As copaíbas, pertencentes à família Leguminosae, subfamília Caesalpinioideae, são conhecidas pela produção de uma óleo-resina com propriedades antiinflamatórias, utilizada na medicina popular e pela indústria farmacêutica. A substância é retirada do tronco da árvore, através do uso de um trado que perfura o caule até que a óleo-resina escorra. Esta óleo-resina parece ser produzida, armazenada e secretada por dois tipos de estruturas secretoras, os canais e as cavidades secretores. Embora muitos trabalhos tratem das análises químicas e das atividades biológicas da óleo-resina de espécies de Copaifera, poucos são os que tratam dos mecanismos subcelulares da produção, do armazenamento e da secreção da óleo-resina. Assim, o objetivo deste trabalho foi estudar comparativamente a distribuição, a morfologia, o desenvolvimento e o conteúdo secretor dos canais e/ou cavidades secretores de óleo-resina no caule e na folha de Copaifera trapezifolia Hayne, única dentre as 35 espécies do gênero que ocorre na Floresta Atlântica. Foi testado se os canais e/ou cavidades secretores produzem óleo-resina na folha, assim como relatado para o caule, a fim de propor alternativas para a utilização do tronco da árvore como fonte da secreção. Como a natureza química da secreção já é conhecida para o caule, o estudo ultraestrutural visa relacionar as populações de organelas às substâncias produzidas, ampliando o conhecimento sobre os mecanismos de produção e secreção de óleo-resina pelas células epiteliais secretoras dos canais e/ou cavidades. Para tal, gemas axilares contendo primórdios foliares e caulinares e folíolos medianos completamente expandidos foram coletados de três indivíduos no Jardim Botânico do Rio de Janeiro, e processados para estudos anatômicos, de histolocalização de óleo-resina, ultra-estruturais e de diafanização de folhas inteiras. Os dados indicam que estruturas com forma isodiamétrica, denominadas cavidades secretoras, ocorrem na folha e no caule em estrutura primária e secundária. Na lâmina foliar, estão localizadas entre os parênquimas paliçádico e lacunoso e na face abaxial da nervura central; no pecíolo as cavidades ocorrem no córtex; no caule ocorrem imersas nos parênquimas cortical e medular. Originam-se de células do meristema fundamental, a partir de uma divisão periclinal seguida de duas anticlinais; o lúmen é originado por esquizogenia. O conteúdo das cavidades tanto do caule como da folha contém óleo e resina, conforme consta na literatura para o gênero. Isto permite inferir que a extração da óleo-resina seria menos prejudicial para a planta se extraída da folha. A presença de um epitélio bisseriado na folha e no caule, assim como o que foi encontrado em C. langsdorffii, constitui um dado inédito para Leguminosae e, provavelmente, representa a reposição das células epiteliais que já secretaram. As células epiteliais, no início da produção dos metabólitos, são polarizadas: núcleo próximo à parede periclinal interna e citoplasma próximo à parede periclinal externa. O citoplasma é rico em mitocôndrias e retículos endoplasmáticos liso e rugoso, associados a vesículas (folha) ou plastídeos (caule). Vesículas de conteúdo distinto (elétron-denso e elétron-opaco) são produzidas nos retículos, transportadas por entre as microfibrilas das paredes anticlinal e periclinal interna e liberadas para o lúmen. Produção e secreção de metabólitos para o lúmen não são sincronizadas nas células epiteliais de uma mesma cavidade. Sugere-se que o componente resinoso seja produzido nos retículos rugosos e plastídeos, e o oleoso nos retículos lisos. A comparação entre C. langsdorffii e C. trapezifolia utilizando caracteres com valor diagnóstico representa um resultado pioneiro se considerado o grande número de espécies e morfo-espécies do gênero. No entanto, a inclusão de um maior número de espécies nos estudos de estruturas secretoras de Copaifera permitiriam auxiliar a delimitação infragenérica do grupo. / Copaíbas (Leguminosae, Caesalpinioideae) are best known for the production of an oilresin with anti-inflammatory properties, used in the folk medicine and pharmaceutical industry. The substance is usually taken from the stem, through the use of an auger to drill the stem until the oilresin drips. This oilresin seems to be produced, stored and secreted by two types of secretory structures, canals and secretory cavities. Although many studies address the chemical analysis and the biological activity of the oilresin in species of Copaifera, the cellular mechanisms of production, storage and secretion have rarely been exploited. The objective of this study was to compare the distribution, morphology, development and secretion biology of oilresin-secreting canals and/or cavities, in the stem and in the leaf of Copaifera trapezifolia Hayne, unique among the 35 species of the genus that occurs in