Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Biologia Celular, Programa de Pós-Graduação em Biologia Molecular, 2017. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2017-07-12T16:55:22Z No. of bitstreams: 1 2017_JaquesMirandaFerreiradeSouza.pdf: 2982862 bytes, checksum: 20647199d81a1bad4c017a1e467820df (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2017-08-10T17:24:53Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_JaquesMirandaFerreiradeSouza.pdf: 2982862 bytes, checksum: 20647199d81a1bad4c017a1e467820df (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-10T17:24:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_JaquesMirandaFerreiradeSouza.pdf: 2982862 bytes, checksum: 20647199d81a1bad4c017a1e467820df (MD5) Previous issue date: 2017-08-10 / O condicionamento operante é uma forma de aprendizagem associativa, através da qual o indivíduo aprende a antecipar eventos futuros em decorrência das consequências de seus atos. Essa forma de aprendizagem encontra-se compartilhada entre o homem e outros animais. O uso de ratos e abelhas no estudo de aprendizagens associativas têm gerado informações a respeito dos mecanismos moleculares envolvidos nessas aprendizagens. No entanto, existem poucos relatos a respeito de alterações proteômicas envolvidas na aprendizagem por condicionamento operante utilizando modelos biológicos como ratos e abelhas. O presente trabalho teve como objetivo identificar proteínas com abundâncias alteradas em indivíduos treinados no paradigma operante utilizando uma abordagem de cromatografia líquida acoplada a espectrometria de massas. Ratos foram submetidos a sessões de treinamento operante em caixa de Skinner e tiveram seus perfis proteicos hipocampais comparados com os seus controles. Seguindo essa abordagem foi possível identificar 6.082 proteínas das quais 39 apresentaram diferenças de abundância entre os grupos. Tais proteínas estão envolvidas em processos de regulação da organização do citoesqueleto, tráfico de vesículas, transdução de sinais e controle pós-transcricional da expressão gênica. Uma segunda vertente da tese utilizou abelhas da espécie Mellipona quadrifasciata submetidas a aprendizagem por condicionamento operante de pressão a barra. Um total de 3.291 proteínas foram identificadas, até então a maior cobertura para o proteoma cerebral dessa espécie. Conseguimos identificar 850 proteínas com diferença de abundância entre os grupos treinados e controle. / Operant conditioning is a form of associative learning in which the subject learns to anticipate future events coming as consequence of its behavior. This learning process occurs in humans and other animals. Rats and bees have been used in behavior and learning research for the generation of molecular information related to such processes. However, little proteomic data related to operant conditioning is available. The present thesis aimed at using LC-MS/MS to identify proteins with differential abundance in subjects trained under the operant paradigm. Rats were submitted to operant conditioning in Skinner boxes, followed by analyses of their hippocampal proteomes. A total of 6,082 proteins were identified, from which 39 were differentially abundant between trained and control rats. Such proteins are involved in regulation of cytoskeleton organization, vesicle traffic, signal transduction and gene expression control. A second work in this thesis used Mellipona quadrifasciata bees submitted to operant conditioning for bar pressing learning. A total of 3,291 brain proteins were identified, the widest coverage for this species to date, from which 850 presented differential abundance between trained and control groups. A third work was the determination of 120 proteins from Apis mellifera brain that interact with MRJP1 (major royal jelly protein 1). Many of them are involved in processes related to synaptic plasticity.

