Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2010 / Made available in DSpace on 2013-07-16T04:04:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 280297.pdf: 2566999 bytes, checksum: 11956e782cd416896dfaaa489019eca9 (MD5) / Muitos peróxidos isolados de espécies vegetais têm apresentado promissoras atividades biológicas e alguns deles são utilizados com sucesso na terapêutica. Nesse contexto, o presente trabalho está direcionado ao isolamento e identificação de compostos obtidos, com ênfase em peróxidos, a partir de plantas de ocorrência na região sul do Brasil, com o intuito de obter novas substâncias de potencial interesse terapêutico no tratamento de doenças. Dentre essas plantas, são utilizadas neste estudo as espécies pertencentes à família Asteraceae, Calea phyllolepis Baker e Verbesina subcordata DC. e a espécie pertencente à família Salicaceae, Banara parviflora (A.Gray) Benth. Os extratos diclorometano e etanólico das partes aéreas frescas das três espécies foram obtidos e analisados por cromatografia em camada delgada. Os diversos procedimentos cromatográficos em coluna com diferentes resinas (gel de sílica, gel de sílica de fase reversa e Sephadex LH-20) e por CLAE resultaram no isolamento de compostos das três espécies estudadas, mas nenhuma de classe dos peróxidos por resultarem quantidades insuficientes para a elucidação estrutural e/ou degradação antes ou durante a realização de espectros por sua baixa estabilidade. Por outro lado, resultaram no isolamento de substâncias das três espécies. Para Calea phyllolepis Baker foi isolado o cumarato de 6-epi-?-verbesinol; sesquiterpenos do mesmo esqueleto foram isolados da espécie Verbesina subcordata DC., os isômeros cinamato de 1-hidróxi-6-epi-?-verbesinol e 1-hidróxi-6-epi--?-verbesinol. Do extrato etanólico das folhas de B. parviflora foram isolados o flavonóide C-glicosídeo orientina e o derivado da espermidina N1,N8-dibenzoilespermidil-N4-acetamida, apesar de já serem conhecidos derivados da espermidina em plantas, esse derivado acetilado da espermidina ainda não foi descrito na literatura. O isolamento dessas substâncias é importante para a caracterização química das espécies estudadas, principalmente de B. parviflora e C. phyllolepis pela ausência de estudos químicos nas bases de dados disponíveis.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Farmácia. / Made available in DSpace on 2013-12-05T21:36:18Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006 / Uma forma farmacêutica de liberação prolongada do antimalárico primaquina (PQ) foi investigada com os objetivos de melhorar a eficácia terapêutica e diminuir os efeitos adversos dose dependente da terapia existente. Características do fármaco, como um curto tempo de meia vida e dose reduzida, permitem sua incorporação em matrizes poliméricas de polióxido de etileno (POE). Um estudo de pré-formulação foi realizado para avaliar as características físico-químicas da PQ e sua compatibilidade com excipientes farmacêuticos. Os resultados demonstraram a qualidade do fármaco e a interação entre PQ e estearato de magnésio, lactose e manitol. Metodologias analíticas foram desenvolvidas e validadas para a quantificação de PQ nos ensaios de controle de qualidade e avaliação das formulações. Quatro formulações, F30P4, F30P8, F60P4 e F60P8, foram preparadas por compressão direta da mistura física do fármaco, polímero hidrofílico e excipientes. Cada comprimido continha 52.6 mg de PQ (equivalente a 30 mg de PQ na forma de base livre) e diferentes porcentagens de POE de peso molecular 4x106 ou 8x106 e excipientes. Os comprimidos foram submetidos aos testes de controle de qualidade e todas as formulações desenvolvidas cumpriram as especificações oficiais. Investigações in vitro foram realizadas verificando a inter-relação do intumescimento e erosão das matrizes, bem como o perfil de liberação do fármaco. Para todas as formulações, no mínimo 80 % do conteúdo de fármaco foi liberado durante 8 horas, seguindo um modelo de difusão não-Fickiano, ou seja, um processo controlado por difusão e relaxação. A cinética de liberação do fármaco foi diretamente relacionada à sincronização do intumescimento e erosão das matrizes. As formulações preparadas com alta concentração de POE demonstraram uma baixa razão de erosão, lenta liberação do fármaco e rápida razão de intumescimento, quando comparadas às matrizes contendo baixa concentração de POE. An extended release dosage form of an anti malarial drug, primaquine (PQ), was developed with the aim of improving the treatment efficacy and decreasing the dose-limiting side effects of existing therapy. Drug characteristics, as a short apparent plasma elimination half-life and reduced dose volume, allows its association to poly(ethylene oxide) (PEO) polymeric matrices. A preformulation study was performed in order to evaluate physical-chemical characteristics of PQ and its compatibility with pharmaceutical excipients. The results indicated the drug quality and drug interaction with magnesium stearate, lactose and manitol. Analytical methodologies were developed and validated for quantitation of PQ in the quality control test and performance studies. Four formulations, F30P4, F30P8, F60P4 and F60P8, were prepared by direct compression of the physical mixtures of the drug, hydrophilic polymer and excipients. Each tablet contained 52.6 mg of PQ (equivalent to 30 mg PQ free base), different percentages of either PEO with molecular weight of 4x106 or 8x106 and excipients as diluents and lubricants. The tablets were submitted to quality control test, and all developed formulations were approved based on official specifications. Investigations in vitro were carried out in order to verify the interrelationship between swelling and erosion matrices, as well as drug release profile. For all formulation, not less than 80% of the drug content was released during 8 hours following a non-Fickian diffusion model, i.e. like a diffusion-relaxation controlled process. The kinectics of drug delivery was directly related to the synchronization of swelling and erosion matrices. The formulations prepared with high PEO concentration showed a lower rate of erosion, a slower drug release and a faster rate of swelling, as compared with the matrices containing lower PEO concentration.