the Atlantic Rain Forest. The study tested wheather canals and/or cavities produce oilresin in the leaf, as reported to the stem, in order to propose alternatives to the use of the trunk of the tree as a source of secretion. Considering that the chemical nature of the secretion is already known to the stem, the ultrastructural study of canal/cavity in several stages of development aim at to associate subcellular components with substances produced and secreted. Data obtained can increase the knowledge on the production and secretion mechanisms of within epithelial cells of secretory canals and/or cavities. Materials include axillary buds containing leaf and stem primordial, besides mature middle leaflets and portions of stem in primary and secondary growth. They were collected from three individuals in the Botanic Garden of Rio de Janeiro and prepared to be employed in anatomy, histolocalization of oilresin, ultrastructure and clearing of whole leaves. Secretory cavities were observed in the leaf and the stem (primary and secondary growth), between the palisade and spongy mesophyll, petiole cortex, and shoot cortex and pith. Cavities originate from ground meristem cells by a periclinal division followed by two anticlinals; the lumen is formed by esquizogenous process. The content of the cavities of both the stem and leaf contains oil and resin, as shown in the literature for the genus. This suggests that the extraction of the oleoresin would be less harmful for the plant if extracted from the leaf. The presence of a biseriate epithelium in foliar and shoot cavities, as similarly found in C. langsdorffii, is a novelty for Leguminosae, and probably represents the replacement of epithelial cells that have secreted. In the beginning of substance production epithelial cells are polarized: nucleus near the inner periclinal wall and cytoplasm near the outer periclinal wall. The cytoplasm is rich in mitochondria, and smooth and rough endoplasmic reticulum associated to vesicles (leaf) or plastids (stem). There is a greater amount of smooth endoplasmic reticulum in cells of the leaf cavities and rough endoplasmic reticulum in cells of the stem cavities. Vesicles with different content (electron-dense and electron-opaque) are produced by the reticulum, transported through microfibrils of anticlinals and inner periclinal walls and released into the lumen. Production and secretion of metabolites are not synchronized in epithelial cells of the same cavity. It is suggested that the resin component is produced in the rough reticulum and plastids, and the oily component in the smooth reticulum. The comparison between C. langsdorffii and C. trapezifolia using characters with diagnostic value represents a pioneer result if considered the number of species and morpho-species of the genus. However, the inclusion of a greater number of species in studies of secretory structures of Copaifera would certainly help the complex infrageneric division of this group.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-12-13T14:18:51Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Cristiane N. Coelho.pdf: 260294767 bytes, checksum: c58e766f40f09c7f21e336aedbafb454 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-12-13T14:23:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Cristiane N. Coelho.pdf: 260294767 bytes, checksum: c58e766f40f09c7f21e336aedbafb454 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-12-13T14:23:45Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Cristiane N. Coelho.pdf: 260294767 bytes, checksum: c58e766f40f09c7f21e336aedbafb454 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-13T14:23:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Cristiane N. Coelho.pdf: 260294767 bytes, checksum: c58e766f40f09c7f21e336aedbafb454 (MD5) Previous issue date: 2011-08-22 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The cleaning procedure is a step in cavity preparation of tooth structure to receive the restorative treatment, this step aims to remove debris and microorganisms of the cavity, allowing a direct interface between tooth and restoration. Oil-copal resin is a natural product, used by Amazonian populations and recognized for its medicinal properties such as antimicrobial activity against the microorganisms in the oral cavity. This study evaluated the biological compatibility and antimicrobial activity in mouse molar of the emulsions formulated cleaning the cavity of the base oil-resin of copaiba (Copaifera multijuga), the following concentrations: 10% copal, copal to 10% with amyrin, copal 30% and 30% with copal amyrin. The antibacterial activity of these emulsions were analyzed by the minimum inhibitory concentration, minimum bactericidal concentration and cell viability analysis by fluorescence techniques, compared to ATCC 25175 Streptococcus mutans, Streptococcus