221 bytes, checksum: f8a062646186bc0c879ee3c2ecdc3605 (MD5) Previous issue date: 2016 / Indivíduos obesos apresentam concentrações alteradas de diversos minerais essenciais para o metabolismo, tal como o zinco, que atua em várias atividades catalíticas de diversas enzimas, além de atuar no processo adipogênico. Por isso, o objetivo deste trabalho foi avaliar in vitro a influência do zinco nos processos de proliferação e diferenciação celulares, e in vivo o metabolismo de carboidratos. Nos ensaios in vitro, utilizou-se pré-adipócitos para análise da proliferação e diferenciação celular, na ausência e na presença do zinco. In vivo, utilizou-se camundongos que receberam dieta normolipídica (grupo controle), ou dieta hiperlipídica (grupo obeso) por 3 meses. Após este período, o grupo controle e o grupo obeso foram subdivididos para receberem sobrecarga de carboidratos na presença e ausência de zinco (grupo controle com zinco, grupo controle sem zinco, grupo obeso com zinco e grupo obeso sem zinco). Como resultados observou-se uma progressão do ciclo celular caracterizada pela fase S, bem como maior diferenciação, apresentando um aumento no conteúdo de triacigliceróis intracelulares na presença de 2 µg/mL e 4 µg/mL de zinco. In vivo, observou-se que na fase de sobrecarga de carboidrato, ocorreu uma variação da massa corpórea no 10º dia, entre o grupo os grupos com e sem zinco do grupo controle e no 24º dia nos grupos com e sem zinco do grupo obeso. A adiponectina foi inferior no grupo controle sem zinco e a leptina foi superior, quando comparado com o grupo controle com zinco. Diante do exposto, conclui-se que o zinco promoveu o aumento da proliferação e da diferenciação celular, bem como melhorou os fatores relacionados ao metabolismo de carboidratos.<br> / Abstract : Obese individuals have altered concentrations of several essential minerals for metabolism, such as zinc, which operates in various catalytic activities of several enzymes, besides acting in the adipogenic process. Therefore, the objective of this study was to evaluate in vitro the influence of zinc on proliferation and cell differentiation, and in vivo metabolism of carbohydrates. In vitro testing was used for the analysis pre-adipocyte proliferation and cell differentiation in the absence and presence of zinc. In vivo, we used mice that received normolipid diet (control group) or high-fat diet (obese group) for 3 months. After this period, the control group and the obese group were subdivided to receive carbohydrate overload in the presence and absence of zinc (control group with zinc, control group without zinc, obese group with zinc and obese group without zinc). As a result there was been a progression of the cell cycle characterized by the S phase, and greater differentiation, an increase the content of intracellular triglyceride in the presence of zinc 2 µg/mL and 4 µg/mL zinc. In vivo, it was found that the carbohydrate loading phase, there was a body mass variation on the 10th day, between control group with and without zinc and on the 24th day in the obese group with and without zinc. Adiponectin was lower in the control group without zinc and leptin was higher when compared to the control group with zinc. Given the above, it is concluded that zinc promoted the increased proliferation and cell differentiation and improved the factors related to carbohydrate metabolism.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2016 / Made available in DSpace on 2016-09-20T04:12:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 340464.pdf: 31475017 bytes, checksum: 76e8a2f3169647c7c80919f63f656d3f (MD5) Previous issue date: 2016 / Em poucas áreas da economia o Brasil pode desempenhar papel tão destacado quanto no uso sustentável e inteligente do potencial de sua biodiversidade. As plantas medicinais sempre foram objeto de estudo, buscando-se novas fontes para obtenção de princípios ativos, responsáveis por sua ação farmacológica ou terapêutica. Jungia sellowii é uma planta endêmica brasileira que tem suas raízes utilizadas para distúrbios digestivos, porém permanece pouco explorada e conhecida cientificamente. Com o intuito de promover a investigação fitoquímica da espécie para avaliação da atividade biológica in vitro dos componentes majoritários, o extrato bruto das raizes foi submetido a sucessivos procedimentos cromatográficos. Dos quais foi possível purificar e caracterizar 10 substâncias, sendo dois esteroides; o ß-sitosterol e o estigmasterol; um derivado do ácido cafeico, o cafeato de etila; sete terpenóides dos quais cinco são derivados da mesma via metabólica sendo eles a perezona, o a e ß- piptizóis, a diperezona, a curcuhidroquinona-O-ß-Glicopiranosideo; dois derivados