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The morphology and physiology of Cryptostroma corticale

Abbey, Samuel D. January 1978 (has links)
Four 'strains of Cryptostroma corticale' have 'been characterised morphologically and physiological1y. The growth, sporulation and gemination were affected differentially by environmental factors. A30 grew rapidly and sporulated abundantly. A32 grew well but not quite as rapidly, as A30. A31 and A33 were both equally slow with A33 producing spores in low numbers. The optimal conditions for growth sporulation and gemination under laboratory conditions have been established. The strains were mesophilic, osmoduric, carboxyduric and slightly haloduric.
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Design and synthesis of inhibitors for N-myristoyltransferase, a promising treatment for parasitic diseases

Yu, Zhiyong January 2011 (has links)
N-myristoyltransferase (NMT) is a monomeric enzyme, which is ubiquitous in eukaryotes, catalysing an irreversible co-translational transfer of myristate to a particular set of proteins containing an N-terminal glycine. The work presented in this thesis illustrates the use of synthesised small molecules as a probe to investigate the role of NMT in parasites. Chapter 1 looks at the two parasitic diseases that this project targets: malaria and visceral leishmaniasis, which are caused by Plasmodium falciparum (Pf) and Leishmania donovani (Ld) respectively. Additionally, biological evidence to show that NMT is a promising drug target in these parasites is presented. Chapter 2 describes a piggy-back strategy, which was applied to discover a benzofuran compound with moderate inhibition against PfNMT. This molecule was re-synthesised and then validated as a hit by an optimised scintillant proximity assay. Chapter 3 details the process of drug design based on the inhibition data against PfNMT and structural information of the related enzymes, in which a library of 150 benzofuran analogues was generated. Importantly, the cell inhibition results provided strong evidence to chemically validate NMT as a drug target in P. falciparum, leading to the identification of a lead candidate. Chapter 4 gives the initial structure-activity relationships for LdNMT inhibitors, whereby the whole library of the PfNMT inhibitors was screened against LdNMT. In addition, combined with the parasite inhibition assay, two compounds were determined to be the early lead candidates for LdNMT inhibitors. Chapter 5 provides an overview of the work detailed in this thesis and suggests the future directions that will continue the advancement of this project.
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Proteomic analysis of Leishmania mexicana differentation

Karsani, Saiful Anuar January 2006 (has links)
No description available.
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Étude de la voie des métacaspases, une étape vers la compréhension de l’apoptose de Plasmodium falciparum / Place of the metacaspase pathway in Plasmodium falciparum apoptosis

Meslin, Benoît 22 July 2010 (has links)
Plasmodium falciparum est un protozoaire parasite responsable du paludisme causant la mort d’environ un million de personnes par an. La résistance médicamenteuse du parasite augmente la pathogénicité de cette maladie. Il est question ici d’explorer les mécanismes moléculaires impliqués dans la mort cellulaire programmée (apoptose) du parasite en présence de chloroquine (CQ) et de tester l’hypothèse qu’une résistance à la CQ peut s’expliquer en partie par une défaillance de ce mécanisme de mort. Dans un premier temps l’étude des marqueurs de l’apoptose (TUNEL, JC1, formes pyknotiques) montre qu’une souche sensible de parasite (3D7) à la CQ peut subir une apoptose en présence de CQ alors qu’une souche résistante (7G8) présente un défaut d’apoptose. Dans un deuxième temps nous montrons que la protéine PfMCA1 (P. falciparum métacaspase 1) présente une structure et une maturation protéolytique proche de celui des caspases faisant de cette protéine un candidat potentiellement impliqué dans l’apoptose du parasite. Dans un troisième temps nous montrons que l’expression du domaine