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-graduação em farmácia / Made available in DSpace on 2013-12-05T21:52:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 266276.pdf: 2176138 bytes, checksum: c1db4b58ba79a9e95c4369bc00f9c899 (MD5) Previous issue date: 2009 / O Deflazacorte (DFZ) é um glicocorticóide derivado da prednisolona indicado no tratamento de doenças reumáticas, dermatológicas, alérgicas, do tecido conjuntivo, gastrointestinais, transplante de órgão entre outras. Apresenta a vantagem da redução significativamente menor na perda óssea, manutenção dos níveis de colesterol, menor efeito diabetogênico e menor perda de massa muscular quando comparado a outros glicocorticóides. Apesar de seu amplo uso na terapêutica, não há registros de monografias farmacopeicas descrevendo métodos para quantificação de DFZ em suspensão, e há escassas informações sobre a estabilidade do fármaco. Os objetivos deste trabalho foram desenvolver, otimizar e validar métodos para análise qualitativa e quantitativa em suspensão oral; avaliar a estabilidade do fármaco, isolar e identificar o principal produto de degradação; avaliar a atividade antiinflamatória e desenvolver suspensão oral contendo DFZ. A caracterização do DFZ foi realizada através de estudos termoanalíticos, espectroscópicos e cromatográficos. Este foi devidamente caracterizado e apresentou uma pureza de 98,98 %. Foram desenvolvidos e validados os métodos espectrofotométricos (UV e Vis) e cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) para a análise do DFZ em suspensão. Para o controle de qualidade do DFZ em suspensão oral, os métodos que demonstraram maior eficiência foram UV e CLAE. O estudo de estabilidade do DFZ foi realizado em meio ácido (HCl 0,1N), alcalino (NaOH 0,1N) e em co-solventes farmacêuticos; tampão acetato, tampão fosfato, glicerina, sorbitol e PEG-400). Nos estudos de estabilidade foi demonstrado que o DFZ degrada mais rapidamente em meio alcalino, e com menor degradação em tampão acetato pH 5,0 com a adição de PEG-400. O principal produto de degradação (DDP1) foi isolado a partir da hidrólise em meio alcalino e foi identificado através de técnicas espectroscópicas como 21-hidroxideflazacorte. DDP1 foi testado comparativamente com DFZ em modelos animais de inflamação aguda in vivo, e ensaios em cultura celular in vitro. Os ensaios farmacológicos demonstraram que o DFZ e o seu metabólito 21-hidroxideflazacorte apresentam efeito antiinflamatório in vivo e in vitro. Além disso, foram desenvolvidas quatro suspensões contendo DFZ, que foram avaliadas quanto à estabilidade acelerada. Nestes ensaios, as formulações F1 e F2 contendo carboximetilcelulose sódica como espessante foram mais estáveis que as formulações F3 e F4 contendo hidroxipropilmetilcelulose. Baseado nestes resultados foi possível concluir que o DFZ foi identificado e quantificado através de técnicas termoanalíticas, espectroscópicas e CLAE, possibilitando usá-lo como substância química referência. Estes métodos também demonstraram ser reprodutíveis para o controle de qualidade do DFZ em suspensão oral. Através do estudo de estabilidade química do DFZ em meio aquoso foi demonstrado que a degradação é dependente de pH e o uso de co-solventes farmacêuticos interferem diretamente na estabilidade do DFZ. Nos ensaios farmacológicos, o 21-hidróxideflazacorte demonstrou efeito antiinflamatório in vivo e in vitro superior ao DFZ. Na avaliação da estabilidade das formulações desenvolvidas, F1 foi considerada mais estável, mantendo os parâmetros dentro do limite de 5 % e conferindo um prazo de validade de 24 meses. Os resultados obtidos contribuem para o estabelecimento de métodos analíticos para o controle de qualidade de formas farmacêuticas contendo DFZ, especialmente em suspensões.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2016-09-20T04:44:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 341273.pdf: 2336849 bytes, checksum: a94799378edb40e4d9aa353d9e3d9479 (MD5) Previous issue date: 2016 / A erva-mate (Ilex paraguariensis) é uma planta amplamente usada na América Latina, muito apreciada por seu sabor e pelas atividades biológicas. Um dos principais grupos de compostos bioativos presentes nas folhas da erva-mate são as saponinas triterpênicas, que possuem o núcleo, formado pelos ácidos ursólico e oleanólico. Algumas das ações fisiológicas atribuídas às saponinas da erva-mate são atividades hipocolesterolêmica, antibacteriana, antifúngica e antiviral. O conhecimento sobre a absorção das saponinas e/ou ácidos ursólico e oleanólico e suas concentrações biodisponíveis é fundamental para o esclarecimento das ações envolvidas. Assim, o objetivo deste estudo foi identificar e quantificar a presença dos ácidos triterpênicos ursólico e oleanólico no plasma após a ingestão aguda