Made available in DSpace on 2015-09-25T12:23:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Rennaly de Freitas Lima.pdf: 983863 bytes, checksum: 6587d3f21487e66eddf68ca2165159c4 (MD5) Previous issue date: 2013-06-11 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / This study aimed to evaluate the in vitro anti-microbial and anti-proliferative potentials of extract and active fractions of Anadenanthera colubrina (Vell.) Brenan (Angico). The anti-microbial evaluation was conducted through Minimum Inhibitory Concentration (MIC), Minimum Bactericidal/Fungicidal Concentration, and biofilm adherence inhibition, as well as a cellular morphology analysis via scanning electron microscope (SEM). To verify the anti-proliferative potential, six tumor cell lines were used. The extract presented severe anti-fungicidal activity against Candida albicans ATCC 18804 (MIC = 0,031 mg/mL), with similar activity in regard to its ethyl acetate fraction. Both the extract and the active fraction also showed the ability to inhibit Candida albicans adherence in biofilm after 48 hours of formation, showing median values equivalent and higher than those of the control group, but without significant statistical difference (p > 0,05). Through the SEM was also observed alterations in the cellular morphology of yeast. With regard to anti-proliferative activity, the extract presented cytostatic potential for all tested lines. In face of these results, it s suggested a strong anti-fungicidal inhibition potential for Anadenanthera colubrina (Vell.) Brenan, as well as a tendency for decreasing the cellular growth of human tumor lineages. / Este estudo objetivou avaliar in vitro o potencial antimicrobiano e antiproliferativo do extrato e frações ativas da Anadenanthera colubrina (Vell.) Brenan (angico), além de caracterizar fitoquimicamente o extrato. A avaliação antimicrobiana foi realizada através da Concentração Inibitória Mínima (CIM), Concentração Bactericida/Fungicida Mínima e inibição de aderência ao biofilme, além da análise da morfologia celular por meio de microscopia eletrônica de varredura (MEV). Para a verificação do potencial antiproliferativo, seis linhagens de células tumorais foram utilizadas. O extrato apresentou forte atividade antifúngica contra a Candida albicans ATCC 18804 (CIM = 0,031 mg/mL), sendo observada atividade semelhante para a sua fração de acetato de etila. Em relação à atividade antibacteriana, o extrato da Anadenanthera colubrina (Vell.) Brenan apresentou atividade apenas para Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 (CIM = 0,5 mg/mL). O extrato e a fração ativa também demonstraram capacidade de inibir a aderência da Candida albicans em biofilme, após 48 horas de formação, demonstrando valores de mediana equivalentes e maiores que o grupo controle, porém sem diferença estatística significativa (p > 0,05). Observou-se ainda, através da MEV, alterações na morfologia celular da levedura. Em relação à atividade antiproliferativa, o extrato apresentou potencial citostático para todas as linhagens testadas, sendo capaz de diminuir o crescimento celular em uma concentração média de 0,25 mg/mL. Através da caracterização fitoquímica, verificou-se alto teor de polifenóis totais (53,18%). Diante destes resultados, sugere-se forte potencial antifúngico para Anadenanthera colubrina (Vell.) Brenan, além de apresentar tendência à diminuição do crescimento celular para linhagens tumorais humanas.