do linalol e ácido jungico. Todas as substancias estão sendo descritas pela primeira vez para a espécie e a curcuhidroquinona-O-ß-Glicopiranosideo uma substancia nova, além do derivado trixano ter sido isolado pela primeira vez de fonte natural. A avaliação da atividade leihmanicida in vitro em promastigotas de L. infantum, L. donovani e L. amazonenses da fração Butanol mostrou na dose de 500µg/mL uma porcentagem de inibição de 73%, 60% e 72% respectivamente. Contudo a substancia majoritária curcuhidroquinona-O-ß-Glicopiranosideo apresentou atividade somente contra L. amazonenses sugerindo um efeito sinérgico de outras substancias presentes na fração responsáveis pela atividade. Já a perezona apresentou potente atividade leishmanicida contra amastigotas de L. amazonenses Com uma IC50 de 6,28 ±0,14 µM. Os resultados obtidos ressaltam a importância do estudo fitoquímico e o potencial biológico de Jungia sellowii. <br> / Abstract : In a few areas of the economy Brazil can play a role as prominent and sustainable as the use of the potential of its biodiversity. Medicinal plants have always been the focus of many studies, as sources for active principles responsible for their pharmacological or therapeutic action. Jungia sellowii is a Brazilian endemic plant and has its roots are used for digestive disorders, but remains poorly explored and unknown scientifically. In order to promote the phytochemical research of the specie and to evaluate the biological activity in vitro of it s major components, the crude extract of the roots was subjected to successive chromatographic procedures. Of which was possible to purify and characterize 10 substances, two steroids ß-sitosterol and stigmasterol; a derivative of caffeic acid, ethyl caffeate; seven terpenoids five derived from the same metabolic pathway: perezone, a and ß- piptizols, diperezone and curcuhydroquinone-O-ß-glucopyranoside; two derivatives of linalol, and jungic acid. All substances were described for the first times in the species, curcuhydroquinone-O-ß-glucopyranoside a new substance, and the trixane derivative was isolated for the first time from natural source. The evaluation of the in vitro activity leishimanicid against promastigotes of L. infantum, L. donovani and L. amazonenses of the butanol fraction showed inhibition percentage of 73%, 60% and 72%, respectively. Curcuhydroquinone-O-ß-glucopyranoside the majority substance was active only against L. Amazonensis, suggesting a synergistic effect of other substances present in the fraction responsible for the activity. And perezone has show potent leishmanicid activity against amastigotes of L. amazonenses with an IC50 of 6,28 ±0,14 µM. The results highlight the importance of phytochemical study and the biological potential of J. sellowii.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Centro de Ciências da Saúde, Programa Programa de Pós-Graduação em Nanotecnologia Farmacêutica, Florianópolis, 2016 / Made available in DSpace on 2016-09-20T04:20:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 339989.pdf: 3605036 bytes, checksum: 463404323fe9debf4c88f315efbc7f38 (MD5) Previous issue date: 2016 / A liberação colônica de fármacos a partir de nano- e micropartículas por via oral é uma estratégia promissora para o tratamento local de diversas doenças que afetam o cólon, como o câncer colorretal. A sinvastatina é um fármaco inibidor competitivo efetivo da 3-hidroxi-3-metil-glutaril coenzima A redutase e atua diretamente na inibição da via da biossíntese do colesterol. Além do seu efeito redutor dos níveis de colesterol, evidências sugerem que a sinvastatina possui efeitos terapêuticos contra o câncer devido à sua interação com uma série de funções celulares essenciais. Desta maneira, objetivo deste trabalho foi desenvolver carreadores microestruturados gastroresistentes encapsulando nanopartículas de quitosana (CSNP) para a liberação colônica da sinvastatina. As nanopartículas de quitosana (CS) e tripolifosfato (TPP) foram preparadas por meio da técnica de interação iônica. Para aumentar a associação da sinvastatina nas nanopartículas foram adicionadas diferentes concentrações de taurocolato de sódio (STC) ou sulfobutiléter-ß-ciclodextrina (SBE-ß-CD) nas formulações. Para a quantificação da sinvastatina, uma metodologia de espectroscopia de absorção do ultravioleta foi desenvolvida e validada. As CSNP contendo STC apresentaram teores de sinvastatina entre 66,91 e 225,14 µg/mL e diâmetros variando entre 317,2 e 443,7 nm. Para as CSNP contendo SBE-ß-CD os teores variaram de 121,4 a 634,62 µg/mL e os diâmetros de 321,07 a 549,53 nm. A eficiência de encapsulação da sinvastatina foi superior a 91 % e o potencial zeta foi positivo para todas