Resumo: Em todo o mundo o declínio de colônias de Apis mellifera é motivo de preocupação, por isso muitos trabalhos tem mostrado os efeitos adversos de inseticidas para esta espécie. Estudos toxicológicos são raros para as abelhas sem ferrão, embora o Brasil possua grande diversidade de meliponíneos. O inseticida imidacloprido é agonista da acetilcolina e age nos receptores nicotínicos de acetilcolina dos insetos provocando, em doses subletais, deficiência na aprendizagem e na formação de memória. Este trabalho determinou a toxicidade do imidacloprido para a espécie sem ferrão Scaptotrigona postica, através da dose letal média (DL50) tópica e da concentração letal média (CL50) de ingestão. A DL50 tópica foi de 25,20 (24 horas) e 24,46 (48 horas) ng i.a./μL/abelha e a CL50 de ingestão foi 42,50 (24 horas) e 14,28 (48 horas) ng i.a./μL dieta. A partir dos resultados de CL50, duas concentrações subletais, a concentração letal e uma concentração acima da letal foram escolhidas para realização das análises dos efeitos citotóxicos do imidacloprido sobre os corpos pedunculados, o ventrículo e os túbulos de Malpighi. Sintomas de intoxicação como hiperexcitação, paralisia e desorientação foram notados para as abelhas que tiveram sua dieta contaminada com imidacloprido. Nos corpos pedunculados de abelhas tratadas observou-se dilatação dos espaços intercelulares, marcação significativa de caspase-3 e alterações celulares como condensação cromatínica e degeneração mitocondrial que podem estar relacionados com o processo de morte celular por apoptose. Embora alterações metabólicas não tenham sido notadas no órgão alvo do imidacloprido, o cérebro, os órgãos que participam de sua metabolização e excreção, o ventrículo e os túbulos de Malpighi respectivamente, tiveram seu metabolismo aumentado... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The decline of Apis mellifera colonies has become a concern worldwide. Several studies have shown the negative effects of insecticides on this species. Toxicological studies on stingless bees, on the other hand, are rare despite the great diversity of meliponines in Brazil. The insecticide imidacloprid acts agonistically on nicotinic acetylcholine receptors of insects. In sublethal doses, this compound impairs learning performance and memory formation in insects. This study determined the toxicity of imidacloprid for the stingless bee Scaptotrigona postica, based on the median lethal dose (LD50) by topical application and median lethal concentration (LC50) by ingestion. The topical LD50 was 25.20 (24 hours) and 24.46 (48 hours) ng i.a./μL/bee and the ingestion LC50 was 42.50 (24 hours) and 14.28 (48 hours) ng i.a./μL diet. Based on the results of LC50 two sublethal concentrations, the lethal concentration, and a concentration above the lethal concentration were chosen for the analysis of the cytotoxic effects of imidacloprid on the mushroom bodies, midgut, and Malpighian tubules of Scaptotrigona postica. Symptoms of intoxication, such as hyperexcitation, paralysis, and disorientation, were observed in bees fed a diet with imidacloprid. The mushroom bodies of treated bees exhibited dilated intercellular spaces, staining for caspase-3, and cellular alterations, such as chromatin condensation and mitochondrial degeneration, that could be associated with the cell death process by apoptosis. Although metabolic changes were not observed in the target organ of imidacloprid, the brain, the organs involved in its metabolization and excretion, the midgut and Malphigian tubules, respectively, exhibited increased metabolism in the attempt to inactivate the toxic compound present in the organism. The morphological alterations, such as the... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Osmar Malaspina / Coorientador: Roberta Cornélio Ferreira Nocelli / Banca: Elaine Cristina Mathias da Silva Zacarin / Banca: Carmem Silvia Fontanetti Christofoletti / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-04-29Bitstream added on 2014-06-13T19:49:25Z : No. of bitstreams: 1 rossi_ca_me_rcla.pdf: 887311 bytes, checksum: 0aac6ef29470c2188c7f7d4a2bd7179d (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Uma preocupação atual consiste no uso indiscriminado de muitas substâncias sintéticas no controle de pragas na agricultura. Estudos atuais indicam que algumas dessas substâncias podem estar envolvidas em casos de intoxicação de insetos, como as abelhas, que são fundamentais em muitas culturas, devido à atividade de polinização realizada por elas. No Brasil, um dos inseticidas mais usados nas culturas de café, citrus, algodão e cana-de-açúcar é o imidaclopride, que apresenta ação neurotóxica para os insetos. Seus metabólitos circulam por todo o organismo e entram em contato com diversos órgãos. A exposição a doses subletais deste inseticida pode provocar mudanças na fisiologia e no comportamento das abelhas, sendo que tais alterações podem ser mais intensas ou não, dependendo do período de exposição. Dessa maneira, o presente estudo