Made available in DSpace on 2015-09-25T12:23:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Jamilly Kelly Oliveira Neves.pdf: 16106200 bytes, checksum: 8dc99d4e55502b91c49642df1fad10ac (MD5) Previous issue date: 2013-06-27 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Copaiba oil, extracted from the Copaiba plant, a common tree to Latin America and West Africa. It is found over 20 species in Brazil, throughout Southeast, Midwest and Amazon regions. Among the various pharmacological activities studied for this oil, antimicrobial and anti-inflammatory stand out. It is taken topically or orally, but indiscriminately, often without any quality control. The extensive use of this oil has attracted increasing interest in pharmaceutical research to develop pharmaceutical forms containing them. This way, it is interesting the development of topically administered microemulsions (ME) O/W, in order to improve the skin permeability of this oil, as well as its therapeutic effect. Thus, the aim of this study was to develop and characterize ME containing copaiba oil and evaluate its antimicrobial and anti-inflammatory activity. It was initially determined the hydrophilelipophile balance (HLB) of the Copaifera multijuga oil (11-12) and it was subsequently defined the HLB of the mixture of surfactant/cosurfactant, guiding the choice of the pseudoternary phase diagrams (2:1 and 4:1). In ME regions of diagrams were selected seven formulations and chosen two (ME-F2 and ME-F6) for characterizing study. Regarding pH, all formulations were within the range of pH of the skin. All samples, after centrifugated, remained unchanged. The electrical conductivity and differential scanning calorimetry (DSC) techniques suggested a system of O/W. The transmission electron microscopy revealed spherical droplets of uniform size less than 200nm and homogeneous distribution. The polarized light microscopy showed dark fields that characterize isotropic systems of the type ME O/W. The size of the droplets was confirmed by dynamic light scattering (DLS) on which it was observed a phenomenon of destabilization by Ostwald ripening, increasing the diameter of the droplets when the system is diluted. All the ME showed negative zeta potential, low viscosity and Newtonian behavior. The ME-F2 and ME-F6 showed activity for the bacterial strain Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa and Escherichia coli and for the fungi Cryptococcus neoforman. Regarding the anti-inflammatory activity the ME-F6 showed acute activity higher than the positive control (diclofenac diethylamine emulgel). As for MEF2, it presented a lag time up to the third hour, but less intense than the control one. Therefore, the systems developed become promising agents in antimicrobial therapy and particularly for acute inflammation, which can be an alternative to use oral nonsteroidal antiinflammatory, thereby reducing side effects. However, it is necessary further studies for quality control of copaiba oil since there are many variables in relation to the composition and consequently the pharmacological activity. Thus, the use of this oil should be standardized as well as carried out studies of skin irritability and toxicity of the formulations. / O óleo-resina de copaíba é extraído das Copaibeiras, árvores comuns a América Latina e África Ocidental, encontradas em mais de 20 espécies no Brasil, distribuídas no Sudeste, Centro-Oeste e Amazônia. Dentre as várias atividades farmacológicas estudadas para este óleo, destacam-se a antimicrobiana e anti-inflamatória. É utilizado por via tópica ou oral, porém de forma indiscriminada, muitas vezes sem nenhum controle de qualidade. O uso extensivo deste óleo tem despertado cada vez mais o interesse da pesquisa farmacêutica em desenvolver formas farmacêuticas que o contenha. Desta forma, torna-se interessante o desenvolvimento de microemulsões (ME) de administração tópica do tipo O/A, a fim de melhorar a sua permeabilidade cutânea deste óleo, bem como o seu efeito terapêutico. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi desenvolver e caracterizar ME contendo o óleo de copaíba e avaliar sua atividade antimicrobiana e anti-inflamatória. Inicialmente foi determinado o Equilíbrio hidrófilo-lipófilo (EHL) do óleo Copaifera multijuga (11-12) e posteriormente foi definido o EHL da mistura de tensoativo/cotensoativo, direcionando a escolha dos diagramas de fases pseudoternários (2:1 e 4:1). Nas regiões de ME dos diagramas foram selecionadas 7 formulações e escolhidas duas (ME-F2 e ME-F6) para estudos de caracterização. Quanto ao pH, todas as formulações encontraram-se dentro da faixa do pH cutâneo. Todas as amostras, após centrifugação, mantiveram-se inalteradas. As técnicas de condutividade elétrica e Calorimetria Exploratória Diferencial (DSC) sugeriram um sistema do tipo O/A. A microscopia eletrônica de transmissão revelou gotículas esféricas de tamanhos uniformes inferiores a 200nm e de distribuição homogênea. A microscopia de luz polarizada mostrou campos escuros característicos de sistemas isotrópicos do tipo ME O/A. O tamanho das gotículas foi confirmado pela técnica de espalhamento de luz dinâmica onde foi observado um fenômeno de desestabilização por maturação de Ostwald, ocorrendo o aumento no diâmetro das gotículas quando o sistema foi diluído. As ME apresentaram potencial zeta negativo, baixa viscosidade e comportamento Newtoniano. As ME-F2 e ME-F6 apresentaram atividade para as cepas bacterianas Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa e Escherichia coli e para o fungo Criptococcus neoformans. Em relação à atividade anti-inflamatória a ME-F6 apresentou atividade aguda superior ao controle positivo (Emulgel de diclofenaco dietilamônio). Já a ME-F2 apresentou um lag time até a terceira hora, porém menos intenso que o controle. Desta forma, os sistemas desenvolvidos tornam-se agentes promissores na terapêutica antimicrobiana e principalmente para inflamações agudas, podendo ser uma alternativa para utilização de anti-inflamatórios não esteroidais orais, reduzindo assim os efeitos colaterais. No entanto, tornam-se necessários mais estudos de controle de qualidade do óleo de copaíba visto as muitas variáveis em relação à composição e consequentemente a atividade farmacológica. Desta forma, deve-se padronizar a utilização deste óleo, como também realizar estudos de irritabilidade cutânea e toxicidade das formulações.