as amostras. Estudos in vitro demonstraram que tanto a sinvastatina livre quanto encapsulada (CSNP70) exibiram efeitos citotóxicos, além de induzir a morte celular por apoptose, inibir a migração celular e reduzir a capacidade das células HT-29 de formar colônias. As micropartículas encapsulando as CSNP foram obtidas mediante adição das suspensões de nanopartículas em soluções aquosas de Eudragit® S100 pH 7,2 e estes sistemas foram submetidos à secagem utilizando a técnica de spray-drying. Para avaliar o efeito da concentração de Eudragit® S100 adicionada no controle da liberação do fármaco, diferentes proporções de nanopartículas/Eudragit® S100 (1:4, 1:6 e 1:8) foram testadas. As micropartículas contendo CSNP70 apresentaram teores de sinvastatina entre 0,88 e 1,05 % e diâmetros de cerca 3 µm. As micropartículas encapsulando CSNPCD65 e CSNPTPP/CD45 apresentaram teores de sinvastatina de 0,97 a 1,51 % e diâmetros de cerca de 5 µm. As interações entre os componentes das formulações e as propriedades do estado sólido das partículas foram avaliadas por calorimetria exploratória diferencial, espectroscopia de absorção no infravermelho com transformada de Fourier e difração de raio X. Os ensaios de liberação in vitro confirmaram a obtenção de micropartículas gastroresistentes visto que apenas uma pequena fração de sinvastatina foi liberada em meio ácido. Entretanto, as micropartículas promoveram uma liberação sustentada do fármaco em meio tampão fosfato pH 7,2 ao longo de 8 horas, sendo esta liberação afetada pela proporção nanopartículas/Eudragit® S100 utilizada. Estes resultados indicam que estes sistemas de liberação inovadores podem ser promissores para a liberação colônica da sinvastatina visando o tratamento do câncer colorretal. <br> / Abstract : The colonic delivery of drugs from nano-microparticles after oral administration is a promising strategy for the local treatment of colonic diseases, such as colorectal cancer. Simvastatin (SIM) is a hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A inhibitor that acts directly in the suppression of the cholesterol biosynthesis by the inhibition of the mevalonate pathway. Besides the lip-lowering effect, increasing evidences suggest that simvastatin has therapeutic effects against cancer due to its interaction with essential cellular functions. Therefore, the aim of this study was to develop nano- and/or microparticles containing simvastatin for colonic delivery aiming the treatment of colorectal cancer. The chitosan nanoparticles were prepared using a modified ionic interaction technique by adding sodium taurocholate (STC) and/or sulfobutylether-ß-cyclodextrin (SBE-ß-CD). To determine the SIM loading in the nano- and/or microparticles an ultraviolet spectroscopy method was developed and validated. The nanoparticles containing STC presented SIM loading ranging between 66.91 and 225.14 µg/mL and mean diameters varying from 317.2 to 443.7 nm. The nanoparticles containing SBE-ß-CD exhibited SIM loading between 121.41 and 634.62 µg/mL and mean diameters ranging from 321.07 to 549.53 nm. The encapsulation efficiency of SIM was above 91 % and the zeta potential was positive for all the samples. In vitro studies demonstrated that both free and encapsulated SIM exhibited cytotoxic effect, induced apoptosis, inhibited cell migration, and reduced the ability of HT-29 cells to form colonies. The microparticles entrapping chitosan nanoparticles (SDP) were obtained by adding the nanoparticles suspensions in a Eudragit® S100 aqueous solution pH 7.2 and dried using the spray-dryer technique. In order to evaluate the effect of the Eudragit® S100 concentration on SIM release, different nanoparticles/Eudragit® S100 ratios (1:4, 1:6, and 1:8) were tested. The microparticles containing STC showed SIM 14 loading between 0.88 and 1.05 % with mean diameters around 3 µm. The microparticles containing SBE-ß-CD presented SIM loading varying from 0.97 to 1.51 % with mean diameters around 5 µm. The interactions between the components of the formulations and crystallinity properties of the nano- and/or microparticles were assessed by differential scanning calorimetry, Fourier-transformed infrared spectroscopy, and X-ray diffraction techniques. The in vitro release studies confirmed the enteric characteristic of all microparticles since a small fraction of SIM was released in the acidic medium. However, the microparticles revealed a sustained drug release in phosphate buffer solution pH 7.2 over 8 hours, that was affected by the nanoparticles/Eudragit® S100 ratios tested. These results indicated that these innovative drug delivery systems could be promising to deliver SIM in the colon for the treatment of colorectal cancer.