catalytique de PfMCA1 dans la levure induit une mort cellulaire et un retard de croissance de la levure. Nous montrons également que PfMCA1 présente une activité enzymatique de type arginase alors que les effets induit par sa surexpression peuvent être inhibés par l’ajout d’un inhibiteur de protéases spécifiques des aspartates. Ces résultats suggèrent que PfMCA1 pourrait agir comme une protéine initiatrice induisant l’action d’une protéase effectrice spécifique des aspartates conduisant à la mort cellulaire. Cette hypothèse testée chez la levure reste à confirmée chez P. falciparum / Plasmodium falciparum is a protozoan parasite responsible for malaria causing one million deaths per year. Drug resistance of the parasite increases the pathogenicity of this disease. In this thesis, it is question to explore the molecular pathway involved in programmed cell death (apoptosis) of the parasite in the presence of chloroquine (CQ) and to test the hypothesis that CQ resistance could be partly explained by a failure of such a mechanism. In a first step, we showed that a sensitive clone (3D7) exhibited the classical hallmarks of apoptosis (DNA fragmentation, mitochondrial depolarization) under a CQ pressure while a resistance clone failed to undergo apoptosis. In a second step we show that the protein PfMCA1 (P. falciparum metacaspase 1) has a structure and a processing similar to the well known caspases which are the key effectors of apoptosis for higher eukaryotic cells. In a third step we show that expression of the catalytic domain of PfMCA1 in yeast induces cell death and growth retardation of yeast. We show that PfMCA1 presented an arginine-specific protease activity while the effects induced by its overexpression were inhibited by an aspartate-specific protease inhibitor (z-VAD-fmk). These results suggest that PfMCA1 might act as an initiator protein inducing an aspartate-specific protease effector leading to cell death. This hypothesis tested in yeast remains to be confirmed in P. falciparum
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Utilisation de biomarqueurs de plasmodium dans le cadre de la prévention du paludisme transfusionnel au Sud-Bénin / Use of malaria biomarkers for the prevention of blood transfusion malaria in Southern-Benin

Atchadé, Sossa Pascal 01 February 2014 (has links)
Le paludisme ou malaria est une maladie parasitaire due à un protozoaire. Il est transmis principalement à l'homme par la piqûre de la femelle d'un moustique du groupe des anophèles. La transfusion sanguine représente la 3e voie potentielle de transmission de Plasmodium. L'incidence du paludisme a entraîné une augmentation de la proportion des donneurs de sang ayant été en contact avec le parasite. Le premier objectif de ce travail de thèse est d'analyser l'immune-réactivité de marqueurs biologiques de dépistage de Plasmodium dans les poches de sang pour prévenir le paludisme transfusionnel et plus spécifiquement, il s'agit de déterminer par goutte épaisse (GE) et Enzyme Linked lmmunosorbent Assay {ELISA), la prévalence du paludisme asymptomatique chez les donneurs de sang au Sud du Bénin. Le second objectif est de répertorier les marqueurs moléculaires les plus adéquats pour la recherche d'antigène et d'anticorps de Plasmodium, utilisables en dépistage de masse dans les centres de transfusion sanguine. / Malaria is a disease due a protozoan. lt is transmitted to humans by the bite of a mosquito form Anopheles group. Blood transfusion is the third potential way of malaria transmission. Incidence of Malaria has increased the proportion of blood donors suspected to be contaminated by Plasmodium sp. The goal of that study is to determine the immunoreactivity of some biomarkers that could be used for the prevention of the blood transfusion transmitted malaria. For that purpose we used thick and thin blood film microscopical determination and an Enzyme Linked lmmunoSorbent Assay technology detecting malaria antigen (pan-pLDH) and malaria antibodies. These methods were used for the screening of 2515 blood donors during ten following months insouthern-Benin, sample were separated in the 4 following seasons observed in Western Africa.