Made available in DSpace on 2017-07-10T14:38:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 eliana.pdf: 812062 bytes, checksum: c2529dd15e8fb109ad0cf0ef2c936178 (MD5) Previous issue date: 2012-03-16 / Parte deste estudo foi realizado para determinar a incidência e resistência antimicrobiana de sorovares de Salmonella isolados a partir de fezes, ração e camas em aviários de frangos de corte na região oeste do Paraná entre os anos de 2003 a 2010. Foram confirmadas 118 amostras de Salmonella spp., pertencentes a 38 diferentes sorovares sendo os mais prevalentes: S. Enteritidis, S. Heidelberg e S. Typhimurium. Todos os sorovares de Salmonella spp. também foram examinados quanto a resistência a 13 antimicrobianos segundo o método de difusão em disco, verificando-se 82 amostras resistentes em 26 diferentes padrões. Em maior incidência, encontraram-se os multirresistentes a estreptomicina, ácido nalidíxico e tetraciclina. Em outro estudo, voltado à pesquisa de plantas como fonte natural e alternativa de substâncias antimicrobianas, realizou-se testes in vitro para testar diferentes métodos de ensaio para avaliar a atividade antimicrobiana de extratos vegetais. As metodologias empregadas para a determinação da atividade antimicrobiana de extratos vegetais da família Myrtacea foram os métodos de microdiluição em caldo e de difusão em ágar por poço e por disco, sendo o método de microdiluição em caldo considerado o melhor por ter apresentado maior reprodutibilidade, relação linear entre a concentração do extrato e a atividade inibitória e maior economia de materiais e espaço. Como última etapa da pesquisa utilizou-se, portanto, o método de microdiluição em caldo seguido de repique em placas de ágar, para verificar in vitro a inibição bacteriana e a inativação bacteriana determinando-se a Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Bactericida Mínima (CBM) de diferentes extratos, aquosos ou etanólicos de folhas de 6 plantas nativas encontradas na região Oeste do Paraná, sendo elas: Maytenus aquifolium (espinheira-santa), Myrciaria cauliflora (jabuticabeira), Ocotea spixiana (canela-branca), Psidium guajava (goiabeira), e Ricinus communis (mamona) e Schinus molle (aroeira-branca) frente a 36 Salmonella spp., de origem aviária e S. Typhimurium ATCC 14028. Todas as plantas apresentaram alguma atividade seletiva sobre Salmonella spp., e os extratos etanólicos apresentaram maior atividade antimicrobiana comparado aos extratos aquosos. Os extratos etanólicos de Myrciaria cauliflora (Mart.) O. Berg e Psidium guajava L., apresentaram os melhores resultados. As CIMs variaram entre 1,56-100 mg.mL-1 e a CBM entre 3,13-100 mg.mL-1.