oralis ATCC 10557, Streptococcus salivarius ATCC 7073 and Lactobacillus casei ATCC 7469. The cytotoxic activity of emulsions were evaluated by tests of the hemolysis tests and cell culture, compared to murine fibroblasts NHI3T3 by the Alamar Blue test. The color change was evaluated difference between the starting and ending of the specimens of dentin when in contact with the test emulsions at different times, 10 seconds, 30 seconds and 10 minutes. The biological compatibility of the copal emulsions were evaluated by washing the cavity with the test emulsion followed by pulp capping with calcium hydroxide pastes associated with oil-resin of copaiba amyrin 10% + 1% in molars of rats. The test emulsions at all concentrations showed antibacterial activity against microorganisms relevant to dentistry. In cytotoxic activities, all emulsions tested showed cell lysis, with an EC50 ranging from 11 to 32μL/mL. The emulsions of the oil-resin of copaiba with amyrin showed better behavior and hemolytic activity that the emulsions without amyrin. In the test cell culture was observed that the emulsions of the oil-resin of copaiba decrease cell viability showing cytotoxicity. Evaluating the color change, the emulsions of the oil-resin of Copaiba with amyrin were less clinically noticeable color change, ΔE <3.3, within 10 minutes. The pulp capping with emulsions and pastes the oil-resin of Copaiba observed behavior was similar to control, when used in the emulsion of the oil-resin of Copaiba to 10% with amyrin. The authors concluded that testing of emulsions and pastes the base of the oilresin of Copaiba are promising for application in dentistry, requiring more research to improve the pharmacological, physical, mechanical and biological properties. / O procedimento de limpeza da cavidade é uma etapa do preparo da estrutura dentária para receber o tratamento restaurador, esta etapa visa remover resíduos e microrganismos da cavidade, permitindo uma interface direta entre dente e restauração. Óleo-resina da copaíba é um produto natural, utilizado pelas populações amazônicas e reconhecido pelas suas propriedades medicinais, como atividade antimicrobiana frente aos microrganismos presentes na cavidade oral. Este estudo avaliou a atividade antibacteriana, citotoxicidade, alteração de cor e a compatibilidade biológica em molares de rato das emulsões de limpeza de cavidade formulada a base do óleo-resina da copaíba (Copaifera multijuga), nas seguintes concentrações: copaíba a 10%, copaíba a 10% com amirina, copaíba a 30% e copaíba a 30% com amirina. A atividade antibacteriana destas emulsões foram analisadas pelos testes da Concentração Inibitória Mínima, Concentração Bactericida Mínima e Análise da Viabilidade Celular por Técnica de Fluorescência, frente aos Streptococcus mutans ATCC 25175; Streptococcus oralis ATCC 10557; Streptococcus salivarius ATCC 7073 e Lactobacillus casei ATCC 7469. A atividade citotóxica das emulsões testes foram avaliadas através dos testes de hemólise e de cultura de células, frente a fibroblastos murinos NHI3T3, através do ensaio de Alamar Blue. A alteração de cor avaliou diferença entre a cor inicial e final dos corpos de prova de dentina quando em contato com as emulsões testes, em diferentes períodos, 10 segundos, 30 segundos e 10 minutos. A compatibilidade biológica das emulsões da copaíba foram avaliadas através da lavagem da cavidade com as emulsões testes nas concentrações de 10% e 30% com amirina, seguida do capeamento pulpar com pastas de hidróxido de cálcio associadas com óleo-resina da copaíba 10% com amirina 1% em molares de ratos. As emulsões testes, em todas as concentrações, apresentaram atividade antibacteriana frente aos microrganismos relevantes na odontologia. Nas atividades de citotoxicidade, todas as emulsões testadas apresentaram lise celular, com uma EC50 variando de 11 a 32μL/mL. As emulsões do óleo-resina da copaíba com amirina apresentaram melhor comportamento quanto a atividade hemolítica que as emulsões sem amirina. No teste de cultura de células foi observado que as emulsões do óleo-resina da copaíba diminuem a viabilidade celular apresentando atividade citotóxica. Comparando a cor inicial e final dos corpos de prova quando em contato com as emulsões testes, as emulsões do óleo-resina da copaíba com amirina apresentaram menor alteração de cor perceptível clinicamente, ΔE <3,3, no período de 10 minutos. O capeamento pulpar com emulsões e pastas do óleo-resina da copaíba foi observado um comportamento semelhante ao controle, quando utilizado a emulsão do óleo-resina da copaíba a 10% com amirina. Os autores concluíram que as emulsões e pastas testes a base do óleoresina da copaíba são promissores para aplicação na odontologia, necessitando de mais pesquisas para melhorar a farmacotécnica, propriedades físicas, mecânicas e biológicas.