teve como objetivo avaliar os efeitos da exposição crônica a doses subletais (DL50/100, DL50/50 e DL50/10) do inseticida imidaclopride, no cérebro, ventrículo e túbulo de Malpighi de Apis mellifera africanizada. Para isso os órgãos estudados das abelhas expostas e dos controles foram submetidos a análises morfológica, histoquímicas e imunocitoquímica, após 1, 3, 5, 7 e 10 dias de exposição. No cérebro das abelhas expostas foi possível observar alterações morfológicas, histoquímicas e imunocitoquímicas nos lobos ópticos de todos os grupos expostos, enquanto que nos corpos pedunculados observou-se tais alterações apenas no grupo exposto à DL50/10. Já nos lobos antenais as alterações não foram observadas. No ventrículo das abelhas de todos os grupos expostos ao inseticida, a análise morfológica permitiu observar de uma maneira geral um aumento na quantidade de células eliminadas no lúmen, na quantidade de secreção apócrina eliminada no lúmen e na quantidade de halos pericromatínicos nas células... / The indiscriminate use of synthetic chemicals to control pests in agriculture is not a new concern. Recent studies indicate that some of these substances are involved in cases of poisoning bees, which are fundamental in many cultures due to the activity of pollination. In Brazil, an insecticide widely used on crops of coffee, citrus, cotton and sugar cane, is imidacloprid, which is neurotoxic to insects. However, its metabolites circulate throughout the body and come into contacting with another organs. Exposure to sublethal doses of this insecticides causes changes in physiology and behavior of bees, and these changes can be more intense depending on exposure period. Therefore, this study aimed to evaluate the effects of chronic exposure to sublethal doses (DL50/100, DL50/50 and DL50/10) of imidacloprid in the brain, midgut and the Malpighian tubules of africanized bees (Apis mellifera). For this, the organs of treated and untreated bees were subjected to morphological, histochemical and immunocytochemical techniques, dissecting the bees after 1, 3, 5, 7 and 10 days. In the brains of exposed bees it was possible to observe morphological, histochemical and immunocytochemical alterations on optic lobes of all bees, whereas in the mushroom bodies, alterations was observed only in the group exposed to DL50/10. The antennal lobe presented no alterations after the treatment in all doses. In the midgut of all exposed groups of bees, morphological analysis showed in general an increase in the number of digestive cells and apocrine secretion eliminated in the lumen and in the number of peripherical chromatin halos were also increased. The histochemical techiniques confirmed the presence of pyknotic nuclei, showing the presence of nuclear fragments and degenerated areas in cytoplasm of digestive cells. The immunocytochemical technique showed no presence of positive nuclei for Tunel reaction in ... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-04-25Bitstream added on 2014-06-13T19:28:36Z : No. of bitstreams: 1 soares_hm_me_rcla.pdf: 1634705 bytes, checksum: cb8fd31115869e473fe89f6849a83cbb (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Em todo o mundo o declínio de colônias de Apis mellifera é motivo de preocupação, por isso muitos trabalhos tem mostrado os efeitos adversos de inseticidas para esta espécie. Estudos toxicológicos são raros para as abelhas sem ferrão, embora o Brasil possua grande diversidade de meliponíneos. O inseticida imidacloprido é agonista da acetilcolina e age nos receptores nicotínicos de acetilcolina dos insetos provocando, em doses subletais, deficiência na aprendizagem e na formação de memória. Este trabalho determinou a toxicidade do imidacloprido para a espécie sem ferrão Scaptotrigona postica, através da dose letal média (DL50) tópica e da concentração letal média (CL50) de ingestão. A DL50 tópica foi de 25,20 (24 horas) e 24,46 (48 horas) ng i.a./μL/abelha e a CL50 de ingestão foi 42,50 (24 horas) e 14,28 (48 horas) ng i.a./μL dieta. A partir dos resultados de CL50, duas concentrações subletais, a concentração letal e uma concentração acima da letal foram escolhidas para realização das análises dos efeitos citotóxicos do imidacloprido sobre os corpos pedunculados, o ventrículo e os túbulos de Malpighi. Sintomas de intoxicação como hiperexcitação, paralisia e desorientação foram notados para as abelhas que tiveram sua dieta contaminada com imidacloprido. Nos corpos pedunculados de abelhas tratadas observou-se dilatação dos espaços intercelulares, marcação significativa de caspase-3 e alterações celulares como condensação cromatínica e degeneração mitocondrial que podem estar relacionados com o processo de morte celular por apoptose. Embora alterações metabólicas não tenham sido notadas no órgão alvo do imidacloprido, o cérebro, os órgãos que participam de sua metabolização e excreção, o ventrículo e os túbulos de Malpighi respectivamente, tiveram seu metabolismo aumentado... / The decline of Apis mellifera colonies has