Própolis é um material resinoso produzido por Apis mellifera constituído de exsudatos coletados de plantas e substâncias produzidas pelas abelhas, além de pequenas quantidades de aminoácidos, açúcares, pólen, etc. Na colméia, esse material é utilizado para diversos fins, como vedar aberturas no ninho e prevenir a decomposição de invasores mortos. Sua composição variada e rica em compostos biologicamente ativos tem sido amplamente reportada em ensaios de atividades antibacteriana, antifúngica, antiinflamatória, antitumoral, antioxidante e antiviral. Por isso, existe um grande interesse no estudo da composição química da própolis e das atividades biológicas de seus constituintes. De uma amostra de própolis vermelha, oriunda da região de Maceió (AL), obteve-se uma série de extratos de polaridade crescente: n-hexano, clorofórmio, acetato de etila e metanol. Com extrato metanólico foram realizados ensaios para determinação dos teores de fenóis e flavonóides, ensaios de atividade antioxidante, além de ensaios antimicrobianos contra bactérias e o fungo Candida albicans. Foi determinado o teor de ceras a partir de 3 g de própolis bruta, por extração com clorofórmio, evaporação do solvente, tratamento com metanol quente e precipitação após resfriamento. O teor de ceras obtido foi de 6,8%. Os fenóis totais foram determinados pelo método de Folin-Ciocaulteau, usando-se soluções de ácido gálico como referência. Para a determinação dos flavonóides, realizou-se a reação com cloreto de alumínio e soluções de quercetina como referência, fazendo-se leituras em 420 nm. Foram determinados 21,9% de fenóis totais e 8,4% de flavonóides. A atividade antioxidante foi avaliada segundo dois métodos, o de redução do radical estável DPPH e o de descoloração do sistema -caroteno/ácido linoléico, usando-se a rutina como referência em ambos os métodos. Extratos metanólicos da amostra em concentrações de 8, 12,5 e 25 g/mL reduziram o DPPH em 30,6%, 32,7% e 39,1% respectivamente, enquanto a solução de rutina nas mesmas concentrações reduziu 60,7% 64,3%, 100% e respectivamente. Com o sistema -caroteno/ácido linoléico foram utilizadas concentrações de 2, 1,5 e 1 mg/mL tanto de amostra como de rutina. Os coeficientes de atividade antioxidante (CAO) das soluções da amostra nas concentrações 1, 1,5 e 2 mg/mL foram 672,2, 698,7 e 739,7, enquanto os valores de CAO para as soluções de rutina nas mesmas concentrações foram 787,2, 814,4 e 739,7. A proximidade dos resultados entre amostra e referência indicam a presença de substâncias altamente antioxidantes na própolis vermelha, em proporções elevadas. A atividade antimicrobiana foi avaliada pelo método de macrodiluição em caldo, seguida de crescimento em placa, usando cepas de Bacillus subtillis, Enterococcus faecalis, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis, Pseudomonas aeruginosa, Salmonela Typhimurium e Candida albicans. Observou-se inibição do crescimento de todos os microrganismos e atividade microbicida contra B. subtillis, P. aeruginosa, S. Typhimurium e C. albicans. / Propolis is a resinous material produced by Apis mellifera, made up of exsudates from plants collected by the bees and beeswax, in addition to small quantities of aminoacids, sugars, pollen, etc. Propolis is used in the hive for several purposes, such as to seal openings and prevent decomposition of the bodies of invading animals. Its composition is varied and rich in biologically active compounds. Many reports have been published about activities such as antibacterial, antifungal, antiviral, anti-inflammatory, antitumoral and antioxidant. There is, therefore, an increasing interest for studies about chemical composition and biological activity of propolis and its constituents. Extracts of increasing polarity (n-hexane, chloroform, ethyl acetate and methanol) were obtained from a sample of red propolis from Maceió (state of Alagoas, northeast Brazil). Assays for determination of contents of phenolics and flavonoids and activities against bacteria and Candida albicans were carried out with the methanol extract. Waxes content was determined with 3 g of the sample by extraction with chloroform, evaporation of the solvent, treatment with hot methanol and precipitation upon cooling. The content obtained was 6.8%. The content of phenolic compounds was determined by the Folin-Ciocalteau method, using solutions of gallic acid as reference. The flavonoid content was determined by complexation with aluminum chloride and reading the absorbances at 420 nm, using quercetin as reference. The content of phenolic compounds was 21.9% and that of flavonoids 8.4%. The antioxidant activity was evaluated by the methods of reduction of the stable free radical DPPH and discoloration of the system -carotene/linoleic acid, using rutin as reference in both methods. The percent of DPPH reduction of methanolic extracts at concentrations 8, 12.5 and 25 g/mL were, respectively, 30.6%, 32.7% and 39.1%, and the values corresponding to rutin at the same concentrations were 60.7%, 64.3% and 100%. With regard to the system -carotene/linoleic acid, solutions at concentrations 2, 1.5 and 1 mg/mL of the methanolic extract gave coefficients of antioxidant activity (CAO) of 672.2, 298.7 and 739.7, respectively, while solutions of rutin at the same concentrations gave CAO of 787.2, 814.4 and 739.7. The similarity of results comparing propolis extract and rutin indicate that the analyzed propolis sample contain high contents of substances with high antioxidant activity. The antimicrobial activity was evaluated by the method of macrodilution in broth, followed by plate growth, using lineages of Bacillus subtillis, Enterococcus faecalis, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis, Pseudomonas aeruginosa, Salmonela Typhimurium and Candida albicans. The growth of all microorganisms was inhibited, while microbicidal activity was observed against B. subtillis, P. aeruginosa, S. Typhimurium and C. albicans.