de extrato nebulizado padronizado de erva-mate verde (ENPEMV). Participaram deste estudo 10 indivíduos saudáveis, os quais receberam dose única de 300 mL do extrato de erva-mate na proporção de 15 mg/mL. Após jejum de 12 h, amostras de sangue foram coletadas, antes e após 1, 1,5, 2, 3 e 4 h da ingestão do extrato nebulizado. A identificação e quantificação dos núcleos das saponinas do mate, ácidos ursólico e oleanólico, foi realizada por cromatografia líquida (CLAE), após validação da metodologia para a extração e recuperação dos compostos nas amostras de plasma. A metodologia utilizada apresentou bom nível de recuperação e precisão. Os compostos de interesse, bem como possíveis metabólitos, foram detectados no plasma de todos os participantes, tanto na forma livre (cinco compostos detectados), quanto na forma conjugada, os quais foram detectados após a hidrólise enzimática com ß-glicuronidase e sulfatase (oito compostos detectados). Os principais ácidos triterpênicos detectados tiveram máxima absorção em 2 h nas amostras de plasma nas concentrações de 2,6 ± 1,3 e 14,4 ± 3,8 ?g/mL, respectivamente, para os ácidos oleanólico e ursólico, nas amostras sem a incubação enzimática. Nas amostras que passaram por tratamento enzimático, as concentrações máximas encontradas foram 30,9 ± 10,1 e 181,9 ± 41,3 ?g/mL para os ácidos oleanólico e ursólico, respectivamente. Amostras de urina também foram avaliadas, no entanto, nenhum composto foi detectado. Com base nesses resultados, evidencia-se que os ácidos ursólico e oleanólico foram de fato absorvidos por seres humanos e detectados no plasma. Um método rápido, sensível e específico de CLAE foi validado para determinação dos ácidos ursólico e oleanólico em plasma humano pela primeira vez. Estudos futuros deverão ainda esclarecer se os ácidos triterpênicos encontram-se na forma de saponinas no plasma.<br> / Abstract : Yerba mate (Ilex paraguariensis) is a plant widely used in Latin America, much appreciated for its taste and biological activities. One of the main bioactive compounds in yerba mate leaves are the saponins, which have their nucleus, mostly made up of ursolic and oleanolic acids. Some of the physiological actions attributed to yerba mate saponins are hypocholesterolemic, antibacterial, antifungal and antiviral activities. Knowledge about the absorption of saponins and/or ursolic and oleanolic acids and their bioavailable concentrations is essential to clarify the activity mechanisms involved. Thus, the aim of this study was to identify and quantify the presence of ursolic and oleanolic triterpenic acids in plasma after acute ingestion of standardized nebulized extract of green yerba mate (ENPEMV). The study included 10 healthy subjects that received a single dose of 300 mL of yerba mate extract in the proportion of 15 mg/mL. After a 12 h fasting, blood samples were collected before and after 1, 1.5, 2, 3 and 4 h of the intake of the nebulized extract. The identification and quantification of the nucleus of mate saponin, oleanolic and ursolic acids was performed by liquid chromatography (HPLC) after method validation for the extraction and recovery of compounds in plasma samples. The methodology used showed good recovery rate and accuracy. Compounds of interest and possible metabolites were detected in plasma of all participants in both free form (five identified compounds), and in conjugated form, which were detected after enzymatic hydrolysis with ß-glucuronidase and sulfatase (eight detected compounds). The main triterpenic acids were detected had maximum absorption within 2 h in the plasma samples at concentrations of 2.6 ± 1.3 and 14.4 ± 3.8 ?g/mL, respectively, for the ursolic and oleanolic acids, in samples without enzyme incubation. In the samples that underwent enzyme treatment, the maximum concentrations were 30.9 ± 10.1 and 181.9 ± 41.3 ?g/mL for oleanolic acid and ursolic respectively. Urine samples were also evaluated, however, no compound was detected. Based on these results, it is evident that the ursolic acid and oleanolic were actually absorbed by humans and detected in plasma. A rapid, sensitive and specific HPLC method was validated for determination of ursolic and oleanolic acid in human plasma for the first time. Future studies should also clarify whether the triterpenic acids are in the form of saponins in plasma.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2016 / Made available in DSpace on 2016-09-20T04:54:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 340337.pdf: 2007305 bytes, checksum: 6be22e3638da4b7879d83a31d6880e6d (MD5) Previous issue date: 2016 / A exposição de Staphylococcus aureus a glicopeptídeos pode determinar mudanças transcricionais em genes envolvidos na biossíntese da parede celular. Somado a isso, mutações em sistemas reguladores de dois componentes como graSR, vraSR, walKR, além do gene codificador da unidade beta da RNA polimerase (rpoB) têm sido descritas e apresentam possível relação causal com o desenvolvimento de S. aureus com heterorresistência intermediária à vancomicina (hVISA). O fenômeno da heterorresistência é caracterizado pela presença de raras sobpopulações de células que apresentam níveis mais elevados de resistência e está associado a falha terapêutica, maior tempo de hospitalização, além de ser de difícil detecção laboratorial. Os mecanismos genéticos envolvidos neste fenótipo são pouco compreendidos e sua análise pode conduzir a determinação de marcadores moleculares da resistência além de auxiliar na validação de métodos laboratoriais que