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Rôle de l'import des ARN de transfert de l'hôte dans le développement Plasmodium / Role of host's transfer RNA import in Plasmodium development

Kapps, Delphine 23 September 2016 (has links)
La protéine tRip de Plasmodium, l’agent du paludisme, fait l’objet de mon travail de thèse. Identifiée au laboratoire, elle est localisée à la membrane plasmique de P. berghei, le modèle murin étudié in vivo. Elle permet l’import d’ARNt exogènes à l’intérieur du parasite. La génération et l’étude d’une souche P. berghei tRip-KO m’ont permis d’explorer l’importance de ce mécanisme et l’implication de tRip dans un complexe multiprotéique. J’ai démontré que la multiplication de P. berghei est très réduite lors du stade sanguin chez la souche tRip-KO. Par protéomique, j’ai montré qu’en l’absence de tRip, de nombreuses protéines sont sous-exprimées, en particulier celles riches en asparagines. Enfin, j’ai identifié trois partenaires protéiques de tRip, dont le substrat est l’ARNt. Ces résultats suggèrent que les ARNt importés par Plasmodium via tRip pourraient être substrat de protéines plasmodiales et acteurs de la synthèse protéique du parasite. Le transport d’ARNt étrangers dans une cellule est un mécanisme inconnu en dehors de cette étude. Il révèle une interaction inédite entre un hôte et son parasite intracellulaire, propice au développement de ce dernier. / The organism studied in this work is Plasmodium, the malaria parasite. The laboratory identified a membrane protein, called tRip for tRNA import protein, displaying a tRNA binding domain exposed outside of the parasite. In vivo, in P. berghei which is the murine model used, tRip mediates the import of exogenous tRNAs into the parasite cytosol. My PhD work begun with the construction of a tRip-KO strain of P. berghei to investigate the role of tRNA import and the putative involvement of tRip within a proteic complex. The phenotype of the tRip-KO strain is significantly modified compared to the wild-type parasite during the blood stage: its rate of multiplication is much lower. By proteomic analyses, I showed that many proteins are under-regulated in the tRip-KO strain, especially those very rich in asparagines. Moreover, I dentified three protein partners for tRip, being tRNA aminoacylation or modification enzymes. These results suggest that host imported tRNAs could be taken in charge by parasitic enzymes and take part to Plasmodium protein synthesis. This work reveals a new host pathogen interaction and is the first example showing exogenous tRNA import into a cell.
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Rôle du facteur de croissance transformant (TGF-β2) dans la virulence des macrophages infectés par Theileria annulata / Role of transforming growth factor (TGF-β2) in regulating virulence of Theileria annulata-infected macrophages

Haidar, Malak 30 October 2015 (has links)
Les parasites Theileria (Theileria. annulata and T. parva) sont des protozoaires intracellulaires qui font partie du phylum des Apicomplexa. Theileria infecte les leucocytes bovins et les transforment en cellules cancéreuses, induisant un genre de leucémie chez le bovin et conduisant à la mort de l’animal. Les cellules infectées par Theileria démontrent certaines caractéristiques de cellules cancéreuses telles qu’une importante capacité d’invasion et de migration cellulaire. Cependant, le traitement de cellules infectées avec une drogue Theiléricide spécifique (buparvaquone) permet l'élimination du parasite et la réversion du phénotype transformé. De plus, la virulence peut être atténuée par passages répétés sur culture cellulaire. La similitude entre les cellules transformées par Theileria et la leucémie humaine fait de Theileria un modèle très important permettant l’étude des mécanismes cellulaires induits par le parasite au cours de la transformation de la cellule hôte. Mon laboratoire d’accueil a publié une augmentation significative de TGF-β2 dans les cellules virulentes et a constaté que parmi les 1158 cibles de TGF-β, 68 gènes ont été reconnus d'avoir modifié leurs niveaux de transcription concomitante avec l'atténuation. Dans ce travail de thèse, nous avons étudié les voies de signalisations impliquées dans la régulation de l’adhésion et l’invasion des cellules infectées par Theileria. Nous nous sommes particulièrement intéressés à l’étude de la voie de signalisation TGF-β2 et ses effecteurs. Nos résultats montrent que l’activation de la voie de signalisation de TGF-β2 par Theileria entraîne une augmentation de l’invasion et de l’adhérence des cellules transformées par deux mécanismes différents, soit en activant la voie de signalisation PGE2/EP4/cAMP/PKA/EPAC/CREB, soit en stimulant la voie GRB2/PI3-K/AP-1. Les macrophages atténués infectés