Orientador: Eduardo Maffud Cillli / Banca: Ana Marisa Fusco Almeida / Banca: Vani Xavier de Oliveira Júnior / Resumo: Neste trabalho foi avaliado o efeito da dimerização e do comprimento/polaridade do espaçador utilizado na formação dos dímeros, na estrutura e atividade biológica do peptídeo antimicrobiano: Gly-Trp-Leu-Asp-Val-Ala-Lys-Lys-Ile-Gly-Lys-Ala-Ala-Phe-Asn-Val-Ala-Lys-Asn-Phe-Leu-CONH2. Nesse sentido, o monômero e três dímeros com diferentes espaçadores foram sintetizados pelo método de síntese de peptídeo em fase sólida (SPFS) utilizando uma combinação das químicas Fmoc e Boc. Análises por cromatografia de fase reversa e espectrometria de massas confirmaram o sucesso das sínteses e das purificações. Os ensaios de atividade antimicrobiana, em termos de CIM mostraram que a dimerização não aumentou a capacidade do peptídeo de inibir o crescimento de bactérias e fungos. No entanto, quando analisada a capacidade dos peptídeos de matar E. coli, um menor tempo para produzir o efeito inibitório foi observado para os dímeros. Adicionalmente, a atividade hemolítica dos peptídeos também foi avaliada, encontrando-se um aumento significativo, aproximadamente 40 vezes, para os dímeros em relação ao monômero. Com o objetivo de tentar explicar esses efeitos, o teste de proteção osmótica foi realizado. No entanto, o tamanho dos poros foi semelhante, o que não permite explicar as diferenças em termos desta variável. Conhecendo seus diâmetros, foi possível determinar que o poro é formado por 6 moléculas monoméricas ou 3 diméricas. Estudos de permeabilização mostraram que a porcentagem e a velocidade de liberação de carboxifluoresceína foram maiores para os dímeros quando comparados com o monômero, especialmente em vesículas contendo esfingomielina. Este ensaio também mostrou que a duplicação da concentração de monômeros não é suficiente para atingir a capacidade de permeabilização dos dímeros, confirmando que a proximidade das cadeias é um fator... (Resumo completo clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This work analyzed the effect of dimerization and the length/polarity of the spacer used in the formation of dimers, in the structure and biological activity of the antimicrobial peptide: Gly-Trp-Leu-Asp-Val-Ala-Lys-Lys-Ile-Gly-Lys-Ala-Ala-Phe-Asn-Val-Ala-Lys-Asn-Phe-Leu-CONH2. In this way, the monomer and three dimers (Lys-branched) with different spacer groups were synthesized by solid phase peptide synthesis methodology using a combination of Fmoc and Boc chemical approaches. Analysis by reverse phase chromatography and mass spectrometry confirmed the success of the synthesis and purifications. The antimicrobial activity assay, in terms of MICs showed that dimerization did not increase the ability of the peptides to inhibit the growth of bacteria and fungi. Nevertheless, when analyzing the peptides activity against E. coli in terms of kinetics, an increased velocity was observed for the dimers. The hemolytic activity of peptides was also evaluated, finding a very significant difference, approximately 40 times greater for dimers. Aiming to explain this difference, the osmotic protection test was performed, but the pore size was similar, which can not explain the differences in terms of this variable. Knowing the diameter of the pores, it was possible to determine that the pore is formed by six monomeric or three dimeric molecules. Additionally, permeabilization studies showed that the percentage and rate of carboxyfluorescein release were larger for the dimers compared with monomer, especially in vesicles containing sphingomyelin. This test also showed that the use of two times more monomer concentration's is not sufficient to reach dimers permeabilization capacity, confirming that the proximity of the chains is an important factor in the activity of this peptide. Analysis by circular dichroism revealed that peptides in aqueous solution are in random coil, whereas... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Flavonóides são compostos fenólicos de ampla ocorrência na natureza exercendo diversas funções fisiológicas nos vegetais. Na família Leguminosae estes metabólitos secundários exercem o papel de antimicrobianos (fitoalexina e/ou fitoanticipinas) e como moléculas sinalizadoras, na simbiose com bactérias do solo no processo de fixação biológica do Nitrogênio. O gênero Lupinus, pertencente a esta família, é encontrado em todas as regiões fisiográficas do estado do Rio Grande do Sul. Entretanto, não existem relatos de estudos químicos ou microbiológicos. Neste trabalho, foi analisado o perfil químico de folhas, flores, raízes, nódulos e legumes da espécie Lupinus lanatus. Foram isolados oito compostos fenólicos, dois deles não foram identificados devido ao baixo rendimento, um derivado do ácido cafeico isolado a partir das raízes teve sua estrutura parcialmente identificada. Quatro flavonóides tiveram suas estruturas elucidadas por métodos espectroscópicos e espectrométricos; três flavonas-C-glicosiladas: citisosídeo a partir das flores e folhas, ramnosil-O-vitexina e ramnosil-O-citisosídeo, a partir das folhas; e a isoflavona angustona A, a partir dos nódulos. Foi analisada a atividade antimicrobiana das flavonas pelo método da bioautografia frente a Bradyrhizobium sp. e Agrobacterium sp., microrganismos simbionte e patógeno, respectivamente, sendo que nenhum metabólito obteve resultado positivo, entretanto quando analisados pelo mesmo método frente a Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae e Escherichia coli o resultado foi positivo para ramnosil-O-vitexina. Foi avaliada a atividade antioxidante pelo método da DPPH para as flavonas, onde citisosídeo obteve resultado positivo.

As bactérias do gênero Paenibacillus são isolados de uma grande variedade de ambientes e tem como característica a produção e secreção de enzimas extracelulares, antimicrobianos e compostos antifúngicos inibidores de vários patógenos animais e vegetais. Os 55 isolados de 15 espécies de Paenibacillus foram testados frente a diversos substratos a fim de verificar a produção de enzimas extracelulares. Foram também testados frente a uma variedade de bactérias e fungos fitopatógenos, humanos e animais para a produção de antibióticos. Nessa triagem, P. validus, P. chibensis, P. koreensis e P. peoriae se destacaram inibindo a maioria das bactérias indicadoras. As espécies P. validus, P. chibensis e P. peoriae foram bons produtores de substancias que inibiram o crescimento de fungos, demonstrando que o gênero possui um amplo espectro de atuação. O tradicional procedimento de triagem para obterem-se novos microrganismos produtores de enzimas para fins biotecnológicos foi executado neste trabalho. As 55 linhagens foram avaliadas na sua capacidade de produzir amilase, proteases (caseinase), celulase, xantanase, xilanase, pectinase, quitinase e lipase. Os isolados se mostraram bons produtores de enzimas hidrolíticas, já que 26 apresentaram atividade xilanolítica, 17 atividade pectinolítica, 49 atividade proteolítica, 43 atividade xantanolítica, 40 atividade celulolítica, 17 atividade lipolítica, 39 atividade amilolítica em condições neutras (pH 7) e 26 atividade amilolítica em condições alcalinas (pH 10), e apenas 4 apresentaram atividade quitinolítica. Sendo assim, esses isolados são candidatos a serem utilizados como agentes biocontroladores ou podem ser explorados como produtores de antimicrobianos e de enzimas hidrolíticas de interesse.