possibilitem um diagnóstico mais fácil, rápido e acurado. Nosso estudo contou com 12 isolados de hVISA obtidos de quatro hospitais de Santa Catarina e objetivou analisar dados de sequenciamento e o perfil de transcrição nos genes graSR, vraSR, walKR e rpoB destas amostras. Cinco isolados apresentaram-se mutados em pelo menos um dos genes avaliados. As mutações rpoB H481N e graS T224I foram as mais frequentes, seguidas pelas mutações graR D148Q e walK A468T. As mutações walK R222K e vraR E59D foram observadas com menor frequência, porém assim como as demais mutações citadas estão mais sugestivamente implicadas na aquisição da resistência em nossas amostras. Mutações em vraS e walR não foram descritas. Da mesma forma, alterações do perfil transcricional nos genes vraSR e walKR não foram observadas neste estudo. No entanto, a exposição à vancomicina aumentou o nível de expressão dos genes rpoB e graSR em pequeno número de nossas amostras, indicando a possível participação dos mesmos no desenvolvimento do fenótipo hVISA. Embora algumas questões permanecem sem resposta, nosso estudo possibilitou a descrição de alterações genéticas em isolados com redução de suscetibilidade à vancomicina que naturalmente ocorreram em hospitais de Santa Catarina, auxiliando, ainda, na compreensão dos prováveis mecanismos envolvidos na determinação deste fenótipo. <br> / Abstract : Staphylococcus aureus constantly exposed to glycopeptides determines transcriptional changes of genes involved in cell wall biosynthesis. Furthermore, mutations in two-component regulatory systems as graSR, vraSR, walKR and in gene encoding RNA polymerase beta unit (rpoB) have been described and may be related to heteroresistant vancomycin-intermediate S. aureus (hVISA). Heteroresistance is characterized by the presence of a rare population of cells with larger levels of resistance, and it is associated with therapy failure and longer hospital stays. Furthermore their laboratory detection is very difficult. The genetic mechanisms involved in this phenotype are poorly understood and their analysis may lead to the determination of molecular markers and validation of methods, which could make laboratory diagnosis earlier, faster and accurate. Our study included 12 hVISA isolates obtained from four hospitals in Santa Catarina and aimed to analyze sequencing data and the transcription levels of graSR, vraSR, walKR and rpoB genes. Five isolates showed mutations in at least one of the genes evaluated. The rpoB H481N and graS T224I were the most frequent mutations, followed by graR D148Q and walK A468T. The walK R222K and vraR E59D mutations were observed less frequently, but like other mutations were more involved in the acquisition of resistance in our samples. Mutations were not described in vraS and walR. Similarly, changes in the transcriptional profile of vraSR and walKR genes were not observed in this study. However, exposure to vancomycin increased the expression level of rpoB and graSR genes in small number of our samples. This indicated their possible participation in the development of hVISA phenotype. Although some questions remain unanswered, our study allowed the description of genetic changes in strains with reduced sensitivity to vancomycin that naturally occurred in hospitals in Santa Catarina and helped understanding the mechanism involved in the determination of this phenotype.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2016 / Made available in DSpace on 2016-09-20T04:54:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 340467.pdf: 1807485 bytes, checksum: f661f353f7a43a9bf68f0e8de9381343 (MD5) Previous issue date: 2016 / Acinetobacter spp., especialmente A. baumannii é um patógeno oportunista que causa infecções relacionadas à assistência à saúde (IRAS) no mundo todo, com alta morbidade e mortalidade. Infecções causadas por A. baumanni multidroga resistente (MDR) têm aumentado e preocupado os hospitais na escolha da terapia adequada para esses pacientes. O mecanismo mais comum de resistência aos carbapenêmicos em A. baumannii é a degradação enzimática por carbapenemases, como as Beta-lactamases da classe A, Metalo-Beta-lactamase (MBL) e oxacilinases. Neste estudo foram identificados e caracterizados Acinetobacter spp. de um Hospital Universitário (HU-UFSC, Florianópolis/SC, Brasil), isolados entre março e setembro de 2015, coletados de profissionais da saúde, pacientes e superfícies de alto contato de cinco alas do hospital: emergência (EMG), Unidade de terapia intensiva (UTI), Centro cirúrgico (CC), Clínica cirúrgica (CR1) e Clínica médica I (CMI). A identificação e o TSA (Teste de suscetibilidade aos antimicrobianos) foram determinados pelo sistema automatizado (Vitek2®; bioMérieux). Espécies foram também identificadas por sequenciamento do 16S rDNA. A presença de 17 genes foi detectada por qPCR: blaOXA-51-like, blaOXA-58-like, blaOXA-23-like, blaOXA-72-like, blaOXA-143-like, blaOXA-48-like,blaIMP, blaVIM e blaSHV, blaKPC, blaSHV, blaNDM, blaGES, blaCTXM-1, blaCTXM-2, blaCTXM-8, blaCTXM-9. Das 1.430 amostras coletadas, obtivemos 575 isolados, dessas, 140 eram Acinetobacter spp. e 70,7% eram MDR (com 96,9% de resistência aos carbapenêmicos). A detecção dos genes de resistência mostrou que 73,5% das amostras foram positivas para OXA-23, 77,8% para OXA-51 e 2,1% para SHV e CTXM-8. Alguns isolados de Acinetobacter spp. com genes de resistência foram encontrados nas salas de lanches, passante, sala de repouso da enfermagem e nas mãos dos profissionais da saúde. Curiosamente, foram encontrados