become a concern worldwide. Several studies have shown the negative effects of insecticides on this species. Toxicological studies on stingless bees, on the other hand, are rare despite the great diversity of meliponines in Brazil. The insecticide imidacloprid acts agonistically on nicotinic acetylcholine receptors of insects. In sublethal doses, this compound impairs learning performance and memory formation in insects. This study determined the toxicity of imidacloprid for the stingless bee Scaptotrigona postica, based on the median lethal dose (LD50) by topical application and median lethal concentration (LC50) by ingestion. The topical LD50 was 25.20 (24 hours) and 24.46 (48 hours) ng i.a./μL/bee and the ingestion LC50 was 42.50 (24 hours) and 14.28 (48 hours) ng i.a./μL diet. Based on the results of LC50 two sublethal concentrations, the lethal concentration, and a concentration above the lethal concentration were chosen for the analysis of the cytotoxic effects of imidacloprid on the mushroom bodies, midgut, and Malpighian tubules of Scaptotrigona postica. Symptoms of intoxication, such as hyperexcitation, paralysis, and disorientation, were observed in bees fed a diet with imidacloprid. The mushroom bodies of treated bees exhibited dilated intercellular spaces, staining for caspase-3, and cellular alterations, such as chromatin condensation and mitochondrial degeneration, that could be associated with the cell death process by apoptosis. Although metabolic changes were not observed in the target organ of imidacloprid, the brain, the organs involved in its metabolization and excretion, the midgut and Malphigian tubules, respectively, exhibited increased metabolism in the attempt to inactivate the toxic compound present in the organism. The morphological alterations, such as the... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-04-30Bitstream added on 2014-06-13T20:10:19Z : No. of bitstreams: 1 ferreira_rac_me_rcla.pdf: 739935 bytes, checksum: 50907a1ee0174b4ffcbc2dde8cbd2c71 (MD5) / As abelhas contribuem para a manutenção das espécies vegetais no nicho ecológico onde vivem. Alguns compostos químicos encontrados em inseticidas utilizados na agricultura (fipronil), ou lançados no meio com resíduos industriais (ácido bórico) são tóxicos para as abelhas. Assim, objetivou-se avaliar a atividade tóxica desses compostos em doses subletais, bem como, analisar as alterações morfológicas (citoplasmáticas e nucleares) do corpo gorduroso e túbulos de Malpighi. As análises estatísticas para o experimento realizado com ácido bórico (0,75% m/m) e fipronil (0,1 ng/abelha/dia) mostraram que os perfis de sobrevivência das abelhas que ingeriram a dieta contaminada foram significativamente diferentes ao perfil de sobrevivência apresentado pelo grupo controle (p<0,0001). As análises morfologicas confirmam que os inseticidas fipronil e ácido bórico, apresentam citotoxicidade em doses subletais, dentre essas alterações, destaca-se: nos túbulos de Malpighi aparente liberação de material celular para o lúmen, alguns núcleos picnóticos e bordo em escova que em alguns casos bloquearam o lúmen do órgão, em algumas células notou-se características morfológicas de degeneração. No corpo gorduroso de abelhas destacam-se intensa atividade de coalescência vacuolar, núcleos picnóticos e alguns núcleos dos trofócitos com aparente ramificação. Ultraestruturalmente destaca-se o aumento da porção apical das microvilosidades, dilatações das cisternas dos retículos endoplasmáticos rugoso, presença de vesículas e acúmulo de polirribossomos no citoplasma para os túbulos de Malpighi dos grupos experimentais tratados com fipronil e ácido bórico. As análises do corpo gorduroso mostram o aumento da quantidade, coalescência, depósitos lipídicos e protéicos nos vacúolos nos trofócitos do corpo gorduroso. Os resultados apresentados mostram que as doses... / Bees help to maintain the plant species in the ecological niche where they live. Some chemicals found in pesticides used in agriculture (fipronil), or thrown in the ambient with industrial waste (boric acid) are toxic to bees. The objective was to evaluate the toxic activity of these compounds at sublethal doses, as well as analyze the morphological (cytoplasmic and nuclear) of the fat body and Malpighian tubules. In the experimental groups, the compounds were added to the diet (Candi). The concentration of fipronil used in the experiment was 0.1 g/kg of candi and the concentration of boric acid was 0.75% (m/m). Statistical analysis for the experiment conducted with fipronil and boric acid profiles showed that the survival of bees that ingested the contaminated diet were significantly different to the profile of survival made by the control group (p <0.0001). Morphologically, in control group, changes found in Malpighian tubules of bees treated with boric acid and fipronil were subtle, showing apparent release of cellular material into the lumen, some pyknotic nuclei and, in some cases, brush border blocking the lumen organ, in some cells we observed morphological features of degeneration. Morphological changes are evident in the fat body of bees treated with fipronil and boric acid compared to control group. Among these changes, stand out intense activity of vacuolar coalescence, pyknotic nuclei and some nuclei of trophocytes with apparent branching. Histochemically, the cells of the Malpighian tubules showed, by the reaction of Bromophenol Blue, proteic activity more apparent in the treated groups compared to controls. The reaction of the PAS-Alcian Blue revealed the presence of glycoproteins in the apical portion of the cells of the Malpighian tubules of the treated groups. For the Feulgen reaction, we observed a high degree of chromatin compaction... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-03-01Bitstream added on 2014-06-13T18:09:02Z : No. of bitstreams: 1 marcondes_m_me_rcla.pdf: 1670302 bytes, checksum: 7b33194d96a6ab51cd1d83d0866f7fe8 (MD5) / Nas abelhas, a espermateca, órgão responsável por estocar os espermatozoides e mantê-los viáveis após a cópula, está presente nas fêmeas da maioria dos insetos,. Associadas a estas, encontram-se as glândulas espermatecais, cuja função é sintetizar o fluido espermatecal no qual os espermatozoides ficam imersos. As rainhas das espécies de abelhas eussociais, pertencentes as tribos Apini e Meliponini, podem estocar os espermatozoides dos machos por anos devido a sua longevidade ser maior do que a de outras espécies de abelhas. Contudo, espécies que apresentam longevidade e taxa de oviposição menores, como é o caso, dos Bombini e das abelhas solitárias, também possuem glândulas espermatecais e espermateca, e mecanismos de preservação dos espermatozoides. Não se sabe ao certo como a espermateca conserva os espermatozoides e se a secreção das glândulas espermatecais são as únicas responsáveis pela formação do fluido espermatecal, o qual se supõe ser o responsável por manter os espermatozoides viáveis nas espécies de abelhas. O fluido espermatecal é formado também pelo conteúdo seminal dos machos, produzido por suas glândulas de muco. Em abelhas, a composição química e a função da secreção das glândulas espermatecais das fêmeas e das glândulas de muco dos machos ainda são pouco estudadas e não se tem nada conclusivo na literatura. Com o intuito de verificar se a organização social e o estado reprodutivo das abelhas refletem em diferenças no tipo de secreção contido nas espermatecas, nas glândulas espermatecais e nas glândulas de muco foi realizado um estudo comparado da histoquímica e do padrão de bandeamento proteico das glândulas de muco, bem como do conteúdo da vesícula seminal dos machos, juntamente com as glândulas espermatecais e do fluido espermatecal das fêmeas com diferentes... / Spermatheca is the organ responsable to store the sperm and keep it viable after the copula. In association with this organ, we can find the spermathecal glands, which synthesize the spermathecal fluid that maintains the sperm. The eusocial bee queens of Apini and Meliponini tribes can store the male sperm for years due to its longevity is bigger than the others bee species. However, species with smaller longevity and oviposition rates like Bombini and lonely bees also have spermatheca, spermathecal glands and sperm preserving mechanisms. It is not known for sure how the spermatheca preserves the sperm and if the spermathecal glands secretion is the only responsible for the spermathecal fluid generation, which is believed to keeps the sperm viable. Some studies show that the spermathecal fluid is also formed by male seminal content produced in mucus glands. The spermathecal glands function and chemical composition in female bees and the male mucus glands are still less studied and there is nothing conclusive in the literature. This study aims to verify if different oviposition rates, longevity and social organization reflects in thta different kinds of secretion contained in spermatheca, spermathecal and mucus glands. For this I made a compared study of the histochemistry and protein band pattern of: 1. mucus glands secretion; 2. male seminal vesicle content plus spermathecal glands secretion; and 3. female spermathecal fluid. This comparison was done in diverse sociability levels and fecundity conditions: virgins and inseminated; with three bee species: Centris (ptilotopus) scopipes – solitary, Bombus morio – primitively eusocial, and Melipona quadrifasciata anthidioides – advanced eusocial. M. quadrifasciata anthidioides males don’t have mucus gland, so in this case the seminal vesicle content was analyzed