As enterocinas são compostos de natureza protéica que apresentam atividade antimicrobiana contra bactérias patogênicas e deteriorantes de alimentos. Por esta razão, nos últimos anos, o interesse por estas substâncias tem aumentado devido ao seu uso potencial como biopreservante de alimentos. Realizando uma triagem com 352 cepas de Enterococcus spp para detectar atividade antimicrobiana, foram encontradas 18 cepas (5%) produtoras de enterocinas, pertencentes às espécies E. faecalis, E. faecium e E. mundtii todas provenientes de amostras de fezes de humanos. Destas cepas foram produzidos sobrenadantes livres de células e realizados testes para caracterização das enterocinas produzidas. As enterocinas produzidas pelas 18 cepas apresentaram o mesmo espectro de atividade antimicrobiana, inibindo 4 espécies do gênero Listeria, Lactobacillus plantarum e Salmonella Enteritidis. Todas foram parcialmente estáveis ao aquecimento (121ºC por 10 minutos), a variações de pH de 2 a 10 e a estocagem por 60 dias a 4ºC e a -20ºC. A sensibilidade a proteases confirmou a natureza protéica destas substâncias antimicrobianas. Com cinco sobrenadantes livres de células foram realizadas curvas de produção de enterocinas e todas iniciaram a produção na fase logarítmica de crescimento, indicando cinética de metabólito primário. Com estes sobrenadantes foi determinado o peso molecular aproximado de 3 KDa, utilizando a técnica de SDS-PAGE. As cepas com atividade antimicrobiana no sobrenadante livre de células não apresentaram os genes para produção das enterocinas A e B, mas 14 cepas de E. faecium apresentaram o gene para enterocina A e 9 para enterocina B, sendo que apenas uma cepa apresentou ambos os genes. Nenhuma das 18 cepas produtoras de enterocinas apresentou atividade hemolítica e presença de adesinas, todas apresentaram cápsula. Os resultados obtidos neste trabalho indicam que estas enterocinas demonstram um potencial aplicabilidade em novos estudos relacionados aos biopreservantes.

A bacteriocina P34 é produzida por um Bacillus sp. e apresenta atividade antimicrobiana para diversas espécies de Listeria sp. e para L. monocytogenes ATCC 7644. Neste trabalho, foi pesquisada a presença de bactérias lácticas em lingüiça frescal de frango. Os resultados demonstraram o isolamento de seis culturas em placas de ágar MRS a 30ºC por 48 h. Cinco das seis linhagens isoladas inibiram o crescimento da L. monocytogenes após incubação a 30o C por 24 h. Os sobrenadantes brutos destas bactérias lácticas demonstraram efeito sinérgico quando adicionados em conjunto com a bacteriocina P34 frente ao microrganismo indicador, L .monocytogenes, pelo método de difusão em ágar com discos. Foi inoculada L. mononocytogenes ATCC 7644 em suspensão com 103 UFC/g em lingüiça frescal de frango no dia zero e recuperada em meio MOX nos dias zero, três, sete e dez da inoculação. Os resultados permitiram concluir que a bacteriocina P34 parcialmente purificada na concentração de 256 UA/g inibiu L. monocytogenes em todos os tempos. A bacteriocina P34 parcialmente purificada foi testada em envoltórios naturais de bovinos (tripas semi-secas salgadas) frente ao mesmo microrganismo indicador, L. monocytogenes ATCC 7644, demonstrando sua inibição in vitro. / The bacteriocin P34, produced by Bacillus sp., showed antimicrobial activity for many species of Listeria sp and L. monocytogenes ATCC 7644 . In this work, it was investigated the presence of lactic bacteria in fresh chicken sausage. The results demonstrated the isolation of six cultures in MRS agar plates at 30o C for 48h. Five of the six isolated strains inhibited the growing of the L. monocytogenes after incubation at 30ºC for 24h. The crude supernatants of these lactic bacteria demonstrated the synergic effect when it were added together with the bacteriocin P34 against indicator microorganism, L. monocytogenes ATCC 7644, using the method of diffusion in agar with paper discs. L. monocytogenes ATCC 7644 was inoculated in a suspension with 103 UFC/g in chilled chicken sausage and recovered in MOX counting from zero, three, seven and ten days from the inoculationt. The results allowed concluding that the P34 bacteriocin partially purified, in a 256 UA/g concentration, inhibited the indicator microorganism in all periods of time. At the same time, the partially purified P34 bacteriocin were tested in natural bovine wrapping ( salty semi-dried tripe ) using the same indicator micro-organism, L. monocytogenes ATCC 7644, demonstrating its inhibition in vitro.

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