isolados sensíveis aos cabapenêmicos, mas com genes de resistência para carbapenemases (OXA-23). O teste rápido Blue-Carba, que detecta bactérias produtoras de carbapenemases, mostrou 100% de sensibilidade e especificidade quando comparado ao qPCR. Através do Rep-PCR, 23 perfis diferentes de bandas foram encontrados, quatro desses constituídos exclusivamente por isolados resistentes aos carbapenêmicos, tendo um perfil prevalente com 58 dos isolados (41%). A porcentagem de similaridade global dos 23 perfis foi de 70%. Esses resultados evidenciam alguns pontos críticos no hospital e mostram que uma detecção rápida das bactérias, com genes de resistência circulantes e dos perfis genéticos existentes no hospital, podem orientar condutas para a redução das taxas de IRAs. <br> / Abstract : Acinetobacter spp., particularly A. baumannii, is an opportunistic pathogen that causes healthcare-associated infections (HAI) worldwide with high morbidity and mortality. Infections by A. baumannii multidrug-resistant (MDR) have increased and worried hospital institutions to figure out the appropriate treatment for these patients. The most common mechanism of resistance to carbapenems in A. baumanii is enzymatic degradation by carbapenemases, such as Class A Beta-lactamases, Metallo-Beta-lactamase (MBL) and Oxacilinases. In this study, we identified and characterized Acinetobacter spp. from a University Hospital (HU-UFSC, Florianópolis/SC, Brazil) isolated in Mar-Sep-2015, from healthcare workers, patients and high-touch surfaces at 5 hospital units: Emergency (EMG), Intensive Care (ICU), Surgical Center (SC), Surgical Inpatient (SIU) and Medical Inpatient (MIU). The identification and the AST (antimicrobial susceptibility test) were determined by an automated method (Vitek2®; bioMérieux). Species were also identified by 16S rDNA sequencing. The presence of 17 resistance genes was tested by qPCR: blaOXA-51-like, blaOXA-58-like, blaOXA-23-like, blaOXA-72-like, blaOXA-143-like, blaOXA-48-like, blaIMP, blaVIM e blaSHV, blaKPC, blaSHV, blaNDM, blaGES, blaCTXM-1, blaCTXM-2, blaCTXM-8, blaCTXM-9. From the 1,430 samples collected, we obtained 575 strains, out of these, 140 were Acinetobacter spp. and 70.7% were MDR (being 96.9% of these resistant to carbapenems). The detection of resistance genes showed that 73.5% of strains were positive for OXA-23, 77.8% for OXA-51 e 2.1% para SHV e CTXM-8. Some of A. baumanni with resistance genes were found in the snack room, on a patient bed transfer board, nurse´s station and hands of healthcare workers. Interestingly, we found Acinetobacter spp. sensitive to carbapenems with carbapenem resistance genes (OXA-23). The rapid test Blue-Carba, which detects strains producing carbapenemases, showed 100% of sensitivity and specificity comparing to qPCR. Rep-PCR revealed 23 different profiles (four composed of strains resistant to carbapenems), being one prevalent with 58 isolates (41%). The global percentage of similarity of these profiles was of 70%. These results highlight some critical points found in the hospital and show that a rapid detection of strains with resistance genes and the genetic profiles circulating in the hospital, may contribute in the conduits for the reduction of hospital infection.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2016-10-19T13:12:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 336844.pdf: 3161632 bytes, checksum: aab4ccd37e8e15413531d8ca9d8ded26 (MD5) Previous issue date: 2015 / A nevirapina (NVP) é um fármaco antirretroviral pertencente à classe dos inibidores não nucleosídeos da transcriptase reversa, usado para o tratamento da infecção pelo vírus HIV. Pertence à classe II do Sistema de Classificação Biofarmacêutica (SCB), ou seja, é pouco hidrossolúvel com alta permeabilidade. A sua solubilidade intrínseca em água é baixa, o que dá origem a dificuldades na formulação e leva a taxas de dissolução variáveis, com uma resultante diminuição na biodisponibilidade. Portanto, estratégias para melhorar as propriedades de dissolução são relevantes. Algumas delas podem apresentar modificações na química do composto (por ex: cocristal), na estrutura cristalina (por ex: polimorfo) e/ou na morfologia (por ex: cristal oco). Este trabalho tem como objetivo desenvolver metodologias de cristalização para a preparação de cristais modificados de NVP (cocristais e cristais ocos), visando aplicações para a indústria farmacêutica. Os cristais modificados morfologicamente, denominados cristais ocos foram obtidos a partir da cristalização antissolvente e a nova morfologia do cristal proporcionou um aumento no perfil de dissolução do fármaco. A partir da classificação dos cristais ocos no SCB, verificou-se correspondência à classe II, com um aumento da eficiência de dissolução em pH 1,2 de 9% quando comparado a matéria-prima. A mecanossíntese foi utilizada como metodologia para preparar cocristais de NVP em forma pura com possibilidade de aplicação para a indústria farmacêutica. Foram estudados os coformadores: ácido salicílico (AS), cafeína (CAF), sacarina (SAC), ureia (URE) e teofilina (TEO). No processo de mecanossíntese usou-se, como variáveis: diferentes equipamentos de moagem, assistido por solventes ou a seco; modificações na proporção molar e no tempo de moagem. Foram obtidos cocristais já reportados com os coformadores SAC e AS e também houve a formação de um possível novo polimorfo do cocristal com o coformador AS ou nova forma cristalina.