As copaíbas, pertencentes à família Leguminosae, subfamília Caesalpinioideae, são conhecidas pela produção de uma óleo-resina com propriedades antiinflamatórias, utilizada na medicina popular e pela indústria farmacêutica. A substância é retirada do tronco da árvore, através do uso de um trado que perfura o caule até que a óleo-resina escorra. Esta óleo-resina parece ser produzida, armazenada e secretada por dois tipos de estruturas secretoras, os canais e as cavidades secretores. Embora muitos trabalhos tratem das análises químicas e das atividades biológicas da óleo-resina de espécies de Copaifera, poucos são os que tratam dos mecanismos subcelulares da produção, do armazenamento e da secreção da óleo-resina. Assim, o objetivo deste trabalho foi estudar comparativamente a distribuição, a morfologia, o desenvolvimento e o conteúdo secretor dos canais e/ou cavidades secretores de óleo-resina no caule e na folha de Copaifera trapezifolia Hayne, única dentre as 35 espécies do gênero que ocorre na Floresta Atlântica. Foi testado se os canais e/ou cavidades secretores produzem óleo-resina na folha, assim como relatado para o caule, a fim de propor alternativas para a utilização do tronco da árvore como fonte da secreção. Como a natureza química da secreção já é conhecida para o caule, o estudo ultraestrutural visa relacionar as populações de organelas às substâncias produzidas, ampliando o conhecimento sobre os mecanismos de produção e secreção de óleo-resina pelas células epiteliais secretoras dos canais e/ou cavidades. Para tal, gemas axilares contendo primórdios foliares e caulinares e folíolos medianos completamente expandidos foram coletados de três indivíduos no Jardim Botânico do Rio de Janeiro, e processados para estudos anatômicos, de histolocalização de óleo-resina, ultra-estruturais e de diafanização de folhas inteiras. Os dados indicam que estruturas com forma isodiamétrica, denominadas cavidades secretoras, ocorrem na folha e no caule em estrutura primária e secundária. Na lâmina foliar, estão localizadas entre os parênquimas paliçádico e lacunoso e na face abaxial da nervura central; no pecíolo as cavidades ocorrem no córtex; no caule ocorrem imersas nos parênquimas cortical e medular. Originam-se de células do meristema fundamental, a partir de uma divisão periclinal seguida de duas anticlinais; o lúmen é originado por esquizogenia. O conteúdo das cavidades tanto do caule como da folha contém óleo e resina, conforme consta na literatura para o gênero. Isto permite inferir que a extração da óleo-resina seria menos prejudicial para a planta se extraída da folha. A presença de um epitélio bisseriado na folha e no caule, assim como o que foi encontrado em C. langsdorffii, constitui um dado inédito para Leguminosae e, provavelmente, representa a reposição das células epiteliais que já secretaram. As células epiteliais, no início da produção dos metabólitos, são polarizadas: núcleo próximo à parede periclinal interna e citoplasma próximo à parede periclinal externa. O citoplasma é rico em mitocôndrias e retículos endoplasmáticos liso e rugoso, associados a vesículas (folha) ou plastídeos (caule). Vesículas de conteúdo distinto (elétron-denso e elétron-opaco) são produzidas nos retículos, transportadas por entre as microfibrilas das paredes anticlinal e periclinal interna e liberadas para o lúmen. Produção e secreção de metabólitos para o lúmen não são sincronizadas nas células epiteliais de uma mesma cavidade. Sugere-se que o componente resinoso seja produzido nos retículos rugosos e plastídeos, e o oleoso nos retículos lisos. A comparação entre C. langsdorffii e C. trapezifolia utilizando caracteres com valor diagnóstico representa um resultado pioneiro se considerado o grande número de espécies e morfo-espécies do gênero. No entanto, a inclusão de um maior número de espécies nos estudos de estruturas secretoras de Copaifera permitiriam auxiliar a delimitação infragenérica do grupo. / Copaíbas (Leguminosae, Caesalpinioideae) are best known for the production of an oilresin with anti-inflammatory properties, used in the folk medicine and pharmaceutical industry. The substance is usually taken from the stem, through the use of an auger to drill the stem until the oilresin drips. This oilresin seems to be produced, stored and secreted by two types of secretory structures, canals and secretory cavities. Although many studies address the chemical analysis and the biological activity of the oilresin in species of Copaifera, the cellular mechanisms of production, storage and secretion have rarely been exploited. The objective of this study was to compare the distribution, morphology, development and secretion biology of oilresin-secreting canals and/or cavities, in the stem and in the leaf of Copaifera trapezifolia Hayne, unique among the 35 species of the genus that occurs in the Atlantic Rain Forest. The study tested wheather canals and/or cavities produce oilresin in the leaf, as reported to the stem, in order to propose alternatives to the use of the trunk of the tree as a source of secretion. Considering that the chemical nature of the secretion is already known to the stem, the ultrastructural study of canal/cavity in several stages of development aim at to associate subcellular components with substances produced and secreted. Data obtained can increase the knowledge on the production and secretion mechanisms of within epithelial cells of secretory canals and/or cavities. Materials include axillary buds containing leaf and stem primordial, besides mature middle leaflets and portions of stem in primary and secondary growth. They were collected from three individuals in the Botanic Garden of Rio de Janeiro and prepared to be employed in anatomy, histolocalization of oilresin, ultrastructure and clearing of whole leaves. Secretory cavities were observed in the leaf and the stem (primary and secondary growth), between the palisade and spongy mesophyll, petiole cortex, and shoot cortex and pith. Cavities originate from ground meristem cells by a periclinal division followed by two anticlinals; the lumen is formed by esquizogenous process. The content of the cavities of both the stem and leaf contains oil and resin, as shown in the literature for the genus. This suggests that the extraction of the oleoresin would be less harmful for the plant if extracted from the leaf. The presence of a biseriate epithelium in foliar and shoot cavities, as similarly found in C. langsdorffii, is a novelty for Leguminosae, and probably represents the replacement of epithelial cells that have secreted. In the beginning of substance production epithelial cells are polarized: nucleus near the inner periclinal wall and cytoplasm near the outer periclinal wall. The cytoplasm is rich in mitochondria, and smooth and rough endoplasmic reticulum associated to vesicles (leaf) or plastids (stem). There is a greater amount of smooth endoplasmic reticulum in cells of the leaf cavities and rough endoplasmic reticulum in cells of the stem cavities. Vesicles with different content (electron-dense and electron-opaque) are produced by the reticulum, transported through microfibrils of anticlinals and inner periclinal walls and released into the lumen. Production and secretion of metabolites are not synchronized in epithelial cells of the same cavity. It is suggested that the resin component is produced in the rough reticulum and plastids, and the oily component in the smooth reticulum. The comparison between C. langsdorffii and C. trapezifolia using characters with diagnostic value represents a pioneer result if considered the number of species and morpho-species of the genus. However, the inclusion of a greater number of species in studies of secretory structures of Copaifera would certainly help the complex infrageneric division of this group.