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:14Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005-10-27Bitstream added on 2014-06-13T19:18:42Z : No. of bitstreams: 1 pereira_am_me_rcla.pdf: 453810 bytes, checksum: 9d141c92ea13cc88e6e95ae064e3bba4 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / No presente estudo avaliou-se o efeito do macerado floral e de extratos folhares de L. camara em operárias de Apis mellifera. Abelhas africanizadas recém-emergidas foram coletadas e marcadas, sendo posteriormente introduzidas em um núcleo contendo 3 favos cobertos por abelhas adultas e apresentando boa quantidade de mel e pólen. Dois desses favos possuíam um grande número de operárias em diferentes fases de desenvolvimento. Sete dias após a marcação as abelhas foram transferidas para caixas de laboratório mantidas em estufa bacteriológica a 34° C l 1° C e umidade relativa de 60 l 5%. Nas primeiras séries de bioensaios, em que foi testado o macerado floral, os grupos experimentais receberam pasta-cândi acrescida do macerado em concentrações variadas (30%, 10%, 7,5%, 5% e 2,5%), enquanto as abelhas dos grupos-controle receberam somente cândi. Os resultados das análises de sobrevivência indicaram que as abelhas alimentadas com cândi acrescido do macerado floral a 30%, 10% e 7.5% apresentaram uma menor longevidade (P < 0,0001), em relação às operárias dos grupos-controle. Estes resultados sugerem a existência de alguma substância tóxica no macerado floral de L. camara capaz de diminuir a longevidade das operárias. Na segunda série de bioensaios, as operárias receberam, por meio de aplicação tópica na região do pronoto, 2æL do extrato metanólico das folhas de L. camara nas concentrações de 0,0888 mg/abelha, 0,0444 mg/abelha e 0,0222 mg/abelha, enquanto que as abelhas do grupo controle receberam somente metanol. As análises de sobrevivência revelaram que os extratos de L. camara não interferiram na longevidade das operárias. / In this study the effect of the floral crushed and foliage extracts of L. camara in Apis mellifera workers was evaluated. Newly-emerged Africanized honeybee workers were collected and marked, being later introduced in a beehive containing three frames covered with bees and presenting good amount of honey, pollen and a great number of workers in different phases of development. Seven days after, the bees were transferred to laboratory boxes maintained in a bacteriological stove at 34° C l 1° C and relative humidity of 60 l 5%. In the first series of bioassays the honeybee workers of the experimental groups received candy plus floral crushed of L. camara in variable concentrations (30%, 10%, 7.5%, 5% and 2.5%), while the bees of the control groups were fed only with candy. The survival analyses indicated that bees fed with candy plus the floral crushed at 30%, 10% and 7.5% have a shorter life time (P <0,0001), in relation to the workers of the control groups. These results suggest the presence of some toxic substance in the floral crushed of L. camara, able to diminish the life time of adult workers. In the second series of bioassays the honeybee workers received, by topical application on the pronotum, 2æL of methanolic extracts of L. camara leaves in the concentrations of 0,0888 mg/bee, 0,0444 mg/bee and 0,0222 mg/bee, while the workers of the control groups received only methanol. The survival analyses revealed that the extracts of L. camara did not affect the worker's longevity.

Orientador: Woodruff Whitman Benson / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-28T14:50:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 BonillaGomez_MariaArgenis_D.pdf: 6399987 bytes, checksum: e346203879cf4400f582de3c160732e0 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: Para caracterizar os padrões espaço-temporais da riqueza, abundância e morfologia de um conjunto de machos das abelhas euglossinas, amostrei as abelhas mensalmente com iscas de odor das fragrâncias de orquídeas em três áreas selecionadas aleatoriamente na mata alta de terra firme da Reserva Florestal de Linhares, Espírito Santo, Brasil. As 16.177 euglossinas atraídas e identificadas ao longo de 12 meses, entre setembro de 1996 e agosto de 1997, pertenceram a 31 espécies. As espécies dominantes foram Euglossa cordata, Eg. analis e Eulaema nigrita. A análise de variância não forneceu evidência de heterogeneidade espacial na distribuição da riqueza na floresta estudada em Linhares, porém a riqueza mudou sazonalmente, com picos no começo (novembro) e no fim (abril) da estação quente e chuvosa. A abundância total das abelhas euglossinas apresentou um pico no fim da época de chuvas (março-abril) e durante a época seca (agosto). Estes resultados indicam que as amostragens de abelhas euglossinas restritas sazonal e espacialmente podem não ser representativas da abundância nem da composição das comunidades de abelhas euglossinas. Para categorizar as espécies de abelhas euglossinas em grupos morfologicamente semelhantes, comparei os comprimentos da asa anterior e da glossa (variáveis morfológicas relacionadas com o forrageamento de néctar em flores com morfologias diferentes) das 31 espécies de abelhas euglossinas; nos grupos morfológicos conformados analisei a distribuição sazonal das espécies. A abundância das abelhas com comprimentos diferentes de asa anterior (pequenas, mediana e grandes) e de glossa (curta e comprida) foi altamente sazonal. As abelhas pequenas de glossa