<br> / Abstract : Nevirapine (NVP) is an antiretroviral drug classified as a non-nucleoside reverse transcriptase inhibitor, and it is used in treatment of HIV infection. It belongs to Class II of the Biopharmaceutics Classification System (BCS), meaning it has high permeability but low solubility. Its low water solubility leads to formulation difficulties and variable dissolution rates, resulting in lower bioavailability. As such, strategies are needed to improve its dissolution properties. Some employ changes to the compound s chemical structure (e.g., cocrystals), to the crystalline structure (e.g., polymorphs), or its morphology (e.g., hollow crystals). This work aims at crystallization methods for creating modified NVP crystals (cocrystals and hollow crystals), with potential uses in the pharmaceutical industry. Morphologically modified crystals, denominated hollow crystals, were obtained through antisolvent crystallization, and the new morphology afforded an increase in the drug s dissolution profile. They conformed with Class II of the classification of hollow crystals on BCS, and the dissolution efficiency increased by 9% at pH 1.2 compared with the unprocessed compound. Mechanosynthesis was used as method for producing NVP cocrystals with potential industry applications. Studies were carried with the following coformers: salicylic acid (AS), saccharin (SAC), urea (URE), and theophylline (TEO). During mechanosynthesis the subsequent variables were analysed: different grinding machines; solvent-assisted or dry; modifications in molar proportions and grinding times. We obtained the previously reported cocrystals with coformers SAC and AS, and achieved a potential new cocrystal polymorph with coformer AS, or a new crystalline form.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2016-12-20T03:17:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 342640.pdf: 5126138 bytes, checksum: 538e0e6cc1942ce4106463c044bb44ba (MD5) Previous issue date: 2016 / As propriedades do estado sólido dos insumos farmacêuticos ativos (IFAs) devem ser compreendidas porque estão diretamente relacionadas ao desempenho dos fármacos. Fármacos pouco solúveis apresentam limitações na biodisponibilidade devido à baixa solubilidade e velocidade de dissolução. Segundo a Organização Mundial da Saúde aproximadamente 40% dos medicamentos administrados por via oral pertencem às Classes II e IV (baixa solubilidade; alta e baixa permeabilidade, respectivamente) do Sistema de Classificação Biofarmacêutica, e, portanto, podem apresentar problemas de biodisponibilidade. O efavirenz (EFV) e o mesilato de saquinavir (SQVM) pertencem a estas classes, são utilizados no tratamento de primeira linha de pacientes portadores do HIV, são fornecidos pelo SUS e por isso são fármacos de interesse da indústria nacional. Neste contexto, o presente trabalho teve por objetivo avaliar a estrutura cristalina, as características do estado sólido e as propriedades de dissolução de fases sólidas de EFV e saquinavir (SQV) visando a biorrelevância e o impacto destes fármacos no tratamento do HIV/ AIDS. Para o EFV, uma forma polimórfica (polimorfo II) dezesseis vezes mais solúvel e termodinamicamente mais estável que a utilizada pela indústria, foi obtida. A caracterização de IFAs de EFV, associada aos resultados do teste de bioequivalência, possibilitou a correlação dos resultados obtidos pelo perfil de dissolução e eficiência de dissolução (DE), com a medida de tamanho de domínio cristalino. Tamanhos de domínio cristalino inferiores a 100 nm forneceram os melhores valores de DE. É provável que exista um tamanho de domínio cristalino ?crítico?, associado a determinado tamanho de partícula, que assegure a bioequivalência dos IFAs. O SQVM cristaliza no sistema monoclínico e grupo espacial P21. O estudo do perfil de dissolução, associado à turbidimetria, e à avalição estrutural do cocristal de SQMV e lauril sulfato de sódio (LSS) obtido, comprovaram ser este surfactante, inapropriado para a avaliação das propriedades de dissolução do fármaco devido à recristalização do SQVM neste meio. Através da avaliação estrutural do cocristal, e com o objetivo de explorar as possibilidades de troca de ânion para o SQVM, três novas formas de SQV foram obtidas com a aplicação da Engenharia de Cristais. Todas foram classificadas como isomorfas do SQVM. A forma de cloridrato, com 38% de fármaco dissolvido em 90 minutos, poderia ser utilizada como alternativa ao mesilato (43%).<br> / Abstract : The solid state property of Active Pharmaceutical Ingredients (APIs) should be understood because they are directly related to the performance of drugs. Poorly soluble drugs present limitations in bioavailability due to lower solubility and dissolution rate. According to World Health Organization nearly 40% of orally administrated drugs belong to Class II (poorly soluble, high permeable) and Class IV (poorly soluble, poorly permeable) in the Biopharmaceutical Classification System and, therefore, they may present problems of bioavailability. Efavirenz (EFV) and saquinavir mesylate (SQVM) are drugs which belong to Class II and IV respectively. They are used in the first-line treatment of HIV patients, they are provided by the Public Health System (SUS-Brazil) and thus, they are interesting drugs to national companies. For so, the aim of this work was to evaluate the crystalline structure, the solid state characteristics and the dissolution properties of EFV and SQVM solid phases targeting the biorelevance and the impact of these drugs in the HIV/ AIDS treatment. A polymorphic form of EFV (polymorph II), sixteen times more soluble