Este estudo translacional avaliou o efeito da aplicação direta de materiais capeadores à base de óleo de copaíba sobre a polpa dentária de ratos. O biomaterial foi analisado de acordo com os processos inflamatórios, reparadores e regenerativos. Cavidades classe I foram preparadas na face oclusal dos molares superiores e inferiores de ratos da linhagem Wistar (n=120). Posteriormente, uma cavidade padronizada foi realizada com broca carbide esférica ¼. Exposições pulpares foram obtidas e após a hemostasia com algodão estéril e água destilada, foi realizado o capeamento pulpar com aplicação de biomateriais diretamente no tecido pulpar. Os biomateriais utilizados foram: COP (Óleo de Copaíba); Ca(OH)2 (hidróxido de cálcio), Ca(OH)2+COP; MTA (agregado trióxido mineral); MTA+COP; BIODENTINA (Biodentine®); BIODENTINA+COP. Todas as cavidades foram restauradas com cimento provisório. Os animais foram sacrificados após o período de 7, 14, 28 dias de acordo com os princípios de ética e experimentação animal. Vinte e um grupos foram criados a partir da combinação de tempos e materiais, cada grupo foi constituído de 5 animais. As peças foram preparadas e processadas pela técnica histológica e coradas pela HE (hemotoxilina e eosina) realizando cortes aleatórios, sendo analisados ao microscópio óptico em 100X de aumento por 2 examinadores. Os critérios avaliados foram: respostas inflamatória e degenerativa, organização tecidual, dentina reacional e reparativa. No último tempo experimental (28 dias) de todos os grupos foi analisado a superfície (mm2) e o volume (mm3) da ponte de dentina formada pela técnica da micro-CT (microtomografia computadorizada) de alta resolução. Os dados foram estatisticamente analisados utilizando o teste T pareado, determinando a superfície e volume da dentina reparadora formada entre os grupos experimentais. Nas análises histológicas foi utilizado o teste não-paramétrico de Mann-Whitney realizando comparações entre os grupos (?=5%). A BIODENTINA demonstrou uma tendência de acelerar o processo de regeneração pulpar, iniciando a deposição de dentina reparativa ao sétimo dia do capeamento. Este material apresentou uma dentina mais espessa em comparação com os outros biomateriais. O MTA também demonstrou uma eficiência na formação da ponte dentinária, entretanto em 20% das amostras não foi observada a presença de dentina reparadora. Ao acrescentar o COP nestes materiais, a formação da ponte dentinária apresentava heterogênea e incompleta, além disso esses grupos continham um processo inflamatório aumentado. A dentina reparadora do grupo de Ca(OH)2 demonstrou presença de túnel, com característica heterogênea. A adição do COP ao Ca(OH)2 aumentou a formação de dentina nas paredes ao redor da câmara pulpar em 80% das amostras, porém esta dentina não apresentava melhora na qualidade. Desta forma, o capeamento pulpar com COP isolado ou associado a Ca(OH)2, MTA e BIODENTINA não formou uma ponte de dentina completa e homogênea no local da exposição pulpar. / This translational study evaluated the effect of the direct application of copaiba oil based capping materials on the rat pulp. The biomaterial was analyzed according to inflammatory, repairing and regenerative processes. Class I cavities were prepared on the occlusal surface of the upper and lower molars of Wistar rats (n = 120). Subsequently, standardized cavities was performed with ¼ spherical carbide drill. Pulp exposures were obtained and after their hemostasis with sterile cotton and distilled water, pulp capping was done with application of biomaterials directly on the pulp tissue. The biomaterials used were: COP (Copaíba oil); Ca(OH)2 (calcium hydroxide), Ca(OH)2+COP; MTA (aggregate mineral trioxide); MTA+COP; BIODENTINE (Biodentine®); BIODENTINA+COP. All cavities were restored with temporary cement. The animals were sacrificed after the period of 7, 14, 28 days according to the principles of ethics and animal experimentation. Twenty-one groups were created from the combination of times and materials, each group consisted of 5 animals. The specimens were prepared and processed by histological technique and stained by HE (haemotoxin and eosin); randomized cuts were examined under optical microscope with 100X enlargement by two different examiners. The evaluated criteria were inflammatory and degenerative response, tissue organization, reactive and reparative dentin. In the last experimental period (28 days) of all groups, the surface (mm2) and the volume (mm3) of the reactive and reparative dentin formed were analyzed by the high-resolution micro-CT (computerized microtomography) technique. The data were statistically analyzed using the paired T-test, determining the surface and volume of the reparative dentin formed between the experimental groups. In the histological analyzes, the non-parametric Mann-Whitney test was used, comparing groups (? = 5%). BIODENTINE demonstrated a tendency to accelerate the process of pulpal regeneration, initiating the deposition of reparative dentin on the seventh day of the capping. This material had a thicker dentin compared to the other biomaterials. The MTA also demonstrated an efficiency in the formation of the dentin bridge; however, 20% of the samples did not observe the presence of reparative dentin. When adding the COP in these materials, the formation of the dentin bridge was heterogeneous and incomplete, in addition these groups contained an increased inflammatory process. The repair dentin of the Ca(OH)2 group showed a tunnel with a heterogeneous characteristic. The addition of COP to Ca(OH)2 increased dentin formation in the walls around the pulp chamber in 80% of the samples, but this dentin did not show improvement in quality. Thus, pulp cap with COP isolated or associated with Ca(OH)2, MTA and BIODENTINE did not form a complete and homogeneous dentin bridge at the site of pulp exposure.