curta, representando mais do 50% da abundância total para cada estação do ano, foram mais abundantes durante a época de chuvas janeiro a março) e na seca julho e agosto). As abelhas médias e as grandes de glossa comprida, embora presentes ao longo do ano, foram menos abundantes que as pequenas; as médias foram mais abundantes no fim das chuvas (abril a junho) e as grandes durante a estação chuvosa (outubro-março). Tanto as abelhas médias quanto as grandes diminuíram em abundância durante a estação seca quando as abelhas pequenas foram mais comuns. Adicionalmente, procurei padrões de espaçamento morfológico, agregado aleatório ou regularmente disperso, sugestivos de deslocamento de caracteres, analisando a distribuição estatística dos comprimentos das asas e das glossas. As análises baseadas no conjunto completo com as 31 espécies de abelhas euglossinas mostraram um padrão agregado de distribuição das espécies nas duas variáveis analisadas. Em contraste, o espaçamento das 12 espécies mais abundantes foi disperso, sugerindo que as interações ecológicas entre as espécies dominantes podem favorecer as espécies que são morfologicamente divergentes em suas adaptações para alimentar-se e deste modo contribuir na estruturação destas comunidades / Abstract: To characterize the spatiotemporal patters in species richness, abundance, and morphology of an assemblage of forest-inhabiting male euglossine, I sampled bees monthly with orchid fragrance baits in three arbitrarily selected areas of a continuous old-growth tropical coastal Atlantic forest in the Linhares Forest Preserve in southeaster Brazil. The 16,117 euglossines sampled and identified. In the 12 months between September, 1996 and August, 1997 belonged to 31 species. The dominant species were Euglossa cordata, Eg. analis and Eulaema nigrita. Analysis of variance provided no evidence for spatial heterogeneity in euglossine richness within Linhares forest, however it varied seasonally, with peaks at the beginning (November) and end (April) of the summer rainy season. Total euglossine abundance peaked at the end of the rainy season (March-April) and a second time near the middle of the dry season August). These results indicate that seasonally and spatially restricted samples may not be representative of the abundance and composition of euglossine bee communities. Forewing and glossa lengths (variables related to nectar acquisition from flowers of differing morphologies) were used to categorize species in to morphologically similar groups and these were ana1yzed for seasonal partitioning of resources. The abundance of bees of different forewing lengths (small, medium ad large) and glossa lengths (small and large) was highly seasonal. The smaller short-tongued bees, providing more that 50% of the bees present at any time of the year, were more abundant during the rainy (January-March) and dry season (July-August). Medium and large long tongued bees, although present alI year, were relatively rarer, with medium bees peaking during April and June and large bees exhibiting a broad October through March peak. Both size classes decreased in abundance during the dry season when small bees were common. Additional univariate analyses searched for spacing patters in the statistical distributions of forewing and glossa measurements suggestive of character displacement. Analyses based on the entire assemblage of 31 species showed significant aggregation of species with respect to the two variables. In contrast, spacing in the 12 most abundant species was over dispersed, suggesting that ecological interactions among the dominant bees may favor species that are morphologically divergent en feeding adaptations an thereby contribute to the organization of these communities / Doutorado / Doutor em Ecologia

Orientador: Yong Kun Park / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-29T05:00:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pacheco_TatianaAndradeRabelloCarvalho_M.pdf: 14412497 bytes, checksum: d1ebb477244483805032c2a9c2c01263 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: O resumo podera ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The abstract is available with the full electronic digital document / Mestrado / Mestre em Ciência de Alimentos

Orientador: Yong Kun Park / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-31T15:18:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Alencar_SeverinoMatiasde_D.pdf: 25655443 bytes, checksum: 62fba3f6b783827efddcf68c4c28ba58 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: o objetivo deste estudo foi classificar e analisar a origem botânica dos principais tipos de própolis brasileiras produzidas por abelhas Apis mellifera africanizadas, bem como avaliar a composição de amostras de mel e própolis da mesma colméia coletados em várias regiões do Brasil. Assim, foram coletadas 201 amostras de própolis nas regiões Norte, Nordeste, Sul e Sudeste e 47 amostras de mel das regiões das regiões Nordeste, Sul e Sudeste do Brasil. Através das análises