and thermodynamically more stable than polymorph I (used by industry to formulate), was obtained. The characterization of EFV APIs, correlated with the results from bioequivalence test, allowed the correlation between data from dissolution tests and dissolution efficiency (DE) with the crystalline domain size measures. Crystalline domain size below 100 nm provided the best values of DE. Probably there is a critical crystalline domain size associated with particular particle size, which ensure the bioequivalence of APIs. Concerning the SQVM, it crystallized in the monoclinic system and space group P21. The dissolution profile study, associated with both, turbidimetry and structural analysis of the cocrystal of SQVM and sodium lauryl sulphate (SLS) obtained, confirmed that this surfactant is unsuitable for the evaluation of dissolution properties of this drug. The SQVM recrystallized in that medium. Based on the structural analysis of cocrystal and aiming to explore the possibility of anion-exchange for SQVM, three new forms of SQV were obtained by applying the Crystal Engineering. All the three forms were classified as being isomorphous of SQVM. The hydrochloride form which presented 38% of drug dissolved in 90 minutes could be used as an alternative to mesylate (43%).

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2017-01-17T03:10:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 343277.pdf: 1324884 bytes, checksum: a6aa30e76b52d3ec495e92604ca3952b (MD5) Previous issue date: 2016 / A erva-mate (Ilex paraguariensis), planta originária da América do Sul, é consumida tradicionalmente na forma de bebida quente ("chimarrão"), fria ("tererê") ou chá mate tostado. Diversas propriedades biológicas da erva-mate são atribuídas à presença de compostos fenólicos, em especial aos ácidos clorogênicos (ACGs), principais representantes dessa classe de compostos encontrados nas folhas da planta, os quais são responsáveis pelas atividades antioxidante, antimicrobiana e anticarcinogênica. Estudos sobre a biodisponibilidade dos ACGs da erva-mate são escassos e o conhecimento sobre a absorção desses compostos em seres humanos é essencial para justificar as propriedades atribuídas aos mesmos. Desta maneira, o objetivo do presente estudo foi detectar e quantificar os ácidos clorogênicos e seus metabólitos e as metilxantinas no plasma e na urina de indivíduos saudáveis, após a ingestão aguda de extrato nebulizado padronizado de erva-mate verde. Participaram deste estudo oito indivíduos saudáveis (5 mulheres/3 homens), com idades entre 21 e 28 anos. Após jejum de 12 h, amostras de sangue foram coletadas antes (basal) e após 1, 1,5, 2, 3 e 4 h da ingestão da bebida. As amostras de urina foram coletadas no período basal e nos intervalos de 0 a 2 h e de 2 a 4 h após a ingestão da bebida (15 mg/mL). A detecção dos compostos foi realizada por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE). No plasma, foram detectados ACGs intactos, ácido dihidrocafeico (DHCA) e dois possíveis metabólitos nas formas livre e conjugada, com concentração máxima após 1,5 e 2 h da ingestão do extrato padronizado. Após a hidrólise enzimática com ß-glicuronidase e sulfatase, foram detectados, além do DHCA, outros sete possíveis metabólitos. Nas amostras de urina, foram identificados os compostos 3-CQA, 4-CQA, 5-CQA e os ácidos cafeico, sinápico, p-cumárico, vanílico, além de outros três possíveis metabólitos com espectro de absorção semelhante àqueles dos ACGs. As metilxantinas teobromina e cafeína também foram detectadas no plasma de alguns indivíduos, ocorrendo aumento na concentração das mesmas após a ingestão. Na urina, foi detectada apenas a cafeína em três indivíduos. Além disto, observou-se grande variação interpessoal nos perfis de absorção dos compostos fenólicos e metilxantinas no plasma e na urina dos participantes. Com base nesses resultados, é possível afirmar que os CGAs e metilxantinas presentes na erva-mate são rapidamente absorvidos, metabolizados e excretados na urina de seres humanos. Estudos futuros são necessários para a identificação dos possíveisDetecção de metabólitos do ácido clorogênico e de metilxantinas em plasma e urina deindivíduos saudáveis, após a ingestão de erva-mate (Ilex paraguariensis, A. st.-hil.)metabólitos detectados, para que se torne viável o conhecimento das formas bioativas da erva-mate e respectivos mecanismos de ação.<br> / Abstract : Yerba mate (Ilex paraguariensis), a native plant species from Southern America, is traditionally consumed as hot (?chimarrão?) or cold beverages (?tererê?) or as toasted mate tea. Several biological properties of yerba mate are due to the presence of phenolic compounds, especially chlorogenic acids (CGAs), the main component of this compound class found in the leaves plant, which are responsible for the antioxidant, antimicrobial and anticancer activities. Studies on the CGAs bioavailability of yerba mate are scarces and the knowledge on absorption and metabolism of these compounds in humans is essential to justify the properties attributed to them. Therefore, the objective of this study was to detect and quantify CGAs, their metabolites and methylxantines in plasma and urine of healthy individuals after acute intake of an nebulized, standardized extract of green yerba mate. Eight subjects participated in this study (5 female/3 male), aged between 21 and 28 y. After a 12 h fasting, blood samples were collected before (baseline) and 1, 1.5, 2, 3 and 4 h after beverage intake. Urine samples were collected at the baseline period