Made available in DSpace on 2015-04-22T22:02:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Paula C S Barbosa.pdf: 2096071 bytes, checksum: 806dcd37f1a3dcf13e97a1623194db6e (MD5) Previous issue date: 2012-06-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / As árvores do gênero Copaifera (Leguminosae), conhecidas popularmente como copaibeiras, exsudam um óleo-resina extensamente utilizado na medicina popular e por indústrias farmacêuticas e de cosméticos, devido às suas atividades cicatrizante e anti-inflamatória. Quimicamente, esses óleos se caracterizam pela presença de hidrocarbonetos sesquiterpênicos, sesquiterpenos oxigenados e ácidos diterpênicos. No entanto, a composição química desses óleos-resina é variável e ainda não se tem conhecimento dos fatores que as determinam, embora vários fatores bióticos e abióticos sejam considerados fontes dessa variação. Essa variação dificulta a padronização da composição química desses óleos, comprometendo seu controle de qualidade e consequentemente a qualidade dos produtos a que darão origem, fato que tem causado um grande entrave à sua maior aplicação e comercialização. Essa variabilidade em sua composição química já é bastante conhecida e relatada na literatura, mas a maioria dos estudos realizados têm se restringido a caracterizar quimicamente o óleo-resina e poucos tem se preocupado em estudar as causas dessas variações. O objetivo deste trabalho foi padronizar a composição química dos óleos de copaíba por meio de técnicas de cromatografia em fase gasosa acoplada à detectores de ionização de chama (CG-DIC) e espectrometria de massas (CG-EM) e cromatografia em fase gasosa bidimensional abrangente (CGXCG); analisar estatisticamente a influência de fatores abióticos como sazonalidade, tipo de solo e diâmetro à altura do peito (DAP), além da infestação por cupins, sobre a composição química desses óleos. Além disso, foram comparados 5 métodos de esterificação dos ácidos diterpênicos presentes nos óleos de copaíba envolvendo catálise ácida, que utilizam BF3/MeOH, H2SO4/MeOH e HCl/MeOH, levando-se em consideração suas eficiências e frequências analíticas, além do consumo e toxicidade dos reagentes utilizados, relação custo benefício e, principalmente, a possibilidade de alteração/degradação da estrutura dos constituintes quando aplicados em óleos de copaíba. Para isso foram obtidos óleos de copaíba de 3 coletas: em novembro de 2004 e novembro de 2005 (épocas consideradas secas) e em maio de 2005 (época considerada chuvosa). No total, 43 amostras de óleo-resina de copaíba foram coletadas na Reserva Ducke (Manaus-AM), de 33 espécimes diferentes, que possuíam diferentes DAP s e se encontravam em diferentes tipos de solo. As análises por CG-DIC e CG-EM permitiram a identificação de 35 constituintes: sendo 22 hidrocarbonetos sesquiterpênicos, 9 sesquiterpenos oxigenados e 4 ácidos diterpênicos. Enquanto a análise por CGxCG permitiu a identificação de outros 13 sesquiterpenos, além de 7 monoterpenos, inéditos em óleos-resina de copaíba. O β-cariofileno e seu óxido foram os constituintes majoritários em 29 e 11 amostras, respectivamente. As análises hierárquica por agrupamento (HCA) e de componentes principais (PCA) evidenciaram a existência de dois grupos distintos com diferentes perfis cromatográficos, em que foi comprovada apenas a influência do tipo de solo, sobre a composição química desses óleos. Outros fatores analisados como sazonalidade, DAP e infestação por cupins, não tiveram influência sobre a composição química dos óleos-resina de copaíba. Quanto aos métodos de esterificação, as análises das 5 metodologias testadas, apesar de terem sido reprodutíveis, não se mostraram eficientes, ao passo que não permitiram a identificação dos constituintes formados e levaram à formação de artefatos.

