Orientadora: Mirela Tinucci Costa / Banca: Suely Nunes Esteves Beloni / Banca: José Jurandir Fagliari / Resumo: A erliquiose canina é uma doença de alta incidência na região nordeste do Estado de São Paulo, sendo responsável pela morte de muitos cães. O diagnóstico precoce favorece a pronta instituição do tratamento e melhora o prognóstico do animal. Estudos têm apontado que a determinação da concentração de proteínas de fase aguda (PFA) pode contribuir para detecção precoce de doenças e auxiliar na predição do prognóstico. O presente estudo objetivou avaliar o perfil de proteínas de fase aguda (PFA) em cães experimentalmente infectados com Ehrlichia canis, amostra Jaboticabal, no início da infecção e após o tratamento. Para tanto, foram utilizados 10 cães sem contato prévio com hemoparasitas. Deste, cinco foram infectados e cinco serviram de controle da infecção. Hemogramas, nested PCR, detecção de anticorpos anti-E. canis e eletroforetograma de proteínas séricas foram realizados em períodos pré-determinados. Os resultados mostraram que a proteína-C reativa, ceruplasmina e a α1-glicoproteína ácida tiveram suas concentrações aumentadas antes do aparecimento dos sinais clínicos e das alterações de hemograma nos cães infectados. Os sinais clínicos da doença tornaram-se evidentes por volta do 17º dia de infecção. Trombocitopenia foi registrada a partir do 3º dia de infecção. Mórulas intracitoplasmáticas foram detectadas a partir do 15º dia. Títulos sorológicos anti-E. canis, variando de 1:2560 a 1:5120, e nPCR positiva foram evidenciados no 18º dia. Nas avaliações após o tratamento os cães infectados estavam assintomáticos, com nPCR negativo e acentuada redução dos títulos de anticorpos específicos em quatro dos cinco cães. Todas as PFA estudadas reduziram suas concentrações a títulos próximos aos iniciais. Este estudo mostrou que as mensurações das PFA contribuem para o diagnóstico precoce e predição de cura... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Canine ehrlichiosis is an endemic disease, with high incidence in the Northwest area of Sao Paulo State - Brazil and it is responsible for the death of numerous dogs. The rapid and accurate diagnosis helps the prompt establishment of treatment and improves the prognosis of the animal. Evidence has shown that the measurement of acute phase proteins (APP) can contribute for the early detection of the disease and help to predict its prognosis. This study evaluated the profile of APP in dogs experimentally infected with Ehrlichia canis, Jaboticabal - SP - Brazil sample, at the onset of the infection and after its treatment. Ten dogs, with no previous hemoparasitosis, were randomly assigned in either the infected group (5 animals), which received the bacteria, or the control group (5 animals). In pre-determined intervals, their blood was colected and hemogram, nested PCR, anti-E. canis antibodies detection and tritation and eletrophoresis of serum proteins were performed. We showed that, in infected dogs, the concentration of C-reactive protein, ceruplasmin and α-1 acid glycoprotein were increased previous to the clinical signs forthcoming and hemogram alterations. The clinical signs were evident around the 17th day of infection. Thrombocytopenia was found on the 3th day of infection. Intra-cytosolic morules were detected on the 15th day of infection. Sorologic tritation of anti-E. canis, ranging from 1:2560 to 1:5120, and positive nPCR were found on the 18th day of infection. In the post-treatment evaluation, the infected dogs were asymptomatic with negative nPCR and decreased tritation of specific antibodies in four out of five dogs. All APP analyzed were similar to basal levels. This study showed that the measurement of APP can, indeed, contribute for the early diagnosis and prediction of cure, after treatment, of the experimental acute phase of canine Ehrlichiosis. / Mestre

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Os animais foram submetidos à coleta de sangue no momento do parto, 18 horas e 7 dias após o parto. No Artigo 2, foram utilizadas 7 éguas mestiças e seus respectivos neonatos, as quais foram submetidas à indução de placentite ascendente entre os dias 290-300 de gestação. As éguas foram submetidas a coletas de sangue 60 dias pré-parto, 30 dias pré-parto, no dia da indução, 24 horas e 48 horas após a indução, no dia que antecedeu o parto, imediatamente após e 24 horas após o parto e os neonatos imediatamente após o nascimento, 12 horas, 24 horas e 48 horas após o nascimento. Em ambos os artigos, a concentração sérica de proteína total foi determinada pelo método colorimétrico, e a leitura realizada por espectofotômetro e para a obtenção da concentração das frações proteicas, utilizou-se eletroforese em gel de acrilaminada contendo dodecil sulfato de sódio (SDS-PAGE). Na avaliação estatística foi considerada significância de 5%. Foram observadas 23 bandas proteicas, com pesos moleculares de 16 KDa a 245 KDa. No Artigo 1 constatou-se, nas éguas, elevação de das frações proteicas no momento do parto, no qual as éguas com placentite apresentaram concentrações mais elevadas do que as hígidas. Os potros provenientes das éguas com placentite apresentaram maior concentração de α1-glicoproteína ácida após a ingestão de colostro. No artigo 2 as éguas submetidas a indução de placentite apresentaram elevação na α1-glicoproteína ácida a partir das 48 horas após a inoculação da bactéria. Com os resultados podemos caracterizar as concentrações médias das Proteínas de Fase Aguda em éguas com placentite e seus neonatos para avaliação da saúde nesse período. Concluímos que a α1-glicoproteína ácida pode ser indicada como um marcador inflamatório para a placentite. / The ascending placentitis is a major cause of premature birth, abortion and birth of compromised foals, so the search for early markers of this condition becomes critical for diagnosis and treatment in the early stage of the disease. The aim of this study is to characterize the concentration of acute phase proteins in periparturient mares with placentitis and their newborns. In Paper 1, 24 Thoroughbred mares and their neonates were used, which were divided by histopathologic examination of the placenta in group Placentitis (n = 11) and group Healthy (n = 13). The animals were subjected to blood collection at delivery, 18 hours and 7 days after delivery. In Paper 2, 7 mares and their neonates were used, which, the mares were subjected to induction of ascending placentitis between days 290-300 of gestation. The mares were subjected to blood sampling 60 days prepartum, 30 days prepartum, on the day of induction, 24 hours and 48 hours after induction, the day before delivery, immediately after and 24 hours after delivery and newborns immediately after birth, 12 hours, 24 hours and 48 hours after birth. Plasma total protein concentration was determined by the colorimetric method, and reading performed by spectrophotometer. To obtain the concentration of protein fractions was used acrilaminada gel electrophoresis in sodium dodecyl sulfate (SDS-PAGE). At the statistical evaluation was considered significance of 5%. Were observed 23 protein bands with molecular weights of 16 kDa to 245 kDa. In Paper 1 it was found, in mares, elevated protein fractions at delivery, in which mares with placentitis showed higher concentrations than healthy mares. The foals from mares with placentitis showed higher concentration of α1-acid glycoprotein after ingestion of colostrum. In Paper 2 mares subjected to induction of placentitis had increased α1-acid glycoprotein from 48 hours after bacterial inoculation. With the results we show the average concentrations of acute phase proteins in mares with placentitis and their newborns for health assessment on that period. We speculate that α1-acid glycoprotein may be indicated as an inflammatory marker for placentitis, but more studies are needed.