and at intervals from 0 to 2 h and from 2 to 4 h after yerba mate consumption (15 mg/mL). The compounds detection was performed by High Performance Liquid Chromatography (HPLC). In plasma, intact CGAs, dihydro caffeic acid (DHCA), and two possible metabolites were detected in the free and conjugated form, with maximum concentration after 1.5 and 2 h of nebulized yerba mate extract intake. After enzymatic hydrolysis with ß-glucuronidase and sulfatase, in addition to DHCA, other seven possible metabolites were detected. In urine samples, the compounds 3-CQA, 4-CQA, 5-CQA and caffeic, sinapic, p-cumaric and vanillic acids were identified, as well as other three possible metabolites with similar absorption spectrum to CGAs. The methylxanthines theobromine and caffeine were also detected in the plasma of few individuals, occurring an increase in their concentration after mate ingestion. In urine, the caffeine was detected only in three individuals. Moreover, it was observed a great interpersonal variation in the profile of absorbed compounds both in plasma and urine samples of participants. Based on these results, we may affirm that the CQAs present in yerba mate are rapidely absorbed, metabolized and excreted through urine in humans. Further studies are necessary to identify the possible detected metabolites, in order to know the bioactive structures of yerba mate and their respective mechanisms in humans.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2017-03-14T04:13:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 340688.pdf: 7904855 bytes, checksum: 964173bfcfb6211179abbd092ab68326 (MD5) Previous issue date: 2016 / O fármaco Benznidazol (BNZ) apresenta baixa solubilidade aquosa, o que pode comprometer a sua biodisponibilidade oral, trazendo a necessidade de utilização de tecnologias que melhorem a suas características farmacocinéticas. A estabilidade do BNZ foi avaliada, indicando que o fármaco é fotolábil, suscetível a hidrólise alcalina, a oxidação e degradação por moagem de alta energia. O método indicativo de estabilidade por CLAE mostrou ser capaz de separar o BNZ de seus produtos de degradação, sendo validado e considerado específico, linear, sensível, preciso, exato e robusto. Os comprimidos de liberação prolongada flutuantes do tipo Dome Matrix® contendo BNZ desenvolvidos demonstraram que um maior percentual de HPMC K15M (30%) leva a uma liberação mais lenta do fármaco. Maiores quantidades do polímero HPMC L3LV influenciaram positivamente na velocidade de dissolução de BNZ. Entretanto, quantidades superiores a 20% deste polímero promoveram a rápida desintegração dos comprimidos. Com a finalidade de aprimorar a dissolução do fármaco em meio ácido, foram produzidas formulações com os carreadores de Eudragit® EPO, L100 e PVPVA. O aumento da velocidade de dissolução do BNZ pode ser atribuído ao somatório da redução do tamanho de partícula e ao efeito carreador dos polímeros selecionados, sendo que as formulações que continham Eudragit® EPO e PVPVA apresentaram o melhor desempenho. A formação de novos sólidos cristalinos foi observada com os ácidos dicarboxílicos, planares de cadeia ímpar: fumárico, succínico, maleico e oxálico.2H2O. Os cocristais obtidos exibiram mudanças positivas nas propriedades físico-químicas do fármaco, como maior estabilidade de luz e aumento da concentração de supersaturação em meio aquoso. Os produtos obtidos neste trabalho: DSMBPVPVA, DSMBEPO, COMAL, COSUCC e COOX se mostraram promissores para o tratamento da doença de Chagas. A redução da CI50 e o aumento do IS, aliados a baixa toxicidade celular, trazem boas perspectivas para a melhoria da efetividade de BNZ.<br> / Abstract : Benznidazole (BNZ) has poor water solubility, which can compromise the oral bioavailability, for this reason it is necessary, the use of pharmaceutical technology to improve pharmacokinetics characteristics of the drug. The stability was evaluated and it indicated that the drug is photosensitive, susceptible to alkaline hydrolysis, oxidation and degradation by high-energy milling. The stability-indicating HPLC method was able to separate BNZ from degradation products, which was validated and showed to be specific, linear, sensitive, precise, accurate and robust. The prolonged release floating tablets, Dome Matrix® type, was developed and it showed that a higher percentage of HPMC K15M (30%) reduces the BNZ releases. In addition, larger amounts of HPMC L3LV polymer improve BNZ dissolution rate. However, amounts greater than 20%, promoted the rapid disintegration of tablets. In order to enhance the drug dissolution rate in acid medium, formulations were produced with the carrier Eudragit® (EPO, L100) and PVPVA. The BNZ increased dissolution rate can be attributed to the sum of effects from particle size reduction of the drug and the selected polymers type. The formulations containing Eudragit® EPO and PVPVA achieved the best performance. The formation of novel crystalline materials was observed with dicarboxylic acids, odd planar chains: fumaric, succinic, maleic and oxálico.2H2O. The cocrystals obtained showed positive changes in the physicochemical properties of the drug, such as greater light stability and increased supersaturation concentration in an aqueous medium. The products obtained in this study: DSMBPVPVA, DSMBEPO, COMAL, COSUCC and COOX have proved themselves promising for the treatment of Chagas disease. The reduction and increase of IC50, SI, coupled with low cell toxicity, which brings good prospect for improving the effectiveness of BNZ.