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2014-09-29T14:43:20Z No. of bitstreams: 2 Guidotti, Micaela-2013-dissertação.pdf: 5573405 bytes, checksum: 6c218b2a095f16e608d6d6a1179ebee5 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2014-09-29T15:13:32Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Guidotti, Micaela-2013-dissertação.pdf: 5573405 bytes, checksum: 6c218b2a095f16e608d6d6a1179ebee5 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-09-29T15:13:32Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Guidotti, Micaela-2013-dissertação.pdf: 5573405 bytes, checksum: 6c218b2a095f16e608d6d6a1179ebee5 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2013-06-04 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The aim of this work was to evaluate the effect of oil-resin from the plant Copaifera sp. as phytogenic additive on broiler performance and as immunomodulatory agent. Five hundred broiler chicks were used (Cobb500 males), distributed in a randomized design experiment in factorial 5 x 2, composed of 10 treatments and five replications with 10 birds per pen. The treatments were divided in animals challenged and not challenged for all treatments: control group with and without challenge, oil-resin from copaiba 0.2%, group oilresin from copaiba 0.4%, group of oil-resin from copaiba 0.6 and group with growth promoter colistin. The challenge with pathogenic E. coli (4.5 x 109 UFCmL ) was realized at the age of four and 22 days old. The final weight, weight gain, feed intake and feed conversion were measured at weekly intervals until the age of 28 days. A in house indirect ELISA was standardized and immunoglobulin class IgA was evaluated. The cellular immunity was measured through skyn reaction test to phytohemagglutinin and analyzing the relative weight of the lymphoid organs. Performance data were analyzed through ANOVA and Turkey test with 5% of probability. For statistical evaluation of immunological data it was used multiple test non-parametric test, Kruskall-Wallis followed by T teste. The results showed that the inclusion of different levels of oil-resin from copaiba in broiler diet had similar performance when compared to the inclusion of antibiotic growth promoter. However it was observed an additive effect on antibody levels at the end of the trial period when oil-resin 0.2% was used. / Objetivou-se com este trabalho avaliar o efeito do óleo-resina da planta Copaifera sp. como aditivo fitogênico sobre os parâmetros de desempenho e como agente imunomodulador. Foram utilizados 500 pintos de corte machos Cobb500, distribuídos em delineamento inteiramente casualizado, em esquema fatorial 5x2, composto por 10 tratamentos e cinco repetições com 10 aves por unidade experimental. Os tratamentos foram divididos em animais desafiados e não desafiados para todos os tratamentos: grupo controle com e sem desafio, grupo com nível de inclusão de óleo-resina de 0.2% com e sem desafio, grupo com nível de inclusão de óleo-resina de copaíba 0.4% com e sem desafio, grupo com nível de inclusão de óleo-resina de copaíba 0.6% com e sem desafio, grupo com promotor de crescimento colistina com e sem desafio. O desafio microbiano foi fornecido as aves aos quatro dias de idade e aos 22 dias de idade contendo 4,5 x 109 UFC/mL. O peso final, ganho de peso, consumo de ração e conversão alimentar foram mensurados semanalmente até os 28 dias de idade das aves. Foi realizado a padronização de um teste de ELISA indireto para pesquisa de imunoglobulinas da classe IgA e avaliação da imunidade celular por meio de teste de reação a fitohemaglutinina e ao peso relativo dos órgãos linfóides. Os dados de desempenho foram analisados por meio do teste de ANOVA e Turkey a 5% de probabilidade. Para avaliação estatística para os dados imunológicos foi utilizado teste múltiplos nãoparamétrico de Kruskall-Wallis seguidos de teste T para comparação entre os diferentes grupos. Os resultados demonstraram que a inclusão de diferentes níveis de óleo-resina de copaíba na dieta de frangos de corte apresentaram efeito semelhante ao promotor de crescimento antibiótico e apresentou efeito aditivo nos níveis de anticorpos ao final do período experimental no nível de 0.2% de óleoresina.