par Theileria sont plus stressés oxydativement ce qui diminue leur adhérence et leur invasion cellulaire. Ceci nous a amené à étudier en collaboration avec un autre doctorant (Mehdi Metheni) le rôle de TGF-β2 dans la régulation du stress oxydatif dans les macrophages infectés par Theileria. Nos données montrent que les niveaux élevés de TGF-β2 stimule l’expression de la catalase, une enzyme anti-oxydante qui convertit le H2O2 en H2O et la baisse de H2O2 favorise la virulence en augmentant l’invasion et l’adhésion des cellules infectées par Theileria (résultats supplémentaires). De plus, nous avons examiné le statut de stress oxydatif et le type de glycolyse utilisé par les cellules infectées par Theileria. Les cellules transformées par Theileria agissent comme des cellules cancéreuses, elles consomment énormément de glucose. La protéine BAD joue un rôle important dans l’apoptose ainsi que dans la voie de glycolyse. Son activité est régulée par phosphorylation en réponse à des facteurs de croissance et de survie. BAD peut être phosphorylée par la PKA sur le résidu sérine 155. Durant ma thèse, nous avons examiné le rôle de la phosphorylation de BAD par la PKA dans la régulation du métabolisme cellulaire des macrophages infectés par Theileria. Nos résultats montrent que l’abolition de la phosphorylation de BAD par la PKA dissocie le complexe mitochondrial formé entre BAD et HK2, ce qui induit l’ubiquitynation et la dégradation de HK2 par le protéasome. La baisse de HK2 stimule la voie de phosphorylation oxydative en faveur de l’effet Warburg dans les cellules infectées par Theileria. / Theileria parasites (Theileria. annulata and T. parva) are intracellular protozoa and members of the phylum Apicomplexa. Theileria parasites are the only eukaryotes that possess the property of being able to transform another eukaryote, their leukocyte host cells. Transformed leukocytes show many characteristics of tumour cells such as heightened invasive capacity; however the tumour-like phenotype can be totally reversed upon drug induced parasite death and attenuated by multiple in vitro passages. Such multiple-passaged attenuated lines are used as live vaccines against tropical theileriosis. The similarities in tumour hyper-invasiveness between Theileria-transformed leukcocytes and human lymphomas imply that observations on Theileria-induced leukocyte transformation have the potential to give generally applicable insights into the mechanisms underpinning tumour virulence. My host laboratory described higher TGF-β2 levels in virulent infected macrophages and following microarray analysis of virulent compared to attenuated macrophages found that among the 1158 TGF-β-targets, 68 genes had altered transcript levels concomitant with attenuation. In this study, we investigate the signalling pathways involved in the regulation of cellular adhesion and invasiveness of Theileria-infected cells. We were especially interested in the study of TGF-β2 signalling in Theileria-transformed virulent versus attenuated macrophages. My results indicate that following Theileria infection of macrophages, the TGF-β2 signalling pathway is activated and induces an increase in adhesion of virulent transformed macrophages through two different mechanisms: either by activating a PGE2 / EP4 / cAMP / PKA / EPAC / CREB signaling pathway, or by stimulating a GRB2 / PI3-K / AP-1 pathway. As attenuated macrophages display heightened oxidative stress, which underpins their loss of adhesion and invasiveness, in collaboration with another PhD student (Mehdi Metheni) we investigated the role of TGF-β2 in the regulation of the oxidative stress status of Theileria-infected macrophages. Our data show that high levels of TGF-β2 increase the expression of catalase, an anti-oxidant enzyme that converts H2O2 into H2O and the drop in H2O2 output results in regain of the virulence trait heightened adhesion of Theileria-transformed macrophages to fibronectin. Theileria-transformed macrophages display many features of cancer cells such as their consumption of larger quantities of glucose. The BCL-2 family protein BAD has an alternative function in glucose metabolism separate from its role in apoptosis. The activity of BAD is regulated by phosphorylation in response to growth/survival factors. BAD can be phosphorylated on Ser155 by PKA. So during my thesis studies I examined the role of PKA mediated phosphorylation of BAD in the regulation of the cellular metabolism of Theileria-transformed macrophages. My results showed that ablation of BAD S155 phosphorylation dissociates the mitochondrial complex of BAD and HK2 and cytosolic HK2 becomes ubiquitinated and degraded by the proteasome. Loss of HK2 switches the metabolism of Theileria-transformed leukocytes from Warburg-like to OXPHOS-like glycolysis.