por espectrofotometria na região UV-visível e cromatografia em camada delgada de alta eficiência (CCDAE) foi possível classificar as amostras coletadas de própolis em 12 grupos distintos. As diferenças na composição química dos grupos de própolis foram detectadas pelas técnicas de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) e Cromatografia Gasosa com Espectrometria de Massas (CGEM). As própolis do grupo 3 mostraram a presença do éster do ácido dimetil dialil caféico, o qual é um composto altamente alergênico e comumente encontrado em própolis de climas temperados. Própolis do grupo 6 apresentaram uma composição química distinta dos demais grupos, principalmente pela completa ausência de flavonóides. Entretanto, este foi o grupo que apresentou as maiores atividades contra os microrganismos Streptococcus mutans e Staphylococcus aureus. Todos os grupos, exceto os de número 9 and 10, mostraram um índice de antioxidação superior a 4. Com relação à atividade antiinflamatória, as própolis dos grupos 3, 5, 6, 7, 8, e 12 demonstraram uma alta atividade quando comparadas com as própolis dos grupos 1, 2, 4, 9, 10 e 11. No teste dá atividade citotóxica, as própolis dos grupos 6 e 7 apresentaram as maiores atividades "in vitro" contra 4 linhagens de células tumorais humanas. Com base nas evidências fitoquímicas, determinadas por meio das técnicas de espectrofotometria na região UV-visível, CCDAE, CLAE e CG-EM, as espécies vegetais Populus alba, Hyptis divaricata e Baccharis dracunculifolia mostraram ser as principais fontes vegetais das própolis do grupo 3, grupo 6 e grupo 12, respectivamente. As amostras de mel, coletadas de diferentes regiões brasileiras e analisadas pela técnica de CCDAE, mostraram um perfil cromatográfico totalmente diferente das amostras de própolis da mesma colméia de origem. Observou-se que as abelhas utilizaram fontes vegetais diferentes para a elaboração do mel unifloral de laranja, eucalipto e alecrim do campo, mas somente uma única fonte vegetal (B.dracunculifolia) para a produção das própolis oriundas da mesma colméia. O mel de alecrim do campo foi o que apresentou o maior número de flavonóides, com alto teor de quercetina. Estes resultados demonstraram uma grande diversidade das própolis brasileiras, não somente em relação as suas composição química, mas sobretudo, em relação as suas atividades biológicas. / Abstract: The aim of this study was to classify and analyze the botanical origin of the main Brazilian propolis produced by africanized Apis mellifera; as well as to evaluate the composition of honey and propolis fTomthe same beehive fTomvarious Brazilian regions. Therefore, two hundred and one propolis samples were collected, in northern, northeastern, southern and southeastern Brazil, in addition to forty and seven honey samples collected in northeastern, southern and southeastern Brazil. Using Ultraviolet-visible spectrophotometry and High Performance Thin Layer Chromatography (HPTLC) it was possible to classify the samples into 12 different groups of propolis. The differences in the chemical composition of the groups were detected by High Performance Liquid Chromatography (HPLC) and Gas Chromatography - Mass Spectrometer (GC-MS). Group 3 showed the presence of the compound dimethylallyl ester of caffeic acid, which has been implicated as an allergenic substance in propolis from temperate zones. Group 6 showed a very different chemical composition, in which flavonoids were not detected. Nevertheless, this group showed high antibacterial activity against Streptococcus mutans and Stapylococcus aureus. All groups of propolis, except for the groups 9 and 10, showed an antioxidant index higher than 4. Regarding the antiinflammatory activity, propolis from the groups 3, 5, 6, 7, 8 and 12 demonstrated higher antiinflammatory activity as compared to that of groups 1, 2, 4, 9, 10 and 11. Propolis fTomthe groups 6 and 7 were higWy active "in vitro" against 4 human tumoral cell lines. Based on phytochemical evidence, obtained by means of UV-visible Spectrofotometry, HPTLC, HPLC and GC-MS techniques, Populus alba, Hyptis divaricata and Baccharis dracunculifolia were shown to be the main source ofpropolis for groups 3,6 and 12 respectively. Honey samples collected from various Brazilian regions showed a distinct chromatographic profile when compared to propolis collected at the same beehive, as shown by the CCDAE technique. In the southem Brazil samples, it was observed that bees used several vegetable sources to produce unifloral orange, eucalyptus and rosemary honeys. However, the chemical analysis of the propolis samples from the respective beehives showed that the bees had used only one plant source (B. dracunculifolia) to make the propolis. Rosemary honey showed more flavonoids than the others, with high amounts of quercetin. The results demonstrated a great diversity of Brazilian propolis, not only in their chemical composition, but especially in their biological activity. / Doutorado / Doutor em Ciência de Alimentos