Este estudo translacional avaliou o efeito da aplicação direta de materiais capeadores à base de óleo de copaíba sobre a polpa dentária de ratos. O biomaterial foi analisado de acordo com os processos inflamatórios, reparadores e regenerativos. Cavidades classe I foram preparadas na face oclusal dos molares superiores e inferiores de ratos da linhagem Wistar (n=120). Posteriormente, uma cavidade padronizada foi realizada com broca carbide esférica ¼. Exposições pulpares foram obtidas e após a hemostasia com algodão estéril e água destilada, foi realizado o capeamento pulpar com aplicação de biomateriais diretamente no tecido pulpar. Os biomateriais utilizados foram: COP (Óleo de Copaíba); Ca(OH)2 (hidróxido de cálcio), Ca(OH)2+COP; MTA (agregado trióxido mineral); MTA+COP; BIODENTINA (Biodentine®); BIODENTINA+COP. Todas as cavidades foram restauradas com cimento provisório. Os animais foram sacrificados após o período de 7, 14, 28 dias de acordo com os princípios de ética e experimentação animal. Vinte e um grupos foram criados a partir da combinação de tempos e materiais, cada grupo foi constituído de 5 animais. As peças foram preparadas e processadas pela técnica histológica e coradas pela HE (hemotoxilina e eosina) realizando cortes aleatórios, sendo analisados ao microscópio óptico em 100X de aumento por 2 examinadores. Os critérios avaliados foram: respostas inflamatória e degenerativa, organização tecidual, dentina reacional e reparativa. No último tempo experimental (28 dias) de todos os grupos foi analisado a superfície (mm2) e o volume (mm3) da ponte de dentina formada pela técnica da micro-CT (microtomografia computadorizada) de alta resolução. Os dados foram estatisticamente analisados utilizando o teste T pareado, determinando a superfície e volume da dentina reparadora formada entre os grupos experimentais. Nas análises histológicas foi utilizado o teste não-paramétrico de Mann-Whitney realizando comparações entre os grupos (?=5%). A BIODENTINA demonstrou uma tendência de acelerar o processo de regeneração pulpar, iniciando a deposição de dentina reparativa ao sétimo dia do capeamento. Este material apresentou uma dentina mais espessa em comparação com os outros biomateriais. O MTA também demonstrou uma eficiência na formação da ponte dentinária, entretanto em 20% das amostras não foi observada a presença de dentina reparadora. Ao acrescentar o COP nestes materiais, a formação da ponte dentinária apresentava heterogênea e incompleta, além disso esses grupos continham um processo inflamatório aumentado. A dentina reparadora do grupo de Ca(OH)2 demonstrou presença de túnel, com característica heterogênea. A adição do COP ao Ca(OH)2 aumentou a formação de dentina nas paredes ao redor da câmara pulpar em 80% das amostras, porém esta dentina não apresentava melhora na qualidade. Desta forma, o capeamento pulpar com COP isolado ou associado a Ca(OH)2, MTA e BIODENTINA não formou uma ponte de dentina completa e homogênea no local da exposição pulpar. / This translational study evaluated the effect of the direct application of copaiba oil based capping materials on the rat pulp. The biomaterial was analyzed according to inflammatory, repairing and regenerative processes. Class I cavities were prepared on the occlusal surface of the upper and lower molars of Wistar rats (n = 120). Subsequently, standardized cavities was performed with ¼ spherical carbide drill. Pulp exposures were obtained and after their hemostasis with sterile cotton and distilled water, pulp capping was done with application of biomaterials directly on the pulp tissue. The biomaterials used were: COP (Copaíba oil); Ca(OH)2 (calcium hydroxide), Ca(OH)2+COP; MTA (aggregate mineral trioxide); MTA+COP; BIODENTINE (Biodentine®); BIODENTINA+COP. All cavities were restored with temporary cement. The animals were sacrificed after the period of 7, 14, 28 days according to the principles of ethics and animal experimentation. Twenty-one groups were created from the combination of times and materials, each group consisted of 5 animals. The specimens were prepared and processed by histological technique and stained by HE (haemotoxin and eosin); randomized cuts were examined under optical microscope with 100X enlargement by two different examiners. The evaluated criteria were inflammatory and degenerative response, tissue organization, reactive and reparative dentin. In the last experimental period (28 days) of all groups, the surface (mm2) and the volume (mm3) of the reactive and reparative dentin formed were analyzed by the high-resolution micro-CT (computerized microtomography) technique. The data were statistically analyzed using the paired T-test, determining the surface and volume of the reparative dentin formed between the experimental groups. In the histological analyzes, the non-parametric Mann-Whitney test was used, comparing groups (? = 5%). BIODENTINE demonstrated a tendency to accelerate the process of pulpal regeneration, initiating the deposition of reparative dentin on the seventh day of the capping. This material had a thicker dentin compared to the other biomaterials. The MTA also demonstrated an efficiency in the formation of the dentin bridge; however, 20% of the samples did not observe the presence of reparative dentin. When adding the COP in these materials, the formation of the dentin bridge was heterogeneous and incomplete, in addition these groups contained an increased inflammatory process. The repair dentin of the Ca(OH)2 group showed a tunnel with a heterogeneous characteristic. The addition of COP to Ca(OH)2 increased dentin formation in the walls around the pulp chamber in 80% of the samples, but this dentin did not show improvement in quality. Thus, pulp cap with COP isolated or associated with Ca(OH)2, MTA and BIODENTINE did not form a complete and homogeneous dentin bridge at the site of pulp exposure.