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Rôle du facteur de croissance transformant (TGF-β2) dans la virulence des macrophages infectés par Theileria annulata / Role of transforming growth factor (TGF-β2) in regulating virulence of Theileria annulata-infected macrophages

Haidar, Malak 30 October 2015 (has links)
Les parasites Theileria (Theileria. annulata and T. parva) sont des protozoaires intracellulaires qui font partie du phylum des Apicomplexa. Theileria infecte les leucocytes bovins et les transforment en cellules cancéreuses, induisant un genre de leucémie chez le bovin et conduisant à la mort de l’animal. Les cellules infectées par Theileria démontrent certaines caractéristiques de cellules cancéreuses telles qu’une importante capacité d’invasion et de migration cellulaire. Cependant, le traitement de cellules infectées avec une drogue Theiléricide spécifique (buparvaquone) permet l'élimination du parasite et la réversion du phénotype transformé. De plus, la virulence peut être atténuée par passages répétés sur culture cellulaire. La similitude entre les cellules transformées par Theileria et la leucémie humaine fait de Theileria un modèle très important permettant l’étude des mécanismes cellulaires induits par le parasite au cours de la transformation de la cellule hôte. Mon laboratoire d’accueil a publié une augmentation significative de TGF-β2 dans les cellules virulentes et a constaté que parmi les 1158 cibles de TGF-β, 68 gènes ont été reconnus d'avoir modifié leurs niveaux de transcription concomitante avec l'atténuation. Dans ce travail de thèse, nous avons étudié les voies de signalisations impliquées dans la régulation de l’adhésion et l’invasion des cellules infectées par Theileria. Nous nous sommes particulièrement intéressés à l’étude de la voie de signalisation TGF-β2 et ses effecteurs. Nos résultats montrent que l’activation de la voie de signalisation de TGF-β2 par Theileria entraîne une augmentation de l’invasion et de l’adhérence des cellules transformées par deux mécanismes différents, soit en activant la voie de signalisation PGE2/EP4/cAMP/PKA/EPAC/CREB, soit en stimulant la voie GRB2/PI3-K/AP-1. Les macrophages atténués infectés par Theileria sont plus stressés oxydativement ce qui diminue leur adhérence et leur invasion cellulaire. Ceci nous a amené à étudier en collaboration avec un autre doctorant (Mehdi Metheni) le rôle de TGF-β2 dans la régulation du stress oxydatif dans les macrophages infectés par Theileria. Nos données montrent que les niveaux élevés de TGF-β2 stimule l’expression de la catalase, une enzyme anti-oxydante qui convertit le H2O2 en H2O et la baisse de H2O2 favorise la virulence en augmentant l’invasion et l’adhésion des cellules infectées par Theileria (résultats supplémentaires). De plus, nous avons examiné le statut de stress oxydatif et le type de glycolyse utilisé par les cellules infectées par Theileria. Les cellules transformées par Theileria agissent comme des cellules cancéreuses, elles consomment énormément de glucose. La protéine BAD joue un rôle important dans l’apoptose ainsi que dans la voie de glycolyse. Son activité est régulée par phosphorylation en réponse à des facteurs de croissance et de survie. BAD peut être phosphorylée par la PKA sur le résidu sérine 155. Durant ma thèse, nous avons examiné le rôle de la phosphorylation de BAD par la PKA dans la régulation du métabolisme cellulaire des macrophages infectés par Theileria. Nos résultats montrent que l’abolition de la phosphorylation de BAD par la PKA dissocie le complexe mitochondrial formé entre BAD et HK2, ce qui induit l’ubiquitynation et la dégradation de HK2 par le protéasome. La baisse de HK2 stimule la voie de phosphorylation oxydative en faveur de l’effet Warburg dans les cellules infectées par Theileria. / Theileria parasites (Theileria. annulata and T. parva) are intracellular protozoa and members of the phylum Apicomplexa. Theileria parasites are the only eukaryotes that possess the property of being able to transform another eukaryote, their leukocyte host cells. Transformed leukocytes show many characteristics of tumour cells such as heightened invasive capacity; however the tumour-like phenotype can be totally reversed upon drug induced parasite death and attenuated by multiple in vitro passages. Such multiple-passaged attenuated lines are used as live vaccines against tropical theileriosis. The similarities in tumour hyper-invasiveness between Theileria-transformed leukcocytes and human lymphomas imply that observations on Theileria-induced leukocyte transformation have the potential to give generally applicable insights into the mechanisms underpinning tumour virulence. My host laboratory described higher TGF-β2 levels in virulent infected macrophages and following microarray analysis of virulent compared to attenuated macrophages found that among the 1158 TGF-β-targets, 68 genes had altered transcript levels concomitant with attenuation. In this study, we investigate the signalling pathways involved in the regulation of cellular adhesion and invasiveness of Theileria-infected cells. We were especially interested in the study of TGF-β2 signalling in Theileria-transformed virulent versus attenuated macrophages. My results indicate that following Theileria infection of macrophages, the TGF-β2 signalling pathway is activated and induces an increase in adhesion of virulent transformed macrophages through two different mechanisms: either by activating a PGE2 / EP4 / cAMP / PKA / EPAC / CREB signaling pathway, or by stimulating a GRB2 / PI3-K / AP-1 pathway. As attenuated macrophages display heightened oxidative stress, which underpins their loss of adhesion and invasiveness, in collaboration with another PhD student (Mehdi Metheni) we investigated the role of TGF-β2 in the regulation of the oxidative stress status of Theileria-infected macrophages. Our data show that high levels of TGF-β2 increase the expression of catalase, an anti-oxidant enzyme that converts H2O2 into H2O and the drop in H2O2 output results in regain of the virulence trait heightened adhesion of Theileria-transformed macrophages to fibronectin. Theileria-transformed macrophages display many features of cancer cells such as their consumption of larger quantities of glucose. The BCL-2 family protein BAD has an alternative function in glucose metabolism separate from its role in apoptosis. The activity of BAD is regulated by phosphorylation in response to growth/survival factors. BAD can be phosphorylated on Ser155 by PKA. So during my thesis studies I examined the role of PKA mediated phosphorylation of BAD in the regulation of the cellular metabolism of Theileria-transformed macrophages. My results showed that ablation of BAD S155 phosphorylation dissociates the mitochondrial complex of BAD and HK2 and cytosolic HK2 becomes ubiquitinated and degraded by the proteasome. Loss of HK2 switches the metabolism of Theileria-transformed leukocytes from Warburg-like to OXPHOS-like glycolysis.
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Epigenetic studies of plasmodium falciparum pre-erythrocytic stages / Etudes épigénétiques des stades pré-érythrocytaires de plasmodium falciparum

Zanghi, Gigliola 01 December 2016 (has links)
L'épigénétique joue un rôle majeur dans le développement érythrocytaire de Plasmodium falciparum, tels que variation antigénique, pathogenèse, différenciation sexuée. Jusqu'à présent, ces éléments n'ont jamais été décrits chez les sporozoïtes. Pour caractériser la régulation épigénétique au niveau des sporozoïtes de P. falciparum, nous avons étudié les principaux régulateurs épigénétiques PfHP1 (P. falciparum hétérochromatine Protein 1) ainsi que PfSET6 et PfSET7 (méthyltransférases histone lysine). J'ai établi une cartographie génomique des marques épigénétiques répressives associées à l'hétérochromatine, et actives associées à l'euchromatine. J'ai identifié un nouveau mécanisme stade-spécifique de contrôle de l'expression génique, qui réprimés plusieurs gènes codant pour des protéines exportées. Ce mécanisme repose sur une expansion d'hétérochromatine. De plus, je démontre qu'un membre de la famille des gènes var, qui code pour le facteur de virulence PfEMP1 des stades sanguins, est exprimé à la surface des sporozoïtes. Cette localisation contraste avec les stades sanguins, où PfEMP1 est transporté à la surface des érythrocytes et participe à cytoadhérence. L'ensemble de ces résultats ouvre de nouvelles questions biologiques: quels sont les facteurs qui régulent la formation d'hétérochromatine chez les sporozoïtes? Quelle est la fonction de PfEMP1 sur la surface d'un sporozoïte? Mes conclusions indiquent un rôle putatif de PfEMP1 lors de la migration des sporozoïtes. En outre, l'expression, à la surface du sporozoïte, d'un antigène polymorphique et spécifique de souche pourrait expliquer la réponse immunitaire souche-spécifique, induite par les sporozoïtes atténués. / Epigenetic mechanisms control key processes during Plasmodium falciparum blood stage development such as antigenic variation, malaria pathogenesis and sexual commitment. However, the epigenetic landscape has not been reported for the sporozoites stage. To characterize epigenetic regulation in sporozoites, we tested the major epigenetic regulators P. falciparum Heterochromatin Protein 1 (PfHP1) and the histone lysine methyltransferases (PfSET6 and PfSET7) in P. falciparum sporozoites. I obtained a reliable genome-wide occupancy data for repressive heterochromatin and active euchromatin marks. Notably, I discovered an unprecedented stage specific mechanism of silencing, which represses several hundreds of genes, encoding parasite surface exported proteins. This is based on an expansion of facultative heterochromatin boundaries in sporozoites. Moreover, I demonstrate that a single member of the polymorphic var gene family, encoding the blood stage virulence factor PfEMP1, is expressed at the surface of sporozoites. This is in contrast to blood stages where PfEMP1 is transported to the erythrocyte surface participating in cytoadhesion. Overall, my findings rise new biological questions including what are the factors that regulate heterochromatin boundaries and what is the function of a virulence-associated surface antigen in sporozoites stage. My findings point to a putative function of this adhesion molecule in sporozoites migration. Moreover, the expression of a highly polymporphic and strain-specific antigen on the surface of sporozoites might provide a molecular explanation for the strain-specific protective immune response induced by attenuated sporozoites.
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Characterization of P.falciparum histone methyltransferases : biological role and possible targets for new intervention strategies / Caractérisation des histones méthyltransférases de P.falciparum : rôle biologique et cibles possibles pour de nouvelles stratégies d'intervention

Ding, Shuai 15 December 2016 (has links)
On a montré que les PTM jouaient un rôle significatif de P. falciparum dans l'année de contrôle de la régulation transcriptionnelle, de l'expression monoaléique et de la différenciation sexuelle. Dix SET contenant des HKMTs contenant du domaine-ont été prédits; Six d'entre eux être essentiels pour le développement de stages de sang asexués. Le projet de thèse est centré sur la caractérisation biologique de PfSET7 et PfSET6. Nous avons observé l'échange de localisation cellulaire dynamique Pendant le cycle de vie: PfSET7 se trouvent dans de multiples foyers cytoplasmiques dans les stades érythrocytaires asexués et le stage de foie, et plus frappante, dans la membrane du parasite enrichie en gamétocytes. PfSET6 EXPOSÉ une localisation nucléaire dans les anneaux et un modèle ponctué dans le cytoplasme des trophozoites matures et schizontes, et est enrichi dans les structures de foyers dans le cytoplasme des gamétocytes. Pris ensemble, notre étude suggère que la méthylation non histone est beaucoup plus significative chez P. falciparum que précédemment attendu. La méthylation à médiation par PfSET7 Peut être une extension du code histone à - d'autres protéines cytosoliques; Partiellement PfSET6 s'associe à des voies de répression transcriptionnelle dans le noyau et des régulateurs post-transcriptionnels dans le cytoplasme. Une étude plus approfondie vise à identifier des cibles de domaine SET contenant des protéines dans le gène inducible knockout mutant parasite lignes. Le fait que PfSET7 et PfSET6 sont exprimés à différents stades du cycle de vie, les fait comme de nouvelles cibles pour le développement de médicaments contre cette maladie grave et de bloquer la transmission. / In P. falciparum, PTMs have been shown to play an important role in the control of transcriptional regulation, monoallelic expression, and sexual differentiation. Ten SET domain-containing HKMTs have been predicted; six of them appear to be essential for asexual blood stage development. My lab has expressed and purified two enzymatically active recombinant methyltransferase PfSET7 and PfSET6. In vitro enzyme kinetics assays shows they can methylate histones. The dissertation project is centered around the biological characterization of PfSET7 and PfSET6. We observed the dynamic changes of cellular localization during life cycle: PfSET7 are found in multiple cytoplasmic foci in asexual erythrocytic stages and liver stage, and more strikingly, enriched in parasite membrane in gametocytes. PfSET6 exhibited a nuclear localization in rings and a punctuated pattern in the cytoplasm of mature trophozoites and schizonts, and is enriched within foci-like structures in the cytoplasm of gametocytes. Taken together, our study suggests that non-histone methylation is much more important in P. falciparum than previously anticipated. PfSET7-mediated methylation may be an extension of the histone code to other cytosol proteins; PfSET6 partially associates with transcriptional repression pathways in the nucleus and post-transcriptional regulators in the cytoplasm. Further study aims to identify targets of SET domain containing proteins within the inducible gene knock out mutant parasite lines. The fact that PfSET7 and PfSET6 are expressed in different life cycle stages, makes them as novel targets for drug development that could against severe disease and to block pathogen transmission.

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